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梅毒血清学检测策略

梅毒血清学检测策略
梅毒血清学检测策略

1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验:

?

原理:梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质,刺激机体产生抗类脂抗体(反应素)。在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应,形成凝集反应。?方法:VDRL (venereal disease research laboratory test) USR (unheated serum reagin test )

RPR (rapid plasma reagin circle card test) TRUST (tolulized red unheated serum test)特点:非特异性反应,

一、梅毒血清试验

2、梅毒螺旋体抗原血清试验

基于TP特异性抗原,检测TP抗体

TPPA TPPA

物,荧光镜下,TP呈苹果绿色荧光。

阴性

弱阳性

阳性

图18-1 TP抗体酶联免疫法试验

双抗原夹心一步法原理

图18-2 TP抗体酶联免疫法试验

双抗原夹心二步法原理

?电化学发光(ECLIA)免疫检测原理

亲和素

5)TP-RT胶体金法:

?临床:用于梅毒筛查

?注意:

高敏感性,特异较?

特异性总抗体

特异性IgG 抗体特异性IgM 抗体

5-7周 反应素

抗体变化规律

Comparison of three syphilis serodiagnosis algorithms and clinical 665 RPR-/TPPA+ patients were excluded from positive serodiagnosis due to a missed diagnosis rate of 24.2% (665/2,749).

Man-Li Tong, et al. Analysis of three algorithms for syphilis serodiagnosis and implications for clinical management. Clinical

Infectious Diseases 2014;58:1115-1124

.

The traditional algorithm

?One lab :

?98%EIA +/PRP+→

?TP-PA+

?CDC. Discordant results from reverse sequence syphilis screening--five laboratories ,United States ,2006-2010. MMWR. Morbidity and mortality weekly report ,2011,60(5): 133.

特点:仅检测活动性梅毒。

血清试验相比,可能会漏检一些早期和晚期梅

毒患者。

传统筛查策略

Fonseca K , Tsang RSW ,et al. Canadian Public Health Laboratory Network laboratory guidelines for the use of serological tests (excluding point-of-care tests) for the diagnosis of syphilis in Canada. Can J Infect Dis Med Microbiol, 2015, 26(Suppl A):6A-12A

逆向筛查策略

)中国梅毒筛查策略

血清试验筛查

性病防治培训手册-实验室检测(学员用书).北京:人民卫生出

采用梅毒螺旋体抗原血清试验进行初筛的流程图

Analysis of three algorithms for syphilis serodiagnosis

and implications for clinical management.

Man-Li Tong,et al. Clinical Infectious Diseases 2014;58:1115-1124.

小结

?梅毒血清学试验包括两类。

?梅毒血清学检测策略有:

1.非TP血清学筛查方法-传统方法。

2. TP血清学筛查方法-逆向方法。

3. 联合筛查方法

?逆向或联合筛查方法中结果不一致时,应进一步确证。

梅毒血清学检测策略

1.非梅毒螺旋体抗原血清学试验: ? 原理:梅毒螺旋体破坏宿主细胞释放以及其螺旋体细胞表面释放的类脂物质,刺激机体产生抗类脂抗体(反应素)。在体外该抗体与心磷脂、卵磷脂和胆固醇组成的抗原反应,形成凝集反应。?方法:VDRL (venereal disease research laboratory test) USR (unheated serum reagin test ) RPR (rapid plasma reagin circle card test) TRUST (tolulized red unheated serum test)特点:非特异性反应, 一、梅毒血清试验 2、梅毒螺旋体抗原血清试验 基于TP特异性抗原,检测TP抗体

TPPA TPPA 物,荧光镜下,TP呈苹果绿色荧光。 阴性 弱阳性 阳性 图18-1 TP抗体酶联免疫法试验 双抗原夹心一步法原理 图18-2 TP抗体酶联免疫法试验 双抗原夹心二步法原理

?电化学发光(ECLIA)免疫检测原理 亲和素 5)TP-RT胶体金法: ?临床:用于梅毒筛查 ?注意: 高敏感性,特异较?

特异性总抗体 特异性IgG 抗体特异性IgM 抗体 5-7周 反应素 抗体变化规律

Comparison of three syphilis serodiagnosis algorithms and clinical 665 RPR-/TPPA+ patients were excluded from positive serodiagnosis due to a missed diagnosis rate of 24.2% (665/2,749). Man-Li Tong, et al. Analysis of three algorithms for syphilis serodiagnosis and implications for clinical management. Clinical Infectious Diseases 2014;58:1115-1124 . The traditional algorithm ?One lab : ?98%EIA +/PRP+→ ?TP-PA+ ?CDC. Discordant results from reverse sequence syphilis screening--five laboratories ,United States ,2006-2010. MMWR. Morbidity and mortality weekly report ,2011,60(5): 133.

梅毒实验室诊断方法

梅毒实验室诊断 梅毒的实验室诊断方法主要有显微镜检查法和血清学检测法。 一、显微镜检查法 (一)暗视野显微镜检查 【基本原理】 梅毒硬下疳、扁平湿疣、黏膜斑等皮损的渗出液涂片,以及淋巴结穿刺液涂片等,在暗视野显微镜下,光线从聚光器的边缘斜射到涂片上的梅毒螺旋体而发出亮光,从而可根据其特殊形态和运动方式进行检测。 【仪器材料】 1.暗视野显微镜。 2.钝刀(刮勺)、载玻片、盖玻片、注射器具、无菌生理盐水。 【标本采集】 1.皮肤黏膜组织液:无菌生理盐水浸湿的棉拭子擦去皮损表面的污物,钝刀轻刮、挤压皮损表层,取渗出液与预先滴加在载玻片上的生理盐水混合后加盖玻片镜检。 2.淋巴液:无菌操作下穿刺淋巴结,注入生理盐水并反复抽吸2~3次,取少量的淋巴液直接滴于载玻片上,加盖玻片镜检。 【操作步骤】 1.加镜油:在暗视野显微镜的聚光器上滴加镜油。 2.聚光:将标本玻片臵载物台上,上升聚光器使镜油接触载玻片底面。 3.镜检:在镜下观察,寻找有特征形态和运动方式的梅毒螺旋体。 【结果判读】 梅毒螺旋体在暗视野显微镜镜下表现为纤细、白色、有折光的螺旋状微生物,长5~20μm,直径小于0.2μm,有6~12个螺旋,具有旋转、蛇行及伸缩等三种特征性的运动方式。暗视野显微镜下发现有上述特征的螺旋体为阳性结果。 【结果报告】 1.阳性:见到上述特征的梅毒螺旋体。 2.阴性:未见到上述特征的梅毒螺旋体。 【临床意义】 1.暗视野显微镜检查阳性,可确诊梅毒。 2.螺旋体检查是诊断早期现症梅毒的最好方法,世界卫生组织指定为性病实验室必备项目之一。 3.如未见到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的可能性,应复查和血清学检查。 【注意事项】 1.取材时尽量避免出血,以免影响镜下观察。 2.取材后应立即臵暗视野显微镜下观察。 3.镜下观察时应注意与其他螺旋体相鉴别。 (二)镀银染色检查 【基本原理】 梅毒螺旋体具有亲银性,可被银溶液染色,从而可以在镜下观察到梅毒螺旋体。 【仪器材料】 1.显微镜。 2.罗吉氏固定液、鞣酸媒染剂、Fontana氏银溶液。 【标本采集】

四种梅毒螺旋体检测方法的应用分析

四种梅毒螺旋体检测方法的应用分析 周君霞,巫翠云,何林 (海口市人民医院,海南海口570208) [摘要】应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体血球凝集试验(TPHA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)分别检测血清中的梅毒螺旋体抗体,荧光定量PCR(FQ—PCR)法检测局部分泌物或渗出物中梅毒DNA。 结果:TRUST、TP-ELISA、TPHA、FQ—PCR法灵敏度分别为84.3%、96.1%、94.1%、97.1%,特异性分别为93.5%、98%、100%、100%。TRUST在一、三期梅毒的阳性率最低(66.7%和50%);FQ—PCR在一期梅毒阳性率最高。提示TP-ELISA可作为输血和手术前检测的一种理想筛查方法;TPHA可作为梅毒确诊方法;TRUST可应用于梅毒治疗疗效监测;早期梅毒的诊断首选FQ-PCR。 【关键词】梅毒螺旋体;梅毒螺旋体血凝试验;甲苯胺红不加热血清试验;荧光定量PER [中图分类号]R759.1【文献标识码】B[文章编号】1002-266X(2008)01-0122-02‘ 梅毒是由苍白密螺旋体引起的性传播疾病,流行非常广泛。本研究应用酶联免疫吸附试验(ELISA)、梅毒螺旋体血球凝集试验(TPI-IA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、荧光定量PCR技术(FQ—PCR)等4种检测方法对102例各期梅毒患者的标本进行检测,并对检测结果及各种方法的优缺点进行分析比较,为选择合适的梅毒检测方法提供参考。 1材料与方法 1.1标本来源102例标本来自2006年10月一2007年10月按2000年中国卫生部防疫司颁布的性病诊断标准确诊的我院梅毒患者,其中一期36例、二期58例、三期8例;对照组100例为来自我院皮肤科和泌尿外科非梅毒患者。 1.2检测方法分别对各期梅毒患者及对照组血清进行TP-ELISA、TPHA、TRUST检测;用消毒棉签取所有被检者局部分泌物、渗出液或局部淋巴结抽出液作FQ—PCR检测。PCR试剂由中山达安基因股份有限公司提供,ELISA、TRUST试剂由厦门英科新创科技有限公司提供,TPHA试剂为英国Omega诊断试剂。MuhiskanMK3酶标仪为热电(上海)仪器有限公司生产。PE5700扩增仪为美国ABI公司生产。 1.3统计学方法计数资料比较用采用,检验,以P≤O.05为有统计学差异。 2结果 4种检测方法对梅毒患者标本检测的敏感度和特异性比较见表l。4种检测方法对100例对照组标本检测结果:TRUST阳性6例,特异性为93.5%;122TP-ELISA阳性2例,特异性为98%;TPHA和FQ-PCR法未见假阳性,特异性100%。‘ 表14种检测方法的敏感度和特异性比较(%) 注:与其他方法比较,。P<0.05 3讨论 目前临床对梅毒螺旋体感染的诊断方法越来越多,但临床应用不一。人体感染梅毒螺旋体后,血液产生两种抗体,一种是非梅毒螺旋体特异性抗体,是梅毒螺旋体在破坏组织时释放的抗原性物质(心磷脂)刺激机体产生的有抗体性质的反应素(抗心磷脂抗体),如RPR、TRUST、VDRL、USR等,另一种是梅毒螺旋体特异性抗体,包括IgM和IgG,如TPHA、ELISA等,FQ—PCR法则属于分子生物学技术,可直接检测梅毒螺旋体的核酸。 本研究用4种方法对102例梅毒患者和对照组标本进行检测,结果显示TRUST的灵敏度和特异性均低于其他3种方法,这是因为人体感染梅毒4一lo周血清中才可产生一定数量的抗体,而非特异性抗体比特异性抗体晚1周出现,并且在疾病的非活动期和治疗后容易消失。而且TRUST易出现生物学假阳性,可见于多种疾病,如结核、红斑狼疮、类风湿性关节炎、猩红热等,常导致过激治疗,健康老年人中也可出现假阳性结果…,本次结果也显示假阳性率偏高。但此方法所得的抗体的效价与病情的变化  万方数据

梅毒实验室测试题

梅毒实验室测试题 一、单选题 1、梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法: A 革兰染色 B 美兰染色 C 镀银染色 D 伊红染色 2、非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法: A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS 3、TPPA只能检测到: A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA等混合抗体 D IgM 4、梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本: A 皮肤溃疡组织液 B 羊水 C 血液 D 脑脊液 5、RPR检测不能采用下列标本:

A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 6、ELISA检测不能采用下列标本: A 血清 B 血浆 C 全血 D 脑脊液 7、梅毒螺旋体病原学检测方法不包括: A 暗视野显微镜检查 B 镀银染色 C 培养基培养 D 核酸检测 8、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的转速是: A (100±2)转/分B(100±10)转/分 C (120±2)转/分 D (120±10)转/分 9、RPR/TRUST检测用水平旋转仪的旋转直径是: A 25±2mm B 18±2mm C 20±2mm D 30±2mm 10、RPR/TRUST试验在水平旋转仪上旋转反应时间

A 5分钟 B 8分钟 C 10分钟 D 12分钟 11、TRUST试验时每个反应孔滴加的抗原量是: A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 12、前带现象主要出现在下列哪一种方法中: A ELISA B RPR C TPPA D FTA-ABS 13、RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是: A 50μl B 30μl C 25μl D 17μl 14、下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体: A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、TPPA试验结果判读孔的血清稀释倍数是:

梅毒实验室测试题

梅毒实验室测试题 一、单选题 梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法: 1 、 A 革兰染色 2 、 3、 4、 5、 6、 7、 9、 10、 11、 12、 C 镀银染色 非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法: A TPPA B ELISA C RPR TPPA 只能检测到: A IgA D FTA-ABS B igG C IgG+IgM+IgA 等混合抗体 梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本: A 皮肤溃疡组织液 C 血液 D IgM RPR 检测不能采用下列标本: A 血清 C 全血 ELISA 检测不能采用下列标本: A 血清 C 全血 梅毒螺旋体病原学检测方法不包括: A 暗视野显微镜检查 C 培养基培养 RPR/TRUST 检测用水平旋转仪的转速是: A ( 100 土 2)转 / 分 C ( 120± 2)转 / 分 RPR/TRUST 佥测用水平旋转仪的旋转直径是: A 25 ± 2mm C 20 ± 2mm B 18 D 30 RPR/TRUS 试验在水平旋转仪上旋转反应时间 5分钟 10分钟 D 12 TRUST 式验时每个反应孔滴加的抗原量 是: B 30 D 17 前带现象主要出现在下列哪一种方法中: 美兰染色 伊红染色 羊水 脑脊液 血浆 脑脊液 血浆 脑脊液 镀银染色 核酸检测 (100 ± 10)转 / 分 (120± 10)转 / 分 ± 2mm ± 2mm 分钟 分钟 (11 (11

A ELISA C TPPA D FTA-ABS RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是: A 50 卩l B 30 C25 卩 l D 17 下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体: A RPR B ELISA C VDRL D TRUST TPPA 式验结果判读孔的血清稀释倍数是: A 1:20 B 1:40 C 1:80 D 1:160 ELISA 法采用的抗原是: A 重组抗原 B C 超声裂解梅毒螺旋体 D TPPA 法采用的抗原是: A 重组抗原 B C 超声裂解梅毒螺旋体 D RPR 法采用的抗原是: A 重组抗原 B C 超声裂解梅毒螺旋体 D 梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是: A 一级 B C 三级 D 室间质控的主要目的是评价: A 检测方法有效性 B C 检测结果准确性 D 室内质控的主要目的是评价: A 检测方法有效性 B C 检测结果准确性 D RPF 只能检测到: A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA 等混合抗体 D IgM 特异性梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法: A TRUST 13、 14、 15、 16、 17、 18、 19、 20、 21、 22、 23、 完整的梅毒螺旋体 类脂质 完整的梅毒螺旋体 类脂质 完整的梅毒螺旋体 类脂质 二级 四级 检测结果精确性 检测方法可行性 检测结果精确性 检测方法可行性 B RPR B ELISA

实验室常用梅毒检测方法的评价

?622? 河南职工医学院学报 JournalofHenanMedicalCollegeforStaffandWorkersV01.20No.6Dec.2008实验室常用梅毒检测方法的评价 孟德娣,房功思 (安徽医学高等专科学校医学技术系,安徽合肥230601) [关键词]梅毒;RPR;TPHA;TRUST;ELISA;订A—ABS;PCR [中图分类号]R377+.1[文献标识码]A[文章编号]1008—9276(2008)06—0622-03 梅毒是一种经典的通过性和母婴传播的疾病,其传染性强,感染后可以引起全身各组织、器官的损害,危害较大。近年来,梅毒的发病率呈上升趋势。在梅毒诊断中,由于抗体效价或方法特异性等原因使诊断结果常出现偏差,因此,高效的梅毒实验室诊断已成为大势所趋,对控制梅毒蔓延意义重大。临床实验室合理、有效地选用检测方法,避免错诊、误诊、漏诊是非常必要的。 目前梅毒的检测多采用血清学试验,本文仅对我国实验室常用的梅毒螺旋体检测方法回顾、总结如下。 1快速血浆反应素试验(RPR) 快速血浆反应素试验,是一种常用的梅毒血清学筛选试验,检查的是人体内的反应素。该试验原理是用未经处理的活性炭颗粒(直径3—5am)吸附VDRL抗原…(0.03%心拟脂、0.21%卵磷脂、0.9%胆固醇,用无水乙醇配制)。此颗粒如与待检血清中反应素结合,便形成黑色凝集块,可肉眼观察结果,也可将标本倍比稀释(1:2、1:4—1:32)进行半定量试验,对疗效和判断是否再感染有一定价值。该试验操作简便、快速,可用肉眼判断结果,不需特殊器材,易于推广,可广泛应用于普查、筛选。但是反应素试验特异性不强。梅毒螺旋体破坏组织可使机体产生反应素,而其他破坏机体的过程也可产生反应素,所以患者RPR试验阳性,不一定感染梅毒螺旋体。人体某些生理或病理状态,如怀孕、病毒性肝炎、上呼吸道感染、肺结核、肺炎、亚急性细菌性心内膜炎、类风湿性关节炎、SLE(系统性红斑狼疮)、风湿性心脏病、干燥综合征、慢性肾炎和海洛因成瘾等,RPR都可以呈假阳性;同时,由于梅毒感染者下疳出现最初几天内血清反应素抗体效价较低,RPR试验可能呈阴性结果口】。因此,RPR一般只作为初筛手段,不能单独据其结果诊断梅毒感染,而应对患者进行全面检查,密切随访,并采用其他试验进行确定。 2甲苯胺红不加热试验(TRUST) TRUST试验同样是检测梅毒患者血清中存在着的反应素。TRUST试验采用VDRL抗原重悬于特制的甲苯胺红溶液中,当待测血清中存在反应素时,即与其发生凝集反应,出现肉眼可见的粉红色凝块。TRUST法成本低廉、快速、直观,作为梅毒的初筛试验,TRUST试验在一般的中小型及基层医院被广泛使用。但TRUST法为人工操作、判读,易受到室温及技术操作等因素影响,结果的判断方面主观性较强,易出现漏判和错判,同时存在与RPR同样的特异性低、敏感度不高的缺点,尤其对早期和治疗期梅毒可呈阴性反应,且其结果不易保存、查阅,故只作为一项梅毒感染的筛选试验p1。 3梅毒螺旋体血凝试验(TPHA) TPHA试验是一种检测梅毒螺旋体特异性抗体的特异的、灵敏的被动血凝试验。试验血球为用梅毒螺旋体特异性抗原包被经过醛化和鞣化的鸡红细胞,对照血球为未用上述抗原包被的经过醛化和鞣化的鸡红细胞,如果是阳性标本,当和致敏的鸡红细胞混合后,抗体和抗原的结合会引起致敏血球的凝集,在血凝板底部形成凝集块,如为阴性标本,则血细胞在孔底形成致密的沉淀。TPHA检测目标物为梅毒特异性抗体,是目前公认的梅毒诊断试验,主要用于筛检阳性标本的确诊H1。但TPHA试剂价格较高,操作较繁琐费时,不利临床快速诊断,同时因该特异性抗体存在时间过长,患者即便经过正规抗梅毒治疗,仍可出现阳性结果,甚至可终生检出阳性.故该法对梅毒治疗效果无判定价值¨-。 收稿日期:2008—06—10 作者简介:孟德娣(1979一).女,安徽省合肥市人.学士,助教.现从事临床检验技术教学和科研工作。万方数据

梅毒的检测方法

梅毒是艾滋病出现以前最令人生畏的一种性传播疾病,梅毒是一种慢性传染病,梅毒初起时为全身感染,病程缓慢,在发展中向人体各器官组织入侵,梅毒也可潜伏多年甚至终身没有临床表现。梅毒从传染来源可分为后天梅毒(获得性)和先天梅毒。梅毒早期确诊很关键,下面我们介绍一下梅毒的检测方法: 梅毒的检测方法1、暗视野显微镜检 暗视野显微镜检查是一种检查梅毒螺旋体的方法。暗视野,顾名思义即是显微镜下没有明亮的光线,它便于检查苍白的螺旋体。这是一种病原体检查,对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。 早期皮肤粘膜损害(一期、二期霉疮)可查到苍白螺旋体。一期梅毒苍白螺旋体多在硬下疳的硬结、溃疡的分泌物和渗出液中存在,肿大的淋巴结穿刺也可检出。二期梅毒苍白螺旋体可在全身血液和组织中检出,但以皮肤检出率最高。早期先天性梅毒,可以通过皮肤或粘膜损害处刮片发现梅毒苍白螺旋体。最近,通过羊膜穿刺术获得孕妇的羊水,以其作暗视野显微镜观察,对先天性梅毒有诊断价值。 梅毒的检测方法2、梅毒血清学检测 梅毒血清学检查对于诊断二期、三期梅毒,以及判定梅毒的发展和痊愈,判断药物的疗效都有十分重要的意义。梅毒血清学检查包括非梅毒螺旋体血清学试验和梅毒螺旋体血清学试验。前者常用于临床筛选及判定治疗的效果,抽血后1小时即可出结果,这样梅毒检测费用也低廉。后者主要是用于判定试验,但是它不能判定治疗效果,一旦患有梅毒,这一试验将终身阳性。 (1)非梅毒螺旋体血清试验:这类试验的抗原分为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混悬液,用来检测抗心磷脂抗体。由于这些试验具有相同的标准化抗原,所以敏感性相似。常用的有三种: ①性病研究实验室玻片试验(VDRL); ②血清不加热的反应素玻片试验(USR); ③快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)。 可用作临床筛选,并可作定量,用于疗效观察。 (2)梅毒螺旋体血清试验: ①荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS); ②梅毒螺旋体血凝试验(TPHA);

梅毒实验室测试题

(11 梅毒实验室测试题 一、单选题 梅毒螺旋体镜检可采用的染色方法: A 革兰染色 B C 镀银染色 D 非梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法: A TPPA B ELISA C RPR D FTA-ABS TPPA 只能检测到: A IgA B IgG C IgG+IgM+lgA 等混合抗体 D IgM 梅毒螺旋体镜检一般不采用下列标本: A 皮肤溃疡组织液 B C 血液 D RPR 检测不能采用下列标本: A 血清 B C 全血 D ELISA 检测不能采用下列标本: A 血清 B C 全血 D 梅毒螺旋体病原学检测方法不包括: A 暗视野显微镜检查 B C 培养基培养 D RPR/TRUST 检测用水平旋转仪的转速是: A ( 100± 2)转 / 分 B C ( 120± 2)转 / 分 D RPR/TRUST 佥测用水平旋转仪的旋转直径是: A 25 ± 2mm B 18 C 20 ± 2mm RPR/TRUS 试验在水平旋转仪上旋转反应时间 A 5分钟 B 8 C 10分钟 D 12 TRUST 式验时每个反应孔滴加的抗原量是: A 50 卩 l B 30 C25 卩l D17 1、 2、 3、 4、 5、 6、 7、 8 9、 10、 11、 12、 美兰染色 伊红染色 羊水 脑脊液 血浆 脑脊液 血浆 脑脊液 镀银染色 核酸检测 (100 ± 10)转 / 分 (120± 10)转 / 分 ± 2mm ± 2mm 分钟 分钟 D 30

前带现象主要出现在下列哪一种方法中: (11

A ELISA B RPR A TRUST B ELISA C TPPA D FTA-ABS 13、 RPR 试验时每个反应孔滴加的抗原量是: A 50 卩 l B 30 3 l C 25 卩 l D 17 3 l 14、 下列哪项方法不是检测非梅毒螺旋体抗体: A RPR B ELISA C VDRL D TRUST 15、 TPPA 式验结果判读孔的血清稀释倍数是: A 1:20 B 1:40 C 1:80 D 1:160 16、 ELISA 法米用的抗原是: A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 17、 TPPA 法采用的抗原是: A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 18、 RPR 法采用的抗原是: A 重组抗原 B 完整的梅毒螺旋体 C 超声裂解梅毒螺旋体 D 类脂质 19、 梅毒血清学检测实验室的生物安全级别是: A 一级 B 二级 C 三级 D 四级 20、 室间质控的主要目的是评价: A 检测方法有效性 B 检测结果精确性 C 检测结果准确性 D 检测方法可行性 21、 室内质控的主要目的是评价: A 检测方法有效性 B 检测结果精确性 C 检测结果准确性 D 检测方法可行性 22、 RPF 只能检测到: A IgA B IgG C IgG+IgM+IgA 等混合抗体 D IgM 23、 特异性梅毒螺旋体抗体检测可采用的方法:

四种梅毒抗体血清学检验方法的比较

四种梅毒抗体血清学检验方法的比较 【摘要】目的评价四种梅毒血清学检验方法的敏感度和特异性以及对梅毒诊断的临床应用和价值。方法分别采用ELISA、TRUST及胶体金法3种不同的血清学方法对255例皮肤科门诊患者标本进行检测,结果均以梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)进行确认,比较ELISA、TRUST和胶体金法对梅毒的诊断价值。结果在对87例阳性和168例阴性标本的检测中,TRUST法、胶体金法、ELISA诊断梅毒的敏感度分别为73??56%、95??4%、98??8%,特异度分别为97??0%、98??8%、100%。TRUST法与TPPA法检测结果差异有统计学意义(P<0??01)而ELISA、胶体金与TPPA法差异无统计学意义。结论ELISA法检测梅毒螺旋体具有较高的敏感度和特异性与TPPA法有较高的一致性,可用于临床大批量样本初筛,胶体金可用于急诊快速筛查,阳性标本用TPPA法来进行确认,以TRUST法及其滴度试验作为对疗效及愈合的判断指标。 【关键词】梅毒抗体; TPPA、TP??ELLSA、TRUST;胶体金法 作者单位:457000 河南省濮阳市人民检验科梅毒是一种由梅毒螺旋体(TP)引起的全身各器官病变的性传播疾病,

其传染力强、危害性大。据世界卫生组织(WTO)报告,成年人每年新发梅毒1200万,已成为严重的公共卫生问题[1]。梅毒的诊断需依据病史,临床表现及血清学诊断,由于梅毒早期的临床表现并不典型,有些患者对病史陈述缺乏真实性,故血清学检测是诊断梅毒的主要手段之一。目前,临床实验室常用的血清学诊断TP的有甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST),胶体金法,ELISA法、TPPA法等等不同的检测方法都有其特殊的临床应用价值,选择有效的方法对梅毒早期诊断、预防和控制梅毒的传播,避免因错误的检测结果引起不必要的医疗纠纷有着重要意义。 本文对255例患者的血清就我院检验科常用的TRUST 法胶体金法ELISA法以下方法学评价。 1 资料与方法 1??1 一般资料选择2011年1月至12月皮肤科患者255例,年龄19??70岁。男性125例,女性:89例。 1??2 试剂与仪器TRUST试剂、胶体试剂均为英科新创公司产品,ELISA试剂为上海科华生物工程股份有限公司产品,TPPA试剂由日本富士株式会社产品: 全自动酶免分析系统(RMP200)振漏器、离心机等。 1??3 检测方法所有受试者均空腹抽血5 ml,4000r/min 离心5 min后分离血清,血清标本不能及时检测则置于4℃冰箱,避免反复冻融,均采用TRUST法,ELISA法,胶体

梅毒几种检测方法的比较(一)

梅毒几种检测方法的比较(一) 【摘要】安全的血源,是输血安全的保证。大多数采供血机构采用的非特异性的甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)或快速血浆反应素试验(RPR)法,检测灵敏度低、特异性差,对输血安全影响很大。为选择合适的梅毒检测方法,本文探讨各种检测方法的原理及优劣,从而总结出适合用于献血者梅毒筛查的方法。 【关键词】梅毒;检测;血站筛查 非特异性的甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)或快速血浆反应素试验(RPR)法,是目前血站筛查梅毒的常用方法。传染期的梅毒献血者,试验结果可能为阴性,献血者献血后造成梅毒传播;检测易出现生物学假阳性,部分假阳性的献血者被淘汰。因此梅毒的检测方法对输血安全非常重要。梅毒螺旋体侵入机体可产生两种抗体:特异性抗体与非特异性抗体。目前用于梅毒检验的方法就是检测这两种抗体。 1梅毒螺旋体非特异性血清学试验 1.1快速血浆反应素试验(RPR):抗原以胆固醇晶粒为载体,包被上心磷脂和卵磷脂,构成VDRL 抗原颗粒。再把抗原颗粒结合到活性炭上,当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时,出现凝集,凝集颗粒呈黑色。 1.2甲苯胺红不加热血清试验(TRUST):抗原以胆固醇晶粒为载体,包被上心磷脂和卵磷脂,构成VDRL抗原颗粒。再把抗原颗粒结合到甲基胺红上,当抗原与血清中反应素以一定的比例相互作用时,出现凝集,凝集颗粒呈红色。 2梅毒螺旋体特异性血清学试验 2.1荧光密螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS):首先将梅毒螺旋体Nichols株抗原直接涂在载玻片上,然后将密螺旋体无毒株Reiter株制成吸收剂加至待测血清标本中,吸收掉血清中的非特异性抗体。再将吸收后的血清加到玻片的抗原膜上,再加荧光素标记的抗人IgG,最后在荧光显微镜下观察结果。 2.2梅毒螺旋体血细胞凝集试验(TPHA):将梅毒螺旋体Nichols株经超声破碎后,得到可溶性抗原成分,致敏红细胞。用无毒株Reiter株制成吸收剂与血清反应,吸收掉血清中的非特异性抗体。特异性的抗体(血清通常用作1∶80以上稀释)就可使致敏的红细胞发生凝集作用。 2.3梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA):用梅毒螺旋体致敏明胶颗粒替代TPHA试验中致敏的红细胞,明胶颗粒为洋红色,致敏颗粒与人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体结合,产生可见的凝集反应,具有较高的敏感性。 2.4梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA):在体外表达得到了梅毒螺旋体的相应特异基因工程抗原,采用基因工程梅毒螺旋体抗原以双抗原夹心法检测梅毒抗体。 2.5梅毒胶体金层析法(TP-CG):根据双抗原夹心免疫层析原理,在硝酸纤维素膜上包被TP 重组抗原,在玻璃纤维上吸附胶体金标记TP重组抗原,样品中的TP抗体首选与金标抗原结合形成复合物,顺膜渗透至包被反应区,与包被TP抗原结合,形成由胶体金抗原-TP抗体-抗原组成的紫红色反应带。 2.6梅毒蛋白印迹(TP-WB)首先将将梅毒螺旋体Nichols株菌体细胞用SDS破碎,再使用聚丙烯酰胺凝胶电泳将将梅毒螺旋体各种抗原成分分开形成不同区带,经电转印可将这些条带转移至硝酸纤维素膜上作为抗原,最后采用酶标技术检测病人血清中的相应特异抗体。

梅毒血清学检测方法的选择

梅毒血清学检测方法的选择 目的研究并探讨不同梅毒血清检测方法在产前梅毒常规筛查中的应用效果。方法于2014年1月~2015年6月,选取在我院进行产前梅毒常规筛查的500例孕妇进行研究,分别采用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA法)、免疫胶体金法、甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST法)对梅毒进行检测,对比TPPA法、免疫胶体金法、TRUST法、三种方法联合检测的敏感度、特异度、准确性、阳性预测值以及阴性预测值。结果500例进行产前梅毒常规筛查的孕妇中,有448例孕妇被确诊为梅毒阳性,52例孕妇为阴性。三种梅毒血清学检测方法的敏感度、特异度、准确性、阳性预测值以及阴性预测值均不存在统计学差异(P>0.05),但三种检测方法联合检测的敏感度、特异度、准确性、阳性预测值以及阴性预测值均明显高于单一的检测方法(P<0.05)。结论在产前梅毒筛查中,TPPA法、TRUST法以及胶体金法具有其各自的优势,三种方法进行联合检测可提高梅毒检出率,产前梅毒筛查时可进行联合检测。 标签:产前筛查;梅毒;血清学检测;诊断 梅毒是一种传染性较强的人类性传播疾病,其病原体主要为梅毒螺旋体,传染性较强,危害性较为严重。梅毒通常可分为先天性梅毒和获得性梅毒,其中先天性梅毒主要传播方式为母婴传播,母体携带的梅毒螺旋体通过胎盘组织传染给宫内胎儿,可能会导致胎儿早产、流产等妊娠不利结局。因此,有必要在产前对孕妇进行梅毒筛查,以便于及时采取相应的干预措施,以减少梅毒的传播,改善妊娠结局。本次研究为了探讨不同梅毒血清检测方法在产前梅毒常规筛查中的应用效果,特于2014年1月~2015年6月选取500例进行梅毒筛查的孕妇进行研究,分别采取梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA法)、免疫胶体金法、甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST法)进行检测。现将研究结果分析如下。 1资料与方法 1.1一般资料 于2014年1月~2015年6月,选取在我院进行产前梅毒常规筛查的500例孕妇进行研究,所有孕妇均进行产前梅毒常规筛查,孕妇的年龄分布于20~37岁之间,平均为(29.67±6.34)岁,孕周为12~32周,平均孕周为(21.94±9.57)周,其中有427例初产妇、73例经产妇。在进行研究前,孕妇及其家属均对研究方法和目的进行了详细的了解,并签署知情同意书。此次研究经医院伦理委员会许可通过。 1.2研究方法 分别采用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA法)、免疫胶体金法、甲苯胺红不加热血清反应素试验(TRUST法)对孕妇进行梅毒血清学检测,每例孕妇均于清晨空腹状态时采集5mL的静脉血液,以3000r/min的速度进行离心处理,取血

3种梅毒检测方法的比较与分析

3种梅毒检测方法的比较与分析 目的比较分析三种梅毒检测方法,提高梅毒临床诊断符合率。方法收集2012年10月~2013年10月门诊及住院患者共8178例,经梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)筛选出200例血清标本分别用梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)法进行检测,以TPPA检测结果作为确诊。结果以TPPA为标准可得出TP-ELISA的敏感性较高;而TRUST 的敏感性较低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论2种方法的特异性均较高,无明显差异(P>0.05)。TP-ELISA适合大规模筛查和临床的诊断,TRUST敏感性较低,不适合于大批量筛查,为提高梅毒的检出率和准确性,建议用TPPA复检和确诊,3种检测方法结合应用能更有效提高梅毒临床诊断符合率。 Abstract:Objective To compare three methods for detection of syphilis,improve the clinical diagnosis of syphilis.Methods A total of 8178 cases of syphilis including outpatients and inpatients were collected from 2012 October to 2013 October,among which 200 serum samples selected by TP-ELISA were detected by TPPA and TRUST methods,the TPPA results as confirmation. Results Can be obtained with the standard of TPPA that the sensitivity of TP-ELISA was higher and TRUST was lower,the difference was statistically significant (P<0.05). Conclusion Specificity of the two methods was high,no significant difference (P>0.05). TP-ELISA method is suitable for large-scale clinical screening and diagnosis,the TRUST method is not suitable for mass screening because of the lower sensitivity,in order to improve the detection rate and accuracy of syphilis,we advice examing and confirming by TPPA. Three kinds of detection methods combined application can more effectively improve the rates of clinical diagnosis. Key words:Syphilis;Enzyme-linked immunosorbent assay;Treponema pallidum gelatin particle agglutination test for syphilis;Methylaminered unheated serum test 梅毒是由梅毒螺旋体感染引起的具有高度传染性和致病性疾病。目前,临床实验室主要采用血清学试验检测梅毒抗体。我们对常用的梅毒酶联免疫吸附试验(TP-ELISA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST) 3 种方法进行比较,为提高梅毒检测及诊断的准确率提供参考。 1资料与方法 1.1一般资料收集2012年10月~2013年10月门诊及住院患者共8178例。 1.2方法①试剂:TP-ELISA试剂为北京万泰生物药业有限公司产品,TPPA 试剂为日本富士瑞必欧株式会社产品,TRUST试剂为上海荣盛生物有限公司产品。②方法:所有血清标本经TP-ELISA筛查后,选取200例标本(阴性和阳性血清标本各100例),分别用TPPA和TRUST检测,TPPA作为确诊试验。实验

四种梅毒血清学试验检测方法的比较

中国皮肤性病学杂志2006年4月第20卷第4期ChinJDermVenereol,Apr.2006,V01.20,No.4 职业分布上,学生、军人与其他人员差异具有非常显著性差异,这可能与学生、军人主要由未婚人员组成有关,显示学生、军人为低危人群。在学历分布上没有明显差异,这与艾滋病的流行情况有所不同,艾滋病阳性率与受教育程度有关,学历高者相对感染率低些∞J。 鉴于梅毒的流行状况,这就要求献血前应加大宣传力度,认真咨询,对高危人群应劝其放弃献血,并尽量从低危人群中采集血液,同时必须加强检验工作的规范化管理,严把血液质量关,选择特异性、灵敏度较好的检测试剂,输血时尽量输用保存了3天以上的血液。总之,为了确保血液质量,应该在献血前、检验、发血等环节进行全程控制,才能够为临床提供合格的血液,从而保证输血安全。 [参考文献] [1]杨国庆,朱祥明,杨勇,等.无偿献血者梅毒抗体检测情况分析[J].职业与健康,2003,19(12):142. [2]徐明华,吴晓黎,宋哲.烟台市无偿献血梅毒血清学分析[J].齐鲁医学检验,2004,15(6):70. [3]濮德敏,侯萌,杨丹.同济医院门诊1987年~2001年性传播疾病流行病学分析[J].中华流行病学杂志,2004,25(3):189. [4]张雅莉,赵晓华,王瑁.陕西省西安地区血检阳性无偿献血者的结构分析[J].中华流行病学杂志,2002,4(4):305. [5]汪宁.我国艾滋病预防控制的形势与面临的挑战[J].中华预防医学杂志,2004,38(5):291. [收稿日期]2005—10—24[修回日期]2005-12-04 四种梅毒血清学试验检测方法的比较 TheComparativeStudyforSyphiliswithFourSerumTests 赵华1,李代渝2,雷丽明2 ZHAOHua,LIDai‘yu,LEILi。ming [摘要]目的比较四种梅毒血清学试验的检测效果。方法对20例梅毒患者血清采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析法(GICA)四种不同的血清学方法进行对比检测。结果TPHA与GICA比较,TPHA与ELISA比较差异均无显著性。TPHA,ELISA对梅毒检测结果呈正相关,ELISA的S/CO随TPHA滴度的增高而增高。结论用GICA对梅毒进行筛选,ELISA双抗原夹心法对梅毒进行确诊,并用ELISA结合TRUST进行疗效判断,是较为理想的血清学实验组合。 [关键词]梅毒;方法评价;血清学试验 [中图分类号]R759.1[文献标识码]B[文章编号]1001-7089(2006)04—0229—01 梅毒是常见性传播疾病之一,它可以引起全身性的损害及病变,同时还传播给下一代。近几年来,我国梅毒的患病率快速上升。因此,对梅毒的早期诊断及正确地评价治疗疗效,为临床提供准确、及时的依据显得尤为重要。血清学试验是目前国内外诊断梅毒的主要方法。笔者采用甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)、梅毒螺旋体血凝试验(TPHA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、胶体金免疫层析法(GICA)对治疗前的梅毒患者进行检测,并对各项试验之间的相互关系和应用价值进行分析评价,现报告如下。 1材料和方法 1.1标本20例血清标本均来自泸州医学院附属医院皮肤科确诊的梅毒患者。 1.2试剂与仪器TRUST试剂盒由上海荣盛生物技术有限公司提供,TPHA试剂盒为13本富士公司产品,ELISA试剂盒由厦门新创科技有限公司提供,GICA由艾康生物技术杭州有限公 【作者单位]1泸州医学院附属医院检验科,四川泸州646000;2泸州医学院附属医院输血科,四川泸州646000 【作者简介]赵华(1958一),女,四川省泸州人,副主任技师,主要从事免疫血液学研究。 司生产。酶标仪为郑州安图公司生产,洗板机为奥地利产品。1.3试验方法TRUST,TPHA,ELISA,GICA的检测均严格按使用说明书操作。 1.4统计学处理计数资料比较用x2检验,S/CO值与TPHA的滴度比较用相关系数检验。 2结果 检测结果见表1,2。 表1三种方法梅毒检测结果比较 TPHA与GICA比较x2=O,TPHA与ELISA比较x2=1.33,差异均无显著性。 3讨论 人体感染梅毒螺旋体后,通过感应、反应、效应三个阶段才会出现抗体,梅毒血清学试验出现阳性。7删PA检测特异性抗体,常用于筛检阳性标本的确认,具有特异性强、敏感性高,血清、血浆皆可用于检测的特点,但反应时间较长,最少需要1.5h,不适于大批量的筛选试验,而且价格较昂贵。GICA是新近

特异性梅毒快速血清学试验

特异性梅毒快速血清学试验(TP)标准操作规程 1、目的 作为血清学确证实验,对梅毒诊断有非常重要的意义,梅毒是国家法定的传染病之一,必须保证该项检测的质量。 2、适用范围 适用于检验科实验室检测梅毒螺旋体IgG、IgM抗体血清学试验(TP)的质量控制。 3、职责 3.1检测人员必须执行本规程。 3.2监督员负责对本规程的执行情况进行检查监督。 3.3科室主任负责对违规情况进行查处,并进行跟踪纠正。 3.4检测人员做好个人防护非常重要,应遵循普遍性防护原则,戴手套谨慎操作。 4、原理 将梅毒的抗原成分固定在结果显示窗上,人血清或血浆中的梅毒螺旋体抗体在移动到该窗口时与固定抗原特异性结合,产生肉眼可见的红色条带,该试验具有较高的敏感性和特异性。方法简便、快捷。 5、仪器 定量架器 6、试剂与材料 6.1试剂盒组成:梅毒TP快速检测试纸条,100人份/包 6.2一次性吸头 7、操作程序 7.1标本的采集: 7.2确保冻融的待检血样充分混匀。 7.3检测程序:撕开试纸条上的盖膜,加质控品和血清或血浆样本50微升分别于试纸条的加样孔内,15分钟后观察结果,最迟不超过2小时。 8、结果的判定 阴性:质控窗口出现条带,样本窗口不出现条带。 阳性:质控窗口出现条带,样本窗口出现条带。 无效:质控窗口不出现条带。 9、注意事项 9.1试剂保存:应保存于2-30℃,在有效期内使用。 9.2判读结果时要保证足够的光线和充足的时间。 9.3确保实验的有效性。试剂在使用前需要进行预评价,检测过程中设置外部对照,观察质控窗条带是否出现,综合判断实验的有效性、确保检测质量。 10、支持性文件 10.1《中华人民共和国传染病防冶法》规定管理的传染病诊断标准

梅毒的检测方法

梅毒的检测方法 1、暗视野显微镜检暗视野显微镜检查是一种检查梅毒螺旋体的方法。暗视野,顾名思义即是显微镜下没有明亮的光线,它便于检查苍白的螺旋体。这是一种病原体检查,对早期梅毒的诊断有十分重要的意义。早期皮肤粘膜损害(一期、二期霉疮)可查到苍白螺旋体。一期梅毒苍白螺旋体多在硬下疳的硬结、溃疡的分泌物和渗出液中存在,肿大的淋巴结穿刺也可检出。二期梅毒苍白螺旋体可在全身血液和组织中检出,但以皮肤检出率最高。早期先天性梅毒,可以通过皮肤或粘膜损害处刮片发现梅毒苍白螺旋体。最近,通过羊膜穿刺术获得孕妇的羊水,以其作暗视野显微镜观察,对先天性梅毒有诊断价值。 2、梅毒血清学检测梅毒血清学检查对于诊断二期、三期梅毒,以及判定梅毒的发展和痊愈,判断药物的疗效都有十分重要的意义。梅毒血清学检查包括非梅毒螺旋体血清学试验和梅毒螺旋体血清学试验。前者常用于临床筛选及判定治疗的效果,抽血后1小时即可出结果,费用也低廉。后者主要是用于判定试验,但是它不能判定治疗效果,一旦患有梅毒,这一试验将终身阳性。(1)非梅毒螺旋体血清试验这类试验的抗原分为心磷脂、卵磷脂和胆固醇的混悬液,用来检测抗心磷脂抗体。由于这些试验具有相同的标准化抗原,所以敏感性相似。常用的有三种:①性病研究实验室

玻片试验(VDRL);②血清不加热的反应素玻片试验(USR); ③血浆反应素target=_blank>快速血浆反应素环状卡片试 验(RPR)。可用作临床筛选,并可作定量,用于疗效观察。 (2)梅毒螺旋体血清试验包括有:①荧光螺旋体抗体吸收试验(FTA-ABS);②梅毒螺旋体血凝试验(TPHA);③梅毒螺旋体制动试验(TPI)等。这类试验特异性高,主要用于诊断试验。3、梅毒螺旋体IgM抗体检测梅毒螺旋体IgM抗体检测是近年来才有的新的诊断梅毒的方法。IgM抗体是一种免疫球蛋白,用它来诊断梅毒具有敏感性高,能早期诊断,能判定胎儿是否感染梅毒螺旋体等优点。特异性IgM 类抗体的产生是感染梅毒和其他细菌或病毒后机体首先出 现的体液免疫应答,一般在感染的早期呈阳性,随着疾病发展而增加,IgG抗体随后才慢慢上升。经有效治疗后IgM抗体消失,IgG抗体则持续存在,TP-IgM阳性的一期梅毒病人经过青霉素治疗后,约2~4周TP-IgM消失。二期梅毒 TP-IgM阳性病人经过青霉素治疗后,2~8个月之内IgM消失。此外,TP-IgM的检测对诊断新生儿的先天性梅毒意义很大,因为IgM抗体分子较大,其母体IgM抗体不能通过胎盘,如果TP-IgM阳性则表示婴儿已被感染。4、分子生物学检测近年来分子生物学发展迅速,PCR技术广泛用于临床,所谓PCR即多聚酶链式反应,即从选择的材料扩增选择的螺旋体DNA序列,从而使经选择的螺旋体DNA拷

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