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非放射性凝胶迁移试剂盒(EMSA)操作手册

非放射性凝胶迁移试剂盒(EMSA)操作手册
非放射性凝胶迁移试剂盒(EMSA)操作手册

清洗机 电气操作手册

操作说明书 目录: 1 投产使用 (3) 1.1 设备开机 (4) 1.2 设备关机 (5) 2 模式操作 (6) 2.1 操作台(人机界面) (6) 2.2 运行方式 (7) 2.2.1 手动运行模式( 单动) (8) 2.2.2 自动运行模式(联动运行) (9) 2.2.3 原位(基准位) (11) 2.2.4 循环结束后停止 (12) 3 操作区图面 (13) 3.1 操作画面转换 (13) 3.2 设备操作画面组成及操作 (14) 3.3 设备手动操作(即单步模式) (14) 3.3 .1 手动操作画面组成元素及其含义 (14) 3.3.2 上料输送滚道画面 (15) (16) 3.3.3 下料输送滚道画面 (17) (17) 3.3.4 机床上下料插门画面 (18) 3.3.5 升降清洗工位画面 (19) (19) 3.3.6 升降清洗工位画面 (20) (20) 3.3.7 升降清洗工位画面 (21) (21) 3.3.8 浪涌清洗工位画面 (22) (22) 3.3.9 浪涌清洗工位画面 (23)

(23) 3.3.10 浪涌清洗工位画面 (24) 3.3.11 升降吹干工位画面 (25) 3.3.12 升降吹干工位画面 (26) 3.3.13 辅助电磁阀画面 (27) 3.3.14 清洗水泵画面 (28) 3.3.15 磁辊排屑水泵画面 (29) 3.3.16 排屑吸雾画面 (30) 3.3.17 清洗加热器画面 (31) 3.4设备自动监控主画面 (32) 3.5 工件位置调整 (33) 3.6 功能切除画面 (34) 3.7 报警显示 (35) 3.8 IQ状态显示 (36) 3.9 故障诊断 (37) 3.10 加热画面 (37) 4 简要说明 (38) 4.1 设备开机 (39) 4.2 三色灯定义 (39) 4.3 密码发放和管理 (40)

核素迁移(徐鑫鑫)

核素迁移的现状和发展 (西南科技大学安全技术及工程2010000598 徐鑫鑫) 摘要:本文着重评述了当前有关放射性废物地质处置的核素迁移研究的进展,介绍了核素的迁移机理,以及讨论了迁移化学和天然类比体系。 关键词:核素迁移,进展,核废物处理,迁移化学 全世界面临着能源遗乏的紧张局面,大力发展核能将是一种不可避免的趋势。我国在核能发展方面,由于过去认识落后,起步很晚,加上现在资金和技术上的困难,在本世纪末的发展规模是很有限的。但可以预见到,在下一个世纪我国的核电事业必将有较大的发展,以满足大规模的社会主义建设对能源的需求。 从另一方面看,发展核电的重要前提是必须安全地处置核动力反应堆产主的大量的放射性废物。这些被公众所厌恶的废物的安全处置问题,已经成为当前核电发展的严重障碍。如在瑞士,法律规定核电站对核废物的贮存和处置负有责任。为此,五个核电站共同出资建立了“国家放射性废物处置组织(NAGRA)”全面负责规划、研究和解决这个难题,然后将根据废物处置方案的安全可靠性,进行全国公民投票来决定继续使用核电站还是关闭全部核电站。 最终安全地处置核废物的目的是将放射性废物与人类环境相隔离,使人类不受其放射性的危害。世界各国公认的较为安全的处置方法(主要指高放废物)是地质处置,即将放射性废物处置库建造在深度地质层中,使用工程的和天然的多层屏障将废物隔离起来,天然的深厚的地质岩层和地层成为有效的最后屏障。可是,必须看到这种屏障并不能保证绝对的安全。在几百年、几千年后水泥废物库及包装体终将分崩瓦解,废物中的各种放射性核素将随着地下水流,或多或少地从地下废物库中迁移到生物圈中来。因此,对放射性核素的迁移行为和规律的研究是放射性废物安全处置的一个十分关键的问题]2][1[。 1 核素的迁移机理 放射性核素在岩石中随地下水的迁移主要包含三种物理化学作用: 1) 由于水流运动及流体个别质点流速、流向差异而引起的机械弥散与分子扩散综合作用而导致的核素迁移,称为水动力弥散; 2) 核素随地下水的宏观迁移,称为对流弥散; 3) 吸附作用,当放射性核素随地下水流穿过被水饱和的岩石孔隙时,由于溶液pH值不同,在固液界面上进行不同程度的离子交换,形成岩石孔隙表面对核素的吸附作用,从而减缓扩散进程。这三种物化作用是研究放射性核素在裂隙岩石中的迁移规律时的主要方向]53[ 。

ADP含量试剂盒使用说明

ADP含量试剂盒使用说明 产品简介: ADP广泛存在于动物、植物、、微生物和培养细胞中,是描述细胞能量代谢状态的主要参数。测定ADP含量并且计算能荷,能够反映能量代谢状态。 ADP在254nm下有吸收峰,可以利用高效液相色谱法测定其含量。 试验中所需的仪器和试剂: 高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、针头式过滤器(水系,50个,0.22μm)、滤膜(水系和有机系各1个,0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可调式移液器、样品瓶(50个,2mL)、甲醇(色谱级,300mL)、甲醇(色谱级,300mL)、蒸馏水 产品内容: 试剂一:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂二:液体60mL×1瓶,4℃保存; 试剂三:粉剂1×1瓶,粉剂2×1瓶,4℃保存;临用前用少量蒸馏水将粉剂1和粉剂2溶解后倒入1000mL容量瓶中,用蒸馏水定容至1000mL,形成流动相缓冲液基质(注:试剂瓶中的粉剂要冲洗干净),4℃可保存1周; 试剂四:ADP标准品5mg×1支,-20℃保存。临用前加入1mL双蒸水,配成5mg/mL溶液,配好后-20℃可保存1周; 操作步骤: 一、实验前的准备工作: 1、将双蒸水1000mL、流动相缓冲液基质1000mL和甲醇300mL用0.45μm的滤膜抽滤,以除去溶剂中的杂质,防止堵塞色谱柱。(注:双蒸水和缓冲液基质用水系滤膜抽滤,甲醇用有机系滤膜抽滤)。 2、流动相的配制:将抽滤完毕的流动相缓冲液基质1000mL与甲醇配比为99.9:0.1(v/v),即取999mL缓冲液基质与1mL甲醇混合。

3、将抽滤完毕的甲醇和双蒸水配比成100%的甲醇,10%的甲醇,双蒸水各250mL。将2和3中的溶剂超声30分钟,以脱去溶剂中的气泡,防止堵塞色谱柱。 二、ADP的提取: 1、组织的处理:准确称取组织重量0.1g,加入1mL试剂一,提取ADP,4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。 2、细胞处理:收集约30mL细胞,离心菌体经干燥后,加入1mL试剂一,超声破壁细胞(950 W,30%,15min,工作1s间隔2s),4000g常温离心15min,取上清液,加入等体积的试剂二,混匀,4000g常温离心15min,取上清,0.22μm水系微孔滤膜过滤后冰上放置,待测。 三、ADP含量测定操作步骤: 1.开启电脑、检测器和泵,安装上色谱柱,打开empower软件,在方法组中设置进样量20μL,流速1mL/min,保留时间10min,检测波长254nm,设置完毕保存方法组。 2.用100%的甲醇、10%的甲醇、双蒸水按甲醇浓度从大到小的顺序洗色谱柱30min。 3.用流动相洗柱子,待基线稳定后开始加样。 4.加入标准品20μL,在10min内可分离ADP,ADP的保留时间在4min左右(柱子不同,保留时间有差异),计算不同浓度的ADP标准品的峰面积。 5.加入样品20μL,在相应保留时间处检测ADP的峰面积。 ADP含量的计算: 将5mg/ml的ADP标准品用双蒸水分别稀释成100μg/ml、80μg/ml、60μg/ml、40μg/ml和20μg/ml的ADP标准品溶液,以标准品浓度(μg/ml)为横坐标,峰面积为纵坐标分别计算ADP标准曲线。 注:标准品的稀释倍数要根据样品中ADP浓度确定,样品中ADP的峰面积必须落在不同浓度的ADP标准品的峰面积之内,该标准品稀释倍数只是一个参考。

荧光探针设计原理

荧光化学传感器是建立在光谱化学和化学波导与量测技术基础上的将分析对象的化学信息以荧光信号表达的传感装置。其主要组成部件有三个(图 1.1):1.识别结合基团(R),能选择性地与被分析物结合,并使传感器所处的化学环境发生改变。这种结合可以通过配位键,氢键等作用实现。2.信号报告基团(发色团, F),把识别基团与被分析物结合引起的化学环境变化转变为容易观察到的输出信号。信号报告基团起到了信息传输的作用,它把分子水平上发生的化学信息转换成能够为人感知(颜色变化)或仪器检测的信号(荧光等)。3.连接基团(S),将信号报告基团和识别结合基团连接起来,根据设计的不同连接基团可有多种选择,一般用做连接基团的是亚甲基等短链烷基。连接基团的合适与否将直接影响是否有输出信号的产生。信号表达可以是荧光的增强或减弱、光谱的移动、荧光寿命的变化等。 图1.1 荧光探针的结构 1.1.1 荧光探针的一般设计原理 (1) 结合型荧光探针[21] +

Analyte Signalling subunit Space Binding subunit Output signal 图1.2 共价连接型荧光探针 结合型荧光探针是利用化学共价键将识别基团和荧光基团连接起来的一类荧光探针,是比较常见的一类荧光探针。该类探针通过对比加入分析物前后荧光强度的变化、光谱位置的移动或荧光寿命的改变等实现对分析物的检测。在该类荧光化学传感器的设计中,必须充分考虑下列三个方面的因素。(a) 受体分子的荧光基团设计、合成:考虑到用于复杂环境体系的荧光检测,要求荧光基团要有强的荧光(高荧光量子产率,有利于提高检测的灵敏性),Stokes 位移要大(可有效消除常规荧光化合物如荧光素等具有的自猝灭现象),荧光发射最好要在长波长区(最好位于500 nm 以上,可避免复杂体系的常位于短波长区的背景荧光的干扰,另外由于长波长区发射的荧光能量的降低可减少荧光漂白现象的发生而延长传感器的使用寿命)。(b) 受体分子的识别基团:受体分子的识别基团设计以软硬酸碱理论、配位作用以及超分子作用力(如氢键、范德华力等)作为理论指导,多选择含氮、硫、磷杂环化合物作为识别分子。(c) 荧光超分子受体的组装:组装荧光超分子受体就是利用一个连接基将识别基团和荧光基团通过共价键连接在一起,要充分考虑到识别基团和荧光

电气手册

前言 电力工程建设的质量与安全是电力系统整体质量与安全的基础,是保证电力工业可持续健康稳定发展的基础。电力工程建设标准强制性条文,是贯彻落实《建设工程质量管理条例》等法律法规的具体体现,是电力建设过程中参与建设活动各方应强制执行的技术法规性条文,是从源头上、技术上保证电力工程安全与质量的关键所在。贯彻工程建设标准强制性条文是电力行业落实科学发展观、构建和谐社会的一项重要工作。参与电力工程建设的各责任主体必须认真学习与贯彻落实强制性条文,以确保工程建设质量与安全。 工程建设标准强制性条文的执行与否关系到工程建设建筑、设备的质量安全和人民的生命安全,不论是否造成后果,都必须严格执行,在《建设工程质量管理条例》中,国家首次以法规形式,明确了强制性条文的法律地位,不执行工程建设强制性技术标准就是违法,并根据违反强制性技术标准所造成后果的严重程度,规定了相应的行政处罚措施。 为进一步增强对《强制性条文》的认识,提高贯彻实施强制性条文的自觉性,建立执行《强制性条文》的长效机制,保障电力工程质量和安全。我们编制了这套火力发电工程建设强制性条文执行表格。 本套表格贯彻强制性条文,强制性执行的指导思想,体现强制性条文执行完整性、系统性、可操作性和事前、事中、事后全过程控制的原则。从执行计划、执行记录、执行检查到验收汇总作了统一规定,编制了相应表格。分别用于施工、设计、监理、建设单位的执行检查、验收监督管理,形成了执行强制性条文事前、事中和事后全过程控制的管理体系。 本套表格涉及相关专业较多,如有错漏,敬请同行提出宝贵意见,以便及时改正。

目录 前言 概述 填写说明 规范性引用文件 强制性条文执行计划表 强制性条文执行记录表 强制性条文执行检查表 强制性条文执行汇总表 附录省火力发电工程建设标准强制性条文执行管理办法

四探针操作手册

南开大学 硅光电子学与储能实验室 Four-Point Probe Operation | 2011 四探针操作手册

四探针操作说明书 Four-Point Probe Operation 第1章引言 (1) 1. 目的 (1) 2. 应用范围 (1) 3. 测试设备 (1) 四探针 (1) 数字电压源表 (2) 第2章原理简述 (3) 1. 薄膜(厚度≤4mm)电阻率: (3) 2. 薄膜方块电阻 (3) 第3章操作方法 (5) 1. 引言 (5) 2. 测试线连接方式 (5) 3. KEITHLEY 2400高压源表设置指南 (6) 4. 探针接触方式 (8) 5. 数据测试指南 (8) 第4章注意事项 (10) 附表 ................................................................................................................................................... I

第1章引言 1.目的 本说明书主要介绍用四探针法测试薄膜方块电阻及电阻率的原理及具体操作方法。 2.应用范围 测量参数:方块电阻,电阻率 测量样品:均匀薄膜,均匀薄片 方块电阻测试范围:0.01?~500M? 电阻率测试范围:10-5??cm~103??cm 样品大小:直径>1cm 精度:<±5% 3.测试设备 四探针 生产厂商: 广州四探针有限公司RTS-2型 基本指标: 间距:1±0.01mm; 针间绝缘电阻: ≥1000MΩ; 机械游移率: ≤0.3%; 探针:碳化钨或高速钢材质,探针直径Ф0.5mm; 探针压力:5~16 牛顿(总力); 使用环境: 温度::23±2℃; 相对湿度:≤65%; 无高频干扰; 无强光直射; 基本参数: Fsp=0.1 探针间距:1.0mm

基于广义积分变换法的放射性核素迁移计算

一第51卷第8期 原子能科学技术V o l .51,N o .8一2017年8月A t o m i cE n e r g y S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y A u g .2017基于广义积分变换法的放射性核素迁移计算 李一哲1,2,丁志斌1,?,富宝峰2,王秀春1,司高华2,刘东旭2 (1.解放军理工大学国防工程学院,江苏南京一210007;2.西北核技术研究所,陕西西安一710024)摘要:针对我国某铀矿尾库的风险评估需求,根据具体场地的水文地质条件,建立了包气带及饱和带中核素迁移的数学模型三在理论建模基础上,基于广义积分变换法对核素迁移方程进行求解,分析了铀尾 矿库中238U 二234U 二230T h 二226R a 二210P b 在4种情景下的迁移规律三结果表明: 广义积分变换法对于评估相对较复杂的地下污染物运移问题效果较好,尤其对于长时间尺度和污染物浓度非常小的情况,结果准确三进一步验证了较厚的包气带不仅能最低程度上减小核素在饱和带的迁移速率,而且浓度也低三吸附性能越强的介质,对核素迁移的阻滞作用越大三 关键词:放射性核素迁移;混合模型;广义积分变换法 中图分类号:P 641.3一一一文献标志码:A一一一文章编号:1000-6931(2017)08-1500-09 收稿日期:2016-09-23;修回日期:2017-01-14作者简介:李一哲(1988 ),男,陕西渭南人,助理工程师,硕士研究生,从事核环境科学研究?通信作者:丁志斌,E -m a i l :n j w a t e r d z b @q q .c o m d o i :10.7538/y z k .2017.51.08.1500C a l c u l a t i o no fR a d i o n u c l i d eM i g r a t i o n B a s e do nG e n e r a l i z e d I n t e g r a l T r a n s f o r mT e c h n i q u e L I Z h e 1,2,D I N GZ h i -b i n 1, ?,F U B a o -f e n g 2,WA N G X i u -c h u n 1,S IG a o -h u a 2,L I U D o n g -x u 2(1.C o l l e g e o f D e f e n s eE n g i n e e r i n g ,P L AU n i v e r s i t y o f S c i e n c e a n dT e c h n o l o g y , N a n j i n g 210007,C h i n a ;2.N o r t h w e s t I n s t i t u t e o f N u c l e a rT e c h n o l o g y ,X i a n 710024,C h i n a )A b s t r a c t :一A c c o r d i n g t o t h e d e m a n d o f r i s k a s s e s s m e n t o f a u r a n i u mt a i l i n g i nC h i n a ,t h e m a t h e m a t i c a lm o d e l o f r a d i o n u c l i d em i g r a t i o n i n t h e v a d o s e z o n e a n d s a t u r a t i o n z o n ew a s e s t a b l i s h e d a c c o r d i n g t o t h eh y d r o g e o l o g i c a l c o n d i t i o n s o f t h e s p e c i f i c s i t e .O n t h e b a s i s o f t h e o r e t i c a lm o d e l ,t h em i g r a t i o n e q u a t i o nw a s s o l v e d b a s e d o n t h e g e n e r a l i z e d i n t e g r a l t r a n s f o r mt e c h n i q u e ,a n d t h em i g r a t i o n r u l e s o f 238U ,234U ,230T h ,226R a a n d 210P b i n t h e u r a n i u mt a i l i n g w e r e a n a l y z e d i nf o u r s c e n a r i o s .T h e r e s u l t s s h o wt h a t t h e g e n e r a l i z e d i n t e g r a l t r a n s f o r mt e c h n i q u e f o r e v a l u a t i n g r e l a t i v e l y c o m p l e x u n d e r g r o u n d p o l l u t a n tm i -g r a t i o n i s s u e s i sv e r y e f f e c t i v e ,a n de s p e c i a l l y f o r s m a l l c o n t a m i n a n t c o n c e n t r a t i o na n d l o n g t i m e s c a l e ,t h e r e s u l t i s v e r y a c c u r a t e .T h e t h i c k e r v a d o s e z o n e n o t o n l y c a n r e d u c e t h e r a t e o f n u c l i d em i g r a t i o n i n s a t u r a t i o na t t h e l o w e s t e x t e n t ,b u t a l s o t h e c o n c e n t r a -t i o n i s l o w.T h e s t r o n g e r a d s o r p t i o n p e r f o r m a n c e o f t h em e d i u mi s ,t h e g r e a t e r t h e r o l e o f t h e r e t a r d a t i o no f r a d i o n u c l i d em i g r a t i o n i s .万方数据

土壤试剂盒操作手册和常见问题

FastDNA Spin Kit for Soil实验步骤 1.Add up to 500 mg of soil sample to a Lysing Matrix E tube. 在裂解介质管E中最多加入500mg土壤样品。 注意:推荐最多加入500mg土壤样品,含水量比较多的土壤或者碎屑多的土壤可适量减少样品量。 2.Add 978 μL Solution Phosphate Buffer to sample in Lysing Matrix E tube. 在裂解介质管E中加入978μl Sodium Phosphate Buffer 3.Add 122 μL MT Buffer. What’s happening: Begin to solubilize membrane proteins with detergents as well as extra-cellular proteins and contaminations in soil. 加入122μl MT Buffer 发生的反应:用洗涤剂溶解细胞膜蛋白以及细胞外蛋白和土壤中的污染物。 注意:为了得到更好的样品处理效果,加入土壤样品及两个缓冲液后,在裂解介质管中仍能保留有250-500μl空间。 4.Homogenize in the FastPrep Instrument for 40 seconds at a speed setting of 6.0 What’s happening: mechanical disruption of cell walls of soil organisms and releasing nucleic acids into the protective buffer. 将样品置于FastPrep?仪器上匀浆40s,速度为6.0m/s 发生的反应:机械破碎土壤微生物的细胞壁,将核酸释放入保护缓冲液中。 5.Centrifuge at 14,000×g for 5-10 minutes to pellet debris. 14,000 x g离心5-10min至沉渣 注意:如果把离心时间延长到15min,可以更好地使样品量较大的,或者细胞壁结构较复杂的细胞碎片沉降到管底。 6.Transfer supernatant to a clean 2.0 ml microcentrifuge tube. Add 250μL PPS (Protein Precipitation Solution) and mix by inverting the tube 10 times. What's happening: Separate the solubilized nucleic acids from the cellular debris and lysing matrix. Flocculation of protein-containing micelles 将上清液转移至一个干净的2.0ml离心管中。加入250μL的PPS溶液(蛋白质沉淀溶液),用手颠倒10次,使之充分混合。 发生的反应:将溶解的核酸与细胞沉渣以及裂解介质分离。产生絮状蛋白。

AGV电气操作手册20130801

AGV操作手册 (SIASUN-AGV-L1400) 沈阳新松机器人自动化股份有限公司

目录 第一章 AGV介绍3 1.1 AGV外观结构及系统构成3 1.1.1 AGV电气系统构成 3 1.2 操作面板上的开关4 1.3 功能键5 1.4图标状态显示6 1.4.1系统正常图标 6 1.4.2急停图标 6 1.4.3软件错误图标 6 1.4.4位置不详图标 6 1.4.5位置确定图标7 1.4.6充电图标7 第二章AGV运行、停车和下线操作方法8 2.1 AGV的操作方法及运行方式的选择8 2.1.1AGV手控盒功能介绍8 2.1.2 在线自动运行方式10 2.1.3 离线自动运行方式10 2.1.4 手动运行方式10 2.2 AGV暂停的操作方法11 2.2.1 AGV手动暂停11 2.2.2 AGV的急停操作11 2.2.3 非接触式停车11 2.2.4接触式停车12 2.3 AGV从系统中的退出(下线)12 2.4 安全下线(撤消登陆)12第三章AGV传感器、声音、灯光定义12 3.1AGV各传感器的定义12 3.1.1PLS区域激光防碰传感器12 3.1.2直线激光防碰传感器13 3.2AGV声音定义13

3.3AGV灯光定义13第四章操作面板的基本操作14 4.1 操作面板的文字显示14 4.2面板功能操作15第五章 AGV的手动操作17 5.1AGV的行走与转舵17 5.2货叉的操作18

第一章 AGV介绍 本章主要介绍AGV的外观结构及系统组成、操作面板、操作控制器的多种开关和按键,同时介绍操作面板和液晶显示屏上的多种显示功能。 1.1 AGV外观结构及系统构成 AGV是由机械部分和电子部分组成。机械部分包括AGV本体、货叉、控制箱、驱动轮、从动轮、保险杠、电池箱和充电连接器。电子部分包括AGV控制器(CVC600),伺服驱动器,位置控制及输入/输出单元(VMC20),驱动单元,电源和传感器。 1.1.1 AGV电气系统构成 图1-1为AGV电气系统的简单系统结构图。下面简单介绍各部分的主要功能: 图1-1 ●电源:由于AGV供电系统为24伏电池组,AGV的电源采用DC-DC转换器,把24伏电池电源转换为稳定的24V电源供电。 ●伺服系统:用于驱动AGV车轮电机、转舵电机及举升电机。 ●传感器:激光定位传感器——用于测量AGV运行时的方位;激光防碰传感器——用以探测运行路线上的障碍物;接近传感器——检测举升装置的上限位、下限位。 ●VMC20:用于控制器与伺服、传感器、报警信号、电源间I/O信

甲基化引物探针设计方法

本文叙述了一种用于甲基化分析的探针法定量PCR的引物和探针设计方法,目前用于甲基化检测的引物探针设计工具非常多,都有使用成功的案例,经过初步多方尝试,本文中叙述的为本人认为较为靠谱的方法。Oligo7的优势在于专业,参数详尽且可自由设置,模块化设计,学会后使用便利。专业的活就是要专业的用专业的工具干。

首先是进行序列转换,有较多的在线工具和联机软件都可实现,这里使用https://www.sodocs.net/doc/2b6519187.html,/methprimer/,较为简单直观。

直接将目标序列放入如上图的编辑框中,此也可直接用于相关引物的设计,不过本人没使用过,因为不能设计探针。submit后就有转化后的序列信息,如下图: 以上详细标记了CpG位置和非CpG位置的C,可直接复制到Word标注使用,下面就可以使用Oligo7利用上边的序列设计引物和探针了,如果是设计非甲基化引物探针,则使用原始序列。

关于引物和探针的一些主要参数,主要参考invtrogen的建议: Primer设计的基本原则: a)引物长度一般在18-35mer。 b)G-C含量控制在40-60%左右。 c)避免近3’端有酶切位点或发夹结构。 d)如果可能避免在3’端最后5个碱基有2个以上的G或C。 e)如果可能避免在3’端最后1个碱基为A。 f)避免连续相同碱基的出现,特别是要避免GGGG或更多G出现。 g)退火温度Tm控制在58-60C左右。 h)如果是设计点突变引物,突变点应尽可能在引物的中间。 T aqMan 探针设计的基本原则: a)T aqMan 探针位置尽可能靠近扩增引物(扩增产物50-150bp),但不能与引物重叠。 b)长度一般为18-40mer 。 c)G-C含量控制在40-80%左右。 d)避免连续相同碱基的出现,特别是要避免GGGG或更多G出现。 e)在引物的5’端避免使用G。 f)选用比较多的碱基C。 g)退火温度Tm控制在68-70℃左右。 另:目标变异碱基最好在3’末端或3’末端-1位置,保证扩增特异性,对于甲基化,则最好是C。

TPPA试剂盒说明书

T P P A试剂盒说明书-CAL-FENGHAI.-(YICAI)-Company One1

梅毒TPPA试书剂盒说明书 1、试验原理: 梅毒抗体检测是采用抗原抗体凝集反应中的抗原抗体凝集反应。其原理如下:将梅毒 (Nichols 株)的精制菌体成分包被在人载体明胶粒子上。这种致敏粒子和样品中的梅毒螺旋体(TP)抗体进行反应发生凝集,产生粒子凝集反应(TP)抗体,并且可用来测定抗体效价。 2、样本收集和贮存: 血清或血浆1ml,标本应无溶血,无脂血,无微生物污染。不满足上述要求的标本拒收,标本的采集应使用清洁,无菌的一次性的干燥管。 标本用量最少50ul,七天内检测的标本应在2-8℃保存,贮存在-20℃可保存4W,同时避免反复冻融血清。 3、安全防范: 3.1此试剂盒内含人血成分。尽管所有的对照及定点对照都已经过试验验证并且发现对于乙型肝炎表面抗原,丙型肝炎抗体,HIV抗体均为阴性;但仍认为它们具有潜在的感染性。 3.2移液过程禁止用口。 3.3 在处理试剂和标本的地方禁止吸烟,饮食。 3.4使用试剂盒和标本时,必须戴一次性手套,穿试验服。使用后请彻底洗手清洁。 3.5患者样本及其他潜在感染材料试验后应放入医用垃圾桶内。 3.6试剂的溶解液,血清稀释液和阳性对照血清含有叠氮钠作为防腐剂,叠氮钠可以和铅铜反应形成爆炸的金属叠氮化合物.为防止金属叠氮化合物的形成,应用大量的水冲洗以免其堆积. 4、试剂: 4.1 储存与稳定性: 试剂应在2-10℃保存。 冻干试剂必须在复溶后的当天使用,如果保存在2-10℃最多可使用7天。 4.2 试剂盒组成:(由富士瑞士欧公司出产) (1)溶解液(液体) 8mL×1瓶 用于调制致敏粒子和未致敏粒子。 (2)血清稀释液 29mL×1瓶 用于样品的稀释。 (3)致敏粒子(冷冻干燥)

加A试剂盒使用说明书

编码品名规格单位 北京华越洋生物 加A试剂盒50次盒GX9133 北京华越洋生物 加A试剂盒100次盒GX9133 产品及特点本产品利用Taq DNA polymerase的不依赖于模板的末端转 移酶活性,在只有dATP存在的情况下,在平末端的DNA片段加 上一个dA尾巴,使平末端片段也能被T载体克隆。 1.简单, 2X Tailing Buffer 中含有所需要的所有成分,不需要 单独准备。 2.适用于任何平末端的DNA片段,包括Pfu DNA polymerase等酶合成的DNA片段。 3.产物可以直接用于与T载体的连接。 规格及成分成份50 次包装 2 X Tailing Buffer 1.25 mL Taq DNA olymerase(5U/uL) 50 uL 使用手册1份运输及保存低温运输,-20℃保存,保存期限为一年。 自备试剂PCR片段 使用方法一:反应前纯化处理: 用Vent, Deep Vent, Pfu, Pwo等具有3到5外切活性的 DNA聚合酶扩增得到的DNA片段,必须经过彻底的去除残留的酶 的处理过程(如酚/氯仿抽提或Proteinase K处理),否则它们将 在加A反应时,切除掉加上的A尾巴,干扰反应。可以采取胶回收 和酚/氯仿抽提法等常规方法纯化,最后溶解在水或TE中,终浓度 以0.1 ug/uL为宜。 二:加A反应

在干净的0.5 mL或1.5 mL离心管中,分别加入下列成分: 回收的DNA片段(0.2-2 ug) 25 uL 2 X dA Tailing Buffer 1 uL Taq DNA polymerase(5 U/uL) 补水到50 uL 72℃保温2小时 三:反应后处理 加A反应后,Taq DNA polymerase将与DNA末端紧密结合,所以必须酚/氯仿抽提去除。如果使用Proteinase K处理后再 用酚/氯仿抽提效果会更好。得到的DNA溶于适量水和TE中后即 可用于T载体的连接反应。 疑难解答Q:Taq DNA polymerase加尾有特异性吗? A:在有四种核苷酸存在的反应体系中,Taq DNA polymerase加 尾特异性跟DNA的3’末端的核苷酸有关。如果要加T,要加尾的 DNA片段最好末位为T。如果要加A,要加尾的DNA片段最好末 位为C。其关系具体见下表: 3’末端核苷酸加尾核苷酸 A A,但效率极低 C A>C G G>A>C T T>A --DNA & Cell Biol. 12:763, 1993 关联产品加T试剂盒(dT Tailing Kit)、一站式T载体制备套装

电气操作说明书

电气操作说明书 安装和使用本设备时,请详细阅读说明书,熟悉电气线路及各按钮的功能。线路图参见附图。 1 安装说明:本设备的电源为380V三相5线制(包括火线、零线和地线),整机额定功率为48KW,接入电源线要求不低于10mm2,最好用16 mm2,务必将火线L1/L2/L3接到380V主电源空气开关上,零线接到零线位置上,地线接到地线排上,工厂应在接入电源侧安装额定电流100A以上的漏电保护断路器,加强用电安全。 2 参数设定:根据用户需要,水温最高不超过55°,实际设定值建议为50-55°。 当水温温度低于设定值时,在水位处于“满水”和开启加热的情况下,系统加热启动,在达到设定值时,停止加热,当水温低于设定值3°时,再次加热,如此循环。 当设定温度为50°时,如当前水温为48°或者高于47°时,启动加热后,系统不会立即加热,要等到水温低于设定值3度(也即37°)时,才会加热。 当水箱水位处于低位时,为保护水泵和加热管,系统将自动停止水泵和加热,请注意保持水箱的水位。 磕蛋和清洗频率的设定,磕蛋频率最高为35HZ,清洗频率最高为18HZ,用户可根据使用情况,调整参数。磕蛋和清洗状态相互切换。 用户设定的设备参数,在设备通电状态下,可以持续保存和使用,在设备完全断电的情况下,PLC的保存期为4-5天,超过时间后,数据会丢失,在数据

丢失后,系统将使用默认的开机参数,每次开机前请注意核对开机参数,及时调整到工厂需要的设定值。系统默认值为水温50°,磕蛋频率为25HZ,清洗频率为15HZ。 水温设定的围是最高55°,磕蛋频率的最高设定值为35,清洗频率的最高设定值为18。 3 页面设置: 开机进入“首页”画面如下:点击:“进入”,进入选择画面。 在此页可以选择“首页”、“流程”、“参数”、“操作”画面。

探针的设计原则

实时荧光Taqman 探针设计的几个要点 实验室很多同学都要做Real time PCR实验,实验室的师兄师姐都会有很多宝贵意见,不过也有实验室前没有做过的,查找了下资料和大家分享下关于实时荧光Taqman探针设计、实时荧光PCR探针的选择、 引物的设计及评价。 荧光探针法是用序列特异的荧光标记探针来检测产物,探针法的出现使得定量PCR技术的特异性比常规PCR技术大大提高。目前较常提及的有TaqMan探针、FRET杂交探针(荧光共振能量传递探针)和分子信 标Molecular Beacon。 广泛使用的TaqMan探针法是指PCR扩增时在加入一对引物的同时另外加入一个特异性的荧光探针,该探针只与模板特异性地结合,其结合位点在两条引物之间。探针的5′端标记有荧光报告基团(Reporter, R),如FAM、VIC等,3′端标记有荧光淬灭基团(Quencher, Q),如TAMRA等。当探针完整的时候,5′端报告基团经仪器光源激发的荧光正好被近距离的3′端荧光基团淬灭,仪器检测不到5′端报告基团所激发的荧光信号(就是说5’荧光基团的发射波长正好是3’ 荧光基团的吸收波长,因而能量被吸收传递到3’荧光基团而发出其它荧光)。随着PCR的进行,Taq酶在链延伸过程中遇到与模板结合的探针,其5′-3′外切酶活性(此活性是双链特异性的,游离的单链探针不受影响)就会将切割探针,释放5′端报告基团游离于反应体系中,远离3′端荧光淬灭基团的屏蔽,5′端报告基团受激发所发射的荧光信号就可以被探头检测到。也就是说每扩增一条DNA链,就有一个荧光分子形成,实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步。报告信号 的强度就代表了模板DNA的拷贝数。 (请注意,该图显示的不是普通的Taqman探针法,而是Taqman MGB探针法)Taqman探针检测的是积累荧光。常用的荧光基团有FAM,TET,VIC,HEX等等。当探针完整的时候,由于3′端的荧光淬灭基团在吸收5′端报告基团所发射的荧光能量,本身会发射波长不同的荧光而导致本底高,因此TaqMan探针近来又有新的发展——TaqMan MGB探针。MGB探针的淬灭基团采用非荧光淬灭基团(Non-Fluorescent Quencher),本身不产生荧光,可以大大降低本底信号的强度。同时探针上还连接有MGB (Minor Groove Binder)修饰基团,可以将探针的Tm值提高10°C左右。因此为了获得同样的Tm值,MGB探针可以比普通TaqMan探针设计得更短,既降低了合成成本,也使得探针设计的成功率大为提高——因为在模板的DNA碱基组成不理想的情况下,短的探针比长的更容易设计。实验证明,TaqMan MGB探针对于富含A/T 的模板可以区分得更为理想。 Taqman探针法已经得到广泛使用,不过有人认为这种技术利用了Taq酶5`—3`外切酶活性,一般试剂厂家只给Taq酶的聚合酶活性定标,没有同时给Taq酶5`—3`外切酶活性定标,不同批号试剂之间会给定量带来差异。另外对探针的熔点温度(Tm)仅要求其高于60°C,这就使不同试剂盒之间的特异性参差不齐,难 于做质控检测。 Real time PCR Taqman探针设计、实时多重PCR探针的选择和引物的设计及评价 一、实时荧光Taqman探针设计 总原则:探针选择要保守,引物选择要保守,因此必须找一段100-200bp相对要保守的片段来设计引物与探针。即real-time PCR的扩增片段是50bp----150bp。当找不到150bp的保守片段时,必须确保探针的 片段是保守的。

人MyoDELISA试剂盒使用说明书

人Myo-DELISA试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中人Myo-D含量。 实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人Myo-D水平。用纯化的人Myo-D抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入Myo-D,再与HRP标记的Myo-D抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP 酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的Myo-D 呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人Myo-D浓度。 样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上 清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后, 离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中 如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。

建筑电气工程操作手册

电气工程 监理操作手册 编制人 审核人 新疆恒通工程建设监理有限责任公司 2006年8月6日 说明 本手册仅适合新疆石油管理局恒通监理公司内部使用,是针对本

公司电气监理工程师对市政工程、民用建筑、油田工程的现场监理作业进行指导,规范电气监理人员监理行为而编制。 本手册以国家现行的有关强制性标准、建设监理规范、电气工程质量验收规范为依据。 由总监理工程师负责监督实施。 目录 一、掌握有关规范和标准 二、熟悉工程图纸内容

三、图纸会审和技术交底 四、施工现场临时用电检查 五、施工阶段监理工序质量控制 强电部分 1、电气设备、材料进场工序审批 2、穿线管和线槽敷设工序验收 3、导线、电缆穿管和线槽敷线工序验收 4、钢索配线工序验收 5、电缆桥架安装和桥架内电缆敷设工序验收 6、电缆沟内和电缆竖井内电缆敷设工序验收 7、电缆头制作、接线和线路绝缘测试工序验收 8、普通灯具安装工序验收 9、专用灯具安装工序验收 10、建筑物景观照明灯、航空障碍标志灯和庭院灯安装工序验收 11、开关、插座安装工序验收 12、照明通电试运行工序验收 13、接地装置安装工序验收 14、等电位联结工序验收 15、裸母线、封闭母线、插接式母线安装 16、成套配电柜、控制柜(屏、台)和动力、照明配电箱(盘)安装工序验收 17、变压器、箱式变电所安装工序验收 18、低压电动机、电动执行机构检查接线工序验收 19、柴油发电机组安装工序验收 20、不间断电源安装工序验收 21、低压电气动力设备试验和试运行工序验收 22、10KV及以下架空电力线路及杆上电气设备安装工序验收 23、避雷引下线和变配电室接地干线敷设工序验收

Annexin V-FITC 凋亡检测试剂盒操作方法及步骤说明书

Annexin V-FITC凋亡检测试剂盒 说明: 细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。以标记了FITC的Annexin Ⅴ作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。 Propidium iodide(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但在凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI能够透过细胞膜而使细胞核红染。将Annexin Ⅴ与PI匹配使用,可以将凋亡早期的细胞和晚期的细胞以及死细胞区分开来。 产品组成(50/25次反应): · Annexin V-FITC 500ul/250ul(20ug /ml) · Binding Buffer 40ml/20 ml · Propidium Iodide (PI) 250ul/125ul(50ug /ml) 保存条件: 2-8℃储存,有效期一年。 注意事项: 1.为保证得到理想的实验结果,在使用此试剂盒之前请认真阅读该注意事项; 2.试剂(尤其是小瓶装的试剂)在开盖前请短暂离心,将盖内壁上的液体甩至管底,避免开盖 时液体洒落; 3.Propidium iodide(PI)能通过皮肤吸收,对眼睛有刺激作用; 4.此试剂盒仅供科研使用,不宜用于临床诊断; 5.本试剂盒中提供的PBS为随试剂赠送,并非试剂盒的真正组成成分;细胞的洗涤同常规方法。 操作注意要点: 1.整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作; 2.反应完毕后请尽快检测,因为细胞凋亡是一个动态的过程,反应1小时后荧光强度就开始衰 变;

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