动物细胞工程试题及详解

动物细胞工程试题

1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基

B都需用培养箱

C都要在无菌条件下进行

D都可体现细胞的全能性

解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。

动物细胞培养：

1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。

2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。

3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。

4、动物细胞培养需要满足以下条件

(1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。

(2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。

(3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。

(4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。

5、动物细胞培养的过程：

取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理

分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。

2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D）

A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合

B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理

C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体

D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同

解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。

3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A）

①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植

A．①②B．①③C．②③D．③④

解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。

4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D）

A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体

B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体

C. 将等量浆细胞和骨髓瘤细胞混合，经PEG诱导融合后的细胞均为杂交瘤细胞

D. 利用该单克隆抗体与SARS病毒核衣壳蛋白特异性结合的方法可诊断出病毒感染者

解析：A错误一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。从血清中分离出的抗体产量低、纯度低、特异性差；B错误单克隆抗体是杂交瘤细胞合成并分泌的，杂交瘤细胞是由浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成的；C错误制备单克隆抗体过程中的筛选：筛选是将未融合的B 淋巴细胞、骨髓瘤细胞以及BB融合、瘤瘤融合的细胞通过选择培养基淘汰，筛选出B瘤融合的细胞。筛选是将产生特定抗体的B瘤细胞通过细胞培养用相应抗原检测的办法筛选出来。因为从体内取免疫过的B淋巴细胞时取出很多种，形成的杂交瘤细胞有很多种，所以需筛选出产生特定抗体的杂交瘤细胞。

5用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是()

A. 将抗原注入小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞

B. 用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞

C. 用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合

D. 筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体

解析：动物细胞没有细胞壁，所以不需要纤维素酶去除细胞壁

6某研究小组进行药物试验时，以动物肝细胞为材料，测定药物对体外培养细胞的毒性。供培养的细胞有甲、乙两种，甲细胞为肝肿瘤细胞，乙细胞为正常肝细胞。请回答下列有关动物细胞培养的问题：(1)将数量相等的甲细胞和乙细胞分别置于培养瓶中培养，培养液及其他培养条件均相同。一段时间后，观察到甲细胞数量比乙细胞数量_多___。

(2)在动物细胞培养时，通常在合成培养基中加入适量血清，其原因是血清可以补充合成培养基中缺乏的物质____。细胞培养应在含5%的CO2的恒温培养箱中进行，CO2的作用是_

维持培养液pH _______。

(3)在两种细胞生长过程中，当乙细胞铺满瓶壁时，其生长__停止___。药物试验需要大量细胞，两种细胞频繁传代，甲细胞比乙细胞可以传代的次数更___多___。若用动物的肝脏组织块制备肝细胞悬液，需用_胰蛋白酶____消化处理。

(4)为了防止细胞培养过程中细菌的污染，可向培养液中加入适量的__抗生素_______。

(5)已知癌细胞X过量表达与肝肿瘤的发生密切相关，要试验一种抗肿瘤药物Y对甲细胞生长的影响，可将甲细胞分为A、B两组，A组细胞培养液中加入__Y_____，B组细胞培养液中加入无菌生理盐水，经培养后，从A、B两组收集等量细胞，通过分别检测X基因在A、B两组细胞中的__mRNA____或____蛋白质___合成水平的差异，确定Y的药效。

7回答下列有关细胞培养的问题

(1)在动物细胞培养过程中。当贴壁细胞分裂生长到细胞表面__相互接触____时，细胞会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的__接触抑制______。此时，瓶壁上形成的细胞层数是__单层_ ______。要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来，需要用酶处理，可用的酶是___胰蛋白酶______ _______。

(2)随着细胞传代次数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现_衰老甚至死亡____现象；但极少数细胞可以连续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成__不死性______细胞，该种细胞的黏着性__降低______，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量___减少_________。

(3)现用某种大分子染料，对细胞进行染色时，观察到死细胞被染色，而活细胞不染色，原因是_由于死细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色_____。(4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目，最好选用细胞分裂到_中____期的细胞用显微镜进行观察。

(5)在细胞培养过程中，通常在__超低温______条件下保存细胞。因为在这种条件下，细胞中

__酶_____的活性降低，细胞_新陈代谢_________的速率降低。

(6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后，发生了排斥现象，这是因为机体把移植的皮肤组织当作__抗原______进行攻击。

8如图所示为单克隆抗体制备过程示意图。

（1)淋巴细胞能与骨髓瘤细胞融合成一个细胞，两种细胞膜也能“融合”在一起，说明细胞膜___具有一定的流动性_______。此过程，常用_聚乙二醇____作为诱导剂，杂交瘤细胞繁殖进行的是有丝分裂。该细胞的特点（遗传性状）是___既能大量增殖又能产生特异性抗体__。

(2)筛选出杂交瘤细胞的方法是__培养液中加入氨基蝶呤，收集增殖的细胞______________。

(3)杂交瘤细胞的体外培养与植物组织培养的培养基相比有何主要不同？_液体培养基含有葡萄糖和动物血清___。

(4)单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原(病原体或癌变细胞等)并与之结合，而绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这是利用了___抗原与抗体之间结合的高度特异性__。

(5)在单克隆抗体制备过程中，还应用了细胞工程中的_动物细胞融合________和__动物细胞培养______两大技术。

9现有甲、乙两种可能有一定毒性的化学物质，实验室研究人员欲通过动物细胞培养的方法来鉴定它们是否有毒性并比较二者毒性的强弱。请你以一个研究人员的身份参与此项研究，完成下列有关问题：(1)实验原理：__有毒物质能诱导细胞产生染色体变异_______。根据这种变异细胞占全部培养细胞的百分数(以下称Q值)，可判断该化学物质的毒性。

(2)材料用具：活的小白鼠胚胎、胰蛋白酶液、动物细胞培养液、动物细胞固定液、适宜浓度的龙胆紫溶液、适宜浓度的化学物质甲溶液、适宜浓度的化学物质乙溶液、蒸馏水、滴管、培养皿、剪刀、锥形瓶、恒温箱、载玻片、盖玻片、显微镜、小白鼠正常有丝分裂各时期的高倍显微照片。

(3)实验步骤：

Ⅰ．制备细胞悬浮液。把活的小白鼠胚胎放在培养皿中剪碎，转入锥形瓶中，加入胰蛋白酶液处理，使胚胎组织离散成单个细胞，再加入动物细胞培养液，制成细胞悬浮液。Ⅱ．进行细胞培养。

①．取A、B、C3个洁净的培养瓶，_消毒灭菌加入等量的细胞悬浮液_____________；

②．向A、B两个培养瓶中分别加入等量的甲、乙溶液，C瓶中加入等量的蒸馏水，摇匀；

③．把3个培养瓶放在37℃的恒温箱中培养。

Ⅲ．制作临时装片。

①．当细胞增殖到大约8代左右时，同时从恒温箱中取出3个培养瓶，用胰蛋白酶液处理，

加入动物细胞固定液，迅速杀死细胞并固定细胞分裂相；

②．静置一段时间后，分别从各培养瓶底部吸取适量的细胞悬浮液，滴在与培养瓶有相同编

号的载玻片的中央，_用适宜浓度龙胆紫进行染色___，3～5min后，盖上盖玻片。

Ⅳ．镜检和统计。

把临时装片放在显微镜下，先用低倍镜后用高倍镜，寻找处于_有丝分裂中_____期的细胞，

并与__C_______进行对比，统计并计算变异的细胞占该期细胞总数的百分数(Q值)。

(4)结果分析与结论：

①．经研究人员实验得知，A、B、C三个培养瓶的Q值依次为：Q A=1.3%，Q B=12.5%，

Q C=0.1%，由此可知该实验的结论是____甲乙都是有毒性的且乙的毒性大于甲______。

②．在实验中，C培养瓶起___对照_____作用，C瓶的Q值说明_动物细胞在正常培养状态

下染色体变异频率非常低__。

10下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

(1)图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是__动物细胞培养________。

(2)图甲中①注射病原入小鼠体内后，要经过___吞噬细胞_______细胞处理后，才能被免疫细胞识别。②过程常在___灭火的病毒________诱导下完成，④过程与体外培养相比，其优点是__不需特定的培养基，不需严格的外界环境条件___________。

(3)单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其_特异性___________。

(4)图乙过程常选择_____MⅡ中______期的卵母细胞做受体细胞，原因是__MⅡ期卵母细胞体积大，易操作，含有促使细胞核全能性表达的物质和营养添加________。若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗？_____不是________。原因是_卵细胞细胞质的遗传物质也能控制某些性状___________。

(5)图乙过程的技术具有多种用途，但是不能___D________。

A．有选择地繁殖某一性别的家畜B．繁殖家畜中的优良个体C．用于保存物种D．改变动物的核基因(6)在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为原因最可能是____C______。

A．卵细胞大，便于操作B．卵细胞含有的营养物质多

C．卵细胞细胞质可使体细胞核全能性得到表达D．重组细胞才具有全能性

细胞工程试题及答案

专题2细胞工程 一、选择题 1.运用下列各种细胞工程技术培育生物新品种,操作过程中能形成愈伤组织的是( )。 ①植物组织培养②植物体细胞杂交③动物细胞培养 ④转基因植物的培育 A.①②③ B.①②④ C.①③④ D.①②③④ 2.生物技术的发展速度很快,已灭绝生物的“复生”将不再是神话。如果世界上最后一只野驴刚死亡,以下较易成功“复生”野驴的方法是( )。 A.将野驴的体细胞取出,利用组织培养技术,经脱分化、再分化,培育成新个体 B.将野驴的体细胞两两融合,再经组织培养培育成新个体 C.取出野驴的体细胞核移植到母家驴的去核卵细胞中,经孕育培育成新个体 D.将野驴的基因导入家驴的受精卵中,培育成新个体 3.下列关于细胞工程的叙述,错误的是( )。 A.电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B.去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C.小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D.某种植物甲、乙两品种的体细胞杂种与甲、乙两品种杂交后代的染色体数目相同 4.用高度分化的植物细胞、组织和器官进行组织培养可以形成愈伤组织,下列叙述错误的是( )。 A.该愈伤组织是细胞经过脱分化和分裂形成的 B.该愈伤组织的细胞没有全能性 C.该愈伤组织是由排列疏松的薄壁细胞组成的 D.该愈伤组织可以形成具有生根发芽能力的胚状结构 5.名为“我的皮肤”的生物活性绷带自从在英国诞生后,给皮肤烧伤病人带来了福音。该活性绷带的原理是先采集一些细胞样本,再让其在特殊的膜片上增殖。5~7天后,将膜片敷在患者的伤口上,膜片会将细胞逐渐“释放”到伤口,并促进新生皮肤层生长,达到加速伤口愈合的目的。下列有关叙述中,不正确的是( )。 A.“我的皮肤”的获得技术属于动物细胞工程 B.人的皮肤烧伤后会因人体第二道防线的破坏而导致免疫力下降 C.种植在膜片上的细胞样本最好选自患者本人 D.膜片能否把细胞顺利“释放”到伤口,加速患者自身皮肤愈合与细胞膜上的糖蛋白有关 6.既可用于DNA重组技术又可用于细胞融合技术的是( )。 A.病毒 B.纤维素酶 C.聚乙二醇 D.质粒 7.培育农作物新品种的过程中,常利用植物组织培养技术。下列叙述正确的是( )。 A.培育转基因的外植体得到的新个体属于基因突变个体 B.在植物组织培养过程中用理化因素诱导可获得大量有益突变体 C.单倍体育种中经减数分裂和组织培养两个过程能获得纯合二倍体 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 8.下列与细胞工程技术相关的表述中,不正确的是( )。 A.植物体细胞杂交技术可以克服常规的远缘杂交不亲和障碍 B.动物细胞培养与植物组织培养所用的培养基成分基本相同 C.动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同 D.植物组织培养技术的理论基础是细胞的全能性 9.经植物组织培养技术培养出来的植物一般很少有植物病毒危害,其原因在于( )。 A.在组织培养过程中经过了脱分化和再分化,进行的是快速分裂和分化

动物细胞工程知识点

动物细胞工程12月20日 动物细胞工程常用技术手段有动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体等，其中动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 一、动物细胞培养 1、定义：就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。 2、原理：细胞增殖 3、过程 分散成单个细胞， 制成细胞悬液 注意： ①10代以内细胞保持正常的二倍体核型，无突变发生，常用于实践或冷冻保存。 ②超过50代，极少数细胞突破自然寿命极限，突变成癌细胞，具有无限增殖能力；若超过50代，细胞不再增殖，全部死亡，则说明细胞没有发生癌变。 ③分瓶之前，称原代培养；出现接触抑制用胰蛋白酶处理，再分瓶培养为传代培养。 思考回答： ⑴、为什么选用幼龄动物组织或胚胎进行细胞培养? 答：其细胞的分化程度低，增殖能力强，有丝分裂旺盛，容易培养。 ⑵、动物细胞培养需要脱分化吗?为什么? 答：不需要。因为高度分化的动物细胞发育潜能变窄，失去了发育成完整个体的能力，所以没有类似植物组织培养的脱分化过程，要想使培养的动物细胞定向分化，通常采用定向诱导动物干细胞，使其分化成所需要的组织或器官。 ⑶、进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分?用胃蛋白酶行吗? 答：主要是蛋白质，不行，因为胃蛋白酶作用的适宜PH约为2，当ＰＨ大于6时就会失去活性，多数动物细胞培养适宜PH为7.2－7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。（胰蛋白酶作用的适宜PH为7.2－8.4，胰蛋白酶活性较高） ⑷、胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗?为什么?

答：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白质，长时间作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤，因此必须控制好消化时间。 ⑸、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个体？ 不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动物个体 4、重要概念 ①细胞贴壁：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。 产生原因：培养贴附性细胞时，细胞要能够贴附于底物上才能生长增殖。 培养要求：培养瓶或培养皿内表面光滑、无毒，易于贴附。 ②细胞的接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。 ③原代培养：动物组织消化后的初次培养 ④传代培养：原代培养的细胞由于接触抑制不再分裂，需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这种培养叫传代培养。 5、培养条件： ⑴无菌无毒环境：无菌——对培养液和所有培养用具进行无菌处理；在细胞培养液中添加一定量的抗生素。；无毒——定期更换培养液，防止细胞代谢产物积累对自身造成危害。 ⑵营养： 成分：所需营养物质与体内基本相同，例如需要有糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然成分。 培养基类型：合成培养基（将细胞所需的营养物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基） ⑶温度和pH值：哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜，多数细胞生存的适宜pH为7.2～7.4。 ⑷气体环境：通常采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95％空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养。O2：是细胞代谢所必需的CO2主要作用是维持培养液的pH。 6、应用：生产有重要价值的生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。基因工程中受体细胞的培养。用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性。科学家培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症及其他疾病提供理论依据。

植物、动物细胞工程练习

植物细胞工程练习 学校:___________姓名：___________班级：___________座号：___________ 一、非选择题 1．草莓是人们经常食用的一种水果，有较高的营养价值。草莓是无性繁殖的作物，长期种植会使病毒积累在体内，产量降低，品质下降。下图是利用植物组织培养技术培育草莓脱毒苗的过程，请据图回答： （1）外植体能够形成幼苗所依据的原理是____________。培育脱毒苗时，一般选取_________作为外植体，其依据是__________________。 （2）①是脱分化过程，细胞脱分化是指已经分化的细胞，经过诱导后，失去其__________而转变为未分化细胞的过程。②是_______________过程。 （3）研究表明，多倍体草莓产量高于二倍体，利用组织培养技术获得多倍体草莓的方法有两种:一是使用__________〔药剂）处理草莓的愈伤组织，再经培养获得多倍体植株；二是利用_________(药剂)诱导草莓体细胞融合形成杂种细胞后，再经组织培养获得多倍体植株，这种育种技术被称为___________技术。 2．选取A、B植株的细胞进行如下图操作，请回答问题: (1)实现图中的①过程最常用的方法是________。 (2)②过程的发生，必须进行____________,其方法有____________法和____________法。 (3) 若细胞A内含a个染色体，细胞B内含b个染色体，则“杂种细胞”内含________个染色体；若A、B植株采用常规杂交育种方法成功的话，得到的后代含_____个染色体，必须用______________来处理幼苗，才能得到可育的杂种植株，其中含有_____个染色体。这两种方法相比，体细胞杂交方法的优点是：__________________________________。 (4)如果原生质体A为小鼠的浆细胞，原生质体B为小鼠的骨髓瘤细胞，诱导二者融合时，独特的方法是用_______处理。 3．细胞工程是一门新兴的生物工程技术。在动、植物的育种；药物提取；药物生产等领域的应用十分广泛。利用所学知识回答以下关于细胞工程的相关问题。 （1）釆用植物细胞工程育种的方法如下：

高中生物 动物细胞培养和核移植技术教案 新人教版选修3

动物细胞培养和核移植技术 备课日期2014年 3 月 4 日课型新授课 教学目标 知识与技能 1\简述动物细胞养的含义。 2\说出动物细胞养的所需条件。 3\简述动物细胞培养的基本程序。 4\简述动物细胞核移植的概念。 过程与方法 情感态度 与价值观 1\通过学习基因工程的概念，使学生认识到科学研究需要的严谨，激 发为祖国而奋斗的精神。 2\通过学习基因操作的工具，使学生树立结构与功能相统一的辩证唯 物主义观念。 教学重点 1\动物细胞培养的过程及条件； 2\用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程和应用前景 教学难点用动物体细胞核移植技术克隆动物的过程 教学方法以探究法、谈话法、材料教学法相结合。 教学用具多媒体课件 课时安排1课时 教学内容设计与反思 板书设计:

教学内容设计与反思一、复习导入: 教师活动：投影幻灯片，引导学生思考、分析讨论。 （1）植物细胞工程常用的技术手段有哪些？ 植物组织培养 植物体细胞杂交 （2）植物体细胞杂交的结果是产生了？ （3）植物体细胞杂交过程中涉及的原理是？ 二、讲授新课: （一）动物细胞工程 动物细胞工程常用的技术手段 动物细胞核移植、动物细胞融合、生产单克隆抗体、动物细胞培养 动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。 （二）动物细胞培养 1.发展历史: 单20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形 成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问 题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harrison)从蝌蚪的 脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神 经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验 不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后， 在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物 细胞培养。 2、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培养就是从动物有机体中取出相关 的组织,将它分散成个细胞,然后,放在适宜的 培养基中,让这些细胞生长和增殖. 3、动物细胞培养过程： 引导学生阅读课文44--46面相关内容。

动物细胞工程

细胞工程第一讲 一、概述 1、细胞工程（cell engineering ）定义 应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的原理方法与技术，按照人们的需要，在细胞水平上进行遗传操作，包括细胞融合、核质移植等方法，快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。 2、细胞工程的研究内容 （1）动植物细胞和组织培养 植物细胞培养主要用于育种和代谢产物制备，日本等国家用生物反应器培养人参细胞生产有效药用成分。 动物细胞培养用于制备单克隆抗体、疫苗、生长因子等。 （2）细胞融合 改良性状，培育新品种 （3）染色体工程 细胞工程 动植物细胞和组织培养 细胞融合 染色体工程 胚胎工程 细胞遗传工程 器官培养 组织培养 细胞培养 （快速繁育和产物大量制备） （改良性状，培育新品种） （培育新品种，单倍体和多倍体） （获得人们需要的成体） （无性繁殖，改变性状） 克隆 转基因技术

主要用于培育单倍体或多倍体新品种，如四倍体小麦，八倍体小黑麦 （4）胚胎工程 主要是获得人们需要的成体 如：胚胎分割技术、胚胎融合技术、卵核移植技术、体外授精技术等最成功应用于畜牧业获得优良品种与胚胎保存 对人类来说主要用于不孕症获得试管婴儿 （5）细胞遗传工程 克隆：无性繁殖，动物克隆指经无性繁殖而产生遗传性状完全相同的后代个体。 转基因技术：将外源基因整合到生物体内，能够表达并稳定遗传给后代的实验技术。 3、细胞工程的优势 （1）避免了分离、提纯、剪切、拼接等基因操作，只需将细胞遗传物质直接转移到受体细胞中就能够形成杂交细胞。 （2）不仅可以在植物与植物之间、动物与动物之间、微生物与微生物之间，甚至可以在三者之间形成前所未有的杂交物种。 4、细胞工程发展 （1）萌芽阶段---理论渊源和早期的尝试（20世纪初-30年代中期）德国植物生理学家Haberlandt在1902年提出植物细胞的全能性。认为植物细胞有再生出完整植株的潜在能力。 美国生物学家Harrison 是公认的动物组织培养的创始人，1907年，以淋巴液为培养基观察了蛙胚神经细胞突起的生长过程，

动物细胞工程练习题

，能够用 于杀死人类的某些 第I 卷（选择题） 1 .下列关于现代生物技术的叙述中不正确的是（ A. 植物细胞去除细胞壁获得的原生质体仍然具有全能性 B. 动物细胞培养过程中需用胰蛋白酶处理获取单个细胞 C. 需使用特定的选择培养基筛选杂交瘤细胞 D. DNA 连接酶将DNA 分子碱基对之间的氢键连接起来 2 .将特定药物与单克隆抗体相结合制成的“生物导弹” 胞，其 过程如下图所示。下列相关叙述不正确的是（ A. ①过程的原理和植物原生质体融合的原理基本相同 B. 经①形成的杂交瘤细胞能无限增殖并产生单一抗体 C. ②过程需要筛选并克隆单个杂交瘤细胞 D. 抗体的靶向作用使③过程具有高度特异性 3 .图示利用奶牛乳汁生产血清白蛋白的过程，分析错误 的是 A. ①经胰蛋白酶处理可得到③ B. 图中涉及基因工程、细胞核移植等技术 C. 常用PCR 技术扩增② D. 把⑤送入⑥的最佳时期是囊胚和原肠胚 4 .下表为动、植物细胞工程的有关内容比较，你认为错误 的有 植物细胞工程 动物细胞工程 持殊处理 酶解法去除细胞壁 胰蛋白酶处理配制细胞悬液 融合方法 物理方法，化学方法 物理方法，化学方法，生物方法 典型应用 人工种子，种间杂种植物 单克隆抗体的制备 培养液的区别 麦芽糖是离体组织赖以生长的成分 动物血清不可缺少 A. 0处 B . 1处 C . 2处 5.对细胞全能性的表述正确的有 A. 没有离体植物细胞也能表现出全能性 B. 动物细胞融合标志着动物细胞全能性的实现 C. 单克隆抗体的制备原理依据是细胞的全能性 D. 花粉可培育成单倍体，是细胞全能性的体现 脾细胞- 话髓痼细胞- 4 ■杂左痢 细胞 抗瘵药物 |结律 _ ；辺.单克隆一生物③十 抗体 导弹「 癌细胞 ① Q) III

动物细胞工程试题及详解

动物细胞工程试题 1用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（C）A都须用液体培养基 B都需用培养箱 C都要在无菌条件下进行 D都可体现细胞的全能性 解析：动物细胞离体培养主要是获得细胞的代谢产物，植物体细胞离体培养体现的是全能性。植物体细胞是固体培养基。动物体细胞培养需要二氧化碳培养箱。 动物细胞培养： 1、动物细胞的培养：动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和繁殖。 2、动物细胞培养液的成分：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。 3、动物细胞培养液的特点：液体培养基含动物血清。 4、动物细胞培养需要满足以下条件 (1)充足的营养供给——微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 (2)适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 (3)无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 (4)气体环境：95%空气+5%CO2。O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 5、动物细胞培养的过程： 取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理

分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2下列关于细胞工程的叙述，错误的是（D） A. 电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B. 去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C. 小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D. 某种植物甲乙两品种的体细胞杂交与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 解析：A正确诱导原生质体融合的方法有物理法（离心振动电刺激）化学法（聚乙二醇PEG）生物方法（灭活的病毒）. B正确去除植物细胞壁需要纤维素酶和果胶酶，将动物组织分散成单个细胞需要胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理一段时间。C正确小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合既可以无限增殖，又可产生特异性抗体。D错误，假设甲植物体细胞是2N,乙植物体细胞是2M，甲乙体细胞杂交染色体数目为2N+2M；而甲乙品种杂交染色体数目是N+M。 3制备单克隆抗体所采用的细胞工程技术包括（A） ①细胞培养②细胞融合③胚胎移植④细胞核移植 A．①②B．①③C．②③D．③④ 解析：单克隆抗体的制备过程是人工诱导经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，再经筛选获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，经过培养获得的杂交瘤细胞获得单克隆抗体。 4利用细胞工程方法，以SARS病毒核衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体。下列相关叙述正确的是（D） A. 用纯化的核衣蛋白反复注射到小鼠体内，产生的血清抗体为单克隆抗体 B. 体外培养单个浆细胞可以获得大量针对SARS病毒的单克隆抗体

2015 动物细胞培养技术实验报告

一、实验目的 1、学习并掌握动物细胞培养的无菌操作技术。 2、学习并掌握细胞传代培养的方法。 3、学习并掌握用倒置荧光显微镜观察细胞细胞形态。 二、实验原理 细胞培养（cell culture）：细胞在体外条件下生长，细胞不再形成组织。 动物细胞培养（animal cell culture）就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞（使用胰蛋白酶或胶原蛋白酶）然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。由于细胞具有生长和自我复制的能力，为细胞体外培养和研究提供可能。 动物细胞培养可分为原代培养和传代培养。 原代培养（primary culture）即直接从动物机体分离、获得组织细胞，在无菌条件下，用胰蛋白酶消化或机械分散等方法，将动物组织分散成单个细胞开始首次培养长出单层细胞的方法。 传代培养（subculture）当细胞生长增值达到一定密度，用胰蛋白酶将细胞消化分散成单细胞，将细胞转移到新的培养皿中扩大培养的方法。 高等生物是由多细胞构成的整体，在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内的功能活动是十分困难的，但如果把或细胞拿到体外培养、增殖并进行观察和研究，则方便简单的多。被培养的动物细胞是非常好的实验对象和实验研究材料，对体外培养的活细胞进行研究可以帮助人类探索防治各种疾病途径和机制，也可以人为地诱导和改变细胞的遗传性状和特性，因此，动物细胞体外培养技术是研究细胞分子机制非常重要的实验手段，被广泛应用于医学、生物技术、基因工程等研究领域。 三、细胞培养相关设施及材料 1、细胞培养室 无菌操作区：只限于细胞培养及其它无菌操作，与外界隔离。 孵育区：培养箱设定的条件为37℃，5%CO2。 制备区：培养液及有关培养用液体的制备，液体制备后应该在净化工作台进行过滤除菌。 储藏区：包括冰箱、干燥箱、液氮罐等。 清洗区和消毒灭菌区：清洗区为相对污染区，消毒灭菌区与清洗区分开。 2、细胞培养常用基本设施： 荧光显微镜、超净工作台、孵箱、电热鼓风干燥箱、冰箱、液氮罐、消毒器、恒温水浴槽、滤器等。 细胞培养常用器皿：培养瓶、培养板、培养皿，玻璃瓶、吸管，离心管、冻存管，注射器，烧杯、量筒等。 3、细胞培养用品的清洗、消毒 新玻璃器皿要用5%稀盐酸浸泡，以中和其表面碱性物质：刷洗： 硫酸清洁液浸泡：浓硫酸+重铬酸钾+蒸馏水； 冲洗：流水冲洗15-20次，蒸馏水冲洗3次，三蒸水漂洗1-3次。 所有需灭菌的器械、物品灭菌前均需包装，防止灭菌后污染。使用时放入超净工

生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解

生物专题细胞工程之动物细胞工程题库详解 一、单项选择题（共80小题；共160分） 1. 动物细胞融合的原理是 A. 动物细胞没有识别能力 B. 动物细胞易被病毒感染 C. 细胞膜具有流动性 D. 动物细胞膜易被击穿 2. 能使动物细胞融合的特有的诱导因子是 A. 离心 B. 灭活的病毒 C. 电刺激 D. 振动 3. 科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与 骨髓瘤细胞融合的是 A. 经过免疫的B淋巴细胞 B. 不经过免疫的T淋巴细胞 C. 经过免疫的T淋巴细胞 D. 不经过免疫的B淋巴细胞 4. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 A. 动物细胞培养 B. 动物细胞融合 C. 生产单克隆抗体 D. 胚胎移植、核移植 5. 进行动物细胞培养时，选用的材料是 A. 衰老退化的动物细胞 B. 成熟动物个体的体细胞 C. 动物的受精卵 D. 动物胚胎或幼年个体的细胞 6. 动物细胞融合与植物原生质体融合的理论基础是 A. 细胞膜的流动性 B. 细胞膜的选择透过性 C. 细胞质的流动性 D. 细胞质中酶的活性 7. 用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因 是这样的组织细胞 A. 容易产生各种变异 B. 具有更强的全能性 C. 取材十分方便 D. 分裂增殖的能力强 8. 为了让用于培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬液，选取来的动物组织应选 用下列哪种物质处理 A. 胃蛋白酶 B. 胰蛋白酶 C. 盐酸 D. 胰脂肪酶 9. 动物细胞工程常用的技术手段中，最基础的是 A. 动物细胞培养 B. 动物细胞融合 C. 单克隆杭体 D. 胚胎、核移植 10. 动物细胞培养的细胞来自于 A. 任何个体的细胞 B. 只能取自动物胚胎细胞 C. 只能取自幼龄动物的组织细胞 D. 胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞

动物细胞培养技术 思考题

《动物细胞培养技术》复习思考题 1.动物细胞培养的实验器皿清洗要求为何较高？你认为该如何保证器皿中无杂质？如果 器皿中有杂质，会对细胞培养产生什么样的影响？ 答：①离体细胞对各种毒物都很敏感，若所用器材清洗效果未达到要求，各种毒物会损坏细胞影响实验。②器皿使用高压灭菌锅，121.3℃，20~30分钟，在取拿的时候用经过高压灭菌后的镊子取拿，避免造成污染。③ 2.叙述超净工作台的工作原理？ 答：超净工作台最主要的是空气循环过滤的过程，在这个过程中风机起到了心脏的作用。鼓风机驱动空气通过高效过滤器得以净化，净化的空气被徐徐吹过台面空间而将其中的尘埃、细菌甚至病毒颗粒带走，使工作区构成无菌环境。 3.正压过滤器为何会除菌？ 答：正压式过滤器没有内置灭菌灯，正压式过滤器利用的是两层0.22um孔的过滤膜，这层膜可以将细菌阻挡在膜上，过滤的液体流下去就基本上完成了灭菌过程 4.各种细胞培养用液的配制需要很精确吗？如果不精确，会导致什么后果？请举例说明。 你认为精确配制各种溶液？ 答： 5.配制后平衡盐溶液呈黄色意味着液体的pH发生了什么变化？ 答：配制后的液体应呈桃红色，PH值为7.4左右。苯酚红的变色域：1.2（橙）~3.0（黄），6.5（棕色）~8.0（紫色），若为黄色，则液体呈酸性，不利于细胞的生存。 6.用于分离细胞的消化液为什么宜用无Ca、Mg离子的D-Hanks液或PBS液配制 答：Ca＋2、Mg＋2是细胞膜的重要组分，具有使细胞凝聚的作用。因此，用于分离细胞的消化液宜用无Ca＋2、Mg＋2离子的D-Hanks液或PBS液。 7.L-谷氨酰胺在营养液中有何作用？ 答： L－谷氨酰胺是细胞的能量来源；是一种必须氨基酸，是使物体合成核酸、蛋白质、嘌呤、嘧啶的重要前体，也是蛋白质合成分解的调节物；是细胞内氨的清除剂，氨对一些细胞有毒性。 8.HEPES溶液的作用机理？ 答：它是一种氢离子缓冲剂。主要作用是防止培养基pH迅速变动 9.平衡盐溶液的组成与基本作用？小牛血清在细胞培养中有哪些作用？ 答：①平衡盐溶液主要是由无机盐、葡萄糖组成,它的作用是维持细胞渗透压平衡,保持pH 稳定及提供简单的营养.主要用于取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。②作用：a提供能促使细胞指数生长的激素、基础培养基中没有或含量微小的营养物，以及某些低分子营养物质；b提供结合蛋白，识别维生素、脂类、金属离子，并与有毒金属和热源物质结合，起解毒作用；c是细胞贴壁、铺展生长所需因子的来源；d起酸碱度缓冲液作用； e提供蛋白酶抑制剂，细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受损伤。 10.营养液制备后为什么要小剂量分装？ 答：避免营养液被污染后，全部的营养液都被污染。 营养液一次用完过后，下一次的实验就不能用，会引起污染，影响实验，若冷冻营养液，则营养液的营养成分会有所损失，影响细胞的生长 11.10万U/mL单位青霉素、链霉素的配制方法？ 答：用注射器吸10毫升双蒸水溶解100万单位的链霉素，弃去2ml，用剩余的8ml链霉素溶解80万单位的青霉素，配制成每毫升青霉素、链霉素各10万单位的母液。

人教版生物选修三2.2动物细胞工程专项练习题

动物细胞工程专项练习题 1．美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱，并顺利移植到7名患者体内。这种技术为那些急需器官移植的患者带来福音。回答下列问题： （1）科学家从患者的膀胱上取下一小块活细胞样本，将其中的肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养。在培养之前，需用 _____处理以分散细胞，将动物组织块消化后的初次培养称为 代培养。与植物组织培养的培养基相比，其培养基的主要不同点是含有 等一些天然成分。 （2）约一周后将培养皿中培养的细胞放在由胶原质制成的“支架”上继续培养，再过7周左右，原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右，布满“支架”，膀胱上皮在内，肌肉在外，形成“新膀胱”。细胞数目大量增加，其增殖方式是 ；由这些细胞再形成肌肉和膀胱上皮的过程中要经过 。 （3）医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面，这样新器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分。新器官与老器官的“重组” （填“是”或“不是”）基因重组；“新膀胱”移植后， ______________（填“会”或“不会”）引起免疫排斥反应。 （4）除上述方法外，还可将患者的体细胞核移入去核的 ______中，利用体细胞 技术，形成相应组织、器官用于疾病的治疗。 2．下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。 回答下列问题： （1）图中A 表示正常细胞核，染色体数为2n ，则其性染色体的组成可为____________。过程①表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_________________的方法。②代表的过程是__________。 （2）经过多次传代后，供体细胞中_______________的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。 （3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是__________________________________。 （4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了__________________________。 3．下图为利用小鼠制备抗埃博拉病毒的单克隆抗体过程示意图，图中A ～F 分别表示生物技术或细胞名称，请同答有关问题： （1）若A 细胞是经抗原刺激的小鼠B 淋巴细胞，则B 细胞一般选用__________，C 过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是____________________。 （2）在杂种细胞的培养过程中，为了防止污染，通常还要在细胞培养液中添加一定量的__________。 （3）单克隆抗体的制备过程需要经过多次筛选，首先用特定的选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，其具有的特点是_______________，还需进行克隆化培养和__________，最终获得足够数量的________________________，选出符合要求的细胞后，可在体外条件下培养或注射到__________内增殖。 （4）利用上述技术生产的单克隆抗体可制作成诊断盒，用于准确、快速诊断埃博拉病毒的感染者，这体现了单克隆抗体____________________的特性。 4．人乳头状瘤病毒（HPV ）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV 的单克隆抗体可以准确检测出HPV ，从而及时监控宫颈癌的发生，以下是以HPV 衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答： （1）单克隆抗体制备过程中涉及的细胞工程技术有________________。 （2）将经融合处理后的细胞转到HAT 培养基上培养的目的是 ，该细胞 （填“能”、 “不能”）产生专一性抗体，所产生的抗体 （填“一定”、“不一定”）能抗HPV 。 （3）对于抗体检测呈______性的杂交瘤细胞克隆应进行克隆化培养，克隆化培养的方法最常用的是有 限稀释法，即稀释细胞到3～10个/mL ，每孔加入细胞稀释液______mL （填“0．1”、“1”或“10”），使每个孔内不多于一个细胞，达到单克隆培养的目的。 （4）科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因（prG ），该基因能激发动物细胞分裂，这为单克隆抗体的制备提供了更多的思路。除本题描述的一种制备单克隆抗体技术外，请再简要写出一种制备单克隆抗体的思路 __________________________________________________________ _________________________________________________________________________________________。 5．不同类型的细胞表达不同的基因组合。那么不同类型的动物细胞都具有全套基因吗？科学家进行了如图所示的克隆研究。Ⅰ～Ⅶ代表有关过程，a ～h 代表有关结构或个体。据图回答问题： (1)a 细胞的名称是________，选用该细胞作为核移植受体细胞的原因是 ________________________________________________________________________。 (2)对b 的操作方法通常是__________。若g 是能产生人生长激素的羊，则培育g 时，应将人生长激素基因导入___________，为了尽快获得大量的生长激素，但让g 进行有性生殖会丢失目的基因，你将通过________________技术来实现。 (3)从 d 中取出细胞进行培养时，一般不超过______代，原因是 ________________________________________________________________________。 此培养过程中与植物细胞培养过程中所用的培养基有何不同？_________________________________。 (4)如果图中的细胞均是人体细胞，则获得的h 细胞或器官可用于供体本人组织器官的移植，其优点是

动物细胞工程习题

选修三动物细胞工程习题 一、单选题： 1. 下列关于动物细胞培养的叙述中，正确的是（） A.动物细胞培养选用的培养材料大多是动物的受精卵细胞 B.动物细胞培养液中通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、生长素和动物血清 C.动物细胞培养过程中要用胰蛋白酶处理使细胞分散 D.“海拉”细胞系在实验室中被广泛传代使用是因为其遗传物质保持了长时间的稳定 2. 关于细胞工程的说法不正确的是（） A.培养动物细胞和植物细胞的重要区别在于培养基的不同 B.单克隆抗体与血清抗体相比，前者特异性强、灵敏度高，产量大 C.动物细胞培养不需要在无菌条件下进行，而植物细胞培养则需要在无菌条件下进行 D.在生物体内细胞没有表现出全能性，与基因表达的选择性密切相关 3. 小鼠骨髓瘤细胞与某一种B淋巴细胞融合成为杂交瘤细胞，这种杂交瘤细胞（） A.发生了基因突变 B.只能在体外大量增殖 C.只能在体内大量增殖 D.能产生特定的抗体 4. 下列关于细胞工程的叙述中，正确的是（） A.克隆羊“多莉”的培育技术主要包括核移植和胚胎移植两方面 B.植物细胞工程中，融合叶肉细胞时，应先去掉细胞膜，制备原生质体 C.植物细胞工程中，叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 D.单克隆抗体制备过程中，采用不经免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合从而获得杂交瘤细胞 5. 生产单克隆抗体时，在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，该试剂的作用是（） A.能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制 B.能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活 C.能抑制淋巴细胞的DNA复制 D.能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成 6. 对比植物体细胞杂交和动物细胞融合，以下论述完全正确的是（） A.两者都必须经过人工诱导，但方式不同 B.两者细胞融合的基本原理都是细胞的全能性 C.两者都必须用灭活的病毒进行诱导 D.两者的用途都是为了培养新品种 7．下列关于哺乳动物胚胎发育和胚胎工程的叙述，正确的是（） A．卵裂期胚胎中细胞数目和有机物总量在不断增加 B．胚胎分割时需将原肠胚的内细胞团均等分割 C．胚胎干细胞具有细胞核大、核仁小和蛋白质合成旺盛等特点 D．胚胎干细胞是一类未分化细胞，可从早期胚胎中分离获取 8．用动、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（） A．都需用CO2培养箱B．都须用液体培养基 C．都要在无菌条件下进行D．都可体现细胞的全能性 9、下列关于细胞工程的叙述，错误的是（） A．电刺激可诱导植物原生质体融合或动物细胞融合 B．去除植物细胞的细胞壁和将动物组织分散成单个细胞均需酶处理 C．小鼠骨髓瘤细胞和经抗原免疫小鼠的B淋巴细胞融合可制备单克隆抗体 D．某种植物甲乙两品种的体细胞杂种与甲乙两品种杂交后代的染色体数目相同 10、通过特定方法，科学家将小鼠和人已分化的体细胞成功地转变成了类胚胎干细胞。有关分化的体细胞和类胚胎干细胞的描述，正确的是（） A．人类胚胎干细胞能够分化成多种细胞B．分化的体细胞丢失了某些基因 C．二者功能有差异，但形态没有差异。D．二者基因组相同，且表达的基因相同

动物细胞培养总结!!!!

动物细胞培养总结 一．实验准备 1.实验器械、器皿的清洗和消毒 （1）清洗和包装 离心管，2ml,15ml)若干，冻存管若干放进铝饭盒，用牛皮纸包裹，系紧棉绳，用笔在饭盒上和牛皮纸上标记盒内所装物品名称、数量、日期和所属人名称。 蓝枪头两盒，黄枪头白枪头各一盒用牛皮纸包裹，用棉绳扎紧。 取适量蒸馏水于4L玻璃瓶，瓶盖拧松半圈。 过滤器，250ml玻璃瓶，500ml玻璃瓶用自来水毛刷洗涤剂刷洗，蒸馏水润洗，烘干。 过滤器两部分分别包裹，先将瓶口部位用锡纸包裹后，再罩以牛皮纸，再用棉布密包起来，用棉绳扎紧。 玻璃瓶拧下瓶盖，瓶身浸酸。浸酸时应注意安全，须穿戴耐酸手套和白大褂，注意保护好面部和身体裸露部分，提前备好一盆水在旁以便浸酸结束后清洗耐酸手套，防止走动时酸液滴到地板上不好清洗。瓶口慢慢沉入液面下，注意缓慢降低瓶身，使液体慢慢浸入瓶内，以免产生气泡溅出酸液，发生危险。浸酸时器皿要充满酸液，勿留气泡，浸泡过夜。取出瓶身时，须穿戴耐酸手套和白大褂，注意保护好面部和身体裸露部分，提前备好一盆水在旁，取出后将瓶身放入盆内水中在转移至水池边清洗，以免酸液滴落地板不好清洗。换水洗几次，待水澄清后开始冲洗，每瓶都用自来水灌满，倒掉，重复15次，再用

蒸馏水漂洗5次，去离子水漂洗3次，烘干备用。 （2）消毒灭菌 1>全自动高压灭菌锅：插电源，打开开关，检查水位，若水位不足加蒸馏水补足，放入物品，瓶类物体须拧松盖子后放最上面一筐，盖上灭菌锅盖，拧紧盖子至温度显示栏的左上角有一红点亮灯，按start开始升温。若灭有无菌水或玻璃瓶待降温至常温再打开，打开后立即拧紧，无菌水瓶口封上封口膜。若没灭瓶类物品，降温至80度左右即可打开灭菌锅，须戴上线手套取出。 2>手提式高压灭菌锅：插电源，打开开关，检查水位，若水位不足加蒸馏水补足，检查设定是否为121度20分钟，放入物品，盖上灭菌锅盖，注意导气管一定插到锅底并不能堵塞，用手对称地拧紧锅盖螺栓，再用扳手继续拧紧。加温升压之前，先打开排气阀门，加温约半小时后见排气阀处开始排残留在锅内的冷空气，排气五分钟，关闭排气阀，继而开始升压。灭菌后不要立即打开气阀放气以免水汽喷出。待自然降温至常压才能打开气阀。 玻璃瓶须拧紧，饭盒，枪头灭菌后放入烘箱烘干备用。 2.无菌间消毒及设备检查 用84消毒液拖地，用原液按照1：29的比例兑水，抹布、拖把擦洗。配400ml 75%酒精于盆中，用酒精棉仔细擦拭CO2培养箱，超净台，超净台内物品，显微镜，桌面，若培养箱内未培养细胞可以再打开高温灭菌模式将培养箱灭菌一次。 用蒸馏水擦拭清洗水浴锅内壁，注意底座不要沾水。

动物细胞培养及应用发展史

细胞培养技术

细胞培养发展史及其应用 （一）前言 20世纪初，人们不知道神经纤维是由神经细胞的细胞质向外突出形成的，还是由神经细胞周围的其他细胞融合而成的。生物学家们就这个问题展开了激烈的争论。1907年，美国生物学家哈里森(Harriso n)从蝌蚪的脊索中分离出神经组织，把它放在青蛙的凝固的淋巴液中培养。蝌蚪的神经组织存活了好几周，并且从神经细胞中长出了神经纤维。哈里森的实验不仅解决了神经纤维的起源问题，而且开创了动物组织培养的先河。此后，在许多科学家的不懈努力下，动物组织培养不断改进并逐渐发展成为动物细胞培养。 所谓动物细胞培养(亦称组织培养)既有别于植物细胞培养，又与微生物的培养完全不同。所谓动物细胞培养是指离散的动物活细胞在体外人工条件下的生长、增殖过程，在此过程中细胞不再形成组织。 由于动物细胞培养是在人工条件下进行的，便于调控和观察，因而成为现今研究动物的物质代谢过程、染色体的形态变化、以及遗传物质的表达调控等高难领域的既便利而又有效的新方法。同时，随着现代生物化学、分子生物学、分子遗传学、以及现代医学的发展，细胞培养也在许多应用领域充分展示了其巨大的发展潜力，并已为世人所关注。尽管如此，动物细胞培养仍是一门年轻的新学科，在发展之初被混淆于动物组织培养之中。 （二）细胞培养技术及其历史 细胞培养的历史最早可追溯到19 世纪末，据可考证的资料记载W ilhelm Roux是第一个进行动物组织培养实验的人。 1885年Wilhelm Roux 将鸡胚髓板放置于温热盐水中使之维持存活了数天，是有记录的第一个体外移植成功的例子。 1887年Arnold把恺木的木髓碎片接种到蛙的身上。当白细胞侵入这些木髓碎片后，他把这些白细胞收集在盛将盐水的小碟中，接下来观察到这些白细胞在运动，并存活了一个短的时间。

动物细胞工程(1)

第三节动物细胞工程 动物细胞与组织培养、细胞核移植与动物体细胞克隆 学习目标： 1.简述动物细胞培养的过程、条件及其应用； 2.简述克隆动物的概念含义和基本原理； 3.简述体细胞核移植技术和动物克隆技术，以及应用前景； 课前导学： 一、动物细胞工程包括的主要技术 动物细胞工程的主要技术包括____ 、_____ 、___ ___、_______________、________________等技术。其中_________________________是其他动物细胞工程技术的基础。 二、动物细胞与组织培养 1．概念：动物细胞与组织培养是指在体模拟____ _ __，将动物细胞或组织在无菌、温度适宜和营养充足的条件下培养，使其、并维持原有和的技术。 2. 材料：动物或出生不久的的器官或组织。 3. 过程： （1）动物细胞培养： （2）动物组织培养： （3）动物细胞培养和动物组织培养的区别：动物细胞培养过程中需要用 __________________等使________________________________________________。 4.培养条件： （1）温度：最适温度是°C左右。 （2）PH：最适PH范围是_______。 （3）气体：主要是和，气体的含量不仅影响培养环境的，还直接影响。 （4）营养物质：如、无机盐、氨基酸、维生素、核酸、嘌呤、嘧啶、和生长因子等。 5.培养基的种类： 天然培养基：主要取自动物血清、动物组织提取液和鸡胚汁等，具有营养价值高、成分复杂的特点。 合成培养基：人工配制的，具有成分明确、便于控制实验条件的特点。缺点是缺乏天然培养

动物细胞工程和胚胎工程(包括答案,试卷可以直接作为考卷)

绝密★启用前 2011-2012学年度???学校10月月考卷 试卷副标题 考试范围：xxx；考试时间：100分钟；命题人：xxx 题号一二总分 得分 注意事项： 1．答题前填写好自己的姓名、班级、考号等信息 2．请将答案正确填写在答题卡上 第I卷（选择题） 请点击修改第I卷的文字说明 1．（16分）下面两幅图分别是单克隆抗体制备过程和克隆羊培育过程示意图，请回答下列问题： （1）图甲和图乙所示的过程中，都必须用到的动物细胞工程技术手段是__________________。 （2）图甲中②过程常在诱导下完成，④过程与体外培养相比，其优点是____________________________。（3）单克隆抗体能定向攻击癌细胞，主要是利用其________的特点。 （4）克隆羊的性别由哪只羊决定。 （5）若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像白面绵羊吗? _________。原因是_______________________________________________。 （6）在目前现有技术条件下，还不能将从动物体内分离出来的成熟的体细胞直接培养成一个新个体，而是必须将体细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中才能发育成新个体，你认为哪个是最可能原因（） A．卵细胞大，便于操作B．卵细胞含有的营养物质多 C．卵细胞的细胞质可使体细胞胞核全能性得到表达D．重组细胞才具有全能性 第II卷（非选择题） 请点击修改第II卷的文字说明 评卷人得分 二、综合题（题型注释） 2．[生物──选修3现代生物科技专题]（10分） 应用生物工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题：

生物选修三专题测试题

专题2细胞工程单元检测 一、选择题 1．下图为植物组织培养的基本过程，则制作人工种子，及生产治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，应分别选用编号是的（） A．④② B．③② C．③④ D．④③ 2．某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容， 植物细胞工程动物细胞工程 技术手段植物组织培养，植物体细 胞杂交 动物细胞培养和融合，单克隆抗 体的制备 特殊处理机械法去除细胞壁胰蛋白酶处理，制细胞悬浮液融合方法物理方法，化学方法物理方法，化学方法，生物方法典型应用人工种子，杂种植物单克隆抗体的制备 培养液区 别蔗糖是离体组织赖以生 长的成分 动物血清不可缺少 3．试管婴儿、试管苗、克隆羊三者均属于生物工程技术的杰出成果,下面对其生物学原理及技术的叙述正确的是（） A．都属于无性生殖,能保持母本性状B．都是细胞工程的技术范围 C．都充分体现了体细胞的全能性 D．都不会发生基因重组和变异4．两个亲本的基因型分别为AAbb和aaBB，这两对基因按自由组合定律遗传,要培育出基因型为aabb的新品种，最简捷的方法是（） A．单倍体育种B．杂交育种C．人工诱变育种D．细胞工程育种5．下列关于细胞工程的叙述中，错误的是（） A.植物细胞融合必须先制备原生质体 B.试管婴儿技术包括人工授精和胚胎移植两方面 C.经细胞核移植培育出的新个体只具有一个亲本的遗传性状 D.用于培养的植物器官或组织属于外植体 6．下面关于植物细胞工程的叙述，正确的是（） A. 叶肉细胞脱分化后可形成无定形状态的薄壁细胞 B．叶肉细胞经再分化过程可形成愈伤组织 C. 融合植物叶肉细胞时，应先去掉细胞膜 D．叶肉细胞离体培养时，可以表现出全能性 7．关于单克隆抗体的不正确叙述是（） A.化学性质单一B．用有性繁殖获得 C．特异性强D．可用于治病、防病