大豆异黄酮对成骨肉瘤细胞株MG-63增殖活性的影响

大豆异黄酮对成骨肉瘤细胞株MG-63增殖活性的影响

【摘要】本实验采用MTT法检测了不同浓度的大豆异黄酮对人成骨肉瘤细胞株MG-63增殖活性的影响。结果表明大豆异黄酮可以抑制MG-63细胞的增殖，具有剂量效应关系。

【Abstract】To determine the effects of soy isoflavone on the growth of human cell line MG-63, the cells were treated by different concentrations of soy isoflavone for 48h then MTT assay were performed to observe the effects of soy isoflavone on cell proliferation. The results showed that soy isoflavone markedly inhibited the proliferation of MG-63 cell in dose-dependent manner.

1前言

女性从成熟走向衰退的过程中，45岁以后卵巢功能会逐渐退化，雌激素分泌减少，血液雌激素水平下降，会引起一系列包括骨质疏松在内的更年期综合征。为缓解这一症状，医学上引入了雌激素替代疗法[1]，植物雌激素因为副作用小而在雌激素替代疗法中得到广泛应用，成为了相对于人工合成药品而言的天然雌激素替代品，在预防和治疗妇女更年期综合症方面受到人们越来越多的关注。日常饮食中所包含的植物雌激素主要有异黄酮类和木质素等等，其中大豆异黄酮最为广泛存在，生产生活中为人们广泛接触。大豆异黄酮主要存在于豆类作物[2]，具有较高生物活性，许多实验研究证明大豆异黄酮具有抗肿瘤，防止骨质疏松症，改善妇女更年期障碍，防治心血管疾病等多种生理功能[3-5]。因此，研究大豆异黄酮对人成骨肉瘤细胞增殖活性的影响在研究防治骨质疏松和大豆异黄酮的抗肿瘤活性两个方面具有重要意义

2材料与方法

2.1细胞株人成骨样细胞MG-63购自中国医学科学院细胞库，37℃、5%CO2含10%胎牛血清DMEM培养基培养，贴壁生长，药物暴露细胞时选择无酚红DMEM培养基加10%活性炭处理的胎牛血清进行培养.

2.2主要试剂与仪器大豆异黄酮、DMEM培养基、胰酶、特级胎牛血清（FBS）购自Gibco公司，细胞培养瓶及24孔培养板购自Coring公司，细胞培养箱为SANYO公司生产，细胞检测仪为德国CACS公司生产；四甲基偶氮唑盐(MTT)、二甲亚砜均（DMSO）购自Sigma公司.

2.3实验方法

2.3.1药物的配制配制大豆异黄酮终浓度为2mg/ml DMSO储存液，4℃冰箱中保存备用.实验时分别依次梯度稀释成1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml、0.0625mg/ml.称取0.05g MTT溶于10ml PBS中，过滤除菌，避光保存于4℃冰箱，两周内有效。