HEK293细胞
兄弟最近在培养HEK293细胞，细胞是刚从美国ATCC买回来的，问题是复苏后几代，细胞表现出2种形态，请大家看一下，哪个是正常的，不正常的是什么原因呢？
附图
图2
我的细胞也出现了这种现象，即使是同一瓶细胞传代，也可能出现一瓶像图1，一瓶像图2。图1的瓶底出现点状物，细胞很容易漂浮。我认为可能是血清质量问题，建议换一批血清或提高血清浓度试一下，把那种长得网状的细胞丢弃，几代之后再看看情况如何。
我觉得图2的状态比较正常,图1中的细胞状态不太好了.我分析有以下几个原因:
1.HEK293因为贴壁能力非常差,所以培养皿的质量很重要,一般我每次传代都会换新的培养皿,如果一个培养皿多次传代的话,细胞的贴壁就很差了.
2.传代后24小时内不要移动和观察细胞,否则细胞容易漂.
3.HEK293的传代次数超过30代以后,状态会变差,需要重新复苏培养了.
“人之巧”与“天之巧”——细胞与计算机复杂程度比较
8、“人之巧”与“天之巧”——细胞与计算机复杂程度比较 科学技术发展到今天，连我们自己都为之称叹了。计算机就是人类技术发展的一个典型实例。其运算速度一直遵循着一定时间增加一倍的摩尔定律。现在普通微机的运算速度已达到每秒种30亿次之多。微机的重要存贮设备——硬盘，也大致遵循着摩尔定律，现在已达160Ｇ甚至更多。在中文中，两个汉字占一个字节，160Ｇ是3200亿字节，以前的科普作品中称“口袋图书馆”，可以在一个口袋中放下整个图书馆的内容。而今天，如果你在口袋中放一个装满文字的移动硬盘，那绝不仅仅是一个图书馆的内容，而且是个不小的图书馆。大约是几十万册每本50万字的图书。 现在，我们可以在人指甲盖大小的半导体上集成几千万个三极管。其制造工艺是微米计算。但是你如果因此认为计算机比细胞复杂，那只能说明你太不了解生命了。 现在我们就拿信息的贮存效率作一个比较。在细胞中贮存贮遣传信息的是ＤＮＡ分子，它是通过Ａ、Ｔ、Ｃ、Ｇ四种碱基的排列顺序来贮存遗传信息的。这就和计算机用二进制的０和１贮存信息是一样，ＤＮＡ是四进制。在人体细胞的细胞核里，有46个ＤＮＡ分子，含有30亿个碱基对。20世纪90年代，由美国科学家提出一项宏伟计划。按照这个计划设想，在2005年，要把人体内约4万个基因，共30亿个碱基对的秘密全部解开，同时绘画制出人类基因的图谱，要完成这一工程，预计需要数千名科学家，花费10年左右的时间，耗资30亿美元。被称之为“人体的阿波罗计划”。30亿个碱基的顺序，什么概念。如果一个人想把这些碱基顺序输入电脑里，要输100多年，何况是测出它们的顺序呢？如果这些碱基顺序已经输入到电脑里了，那么它有3Ｇ大小。也许你要说我们的硬盘有几百Ｇ之大呢？但你不要忘了，细胞贮存这些信息只用了几纳克ＤＮＡ，而我们的硬盘有几百克之多，按每克物质的贮存效率算，ＤＮＡ是硬盘一万亿倍。 ＤＮＡ的直径只有２纳米，与ＣＰＵ的微米制造工艺相比也要精巧许多。 我们可以在指甲盖大小的地方集成上千万个三极管，这是已经够神奇了，但同生命的复杂程度来讲，仍是小巫见大巫。为什么这样说呢？人体在指甲盖大小的视网上，有上亿个视杆和视锥细胞。而每个视觉细胞的复杂程度与三极管都不可同日而说。三极管是由三块不同杂质的半导体组成的。而每个视觉细胞里还有细胞器、细胞核，并且细胞器和细胞核里仍有复杂的结构。 现代人类可以制造最复杂的机器，但如果把生命比作是大自然用细胞制造的机器的话，这台生命机器不仅仅是复杂，而且轻便，耐用。 肾是人体的器官，它可以有效地排出血液中的尿素等有毒物质。通过尿液排除出体外，如果人的肾脏发生严重病变，血液中的有毒害物质就会威胁人的生命。在医学上，人类发明了透析设备来行使肾脏的功能。这已经是高科技了。对于一个健康人而言，肾脏可以为我们日夜不停地工作几十年，但透析设备却没这么耐用，而且体积庞大是不能和我们的肾相比的。在人工心脏研究中，有人说过这样一句话：“制造人造心脏和阿波罗登月计划一样艰难”。但是阿波罗登月计划早已实现，而人造心脏还遥遥无期。也许这名话，应改为：“人造心脏比登月计划要难的多。” 我们利用技术，不继地创造着奇迹，而生命世界的奇迹比我们创造的奇迹即大而且多。 拿复制技术来讲，高速轮转机，一个小时可以印上万份报纸，三天不停地印制也印不到１百万份。但如果我们把一个大肠杆菌培养３天的话，它可以复制出几百亿个细菌来。海龟的寿命是300年，它每天都遨游于大海，而人造的机器，30年后如果仍然能使用，那恐怕都算是奇迹了。 更为重要的是，生命还具有繁殖能力，进化能力，这都是人造机器不可比拟的。所谓科
计算机选择题
在Word中，如果使用了项目符号或编号，则项目符号或编号在（c）时会自动出现。 （A）每次按回车键（B）按Tab键 （C）一行文字输入完毕并回车（D）文字输入超过右边界 在Windows中的“任务栏”上显示的是（A）。 （A）系统正在运行的所有程序（B）系统后台运行的程序 （C）系统禁止运行的程序（D）系统前台运行的程序 在Excel中，如果在打印“页面设置”的“工作表”标签中选择设置了打印“顶端标题行”，则（C）。（A）只在第一页打印标题行（B）只在第一页打印左端标题列 （C）在每一页打印标题行（D）不打印标题行 使用（ A ）下拉菜单中的“背景”命令改变幻灯片的背景。 A. 格式 B. 幻灯片放映 C. 工具 D. 视图 IP地址是由一组长度为（C ）的二进制数字组成。 A．8位 B．16位 C．32位 D．20位 在因特网中，中国的国家和地区地理域名是（B）。 （A）ch （B）cn （C）China （D）中国 下列度量单位中，用来度量计算机网络数据传输速度（比特率）的是（D）。 （A）MB/s （B）MIPS （C）GHz （D）Mbit/s 下列叙述中正确的是（C ）。 A．在同一间办公室中的计算机互联不能称之为计算机网络 B．至少六台计算机互联才能称之为计算机网络 C．两台以上计算机互联是计算机网络 D．多用户计算机系统是计算机网络 在网络通信中，双绞线和同轴电缆传输的是（C）信号。 （A）光脉冲（B）红外线（C）电（D）微波 若一台计算机的字长为32位，则表示该机器（C）。 （A）能处理的数值最大为4位十进制数 （B）能处理的数值最多为32位 （C）在CPU中能够作为一个整体加以处理的二进制数据为4个字节 （D）在CPU中运算结果最大为32 下列存储器中，只能读出，不能写入的是（D）。 （A）硬磁盘（B）软磁盘（C）磁带（D）ROM 汇编语言是一种（C）程序设计语言。 （A）与具体计算机无关的高级（B）面向问题的 （C）依赖于具体计算机的低级（D）面向过程的 已知字符K的ASCII码十六进制数是4B，则ASCII码二进制数是1001000对应的字符应为（B）。（A）G （B）H （C）I （D）J 下列叙述中，（A）是正确的。 （A）反病毒软件通常是滞后于计算机新病毒的出现 （B）反病毒软件总是超前于病毒的出现，它可以查、杀任何种类的病毒 （C）感染过计算机病毒的计算机具有对该病毒的免疫性 （D）有的计算机病毒会直接影响计算机用户的健康 计算机指令是由__D____组成的。 A.指令码和操作码 B.操作数和地址码 C.指令寄存器和地址寄存器 D.操作码和地址码
细胞培养技术个人总结
总结---细胞培养 一．基本理论概论 原代培养: 也叫初代培养，指直接从体内取出的细胞、组织和器官进行的第一次的培养。 传代培养：将细胞从一个培养瓶转移到另外一个培养瓶即称为传代或传代培养。 细胞系：原代培养物成功传代后，则称之为细胞系。(如细胞系的生存期有限，则称之为有限细胞系；已获无限繁殖能力能持续生存的细胞系，称连续细胞系或无限细胞系。) 细胞株：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。 培养类型：细胞培养，组织培养，器官培养。 细胞生长的方式：贴附生长，悬浮生长 培养细胞的形态（形态不一定，环境改变形态可能改变）：成纤维性型细胞，上皮型细胞（单层膜样生长），游走性细胞（游散生长，常有伪足跟突起） 二．培养过程及要点（切记无菌操作） （一）工作环境的处理 1. 实验进行前，无菌室及无菌操作台以紫外灯照射30-60 分钟灭菌，以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面，并开启无菌操作台风扇运转10 分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，且即使培养基相同亦不共享培养基，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以70 % 酒精擦拭无菌操作抬面。操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作。 2. 实验用品以70 %酒精擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在台面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。 3. 小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约45°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。吸管口切勿碰到容器瓶口 4. 工作人员应注意自身之安全，须穿戴实验衣及手套后才进行实验。对于来自人类或是病毒 感染之细胞株应特别小心操作，并选择适当等级之无菌操作台(至少Class II)。操作过程中，应避免引起aerosol 之产生，小心毒性药品，例如DMSO 及TPA 等，并避免尖锐针头之伤害等。 5. 定期检测下列项目： CO2 钢瓶之CO2 压力。CO2 培养箱之CO2 浓度、温度、及水盘是否有污染(水盘的水用无菌水，每周更换)。无菌操作台内之airflow 压力，定期更换紫外线灯管及HEPA 过滤膜，预滤网(300 小时/预滤网，3000 小时/HEPA)。 6. 水槽可添加消毒剂(Zephrin 1:750)，定期更换水槽的水。 （二）试验用玻璃塑料用品清洗及其消毒灭菌 清洗： （1）玻璃器皿的清洗（酸液由重铬酸钾，浓硫酸，蒸馏水配置） 浸泡—刷洗—浸酸—冲洗 （2）胶塞的清洗 刚买回的常含滑石粉等杂质，先用自来水冲洗后再按常规方法处理。2%NaoH或洗衣粉煮沸10-20分钟---1%稀Hcl浸泡30分钟或蒸馏水冲洗后再煮沸10-20分钟—晾干备用 （3）塑料制品的清洗 2%NaoH浸泡过夜—自来水冲洗--5%稀Hcl浸泡30分钟—自来水和蒸馏水冲干备用。
33复杂电力网潮流计算的计算机解法
3.3复杂电力网潮流计算的计算机解法 ３.3.1 导纳矩阵的形成 １．自导纳?节点ｉ的自导纳，亦称输入导纳，在数值上等于在节点i施加单位电压,其他节点全部接地时,经节点ｉ注入网络的电流。 主对角线元素,更具体地说，就等于与节点连接的所有支路导纳的和。? 2．互导纳?节点i、j间的互导纳，在数值上等于在节点i施加单位电压,其他节点全部接地时，经节点ｊ注入网络的电流。非对角线元素。 更具体地说,是连接节点j和节点ｉ支路的导纳之和再加上负号而得。? 3.导钠矩阵的特点:?（1)因为，导纳矩阵Ｙ是对称矩阵; (2）导纳矩阵是稀疏矩阵,每一非对角元素是节点i和j间支路导纳的负值,当ｉ和j间没有直接相连 的支路时，即为零，根据一般电力系统的特点,每一节点平均与3-5个相邻节点有直接联系，所以导纳矩阵是一高度稀疏的矩阵； (3）导纳矩阵能从系统网络接线图直观地求出。?４.节点导纳矩阵的修改?（1)从原有网络引出一支路,同时增加一节点，设ｉ为原有网络结点，ｊ为新增节点，新增支路ij的导纳为ｙij。如图３-17(a）所示。?因新增一节点，新的节点导纳阵需增加一阶。且新增对角元Ｙjj=y ij,新增非对角元Y ij＝Y jｉ＝－y iｊ,同时对原阵中的对角元Y ii进行修改，增加ΔY ii＝y ij。?（2)在原有网络节点i、j间增加一支路。如图3-１7（ｂ)所示。?设在节点i增加一条支路，由于没有增加节点数,节点导纳矩阵Y阶次不变,节点的自导纳Ｙii、Yｊｊ和互导纳Yｉｊ分别变化量为 (３-57） 图３-17 网络接线的变化图 (ａ)网络引出一支路，(b)节点间增加一支路,（c)节点间切除一支路，(ｄ)节点间导纳改变?（3）在原有网络节点i、j间切除一支路。如图3-17(c）所示。?设在节点i切除一条支路，由于没有增加节点数，节点导纳矩阵Y阶次不变,节点的自导纳Y ii、Y jｊ和互导纳Y ij分别发生变化，其变化量为 （3－58) （4）原有网络节点i、j间的导纳改变为。如图３-１7（d)所示。 设节点i、j间的导纳改变为，相当于在节点i、j间切除一条ｙij的支路,增加一条的支路。
BHK细胞培养小结
BHK细胞培养小结 报告人： 1、细胞培养 （1）培养基：DMEM培养基+10%无支原体新生牛血清+100U/ml青/链霉素 （2）细胞传代：细胞长满瓶壁90%-95%时，将上清倒掉，用D-Hanks液洗2-3遍细胞，加1ml0.25%胰酶37℃温箱消化3-5分钟后，加入3ml培养基将细胞吹下来，转移至15ml离心管，1000转离心5分钟，倒掉上清，加入3ml新鲜培养基重悬细胞，将细胞吹打均匀后按1：2或1：3的比例接种于新的培养瓶中，加入5ml新鲜培养基，放入培养箱培养。 2、细胞冻存及复苏 （1）细胞冻存液：90%无支原体新生牛血清+10%DMSO （2）细胞冻存方法：细胞长满瓶壁90%后，细胞消化离心，弃上清，加入配制好的冻存培养液（含10%DMSO），重悬细胞，或者用细胞计数板计数细胞浓度，将细胞浓度调至106个/ml，将细胞转移至冻存管，每管1ml，用棉花包住冻存管放入-80℃冰箱，2天后将冻存管放入液氮冻存。 （3）细胞复苏：先准备一支15ml离心管，加入5-8ml新鲜培养基，再从液氮取出细胞后立刻放入37-40℃水浴，在1min内融化，然后将细胞转移至装有培养基的离心管，1000转离心5分钟，倒掉上清，加入2ml新鲜培养基重悬，再转移到1个新的培养瓶中，加入4ml新鲜培养基放入培养箱培养，1天后细胞贴壁，换液。 3、注意事项 （1）如果细胞生长太慢可选用含20%无支原体血清的DMEM培养基培养，可加快细胞生长； （2）细胞传代时必须先离心后再重悬，如果不离心直接吹打后传代细胞不能吹打成单个细胞悬液，传代细胞成堆生长，影响细胞状态； （3）细胞传代时不能传得太稀，如果传代时细胞浓度太低的细胞生长速度会很慢，而且细胞容易成堆生长； （4）胰酶在使用前最好预热到37度。由于胰酶平时保存在4度，反复预热对胰酶的活性不好，可以将胰酶进行分装，尽可能避免胰酶反复冷却加热； （5）BHK还是比较好消化的，2-3min应该足够了，消化时间太长对细胞不利。可以在显微镜下观察消化情况，必要时可以拍打培养瓶帮助细胞分散，消化结束后直接加入培养基即可，胰酶会被血清灭活； （6）细胞冻存时要选细胞状态好的细胞冻存，否则细胞不容易复苏。
大一计算机选择题库
填空题 1．HTTP是指___________协议。超文本传输协议 2．HTML是指___________语言。超文本标记语言 3．在Internet中，按_______地址进行寻址。 IP 4．拥有计算机并以拨号方式上网的用户需要使用Modem，Modem的中文名称 为 _____________。调制解调器 5．从计算机域名到IP地址翻译的过程称为______________。域名解析 6．为了保障网络安全，防止外部网对内部网的侵犯，一般需要在内部网和外部公共网之间设置_______。防火墙 1．TCP/IP协议中IP是_________________的缩写。 Internet Protocol 2．IP地址记忆起来十分不方便，因此，每台主机可以取一个便于记忆的名字，这个名字就是__________。域名 3．Internet网络的最早前身是________网。 ARPAnet 4．负责文件传输的协议是_________。 FTP 5．以太网是一种______域网的网络技术。局 6．在Web页面上移动鼠标，当鼠标在某些位置变为手指形时，表明此处有 ___________。超链接 1．TCP/IP协议栈可分为四层，分别为：主机到网络层、互联网层、传输层、应用层；SMTP协议位于 __________ 。应用层 2．Internet服务提供商简称_________。 ISP 3．中国互联网络信息中心的英文缩写是___________。 CNNIC 4．计算机网络是计算机技术和________技术相结合的产物。通信 5．广域网的英文缩写为__________。 WAN 6．在因特网（Internet）中，电子公告板系统的英文缩写是___________。 Bbs
HUVEC细胞培养心得
HUVEC 培养交流讨论： 各位仁兄，我查了一下，关于HUVEC 的贴子有几千篇，不知有那位知道的多的能给总结一下？我想应该有以下几 1、讲清HUVEC 与ECV304区别 2、HUVEC 原代与细胞株的关系、区别问题 3、能否总结一下国内有哪些单位可以买到HUVEC ？是原代还是细胞株？ 4、培养中到底添加ECGS 还是ECGF ？ 5、有些推荐细胞的应该讲清自己的是原代还是细胞株，能养多少代。 希望能抛砖引玉。 票数+收藏2回帖16浏览2686我也要发帖 举报 ? 浙江医院招聘浙江省老年医学研究所（临床医学） ? 请教关于HUVEC 细胞的培养 ? 求购HUVEC ? 【互助小组】正在养或已经养过HUVEC 的请进。 docter_zhao ? 0 2004-08-03 15:14 消息 引用 分享 huvec 必需加ECGS 及肝素，否则很难生长增殖 举报 ? zjqlucky ? 15 ? 5 ? 7 2004-08-03 17:27 消息 引用 分享 docter_zhao wrote: huvec 必需加ECGS 及肝素，否则很难生长增殖 这个好像也未必吧，我养的原代的huvec 只用20％胎牛血清的RPMI1640也长的很好呀，只是传ecgs 能传这么多代吧 票数+收藏1 举报 ? 2004-09-08 00:20 消息 引用 分享 我们曾试过用m199或DMEM 加20％胎牛血清原代培养，感觉效果不佳，后来加了ECGS 及肝素，发现细胞长得能有改变 票数+收藏1 举报 引用 分享 huvec 是脐静脉内皮细胞,不是那么难养,细胞可以从脐带自己提取,卖现成的细胞株也不贵,用内皮细胞的配套培email-sinian19988@https://www.sodocs.net/doc/2a839937.html,
计算机统考操作题解题方法(解题地技巧,不是具体题目)
《计算机应用基础》操作题复习方法 考试考操作题，电脑是根据你的操作步骤给分，不是直接写答案就有分的，所以计算机操作题部分必须要做一定的练习才能掌握，以下为各部分的详细解题方法。 《计算机应用基础》操作题考试的主要内容 主要分六大部分： （一）操作系统应用部分；（二）Word文档的操作； （三）Excel 电子表格操作；（四）PPT 演示文稿操作； （五）Internet 操作部分；（六）Outlook 操作部分； 下面分别以统考中的题目为例，来讲解每个部分的知识点及需要注意的事项。（一）操作系统应用部分 操作系统应用部分的操作题比其它部分简单，每次统考都会涉及，主要考察文件操作和桌面操作。下面我们将重点阐述在操作系统应用部分需要熟悉的知识。 1、文件操作：新建、删除、复制、移动、重命名、修改属性、文件查找和创建快捷方式等。 2、桌面操作：背景、屏幕保护，创建桌面快捷方式 在考生进入考试界面后，考生直接打开我的电脑或者打开资源管理器，但最好的办法是进入考生界面后，单击下面图标，如下图： 文件操作： 在“命名”文件时，要十分注意文件名的大小写及某些字（例如“的”）的出入。 例如题目要求新建一个名为“WORD文档”的文件夹，则我们不能将新建的文件夹命名为“word 文档”，因为大小写不同也将被视为错误。另一个例子是“的”字，题目要求将某个文件命名为“刘若英新歌”，则我们不能将文件命名为“刘若英的新歌”。这些细节只要稍加注意就不会丢分了。 另一个需要注意的是，“复制”和“移动”的区别。这里的“移动”就是我们平时说得剪切。 ★例题：1 考点：新建文件夹，查找文件，移动文件，修改属性。 操作步骤： （1）单击进入“D:\Exam\模拟用户”，在空白处右键单
计算机选择题及答案
第一套 2.因特网能提供的最基本服务___E-mail,WWW,FTP ___。 3.十进制数66转换成二进制数为__ 1000010____。 5.目前3.5英寸高密度软盘的最大容量为__1.44MB _ 6.Windows从软件归类来看是属于_操作系统_____。 7. 家用电脑能一边听音乐，一边玩游戏，这主要体现了Windows的___多任务技术___。 8. 对计算机特点的描述中，__无存储____是错误的10．640KB等于_655360__字节。 11.计算机能够直接识别和处理的语言是_机器语言 ____。 12. 在计算机中存储一个汉字内码要用两个字节，每个 字节的最高位为__1和1 ____。 14. 存有文件的软磁盘格式化后，在下列叙述中正确的 是__软磁盘上的原有文件全部被删除 15. 在计算机应用中，“计算机辅助制造”的英文缩写是 ___ CAI ___。 16. 目前大多数计算机，就其工作原理而言，基本上采 用的是科学家___冯*诺依曼___提出的存储程序控制原理。 17. 在多媒体系统中，内存和光盘属于__存储媒体_ 19. 计算机病毒是__一类具有破环性的程序___ 20. _操作系统___属于一种系统软件，缺少它，计算机 就无法工作． 第二套 1. 第三代计算机所使用的主要逻辑器件为__集成电路
____。 2. 一个字节包含__8 ____个二进制位。 4. ROM的意思是__只读存储器____。 5. 在下列四条叙述中，正确的一条是__在微机中，访问速度最快的存储器是内存 6. __应用软件___是指专门为某一应用目的而编制的软件。 7. 在资源管理器窗口中，要选择一批连续文件，在选择第一个文件后，要按住_ Shift _____键，再用鼠标左键单击最后一个文件即可。 8. Windows中不通过资源管理器实现的功能是_打印文档_____ 9. 下列说法正确的是__在不同文件夹下可以有两个同名文件 10. Windows的"复制"快捷键是__ Ctrl+c ____ 11. PowerPoint中默认的视图是__幻灯片普通视图 12. _格式化_____操作会清除硬盘上的全部数据。 13. Internet是由__各种网络____组成的。 14.在信息时代，存储各种信息资源容量最大的是___因特网___。 15. 计算机感染病毒后，症状可能有__以上都对 计算机运行速度变慢文件长度变长不能执行某些文件 16. 使PC机正常工作必不可少的软件是__操作系统。 18. 启动Windows后，出现在屏幕的整个区域称为_桌面 19. 通过Internet发送或接收电子邮件(E-mail)的首要
细胞培养
2011年7月11日（以细胞换液为例子） 今天培养293细胞,培养前准备两个蓝盖瓶(200mL),1mL枪头一盒，并将蓝盖瓶和枪头高压灭菌后置于烘箱干燥。 取一双干净的手套专门用于细胞操作，将手套置于超净台中，并在超净台上放置蓝盖瓶、枪头、酒精棉球、移液器、垃圾存放盒。这些放入超净台后打开紫外灯照射30分钟左右，在这时可以将已经配好的培养基和PBS温浴30分钟。（买好的现成培养基可以直接在超净台中配好，在DMEM 中加入10%的血清，血清需要从-20度中取出解冻后使用，使用完毕后注意用封口膜封好血清管口，倒培养基的过程直接在超净台中进行，注意无菌操作！） 在实验室找一个塑料篮，在其中放入酒精喷壶、完全培养基、PBS液（如果细胞需要计数的话还可以带入计数板和刻度离心管）、所需规格的细胞培养皿将装好物品的塑料篮带入细胞间。 用酒精喷壶喷洒培养基和PBS瓶口处，然后放入超净台中（注意平放，防止液体与瓶口接触造成污染），并喷洒所带的手套。 取出超净台中的酒精棉球擦拭培养基、PBS瓶口，擦拭培养皿口，并擦拭超净台工作区。 从细胞培养箱中取出细胞，并在显微镜下观察细胞生长情况，然后将细胞带入工作间，注意按紧平皿。 细胞放在工作区中间位置，两只手的操作在其两侧不能在试剂瓶或者培养皿的上方活动。培养基、磷酸盐缓冲液、无菌培养皿、酒精棉球、血清管放在左手侧，细胞放在中间区域，垃圾存放盒、枪头、移液器放在右手侧。 将细胞培养皿微微背对自己打开，将枪头背对自己打开吸出其中原有的培养基，之后取一定量的磷酸盐缓冲液沿着培养皿壁打入培养皿中。注意：在取液体时枪头不要碰到试剂瓶，且移液器的其他部位也不要碰到试剂瓶，谨防试剂污染。磷酸盐缓冲液进入培养皿后缓慢转动培养皿以清洗细胞碎片和杂物，反复进行两遍或三遍。 枪头背对自己打开，吸取一定量的新鲜培养基沿着培养皿壁注入，盖好培养皿后取出，观察细胞情况后放入细胞培养箱中继续生长。 不同规格培养皿的倒液量（参考）： 10cm细胞培养皿中一般冲洗液加入2mL，培养基加入10mL 5cm细胞培养皿中一般冲洗液加入1mL，培养基加入5mL（实际操作时4毫升就可以了）2011年7月12日 今天独立地对昨天的293细胞换液,换液后细胞碎片少了,可是细胞却是扎堆在一起,可能要吹一下效果才比较好。 今天独自配制了1×PBS（8.0g氯化钠、0.2g氯化钾、0.24g磷酸二氢钾、1.44g磷酸氢二钠，加双蒸水至800毫升后调节pH值到7.2左右，再定容至1升），学习了pH计的使用方法，先校准后测量。 今天还看了马师兄配制DMEM培养基的过程，先将一袋DMEM粉倒入1000mL的烧杯中（烧杯先用洗涤剂洗，后用自来水冲刷几遍，再用单蒸水过一遍，最后用双蒸水过），然后向烧杯中称量放入3.7g碳酸氢钠，加入约900mLdd水后用浓盐酸调节pH到7.2，大约加入200uL浓盐酸，再定容至1L。配好后去已经放好手套、1L蓝盖瓶、高压过的过滤器、60mL注射器、酒精棉球、垃圾存放盒并紫外照的超净台中抽滤。烧杯进超净台之前需要用酒精棉球擦拭全身，然后放入超净台中开始抽滤，蓝盖瓶要注意防止污染。 2011年7月13日 今天上午对昨天换液的细胞(293)进行消化处理，处理前的准备和换液前的准备一样，首先取出培养基和磷酸盐缓冲液温浴，同时将移液器、枪头、手套、酒精棉球、垃圾存放盒以及从4度中取出的胰蛋白酶进行紫外照30分钟。 取一个塑料篮放入已经温浴的培养基和磷酸盐缓冲液、酒精喷壶进入超净台，进入超净台之前
计算机二级C语言程序修改题解题思路
计算机二级C语言程序修改题解题思路 12通信3班盛伟上次计算机二级缺几分及格，所以只能参加今年3月份的二级考试了。我认认真真的做了50套程序改错题，这里我总结了一些对于此题解题的经验与想法，过级的略过，没过级的大家不妨看看，希望对大家有用哦！ 首先大家有没有注意到每套程序改错题中到底哪里错了，在哪里改，这是个关键，也是我们需要思考的驻点。我可是真的发现了规律，当然这个规律我去年9月份备考二级的时候就已经发现了。请看下面。（每套题都是这样） 例如：/***************found***************/ d=d\10;(这就是错误的所在处，改错就在此处改）改为d=d/10; 在这里我们将/***************found***************/称为错误栏，那么每道题的错误处就在这个错误栏的下面，改正就好了。当然到底怎么改，改的过程我们需要注意什么问题，我想这是我们大家都很关心的问题，那就由我为大家说说解题思路吧。 我觉得第一步大家还是得锁定错误所在处，接着就应该看是否出现那些不易发现的“低级错误”，其实往往就是这些错误却很容易被我们忽略。这点我为大家总结了一些，供大家复习所用。我以例子的形式给大家展现出来：（1）符号错误：1.if（t==0)被写成if（t=0) 2.d=d/10;被写成d=d\10;（2）大小写混乱：3.if（*a)被写成If(*a) 4. s=s+(double)a/b;被写成s=s+(Double)a/b; 5.前文定义了int y,而下文却写成了Y=1；（3）漏加标点符号：6.printf(“%c” *a)；错误在于没有加上逗号，应该改为printf(“%c”，*a)； 7.for语句中有两个分号，但是题目往往会写成两个逗号，这是大家需要注意的地方。8.漏加分号如：result *=n-- 错误就在于末尾没有加上分号，应该改为result *=n--；9.多加分号如在if语句后面加上分号也是错误的。在此也提醒大家if语句一定要在if的后面加上括号，在括号里面写上内容也就是合法的表达式。（PS：大家发现了没有，这些小问题小细节如果我们不仔细观察，真的很难发现其中的“奥秘”哦，所以我给大家提炼整理了出来，大家一起共勉，补缺补差） 接着来谈谈for语句，说说for语句括号中的“猫腻”。例如for(i=2;i 据英国《新科学家》杂志报道,现今的计算机技术发展日新月异,但科学家们还是试图拓宽新型计算机的开发领域,近年来研制出光子计算机、量子计算机、DNA计算机等十大不可思议的奇特计算机. 光子计算机 1、光子计算机 通过光编码数据并不奇怪，目前全球通讯系统是基于光纤技术。但是使用光信号实际处理数据资料，并进行计算处理却并没有实际应用。 光子计算机是一个值得努力实现的目标，其原因是使用光可增加计算机的处理速度以及可处理的数据质量，但是获得、存储和处理光是非常困难的。像美国伊利诺斯州立大学的保罗?布劳恩等研究人员目前正积极进行该研究。他在光子晶体外建立了3D光学波导，这可能会获得光，使光在锐角转角减缓速度并发生弯曲，而不必担心光的逃逸。 其间，美国哈佛大学的米克海尔?卢金研制了一种光学型晶体管，能够成为现今计算机的能量源。卢金和同事们已建立了使用单一光子从光信号中分离出来的通道，该通道可以转换另一种光信号开启或关闭。 量子计算机 2、量子计算机 如果你想破坏传统计算机计算处理规则，量子计算机将实现这一点。量子计算机不使用1或0的电子比特信息，而采用量子机械效应而建立量子比特。 量子计算机是一类遵循量子力学规律进行高速数学和逻辑运算、存储及处理量子信息的物理装置。当某个装置处理和计算的是量子信息，运行的是量子算法时，它就是量子计算机。量子计算机的概念源于对可逆计算机的研究。研究可逆计算机的目的是为了解决计算机中的能耗问题。 计算显示，量子计算机有能力执行许多平行计算。当量子计算机中量子比特数目增加时，数据将以指数级增长。这将实现现今计算机难以实现的计算处理，比如：快速因式分解较大质数裂化密钥。 然而，量子计算机迄今仅有非常小数目的量子比特，其使用量子圆点、核磁共振、金属离子。 在word的编辑状态，选择了整个表格，执行了表格菜单中的“删除行”命令，则(D、整个表格被删除) 1. Word文档中选中一句，则应按住（D、CTRL）键单机剧中任意位置 2.设windows处于系统默认状态，在word编辑状态下，移动鼠标至文档行首空白处（文 本选定区）连击左键三下，结果会选择文档的（A、全文） 在word编辑状态下，要统计文档的字数需要使用的菜单是（D、工具） 3.在word文档编辑中，如果想在某一个页面没有写满的情况下强行分页，可以插入（C、 分页符） 在word的编辑状态，进行自体设置操作后，按新的设置的自体显示的文字是（B、文档中被选择的文字） 4.单击“页眉和页脚”工具栏上（A、页码域）按钮可以插入页码，word将把该域作为页 眉和页脚文字的一部分插入 在word中，若将光标快速的移到一处编辑位置，可以（C、Shift+F5） Word中若要在表格的某个单元格中产生一条对角线，应该使用（B、表格和边框工具栏中的"绘制表格"工具按钮） 5.在word的编辑状态下，如果要调整段落的左右边界，快捷的方法是使用（B、拖动标尺 上的缩进标志） Word文本编辑中，文字的输入方式有插入和改写两种方式，要将插入方式转换为改写方式，则可按（A、Insert键） 6.在word文档窗口中，当“开始”菜单中红的“剪切”和复制“命令呈现浅灰色而不能 被选择时，表示的是（B、在文档中没有选定任何信息） 7.Word的最大的特点是（D、所见即所得） 8.在word文本中，当鼠标移动到正文左边，形成右向上箭头时，连续单机鼠标（B、3） 次可以选定全文 9.在word中可以建立几乎所有的复杂公式，通过下列哪种方法实现A、执行"插入"菜单的 "对象"命令中选择公式编辑器 关于筛选与排序的叙述正确的是（A、排序重排数据清单;筛选是显示满足条件的行,暂时隐藏不必显示的行） 10.在word编辑状态下，当前输入的文字显示在（A、插入点） 11.在word的编辑状态，执行“开始“菜单中的”粘贴“命令后D、剪贴板中的内容复制到 插入点 在word的编辑状态，当前编辑的文档时C盘中的D1.DOC文档，要将该文件存储到软盘，应当使用的是（C、文件菜单中的"另存为"命令） 12.在word的表格操作中，改变表格的行高与列宽可以用鼠标操作，方法是（D、当鼠标指 针在表格线上变为双箭头形状时拖动鼠标） 在word的编辑状态，文档串口显示出水平标尺，拖动水平标尺上边的“首行缩进“滑块，则（D、文档中被选择的各段落首行起始位置都重新确定） 为在word文档中获得艺术字的效果，可以选用下列哪种方法B、执行"插入"菜单的"图片"命令 13. 14.在word中，在页面设置选项中，系统默认的纸张大小是（B、A4） 15.在word的“文件“菜单底部显示的文件名所对应的文件时（B、最近被操作过的文件） 16.在word文档编辑中，使用哪个菜单中的“分隔符……“命令，可以再文档中指定位置 1 目录 293和293T 293T细胞的培养心得293T细胞的培养与传代Jurcat细胞的传代 悬浮细胞培养方法Jurcat细胞培养方法 293T细胞的培养心得 点击次数： 12 发表于：2008-08-24 23:25转载请注明来自丁香园 来源：丁香园 293T细胞差点被我养死，幸好我又将它起死回生，一点心得。 细胞传代：当细胞在细胞培养瓶内长满达到80％时就要传代，一传二，24小时后再传代。48小时传就不好了，如果在24小时后细胞没有长到80％，应该换新的培养基，不然，培养基变黄，细胞脱落。 细胞消化：将细胞培养瓶竖立放置，吸走培养基，如果培养基中的脱落细胞较多，说明细胞现在很容易脱落，只要加入1ml的PBS+EDTA(0.02%)，来回轻微晃动培养瓶直到细胞完全脱落，加入10mlMEM(10%杭州四季青胎牛血清），混匀，不能吹打，分装2瓶，如果细胞没长满就脱落，则只需加入5mlMEM，不分装。如果培养瓶中的细胞贴壁较牢固，培养基上清没有细胞脱落碎片，且细胞长满达到80％以上，吸走培养基，加入5ml 的PBS+EDTA(0.02%)，迅速轻微晃动，竖立培养瓶，吸走，加入1ml0.05%胰酶，37度消化不超过3min，细胞完全消化脱壁，取出加入10ml培养基轻微吸打混匀，分装2瓶。 培养基：MEM(GIBCO)+10%胎牛血清（杭州四季青）＋双抗 293T细胞的培养与传代 点击次数： 24 发表于：2008-08-25 20:47转载请注明来自丁香园 来源：丁香园 293细胞是转染腺病毒E1A基因的人肾上皮细胞系，293T细胞由293细胞派生，同时表达SV40大T抗原，含有SV40复制起始点与启动子区的质粒可以复制。 大家注意293T细胞的一个重要特性：室温下不贴壁，但37度时可以重新贴壁。 3.3复杂电力网潮流计算的计算机解法 3.3.1 导纳矩阵的形成 1．自导纳 节点i的自导纳，亦称输入导纳，在数值上等于在节点i施加单位电压，其他节点全部接地时，经节点i注入网络的电流。 主对角线元素，更具体地说，就等于与节点连接的所有支路导纳的和。 2．互导纳 节点i、j间的互导纳，在数值上等于在节点i施加单位电压，其他节点全部接地时，经节点j注入网络的电流。非对角线元素。 更具体地说，是连接节点j和节点i支路的导纳之和再加上负号而得。 3．导钠矩阵的特点： （1）因为，导纳矩阵Y是对称矩阵； （2）导纳矩阵是稀疏矩阵，每一非对角元素是节点i和j间支路导纳的负值，当i和j间没有直接 相连的支路时，即为零，根据一般电力系统的特点，每一节点平均与3-5个相邻节点有直接联系，所以导纳矩阵是一高度稀疏的矩阵； （3）导纳矩阵能从系统网络接线图直观地求出。 4．节点导纳矩阵的修改 （1）从原有网络引出一支路，同时增加一节点，设i为原有网络结点，j为新增节点，新增支路ij的导纳为y ij。如图3-17（a）所示。 因新增一节点，新的节点导纳阵需增加一阶。且新增对角元Y jj=y ij，新增非对角元Y ij=Y ji=－y ij，同时对原阵中的对角元Y ii进行修改，增加ΔY ii＝y ij。 （2）在原有网络节点i、j间增加一支路。如图3-17（b）所示。 设在节点i增加一条支路，由于没有增加节点数，节点导纳矩阵Y阶次不变，节点的自导纳Y ii、Y jj和互导纳Y ij分别变化量为 （3-57） 图 3-17 网络接线的变化图 （a）网络引出一支路，（b）节点间增加一支路，（c）节点间切除一支路，（d）节点间导纳改变 （3）在原有网络节点i、j间切除一支路。如图3-17（c）所示。 设在节点i切除一条支路，由于没有增加节点数，节点导纳矩阵Y阶次不变，节点的自导纳Y ii、Y jj和互导纳Y ij分别发生变化，其变化量为 计算机冗余容错 fault-tolerant computer rongCUO llSUQn』l 容错计算机(fault-tol~t computer)在硬件发生故障或软件产生错误时仍能继续运行并完成其既定任务的计算机系统。容错计算机的主要设计目标是为了提高计算机系统的可靠性、可用性和可信性等性能。提高计算 ·600· 容机可靠性的方法可以分为两大类:一类是排错技术，主要是通过使用可靠性高的元器件，严格的老化筛选等方法达到尽量减少发生故障的可能性; 另一类是容错技术，主要是运用元余技术来抵消由于故障而引起的影响。所谓冗余技术，简单地说，是在正常系统运行所需的基础上加上一定数量的信息、时间或后备硬件、后备软件的方法。冗余技术是容错计算机中容错技术的基础。冗余大致上可以分为下列几种类型: (l)硬件冗余以检测或屏蔽故障为目的而添加一定硬件设备的方法; (2)软件冗余为了检测或屏蔽软件中的错误而添加一些在正常运行时不需要的软件的方法; (3)信息冗余在实现正常功能所需的信息以外，再附加一些信息的方法，例如纠错码就是信息冗余的一种形式; (4)时间冗余使用附加一定的时间来完成系统的功能，这些附加的时间主要是用在故障检测或故障屏蔽上。 最常用的硬件冗余是硬件的重复。硬件冗余一般可以分为3种类型:静态冗余(也称为被动冗余)、动态冗余(也称为主动冗余)和混合冗余。静态冗余将已发生的故障屏蔽起来，使不影响运行的结果。被动冗余主要是依靠表决机制来屏蔽发生的故障，因而这种方法不需要故障检测也不必进行系统的重新配置等就可以获得容错的效果。被动冗余技术中使用最广的是三模元余TM[R。TMR的基本概念是使用3套完全相同的硬件系统执行相同的任务，然后由1个多数表决器对这3套系统的输出进行表决以确定整个系统的输出。多数表决器的表决原则是三中取二。也就是说三模冗余系统可以容许有1个模块发生故障而不至于影响到整个系统运行的正确性。三模冗余的关键是多数表决器本身的可靠性问题。提高多数表决器可靠性的方法有多种，其中最常用的方法是多数表决器本身也使用三模冗余，即利用3个独立的多数表决器，每个多数表决器分别接受来自3个模块的输出作为它的输人，然后再分别输出。这种系统通常被称为带三重多数表决器的三模冗余系统。除了三模冗余系统外，还有多于三模的冗余，称为N模冗余。主动冗余技术与被动冗余技术相反，它是通过故障检测、故障定位及故障恢复等手段达到容错的目的。因而在主动冗余技术中不是去防止故障引发的错误，而是暴露由故障引发的错误，从而去纠正错误。主动冗余技术中 动物细胞培养总结 一．实验准备 1.实验器械、器皿的清洗和消毒 （1）清洗和包装 离心管，2ml,15ml)若干，冻存管若干放进铝饭盒，用牛皮纸包裹，系紧棉绳，用笔在饭盒上和牛皮纸上标记盒内所装物品名称、数量、日期和所属人名称。 蓝枪头两盒，黄枪头白枪头各一盒用牛皮纸包裹，用棉绳扎紧。 取适量蒸馏水于4L玻璃瓶，瓶盖拧松半圈。 过滤器，250ml玻璃瓶，500ml玻璃瓶用自来水毛刷洗涤剂刷洗，蒸馏水润洗，烘干。 过滤器两部分分别包裹，先将瓶口部位用锡纸包裹后，再罩以牛皮纸，再用棉布密包起来，用棉绳扎紧。 玻璃瓶拧下瓶盖，瓶身浸酸。浸酸时应注意安全，须穿戴耐酸手套和白大褂，注意保护好面部和身体裸露部分，提前备好一盆水在旁以便浸酸结束后清洗耐酸手套，防止走动时酸液滴到地板上不好清洗。瓶口慢慢沉入液面下，注意缓慢降低瓶身，使液体慢慢浸入瓶内，以免产生气泡溅出酸液，发生危险。浸酸时器皿要充满酸液，勿留气泡，浸泡过夜。取出瓶身时，须穿戴耐酸手套和白大褂，注意保护好面部和身体裸露部分，提前备好一盆水在旁，取出后将瓶身放入盆内水中在转移至水池边清洗，以免酸液滴落地板不好清洗。换水洗几次，待水澄清后开始冲洗，每瓶都用自来水灌满，倒掉，重复15次，再用 蒸馏水漂洗5次，去离子水漂洗3次，烘干备用。 （2）消毒灭菌 1>全自动高压灭菌锅：插电源，打开开关，检查水位，若水位不足加蒸馏水补足，放入物品，瓶类物体须拧松盖子后放最上面一筐，盖上灭菌锅盖，拧紧盖子至温度显示栏的左上角有一红点亮灯，按start开始升温。若灭有无菌水或玻璃瓶待降温至常温再打开，打开后立即拧紧，无菌水瓶口封上封口膜。若没灭瓶类物品，降温至80度左右即可打开灭菌锅，须戴上线手套取出。 2>手提式高压灭菌锅：插电源，打开开关，检查水位，若水位不足加蒸馏水补足，检查设定是否为121度20分钟，放入物品，盖上灭菌锅盖，注意导气管一定插到锅底并不能堵塞，用手对称地拧紧锅盖螺栓，再用扳手继续拧紧。加温升压之前，先打开排气阀门，加温约半小时后见排气阀处开始排残留在锅内的冷空气，排气五分钟，关闭排气阀，继而开始升压。灭菌后不要立即打开气阀放气以免水汽喷出。待自然降温至常压才能打开气阀。 玻璃瓶须拧紧，饭盒，枪头灭菌后放入烘箱烘干备用。 2.无菌间消毒及设备检查 用84消毒液拖地，用原液按照1：29的比例兑水，抹布、拖把擦洗。配400ml 75%酒精于盆中，用酒精棉仔细擦拭CO2培养箱，超净台，超净台内物品，显微镜，桌面，若培养箱内未培养细胞可以再打开高温灭菌模式将培养箱灭菌一次。 用蒸馏水擦拭清洗水浴锅内壁，注意底座不要沾水。十大不可思议的奇特计算机
计算机习题选择(上)
细胞培养心得
3.3复杂电力网潮流计算的计算机解法
计算机冗余容错
动物细胞培养总结!!!!