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无缝克隆

2012 分子生物学创新产品

上海诺晶生物科技有限公司

GBI 无缝克隆技术

GBI Direct PCR 技术

高效转染试剂 高端生物技术服务

无缝克隆试剂盒

---全新重组技术将目标DNA 片段精准插入载体!

---突破传统,无需内切酶和连接酶! ---省钱省时,分子实验室的必备!

GBI 无缝克隆和组装技术是一种新的、快速、简洁的克隆方法。传统的PCR 产物克隆方法主要有两种:一种是PCR 引物设计时引入载体上的酶切位点,PCR 产经双酶切后定向克隆到目的载体上;另一种是TA 载体连接。这两种方法费时费力,过程繁冗。无缝克隆和组装技术旨在克服上述缺陷,它可以在质粒的任何位点进行一个或多个目标DNA 的片段的插入,而不需要任何限制性内切酶和连接酶。它可以为您解决克隆,片段组装,突变方面的技术困扰,提高您的工作效率,让您的工作变得轻松高效。

无缝克隆技术原理

GBI 无缝克隆技术只要插入的DNA 片段末端与载体末端具有15-20个同源碱基序列就可以在载体的任意位点完成克隆重组。这种无缝克隆技术可灵活地将多个DNA 片段组合成具有更多功能的DNA 分子,可广泛应用于功能基因组学,蛋白功能研究,合成生物学,基因组改造等领域。

技术特点 ● 位点选择灵活:载体任意位置基因克隆 ● 快速简便:30 分钟完成载体构建 ● 精确:不需要增加任何额外的程序 ● 克隆效率高:高达90%阳性克隆 应用: ● 片段克隆,片断组装,突变构建

● 基因表达,沉默,小RNA 等功能研究

● 蛋白质突变研究

● 应用合成生物学

● 代谢工程,菌株改造

● 基因定点突变试剂盒技术原理

● 无缝组装试剂盒原理

● GBclonart 引物设计方法

GBclonart 基因克隆的引物设计及目的DNA 片段的扩增,与常规PCR 法是相同的。唯一的差异在于载体末端和引物末端应具有15-20个同源碱基,由此得到的PCR 产物两端便分别带上了15-20个与载体序列同源性的碱基。 举例如下:

订购信息 货号 描述

规格 价格(元)

GB2001-24 GBclonart 无缝克隆试剂盒 24个反应 1600 GB2001-48 GBclonart 无缝克隆试剂盒 48个反应 3000 GB2002-24 GBclonart 无缝组装试剂盒 24个反应 3200 GB2002-48 GBclonart 无缝组装试剂盒 48个反应 6000 GB3001-24 GB 定点突变试剂盒

24个反应 3200 GB3001-48 GB 定点突变试剂盒

48个反应

6000

一步法PCR 检测试剂盒

---无需样本处理和核酸提取,操作快速简便!

---一步加样,PCR 易如反掌! ---省钱省时,分子实验室的必备!

GB-Direct PCR 是一种世界领先的核酸释放和扩增试剂盒,包含核酸萃取液和相应的PCR 缓冲液 (含PCR 酶)。各类生物样品经过GB-Direct 核酸萃取液处理后可直接用于PCR 反应,无需提取其DNA 。GB-Direct 萃取液仅需10 min 左右,即可以有效地释放生物样品中的核酸。而且,经优化后的PCR 预混液可有效地消除一些抑制剂(如血红蛋白等)对PCR 反应的干扰,使得PCR 反应高效进行。GB-Direct PCR 适用范围广泛,包含一系列生物样品,如血液,动物、植物、真菌、 酵母、细菌和病毒等,简化实验步骤,减少大量的核酸纯化试剂的消耗,为研究人员节约大量的时间和科研经费。对于商检,CDC,疾病诊断的用户,还可以在很大程度上降低污染,保护操作人员的安全。

特点:

● 简单快速: DNA 释放仅需10 min 左右 ● 无需提取其DNA:节省时间,成本,劳动

● 易于自动化:与高通量的基因的工作流程兼容

● 多重PCR: 可以使用多重PCR 引物,扩增多个DNA 序列,经优化后可用于QPCR 检测 ● 安全,高效:减少操作,提供对操作人员的安全性,也降低样品被污染的风险 ● 省时,省力,低成本:减少周转时间和基因检测的成本

订购信息

编号 名称

规格 价格(元)

GB4001-24 一步法快速PCR 检测试剂盒(human blood) 200*25μl

2000 GB4002-24 一步法快速PCR

检测试剂盒(Animal Tissue )

200*25μl

2375

GB4003-24 一步法快速PCR 检测试剂盒(Plant) 200*25μl 2375 GB4004-24

一步法快速PCR 检测试剂盒(Cell)

200*25μl

2000

GBfectene –Elite 高效转染试剂

---可与Lipo2000完全媲美的高效转染试剂

来自于GBI 的GBfectene-Elite 转染试剂是一种新型的真核细胞转染试剂。该试剂可与DNA 形成稳定的复合物,保护DNA 免受降解,从而高效地将DNA 转染至真核细胞中。它不但适用于多种常用类型的细胞系,也适合一些难转染的细胞,如 Jurkat 和 RAW264.7 等。与其它转染试剂相比,GBfectene-Elite 转染试剂转染效率高、细胞存活率高,毒性小,广泛用于瞬时和稳定转染, 也可以应用于蛋白表达和基因功能的研究。

特点

● 转染效率高,转染效果优于市场同类商品 ● 细胞存活率高、毒性小 ● 细胞适用范围广:可适用在难以转染的原代细胞操

作简便,转染后无介质变化要求

订购信息

编号

名称

规格 价格(元) GB1001-750 GBfectene -Elite 转染试剂 0.75ml 1700 GB1001-1500

GBfectene -Elite 转染试剂

1.5ml

2800

GBfectene-Elite 转染试剂的操作流程

GBfectene-Elite 成功进行细胞转染的范例

GBclonart全长cDNA库系列产品

---提供高度富集全长序列的cDNA文库和均一化文库

GBclonart全长cDNA文库构建系统提供了如何从mRNA、total RNA中生成高品质全长cDNA文库的简单而有效的方法。该系统结合了GBI公司的两种创新技术:GBclonart全长cDNA合成和GBclonart无缝克隆技术。

特点

●无需限制性内切酶,cDNA合成及克隆过程无需

平端处理

●高度富集全长cDNA文库

●可将您的文库插入到载体上的任意位置

●高效传输克隆片段到目的载体进行蛋白表达及功

能分析

cDNA文库种类:

1、标准未剪切cDNA文库:采用特异性重组技术

(GBclonart cDNA library construction kit),不

使用限制性内切酶酶切的步骤,无需担心任何基因被

剪切;利用重组酶可以将构建好的cDNA文库穿梭于任何表达载体上

2、全长未剪切cDNA文库:利用独特的富集含5′帽子结构的全长mRNA技术,确保获得高度富集的全长cDNA 文库;采用特异性重组技术(GBclonart cDNA library construction kit),不使用限制性内切酶酶切步骤,无需担心任何基因被剪切;利用重组酶可以将构建好的cDNA文库穿梭于任何表达载体上

3、均一化cDNA文库:通过基因组DNA饱和杂交的原理,将cDNA文库中高丰度的基因拷贝数减少10-100倍,增加克隆低丰度mRNA的机会,减少大规模EST测序的费用

技术平台:GBclonart cDNA library construction system

● 独特的富集含5’端帽子结构的全长mRNA技术,确保获得高度富集的全长cDNA文库

● 通过DNA饱和杂交的原理,将cDNA文库中高丰度的基因拷贝数减少10-100倍,同时增加克隆低丰度mRNA 的机会

质量保证:

● 文库含有至少5×106个原始克隆

● 动物样品平均插入片段,大于1.2kb,植物样品大于1.0kb

● 全长基因比例大于70%

● 有超过90%的载体含有插入片段

订购信息

价格(元)

GB2100-F cDNA文库(全长未剪切cDNA文库)4*1ml 24500 GB2100-N cDNA文库(均一化未剪切cDNA文库)4*1ml 49500 GB2100-CS 定制文库cDNA文库(标准)4*1ml 27000 GB2100-CF 定制文库cDNA文库(全长)4*1ml 45000 GB2100-CN 定制文库cDNA文库(均一化)4*1ml 85500

高端生物技术服务

1.全长cDNA 克隆服务 (请询价: service@https://www.sodocs.net/doc/1317796023.html, )

提供丰富的人,鼠和其它各个物种的全长cDNA 服务, 根据客户提供的基因的Accession Number,我们提供带有测序报告的全长cDNA. 并且可以将全长cDNA 构建到带有各个标签的载体上, 满足不同研究人员的需要.

2.慢病毒包装服务 (请询价: service@https://www.sodocs.net/doc/1317796023.html, )

3. RNAi 干扰服务(请询价: service@https://www.sodocs.net/doc/1317796023.html, )

4.蛋白表达服务 (请询价: service@https://www.sodocs.net/doc/1317796023.html, )

● 技术平台:哺乳动物细胞表达系统---GBexpress 系统 ● 可快速地获取蛋白,并有正确折叠和翻译后修饰 ● 使用的无血清培养基可简化下游纯化分泌蛋白的工作

1. RNAi 载体表达

设计针对特定基因的shRNAi 或miRNAi 序列,并将其连入RNAi 载体中 2. RNAi 导入优化 ● 利用GBI 转染技术将RNAi 高效地转入细胞,使得RNAi 获得最大化的干扰效果。 ● 病毒侵染优化: 针对难于转染细胞(特别是神经细胞、悬浮细胞、干细胞),基于GBI 的RNAi 病毒载体构建、包装、浓缩等技术,利用病毒进行RNAi 研究 ● 筛选RNAi 稳定细胞株: 利用抗生素来筛选稳定表达shRNiA 或miRNAi 的细胞株 3. RNAi 干扰效果检测

用实时定量PCR 方法检测mRNA 水平的基因敲减效果;通过Western blot 方法检测蛋白水平的基因敲减效果 RNAi 服务流程 ● 针对特定基因,设计Knock-iT shRNAi , miR RNAi 序列;合成该序列并退火生成双链DNA ● 将DNA 与RNAi 载体相连,连接物转化大肠杆菌 ● 测定全长序列以鉴定shRNAi, miRNAi 序列

慢病毒载体能够产生表达高滴度的慢病毒,在周期性和非周期性细胞、干细胞、受精卵以及分化的后代细胞中表达目的基因,

实现在多种类型的细胞和转基因小鼠中特异而稳定的基因

表达的功能,为在原代的人和动物细胞组织中快速而高效地研究基因功能,以及产生特定基因表达的动物提供了可能性,为基因功能的研究提供了更强有力的工具。 我们提供的慢病毒包装类型: ● cDNA 过表达慢病毒载体包装 ● shRNA 慢病毒包装 ●

miRNA 慢病毒包装

我们提供完整的实验报告,鉴定图谱,测序结果,病毒成品。

诺晶生物还提供高性价比的分子实验室配套产品!

ne Drop ?超微量分光光度计

全国合作经销商

96通道半自动液体加样器

Thermo 常规PCR 和QPCR 仪

高灵敏度化学发光成像系统

https://www.sodocs.net/doc/1317796023.html, service@https://www.sodocs.net/doc/1317796023.html,

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