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53种缓冲液配制

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53种缓冲液配制

缓冲液配制作者: ivy3dball 发布日期: 2006-1-05 出自: http://www.e2002.co m

缓冲液

乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7) 取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0) 取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1) 取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml,即得。

三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0) 取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸

3.65g、氯化钠5.8g、乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,

调节pH值至9.0,即得。

乌洛托品缓冲液取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml,即得。

巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠 4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过,即得。

巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥 5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml,即得。

巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。然后用

0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml,即得。

甲酸钠缓冲液(pH3.3) 取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25~3.30,即得。

邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6) 取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml,混匀,即得。

枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20%乙醇制氢氧化钠溶液40ml 使溶解,再用20%乙醇稀释至100ml,即得。

枸橼酸盐缓冲液(pH6.2) 取2.1%枸橼酸水溶液,用50%氢氧化钠溶液调节pH值至6.2,即得。

枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0) 甲液:取枸橼酸21g或无水枸橼酸

19.2g,加水使溶解成1000ml,置冰箱内保存。乙液:取磷酸氢二钠71.63g,

加水使溶解成1000ml。取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml混合,摇匀,即得。

氨-氯化铵缓冲液(pH8.0) 取氯化铵1.07g,加水使溶解成100ml,再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0,即得。

氨-氯化铵缓冲液(pH10.0) 取氯化铵5.4g,加水20ml溶解后,加浓氯溶液35ml,再加水稀释至100ml,即得。

硼砂-氯化钙缓冲液(pH8.0) 取硼砂0.572g与氯化钙2.94g,加水约800ml 溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0,加水稀释至1000ml,即得。

硼砂-碳酸钠缓冲液(pH10.8~11.2) 取无水碳酸钠 5.30g,加水使溶解成1000ml;另取硼砂1.91g,加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml 与硼砂溶液27ml,混匀,即得。

硼酸-氯化钾缓冲液(pH9.0) 取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml 使溶解,再加0.1mol/L氢氧化钠溶液210ml,即得。

醋酸盐缓冲液(pH3.5) 取醋酸铵25g,加水25ml溶解后,加7mol/L盐酸溶液38ml,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml,即得。

醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0) 取冰醋酸50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节pH值至3.0,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7)取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.8)取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至4.6,再加水稀释至100ml,即得。

醋酸-醋酸钠缓冲液(pH6.0) 取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml,即得。

醋酸-醋酸钾缓冲液(pH4.3) 取醋酸钾14g,加冰醋酸20.5ml,再加水稀释至1000ml,即得。

醋酸-醋酸铵缓冲液(pH4.5) 取醋酸铵7.7g,加水50ml溶解后,加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml,即得。

醋酸-醋酸铵缓冲液(pH6.0) 取醋酸铵100g,加水300ml使溶解,加冰醋酸7ml,摇匀,即得。

磷酸-三乙胺缓冲液取磷酸约4ml与三乙胺约7ml,加50%甲醇稀释至1000ml,用磷酸调节pH值至3.2,即得。

磷酸盐缓冲液取磷酸二氢钠38.0g,与磷酸氢二钠5.04g,加水使成1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.0) 甲液:取磷酸16.6ml,加水至1000ml,摇匀。乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml。取上述甲液72.5ml与乙液27.5ml混合,摇匀,即得。

磷酸盐缓冲液(pH2.5) 取磷酸二氢钾100g,加水800ml,用盐酸调节pH至2.5,用水稀释至1000ml。

磷酸盐缓冲液(pH5.0) 取0.2mol/L磷酸二氢钠溶液一定量,用氢氧化钠试液调节pH值至5.0,即得。

磷酸盐缓冲液(pH5.8) 取磷酸二氢钾8.34g与磷酸氢二钾0.87g,加水使溶解成1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.5) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液

15.2ml,用水稀释至100ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.6) 取磷酸二氢钠1.74g、磷酸氢二钠2.7g与氯化钠1.7g,加水使溶解成400ml,即得。

磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6.8) 取磷酸二氢钾 6.8g,加水500ml使溶解,用

0.1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至6.8;另取胰酶10g,加水适量使溶解,

将两液混合后,加水稀释至1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH6.8) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液250ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液118ml,用水稀释至1000ml,摇匀,即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.0) 取磷酸二氢钾0.68g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液

29.1ml,用水稀释至100ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.2) 取0.2mol/L磷酸二氢钾溶液50ml与0.2mol/L氢氧化钠溶液35ml,加新沸过的冷水稀释至200ml,摇匀,即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.3) 取磷酸氢二钠1.9734g与磷酸二氢钾0.2245g,加水使溶解成1000ml,调节pH值至7.3,即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.4) 取磷酸二氢钾 1.36g,加0.1mol/L氢氧化钠溶液79ml,用水稀释至200ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.6) 取磷酸二氢钾27.22g,加水使溶解成1000ml,取50ml,加0.2mol/L氢氧化钠溶液42.4ml,再加水稀释至200ml,即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.8) 甲液:取磷酸氢二钠35.9g,加水溶解,并稀释至500ml。

乙液:取磷酸二氢钠2.76g,加水溶解,并稀释至100ml。取上述甲液91.5ml 与乙液8.5ml混合,摇匀,即得。

磷酸盐缓冲液(pH7.8~8.0) 取磷酸氢二钾5.59g与磷酸二氢钾0.41g,加水使溶解成1000ml,即得。

磷酸盐缓冲液的配制

磷酸盐是生物化学研究中使用最广泛的一种缓冲剂,由于它们是二级解离,有二个pKa 值,所以用它们配制的缓冲液,pH 范围最宽:NaH2PO4: pKa1=2.12,pKa2=7.21; Na2HPO4:pKa1=7.21,pKa2=12.32

配酸性缓冲液:用NaH2PO4,pH=1~4,

配中性缓冲液:用混合的两种磷酸盐,pH=6~8,

配碱性缓冲液:用Na2HPO4,pH=10~12。

用钾盐比钠盐好,因为低温时钠盐难溶,钾盐易溶,但若配制SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳的缓冲液时,只能用磷酸钠而不能用磷酸钾,因为SDS(十二烷基硫酸钠)会与钾盐生成难溶的十二烷基硫酸钾。

磷酸盐缓冲液的优点为:①容易配制成各种浓度的缓冲液;②适用的pH 范围宽;

③pH 受温度的影响小;④缓冲液稀释后pH 变化小,如稀释10倍后pH 的变化

小于0.1。

其缺点为:①易与常见的钙Ca2+离子、镁Mg2+离子以及重金属离子缔合生成沉淀;②会抑制某些生物化学过程,如对某些酶的催化作用会产生某种程度的抑制作用.

配制方法:配制时,常先配制0.2mol/L的NaH2PO4和0.2mol/L的Na2HPO4,两者按一定比例混合即成0.2mol/L的磷酸盐缓冲液(PB),根据需要可配制不同浓度的PB和PBS。

(1)0.2mol/L的Na2HPO4;称取Na2HPO4.12H2O 31.2g(或NaH2PO4·H2O 27.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(2)0.2mol/L的Na2HPO4:称取NaHPO4.·12H2O 71.632g(或Na2HPO4·7H2O 53.6g或Na2HPO4·2H2O 35.6g)加重蒸水至1000ml溶解。

(3)0.2mol/L pH7.4的PB的配制:取19ml 0.2mol/L的NaH2PO4和81ml 0.2mol/L的Na2HPO4·12H2O,充分混合即为0.2mol/L的PB(pH约为7.4~7.5)。若pH偏高或偏低,可通过改变二者的比例来加以调整,室温保存即可。

0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH5.7~8.0)

pH 0.2mol/L NaH2PO4(ml) 0.2mol/L Na2HPO4(ml)

5.7 93.5

6.5

5.8 92.0 8.0

5.9 90.0 10.0

6.0 8

7.7 12.3

6.1 85.0 15.0

6.2 81.5 18.5

6.3 7

7.5 22.5

6.4 73.5 26.5

6.5 68.5 31.5

6.6 62.5 3

7.5

6.7 56.5 43.5

6.8 51.0 49.0

6.9 45.0 55.0

7.0 39.0 61.0

7.1 33.0 67.0

7.2 28.0 72.0

7.3 23.0 67.0

7.4 19.0 81.0

7.5 16.0 84.0

7.6 13.0 87.0

7.7 10.5 89.5

7.8 8.5 91.5

7.9 7.0 93.0

8.0 5.3 94.7

六次甲基四胺缓冲溶液(PH5.5):称取200g六次甲基四胺于500ml烧

杯中,加200ml水溶解,加70ml盐酸(1+1),用水稀释至1000ml 0.1mol/LpH5。6的柠檬酸缓冲溶液,A液(0.1vmol/l柠檬酸)称取分析纯柠檬酸21。01g用蒸馏水溶解并定容至1升,B液,(0。1mol/l)柠檬酸钠,称取柠檬酸钠29。41g用蒸馏水溶解并定容至1l,取A液55ml与B液145ml混匀,即为0。1mol/lpH5。6的柠檬酸缓冲溶液。

0 1Mol/L PH5 6的柠檬酸缓冲液:A液(0 1Mol/L柠檬酸):称取分析纯柠檬酸21 01g,用蒸馏水溶解并定容至1L;B液(0 1Mol/L柠檬酸钠):

称取柠檬酸钠29 41g用蒸馏水溶解并定容至1L;取A液55Ml与B液145Ml 混匀,即为0 1Mol/L PH5 6的柠檬酸缓冲液

标准缓冲溶液(均用pH标准缓冲物质配制)

1.1 苯二甲酸氢钾标准缓冲溶液:c(KHC8H4O4)=0.05 mol/L(25℃时,

pHs=4.003)。

苯二甲酸氢钾的pH标准缓冲物质,有小塑料袋和瓶装两种,配制方法如下:a)袋装配制法:

在250 mL(或500 mL)量瓶中(根据袋中标准缓冲物质量,选择量瓶大小),按袋上的说明配制成所需的浓度。保存于聚乙烯瓶中。

b)瓶装配制法:

称取5.10 g苯二甲酸氢钾(KHC8H4O4预先在115℃±5℃,烘2~3 h,于干燥器中冷却),溶于水并稀释至500 mL,混匀。保存于聚乙烯瓶中。

1.2 0.025 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.025 mol/L磷酸氢二钠(Na2HPO4)混合标准缓冲溶液(25℃时,pHs=6.864):

磷酸二氢钾和磷酸氢二钠的pH标准缓冲物质,有小塑料袋装(混合磷酸盐)和瓶装(两种pH标准缓冲物质分别包装)两种。配制方法如下:

a)袋装配制法:

在量瓶(根据袋上说明确定量瓶大小)中按袋上说明配制成所需浓度后,保存于聚乙烯瓶中。

b)瓶装配制法:

迅速称取3.40 g磷酸二氢钾(KH2PO4)和3.55 g磷酸氢二钠(Na2HPO4)(均预先在115±5℃烘2~3 h,于干燥器中冷却)溶于蒸馏水,转入1 000 mL量瓶中,加水至标线,混匀。

1.3 0.008 695 mol/L磷酸二氢钾(KH2PO4)和0.030 43 mol/L磷酸氢二钠

(Na2HPO4)标准混合缓冲溶液(25℃时,pH=7.413):

磷酸二氢钾和磷酸氢二钠两种pH标准缓冲物质分别用瓶包装,配制方法如下:迅速称取1.18 g磷酸二氢钾和4.31 g磷酸氢二钠(均预先在115℃±5℃烘2~3 h,于干燥器中冷却),溶于水,全量移入1 000 mL量瓶中,加水至标线,混匀。保存于聚乙烯瓶中。

1.4 硼砂标准缓中溶液:c(Na2B4O7·10H2O)=0.010 mol/L(25℃时,

pHs=9.182)。

硼砂的pH标准缓冲物质也有塑料袋装和瓶装两种,配制方法如下:

a)袋装配制法:

在500 mL量瓶中,按袋上说明配制成所需浓度后,分装于5个100 mL聚乙烯瓶中,瓶口用石蜡熔封。

b)瓶装配制法:

称取1.91 g硼砂(预先在盛有蔗糖饱和溶液的干燥器中平衡两昼夜),溶于刚煮沸冷却的蒸馏水,全量转入500 mL量瓶中,加水至标线,混匀。分装于5个100 mL聚乙烯瓶中,瓶口用石蜡熔封,有效期为三个月,经常使用的缓冲溶液,每周更换一次。

各种标准缓冲溶液的pH值随温度的变化而变化。0~45℃的pH值列于表21中。

27.1.3.2 饱和氯化钾溶液:

称取40 g氯化钾(KCl),加100 mL水,充分搅拌后盛于试剂瓶中(此溶液应与氯

化钾固体共存)。

表21 0~45℃标准缓冲物质的pH值

温度,℃苯二甲酸氢钾(27.1.3.1.1) 混合磷酸盐(27.1.3.1.2) 磷酸盐(27.1.3.1.3) 硼砂(27.1.3.1.4)

0 4.006 6.981 7.534 9.458

5 3.999 6.949 7.500 9.391

10 3.996 6.921 7.472 9.330

20 3.998 6.879 7.429 9.226

25 4.003 6.864 7.413 9.182

30 4.010 6.852 7.400 9.142

35 4.019 6.844 7.389 9.105

40 4.029 6.838 7.380 9.072

45 4.042 6.834 7.373 9.042

1、PBS:

取ZLI-9061 PBS溶于1000ml的蒸馏水中,混匀,测pH值应在7.2~7.4之间,若偏离此范围,请用0.1N的HCL或NaOH调整。

2、TBS:

2.1 Tris缓冲液配方:(0.5 M pH7.6)

Tris(三羟甲基氨基甲烷)60.57g

1N HCL 约420ml

双蒸水加至1000ml

Tris缓冲液配制方法:

先以少量双蒸水(300~500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH (1N)将pH调至7.6,最后双蒸水加至1000ml。此液为储备液,4℃冰箱中保存。

2.2 TBS配方:

Tris-HCI缓冲液

(0.5M pH7.6)

100ml

NaCI 8.5~9g

(0.15mol/L)

双蒸水加至1000ml

TBS配制方法:

先以少量双蒸水溶解NaCl,再加入Tris-HCl缓冲液,最后加双蒸水至1000ml,充分摇匀。

3、枸橼酸盐缓冲液(Citrate buffer):

3.1 储存液:

A. 0.1M枸橼酸溶液:称取21.01g枸橼酸(C

6H

8

O

7

·H

2

0)溶于1000ml蒸馏水中。

B. 0.1M枸橼酸钠溶液:称取29.41g枸橼酸钠(C

6H

5

Na

3

O

7

·2H

2

0)溶于1000ml

蒸馏水中。

3.2 工作液:

取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中,溶液pH值应为6.0±0.1

4、胰酶(Trypsin):

4.1 ZLI-9011胰蛋白酶消化液:

常用浓度为0.125%,即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合(1:3稀释),则可直接滴加使用。胰酶的最终浓度可以根据使用者的要求进行调整,浓度范围可以从0.05%(1:10稀释)至0.25%(1:1稀释)。4.2 ZLI-9010胰蛋白酶:

取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中,溶解即可。

5、胃酶(Pepsin):

4%胃蛋白酶,用0.1mol/L HCL配制。

6、DAB:

6.1 ZLI-9032/9033 DAB Kit:

使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双蒸水中,即可获得1ml DAB工作液,简单易用。

6.1 ZLI-9030 DAB:

6mgDAB溶于10mlTBS(0.05M pH7.6),再加入0.1ml浓度为3%的H

2O

2

,过滤掉

沉淀物,即可。

7、AEC:

4mg AEC溶于1ml二甲基甲酰胺中,加入14ml浓度为0.1M的醋酸缓冲液(pH5.2),

然后加入0.15ml 3%H

2O

2

,过滤掉沉淀物。

8、RIPA:

1×PBS,1%NP 40,0.5 sodium deoxycholate,0.1% SDS(此液体可长期保存)。以下抑制剂以储存液方式保存,临用前加入RIPA中。

l/ml)μ8.1 10mg/ml PMSF异丙醇溶液(用量为10

l/ml)μ8.2 Aprotinin(Sigma产品,用量为30

8.3 1000mM sodium orthovanadate冷冻液

l/ml)μ(用量为10

9、Blotto A:

常规使用1×PBS,5% milk,0.05% Tween 20。

10、Blotto B:

与Phosphotyrosine抗体共用,1×PBS,1% milk,0.05% Tween 20。部分实验中milk可完全去除,但可能引起背景增高。

.Tris–盐酸缓冲液(0.05M,25℃)

50毫升0.1M三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1N盐酸混匀后,加水

C

HOCH2 NH2

分子量=121.14;

0. 1M溶液为12.114克/升。Tris溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶

盖严。

53种常见缓冲液配制方法

53种常见缓冲液配制方法 乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7)取5 mol/L醋酸溶液15.0 ml,加乙醇60 ml和水20 ml,用10 mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000 ml,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0)取三羟甲基氨基甲烷12.14 g,加水800 ml,搅拌溶解,并稀释至1000 ml,用6 mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1)取氯化钙0.294 g,加0.2 mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40 ml使溶解,用1 mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100 ml,即得。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0)取三羟甲基氨基甲烷6.06 g,加盐酸赖氨酸3.65 g、氯化钠5.8 g、乙二胺四醋酸二钠0.37 g,再加水溶解使成1000 ml,调节pH值至9.0,即得。 乌洛托品缓冲液取乌洛托品75 g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2 ml,再用水稀释至250 ml,即得。 巴比妥缓冲液(pH7.4)取巴比妥钠4.42 g,加水使溶解并稀释至400 ml,用2 mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过,即得。 巴比妥缓冲液(pH8.6)取巴比妥5.52 g与巴比妥钠30.9 g,加水使溶解成2000 ml,即得。 巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8)取巴比妥钠5.05 g,加氯化钠3.7 g及水适量使溶解,另取明胶0.5 g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2 mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.8,再用水稀释至500 ml,即得。 甲酸钠缓冲液(pH3.3)取2 mol/L甲酸溶液25 ml,加酚酞指示液1滴,用2 mol/L氢氧化钠溶液中和,再加入2 mol/L甲酸溶液75 ml,用水稀释至200 ml,调节pH值至3.25~3.30,即得。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6)取邻苯二甲酸氢钾10 g,加水900 ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000 ml,混匀,即得。 枸橼酸盐缓冲液取枸橼酸4.2 g,加1 mol/L的20%乙醇制氢氧化钠溶液40 ml使溶解,再用20%乙醇稀释至100 ml,即得。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2)取2.1%枸橼酸水溶液,用50%氢氧化钠溶液调节pH值至6.2,即得。

各种缓冲液的配制方法-

各种缓冲液的配制方法 24 Na2HP6 2H2O,分子量=178.05 0.2mol∕L 溶液含35.61g∕L 柠檬酸.H2O,分子量=210.14 0.1mol∕L 溶液含21.01g∕L 柠檬酸.H2O,分子量=210.14 0.1mol∕L 溶液含21.01g∕L 柠檬酸钠.2HO,分子量=294.12; 0.1mol∕L溶液

(1)醋酸盐溶液的配制: 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.6) 取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml ,再加水稀释至250ml,即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.7) 取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60?80ml ,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml ,即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH3.8) 取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml ,即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH4.5) 取醋酸钠18g,加冰醋酸9.8ml,再加水稀释至1000ml,即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH4.6) 取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节PH值至4.6,再加水稀释至100ml, 即得。 醋酸—醋酸钠缓冲液(pH6.0) 取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml ,即得。 用醋酸和醋酸钠配制的缓冲溶液的PH=PKa+lg[C(NaAc)/C(HAC)K在此,C(HAC指醋酸的 浓度,C(NaAC指醋酸钠的浓度,Ka是醋酸的解离常数=1.8*10-5 (1.8乘10的-5次方),PKa=-IgKa=4.75,将PH=5.5代入,可得C(NaAC)/C(HAc)=5.6通常我们配制时会使C(HAC)=0.1mol∕L,或是C(HAC)=0.2mol/L 等。若是配制C(HAC)=0.1mol/L,则C(NaAC)=0.56mol/L 称量醋酸钠固体质量为82*0.56=46克量取冰醋酸体积为0.1*1000∕17.5=5.7mL。将称好的 醋酸钠和量好的冰醋酸加入1000mL水中溶解、搅拌均匀即可。当然若想配制其它的浓度, 也可照公式计算即可,通常缓冲溶液不能配的太稀,否则缓冲能力要下降,太浓的话又浪费试剂。

各种缓冲液的配制方法

1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L) 2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L) 24 Na2HPO4-2H2O分子量= 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量= 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。 ② 687·H2 柠檬酸钠Na3 C6H5O7·2H2O:分子量294.12 ,0.1 mol/L溶液为29.41克/毫升。 7.磷酸盐缓冲液

2 4·2H 2Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 358.22,0.2 mol/L 溶液为71.64克/升。 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 156.03,0.2 mol/L 溶液为31.21克/升。 24·2H 2KH 2PO 4分子量 = 136.09,1/15M 溶液为9.078克/升。 8.磷酸二氢钾–氢氧化钠缓冲液(0.05M )

10.Tris –盐酸缓冲液(0.05M ,25℃) C HOCH2 NH2 分子量=121.14; 0. 1M 溶液为12.114克/升。Tris 溶液可从空气中吸收二氧化碳,使用时注意将瓶盖严。 247·H 2硼酸H 2BO 3,分子量=61.84,0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。

247·10H 2硼酸H 2BO 3,分子量=61.84, 0.2M 溶液为12.37克/升。 硼砂 易失去结晶水,必须在带塞的瓶中保存。 12.甘氨酸–氢氧化钠缓冲液( 0.05M ) 13.硼砂-氢氧化钠缓冲液(0.05M 硼酸根) 2 47·10H 2 14.碳酸钠-碳酸氢钠缓冲液(0.1M ) 2+2+22·10H 2

PBS缓冲液的配制方法

PBS缓冲液配方 不管是免疫组化,还是细胞培养中,常用到PBS缓冲液,下面是常用配方,供大家参考。 用于细胞培养的PBS需含有氯化钾 称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L,灭菌即可。0.01M PBS缓冲液 称取NaCl 8g,KCl 0.2g,Na2HPO4?12H2O 3.63g, KH2PO4 0.24g,溶于900ml 双蒸水中,用盐酸调pH值至7.4,加水定容至1L,常温保存备用。 一般免疫组化用PBS,主要用来清洗,都只包含Na2HPO4?12H2O(磷酸氢二钠)和NaH2PO4?2H2O(磷酸二氢钠)两种组分,母液的配制: 0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水 0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水 各种浓度PB(pH=7.4)的配制: 先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L 的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可。 然后只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释即可,如: 0.1M PB(PH=7.4):取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可。 若需要 NaCL 的话,加入 NaCL 至0.9%(g/100ml)即可。

各种缓冲液的配制方法

各种缓冲液的配制方法

1.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L) X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升 pH X Y pH X Y 2.0 2.4 2.6 2.8 50 50 50 50 44.0 32.4 24.2 16.8 3.0 3.2 3.4 3.6 50 50 50 50 11.4 8.2 6.4 5.0 甘氨酸分子量 = 75.07,0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。 2.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L) X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl,再加水稀释到20毫升 pH(20℃)X Y pH(20℃)X Y 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 5 5 5 5 5 4.070 3.960 3.295 2.642 2.022 3.2 3.4 3.6 3.8 5 5 5 5 1.470 0.990 0.597 0.263 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升3.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 pH 0.2mol/L Na2HPO4 (毫升)0.1mol/L 柠檬酸 (毫升) pH 0.2mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.1mol/L 柠檬酸 (毫升) 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 19.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55 Na2HPO4分子量 = 14.98,0.2 mol/L溶液为28.40克/升。 Na2HPO4-2H2O分子量 = 178.05,0.2 mol/L溶液含35.01克/升。C4H2O7·H2O分子量 = 210.14,0.1 mol/L溶液为21.01克/升。

常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法公司内部编号:(GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-

常见缓冲溶液配制方法乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7):取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0):取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1):?取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0):?取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g,氯化钠5.8g,乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH 值至9.0。 乌洛托品缓冲液:取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液(pH7.4):取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用 2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.4,滤过。 巴比妥缓冲液(pH8.6):取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成 2000ml。 巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8):取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液(pH3.3):取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用 2mol/L氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH 值至3.25~3.30。

常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法 乙醇-醋酸铵缓冲液:取5mol/L醋酸溶液,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至,用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液:取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液:取氯化钙0.294g,加L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L 盐酸溶液调节pH值至,加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液:取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g,氯化钠5.8g,乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至。 乌洛托品缓冲液:取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液,再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液:取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH值至,滤过。 巴比妥缓冲液:取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml。 巴比妥-氯化钠缓冲液:取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。然后用L盐酸溶液调节pH值至,再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液:取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至~。 邻苯二甲酸盐缓冲液:取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至,加水稀释至1000ml,混匀。 枸橼酸盐缓冲液:取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20%乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20%乙醇稀释至100ml。 枸橼酸盐缓冲液:取%枸橼酸水溶液,用50%氢氧化钠溶液调节pH值至。 枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液:甲液:取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml,置冰箱内保存。乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml。取上述甲液与乙液混合,摇匀。 氨-氯化铵缓冲液:取氯化铵1.07g,加水使溶解成100ml,再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至。 氨-氯化铵缓冲液:取氯化铵5.4g,加水20ml溶解后,加浓氯溶液35ml,再加水稀释至100ml。 硼砂-氯化钙缓冲液:取硼砂0.572g与氯化钙2.94g,加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约调节pH值至,加水稀释至1000ml。 硼砂-碳酸钠缓冲液~:取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml;另取硼砂1.91g,加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml,混匀。 硼酸-氯化钾缓冲液:取硼酸3.09g,加L氯化钾溶液500ml使溶解,再加L氢氧化钠溶液210ml。 醋酸盐缓冲液:取醋酸铵25g,加水25ml溶解后,加7mol/L盐酸溶液38ml,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至(电位法指示),用水稀释至100ml,即得。 醋酸-锂盐缓冲液:取冰醋酸50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节pH值至,再加水稀释至1000ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液:取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液:取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液:取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液,再加水稀释至1000ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液:取醋酸钠18g,加冰醋酸,再加水稀释至1000ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液:取醋酸钠5.4g,加水50ml使溶解,用冰醋酸调节pH值至,再加水稀释至100ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液:取醋酸钠54.6g,加1mol/L醋酸溶液20ml溶解后,加水稀释至500ml。 醋酸-醋酸钾缓冲液:取醋酸钾14g,加冰醋酸,再加水稀释至1000ml。 醋酸-醋酸铵缓冲液:取醋酸铵7.7g,加水50ml溶解后,加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml。

各种缓冲液配制方法

不同缓冲液的缓冲范围 pH缓冲液 六十一秒的常用缓冲溶液的配制&缓冲溶液原理(2007年6月16日更新)(一)甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L) 甘氨酸分子量=75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 (二)邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L) 邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。(三)磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量=141.98;0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量=178.05;0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量=358.22;0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。

C6H8O7·H2O分子量=210.14;0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 ①使用时可以每升中加入1克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。 柠檬酸钠:Na3C6H5O7·2H2O分子量=294.12 ;0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。 (六)醋酸-醋酸钠缓冲液(0.2 mol/L) NaAc·3H2O分子量=136.09;0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。冰乙酸11.8 mL稀释至1 L(需标定)。 (七)磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.05 mol/L) X 毫升0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。

(八)磷酸盐缓冲液磷酸氢二钠-磷酸二氢钠缓冲液(0.2 mol/L) Na2HPO4·2H2O分子量=178.05;0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量=358.22;0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。 NaH2PO4·H2O分子量=138.01;0.2 mol/L溶液为27.6 g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量=156.03;0.2 mol/L溶液为31.21 g/L。 (九)巴比妥纳-盐酸缓冲液 巴比妥钠分子量=206.18;0.04 mol/L溶液为8.25 g/L。 (十)Tris-HCl缓冲液(0.05 mol/L) 50毫升0.1mol/L三羟甲基氨基甲烷(Tris)溶液与X毫升0.1mol/L盐酸混匀并稀释至100

常见缓冲液的配方

一.常用贮液与溶液 1mol/L亚精胺(Spermidine): 溶解2.55g亚精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L精胺(Spermine):溶解3.48g精胺于足量的水中,使终体积为10ml。分装成小份贮存于-20℃。 10mol/L乙酸胺(ammonium acetate):将77.1g乙酸胺溶解于水中,加水定容至1L后,用0.22um孔径的滤膜过滤除菌。 10mg/ml牛血清蛋白(BSA):加100mg的牛血清蛋白(组分V或分子生物学试剂级,无DNA酶)于9.5ml水中(为减少变性, 须将蛋白加入水中,而不是将水加入蛋白),盖好盖后,轻轻摇动,直至牛血清蛋白完全溶解为止。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。 1mol/L二硫苏糖醇(DTT):在二硫苏糖醇5g的原装瓶中加32.4ml水,分成小份贮存于-20℃。或转移100mg的二硫苏糖醇至微量离心管,加0.65ml的水配制成1mol/L二硫苏糖醇溶液。 8mol/L乙酸钾(potassium acetate):溶解78.5g乙酸钾于足量的水中,加水定容到100ml。 1mol/L氯化钾(KCl):溶解7.46g氯化钾于足量的水中,加水定容到100ml。3mol/L乙酸钠(sodium acetate):溶解40.8g的三水乙酸钠于约90ml水中,用冰乙酸调溶液的pH至5.2,再加水定容到100ml。 0.5mol/L EDTA:配制等摩尔的Na2EDTA和NaOH溶液(0.5mol/L),混合后形成EDTA的三钠盐。或称取186.1g的Na2EDTA?2H2O和20g的NaOH,

各种缓冲液的配制方法大全

磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量 = 14.98,0.2mol/L 溶液为28.40克/升。 Na2HPO4·2H2O 分子量 = 178.05,0.2mol/L 溶液含35.01克/升。 C4H2O7·H2O 分子量 = 210.14,0.1mol/L 溶液为21.01克/升 20%盐酸溶液如何配置: 取浓盐酸(质量百分比浓度为36.5%)一个体积(如100毫升),加入到96.5毫升水中就可以了。36.5%*100*1.17=20%*mm=213.5(克)所需水的质量为;213.5-117=96.5克,也就是96.5毫升水。 PH 0.2mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.1mol/L 柠檬酸 (毫升) pH 0.2mol/L Na2HPO4 (毫升) 0.1mol/L 柠檬酸 (毫升) 2.2 2.4 2.6 2.8 3.0 3.2 3.4 3.6 3.8 4.0 4.2 4.4 4.6 4.8 5.0 0.40 1.24 2.18 3.17 4.11 4.94 5.70 6.44 7.10 7.71 8.28 8.82 9.35 9.86 10.30 10.60 18.76 17.82 16.83 15.89 15.06 14.30 13.56 12.90 12.29 11.72 11.18 10.65 10.14 9.70 5.2 5.4 5.6 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 10.72 11.15 11.60 12.09 12.63 13.22 13.85 14.55 15.45 16.47 17.39 18.17 18.73 1 9.15 19.45 9.28 8.85 8.40 7.91 7.37 6.78 6.15 5.45 4.55 3.53 2.61 1.83 1.27 0.85 0.55

实验常用试剂,缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法 Ampicillin(氨卡青霉素)100mg/ml □组份浓度100mg/ml Ampicillin □配制量50mL □配置方法 1.称量5g Ampicillin置于50mL离心管中。 2.加入40mL灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。 3.用0.22μm滤膜过滤除菌。 4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。 Kan(卡那霉素)50mg/ml □组分浓度50mg/ml卡那霉素 □配制量50mL □配制方法 1.称取2.5g卡那霉素置于50ml塑料离心管中。 2.加入40ml灭菌水,充分混合溶解之后定容至50mL。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。 4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。 IPTG(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷) 24 mg/ml □组份浓度24mg/L IPTG □配制量50mL □配置方法 1.称量1.2gIPTG置于50mL离心管中。

2.加入40mL 灭菌水,充分混合溶解后,定容至50mL。 3.用0.22μm 滤膜过滤除菌。 4.小份分装(1mL/份)后,-20℃保存。 X- Gal 20mg/m □组份浓度20mg/L X-Gal □配制量50mL □配置方法 1.称取1gX-Gal置于50mL离心管中。 2.加入40mL DMF(二甲基甲酰胺),充分混合溶解, 定容至50mL。 3.小份分装(1mL/份)后,-20℃避光保存。 LB培养基 □组份浓度1%(W/V)Tryptone,0.5%(W/V)Yeast Extract,1%(W/V)NaCl □配制量1L □配置方法 1.称量下列试剂,置于1L烧杯中 Tryptone(胰化蛋白胨)10g Yeast Extract(酵母提取物)5g NaCl(氯化钠)10g 2.加入约800mL 的去离子水,充分搅拌溶解。 3.滴加5N NaOH(约0.2mL),调节pH值至7.2-7.3。

实验常用试剂、缓冲液的配制方法

实验常用试剂、缓冲液的配制方法 1、1M Tris-HCl□组份浓度1 M Tris-HCl (pH7.4,7.6,8.0)□配制量1L □配置方法1. 称量121.1gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 pH值浓HCl 7.4 约70mL 7.6 约60mL 8.0 约42mL 4. 将溶解定容至1L。 5. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH 值随温度的变化差很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 2、1.5 M Tris-HCl□组份浓度1.5 M Tris-HCl (pH8.8)□配制量1L □配置方法1.称取181.7gTris置于1L烧杯中。 2. 加入约800mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调pH值至8.8。 4. 将溶液定容至1L。 5. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1℃,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 3、10×TE Buffer□组份浓度100 mM Tris-HCl,10 mM EDTA (pH 7.4,7.6,8.0)□配制量1L □配置方法1. 量取下列溶液,置于1L烧杯中。 1 M Tris-HCl Buffer(pH7.4,7.6,8.0)100mL 500 mM EDTA(pH8.0)20mL 2. 向烧杯中加入约800mL的去离子水,均匀混合。 3. 将溶液定至1L后,高温高压灭菌。 4. 室温保存。 4、3 M 醋酸钠□组份浓度3 M 醋酸钠 (pH5.2)□配制量100mL □配置方法1. 称取40.8gNaOAc?3H2O置于100~200mL烧杯中,加入约40mL的去离子水搅拌溶解。 2. 加入冰乙酸调节pH值至5.2。 3. 加入去离子水将溶液定容至100mL。 4. 高温高压灭菌后,室温保存。 5、PBS Buffer□组份浓度137 mM NaCl,2.7mM KCl,10 mM Na2HPO4,2 mM KH2PO4 □配制量1L □配置方法1. 称量下列试剂,置于1L烧杯中。 NaCl 8 g KCl 0.2g Na2HPO4 1.42 g KH2PO4 0.27g 2. 向烧杯中加入约800 mL的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 滴加HCl将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1L。 4. 高温高压灭菌后,室温保存。 注意:上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 6、10 M醋酸铵□组份浓度10 M醋酸铵 □配制量100mL □配置方法1. 称量77.1g醋酸铵置于100~200 mL烧杯中,加入约30 mL的去离子水搅拌溶解。 2.加去离子水将溶液定容至100mL。 3.使用0.22μm滤膜过滤除菌。 4.密封瓶口于室温保存。 注意:醋酸铵受热易分解,所以不能高温高压灭菌。 7、Tris- HCl平衡苯酚□配置方法 1. 使用原料:大多数市售液化苯酚是清亮无色的,无需重蒸馏便可用于分子生物学实验。但有些液化苯酚呈粉红色或黄色,应避免使用。同时也应避免使用结晶苯酚,结晶苯酚必须在160℃对其进行重蒸馏除去诸如醌等氧化产物,这些氧化产物可引起磷酸二酯键的断裂或导致RNA和DNA的交联等。因此,苯酚的质量对DNA、RNA的提取极为重要,我们推荐使用高质量的苯酚进行分子生物学实验。 2. 操作注意:苯酚腐蚀性极强,并可引起严重灼伤,操作时应戴手套及防护镜等。所有操作均应在通风橱中进行,与苯酚接触过的皮肤部位应用大量水清洗,并用肥皂和水洗涤,忌用乙醇。 3. 苯酚平衡:因为在酸性pH条件下DNA分配于有机相,因此使用苯酚前必须对苯酚进行平衡使其pH值达到7.8以上,苯酚平衡操作方法如下: ①液化苯酚应贮存于-20℃,此时的苯酚呈现结晶状态。从冰柜中取出的苯酚首先在室温下放置使其达到室温,然后在68℃水浴中使苯酚充分溶解。 ②加入羟基喹啉(8-Quinolinol)至终浓度0.1%。该化合物是一种还原剂、RNA酶的不完全抑制剂及金属离子的弱螯合剂,同时因其呈黄色。有助于方便识别有机相。 ③加入等体积的1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 ④重复操作步骤③。 ⑤加入等体积的0.1M Tris-HCl(pH8.0),使用磁力搅拌器搅拌15分钟,静置使其充分分层后,除去上层水相。 ⑥重复操作步骤⑤,稍微残留部分上层水相。 ⑦使用pH试纸确认有机相的pH值大于7.8。 ⑧将苯酚置于棕色玻璃瓶中4℃避光保存。 8、苯酚/氯仿/异戊醇□配置方法 1. 说明:从核酸样品中除去蛋白质时常常使用苯/酚/氯仿/异戊醇(25:24:1)。氯仿可使蛋白(25 :24 :1)质变性并有助于液相与有机相的分离,而异戊醇则有助于消除抽提过程中出现的气泡。 2. 配置方法:将Tris-HCl平衡苯酚与等体积的氯仿/异戊醇(24:1)均匀混合后,移入棕色玻璃瓶中4℃保存。

生物化学实验常用缓冲液的配制方法

生物化学实验常用缓冲液的配制方法 1、0.2mol/L 磷酸缓冲液 *组份浓度0.2mol/L (pH 6.0)*配制量1L *配置方法 1. 称取磷酸氢二钠.12水8.82 g。 2. 称取磷酸二氢钠.2水27.34g。 3. 用去离子水溶解并定容至1L。室温保存。 注意:此为母液,使用时稀释40倍使用。 2、洗脱液*组份浓度0.15mol/L (含0.15mol/L 氯化钠的 0.005mol/L pH 6.0的磷酸缓冲液)*配制量10L *配置方法 1.称取氯化钠87.66g。 2.用0.2mol/L pH6.0的磷酸缓冲液250mL溶解。 3.用去离子水稀释至10L。室温保存。 3、0.3mol/L 磷酸缓冲液*组份浓度0.3mol/L (pH7.8)*配制量0.5L *配置方法 1.准确称取磷酸氢二钠.12水49.150g。 2.磷酸二氢钠.2水2.000g。 3.用去离子水溶解并定容至0.5L。室温保存。 注意:此为母液,使用时稀释10 倍使用。 4、0.2mol/L 乙酸缓冲液*组份浓度0.2mol/L (pH4.6)*配制量2L *配置方法 1.准确称取乙酸钠.3水54.44g。 2.加入23mL冰乙酸,溶解。 3.用去离子水溶解并定容至2L。 4℃保存。 5、0.2mol/L 磷酸-柠檬酸缓冲液(pH 2. 6、4.6、6.6)*组份浓度0.2mol/L *配制量各1L *配置方法 1.母液A(0.2mol/L 的Na2HPO4溶液):称取Na2HPO4.12 水143.256g,用去离子水定容至2L。 2.母液B(0.1mol/L 的柠檬酸溶液):称取柠檬酸.1水42.028g 用去离子水溶解定容至2L。 3. pH2.6、 4.6、6.6的三种缓冲液如下表配制: pH值A(mL)B(mL) 2.6 109.0 891.0 4.6 467.5 532.5 6.6 72 7.5 272.5 4.按上表混匀后,4℃保存。 6、20×SSC 缓冲液*配制量1L(pH7.0) *配置方法 1.准确称取175.2g氯化钠。 2.准确称取88.2g柠檬酸钠.2水。 3.溶解于800mL去离子水中。 4.加入数滴10mol/L 氢氧化钠溶液调节pH值至7.0。

缓冲液的配制方法

核酸电泳相关试剂、缓冲液的配制方法 50×TAE Buffer (pH8.5) 组份浓度 2 M Tris-醋酸,100 mM EDTA 配制量 1 L 配制方法 3.加入57.1 ml的乙酸,充分搅拌。 4.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。 10×TBE Buffer (pH8.3) 组份浓度 890 mM Tris-硼酸,20 mM EDTA 配制量 1 L 配制方法 3.加去离子水将溶液定容至l L后,室温保存。 10×MOPS(3-吗啉基丙磺酸)Buffer 组份浓度 200 rnM MOPS,20 mM NaOAc,10 mM EDTA 配制量 1 L 配制方法 1.称41.8 g MOPS,置于1 L烧杯中。 2.加约700 ml DEPC处理水,搅拌溶解。 3.使用2 N NaOH调节pH值至7.0。 6.用0.45 m滤膜过滤除去杂质。 7.室温避光保存。 注:溶液见光或高温灭菌后会变黄。变黄时也可使用,但变黑时不要使用。 溴乙锭 (10 mg/ml) 组份浓度 10 mg/ml溴乙锭 配制量 100 ml 配制方法 1.称量1 g溴乙锭,加入到100 ml容器中。 2.加入去离子水100 ml,充分搅拌数h完全溶解溴乙锭。 3.将溶液转移至棕色瓶中,室温避光保存。 4.溴乙锭的工作浓度为0.5 g/ml。

注意:溴乙锭是一种致癌物质,必须小心操作。 Agarose凝胶 配制方法 1.配制适量的电泳及制胶用的缓冲液(通常是0.5×TBE或1×TAE)。 2.根椐制胶量及凝胶浓度,准确称量琼脂糖粉,加入适当的锥形瓶中。 3.加入一定量的电泳缓冲液(总液体量不宜超过锥形瓶的50%容量)。 注:用于电泳的缓冲液和用于制胶的缓冲液必须统一。 4.在锥形瓶的瓶封上保鲜膜,并在膜上扎些小孔,然后在微波炉中 加热熔化琼脂糖。加热过程中,当溶液沸腾后,请戴上防热手套。 小心摇动锥形瓶。使琼脂糖充分均匀熔化。此操作重复数次,直 至琼脂糖完全熔化。必须注意,在微波炉中加热时间不宜过长, 每次当溶液起泡沸腾时停止加热,否则会引起溶液过热暴沸,造 成琼脂糖凝胶浓度不准,也会损坏微波炉。熔化琼脂糖时,必须 保证琼脂糖充分完全熔化,否则,会造成电泳图像模糊不清。 5.使溶液冷却至60℃左右,如需要可在此时加入溴乙锭溶液(终浓 度0.5 μg/ml)。并充分混匀。 注:溴乙锭是一种致癌物质。使用含有溴乙锭的溶液时,请戴好手套。 6.将琼脂糖溶液倒入制胶模中,然后在适当位置处插上梳子。凝胶 厚度一般在3~5 min之间。 7.在室温下使胶凝固(大约30 min~1 h),然后放置于电泳槽中进行电泳。 注:凝胶不立即使用时,请用保鲜膜将凝胶包好后在4℃下保存, 一般可保存2~5天。 琼脂糖凝胶浓度与线形DNA的最佳分辨范围 6× Loading Buffer(DNA电泳用) 组份浓度

常见缓冲液配制

常用缓冲溶液的配制 (一)甘氨酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L) X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCl,再加水稀释至200毫升。 甘氨酸分子量=75.07。 0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01 g/L。 (二)邻苯二甲酸-盐酸缓冲液(0.05 mol/L) X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾+Y毫升0.2 mol/L HCl,再加水稀释至20毫升。

邻苯二甲酸氢钾分子量=204.23。0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾溶液含40.85 g/L。 (三)磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液 Na2HPO4分子量=141.98;0.2 mol/L溶液为28.40 g/L。 Na2HPO4·2H2O分子量=178.05;0.2 mol/L溶液为35.61 g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量=358.22;0.2 mol/L溶液为71.64 g/L。

C6H8O7·H2O分子量=210.14;0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 (四)柠檬酸-氢氧化钠-盐酸缓冲液 ① 使用时可以每升中加入1克酚,若最后pH值有变化,再用少量50%氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。 (五)柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L)

柠檬酸:C6H8O7·H2O分子量=210.14 ;0.1 mol/L溶液为21.01 g/L。 柠檬酸钠:Na3C6H5O7·2H2O分子量=294.12 ;0.1 mol/L溶液为29.41 g/L。 (六)醋酸-醋酸钠缓冲液(0.2 mol/L) NaAc·3H2O分子量=136.09;0.2 mol/L溶液为27.22 g/L。冰乙酸11.8 mL 稀释至1 L(需标定)。 (七)磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲液(0.05 mol/L) X 毫升 0.2 mol/L KH2PO4+Y毫升0.2 mol/L NaOH 加水稀释至20毫升。

PH缓冲溶液配制方法精编版

P H缓冲溶液配制方法公司内部编号:(GOOD-TMMT-MMUT-UUPTY-UUYY-DTTI-

P H 3-10缓冲溶液的配制方 法 1.磷酸氢二钠–柠檬酸缓冲液 Na 2HPO 4分子量 = 14.98,0.2 mol/L 溶液为28.40克/升。 Na 2HPO 4·2H 2O 分子量 = 178.05,0.2 mol/L 溶液含35.01克/升。 C 4H 2O 7·H 2O 分子量 = 210.14,0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。 2.柠檬酸–氢氧化钠-盐酸缓冲液

①使用时可以每升中加入1克克酚,若最后pH值有变化,再用少量 50% 氢氧化钠溶液或浓盐酸调节,冰箱保存。 3.甘氨酸–盐酸缓冲液(0.05mol/L) X毫升0.2 mol/L甘氨酸+Y毫升0.2 mol/L HCI,再加水稀释至200毫升 甘氨酸分子量 = 75.07,0.2 mol/L甘氨酸溶液含15.01克/升。4.邻苯二甲酸–盐酸缓冲液(0.05 mol/L) X毫升0.2 mol/L邻苯二甲酸氢钾 + 0.2 mol/L HCl,再加水稀释到20毫升 邻苯二甲酸氢钾分子量 = 204.23,0.2 mol/L邻苯二甲酸氢溶液含40.85克/升 5.柠檬酸–柠檬酸钠缓冲液(0.1 mol/L)

柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O :分子量210.14,0.1 mol/L 溶液为21.01克/升。 柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O :分子量294.12,0.1 mol/L 溶液为29.41克/升。 柠檬酸C 6H 8O 7·H 2O: 2.1g 柠檬酸钠Na 3 C 6H 5O 7·2H 2O: 2.94g H2O: 100 ml 6.乙酸–乙酸钠缓冲液(0.2 mol/L ) Na 2Ac·3H 2O 分子量 = 136.09,0.2 mol/L 溶液为27.22克/升。 7.磷酸盐缓冲液 (1)磷酸氢二钠–磷酸二氢钠缓冲液(0.2)

(最全)常见缓冲溶液配制方法

常见缓冲溶液配制方法 乙醇-醋酸铵缓冲液(pH3.7):取5mol/L醋酸溶液15.0ml,加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至3.7,用水稀释至1000ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.0):取三羟甲基氨基甲烷12.14g,加水800ml,搅拌溶解,并稀释至1000ml,用6mol/L盐酸溶液调节pH值至8.0。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8.1):取氯化钙0.294g,加0.2mol/L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解,用1mol/L盐酸溶液调节pH值至8.1,加水稀释至100ml。 三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9.0):取三羟甲基氨基甲烷6.06g,加盐酸赖氨酸3.65g,氯化钠5.8g,乙二胺四醋酸二钠0.37g,再加水溶解使成1000ml,调节pH值至9.0。 乌洛托品缓冲液:取乌洛托品75g,加水溶解后,加浓氨溶液4.2ml,再用水稀释至250ml。 巴比妥缓冲液(pH7.4):取巴比妥钠4.42g,加水使溶解并稀释至400ml,用2mol/L盐酸溶液调节pH 值至7.4,滤过。 巴比妥缓冲液(pH8.6):取巴比妥5.52g与巴比妥钠30.9g,加水使溶解成2000ml。 巴比妥-氯化钠缓冲液(pH7.8):取巴比妥钠5.05g,加氯化钠3.7g及水适量使溶解,另取明胶0.5g 加水适量,加热溶解后并入上述溶液中。然后用0.2mol/L盐酸溶液调节pH值至7.8,再用水稀释至500ml。 甲酸钠缓冲液(pH3.3):取2mol/L甲酸溶液25ml,加酚酞指示液1滴,用2mol/L氢氧化钠溶液中和,再加入2mol/L甲酸溶液75ml,用水稀释至200ml,调节pH值至3.25~3.30。 邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5.6):取邻苯二甲酸氢钾10g,加水900ml,搅拌使溶解,用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至5.6,加水稀释至1000ml,混匀。 枸橼酸盐缓冲液:取枸橼酸4.2g,加1mol/L的20%乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解,再用20%乙醇稀释至100ml。 枸橼酸盐缓冲液(pH6.2):取2.1%枸橼酸水溶液,用50%氢氧化钠溶液调节pH值至6.2。 枸橼酸-磷酸氢二钠缓冲液(pH4.0):甲液:取枸橼酸21g或无水枸橼酸19.2g,加水使溶解成1000ml,置冰箱内保存。乙液:取磷酸氢二钠71.63g,加水使溶解成1000ml。取上述甲液61.45ml与乙液38.55ml 混合,摇匀。 氨-氯化铵缓冲液(pH8.0):取氯化铵1.07g,加水使溶解成100ml,再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至8.0。 氨-氯化铵缓冲液(pH10.0):取氯化铵5.4g,加水20ml溶解后,加浓氯溶液35ml,再加水稀释至100ml。 硼砂-氯化钙缓冲液(pH8.0):取硼砂0.572g与氯化钙2.94g,加水约800ml溶解后,用1mol/L盐酸溶液约2.5ml调节pH值至8.0,加水稀释至1000ml。 硼砂-碳酸钠缓冲液(pH10.8~11.2):取无水碳酸钠5.30g,加水使溶解成1000ml;另取硼砂1.91g,加水使溶解成100ml。临用前取碳酸钠溶液973ml与硼砂溶液27ml,混匀。 硼酸-氯化钾缓冲液(pH9.0):取硼酸3.09g,加0.1mol/L氯化钾溶液500ml使溶解,再加0.1mol/L 氢氧化钠溶液210ml。 醋酸盐缓冲液(pH3.5):取醋酸铵25g,加水25ml溶解后,加7mol/L盐酸溶液38ml,用2mol/L盐酸溶液或5mol/L氨溶液准确调节pH值至3.5(电位法指示),用水稀释至100ml,即得。 醋酸-锂盐缓冲液(pH3.0):取冰醋酸50ml,加水800ml混合后,用氢氧化锂调节pH值至3.0,再加水稀释至1000ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.6):取醋酸钠5.1g,加冰醋酸20ml,再加水稀释至250ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.7):取无水醋酸钠20g,加水300ml溶解后,加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60~80ml,至溶液从蓝色转变为纯绿色,再加水稀释至1000ml。 醋酸-醋酸钠缓冲液(pH3.8):取2mol/L醋酸钠溶液13ml与2mol/L醋酸溶液87ml,加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液0.5ml,再加水稀释至1000ml。

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