血液细胞形态学检查标准操作程序

血液细胞形态学检查标准操作程序

一．目的：指导血液细胞形态学的检查。

二．该SOP变动程序：本操作程序的改变，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报下述人员批准：专业负责人、科主任。

三．具体内容

（一）原理：将血液制成细胞分布均匀的薄膜涂片，用瑞氏—吉姆萨复合染料染色后，在光学显微镜下油镜观察各类细胞的形态特征及数量变化，对血液系统及某些感染疾病有辅助诊断及疗效观察等意义。

（二）标本要求：

1.采血后推制厚薄适宜的血膜片，血膜应呈舌状，头、体、尾清晰可分。

2.推好的血膜应在空气中晃动，以促使其快干，以免细胞变形缩小。

（三）试剂准备：瑞氏—吉姆萨复合染液。

（四）仪器、器材要求：显微镜、洁净载玻片。

（五）操作具体步骤：

1.染色：平置玻片于染色架上，滴加染色液3～5滴，使其迅速盖满血膜约1min后，滴加

缓冲液5～10滴，轻轻摇动玻片或对准血片吹气，与染液充分混合，10～20min后用水冲去染液待干。

2.选择涂片细胞分布厚薄适宜、染色良好的区域在油镜下观察各类细胞的形态及数量变

化。

（六）结果判断

1.红细胞：正常形态呈双凹圆盘状、无核、平均直径7.2μｍ，染粉红色，外周血中无有核红细胞、异常形态红细胞量小于1％。

2.白细胞：正常外周血中白细胞分为中性杆状核粒细胞占1％～5％，中性分叶核粒细胞占50％～70％，嗜酸性粒细胞占0.5％～5％，嗜碱性粒细胞占0～1％，淋巴细胞占20%～40%，单核细胞占3%～8%，无幼稚细胞。

3.血小板：正常形态呈椭圆形及不规则形，无核、胞质中有嗜苯胺蓝颗粒，直径约2～4μｍ，多为2μｍ左右，呈单个或成堆分布。

（七）干扰因素

1.涂片要新鲜，涂片自然晾干后立即进行染色，如特殊情况下，一般不超过一周，否则，细胞蛋白质变性，使染色偏碱。

2.染色时间长短除与气温有关外，也与细胞增生情况、各批染液的性能有关，故要求将染色中的涂片在显微镜下观察，待颗粒清楚、核浆分明，着色满意后才终止染色，冲洗晾干待检。

3.染色过深得涂片可用瑞氏染液滴加于涂片上，马上冲洗；染色过浅可重染，先加缓冲液再加染色液，混合后复染到需要的深度。

（八）临床意义

（一）红细胞分布异常

1.红细胞分布异常：红细胞呈缗钱状分布，见于多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、高纤维蛋白原血症等，红细胞聚集成堆见于冷凝集素血症。

2.红细胞大小及染色异常

a.低色素性小红细胞增多：见于缺铁性贫血、海洋性贫血、骨髓增生异常综合症等。

b.正色素性或高色素性大红细胞增多，见于巨幼细胞性贫血、抗核酸代谢药物等影响。

3.异性红细胞

a.球形红细胞增多：见于遗传性球形红细胞增多症（常大于25%）、自身免疫性溶血性贫血等。

b.椭圆形红细胞增多：见于遗传性椭圆形红细胞增多症（常大于25%）、巨幼细胞性贫血等。

c.口形红细胞增多：见于遗传性口形红细胞增多症、弥漫性血管内凝血、酒精中毒等。

d.靶形红细胞增多：见于海洋性贫血、某些血红蛋白病、脾切除术后等。

e.镰形红细胞增多：主见于镰状红细胞型贫血。

f.红细胞形态不整：如三角形、泪滴形、盔形、新月形、尾形、星形、棘形等，畸形红细胞增多主见于弥漫性血管内凝血及严重巨幼细胞性贫血等。

4.红细胞内异常结构出现

a.嗜碱性点彩红细胞增多：见于重金属中毒及较严重的增生性贫血。

b.染色质小体（Howell_Jolly小体）：常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血、脾切除术后等。

c.卡波环（Cabot环）：常见于巨幼细胞性贫血、溶血性贫血等。

5.有核红细胞增多:正常人外周血一般无有核红细胞，在溶血性贫血、白血病、骨髓转移癌、骨髓外造血症等外周血中可见数量不等的幼红细胞增多。

（二）白细胞形态异常

1、中性粒细胞形态异常

（1）大小不均：见于一些病程较长的化脓性质症

（2）中毒颗粒：见于较严重的化脓菌感染及大面积烧伤等。

（3）空泡变性：常见于严重感染，特别是败血症时易见。

（4）Dohle小体：见于严重感染。

（5）核变性：包括核固缩、溶解、破碎等，见于严重感染。

（6）核左移：即外周血中杆状核粒细胞增多，严重者出现晚幼粒、中幼粒甚至早幼粒细胞增多，常见于急性化脓性感染、急性中毒、急性溶血反应等。

（7）核右移：正常人外周血中性粒细胞以分三叶为主，若分五叶者大于3%称为核右移，主要见于巨幼细胞贫血及抗核酸代谢药物治疗时。

无菌检测操作规程

无菌操作规程 1.目的 建立无菌检查标准操作规程，确保检查结果准确、可靠。 2.适用范围 本公司无菌产品的无菌检查 3.职责 质量部QC 4.依据 2015版《中国药典》通则1101 5.内容 5.1无菌检查环境保障 5.1.1无菌检查的所有操作均需在严格控制微生物污染的环境下进行，即无菌检查应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行。 5.1.2操作环境的无菌保障程度将直接影响无菌检查结果，为了保证无菌检查用洁净室（区）环境的稳定性，确保检查结果的可靠性，对洁净室（区）的环境定期检测并采取合理的措施保证洁净环境符合要求。 5.1.3无菌检查全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 5.1.4洁净区的温度、湿度等参数必须符合相应洁净级别的要求 5.1.5无菌检查操作还需要对环境进行监控， 5.2培养基、稀硫酸、缓冲液 5.2.1硫乙醇酸盐流体培养基，市售培养基干粉。除另有规定，接种后应置30-35℃培养。 5.2.2胰酪大豆胨液体培养基，市售培养基干粉。接种后应置20-35℃培养。 5.2.3中和或灭活用培养基，按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法实用性试验。 5.2.4胰酪大豆胨琼脂培养基，市售培养基干粉。 5.2.5沙氏葡萄糖液体培养基，市售培养基干粉。 5.2.6沙氏葡萄糖琼脂培养基，市售培养基干粉。 5.2.7PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，市售培养基干粉。 5.2.80.9%无菌氯化钠溶液。 5.2.9培养基使用性检查 无菌检查用的硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基等应符合培养基的无菌性检查及灵敏度检查的要求。本检查可在供试品的无菌检查或与供试品的无菌检查同时进行5.2.9.1无菌性检查：每批培养基随机取5支（瓶），按各培养基规定的温度下培养14天，用无菌生长。 5.2.9.2灵敏度检查 5.2.9.2.1菌种：培养基灵敏度检查所用的菌株传代数不得超过5代（从菌钟存中心获得的干菌种第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以证试验菌株的生物学特性。 金黄色葡萄球菌【CMCC(B)26 003】 铜绿假单胞菌[CMCC(B)10 104] 枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501] 生孢梭菌[CMCC(F)64 941] 白色念球菌[CMCC(F)98 001] 黑曲霉[CMCC(F)98 003]

临床输血技术标准操作流程.介绍

输血标本采集规范 1、查看输血申请单，询问病史，查对输血申请单上病人姓名、性别、年龄等项目与病人是否吻合。 2、请患者准备，对孩子应多哄劝，避免剧烈躁动、哭闹。对于紧张或有晕血史的病人要进行安慰。 3、采血器材准备，选择相应的真空采血管并记录采集时间。 4、选择穿刺血管：扎好压脉带，观察血管走向，选择穿刺点，正在输液的病人绝对不可同侧采血，更不可以利用原有的输液针头采血。 5、消毒：以穿刺点为圆心，用蘸有碘伏的棉签由内到外螺旋型涂抹，消毒范围为直径大约5厘米，注意消毒过的地方不能重复涂抹，在涂抹的过程中棉签必须也要同时旋转。 6、采样及混匀：等待碘伏干了以后，再次扎好压脉带，将针头平面朝上与手臂成15°刺，最好一针见血。拔出采血管后立即进行颠倒8次混匀。在抽学时要询问病人感受（如有无心慌，头晕等情况），当出现异常时如：病人出汗、面色苍白、晕倒时立即拔出针并急救；操作失败，取得病人谅解，再次进行操作。采样尽量在1分钟内完成。 7、止血：采血结束后，解开压脉带，退针后请病人“手指压住棉球，手伸直抬高于心脏，保持两分钟”（如果是有出血倾向患者如紫癜，ITP，血液病等要压迫5～10分钟直到无血渗出）。 8、送检：抽血后立即在试管写上病人的姓名、科别、床号，由医护人员或专门人员将受血者血样与输血申请单送交输血科,双方逐项核对。

输血查对制度 一、采集血样查对 1、接医嘱后，认真核对姓名、床号、输血申请单。 2、采集血样前，2人再次核对姓名、床号、年龄、性别、病案号、血型，在试管上写上病人的姓名、科别、床号。 3、采集血样时，必须一人一次，如同时输2人或2个以上人的血，应分别执行。 4、将血样及输血申请单同时送至输血科并与对方逐项核对。 二、去输血科取血与发血者共同核对，内容为： 1、交叉配血试验单：受血者姓名、科别、血型、血液成分、有无凝集反应、病案号。 2、检查血袋标签：血袋号、血型、血液有效期、储血号。 3、检查血袋有无破裂或渗漏、血袋内血液有无溶血或凝块，是否有细菌污染迹象。核对无误后双方在交叉配血试验单上签字。 三、血液领到病房后2人共同逐项核对 1、受血者姓名，床号，血型，血液成分，有无凝集反应，病案号，血袋号，血型，血液有效期，储血号。 2、再次检查，血袋有无破裂渗漏，血液有无凝集或溶血、是否有细菌污染迹象。 3、输血前后用生理盐水冲洗皮条，输2袋血之间应用生理盐水冲洗。 注意事项： 1、禁止同时采集2个人的血标本，输2个人或2个以上病人的血液，应分别执行。 2、血液切勿振荡，加温，血液领会后应在30分钟内输用。 3、输血过程应严密执行无菌操作，不可随意加入任何药物，防止血液凝集或溶解。 4、输血病人应做到三查八对。 5、输血病人24小时三班交班。 6、按临床输血管理制度执行。

血细胞形态特征和常见血液病的血液学特征

血细胞形态特征和常见血液病的血液学特征 第一节血细胞的生成、发育规律及正常形态学特征 一、血细胞的生成： （一）红细胞系统（红系） 多能干细胞髓系干细胞红系祖细胞 原红早幼红中幼红晚幼红网织红红细胞 分裂次数 1次 1次 2次无 故一个原红可生成16个红细胞。 （二）粒细胞系统（粒系） 多能干细胞髓系干细胞粒单系祖细胞粒系祖细胞 原粒早幼粒中幼粒（三种）晚幼粒杆状核粒细胞分叶核粒细胞分裂次数 1次 1次 2-3次无 故一个原粒可生成16个以上成熟粒细胞。 （三）单核细胞系统 多能干细胞-------------单核细胞 -------进入组织成为组织细胞---------抗原刺激成为巨噬细胞。 （四）淋巴浆细胞系统 全能干细胞淋系干细胞淋系祖细胞（B）原始淋巴（B）幼稚淋巴细胞（B）淋巴细胞（B）原始浆细胞幼稚浆细胞浆细胞 （五）巨核细胞系统 多能干细胞---------------产板巨------裸核、血小板 二、各期细胞正常形态学特征 【红细胞系统】 （一）各期红细胞的形态特点 1．原始红细胞（pronormoblast）： 胞体：直径15~20μm、圆形或椭圆型，边缘常有钝角状或瘤状突起。 胞核：圆形、居中或偏于一旁，约占细胞直径的4/5，核染色质呈颗粒状，比原始粒红细胞粗而密，核仁1-2个，大小不一，染浅蓝色。 胞质：量少，深蓝色，不透明，有油画蓝感，在核周围常形成淡蓝区。 2. 早幼红细胞（eary normoblast） 胞体：直径10-18μm、圆形或椭圆型。 胞核：圆形或椭圆型，占细胞2/3以上，居中或稍偏位，核染色质可浓集成粗密小块，较原红细胞粗糙，核仁模糊或消失。 胞质：量多，染不透明蓝或深蓝色，仍可见瘤状突起及核周淡蓝区。

GMP-无菌检查操作规程

1.目的： 建立无菌检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。 2.范围： 适用于本厂质监科化验室对本厂生产的注射剂进行无菌检查。 3.责任： 化验员有责任按本操作规程操作，并对检验结果负责。 4.定义： 无菌检查法系指检查药品是否无菌的一种方法。 5.内容： 5.1无菌操作设备： 无菌操作室或超净工作台，无菌衣、口罩、帽子、消毒鞋、酒精灯等。5.1.1无菌室分无菌操作室和缓冲间。在缓冲间内应有洗手盆、干手器、无菌衣放置架及挂钩、拖鞋等。无菌操作室应具有空气除菌过滤的层流装置，局 部洁净度100级超净工作台。缓冲间及操作室内均设置能达到空气消毒的紫外光灯和照明灯，操作室或工作台应保持空气正压。 5.1.2无菌室应每周和每次操作前用0.1％新洁尔灭或2％甲酚液擦拭操作台及可能污染的死角，开动无菌空气过滤器及紫外光灯杀菌1小时。在每次操作完毕，同样用2％甲酚或0.1％新洁尔灭溶液擦拭工作台面，用紫外光灯杀菌半小时。 5.1.3无菌室的无菌程度检查：无菌室在消毒处理后，无菌试验前及操作过程中需检查空气中菌落数。取直径90mm双碟，在接种室内点燃酒精灯，在酒精灯旁，以无菌操作，将双碟半开注入溶化的营养琼脂培养基约20ml，制成平板：

在35-37℃预培养48小时，证明无菌后将3个平板以无菌方式带入无菌操作间的洁净区域左、中、右各放1个；打开碟盖扣置，平板在空气中暴露30分钟后将盖盖好，置35-37℃培养48小时，取出检查，3个平板上生长的菌落数相加总数不得超过10个。 无菌操作台面或超净工作台应定期请有关部门检测其洁净度，应达到100 级（一般用尘埃粒子计数仪），检测尘埃粒径≤5μm的粒数不得超过3.5个／升；空气流量应控制在0.75-1.0m3/s；细菌菌落数平均<1个，可根据无菌状况定期置换过滤器。 5.1.4无菌室内应准备好盛有消毒用5％甲酚的玻璃缸、酒精灯、火柴、镊子、75％酒精棉及拖鞋等。 5.2仪器、用具： 5.2.1真空泵、恒温培养箱、生物显微镜、托盘天平（精度0.1g）、抽滤瓶（500ml）、三角瓶（100、500 ml）、移液管（1、10ml）、注射器（要求规格）、试管、双碟（9cm）、注射针、镊子、剪刀、白金耳、橡皮管、纱布、棉花（原棉）、不锈钢吸管筒、接种环、微孔滤膜（直径约5cm），孔径应在0.45±0.02μm )载玻片、洒精灯、取样勺、吸耳球、喷雾瓶。 5.2.2用具的包扎： 5.2.2.1移液管 在移液管上端管内,松松地塞进少许原棉,然后放入不锈钢灭菌筒内。 5.2.2.2试管 在管口塞上纱布棉塞。 5.2.2.3无菌衣、裤、帽、口罩

无菌技术操作流程及评分标准

无菌技术操作流程 开始：各位老师下午好，我操作的项目是无菌技术操作。 1.无菌技术操作的目的：保持无菌物品无菌区域不被污染，防止一切微生物侵入机体，避免给患者带来不应有的损失和危害 2.环境评估：操作前30分钟停止清扫，操作中减少人员走动，开窗、通风、换气，操作台宽敞、平坦、整洁、干燥。 3.用物准备：治疗盘无菌包：包内置无菌巾若干无菌容器内置无菌持物钳棉签无菌包：内置治疗碗一个，镊子两把，弯盘一个无菌纱布罐无菌棉球罐无菌生理盐水一次性无菌手套 铺无菌盘 1.洗手戴口罩。 2.治疗盘清洁，干燥。铺无菌换药盘。 3.开无菌包：化学指示胶带有变色，在有效期内，无潮湿、无破损。斜角打开（打开无菌包内角时，手不可触及包布内面，不得跨越无菌区域）看化学指示卡，有变色。用无菌持物钳夹取一块无菌巾放入治疗盘内，将无菌包按原折痕“一字”包好后，看时间：记录日期、时间、并签名、24小时内有效。 4.铺无菌巾：双手捏住无菌巾一侧两角外面轻轻抖开，由近及远的将治疗巾一半铺于治疗盘上，将上下对齐后上层扇形折三次，开口外边向外，使治疗巾内面构成一无菌区。 5.开无菌包，前述指示胶带变色，在有效期内，侧孔、底孔闭合 1）打开无菌包，看化学指示卡变色 2）用无菌钳分别取治疗碗（内含两把镊子）、弯盘入无菌盘内。 3）打开无菌纱布罐夹取纱布置无菌盘内；同法夹取无菌棉球置治疗碗内（手不可触及容器边缘或内侧），无菌容器盖内面朝下直接盖上。 6.倒无菌溶液：（拿起溶液瓶，看瓶签）述：瓶身干净，标签完整、字迹清楚，0.9%Nacl500ml，在有效使用期内，瓶盖无松动，瓶身瓶底无无裂缝，对光检查：溶液澄清、无杂质。除盖：查棉签（无漏气，在有效试用期内）写好开包日期，消毒瓶盖、手指，开瓶盖。倒溶液于治疗碗内，再次消毒瓶口，盖回瓶盖看时间：记录日期、时间、签名，24小时有效。 7.铺完盘，看时间口述：记录名称、时间并签名（小标签贴于盘缘）、4小时内有效。述：已铺好换药盘，可以给病人进行换药护理。一份无菌物品只供一位病人使用，以防交叉感染。 8.注意事项：在操作中应注意：无菌容器盖放于稳妥处时，应内面朝上。到远处夹取无菌物品，应同时搬移无菌持物钳和容器。无菌持物钳和浸泡容器每周灭菌2次，同时更换消毒液，干燥保存4小时更换一次 带无菌手套 1．目的：用于进行无菌操作，防止患者受到感染，用于接触某些无菌物品或区域，保持无菌物

无菌检查操作规程2015 (1)

无菌检查操作规程 1.目的 建立无菌检查标准操作规程，确保检查结果准确、可靠。 2.使用范围 本公司无菌产品的无菌检查 3.职责 质量部QC 4.依据 2015版《中国药典》通则1101 GB/T 19973.2-2005（ISO11737-2:1998） 《疗器械的灭菌微生物学方法第2部分：确认灭菌过程的无菌试验》 GB/T 14233.2-2005 《医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分：生物学试验方法》 5.内容 5.1.无菌检查环境保障 5.1.1.无菌检査的所有操作均需在严格控制微生物污染的环境下进行，即无菌检 査应在环境洁净度10000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内或隔离系统中进行。 5.1.2.操作环境的无菌保障程度将直接影响无菌检查结果，为了保证无菌检查用 洁净室（区）环境的稳定性，确保检查结果的可靠性，对洁净室（区）的环境定期监测并采取合理的措施保证洁净环境符合要求。 5.1.3.无菌检查全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 5.1.4.洁净区的温度、湿度等参数必须符合相应洁净级别的要求。 5.1.5.无菌检查操作还需要对检查环境进行监控， 5.2.培养基、稀释液、缓冲液 5.2.1.硫乙醇酸盐流体培养基，市售培养基干粉。除另有规定，接种后应置 30~35℃培养。 5.2.2.胰酪大豆胨液体培养基，市售培养基干粉。接种后应置20~35℃培养。 5.2.3.中和或灭活用培养基，按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培

养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法适用性试验。 5.2.4.胰酪大豆胨琼脂培养基，市售培养基干粉。 5.2.5.沙氏葡萄糖液体培养基，市售培养基干粉。 5.2. 6.沙式葡萄糖琼脂培养基，市售培养基干粉。 5.2.7.PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲液，市售培养基干粉。 5.2.8.0.9%无菌氯化钠溶液。 5.2.9.培养基使用性检查 无菌检査用的硫乙醇酸盐流体培养基和胰酪大豆胨液体培养基等应符培养基的无菌性检査及灵敏度检査的要求。本检查可在供试品的无菌检査或与供试品的无菌检査同时进行。 5.2.9.1.无菌性检查：每批培养基随机取5支（瓶），按各培养基规定的温度下 培养14天，应无菌生长。 5.2.9.2.灵敏度检查 5.2.9.2.1.菌种：培养基灵敏度检查所用的菌株传代数不得超过5代(从菌种存中 心获得的干菌种第0代），并采用适宜的菌种保藏技术进行保存，以 证试验菌株的生物学特性。 金黄色葡萄球菌[CMCC(B)26 003] 铜绿假单胞菌[CMCC(B)10 104] 枯草芽孢杆菌[CMCC(B)63 501] 生孢梭菌[CMCC(B)64 941] 白色念珠菌[CMCC(F)98 001] 黑曲霉[CMCC(F)98 003] 5.2.9.2.2.菌液制备：接种金色葡萄球菌、铜绿假胞菌、枯草芽孢杆菌的培养物 至胰酪大豆胨液体培养基中或胰酪大豆胨琼脂培养基上，接种生孢梭 菌的培养物至硫乙醇酸盐流体培养基中，30?35℃培养18?24小时； 接种白色念珠菌的培养物至沙氏葡萄糖液体培养基中或沙氏葡萄糖琼 脂培养基上，20?25℃培养24?48小时，上述培养后的新鲜培养物用 PH7.0无菌化钠-蛋白胨缓冲液或0.9%无菌化钠溶液制成每lml菌数小

无菌检查法标准操作程序

1目的 建立一个无菌检查法标准操作程序，保证实验的准确性、可靠性。 2范围 适用于原料、辅料及成品的无菌检查。 3职责 微生物检验员遵照执行。 4内容 无菌检查法系用于检查药典要求无菌的药品、生物制品、医疗器具、原料、辅料及其他品种是否无菌的一种方法。若供试品符合无菌检查法的规定，仅表明了供试品在该检验条件下未发现微生物污染。 无菌检查应在无菌条件下进行，试验环境必须达到无菌检查的要求，检验全过程应严格遵守无菌操作，防止微生物污染，防止污染的措施不得影响供试品中微生物的检出。单向流空气区、工作台面及环境应定期按医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法的现行国家标准进行洁净度确认。隔离系统应定期按相关的要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。日常检验还需对试验环境进行监控。 4.1 培养基 硫乙醇酸盐流体培养基主要用于厌氧菌的培养，也可用于需氧菌的培养；胰酪大豆胨液体培养基用于真菌和需氧菌的培养。 4.1.1 培养基的制备及培养条件 培养基可按以下处方制备，亦可使用按该处方生产的符合规定的脱水培养基或成品培养基。配制后应采用验证合格的灭菌程序灭菌。制备好的培养基应保存在2?25°C、避光的环境，若保存于非密闭容器中，一般在3 周内使用；若保存于密闭容器中，一般可在一年内使用。 4.1.1.1 硫乙酵酸盐流体培养基

胰酪胨15. 0g 氯化钠 2. 5g 酵母浸出粉 5. 0g 新配制的0. 1 % 刃天 无水葡萄糖 5.0g 青溶液 1.0ml L-胱氨酸0. 5g 琼脂0. 75g 硫乙醇酸钠0.5g 水1000ml (或硫乙醇酸）（0.3ml) 除葡萄糖和刃天青溶液外，取上述成分混合，微温溶解，调节p H 为弱碱性，煮沸，滤清，加入葡萄糖和刃天青溶液，摇匀，调节p H , 使灭菌后在25℃的p H 值为7.1 土0.2。分装至适宜的容器中，其装量与容器高度的比例应符合培养结束后培养基氧化层（粉红色)不超过培养基深度的1/2。灭菌。在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100°C水浴加热至粉红色消失（不释过2 0分钟），迅速冷却只限加热一次，并防止被污染。 除另有规定外，硫乙醇酸盐流体培养基置30?35C培养。 4.1.1.2 胰酪大豆胨液体培养基 胰酪胨 1 7 . 0g 氯化钠 5.0g 大豆木瓜蛋白酶水解物 3. 0g 磷酸氢二钾 2. 5g 葡萄糖/无水葡萄糖 2. 5g/2. 3g 水1000m l 除葡萄糖外，取上述成分，混合，微温溶解，滤过，调节p H 使灭菌后在2 5℃的p H 值为7. 3±0. 2，加入葡萄糖，分装，灭菌。 胰酪大豆胨液体培养基置20?2 5 ℃培养。 4.1.1.3 中和或灭活用培养基 按上述硫乙醇酸盐流体培养基或胰酪大豆胨液体培养基的处方及制法，在培养基灭菌或使用前加入适宜的中和剂、灭活剂或表面活性剂，其用量同方法适用性试验。 4.1.1.4 0.5% 葡萄糖肉汤培养基(用于硫酸链霉素等抗生素的无菌检查） 胨 1 0 . 0g 氯化钠 5 . 0g 牛肉浸出粉 3 . 0g 水1000m l 葡萄糖 5. 0g 除葡萄糖外，取上述成分混合，微温溶解，调节p H 为弱碱性，煮沸，加入葡萄糖溶解后，摇匀，滤清，调节pH使灭菌后在25℃的p H 值为7. 2士0.2，分装，灭菌。 4.1.1.5 胰酪大豆胨琼脂培养基 胰酪胨15.0g 琼脂 1 5 . 0g

正常血细胞形态学检验

一、正常粒细胞系统形态？ 1、原始粒细胞：胞体直径10~18μm，圆形或类椭圆形。胞核较大，约占细胞的2/3以上，圆或类椭圆形，居中或略偏位，核染色质呈细砂粒状，均匀、平坦如一层薄砂，无浓集。核膜薄较模糊，染成淡红色。核仁2~5个，较小，清楚。胞质量少，染成淡蓝或深蓝似天蓝色，透明绕于核周，无颗粒。过氧化物酶染色阴性，但后期有时也可呈阳性反应。 2、早幼粒细胞：胞体直径12~20μm，较原粒细胞大，圆或椭圆形。胞核大，圆或类椭圆形，位于中央或偏位。核染色质呈粗粒状，较原粒粗，开始聚集。核仁可见或消失。胞质量较多，呈淡蓝、蓝或深蓝色，浆内含大小、形态和多少不一的紫红色非特异的天青胺蓝颗粒，分布不均。过氧化物酶染色阳性。 3、中幼粒细胞： （1、）中性中幼粒细胞：胞体直径10~18μm，圆形。胞核椭圆形或一侧开始扁平，，染色质聚集呈索块状，核仁消失。胞质量多，淡红色，内含中等量、大小较一致的特异的中性颗粒，常伴有少数非特异性颗粒。 （2）嗜酸性中幼粒细胞：胞体直径15~20μm，胞核与中性中幼粒细胞相似。胞质内充满粗大、均匀、排列紧密、橘红色的特异性的嗜酸性颗粒。 （3）嗜碱性中幼粒细胞：胞体直径10~15μm，胞核椭圆形，轮廓不清楚，核染色质较模糊。胞质内及核上含有数量不多、排列零乱、大小不等的紫黑色特异的嗜碱性颗粒。 4、晚幼粒细胞 （1、）中性晚幼粒细胞：胞体直径10~16μm，呈圆形。胞核明显凹陷呈肾形、马蹄形、半月形，但其核凹陷程度一般不超过核假设直径的一半。核染色质粗糙，排列更紧密，核仁消失。胞浆量多，染浅红色，充满中性颗粒。 （2、）嗜酸性晚幼粒细胞：胞体直径10~16μm，胞核在中央或偏一侧，呈肾形或椭圆形。核质充满着嗜酸性颗粒，其颗粒粗大呈橘红色，大小一致，但有时见到深褐色或紫棕色颗粒。 （3、）嗜碱性晚幼粒细胞：胞体直径10~14μm。胞核固缩呈肾形，轮廓模糊。胞质内及核上含有少量、分布不匀的嗜碱性颗粒。 5、杆状核粒细胞： （1、）中性杆状核粒细胞：胞体直径10~15μm，圆形。胞核凹陷程度超过核假设直径的一半，核径最窄处大于最宽处1/3以上，形态弯曲成带状，粗细均匀，核染色质粗糙呈块状，也可见核呈“S”形、“U”形或“E”形，核两端钝圆染深紫红色。胞质充满中性颗粒。 （2、）嗜酸性杆状核粒细胞：胞体直径11~16μm，圆形。胞核与中性杆状粒细胞相似。胞质充满着粗大的橘红色嗜酸性颗粒。 （3、）嗜碱性杆状核粒细胞：胞体直径10~12μm。胞核呈模糊杆状。胞质内及胞核上含有紫黑色、大小不匀、数量较少的嗜碱性颗粒。 6、分叶核粒细胞： （1、）中性分叶核粒细胞：胞体直径10~14μm，圆形。胞核分叶状，叶与叶之间有细丝相连或完全断开，或者虽未断开，但有粗而明显的切痕。核常分2~5叶，核染色质浓集或呈较多小块，染深紫红色。胞质丰富，染淡红色，浆内分布着细小紫红色中性颗粒。 （2、）嗜酸性分叶核粒细胞：胞体直径11~16μm。胞核多分为两叶。胞质充满着粗大呈橘红色嗜酸性颗粒。 （3、）嗜碱性分叶核粒细胞：胞体直径10~12μm。胞核可分3~4叶或分叶不明显，常融合呈堆集状。胞质嗜碱性颗粒呈紫黑色，大小不一，分布不均，常掩盖在核上，以致核的形态看不清，有时很难确定为哪一个阶段细胞。

无菌检查法标准操作规程

无菌检查法标准操作规程 目的： 建立无菌检查的基本操作，为无菌检查人员提供正确的操作规程。 2.依据： 《中华人民共和国药典》2000年版二部。 3.范围： 本标准适用于QC无菌检查的操作。 4. 职责： QC无菌检查人员对本标准的实施负责。 5.程序： 5.1. 定义： 无菌检查法：系指检查药品、无菌器具及适用于药典要求无菌检查的其它品种是否无菌的一种方法。 5.2. 无菌操作室应具有空气除菌过滤的层流装置，局部洁净度100级或放置同等级别的超净工作台，室内温控（18~26）℃及除湿装置，操作室或工作台应保持空气正压。 5.2.1. 无菌室的清洁与消毒应符合QC洁净室清洁、消毒规程（SOP ZL0014）。 5.2.1.无菌室无菌程度的检查应符合规定：见沉降菌监测规程（SOP ZL0006）、悬浮粒 子监测规程（SOP ZL0005）。 实验设备及用具： 5.3.1.电热干燥箱、电热手提式压力蒸汽灭菌器、电热恒温培养箱、试管、注射器、针头、试管架、刻度吸管、手术剪、手术镊、砂轮、注射器盒、搪瓷托盘、双碟、75%酒精棉球、无菌工作服（衣、裤、帽、口罩等）。 5.3.2.微孔滤膜：直径50mm、孔径0.45μm，应符合规定。 5.3.3.除菌滤器： 除菌滤器采用的是HTY-2000型全封闭式薄膜过滤器。 5.3.4. 所有进入无菌室的物品必须经过消毒或灭菌，应严格按照进入QC无菌室物品清洁、消毒、灭菌规程（SOP ZL0015）进行操作。

5.4. 稀释剂：灭菌注射用水。 5.5. 培养基： 5.5.1.需气菌、厌气菌培养基（流体硫乙醇酸盐培养基）；真菌培养基。 5.5.2. 培养基的使用，配制、管理及灵敏度检查应按照培养基管理规程（SMP ZL0036）、培养基灵敏度检查规程（SOP ZL0019）、培养基配制规程（SOP ZL0016）进行操作。 5.6. 对照用菌液： 5.6.1. 金黄色葡萄球菌（Staphyoccus sureus）菌液：取金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26 003]的营养琼脂斜面新鲜培养物1白金耳，接种至营养肉汤培养基内，在30~35℃培养16~18小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10~100个菌。 5.6.2. 生孢梭菌（Clostridum sporgenes）菌液：取生孢梭菌[CMCC（B）64 941]的需气菌、厌气菌培养基新鲜培养物1白金耳，接种至相同培养基内，在30~35℃培养18~24小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至1ml中含10~100个菌。 5.6.3. 白色念珠菌（Candida albicans）菌液：取白色念珠菌[CMCC（F）98 001]的 真菌琼脂培养基斜面新鲜培养物1白金耳，接种至真菌培养基内，在20~25℃培养24小时后，用0.9%无菌氯化钠溶液稀释至每1ml中含10~100个菌。 5.7. 操作法： 5.7.1. 供试品、培养基在移入缓冲间之前应先编号，并用75%酒精棉球擦拭瓶（管）外壁，然后连同其它用具（包括无菌衣、帽、口罩等）移入缓冲间，打开无菌间紫外光 灯和空气过滤装置开关，并使其工作在30分钟以上。 5.7.2. 将所需物品移入无菌室，每次试验中所用物品，必须计划好，并有备用物。操作人员进入无菌室应严格遵守QC洁净室进出规程（SOP ZL0013）。 5.7.3. 供试品外部消毒： 5.7.3.1. 橡皮塞、铝盖、压封小瓶：先用75%酒精棉球擦拭外壁及瓶塞，待干，用消毒镊子剔去铝盖上的铝质小圆片，用酒精棉球擦拭瓶盖及橡皮塞，并将酒精棉球盖于橡皮塞上待取样。 5.7.3.2. 安瓶：先用酒精棉球将安瓶外部擦拭消毒待干，用砂轮轻轻割安瓶颈部，便于折开安瓶。 5.7.4. 供试品溶液的制备：取供试品加入该药品项下规定的稀释剂用量，制成该药品项下规定浓度的供试品溶液。 5.7.5. 根据供试品的抑真菌和抑细菌试验，判定该供试品有无抑菌性，而决定采用直接

输血管理制度、操作及处理流程

输血管理制度、操作及处理流程 （一）输血安全制度 1.接到输血医嘱后，两名医护人员持输血申请单和贴好标签的试管，当面核对患 者姓名、性别、年龄、住院号、病室/门急诊、床号、血型和诊断，采集血样。 2.由医院专门人员将血标本与输血申请单送交血库。双方进行逐项核对。 3.接到血库通知可以取血后，先测量患者体温，体温正常者通知血库送血；高热 者通知医生。 4.运送中心送血到病房后，经两名医护人员进行三查后签收。 5.输血前由两名医护人员持受血者病历、交叉配血报告单、血袋共同核对：①血 型检验报告单上的病人床号、姓名、住院号、血型；②供血者和受血者的交叉配血结果； ③血袋采血日期、有效期，血液有无凝血块或溶血，封口是否严密，有无破损；④输血 单与血袋标签上的受、供血者姓名、血型、血袋号及血量是否相符。核对无误后，由两人在交叉配血报告单上签全名。 6.输血时，两名医护人员带病历共同到患者床旁再次对上述项目进行核对，同时 让病人自诉姓名及血型（包括Rh因子）,有疑问时应再次查对。核对无误后，开始输注。 用符合标准的输血器进行输血。 7.取回的血应尽快输用，输用前将血袋内的成分轻轻混匀，避免剧烈震荡。血液 内不得加入其它药物，如需稀释只能用静脉注射生理用盐水。不得自行储血。不得长时间放在温室中或置于无温度监控的冰箱中。血液发出后原则上不能退回，如因故未能及时输注，血液离开冰箱超过30分钟，由迹象表明血袋已被打开或有任何现象应当报废。 8.输血前后用静脉注射生理盐水冲洗输血管道。连续输用不同供血者的血液时， 前一袋血输尽后，用静脉注射生理盐水冲洗输血器，再接下一袋血继续输注。连续输血时，输血器12小时更换一次。 9.输血过程中应先慢后快，再根据病情和年龄调整输注速度，并严密观察受血者 有无输血不良反应，如出现异常情况应及时处理。 （1）减慢或停止输血，用静脉注射生理盐水维持静脉通路； （2）重新核对病历、用血申请单、血袋标签、交叉配血实验记录； （3）立即通知值班医生和血库值班人员。 10．输血的时间限制：血液一旦离开正确的储存条件就有发生细菌繁殖或丧失功能的危险。

无菌检查标准操作程序

无菌检查标准操作程序 1.目的：建立无菌检查标准操作程序，规范检验操作。 2.范围：适用于本公司产品无菌检查—薄膜过滤法的操作。 3.职责：检验人员对本程序的实施负责。 4.本规程的编制依据为2010年版《中华人民共和国药典》二部附录“无菌检查法”中的“薄膜过滤法”。 5.检验环境要求： 5.1本项检查应在环境洁净度C级下的局部洁净度A级的单向流空气区域内或隔离系统中进行。 5.2检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止微生物污染。 5.3单向流空气区、工作台面及环境应按《洁净厂房环境监测规程》（SOP-）及《沉降菌监测的标准操作规程》（SOP-）、《洁净室悬浮粒子数测定的标准操作规程》（SOP-）定期进行洁净度监测。隔离系统按相关要求进行验证，其内部环境的洁净度须符合无菌检查的要求。 6.操作规程： 6.1培养基的准备： 6.1.1培养基的制备：按《培养基配制、灭菌的标准操作规程》（SOP-）制备。 ①硫乙醇酸盐流体培养基（用于培养好氧菌、厌氧菌）。 注意：在供试品接种前，培养基氧化层的高度不得超过培养基深度的1/5，否则，须经100℃水浴加热至粉红色消失（不超过20分钟），迅速冷却，只限加热一次，并应防止污染。 ②改良马丁培养基（用于培养真菌）。 6.2培养基的适用性检查 每批培养基应按《无菌检查的标准操作规程》（SOP-）进行培养基的无菌性检 查及灵敏度检查。 只有本项检查合格的培养基方可用于供试品无菌检查。 本项检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌检查同时进行。 6.3稀释液、冲洗液及其制备方法： 6.3.1 0.1%蛋白胨水溶液取蛋白胨1.0g，加水1000ml，微温溶解，滤清，调节pH值至 7.1±0.2，分装，灭菌。

血液输注护理管理程序

血液输注护理管理程序 1.目的 为保证正确、安全和有效地输入血液，对患者实施输血全程护理，及时发现并处理输血不良反应。 2.适用范围 适用于输注血液的全过程护理及对患者的监护。 3.职责 3.1护士 3.1.1严格执行输血核对制度、《成分输血护理标准操作规程》和无菌操作。 3.1.2在输血过程中严密观察患者，争取早期发现、报告并及时处理各种输血不良反应。 3.1.3负责输血记录及输血相关医疗废物处理。 3.2临床医师 3.2.1负责输血不良反应处理。 3.3输血科（血库） 3.3.1严格执行血液发放核对。 3.3.2配合临床做好输血不良反应的调查、处理工作。 4.管理程序 4.1输血核对管理输血核对须两名医护人员共同参与，输血核对包括血标本送检前核对、取血时核对，血液输注前、中、后核对。输血前核对应包括患者腕带信息、血液信息、《临床输血申请单》、《交叉配血报告单》、血袋核对、及血液外观等。 核对正确无误后，方可输血。 4.2 输血过程管理 4.2.1 输血器选择：输注血液一律使用一次性过滤装置的输血器。 4.2.2 输血速度 （1）输血时要遵循先慢后快的原则。 （2）根据患者具体情况决定。 4.2.3 输血时限 （1）取回的血液应尽快输注，不得自行贮存。 （2）一袋血须在4h内输完。 4.2.4药物禁忌：血液内不得加入其他药物。 4.2.5血液加温：冷藏血不可随意加温，若确需对血液进行加温，只能使用专用加温装置，具体执行《医用输血输液加温器（QW-518Ⅱ型）标准操作规程》 4.2.6加压输血：如果不具备建立更多通道或以建立的通道输血、输血速度不能满足抢救需要时，可以进行加压输血，但应采用专门设计的加压输血器或血泵，具体执行《加压血液输送器（MEDI-QUIC型）标准操作规程》。 4.2.7静脉通道观察：保持血液输注通畅，防止输血管道扭曲、受压；当针头脱落、移位或阻塞时应及时处理。 4.2.8患者的监护：严密观察病情变化，若出现异常情况立即通知临床医师或值班医师，及时采取相应的处理措施。 4.3输血严重危害监控管理包括输血不良反应和经血传播疾病的过程记录、调查分析、处理流程、回报及统计等相关内容。执行《输血不良反应及经血传播疾病管理程序》。 4.4输血后管理完成《输血安全护理单》等输血记录。输血相关医疗废物管理，执行《医疗废物管理规程》。

无菌检测规程

无菌检测规程 1．目的： 建立无菌检查的标准操作规程，确保检验结果的准确性。 2．适用范围 本规程适用于本公司质检科对本厂生产的的无菌检测。 3．引用相关文件 制定本规范参考了下列文件中的一些信息，但没有直接引用里面的条文。凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误的内容）或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 GB/T 14233.2-2005 医用输液、输血、注射器具检验方法第2部分：生物学试验方法《中华人民共和国药典2010年版二部》附录Ⅺ H 无菌检查法 4．设备、用具与试剂 4.1 设备要求 无菌操作室、超净工作台、培养箱、高压消毒锅、高温烘箱。 4.1.1 无菌室应每周用0.1％新洁尔灭或2％甲酚液擦拭操作台及可能污染的死角，每次操作前开动无菌空气过滤器及紫外光灯杀菌1小时。在每次操作完毕，用2％甲酚或0.1％新洁尔灭溶液擦拭工作台面，用紫外光灯杀菌0.5小时。每次使用无菌室都应详细填写无菌室使用记录。 4.1.2 无菌室、超净台在消毒处理完毕后，应检查空气中的菌落数，方法如下：取直径90mm 培养皿，无菌操作注入融化的营养琼脂培养基20ml，在30～35℃培养48h证明无菌后，取3只培养皿在无菌室超净工作台内平均位置打开培养皿上盖，暴露30min后盖好，置30-35℃培养48小时后取出检察， 3只培养皿上生长的菌落数平均不得超过1个。 4.1.3 无菌试验过程中检查空气中的菌落数，方法同上。在试验开始进行时，打开平皿盖在空气中暴露，至试验结束，盖好。照上法培养，应符合上述要求。

临床紧急用血操作规范流程

临床紧急用血操作规程 1 目的 为保障紧急抢救患者情况下临床血液能快速安全输注于临床，制定紧急用血工作操作规程。 2 依据 2.1 《突发公共卫生事件应急条例》 2.2 《艾滋病防治条例》 2.3 《临床输血技术规》 3 指导思想和基本原则 统一领导，分工负责。严格依照国家有关法律法规，对临床紧急用血进行管理，确保输血安全。 4 组织及职责 4.1 为做好临床紧急输血工作，确保紧急用血的顺利实施，成立临床紧急用血协调小组。 组长：医务部主任 副组长：输血科主任 成员：各临床科室主任 4.2 职责 4.2.1 医务部主任负责紧急输血应急工作的统一领导、决策和现场指挥。 4.2.2 医务部负责各科室协调与信息上报，并监督执行操作规程。 4.2.3 输血科负责操作规程的具体实施。 4.2.4 其他各科主任具体负责各部门的应急工作。 5 紧急用血管理操作 5.1经治医师首先为患者建立通畅的静脉通路，最好静脉插管，

通过该插管采集供血型鉴定和交叉配血、传染病筛查试验用的血标本，并同时通知输血科做好紧急用血准备。 5.2输血科在确认库存血液不足时，立即与采供血机构联系，说明哪种血液不能满足紧急输血的需要。 5.3如果有多名医护人员处理多名伤员，此时应指定1名医师负责血液申请并与输血科联络。每个患者的血标本和输血申请单上应清楚地标明患者和唯一性病案号。若无法识别患者（如患者昏迷），可在病案号的基础上加紧急入院号（紧急绿色通道患者号），避免在确认受血者身份和粘贴血标本标签时出错。 5.4如果在短时间发出另外一份针对同一名患者的《临床输血申请单》，应使用与第一份《临床输血申请单》和血标本上相同的标识编号，以便输血科技术人员确认处理的是同一名患者。 5.5急性失血患者如经液体复后收缩压能维持在 10.66kPa(80mmHg)左右可暂不输血，因为患者维持在许可的低血压状态可减缓出血，防止在伤口处形成的一个不结实的止血血栓被血流冲走。 5.6对于低血压急需手术的患者应尽快送手术室。 5.7特别紧急情况下，需要紧急同型输血时，在《临床输血申请单》上标明血液需求的紧急程度，并统一特定用语表达的含义：“火急”：10～15min以；“紧急”：30min以。申请单连同血标本快速送达输血科。血液输用后，经治科室应尽快到医务处审批补办相关手续。 5.8输血科在接到《临床输血申请单》及血标本后，如病情“火急”且不知患者血型情况下，应在10～15min发出第一袋未经交叉配血的O型悬浮红细胞(O型红细胞必须正反定型相符)，并在血袋上标明发血时尚未完成交叉配血试验。此后，应尽快鉴定供、受者血型并根据临床输血需要，发出经交叉配血主侧相合的同型悬浮红

2020年临床输血技术标准操作流程(最新课件)

临床输血技术标准操 作流程 （SOP －培训版) 一、受血者血样采集 操 作流 程 要点说明 ......感谢聆听 采集血样 采血后核对 采血标签、患者、床边卡、腕 严格执行双人核对 治疗室核对 医嘱、《输血治疗同意书》、采血 询问患者输血史，既往有无输血不良反应 严格执行双人查对 着装规范 洗手 严格执行双人查对， 必须采用两种以上的方法对病人身份进行确认 告知 采血的目的、配合事项 双签名，送血库 在试管指定位置进行双签名， 将血样、《江苏省公民临床用 血申请单》（首次输血者）、收费通知单一起送到血库； 废物处理 洗手， 严禁从静脉输液通路中采集血标本 采血时核对 采血标签、患者、床边卡、腕

二、接收血液......感谢聆听 三、输血 接收核对 受血者姓名、床号、住院号、 血型（包括Rh 因子）、血液成分、 用血量、编号、交配试验结果、 核对采血日期、有效期 严格执行双人核对 检查血液质量 色、质、量 凡血液出现下列情形之一的，拒绝接收： 1、标签破损、字迹不清； 2、血袋有破损、漏血； 3、血液中有明显的凝块； 4、血浆呈乳糜状或暗灰色； 5、血浆中有明显气泡、絮状物或粗大颗粒； 6、未摇动时血浆层与红细胞的界面不清或交界面上出现溶血； 7、红细胞层呈紫红色； 8、过期或其他须查证的情况； 9、血液不是由本院血库验收并出具血库检 建立静脉通路、使用输血前用 药 严格按密闭式周围静脉输液法建立静脉通路；将输血医嘱转抄到输液单上并核对 输血前核对 核对方式： 一人持病历、输血单另一人持血

严格执行双人核对； 核对内容同输血前核对 洗手，至病人床边 严格执行双人，同时携带病历、输血单、输血用具和血制品；必须推治疗车 输血时核对 患者、床边卡、腕带、输血单、病历、血袋、输液单 严格执行双人核对 接血袋 确认通畅、消毒 确认病人静脉通路完好 用安尔碘棉杄2次消毒血袋的出口周围，将其覆盖段的塑料管旋下，将输血前输液袋上的输血器针头拔出，插入血袋入口，血袋挂于输液器架上 调节滴数，<20滴/min ， 输血后核对 输血单、输液单、患者、腕带、床边卡 签名 输血单、输液单、临时医嘱 输血单上必须双签名

无菌检测标准操作规程(培养法)

起草人：起草日期： 审核人：审核日期： 批准人：批准日期： 武汉仝干生物科技有限公司 Wuhan Togo Biotechnology Co.,Ltd

1、目的 建立无菌检测的基本操作，为无菌检测人员提供正确的操作规程。通过无菌检验后，确保产品能够达到无菌的要求。 2、适用范围 适用于我公司进行细胞质量检验的技术人员。 3、内容 3.1 简述：无菌检测系用于检查细胞是否无菌的一种方法。检查项目包括需氧菌、厌氧菌及真菌检查。若供试品符合该项检查方法的有关规定，仅表明在该检验条件下未发现微生物污染。 3.2 环境要求：该项检查应在环境洁净度万级背景下的局部百级的单向流区域内或隔离系统中进行。其过程必须严格遵守无菌操作，日常检验需对试验环境进行监控。 3.3人员要求：无菌检测人员应具备微生物及检验专业知识，并经过无菌检验培训。 4、无菌检验前的准备 4.1器具灭菌、消毒 试验过程中与供试品接触的所有器具必须采用可靠方法灭菌，可置高压灭菌锅内121℃蒸汽灭菌30分钟后使用（根据灭菌效果验证决定灭菌参数）。所有的灭菌物品不应超过2周即用毕，否则应重新灭菌。凡检验中使用的器材无法灭菌处理的，使用前必须经消毒处理，如无菌检验室的电子天平，工作台面等，可采用消毒剂浸泡或擦拭。 器具的灭菌、消毒后必须做好标识，标明灭菌、消毒时间和使用有效期。 4.2人员、物料进入无菌检验室

开启紫外灯或臭氧发生器进行空间灭菌处理，消毒时间不得少于30分钟。人员进入无菌检验室需在一更区脱去一般区工作鞋，换无菌检验室工作鞋，并在二更区穿戴无菌服、口罩和手套，口罩掩住口鼻，帽子包裹所有头发。 进入无菌检验室的所有培养基、供试品等需将外包装在传递窗拆除后，查看所有进入无菌检验室的器具上的灭菌、消毒标识，是否在有效期内，符合要求的于传递窗进行表面紫外消毒，传入无菌检验室。 5、无菌检验室操作要求 1）人员进入后，首先进一步消毒擦拭工作台面。 2）全过程必须严格执行无菌操作，防止微生物污染。 3）使用玻璃器皿应轻取轻放，避免破损，以防培养物扩散。 4）所有操作均应在近火焰区进行，且不得有大幅度或快速动作，以免搅动空气中的尘埃微粒。 5）使用金属接种器具时，用前、用后均需灼烧灭菌。 6）在接种培养物时，动作应轻、准，防止培养物溅出，产生汽溶胶，造成污染。 7）操作过程中所有的带菌物品，用后均应作消毒、灭菌处理。可在检验过程中随用随时放入消毒液缸内浸泡或消毒桶内，或在检验完成后经传递窗传至一般区，立即用压力蒸汽灭菌锅121℃灭菌30分钟。 6、培养基制备 6.1需氧菌、厌氧菌培养基（硫乙醇酸盐流体培养基）的制备 所用试剂： 酪胨（胰酶水解） 15.0g 葡萄糖 5.0g L-胱氨酸 0.5g 硫乙醇酸钠 0.5g （或硫乙醇酸）（0.3ml） 酵母浸出粉 5.0g 氯化钠 2.5g 新配制的0.1%刃天青溶液 1.0ml 琼脂 0.75g 水 1000ml

输注血液血制品规范

1 目的与适用范围 制定本规章与流程的目的是规范护士采集与送检血样、领取与输注血液/血制品时应遵循的原则，以保证患者的用血安全。 2 规章 护士须遵医嘱为患者输血，输血前查看输血治疗知情同意书（附件1）。 应由两名医护人员为患者输血，做到“三查十三对一注意”：“三查”是在操作前、操作中、操作后查对；“十三对”包括查对门急诊/病室、床号、姓名、性别、年龄、病案号、血型、血液品种、血量、有效期、血液或血制品外观、交叉配血结果及血袋编码；“一注意”是注意输血后反应。 3 名词释义 血袋编码：为献血唯一识别码，一般为13位条形码，如编码为00101 10 123456，一区码00101为采血机构识别，001为北京，01为红十字血液中心；二区码10代表年代（2010年）；三区码6位数字代表献血者编码。 4 规程 血样的采集与送检 确定输血后，两名医护人员持执行单（附件2）与临床输血申请单（附件3）和贴好标签的真空采血管核对患者姓名、门急诊/病室、床号、性别、病案号、血型。采集血样前，请患者说出床号、姓名，护士复述患者床号、姓名，核对腕带信息（床号、姓名）；如果患者无法正常沟通，需要双人核对腕带信息（床号、姓名）。配送人员/医护人员将装有患者血样的真空采血管及临床输血申请单（附件3）送至输血科，与输血科工作人员逐项核对后双方在输血科登记本（附件4）上签字。注意事项

不能同时采集多名患者的血标本。 交叉配血试验的血标本必须是输血前3天之内的。 血液/血制品的领取 接到输血科通知后，由医护人员持取血单（附件5）取血。 取血者与发血者持输血记录单（附件6）、取血单（附件5）和取血登记本（附件7）对血液/血制品进行“十三对”（包括查对门急诊/病室、床号、姓名、性别、年龄、病案号、血型、血液品种、血量、有效期、血液或血制品外观、交叉配血结果及血袋编码）。凡血袋有下列情形之一，一律不得领取 标签破损、字迹不清。 血袋有破损、漏血。 血液中有明显凝块。 血浆呈乳糜状或暗灰色。 血浆中有明显气泡、絮状物或粗大颗粒。 未摇动时血浆层与红细胞的界面不清或交界面上出现溶血。 红细胞层呈紫红色。 过期或其他须查证的情况。 核对无误后，取血者与发血者双方在取血登记本（附件7）及输血记录单（附件6）上签字，将血液/血制品和输血记录单（附件6）放于密封容器中取回。不同患者的血液/血制品分开放置。 输注血液/血制品前的确认 输血前由两名医护人员持病历、输血记录单（附件6）对血液/血制品进行“十三对” （包括查对门急诊/病室、床号、姓名、性别、年龄、病案号、血型、血液品种、血量、有效期、血液或血制品外观、交叉配血结果及血袋编码）。