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分子实验学习总结——郁娟娟

分子实验学习总结——郁娟娟
分子实验学习总结——郁娟娟

DNAstar:序列拼接

MEGA:分析碱基组成

CLUSTAL:序列比对

PAUP:跑树

DABE:饱和性分析

总思路:序列拼接-比对-

四、下载序列的方法

打开.Fasta格式的序列-File export-sequance alignment-保存

在NCBI上找到相应的序列方法:

Search Nucleotide for 文章的genibank序列号-reports-复制序列到txt文件中,删除没用的东西,只留下序列和学名。

保存成txt文件后,打开Editseq-将,txt序列复制到其中-save保存为seq格式

五、将拼接序列翻译成蛋白质方法

打开拼接的序列-全选中-Goodies-translate DNA

2、如何计算碱基含量比值、

答:MEGA-Nucleotide Composition

六、DAMBE序列饱和性分析

序列的饱和性分析在DAMBE程序中,以转换、颠换数为纵轴,以TN93模型(Tamura and Nei, 1993)校正的距离为横轴做散点图。如果这些点随序列间分歧增大呈线性分布就说明序列间替换没有达到饱和,序列可以用于后续的系统发育分析。DAMBE还长用在单倍型的归纳、基因频率和碱基组成分析、遗传距离计算、序列排序、

5.2.2碱基替换饱和效应的检验

当核苷酸序列分歧较小时,序列之间被观察到的核苷酸差异数接近实际替换数。如果序列分歧较大,DNA序列的变异可能会受到饱和效应的影响,这时观察到的碱基差异可能包含了部分进化杂音。一般说来,碱基转换发生的频率高于颠换,但是随物种分歧程度的增加,转换/颠换的比率接近或小于1,说明转换可能已经趋于饱和并可能成为进化杂音,所以转换和颠换发生的频率与序列间分歧度的关系就可以反映出碱基替换是否受饱和效应的影响。在着手构建分子系统树前,为了排除这种进化杂音获取正确的进化信息,必须对目的片段的碱基替换是否受到饱和效应的影响进行检验。

用 DAMBE(Xia,2000)分别对四个mtDNA片段的碱基替换模式进行检测,以此估计所研究mtDNA片段的碱基替换是否受到饱和效应的影响。

打开DAMBE-FILE-Open standard sequence file-类型unknown-打开proteincoding nuc.seq-invMtdna-trains-table –go-graphics-trainsition and tranversion versis advance –tn93-g0-graphstyle-curve only-保存.bmp

问题

1、如何计算密码子的不同位上碱基变化,转换颠换比值

2、如何进行序列的饱和性分析

序列的饱和性分析在DAMBE程序中,以转换、颠换数为纵轴,以TN93模型(Tamura & Nei, 1993)校正的距离为横轴做散点图。如果这些点随序列间分歧增大呈线性分布就说明序列间替换没有达到饱和,序列可以用于后续的系统发育分析。

3、如何看用Editseq检验拼接后的序列是否能正确翻译为蛋白质

4、如何计算遗传距离(DAMBE)

一、DNAstar:序列拼接

在序列的拼接时,修改红色和小写字母的碱基

具体步骤:

1、ABI文件包括图形和序列、SEQ文件只有序列没有图。

2、DNAstar—seqman—File—NEW,把序列都放近去,有两

个正向,俩个反向的序列—Time ends—LOW—SEAN ALL-ASSEMBLE –出现contig 打开-双击contig_@_核对-contig-save consenus-single file -保存位置-sequce-add-选择保存到的位置-点序列名字-add-双击-拼接完关闭。

3、原始序列和拼接的序列各保存在一个文件夹内。

4、EDIT-GOODIES-TRALS 翻译成蛋白质。‘

5、从ncbi上下载相关的序列和测得的序列保存在一个文件

夹内,把前面的内容都删除,保留种名。加〉符号-保存

二、序列的比对

6、先切齐序列:用Seqman-sequence-add-skip-把所有的序列

加进去进行删除,使序列整齐。-contig双击,将序列切齐,再复制到一个新建的文本文档。

7、切齐后保存方式:contig-export sequences-multiple files=set

location-file-保存切齐

8、当在切齐的序列中发现反向序列要改正:用editseq打开序

列-select all –goodies-reserse complement-全选粘贴到文本文档中,目的是比对。

三、构建NJ树方法(MEGA)

1、将TXT格式保存为nexus和clustal格式(生成aln\dnd\nxs)

CLUSTAR-进行比对-FILE-LOAD SEQUENCE-打开新建的文本文档txt-加入进去后-aligment-do complete Alignment-File-Save sequence as –format-custal-ok-File- Save sequence as –format-NEXUS最后保存为nexus和clustal格式,NEXUS是PAUP格式-关闭clustal.

2、点击MEGA-File-open data-.aln文件-打开-ok-点击向下的绿色图标-ok-ok-删除最后没用的东西-保存-切齐序列,meg-

3、点击MEGA-File-open data-切齐序列,meg-ok-yes-inverttebrate Mitochondrial-ok-

4、phylogency-construct phylogency - NJ树-none改成bootstrap-k 2p-compute-保存(image-EMF)

5、使用Mega 2.0分析序列间的p-distance, 即两两序列间的核酸差异比例,分析序列变异情况

方法1:

Distance-compute pairwise-distance only改为std err-compute

方法2:

pattern-compute composition distance

三、构建MP树方法

1、MrBays,目的是转化为.nex文件步骤为:

用bioedit将.txt文件比对转换成.nex文件格式

方法:打开BioEdit,将.txt文件打开-Accessory application-clustal multiple alignment-File-export-sequence Aligment-选paup/nex命令.nex-保存-把.nex begin 前面的都删除。

File-open-切齐序列.txt-accessory appliacation-clustal multiple aligment-file-expore-sequence aligment-选paup/nenu命名.nex-保存

2、在.nex中加命令模板

;

end;

begin paup;

log file=coimp;

set maxtrees=1000;

set criterion=parsimony;

hsearch addseq=random nreps=1000;

showtrees;

describetrees 1/plot=phylogram brlens=yes;

savetrees file=coi(mp).tre root=yes brlens=yes;

contree all/file=coi.tre;

pscore all/CI=yes RI=yes RC=yes;

bootstrap nreps=1000 keepall=yes search=heuristic/addseq=random nreps=100;

savetrees file=coi(mpb).tre root=yes;

END;

2、打开paup-打开1.nex-open –开始跑树

3、用treeview 打开.tree树。

MrBays建树

1、用bioedit将.txt文件比对转换成.nex文件格式

方法:打开BioEdit,将.txt文件打开-Accessory application-clustal multiple alignment-File-export-sequence Aligment-选paup/nex命令.nex-保存-把.nex begin 前面的都删除。

File-open-切齐序列.txt-accessory appliacation-clustal multiple aligment-file-expore-sequence aligment-选paup/nenu命名.nex-保存

2、用paup运行.nex文件

3、接着继续用paup打开modeltest3.7 文件夹中的model

paupblock命令-运行结束后,在modeltest 的modelfolder中生成一文件名为”model.scores”文件。

4、运行modeltest批处理文件,生成一文件名为”mt.txt”文件,

则为最适合的模型文件

5、将最适模型文件中的参数(hLRTs)拷贝到.nex文件后,加入

贝叶斯运行命令,并改正.ne格式等。删除前后没用的,改正外群名字等。只能用一个外群。

begin mrbayes;

log start filename=coibayes.log;

outgroup Cinara;

Prset statefreqpr=dirichlet(0.3321,0.1058,0.1271,0.435);

Lset nst=6 rates=gamma;

mcmc ngen=1000000 printfreq=100 nchains=4 savebrlens=yes startingtree=random;

end;

6、将加好命令的.nex文件拷贝到MrBayes文件夹所在路径内,运

行人头的MrBayes , 输入execute. 文件名.net,回车。

7、输入sump burnin=1000回车

8、输入sumt burnin=1000回车

9、运算完毕后点击close 弹出一对话框,输入命令语句“ save

tree file=文件名.tre;”回车。

菜单栏Tree中的Show internal edge labels 即可显示各结点的bootstrap值。

9、生成的.con,用treeview打开

注意:贝叶斯树只能用一个外群。建设一个新文件夹,将.scores、mt.txt、txt、nex文件都放到一个文件夹内。

ML建树

方法同MrBays相似。预测模型利用贝叶斯得到的模型。

把ML命令模板拷贝到.nex,把log file改成自己的名(=coiML),外群也改(Daktulosphaira_vitifoliae Cinara_edulis C_arizonica);-把最适模型lset base---likhood下面savetree file=coi savetrees file=coin(mb)

Lset Base=(0.3365 0.0976 0.1280) Nst=6 Rmat=(26794342.0000

8028280.5000 10365153.0000 1.4084 255543472.0000) Rates=equal Pinvar=0.7355;–生成的.nex.con文件-treeview打开。

注意:外群要写成Cinara_edulis形式,可以有多个外群。打开方式和mp树一致。

戴传银笔记

PAUP NJ tree

begin paup;

outgroup outgroupname;

setcriterion=distance;

bootstrap search=nj nreps=1000 keepall;

savetrees file=nj.tre;

end;

PAUP MP TREE

begin paup;

outgroup outgroupname;

setcriterion=parsimony;

hsearch addseq=simple(random) bootstrap nreps=1000;

describetrees 1/plot=phylogram brlens=yes;

savetrees from=1 to=1000;

end;

PAUP ML TREE

begin paup;

outgroup outgroupname;

setcriterion=likelihood;

gettrees file=xxx.tre;(xxx modeltest文件保存的树的名称)

hsearch addseq=asis bootstrap nreps=1000;

savetrees file=ml.tre;

end;

MEGA3.1分析其核酸组成

1、打开MEGA,点击“File”中的“Open Data”打开“COI.aln”文件,点击绿色箭头-“Convert to Mega format”快捷键,出一把COI.aln转换成Mega格式的对话框,点击OK,即转换成COI 的Mega file,保存。

2、用Mega 打开该文件。选Data Type。Protein-coding nucleotide sequence data?Yes。Select genetic Code。程序自行计算。

3、点击TA图标,出现Sequence Data Explorer

C:Conserved sites 291/660,分母613是总位点数

V:Variable sites 352/660

P: Parsimony-informative sites 26/660

N: Nonparsimony-informative sites 352-26=326。

4、Mega-File-open date-运算-sequence Data

Explorer-write data to file-title-写名字.nex

注意:序列一定要正确,不能是反向的!!!!!

5、打开paup-打开1.nex-open –开始跑树

6、Bootstrap 值检验及树的保存

输入命令“bootstrap nreps=1000 keepall=yes search=heuristic/addseq=random nreps=100;”点击回车键,程序开始运算。运算完毕后点击close 弹出一对话框,输入命令语句“ save tree file=文件名.tre;”回车。

菜单栏Tree中的Show internal edge labels 即可显示各结点的bootstrap值。

7、用treeview 打开.tree树。

阿征笔记

begin paup;

set autoclose=yes notifybeep=yes;

log file=log.txt;

outgroup A00;

set root=outgroup outroot=monophyl;

set criterion=parsimony;

hsearch addseq=random nreps=500 nchuck=5 chuckscore=1;

savetrees format=nexus brlens=yes append=yes file=mp.tre root=yes;

contree all/file=mp(contree).tre strict=no majrule=yes percent=50 le50=yes;

bootstrap nreps=1000 conlevel=50 keepall=no search=heuristic/addseq=random nreps=100;

savetrees file=mp(bootstrap).tre root=yes brlens=yes savebootp=both from=1 to=1000;

end;

征征 20:31:57

我每次都是先写到contree那一步,然后在里面敲命令,后两条分别

征征 20:32:13

begin paup;

set autoclose=yes notifybeep=yes;

log file=log.txt;

outgroup A00;

set root=outgroup outroot=monophyl;

set criterion=parsimony;

hsearch addseq=random nreps=500 nchuck=5 chuckscore=1;

savetrees format=nexus brlens=yes append=yes file=mp.tre root=yes;

contree all/file=mp(contree).tre strict=no majrule=yes percent=50 le50=yes;

end;

征征 20:32:25

然后bootstrap nreps=1000 conlevel=50 keepall=no search=heuristic/addseq=random nreps=100;

征征 20:32:36

跑完后savetrees file=mp(bootstrap).tre root=yes brlens=yes savebootp=both from=1 to=1000;

征征 20:32:54

保存一个有bootstrap的树

征征 20:33:35

再给你个阿荣给我的

征征 20:33:42

set autoclose=yes criterion=parsimony notifybeep=yes; log file=...;

Hsearch addseq=random nreps=100 start=stepwise savereps=yes randomize=addseq rstatus=yes hold=1 swap=tbr multrees=yes;

savetrees format=nexus brlens=yes append=yes file=...; contree all/strict=no majrule=yes percent=50 le50=yes; bootstrap nreps=1000 conlevel=50 keepall=yes search=heuristic/addseq=random nreps=10;

征征 20:34:16

对了,我的outroot=monophyl;你们分子不是monophyl PAUP软件使用简要说明

1.数据输入格式

将需要分析的一组DNA数据经Clustal软件比对分析后,将其比对结果的*.a ln文件用Mega软件打开并转换为Mega格式(File-〉Convert To Mega Format),转换结果会以*.meg文件存在与*.aln同一目录下,再用DNAsp软件将*.meg文件转换为PAUP格式(File-〉Save/Export Date As,以NEXUS File Format保存)即可。

2.MP法分析

先启动PAUP软件,选择相应数据文件,然后在命令行内依次键入

outgroup_外群名回车

Bootstrap_nreps=1000_keepall 回车

Describetree 回车

Savetrees_from=1 to=1000 回车

3.NJ法分析

先启动PAUP软件,选择相应数据文件,然后在命令行内依次键入outgroup_外群名回车

Set_criterion=distance 回车

Bootstrap_search=nj_nreps=1000_keepall 回车

contree 回车

Savetrees_from=1_to=1000 回车

4.ML法分析

先启动PAUP软件,选择相应数据文件,然后在命令行内依次键入outgroup_外群名回车

Set_criterion=likelihood 回车

Bootstrap_nreps=100_keepall 回车

contree 回车

Savetrees_from=1_to=100 回车

注:外群名指的是分析数据中外群的代号;

下划线“_”表示键入一个空格;

结果以*.tre格式存在分析数据的同一文件夹内,用Treeview软件打开。

郁娟娟总结

一Seqman 用来Assemble ,改错后保存成Seq. Seqman 将所有的序列打开,将反方向的用Editseq转换过来。

二Editseq 打开所有的Seq序列——export as one ----fas格式

三Mega 打开fas格式文件——Alignment ---alignment by clustle

分子生物学实习总结

分子生物学实习总结 三天的分子生物学实习,我能认真听老师的讲解和很好的按照老师的安排完成实验。期间,接触和学习到了很多有关分子生物学实验的方法、仪器的使用、技术,而且对分子生物学实验有一个大致的了解,学习到很多以前没有接触过的知识。 这几天来做的不足的地方有: 1.预习不够充分。只是浏览了实验报告上的原理、操作等内容,并没有深入了解每一个步骤的操作会对实验有什么的作用和影响。实验失败了,不能自主找到原因。 2.实验操作过程不够细心。实验要求十分细心,严谨和专注。实验中很多细小的地方还是没有很好的注意到。 3.遇到不懂的没有及时发问。实验就是一个让我们实操的过程,一边操作一边巩固书本上的知识。过程中,遇到不明白的地方应该及时问别人活着自己翻阅资料,力求把实验弄透彻。 但是我还是有很多收获的: 1.对分子生物学实验有了了解。例如实验的基本的流程和操作,常用的方法等基础知识已经有了一定了解,对以后的实验会有一定的帮助。 2.最基本的移液枪、离心机、涡旋器等的使用还有实验中的PCR仪、电泳等有一定的认。 3.学会了严谨和细心。实验所用的材料都是比较昂贵的,而且实验只要一步错了,就得重做。所以需要非常严谨。不仅仅是分子生物学实验,其他实验也要求,所以培养这个有点对以后的实验非常有好处。 4.学会了坚持。很多次因为实验做的时间很长,大家都会很累,但是,还是要坚持,一点点累都受不了是不能把实验做好的。开始慢慢了解到做科研的人员的辛酸,长时间整天呆在实验室做实验,这需要很大的毅力。 5.把握实验机会,让自己学得更多。实验过程中,只要有实操的机会,我都会去操作。因为说和做是不一样的。而且在操作中能加深巩固知识和学得更加深入。 三天的分子生物学实习虽然很累,因为要天天去院楼,而却实验时间都比较长。但是 还是很有意义的,因为学习到很到东西,收获了很多。 老师也为我们准备了很多的材料和准备,实验才做得那么快和顺利,其实,实验室简 化了很多了,而且我们所做的实验都是已经设计好的,按照操作做就行了。如果时间和资 金允许,应该设立一些自主完成的实验,这样可以培养我们更加多的能力,开阔知识面和 拓宽思维。

实验实习总结.doc

实验实习总结 实验室教学是培养应用人才的关键环节,关于实验室实习的总结该怎么写。下面是我为大家整理的实验实习总结,希望对大家有帮助。 实验实习总结篇一 时间过的真快,转眼间,在实验室为期两个月的毕业实习结束了,留下的是满满的收获和不舍。 在这两个月的时间,我学到了很多东西,不仅有学习方面的,更学到了很多做人的道理,对我来说受益非浅。在老师和师兄师姐的帮助下,我很快融入了这个新的环境,这对我今后进入研究生阶段是非常有益的。除此以外,我还学会了如何更好地与别人沟通,如何更好地去陈述自己的观点,如何从更多的人那里获取对自己有用的信息。相信这些宝贵的经验会成为我今后实验的最重要的基石。实习是每一个打算进入研究生阶段的学生必须拥有的一段经历,它使我们在实践中了解专业,让我们学到了很多在课堂上根本就学不到的知识,也打开了视野,增长了见识,为我们以后更好地从事科研工作、探索大自然的奥秘打下了坚实的基础。 现实的脚步声却是那么地清晰、有力。在一次次理论与实践相结合的过程中,在老师们悉心指导下,我不但生物实验有了系统的理解,从无数次的失败中吸取了宝贵的经验教训,而且随着时间的推移,自己的意志也得到了磨练,恐惧心理也逐渐地消失了。我时刻提醒自己,唯有不断努力,才能与时俱进。总之,这次实习的意义,对我来说已不再是完成学分、完成毕业实习的任务,而是在开启"生命之旅"大门的过程中迈出了第一

步。我一定会好好地珍惜这个机会,并为自己所喜爱的方向努力贡献自己的聪明才智。 在为期两个月的以实验为主的的实习中,我受益匪浅,我不仅学习到了专业知识,更重要的是收获了经验与体会,这些使我一生受用不尽,记下来以时刻自勉: 1.手脚勤快,热心帮助他人。初来匝道,不管是不是自己的份内之事,都应该用心去完成,也许自己累点,但你会收获很多,无论是知识与经验还是别人的称赞与认可。毕竟师兄师姐们也都是从我们这个时候过来的,对于他们而言,哪些学生是认真的,哪些学生只是混时间,他们一眼就能看出。因为态度决定一些,一些小事,如刷培养皿、刷试管,大家都是从这里开始的,不能因为好高骛远就偷懒。只有用心地,以良好的态度做好这一件件小事,才能获得大家的认可,也只有这样,才有师兄师姐愿意更深入的教给我们一些技术和方法。 2.多学多问,学会他人技能。学问学问,无问不成学。知识和经验的收获可 以说与勤学好问是成正比的,知识总是垂青那些善于提问的人。由于之前没有学过分子生物学,必然没有这方面的知识基础,很多东西不懂也是很正常的。所有的知识也都有一个从不懂到懂的过程,所以没有什么好丢脸的,不懂装懂才是真正的傻。此外,有一些经验上的东西,可能是关于细节的,在已知的基础上根据每个实验室的实验环境等因素进行了一些优化,这就需要我们及时的询问,才能少走弯路。 3.善于思考,真正消化知识。有知到识,永远不是那么简单的事,

分子生物学总结(朱玉贤版)(2020年10月整理).pdf

结合着下载的资料复习吧~~~~ 绪论 分子生物学的发展简史 Schleiden和Schwann提出“细胞学说” 孟德尔提出了“遗传因子”的概念、分离定律、独立分配规律 Miescher首次从莱茵河鲑鱼精子中分离出DNA Morgan基因存在于染色体上、连锁遗传规律 Avery证明基因就是DNA分子,提出DNA是遗传信息的载体 McClintock首次提出转座子或跳跃基因概念 Watson和Crick提出DNA双螺旋模型 Crick提出了“中心法则” Meselson与Stah用N重同位素证明了DNA复制是一种半保留复制 Jacob和Monod提出了著名的乳糖操纵子模型 Arber首次发现DNA限制性内切酶的存在 Temin和Baltimore发现在病毒中存在以RNA为模板,逆转录成DNA的逆转录酶 哪几种经典实验证明了DNA是遗传物质? (Avery等进行的肺炎双球菌转化实验、Hershey 利用放射性同位素35S和32P分别标记T2噬菌体的蛋白质外壳和DNA) 第二章染色体与DNA 第一节染色体 一、真核细胞染色体的组成 DNA:组蛋白:非组蛋白:RNA = 1:1:(1-1.5):0.05 (一)蛋白质(组蛋白、非组蛋白) (1)组蛋白:H1、H2A、H2B、H3、H4 功能:①核小体组蛋白(H2A、H2B、H3、H4)作用是将DNA分子盘绕成核小体

②不参加核小体组建的组蛋白H1,在构成核小体时起连接作用 (2)非组蛋白:包括以DNA为底物的酶、作用于组蛋白的酶、RNA聚合酶等。常见的有(HMG蛋白、DNA结合蛋白) 二、染色质 染色体:分裂期由染色质聚缩形成。 染色质:线性复合结构,间期遗传物质存在形式。 常染色质(着色浅) 具间期染色质形态特征和着色特征染色质 异染色质(着色深) 结构性异染色质兼性异染色质 (在整个细胞周期内都处于凝集状态)(特定时期处于凝集状态)三、核小体 由H2A、H2B、H3、H4各2 分子组成的八聚体和绕在八聚体外的DNA、一分 子H1组成。八聚体在中央,DNA分子盘绕在外,由此形成核心颗粒。,H1结合在核心颗粒外侧DNA双链的进出口端,如搭扣将绕在八聚体外DNA链固定,核心颗粒之间的连接部分为连接DNA。 核小体的定位对转录有促进作用

关于大学个人自我鉴定范文4篇

关于大学个人自我鉴定范文4篇 关于大学个人自我鉴定范文1 三年的大学生活,使我自身的综合素质、修养、为人处事能力以及交际能力等都有了质的飞跃;让我懂得了除学习以外的个人处事能力的重要性和交际能力的必要性。我成长了很多,也收获了很多。 在大学期间,我始终以提高自身的综合素质为目标,以自我的全面发展为努力方向,树立正确的人生观、价值观和世界观。为适应社会发展的需求,我认真学习各种专业知识,发挥自己的特长;挖掘自身的潜力,结合每年的暑期社会实践机会,从而逐步提高了自己的学习能力和分析处理问题的能力以及一定的协调组织和管理能力。 (一)思想方面,本人具有优秀道德修养,并有坚定的政治方向。我热爱祖国,热爱人民,坚决拥护中国共产党领导和社会主义制度,努力学习马克思列宁主义、思想和理论,不断提高自己的政治觉悟和道德修养,严格遵守国家宪法及其它各项法律规定。由于本人表现突出,思想上积极向党组织靠拢,在大二时被确定为入党积极分子,并且顺利的结业了党校学习。本人品德兼优、性格开朗、热爱生活,有较强的实践能力和组织能力。我学习勤奋,积极向上,喜欢和同学讨论并解决问题,经常积极参加班级及学校组织的各种活动。大学三年我学到了很多书本上学不到的知识,思想比以前有了很大的提高,希望以后能做一个有理想,有抱负,有文化的人,为建设社会主义中国做出自己的努力。

(二) 学习方面我觉得大学生的首要任务还是学好文化知识,所以在学习上我踏踏实实,一点也不放松。通过三年学习,我学习了微观经济学、宏观经济学、市场营销、国际金融等专业课程,在课堂上,认真听课,跟着老师的思路思考和研究,把想不明白的问题通过答疑板得到反馈和解决,掌握一些例题的分析思路,本人学习态度端正,勤奋好学,基本上牢固的掌握金融专业知识和技能,课余参加了社团模拟炒股比赛,做到了将所学用于实践中;除了专业知识的学习外,还注意各方面知识的扩展,广泛的涉猎其他学科的知识,从而提高了自身的思想文化素质。 我认为好的学习方法对学好知识很有帮助,所以在每次考试后,我都会总结一下学习经验。我利用课余时间经常去图书馆阅览金融方面的书籍,了解国内金融业的发展情况。图书馆就是一个改变人思想的地方.而且我认为学习是学生的职业,这份职业同样需要有智慧、毅力和恒心。在当今这个快速发展的信息时代,我们只有不断汲取新知识,才不会落伍。 (三)工作方面学习固然重要,一个人能力的培养也不容忽视。本人担任班级学习委员职务,负责班里多方面的工作。与同学相处融洽,对工作热情,责任心强,具有良好的组织交际能力,注重配合其他班委出色完成各项工作,促进了团队沟通与合作。三年的大学生活给了我很多挑战自我的机会,如学生会的竞选,院里组织的演讲比赛,棋弈比赛等。我成功当选棋弈组织部部长。在工作中我认真努力,积极组织活动,在参与这些活动的过程中,我结交了一些很好的朋友,

分子生物学实验-心得体会

关于分子生物学实验的体会 梁慧媛(生技01级) 不知不觉间,一年的时间就这样流逝了,与分子生物实验相伴,对我而言,的确不同寻常。并不仅仅是学习生物学实验技术和方法的宝贵经历,它意味着更多。 首先是实验条件、实验过程、实验设计的完备性,从这里可以初步感受到生物学研究的科学性与严肃性,自己可以得到宝贵的机会,亲身体会生物学研究的苦辣酸甜。一直一直喜欢,得到正确实验结果时刻的畅快感,那是无法言明的欣慰感,一次身心彻底地放松,可以将所有一整天来积累的疲劳抛之身后,即使仅仅是小小的成功,也会让我们兴奋不已。在整理资料,将一年来保存的记录一遍一遍的翻看,重温其中的特别滋味,我,轻轻地笑了。我,喜欢这里,喜欢生物学。 失误是常有的,经历过吃惊、后悔、无奈,检讨分析,最后重新开始。一波三折的记忆清晰的印在脑海中,这种深深的挫折感,再试一次的勇气,我会一生记取的。 一年间,随着对生物学实验知识和技能的进一步学习,我更坚定了自己学习生物学的志向,感分子生物学实验的"试炼"。 分子生物学实验心得体会 东强(生科01级) 分子生物学实验室本科生第一次接触到了真正培养实验能力的实验课,它不同于我们在大二开的植物、动物、微生物等实验课。在这些课上,主要以制备样品并观察样品的形态、结构特征为主,这是由于我们当时正值大二,专业知识还远不够。 随着以后理论课学习的深入,我们开始了分子生物学实验的学习,这无疑对于深刻巩固我们理论课上学到的知识是有帮助的,也进一步加深了对原有知识的理解,如启动子的概念、类型、PCR的原理等。另外,在实验课中,我们掌握并学会如何运用分子生物学研究中的一些基本实验技术,如质粒的提取、总RNA的制备、PCR技术等。 我们的实验动手能力通过亲身接触实验过程并亲自设计一些实验得到了提高,使我们不再象刚开始做分子生物学实验的时候照搬实验指导上的实验步骤,而是通过我们自己的思考,根据现有的实验条件,对原有的步骤作必要的改进。 此外,通过这门实验课的学习,我们形成了严谨的态度,如有时得出的实验结果与理论不符,我们渐渐养成了仔细分析实验结果的习惯,查找在实验设计或操作过程中出现的问题,同时对理论知识认识得更清楚。 总之,我认为,分子生物学实验课,是称得上实用、精彩、有意思的好实验,对于今后我的研究或工作很有价值。

分子生物学综合实验报告

分子生物学综合试验报告

综合实验Ⅰ.Southern杂交 (质粒DNA提取、PCR技术体外扩增DNA、质粒载体和外源DNA的连接反应、 地高辛标记的Southern杂交) 一.实验目的 1.学习Southern杂交的原理及操作方法。 2.学习碱裂解法提取质粒的原理。 3.学习PCR反应的基本原理和实验技术;了解引物设计的一般要求。 4.掌握DNA体外连接的基本技能,了解连接反应的注意事项。 二.实验原理 利用染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离的目的。在碱变性条件下,染色体DNA的氢键断裂,双螺旋解开而变性,质粒DNA氢键也大部分断裂,双螺旋也有部分解开,但共价闭合环状结构的两条互补链不会完全分离,当pH=的乙酸钠将其pH调到中性时,变性的质粒DNA又恢复到原来的碱裂解法提取质粒的主要原理是:利用染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而构型,而染色体DNA不能复性,形成缠绕的致密网状结构,离心后,由于浮力密度不同,染色体DNA与大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。 聚合酶链反应(PCR)是体外酶促合成DNA片段的一种技术,PCR 进行的基本条件:DNA模板(在RT-PCR中模板是RNA)、引物、dNTP (dATP、dTTP、dGTP、dCTP)、Taq DNA聚合酶、反应缓冲体系。 PCR循环由三个步骤组成:变性、退火、延伸。每一个循环的产物可作为下一个循环的模板,通过30个左右循环后,目的片段的扩增可达106倍。

DNA片段之间的连接是通过DNA连接酶的催化实现的。DNA连接酶催化具有平末端或互补粘性末端的DNA片段间相邻碱基通过3’,5’磷酸二酯键连接起来。最常用的来源于T4噬菌体的T4DNA连接酶。对于平末端或互补的粘性末端可直接进行连接反应。一个片段是平末端,另一片段为粘性末端或两个片段都是粘性末端但不配对,则需要通过各种方式使其可一匹配或通过平末端进行连接。通常采用末端补平、加同聚物尾、加接头等方式是目的片段之间能够匹配。 地高辛随机引物法标记的原理:在随机引物法标记的反应液中,有随机合成的六聚核苷酸作为引物,dATP、dCTP、dGTP、dTTP和D1G-11-dUTP作为合成底物,以单链DNA作为模板,在Klenow酶的作用下,合成插入地高辛的DNA链。以地高辛标记的探针与靶基因DNA链杂交后,再通过免疫反应进行检测。一般通过酶标记地高辛抗体检测,就可以肯定杂交反应的存在。免疫检验一般用碱性磷酸酶系统,BClP/NBT显色,敏感性很高。 三.实验准备 1.实验材料: 含质粒的大肠杆菌DH5α,LB液体培养基, LB平板培养基 2.实验试剂: Taq DNA聚合酶,10×反应缓冲液(含25mmol MgCl2),dNTP,引物(P1、P2),溴乙啶 (EB) ,点样缓冲液Loading buffer(10×):%溴酚蓝,40%甘油,目的基因及载体, 2×ligation 缓冲液,T4 DNA连接酶, L CaCl2,氨苄青霉素(100mg/mL), TBE电泳缓冲液(5×), DIG Random Labeling Mix(高效),Anti-DIG-AP Conjugate, BCIP/NBT Stock Solution,Blocking Reagent。 20×SSC:柠檬酸钠,3M NaCl,2×SSC:柠檬酸钠, NaCl, EDTA,变性液: NaOH, NaCl,中和度: Tris-HCl、、3M NaCl,Standard buffer:5×SSC、%(w/v) N-Lauroylsarcosine, % (w/v) SDS, 1% Blocking Reagent,Standard buffer+50% formamide,Anti-DIG-AP 碱性磷酸酶标记抗地高辛单抗体,BCIP/NBT储备液,冲洗液:0. 1M

分子生物学问题汇总

Section A 细胞与大分子 简述复杂大分子的生物学功能及与人类健康的关系。 Section C 核酸的性质 1.DNA的超螺旋结构的特点有哪些? A 发生在闭环双链DNA分子上 B DNA双链轴线高卷曲,与简单的环状相比,连接数发生变化 C 当DNA扭曲方向与双螺旋方向相同时,DNA变得紧绷,为正超螺旋,反之变得松弛为负超螺旋。自然界几乎所有DNA分子超螺旋都为负的,因为能量最低。 2.简述核酸的性质。 A 核酸的稳定性:由于核酸中碱基对的疏水效应以及电荷偶极作用而趋于稳定 B 酸效应:在强酸和高温条件下,核酸完全水解,而在稀酸条件下,DNA的核苷键被选择性地断裂生成脱嘌呤核酸 C 碱效应:当PH超出生理范围时(7-8),碱基的互变异构态发生变化 D 化学变性:一些化学物质如尿素,甲酰胺能破坏DNA和RNA二级结构中的 而使核酸变性。 E 粘性:DNA的粘性是由其形态决定的,DNA分子细长,称为高轴比,可被机械力和超声波剪切而粘性下降。 F 浮力密度:1.7g/cm^3,因此可利用高浓度分子质量的盐溶液进行纯化和分析 G 紫外线吸收:核酸中的芳香族碱基在269nm 处有最大光吸收 H 减色性,热变性,复性。 思考题:提取细菌的质粒依据是核酸的哪些性质? 质粒是抗性基因,,在基因组或者质粒DNA中用碱提取法。 Sectio C 课前提问 1.在1.5mL的离心管中有500μL,取出10 μL稀释至1000 μL后进行检测,测得A260=0.15。 问(1):试管中的DNA浓度是多少? 问(2):如果测得A280=0.078, .A260/A280=?说明什么问题? (1)稀释前的浓度:0.15/20=0.0075 稀释后的浓度:0.0075/100=0.75ug/ml (2)0.15/0.078=1.92〉1.8,说明DNA中混有RNA样品。 2.解释以下两幅图

实验报告总结(精选8篇)

《实验报告总结》 实验报告总结(一): 一个长学期的电路原理,让我学到了很多东西,从最开始的什么都不懂,到此刻的略懂一二。 在学习知识上面,开始的时候完全是老师讲什么就做什么,感觉速度还是比较快的,跟理论也没什么差距。但是之后就觉得越来越麻烦了。从最开始的误差分析,实验报告写了很多,但是真正掌握的确不多,到最后的回转器,负阻,感觉都是理论没有很好的跟上实践,很多状况下是在实验出现象以后在去想理论。在实验这门课中给我最大的感受就是,必须要先弄清楚原理,在做实验,这样又快又好。 在养成习惯方面,最开始的时候我做实验都是没有什么条理,想到哪里就做到哪里。比如说测量三相电,有很多种状况,有中线,无中线,三角形接线法还是Y形接线法,在这个实验中,如果选取恰当的顺序就能够减少很多接线,做实验就应要有良好的习惯,就应在做实验之前想好这个实验要求什么,有几个步骤,就应怎样安排才最合理,其实这也映射到做事情,不管做什么事情,就应都要想想目的和过程,这样才能高效的完成。电原实验开始的几周上课时间不是很固定,实验报告也累计了很多,第一次感觉有那么多实验报告要写,在交实验报告的前一天很多同学都通宵了的,这说明我们都没有合理的安排好自己的时间,我就应从这件事情中吸取教训,合理安排自己的时间,完成就应完成的学习任务。这学期做的一些实验都需要严谨的态度。在负阻的实验中,我和同组的同学连了两三次才把负阻链接好,又浪费时间,又没有效果,在这个实验中,有很多线,很容易插错,所以要个性仔细。 在最后的综合实验中,我更是受益匪浅。完整的做出了一个红外测量角度的仪器,虽然不是个性准确。我和我组员分工合作,各自完成自己的模块。我负责的是单片机,和数码显示电路。这两块都是比较简单的,但是数码显示个性需要细致,由于我自己是一个粗心的人,所以数码管我检查了很多遍,做了很多无用功。 总结:电路原理实验最后给我留下的是:严谨的学习态度。做什么事情都要认真,争取一次性做好,人生没有太多时间去浪费。 实验报告总结(二): 在分子生物学实验室为期两个月的实习使我受益匪浅,我不仅仅学习到了专业知识,更重要的是收获了经验与体会,这些使我一生受用不尽,记下来与大家共勉: 1.手脚勤快,热心帮忙他人。初来匝道,不管是不是自己的份内之事,都就应用心去完成,也许自己累点,但你会收获很多,无论是知识与经验还是别人的称赞与认可。 2.多学多问,学会他人技能。学问学问,无问不成学。知识和经验的收获能够说与勤学好问是成正比的,要记住知识总是垂青那些善于提问的人。 3.善于思考,真正消化知识。有知到识,永远不是那么简单的事,当你真正学会去思考时,他人的知识才能变成你自己的东西。 4.前人铺路,后人修路。墨守陈规永远不会有新的建树,前人的道路固然重要,但是学会另辟蹊径更为重要。

分子生物学实验报告

分子生物学实验 院系:生命科学与技术学院 专业:生物科学(基地) 班级: 201101班 学号: 姓名: 分子生物学基础实验 分子生物学实验技术已成为生物化学及分子生物学以及相关学科院系教学科研不可缺少的一部分。为提高学生在分子生物学技术方面的动手能力,生物技术综合实验室主要开设常用而基本的分子生物学实验技术。它的内容包括质粒DNA的制备;DNA的重组;PCR基因扩增等等。 实验一质粒DNA的小量制备 一、实验原理 要把一个有用的外源基因通过基因工程手段,送进细胞中去进行繁殖和表达,需要运载工具,携带外源基因进入受体细胞的这种工具就叫载体(vector)。载体的设计和应用是DNA体外重组的重要条件。作为基因工程的载体必须具备下列条件:(1)是一个复制子,载体有复制点才能使与它结合的外源基因复制繁殖;(2)载体在受体细胞中能大量增殖,只有高复制率才能使外源基因在受体细胞中大量扩增;(3)载体DNA链上有1到几个限制性内切酶的单一识别与切割位点,便于外源基因的插入;(4)载体具有选择性的遗传标记,如有抗四环素基因(Tc r),抗新霉素基因(Ne r)等,以此知道它是否已进入受体细胞,也可根据这个标记将受体细胞从其他细胞中分离筛选出来。细菌质粒具备上述条件,它是基因工程中常用的载体之一。 质粒(plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小在1~120kb之间,具

有双链闭合环状结构的DNA分子,主要发现于细菌、放线菌和真菌细胞中。质粒具有自主复制和转录能力,能使子代细胞保持它们恒定的拷贝数,可表达它携带的遗传信息。它可独立游离在细胞质内,也可以整合到细菌染色体中,它离开宿主的细胞就不能存活,而它控制的许多生物学功能也是对宿主细胞的补偿。 质粒在细胞内的复制,一般分为两种类型:严密控制型(stringent control)和松弛控制型(relaxed control)。前者只在细胞周期的一定阶段进行复制,染色体不复制时,它也不复制。每个细胞内只含有1个或几个质粒分子。后者的质粒在整个细胞周期中随时复制,在细胞里,它有许多拷贝,一般在20个以上。通常大的质粒如F因子等,拷贝数较少,复制受到严格控制。小的质粒,如ColE Ⅰ质粒(含有产生大肠杆菌素E1基因),拷贝数较多,复制不受严格控制。在使用蛋白质合成抑制剂-氯霉素时,染色体DNA复制受阻,而松弛型ColEⅠ质粒继续复制12-16h,由原来20多个拷贝可扩增至1000-3000个拷贝,此时质粒DNA占总DNA的含量由原来的2%增加到40%-50%。本实验分离提纯化的质粒pBR322、pUC19就是由ColE Ⅰ衍生的质粒。 所有分离质粒DNA的方法都包括三个基本步骤:培养细菌使质粒扩增;收集和裂解细菌;分离和纯化质粒DNA。采用溶菌酶可破坏菌体细胞壁,十二烷基硫酸钠(SDS)可使细胞壁解,经溶菌酶和阴离子去污剂(SDS)处理后,细菌染色体DNA 缠绕附着在细胞壁碎片上,离心时易被沉淀出来,而质粒DNA则留在清液中。用乙醇沉淀、洗涤,可得到质粒DNA。 质粒DNA的相对分子量一般在106-107范围内,如质粒pBR322的相对分子质量为2.8×106,质粒pUC19的相对分子质量为1.7×106。在细胞内,共价闭环DNA(covalently closed circular DNA,简称cccDNA)常以超螺旋形式存在。如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,这种松弛型的分子叫做开环DNA(open circular DNA,简称ocDNA)。在电泳时,同一质粒如以cccDNA形式存在,它比其开环和线状DNA的泳动速度快,因此在本实验中,自制质粒DNA在电泳凝胶中呈现3条区带。 二、实验目的 1.掌握最常用的提取质粒DNA的方法和检测方法。 2.了解制备原理及各种试剂的作用。 三、实验材料和试剂

现代分子生物学总结(朱玉贤、最新版)

现代分子生物学总结(朱玉贤、最新版)

一、绪论 两个经典实验 1、肺炎球菌在老鼠体内的毒性实验:先将光滑型致病菌(S型)烧煮杀活性以后、以及活的粗糙型细菌(R型)分别侵染小鼠发现这些细菌自然丧失了治病能力;当他们将经烧煮杀死的S型细菌和活的R型细菌混合再感染小鼠时,实验小鼠每次都死亡。解剖死鼠,发现有大量活的S型细菌。实验表明,死细菌DNA 进行了可遗传的转化,从而导致小鼠死亡。 2、T2噬菌体感染大肠杆菌:当细菌培养基中分别带有35S或32P标记的氨基酸或核苷酸,子代噬菌体就相应含有35S标记的蛋白质或32P标记的核酸。分别用这些噬菌体感染没有放射性标记的细菌,经过1~2个噬菌体DNA 复制周期后进行检测,子代噬菌体中几乎不含带35S标记的蛋白质,但含30%以上的32P 标记。说明在噬菌体传代过程中发挥作用的可能是DNA而不是蛋白质。 基因的概念:基因是产生一条多肽链或功能RNA分子所必需的全部核苷酸序列。

二、染色体与DNA 嘌呤嘧啶 腺嘌呤鸟嘌呤胞嘧啶尿嘧啶胸腺嘧啶 染色体 性质:1、分子结构相对稳定;2、能够自我复制,使亲、子代之间保持连续性;3、能指导蛋白质的合成,从而控制生命过程;4、能产生可遗传的变异。 组蛋白一般特性:1、进化上极端保守,特别是H3、H4;2、无组织特异性;3、肽链上氨基酸分布的不对称性;4、存在较普遍的修饰作用;5、富含赖氨酸的组蛋白H5 非组蛋白:HMG蛋白;DNA结合蛋白;A24非组蛋白

真核生物基因组DNA 真核细胞基因组最大特点是它含有大量的重复序列,而且功能DNA序列大多被不编码蛋白质的非功能蛋白质所隔开。人们把一种生物单倍体基因组DNA的总量称为C值,在真核生物中C 值一般是随着生物进化而增加的,高等生物的C 值一般大于低等动物,但某些两栖类的C值甚至比哺乳动物还大,这就是著名的C值反常现象。真核细胞DNA序列可被分为3类:不重复序列、中度重复序列、高度重复序列。 真核生物基因组的特点:1、真核生物基因组庞大,一般都远大于原核生物的基因组;2、真核基因组存在大量的的重复序列;3、真核基因组的大部分为非编码序列,占整个基因组序列的90%以上,这是真核生物与细菌和病毒之间的最主要的区别;4、真核基因组的转录产物为单顺反之;5、真核基因组是断裂基因,有内含子结构;6、真核基因组存在大量的顺式元件,包括启动子、增强子、沉默子等;7、真核基因组中存在大量的DNA多态性;8、真核基因组具有端粒结构。

德能勤绩个人自我鉴定总结

近几年以来,在委党组的正确领导下,在同志们的关心支持下,我认真按照中央和省委、省政府的一系列战略部署,在思想上与中央保持一致,在行动上认真贯彻落实委党组的指示。一是加强政治理论学习,努力克服学习不系统,不连贯的问题,克服存在的以干代学思想。由于工作和业务的原因,经常出差在外,委里组织的政治学习有时候要请假,回来后及时补课。对中央的一系列战略部署力求吃透精神,杜绝在一些理论问题上不求甚解、似是而非。在对科学发展观的认识上,树立全面、协调、可持续的发展观。自觉运用科学理论武装头脑、指导实践,加强创新意识、发展意识。特别是加深对“三个代表”重要思想和邓小平理论的学习和理解。二是进一步改进工作作风,严格按照情为民所系,利为民所谋,权为民所用的指导思想,要求自己,紧密依靠党组织,尊重领导,团结同志,善待基层同志。坚持立党为公、执政为民,全心全意为人民服务的意识;深入基层开展调查研究;努力加强理论联系实际的创新能力;力求保持艰苦奋斗的优良作风;在荣誉面前努力克服骄傲自满的情绪;同消极腐败现象作斗争。三是扎扎实实地做好本职工作,坚持培养与时俱进、解放思想、开拓创新的能力;努力学习国际最新的电力技术、工艺和其他新知识;努力提高驾驭全局的能力、决策能力和组织协调能力。特别是针对全省的电力工业发展综合管理方面,做了一些工作。全面完成了农村电网建设改造工程,共争取国家投资**亿元,其中国债资金**亿元。同时又争取国家对我省县城电网改造追加投资**亿元,其中国债补助资金1亿元。通过城农网改造极大地改善了我省电网结构和健康状况,提高了供电可靠性。XX年下半年以来,全国出现了大范围的供电紧张状况,缺电省份达到了二十多个,**作为全国的经济大省和人口大省,一旦发生大面积缺电,对经济发展和社会稳定的影响不可估计。我积极配合处室领导和委党组,认真开展工作,创造性地完成了省委省政府交代的任务,克服困难,审批一批应急电源项目,并及时协调这批项目尽快投产发电,确保了我省电力供应的平稳和安全。同时,在具体工作中,对于政治理论学习、思想觉悟、工作作风、业务学习、工作方式方法等方面还存在不少缺点和错误,亟需改进和克服。一是发扬理论联系实际的优良学风,搞好政治理论的学习。二是加强党性锻炼,提高党性修养,增强执政意识。三是牢记“两个务必”,强化宗旨观念,全心全意地为人民服务。四是保持警钟长鸣,严格要求自己,进一步加强廉政建设。五是按照党组要求做好本职工作。

实验教学心得体会10篇

实验教学心得体会10篇 实验心得(一) 实验室是培养高层次人才和开展科学研究的重要基地。在西方发达国家,学校对培养学生的动手潜力是分重视的,这一问题近年来也越来越受到我国教育界人士的广泛重视。为了提高学生的动手潜力,让学生做相关实训并完成单片机实验报告,在实验的形式上注重培养学生的实验技能和动手潜力。从单片机实验心得中学生就能够总结出超多的经验以适应当代社会的发展。 学习单片机这门课程(教学中选用inter公司的mcs-51),要掌握单片机指令系统中汇编语言各种基本语句的好处及汇编语言程序设计的基本知识和方法,以及单片机与其他设备相连接的输入输出中断等接口-技术。使学生从硬件软件的结合上理论联系实际,提高动手潜力,从而全面掌握单片机的应用。 实验教学的全过程包括认识、基储综合3个阶段。以往的单片机实验是进行软件的编制和调试,与实际应用中的硬件电路相脱节。使学生缺乏硬件设计及调试分析潜力,对单片机如何构成一个单片机最小应用系统,缺乏认识。发布的单片机实验板,透过计算机连接仿真器在实验板上把硬件和软件结合起来一齐调试, 软件的修改也分方便,软件和硬件调试都透过后,把程序固化在eprom当中,插上8051单片机构成一个完整的单片机应用系统。 实验心得(二) 我觉得化工原理实验是一门验证性课程,它把我们在化工原

理学到的各种单元操作化为实实在在的东西,而让我们把学到的知识认识到它的实在性。流体输送——离心泵、过滤——板框压滤机、对流传热——套管式换热器、吸收蒸馏——填料塔板式塔、干燥——厢式干燥装置。一个个实验和装置让我们对每种单元操作都有了除理性认识之外的感性认识。 此刻回过头来看,在做实验前对实验的原理和操作步骤没有认真研究,导致有些实验做的效果并不好,这是预习不够充分的表现。认真的预习报告应要3小时左右,而我犯懒预习方面很敷衍,一小时就完事,于是就在做实验的过程中产生了许多问题,这是我应当深刻检讨的。正如《礼记中庸》所说“凡事豫(预)则立,不豫(预)则废,言前定则不跲,事前定则不困,行前定则不疚,道前定则不穷。”所以以后做实验不应急于开始实验,应搞清楚目的和设计流程的来龙去脉。另外感激俞教师实验前的仔细讲解让我做实验时不至于对整个流程不知所措。 做化工原理实验我感觉很有意思,因为实验数据并不是先定的,自我得出实验结论有一种成就感,这对培养我们不盲从、实证的思维方式有益,并且由于我们是分组实验,每4-5人一组,锻炼了我们的协作的本事。化学实验研究中中分工协作尤为重要,能够发挥整体效能提高进行实验的效率,取长补短,最重要的是团队精神和氛围会产生强大的动力,所以这方面的锻炼是化原实验中我的重要收获之一。 在进行实验和处理数据时,我们用到了非传统的方法用Excel、

(完整版)分子生物学总结完整版

分子生物学 第一章绪论 分子生物学研究内容有哪些方面? 1、结构分子生物学; 2、基因表达的调节与控制; 3、DNA重组技术及其应用; 4、结构基因组学、功能基因组学、生物信息学、系统生物学 第二章DNA and Chromosome 1、DNA的变性:在某些理化因素作用下,DNA双链解开成两条单链的过程。 2、DNA复性:变性DNA在适当条件下,分开的两条单链分子按照碱基互补原则重新恢复天然的双螺旋构象的现象。 3、Tm(熔链温度):DNA加热变性时,紫外吸收达到最大值的一半时的温度,即DNA分子内50%的双链结构被解开成单链分子时的温度) 4、退火:热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性,称为退火 5、假基因:基因组中存在的一段与正常基因非常相似但不能表达的DNA序列。以Ψ来表示。 6、C值矛盾或C值悖论:C值的大小与生物的复杂度和进化的地位并不一致,称为C值矛盾或C值悖论(C-Value Paradox)。 7、转座:可移动因子介导的遗传物质的重排现象。 8、转座子:染色体、质粒或噬菌体上可以转移位置的遗传成分 9、DNA二级结构的特点:1)DNA分子是由两条相互平行的脱氧核苷酸长链盘绕而成;2)DNA分子中的脱氧核苷酸和磷酸交替连接,排在外侧,构成基本骨架,碱基排列在外侧;3)DNA分子表面有大沟和小沟;4)两条链间存在碱基互补,通过氢键连系,且A=T、G ≡ C(碱基互补原则);5)螺旋的螺距为3.4nm,直径为2nm,相邻两个碱基对之间的垂直距离为0.34nm,每圈螺旋包含10个碱基对;6)碱基平面与螺旋纵轴接近垂直,糖环平面接近平行 10、真核生物基因组结构:编码蛋白质或RNA的编码序列和非编码序列,包括编码区两侧的调控序列和编码序列间的间隔序列。 特点:1)真核基因组结构庞大哺乳类生物大于2X109bp;2)单顺反子(单顺反子:一个基因单独转录,一个基因一条mRNA,翻译成一条多肽链;)3)基因不连续性断裂基因(interrupted gene)、内含子(intron)、外显子(exon);4)非编码区较多,多于编码序列(9:1) 5)含有大量重复序列 11、Histon(组蛋白)特点:极端保守性、无组织特异性、氨基酸分布的不对称性、可修饰作用、富含Lys的H5 12、核小体组成:由组蛋白和200bp DNA组成 13、转座的机制:转座时发生的插入作用有一个普遍的特征,那就是受体分子中有一段很短的被称为靶序列的DNA会被复制,使插入的转座子位于两个重复的靶序列之间。 复制型转座:整个转座子被复制,所移动和转位的仅为原转座子的拷贝。 非复制型转座:原始转座子作为一个可移动的实体直接被移位。 第三章DNA Replication and repair 1、半保留复制:DNA生物合成时,母链DNA解开为两股单链,各自作为模板(template)按碱

个人工作自我鉴定总结【七篇】

个人工作自我鉴定总结【七篇】 工作以来,在单位领导的精心培育和教导下,通过自身的不断努力,无论是思想上、学习上还是工作上,都取得了长足的发展和巨大的收获,现将工作总结如下: 思想上,积极参加政治学习,坚持四项基本原则,拥护党的各项方针政策,自觉遵守各项法规。 工作上,本人自xxxx年工作以来,先后在某某部门、某某科室、会计科等科室工作过,不管走到哪里,都严格要求自己,刻苦钻研业务,争当行家里手。就是凭着这样一种坚定的信念,我已熟练掌握储蓄、会计、计划、信用卡、个贷等业务,成为xx行业务的行家里手。 记得,刚进xx行,为了尽快掌握xx行业行业知识,我每天苦学6个多小时,但我每天都风雨无阻,特别是冬天,冰天雪地,怕挤不上车,我常常要提前两、三个小时上班,就是那时起我养成了早到单位的习惯,现在每天都是个到行里,先打扫卫生,再看看业务书或准备准备一天的工作,也是这个习惯,给了我充足的时间学习到的业务知识,为我几年来工作的顺利开展打下了良好的基础。 我工作过的岗位大部分在前台,为了能更好的服务客户,针对不同层次、不同需求的客户,我给予不同的帮助和服务,记得有一位次到我行客户,当我了解到他要贷款买二

手房时,由于他不知该怎么办,只是有个想法,我便详细地向他介绍了个贷的所有手续。除了在服务客户上我尽心尽力,在行里组织的各项活动中我也积极响应,经常参加单位组织的各项竞赛,展示自我,并取得了优异的成绩,受到了单位的嘉奖。 学习上,自从参加工作以来,我从没有放弃学习理论知识和业务知识。由于我毕业财校属于中专,刚工作我就利用业余时间自学大专,并于xx年毕业,但我没有满足于现状,又于xx年自修东北大学金融本科,由于学习勤奋刻苦,成绩优良,学习中受到老师充分肯定,目前正在积极准备论文答辩。不但掌握和提高了金融知识,也有了一定的理论水平,完全达到了本科生所具有的水准。学习理论的同时,更加钻研业务,把学到的金融知识融会到工作中去,使业务水平不断提高,并于xx年参加全国中级经济师资格考试,顺利通过同时被行里聘为中级师。在多年的业务知识考核当中,每次会计业务资格考试都达到1级水平。 最后,我想说的是,上面只是我工作中取得的一点成绩,这与单位的领导和同事们的帮助是分不开的。我始终坚信一句话“一根火柴再亮,也只有豆大的光。但倘若用一根火柴去点燃一堆火柴,则会熊熊燃烧”。我希望用我亮丽的青春,去点燃周围每个人的激情,感召激励着同事们一起为我们的事业奉献、进取、立功、建业……<

分子生物学学习心得

分子生物学学习心得 生物学以及分子生物学本身就是一门实验性的学科,如果只有 单纯的理论课上的讲解而没有与之相配套的实验操作,根本无法使我们深刻体会到我们所学的那些如转导转化之类究竟是怎样操纵的。对此给大家收集了有关分子生物学学习心得,应该能给各位带来帮助。 生命科学发展日新月异,特别是微观生物学的发展速度可谓惊人。作为一名本科生,最重要的就是掌握好基础知识,为今后的科研工作或是研发工作打下基础,这样才能跟得上知识和信息发展的脚步。分子生物学作为微观生物学的根基,学好它无疑将为将来的发展打下最坚实的基础。 最近我读了一篇文献,是有关不同类型的弥散性大B细胞淋巴 瘤的基因表达分析的。弥漫型大B细胞淋巴瘤(DLBCL),最常见的非霍奇金淋巴瘤亚型,是在临床上异构的:40%的患者目前的治疗反应良好,长期生存,而其余屈服于疾病。我们认为这种可变性在自然历史反映 了识别分子在肿瘤异质性。两个不同的分子形式的DLBCL有着不同的gene表达模式,表明了B细胞有不同的分化阶段。一种是表达中心B 细胞的基因表达特征(中心B细胞类似DLBCL),另一种是表达体外激活诱导外周血B细胞(激活B细胞类似DLBCL)。其中中心B细胞的存活率大于激活B细胞。我们发现肿瘤的分子分类的基础上的基因表达可以识别以前未被发现和临床癌症的重要亚型。构建了一个特异性的DNA微阵列,分析淋巴恶性肿瘤的基因表达,判断基因表达模型和肿瘤表型,最后利用分层系统树图得出结论。

从文献中我了解了DNA微阵列技术,掌握了DNA微阵列技术的 方法,学会了分析分层系统树图,更认识到了弥漫型大B细胞淋巴瘤(DLBCL)研究的重要性。分子生物学是一门前沿的学科,我们只有努 力学习英语,经常阅读中外文献,亲自参与到实验中去,才能了解分子生物学最新的研究成果,掌握分子生物学中的研究分析方法。 通过一个学期的分子生物的学习,第一,我掌握了以中心法则 为核心的最基本的分子生物学知识 了解了基因表达调控的基本原理 锻炼了专业英语阅读和写作能力,也接触了微观生物学前沿, 培养了一定的科研思维能力。学习分子生物学提高了我们的微观生物学素养,为今后的进一步学习打下了坚实基础,同时了解了最新的微观生物学进展,让我们对生物学科研有了一定的感性认识。 不知不觉间,一年的时间就这样流逝了,与分子生物实验相伴,对我而言,的确不同寻常。并不仅仅是学习生物学实验技术和方法的宝贵经历,它意味着更多。 首先是实验条件、实验过程、实验设计的完备性,从这里可以 初步感受到生物学研究的科学性与严肃性,自己可以得到宝贵的机会,亲身体会生物学研究的苦辣酸甜。一直一直喜欢,得到正确实验结果时刻的畅快感,那是无法言明的欣慰感,一次身心彻底地放松,可以将所有一整天来积累的疲劳抛之身后,即使仅仅是小小的成功,也会让我们兴奋不已。在资料,将一年来保存的记录一遍一遍的翻看,重温其中的特别滋味,我,轻轻地笑了。我,喜欢这里,喜欢生物学。

分子生物学实验步骤总结超全

一目的基因的获得 细菌基因组DNA的提取 (一)仪器 1)台式高速离心机 2)恒温水浴箱 3)枪式移液器 4)灭菌的EP管和Tip头 (二)试剂 1)溶液1: 25% 蔗糖 50mmol/L Tris-Hcl,pH8.0 50mmol/L EDTA,pH8.0 500ug/ml 溶菌酶(现用现配) 100ug/ml RNase 2)溶液Ⅱ:100mmol/L Tris-Hcl,pH8.0 1% SDS 400ug/ml 蛋白酶K 3)酚:氯仿:异戊醇(25:24:1) 4)氯仿:异戊醇(24:1) 5)3mol/L NaAc(pH5.2) 6)异丙醇或无水乙醇 7)70%乙醇 8) TE缓冲液:10mmol/L Tris-Hcl,pH8.0 1mmol/L EDTA,pH8.0 (三)实验步骤 1) 5mL细菌过夜培养,5000rpm离心10分钟,去上清液。 2)将菌体细胞悬于250uL溶液1中,37°C水浴保温过夜。 3)加250uL溶液Ⅱ,55°C水浴保温4小时。 4)加0.9倍体积的酚/氯仿/异戊醇(25:24:1),轻轻混匀,于14000rpm离心10分钟,转移水相至新的Ep管,重复步骤4一次。 5)向转移的水相中加入0,9倍体积的氯仿/异戊醇(24:1),轻轻混匀,于14000rpm离心10

分钟,转移水相至新的Ep管,重复步骤5一次。 6)向转移的水相中加入0.1倍体积的3mol/L NaAc和0.7倍体积的异丙醇(或2.5倍体积的无水乙醇),冰上放置30分钟。 7)14000rpm离心20分钟,弃上清,用0.5mL70%乙醇洗涤沉淀一次,弃上清,沉淀于室温干燥。 8)将DNA沉淀溶解于15ul TE缓冲液中,-20°C保存。 9)进行DNA含量和纯度检测,琼脂糖凝胶电泳鉴定。 植物DNA的SDS提取法: (一)试验试剂: 1)研磨缓冲液:称取59.63gNaCl,13.25g柠檬酸三钠,37.2gEDTA-Na分别溶解后合并为一,用0.2mol/L的NaOH调至pH7.0,并定容至1000ml。 2)10 SSC溶液:称取87.66gNaCl和44.12g柠檬酸三钠,分别溶解,一起定容至1000ml。3)1 SSC溶液:用10 SSC溶液稀释10倍。 4)0.1 SSC溶液:用1 SSC溶液稀释10倍。 5)Rnase溶液:用0.14mol/LNaCl溶液配制成25mg/ml 的酶液,用1mol/LHCl,pH至5.0,使用前经80℃水浴处理5min(以破坏可能存在的Dnase)。 6)氯仿-异戊醇:按24ml氯仿和1ml异戊醇混合。 7)5mol/L高氯酸钠溶液:称取NaClO4.H2O 70.23g,先加入少量蒸馏水溶解再容至100ml。 8) SDS(十二烷基硫酸钠)化学试剂的重结晶:将SDS放入无水酒精中达到饱和为止,然后在70~80℃的水浴中溶解,趁热过滤,冷却之后即将滤液放入冰箱,待结晶出现再置室温下凉干待用。 9) 1mol/LHCl。 10) 0.2mol/LNaOH。 11) 二苯胺乙醛试剂:1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中,添加1.5ml 浓硫酸,装入棕色瓶,贮存暗处,使用时加0.1ml乙醛液[浓乙醛:H2O=1:50(V/V)]。 12) 1.0mol/L高酸溶液(HClO4)。 13) 0.05mol/LNaOH。 14) DNA标准液:取标准DNA25mg 溶于少量0.05mol/L NaOH中,再用0.05mol/LNaOH定容至25ml,后用移溶管吸取此液5ml至50ml容量瓶中,加5.0ml1mol/LHClO4,混合冷却后用0.5mol/LHClO4定容至刻度,则得100μg/ml的标准溶液。 (二)实验步骤:

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