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总酚含量测定

一、 测定方法概述

1. 依据酚类物质可以被高锰酸钾氧化的性质,高锰酸钾滴定法

2. 酚类化合物在碱性条件下可以与4-氨基安替比林反应生成红色染料,比色

3. 酚羟基可与酒石酸铁中的铁离子反应生成蓝色络合物比色

4. 酚类物质还原福林试剂生成蓝紫色物质,比色

二、高锰酸钾滴定法测多酚 此方法多应用在茶叶上

原理:酚类物质可以被高锰酸钾氧化,烟叶中还有一些酚类衍生物和非酚类物质也可以被高锰酸钾氧化,会使测定结果偏高。因此滴定须分两步进行:第一步滴定待测液中总还原性物质,第二步用明胶盐溶液将酚类物质沉淀后,测定待测液中其它还原性物质含量,二者之差就是样品中多酚含量。但是绿原酸不能被沉淀,因此,此法不易用来测定烟草多酚。0.1%靛红作指示剂。

酚类提取:采用沸水浴方法提取。

三、氨基安替比林比色法

此方法用来测样品中挥发性酚类化合物,常常应用在食品,水等挥发酚的测定。灵敏度最高高。

原理:酚类化合物在碱性溶液中,当有氧化剂铁氰化钾存在时,可以与4-氨基安替比林生成一种红色染料,用分液漏斗将红色染料萃取到氯仿层,在460nm 处比色。用苯酚作标准曲线,计算出样品中挥发性酚类物质含量。

1此方法酚的提取步骤比较麻烦:

先在2.5mol/L硫酸溶液中加热回流1小时,将样品中中挥发酚提取出来。通入水蒸气把酚蒸馏出来,收集并定容。

2苯酚腐蚀性强,为结晶体,不好秤取。

3蒸馏装置不能漏气,且所用的橡皮类物质需要事前用碱水浸泡,并水煮10min 。

四、酒石酸比色法

原理:酚类物质的羟基与酒石酸铁中的铁离子生成蓝色络合物,根据络合物溶液颜色深浅,在540nm 处比色,可测出烟叶中酚类物质含量。以儿茶酚或没食子酸乙酯作标准溶液。可以用来测定烟草中的多酚。 此方法酚的提取与福林法测多酚提取步骤一样。

五、福林法测烟叶多酚/总酚

1. 原理; 在碱性条件下利用多酚的还原性,多酚可以将磷钨钼酸还原成蓝色,蓝色深浅与多酚含量城正相关,可以用分光广度计进行测定。

2.试剂和仪器:

试剂:儿茶酚或没食子酸乙酯,钼酸钠,磷钨酸,Na2CO3

仪器:水浴锅,721分光光度计,试管,三角瓶,漏斗,滤纸,移液管。

3. 操作步骤:

3.1待测液制备:50mg 烟样于150mL 三角瓶中,加入80℃蒸馏水50mL ,80℃以上温度水浴提取30min (期间需要摇晃几次),取出冷却,过虑并定容至100mL 容量瓶中。此为待测液。

3.2 测定:2支干试管,各加入5ml 待测液,一支加福林试剂5ml ,一支加5ml 代替福林试剂,摇匀3分钟后,各加入5ml10%Na2CO3, 振荡,室温下显色1h ,以不加福林试剂的试管管为对照,700nm 比色。

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