Xho I(NEB)
Xho I
#R0146
V
2,500units335.00元#R0146
S
5,000units756.00元
#R0146 L 25,000
units
3,024.00元
NEBuffer1234
%Activity75
10
10
10
5'...C^T C G A G...3'
3'...G A G C T^C
T^C......5'
来源:重组E.coli菌株，克隆有Xanthomonas holcicola(ATCC13461)的Xho I基因。
反应缓冲液:(随酶提供)NEBuffer2+BSA
50mM NaCl,10mM Tris-HCl,10mM MgCl2,1mM DTT(pH7.9@25°C)。加入100μg/ml BSA。37°C温育。
连接和再切:经过Xho I10倍过量消化，超过95%的DNA片段能够被连接和再切。
浓度:20,000units/ml.A（通过lambda DNA/Hind III鉴定）。
贮存条件:50mM KCl,10mM Tris-HCl(pH7.4),0.1mM EDTA,1mM DTT,200μg/ml BSA, 50%甘油。贮存于-20°C。
稀释兼容性:稀释液A
热失活:65°C20分钟。
注意事项:Xho I是PaeR7I的同裂酶。对哺乳动物基因组DNA的切割受CpG甲基化影响。
常用限制性内切酶酶切位点汇总
Acc65I识别位点AccI识别位点AciI识别位点AclI识别位点AcuI识别位点 AfeI识别位点AflII识别位点AflIII识别位点AgeI识别位点AhdI识别位点AleI识别位点AluI识别位点AlwI识别位点AlwNI识别位点ApaI识别位点ApaLI识别位点ApeKI识别位点ApoI识别位点AscI识别位点AseI识别位点AsiSI识别位点AvaI识别位点AvaII识别位点AvrII识别位点BaeI识别位点BamHI识别位点BanI识别位点BanII识别位点
BbvCI识别位点BbvI识别位点 BccI识别位点BceAI识别位点BcgI识别位点 BciVI识别位点 BclI识别位点 BfaI识别位点 BfuAI识别位点 BglI识别位点 BglII识别位点 BlpI识别位点 Bme1580I识别位点BmgBI识别位点BmrI识别位点BmtI识别位点BpmI识别位点Bpu10I识别位点BpuEI识别位点BsaAI识别位点BsaBI识别位点BsaHI识别位点BsaI识别位点BsaJI识别位点BsaWI识别位点BsaXI识别位点BseRI识别位点BseYI识别位点
BsiEI 识别位点BsiHKAI 识别位点BsiWI识别位点BslI 识别位点BsmAI识别位点 BsmBI识别位点BsmFI识别位点BsmI识别位点BsoBI识别位点Bsp1286I识别位点BspCNI识别位点BspDI识别位点BspEI识别位点BspHI识别位点BspMI识别位点BspQI识别位点BsrBI识别位点BsrDI识别位点BsrFI识别位点BsrGI识别位点BsrI识别位点BssHII识别位点BssKI识别位点BssSI识别位点BstAPI识别位点BstBI识别位点BstEII识别位点BstNI识别位点
限制性内切酶酶切位点汇总
Acc65I识别位点 AccI识别位点 AciI识别位点 AclI识别位点 AcuI识别位点 AfeI识别位点 AflII识别位点 AflIII识别位点 AgeI识别位点 AhdI识别位点 AleI识别位点 AluI识别位点 AlwI识别位点 AlwNI识别位点 ApaI识别位点 ApaLI识别位点 ApeKI识别位点 ApoI识别位点 AscI识别位点 AseI识别位点 AsiSI识别位点 AvaI识别位点 AvaII识别位点 AvrII识别位点 BaeI识别位点 BamHI识别位点 BanI识别位点 BanII识别位点
BbvCI识别位点 BbvI识别位点 BccI识别位点 BceAI识别位点 BcgI识别位点 BciVI识别位点 BclI识别位点 BfaI识别位点 BfuAI识别位点 BglI识别位点 BglII识别位点 BlpI识别位点 Bme1580I识别位点 BmgBI识别位点 BmrI识别位点 BmtI识别位点 BpmI识别位点 Bpu10I识别位点 BpuEI识别位点 BsaAI识别位点 BsaBI识别位点 BsaHI识别位点 BsaI识别位点 BsaJI识别位点 BsaWI识别位点 BsaXI识别位点 BseRI识别位点 BseYI识别位点
BsiEI识别位点 BsiHKAI识别位点 BsiWI识别位点 BslI识别位点 BsmAI识别位点 BsmBI识别位点 BsmFI识别位点 BsmI识别位点 BsoBI识别位点 Bsp1286I识别位点 BspCNI识别位点BspDI识别位点 BspEI识别位点 BspHI识别位点 BspMI识别位点 BspQI识别位点 BsrBI识别位点 BsrDI识别位点 BsrFI识别位点 BsrGI识别位点 BsrI识别位点 BssHII识别位点 BssKI识别位点 BssSI识别位点 BstAPI识别位点 BstBI识别位点 BstEII识别位点 BstNI识别位点
常用限制性内切酶酶切位点保护残基
酶切位点保护碱基-PCR引物设计用于限制性内切酶 发布: 2010-05-24 20:19| 来源:生物吧| 编辑:刘浩| 查看: 161 次 本文给出了分子克隆中常用限制性内切酶的保护碱基序列，如AccI，AflIII，AscI，AvaI，BamHI，BglII，BssHII，BstEII，BstXI，ClaI，EcoRI，HaeIII，HindIII，KpnI，MluI，NcoI，NdeI，NheI，NotI，NsiI，PacI，PmeI，PstI，PvuI，SacI，SacII，SalI，ScaI，SmaI，SpeI，SphI，StuI，XbaI，XhoI，XmaI， 为什么要添加保护碱基？ 在分子克隆实验中，有时我们会在待扩增的目的基因片段两端加上特定的酶切位点，用于后续的酶切和连接反应。由于直接暴露在末端的酶切位点不容易直接被限制性核酸内切酶切开，因此在设计PCR引物时，人为的在酶切位点序列的5‘端外侧添加额外的碱基序列，即保护碱基，用来提高将来酶切时的活性。 其次，在分子克隆实验中选择载体的酶切位点时，相临的两个酶切位点往往不能同时使用，因为一个位点切割后留下的碱基过少以至于影响旁边的酶切位点切割。 该如何添加保护碱基？ 添加保护碱基时，最关心的应该是保护碱基的数目，而不是种类。什么样的酶切位点，添加几个保护碱基，是有数据可以参考的。 添加什么保护碱基，如果严格点，是根据两条引物的Tm值和各引物的碱基分布及GC含量。如果某条引物Tm值偏小，GC%较低，添加时多加G或C，反之亦反。 为了解不同内切酶对识别位点以外最少保护碱基数目的要求，NEB采用了一系列含识别序列的短双链寡核苷酸作为酶切底物进行实验。实验结果对于确定双酶切顺序将会有帮助（比如在多接头上切割位点很接近时），或者当切割位点靠近DNA末端时也很有用。在本表中没有列出的酶，则通常需在识别位点两端至少加上6个保护碱基，以确保酶切反应的进行。 实验方法：用γ-[32P]ATP在T4多聚核苷酸激酶的作用下标记0.1A260单位的寡核苷酸。取1μg已标记了的寡核苷酸与20单位的内切酶，在20°C条件下分别反应2小时和20小时。反应缓冲液含70mM Tris-HCl (pH 7.6), 10 mM MgCl2, 5 mMDTT及适量的NaCl或KCl（视酶的具体要求而定）。20%的PAGE（7M尿素）凝胶电泳分析，经放射自显影确定酶切百分率。 本实验采用自连接的寡核苷酸作为对照。若底物有较长的回文结构，切割效率则可能因为出现发夹结构而降低。
常用限制性内切酶酶切位点
AatII 识别位点 Acc65I 识别位点 AccI 识别位点 AciI 识别位点 AclI 识别位点 AcuI 识别位点 AfeI 识别位点 AflII 识别位点 AflIII 识别位点 AgeI 识别位点 AhdI 识别位点 AleI 识别位点 AluI 识别位点 AlwI 识别位点 AlwNI 识别位点 ApaI 识别位点 ApaLI 识别位点 ApeKI 识别位点 ApoI 识别位点 AscI 识别位点 AseI 识别位点 AsiSI 识别位点
AvaI识别位点 AvaII识别位点 AvrII识别位点 BaeI识别位点 BamHI 识别位点 BanI识别位点 BanII识别位点 BbsI识别位点 BbvCI识别位点 BbvI识别位点 BccI识别位点 BceAI识别位点BcgI识别位点BciVI识别位点BclI识别位点 BfaI识别位点BfuAI识别位点BglI识别位点BglII识别位点BlpI识别位点Bme1580I识别位点BmgBI识别位点BmrI识别位点
BmtI 识别位点 BpmI 识别位点 Bpu10I 识别位点 BpuEI 识别位点 BsaAI 识别位点 BsaBI 识别位点 BsaHI 识别位点 BsaI 识别位点 BsaJI 识别位点 BsaWI 识别位点 BsaXI 识别位点 BseRI 识别位点 BseYI 识别位点 BsgI 识别位点 BsiEI 识别位点 BsiHKAI 识别位点 BsiWI 识别位点 BslI 识别位点 BsmAI 识别位点 BsmBI 识别位点 BsmFI 识别位点 BsmI 识别位点
幼儿园课程体系
幼儿园课程体系 立体活动课程——多元智能，立体培养、主动发展 幼儿园立体活动课程是幼儿园自主研发的园本课程。课程以《幼儿园教育指导纲要》为指导，借鉴了国内外最先进的幼儿教育理念，形成鲜明的教育特色：主题建构，双语培养，区域配套，能力延伸;师幼互动，家园共育;主动学习，个性发展;多元培养，立体成长。 综合构建数学课程—逻辑的起点，智慧的灵光，理性的基石! 是赵宋光教授亲自创建并指导下的数学教育课程，是国家七五跨八五的教育科研成果。在数学中，通过幼儿亲自的操作、体验、思考，从具体、半具体、抽象的数学操作中，构建幼儿的逻辑思维和解决问题的方法，使幼儿在快乐的游戏中学会抽象难学的数学，体验成功的快乐。 国学教育课程——以国学的优秀内涵熏染每一位儿童 中国文化以其博大精深的文化底蕴成为幼儿教育取之不尽的宝贵财富。幼儿园的国学教育是从民族文化中产生的课程，以国学经典的诵读活动、祖国特色民俗活动、民间游戏活动以及民间庆祝、娱乐活动为形式，营造传统文化和现代教育思想和谐统一的氛围，培养儿童具有中国传统文化的素养。 双语课——做会交流的中国人，做开放的中国人，做国际化的中国人 采用形式灵活的TPR教学方法，结合丰富的多元智能教育活动和大量的感觉统合训练，通过中外教师的默契配合，为幼儿营造地道的英语口语环境和游戏氛围，使幼儿感知不同的语音和语言节奏，体会不同语言背后的文化差异。从小培养幼儿的自信、活泼和开朗的性格，使幼儿乐于并善于与人沟通和交流。 快乐绅士教育课程——培养身心健康、德行良善、志趣高雅、温文尔雅的孩子! 幼儿园的快乐绅士教育包括了体育、德育、智育、艺术教育、劳动教育等教育内容，培养的是这样的现代小“绅士”：身体健壮、有良好的生活习惯;彬彬有礼、谙悉社会生活与人情世故、宽容大度、懂得感恩，关心社会;具有渊博的知识、理性的思考与独到的见解;具备高雅
培训课程体系
如何打造企业自己的培训课程体系 一、建立企业自己的培训课程体系势在必行 无数事实证明，对企业最有价值，最能带来人员技能素 质快速提升的培训教材，莫过于企业自身的经验教训，企业员工在实践中摸索体验出来的智慧结晶才是企业最好的教 科书。这样的培训内容，不仅让员工感触深，记得牢，用得着,促进人员快速成长，而且企业也能不断形成自己的知识 积累，健全自己的知识体系。 但问题是，许多企业并没有形成自己的知识积累系统。 企业目前普遍对员工培训都很重视,也愿意为员工成长做投资,但是,当员工个人能力得到提升后一旦离开企业另谋发展,保留在员工个人身上的个体知识智慧，无法转化形成公 司共同的经验。一个销售精英走了，他的知识经验也随着带走，很多珍贵的经验资源随着失传，企业和新的人员还需要重新花费大量的时间精力再培训再摸索再提升，周而复始，企业知识无法快速复制传承,有些企业因此对培训失去信心, 甚至对培训产生消极抵触心理。 那么，企业用什么方法可以将个人知识转化成企业智慧,从而建立企业自己的知识体系，真正打造属于自己的造血系统,这是许多企业共同关心的话题。 二、培训课程体系开发总体思路 课程体系的开发要结合企业总体发展战略、发展阶段以 及人力资源规划体系的总体要求进行，在系统的岗位分析以及基于岗位素质模型的基础上展开，根据不同的能力层次及专业、岗位需求设计培训课程结构，建立从岗位到能力到课程的培训课程库。
在课程体系构成上,通常有四种模式,大家可以根据企业 实际情况选择: 一是岗位型, 这种模式是针对具体的岗位而设定的，相对而言工作量比较大，适合企业发展初期，岗位层级相对精简时采用，让各岗位很清楚自己在这个岗位层级所要接受的培训课程，晋升到上级时需要学习哪些课程，所以针对性强。采用这种模式要特别注意的是，在设置课程体系时不要只局限在岗位技能层面，对员工综合素质提升方面的课程也要特别关注。 二是职能型。这种课程模式是针对工作职能进行划分的，对于规模比较大、拥有多家子公司、分公司和事业部的集团公司，这种模式比较适用，这样可以最大限度的整合不同业务类型不同的课程类别。比如，把职能类型整合成产品研发类、商品企划类、营销类、人力资源类、行政管理类、物流管理类、采购供应类、操作技能类、职业素质类、销售业务类、渠道拓展类、财务管理类等。采用这种方式要注意的是各职能之间以及部门之间课程的平衡，在设置通用课程的同时，要留意岗位素质个体差异要求。 三是部门型。针对部门设定课程，这种模式对于规模小的企业可以采取，可以让每个部门对本部门的常规课程一目了然，同时采用这种模式时要注意结合各岗位职能细分的特点，对岗位技能层面要加以关注。 四是开发型。这种模式是结合人力资源开发的角度，针对员工职业发展规划路线来设置课程，主要分为开发四阶段：新员工培训课程，员工基础岗位技能培训课程，岗位技能提升培训课程，员工个人成长培训课程。此课程体系主要依据矩阵模型构建，主要把所有的职位划分为高、中和基层三个层次的课程。有利于企业人才培养的结构化，使人力资源不断增值。 三、建立培训课程库的实施步骤和方法
活动课程与学科课程的关系简论 (2)
简论活动课程与学科课程的关系 新课程已在全国各地轰轰烈烈地铺开。新课程把“活动”纳入课程体系，改变了以往单一学科化的课程设置，使学校课程体系更趋合理，有利于培养目标的落实。要富有成效地实施新的课程计划，发挥学校课程体系的整体功能，必须从理论和实际两方面处理好两类课程的关系。 一、从辩证唯物主义认识论的角度把握活动课程与学科课程的关系 辩证唯物主义认识论认为，认识是一个“实践—认识—再实践—再认识”的循环上升过程。在这一过程中，认识有感性认识和理性认识两种形式。两种认识虽有质的不同，但不是互相分离的，二者是相互依存、相互渗透的辨证统一关系。没有感性认识的基础，就不可能有理性的认识；没有理性的认识，就不能了解事物的本质。理性认识可以通过概念、判断和推理获得，感性认识则必须亲身参加社会实践，直接接触客观事物才能获得。学生在学校中的学习是一种特殊的认识活动，符合认识事物的基本规律。其中，学科课程主要是让学生在原来具备的一定的直接经验的基础上，主要借助课本知识，通过概念和推理来掌握前人留下的间接经验，学习中获得的间接经验占优势；活动课程则通过学生亲身参与各类实践活动，获得对自然和社会事物的大量的直接经验。活动课程与学科课程相辅相成，为给学生提供一个完整的认识过程创造了极有利的条件。 辩证唯物主义认识论指出：人的认识开始于经验。一个人的经验包括直接经验和间接经验两部分。这是人的认识的两个来源，缺少任何一个，人的知识都是不完全的、不深刻的。中小学生的知识也来源于直接经验和间接经验。学生在学校中同时进行着两种不同类型的学习活动。一是以获得直接经验和最新信息为主要任务，同当前社会生活与社会实践发生直接联系的学习活动；二是以掌握间接经
(完整版)幼小衔接课程体系设置
幼小衔接课程体系设置 幼小衔接背景介绍 幼小衔接是指学前一年，从幼儿园的学习生活方式转向小学的过渡期。很多孩子因幼小衔接不适当，导致他们不适应小学的学习生活，出现诸如：注意力不集中、语言理解能力差、听觉记忆水平低下、多动、逻辑思维能力不高、人际交往存在障碍以及自信心不足等问题，最终导致孩子的学业成绩低下。 学龄前和学龄期幼儿在心理发展方面存在着显著的差异，幼儿园与小熊的生活和学习环境有着明显的不同，在教育目标、教育的方式、方法等方面更有着本质的区别。加强幼小衔接，帮助学龄前幼儿顺利的过渡到学龄期是幼儿家长，特别是大班幼儿家长十分关心的问题。 从学前期向学龄期过渡时，儿童的身心发生了一定质的变化。其核心体现在儿童的社会性发展和抽象逻辑思维发展着两个方面的心理品质上。也就是说，从幼儿园进入小学，儿童的心理将发生一个飞跃。就社会性而言，儿童进入小学后，主导活动由游戏变为课程学习，宽松的园内生活被小学严格的纪律和作息时间所取代，毫无压力的启蒙学习变成分数、名次的竞争，“两小无猜”式的人际关系也慢慢变得复杂起来了。这些骤然上升的任务密度大、难度高，规则繁多，需要独立完成任务的能力强，这无疑给儿童带来很大的压力。如果我们没有提前为儿童做好各种适应能力的准备，就会幼小过渡的坡度加大，给儿童造成伤害。 儿童入学的适应于学习准备
儿童入学所面临的主要困难是学习适应困难和社会性适应困难两个方面。学习适应困难主要表现在注意力、读写能力和运算能力方面，社会适应困难则主要表现在任务意识和完成任务的能力、规则意识和遵守规则的能力、独立意识和独立完成任务的能力以及人际交往的能力。学习适应和社会性适应两个方面并不是孤立地存在的，而是相互影响的。也就是说，儿童在社会性适应上存在的问题，会在一定程度影响其学习适应；在学习适应上的问题，也会反过来影响社会性适应。社会性适应能力的发展对儿童学习适应至关重要，可以说，做好社会性适应的工作，幼小衔接的工作就做好了一大半。但如果没有专业的技术指导，家长很难进行全面的适应性训练。 在一定意义上，学习适应的工作注意应由幼儿园和学校来做，而社会性适应则需要更多的家庭配合。所以，让家长们了解更多的社会性适应的内容和方法，以便配合学校做好幼小衔接，是很有必要的。 幼小衔接的社会性主要包括任务意识及完成任务的能力、规则意识和执行规则的能力、独立意识和生活自理能力、人际关系及人际交往能力等四个方面。这些方面存在的主要问题有： 1、任务意识和完成任务的能力——认识不到老师布置的任务 必须做到；缺乏完成任务的成就动机和责任感；缺乏完成 任务的必要机能；缺乏完成任务的信心与毅力。主要表现 在对老师话充耳不闻，不知道要把老师布置的作业记下来。 2、规则意识和执行规则的能力——表现为：不能遵守课堂的 学习规则；不能执行日常学习生活的规则；不能执行日常
活动育人课程实施方案
活动育人课程实施方案 活动育人课程实施方案 为深入贯彻落实全省中小学素质教育工作会议精神和市教育局《关于深化基础教育改革，大力推进素质教育的实施意见》，开展好五个一活动朝阳读书活动，充分利用重大节日、传统节日、纪念日中蕴含的教育资源，广泛开展民族精神、集体主义、革命传统教育和国情教育等活动，使学生受到亲情、孝道等传统美德教育和传统文化熏陶，全面提高学生的人文素养，学校决定利用传统节日资源开发活动育人课程。这也是进一步深入落实我校的市级科研课题《校本课程的开发实验与研究》的一部分，对于丰富和完善我校的校本课程体系具有重要的意义。 一、课程开发的目的、意义 以开展挖掘传统节日、纪念日教育资源活动为切入点，以人文传统教育为主线，以实践体验为途径，大胆创新，不断深化，开拓新的领域，赋予传统节日活动以新的内容。在传统节日教育内容的基础上，紧紧围绕时代教育主题和特点，传统节日活动更具有时代性，使传统节日活动不断取得新的教育效果。引导学生走进历史、了解传统、认识传统、继承传统，激发学生的爱国主义情感和民族自豪感。同时，
结合传统节日的教育活动的实施，逐步形成我校的活动育人课程。 二、实施原则 利用传统节日、纪念日开发活动育人课程，首先要遵循“以育人为目的、以活动为载体、以课程开发为手段”的原则，突出育人目的，以活动促校本课程的开发；第二，要遵循“实践性”原则，重视学生自身的实践活动，活动内容要贴近学生生活实际，有实在意义，使活动具有实效意义。要让学生在丰富的节日实践活动中受到熏陶，有亲身的体验、感悟和收获。第三，要遵循“主体性”原则。活动过程中，重视学生的主体地位和作用，要发挥学生的主动性，激发他们的兴趣，让学生自主参与活动，自主组织实施。 三、加强组织领导，把工作落到实处 学校要加强对利用传统节日纪念日开发活动育人课程的组织领导，确保活动取得实效；要成立由学校分管领导负责，各处室、年级组负责人、班主任和骨干教师组成的学校课程开发领导小组，研究制定课程开发实施方案，加强对课程开发的组织协调工作，分工明确，落实责任。 校本课程开发领导小组： 组长：李金堂 副组长：高怀信
限制性内切酶的一般原则和建议!
限制性内切酶的一般原则和建议! 1．如何做酶切反应？ 该问题看似什么简单： DNA中加上酶，然后保温一段时间就可以了。但是在实际操作过程中，我们不断听到：切不动，装不上。问题在什么地方？能系列生产限制性内切酶的公司国际上，就那么几个，位列前 3 的是NEB, Fermentas, SibEnzyme。这些公司提供酶的品质一般都能得到保证。您可以怀疑酶的质量问题，但是更多的问题来源于模板是否合适酶切要求。下面几点对你的酶切是有帮助的。 1) 成功酶切的关键是准备好模板DNA。DNA样品中不能含有有机溶剂（会使酶变性或产生星号货性），不能含有干扰酶活性的污染物质，不能含有高浓度的EDTA (TE中的EDTA浓度较低，对Mg的浓度影响较小)；同时要对DNA甲基化程度及其对酶切效率的影响要做到心中有数。 2) 选用合适的酶。根据酶切序列选用，特别注意选用甲基化对酶活性的干扰。 3) 正确使用和保存酶。酶需要保存在-20度的低温环境中，只是在需要用酶才从冰箱中取出来。运输和临时存放时需要将酶至于冰上。手拿酶管时不要接触酶管下步含酶的部分，移酶时尽可能用长TIP, 避免污染。用完后需要及时送回原处。注意：酶通常是最后加。所有4) 反应体积需要根据实验目的定，常规的酶切一般要维持在10-50ul，酶切鉴定10-20ul就可以了。 5) 模板浓度问题：浓度过高，溶液黏度过大，酶不能有效扩散，酶切效果不会好。浓度过低，也会影响酶活性。 6) 注意模板用量和反应体积的关系。对酶用量，模板用量，反应体积等要素的确定需要的是时间和经验的积累。 7) 酶切反应的各个组分加完后，需要用TIP小心混匀几次，short spin 一下就可以保温了。一般不能使用振荡器混匀。 8) 反应温度的选择。一般反应都用37度，但是 Sma I 的最适合温度是25度，37度时酶仍表现出活性，但是效率下降50%。部分从耐热菌制备的酶需要在37度以上的温度反应，如Taq I的最适温度为65度，37度保温，效率仅为前者的1/10。 9) 反应时间的选择。一般酶切鉴定30分钟就可以了。要完全酶切可以采用少量的酶长时间反应，或较高的酶量短时间处理都可以达到。在使用高酶量的时候需要注意甘油的最终浓度不要超过5%，也就是说10ul的体系，酶的用量不要超过1ul。 10) 是否和如何终止反应？酶切鉴定之类的实验不需要特殊处理。灭活的手段：加入高浓度的EDTA；65度或80度热处理20-30分钟；部分从高温菌纯化出来的内切酶由于最适的反应温度比较高，热处理灭活不一定完全，需要用苯酚/氯仿/乙醇方法纯化；电泳回收也是实验室常用除酶的手段。 2．如果遇到酶切不动或切不完全，该怎么办？ 要回答这么问题常常需要了解酶活性单位是如何确定，我们多次接到这样的问题：1个单位的酶能在60分钟内切1ug的DNA,为什么我们的DNA那么少切那么长时间也不能切开或切完全？从下面几个因素去考虑： 1) 酶是否有活性：酶的活性单位通常是在60分钟酶切1ug lambda DNA或特定线状DNA所需要的酶量。鉴定酶的活性高低不是用您待切的DNA模板，也不是别的公司的酶来判定。因为不同公司酶可能是从不同系统中纯化的，虽然识别位点相同，但是酶的特性可能是有差异的。鉴定酶必须使用使用说明书上认定的酶活确定的方式，通常需要用lambda DAN做模板来判定。同时如果酶对甲基化敏感，还需要用Dcm-, Dam-的DNA.不排除由于运输或分装不当导致酶活性下降，这种情况是很少发生。我们公
常用限制性内切酶酶切位点汇总
ApaI识别位点Acc65I识别位点 ApaLI识别位点AccI识别位点 ApeKI识别位点AciI识别位点 ApoI识别位点AclI识别位点 AscI识别位点AcuI识别位点 AseI识别位点AfeI识别位点 AsiSI识别位点AflII识别位点 AvaI识别位点AflIII识别位点 AvaII识别位点AgeI识别位点 AvrII识别位点AhdI识别位点 BaeI识别位点AleI识别位点 BamHI识别位点AluI识别位点 BanI识别位点AlwI识别位点 BanII识别位点AlwNI识别位点
BmrI识别位点BbvCI识别位点 BmtI识别位点BbvI识别位点 BpmI识别位点BccI识别位点 Bpu10I识别位点BceAI识别位点 BpuEI识别位点BcgI识别位点 BsaAI识别位点BciVI识别位点 BsaBI识别位点BclI识别位点 BsaHI识别位点BfaI识别位点 BsaI识别位点BfuAI识别位点 BsaJI识别位点BglI识别位点 BsaWI识别位点BglII识别位点 BsaXI识别位点BlpI识别位点 BseRI识别位点Bme1580I识别位点 BseYI识别位点BmgBI识别位点
BspMI识别位点BsiEI识别位点 BspQI识别位点BsiHKAI识别位点 BsrBI识别位点BsiWI识别位点 BsrDI识别位点BslI识别位点 BsrFI识别位点BsmAI识别位点 BsrGI识别位点BsmBI识别位点 BsrI识别位点BsmFI识别位点 BssHII识别位点BsmI识别位点 BssKI识别位点BsoBI识别位点 BssSI识别位点Bsp1286I识别位点 BstAPI识别位点BspCNI识别位点 BstBI识别位点BspDI识别位点 BstEII识别位点BspEI识别位点 BstNI识别位点BspHI识别位点
课程体系设计方案
专业课程体系设计方案 济南职业学院电子工程系 二○一四年四月五日
专业课程体系设计方案 一、课程体系建构 （一）课程体系开发流程 通过对行业和本区域典型电子企业的调研，确定专业对应的岗位群、岗位任职要求和主要工作任务，分析归纳职业能力，引入行业企业技术标准和职业资格标准，按照“工作岗位→工作任务→职业能力→典型工作任务→课程体系”一一对应、层层递进的方式，构建课程体系，如表1所示。 表1 课程体系的开发流程表 实施阶段实施途径阶段成果 1.行业企业岗位调研与需求分析①确定调研企业； ②实施访谈、调研； ③撰写调研报告。 专业面向的工作岗 位、岗位任职要求 2.工作任务分析①工作任务描述； ②工作任务汇总； ③企业专家访谈； ④校企合作理事会组织实践专家论证评审。 工作任务描述 3.职业能力归纳 ①行业、企业专家与学校教师共同分析工作任 务所对应的职业能力； ②校企合作理事会组织实践专家论证评审。 岗位职业能力描述 4.典型工作任务提炼①典型工作任务提炼； ②企业专家访谈； ③企业生产线实地调研； ④校企合作理事会组织实践专家论证评审。 典型工作任务描述 5.项目化课程体系构建①参观企业生产线，研究企业真实产品； ②开发设计学习项目； ③校企合作理事会组织实践专家论证评审。 开发出岗位职业能力 培养所对应的专业核心课 程及项目化课程体系 （二）课程体系构建的具体过程 调研典型企业，确定工作岗位群：通过对山东半岛蓝色经济区、黄三角高效生态经济区、济南高新区等区域内企业的调查分析，电子类企业对高技能人才的需求主要集中在以电子产品装配、电子工艺操作、电子生产管理等为主的电子产品制造岗位群，以生产质检、产品维修为主的产品检测维护岗位群和以小型电子产品设计、开发与售后服务为主的产品开发与客户服务岗位群。
构建多元化评价体系 促进综合实践活动课程教学
构建多元化评价体系促进综合实践活动课程教学 评价是课程、教学的一个有机环节，它同样也是促进学生发展的有效教育手段，评价引导了学生的发展方向。教学评价是教学活动的重要环节，评价策略的研究是综合实践活动课程实施的核心问题之一。借这个机会，我讲一下建立我县综合实践活动课程多元化评价体系的构想。其中对课堂教学评价中心已作出了基本方案，更多评价方案的还要借助各校教导部门和综合实践活动课程教师来完成。 1、综合实践活动课程评价的基本理念 （1）综合实践活动课程评价的指导思想是“以活动促发展”。 由于综合实践活动是基于实践的学习，活动本身和探究活动的结果并不是综合实践活动的目标，因此，综合实践活动课程评价真正关注的是学生在原有基础上的发展和提高。评价的评价标准应是“自我参照”标准，而不是“科学参照”标准、“社会成员参照”标准，正确的理解是以学生已有的发展基础评价标准，并突出学习过程的体验、情感、态度、价值观、综合能力，不过分强调结果的科学性和合理性，但要求其教学评价也要以促进学生发展为目标。例1：《我在活动中成长》，这个评价表以质性评价为主，通过引导学生进行自我反思性评价，树立了学生的自信心。 （2）综合实践活动课程的评价应是动态的、循序渐进的，贯穿于整个学习活动全过程。 正因为综合实践活动课程的评价具有全程性，所以这种评价随时反馈对教师教学活动、学生学习活动的信息，便于及时调整教学策略和学习策略，所以评价又成为综合实践活动课程的教学指导和学习指导。给予学生正确的评价，不单是在活动结束后，给予一张表格作为评价结果。教师更应关注学生活动过程中的表现，在日常评价中，采用多种方式，通过多种渠道表达对学生的期望和激励。如当学生在活动中遇到困难的时候，教师应给予鼓励和有力的支持；当学生有了进步的时候，教师应当表示真诚的祝贺和表扬；当学生在活动中犯错误的时候，教师应送上温暖的话语，并给予正确的指导……。同时，在评价时，教师要根据每个学生的具体情况，确定学生的“最近发展区”，因为每个学生的生理心理素质、个性特点、生活环境、兴趣愿望和能力特点等都存在着差异，他们在学习中有特定的优势和不足，其背后的原因也是各不相同的。因此，在教师对学生的评价中，教师应根据学生的具体特点给予相应的评价，尤其是要给予处于弱势的学生更多的激励，对于智力发育迟缓、被孤立和被拒绝的学生，教师要更多的了解他们的需求和困难，通过给予他们更多的支持和鼓励，使其感受到期望和信心。这样，学生才能从教师的评价中感受到评价的公正、公平，得到自己想要的帮助和鼓励。 （3）综合实践活动课程评价还具有多元化、多主体化。
常见限制性内切酶识别序列(酶切位点)
The Type II restriction systems typically contain individual restriction enzymes and modification enzymes encoded by separate genes. The Type II restriction enzymes typically recognize specific DNA sequences and cleave at constant positions at or close to that sequence to produce 5-phosphates and 3-hydroxyls. Usually they require Mg 2+ ions as a cofactor, although some have more exotic requirements. The methyltransferases usually recognize the same sequence although some are more promiscuous. Three types of DNA methyltransferases have been found as part of Type II R-M systems forming either C5-methylcytosine, N4-methylcytosine or N6-methyladenine. ApaI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5'GGGCC^C 3' BamHI（类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' G^GATCC 3' BglII （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' A^GATCT 3' EcoRI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' G^AATTC 3' HindIII （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' A^AGCTT 3' KpnI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' GGTAC^C 3' NcoI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' C^CATGG 3' NdeI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' CA^TATG 3' NheI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' G^CTAGC 3' NotI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' GC^GGCCGC 3' SacI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' GAGCT^C 3' SalI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' G^TCGAC 3' SphI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' GCATG^C 3' XbaI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' T^CTAGA 3' XhoI （类型：Type II restriction enzyme ）识别序列：5' C^TCGAG 3' 当然，上面总结的这些肯定不全，要查找更多内切酶的识别序列，你还可以选择下面几种方法： 1. 查你所使用的内切酶的公司的目录或者网站；NEB网站上提供的识别序列图表下载 2. 用软件如：Primer Premier5.0或Bioedit等，这些软件均提供了内切酶识别序列的信息；
幼儿园课程体系
幼儿园课程体系 立体活动课程——多元智能,立体培养、主动发展 幼儿园立体活动课程是幼儿园自主研发的园本课程。课程以《幼儿园教育指导纲要》为指导,借鉴了国内外最先进的幼儿教育理念,形成鲜明的教育特色：主题建构，双语培养,区域配套，能力延伸;师幼互动，家园共育;主动学习，个性发展;多元培养，立体成长。 综合构建数学课程—逻辑的起点,智慧的灵光，理性的基石! 是赵宋光教授亲自创建并指导下的数学教育课程，是国家七五跨八五的教育科研成果。在数学中，通过幼儿亲自的操作、体验、思考,从具体、半具体、抽象的数学操作中,构建幼儿的逻辑思维和解决问题的方法，使幼儿在快乐的游戏中学会抽象难学的数学，体验成功的快乐。 国学教育课程——以国学的优秀内涵熏染每一位儿童 中国文化以其博大精深的文化底蕴成为幼儿教育取之不尽的宝贵财富。幼儿园的国学教育是从民族文化中产生的课程，以国学经典的诵读活动、祖国特色民俗活动、民间游戏活动以及民间庆祝、娱乐活动为形式，营造传统文化和现代教育思想和谐统一的氛围，培养儿童具有中国传统文化的素养。 双语课——做会交流的中国人,做开放的中国人，做国际化的中国人 采用形式灵活的TPR教学方法,结合丰富的多元智能教育活动和大量的感觉统合训练，通过中外教师的默契配合，为幼儿营造地道的英语口语环境和游戏氛围，使幼儿感知不同的语音和语言节奏,体会不同语言背后的文化差异。从小培养幼儿的自信、活泼和开朗的性格，使幼儿乐于并善于与人沟通和交流。 快乐绅士教育课程——培养身心健康、德行良善、志趣高雅、温文尔雅的孩子！ 幼儿园的快乐绅士教育包括了体育、德育、智育、艺术教育、劳动教育等教育内容，培养的是这样的现代小“绅士”:身体健壮、有良好的生活习惯;彬彬有礼、谙悉社会生活与人情世故、宽容大度、懂得感恩，关心社会;具有渊博的知识、理性的思考与独到的见解;具备高雅的情趣与音乐、舞蹈、绘画、手工、乐器等知识和技能;掌握园艺、自我服务及集体公益服务的能力。 快乐创意美术课程——涂鸦幼儿心中对美的朦胧感受，发展幼儿的多元智能! 美术是心灵表现出的最持久、最具生命力的艺术。幼儿园的快乐创意美术课程采用幼儿感知训练、主动创造和情感体验行动等途径,注重美术教育的自由性、表现性和情感性，通过幼儿小手,涂鸦幼儿心中对美的朦胧感受，发展幼儿的多元智能，激发、表现并提升幼儿内在的艺术创造潜能。 科学教育课程——世界在眼眸中,智慧在问号里，灵感在指尖上! 幼儿科学教育是从尊重、呵护幼儿与生俱来的好奇心和探究热情，以及着力培养幼儿对科学的兴趣入手的。幼儿园的科学教育课程注重对幼儿进行早期的科学熏陶以及对自然、对科学
常用限制性内切酶酶切位点总结
常用限制性内切酶酶切位点总结
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Acc65I识别位点 AccI识别位点 AciI识别位点 AclI识别位点 AcuI识别位点 AfeI识别位点 AflII识别位点 AflIII识别位点 AgeI识别位点 AhdI识别位点 AleI识别位点 AluI识别位点 AlwI识别位点 AlwNI识别位点 ApaI识别位点 ApaLI识别位点 ApeKI识别位点 ApoI识别位点 AscI识别位点 AseI识别位点 AsiSI识别位点 AvaI识别位点 AvaII识别位点 AvrII识别位点 BaeI识别位点 BamHI识别位点 BanI识别位点 BanII识别位点
BbvCI识别位点 BbvI识别位点 BccI识别位点 BceAI识别位点 BcgI识别位点 BciVI识别位点 BclI识别位点 BfaI识别位点 BfuAI识别位点 BglI识别位点 BglII识别位点 BlpI识别位点 Bme1580I识别位点 BmgBI识别位点 BmrI识别位点 BmtI识别位点 BpmI识别位点 Bpu10I识别位点 BpuEI识别位点 BsaAI识别位点 BsaBI识别位点 BsaHI识别位点 BsaI识别位点 BsaJI识别位点 BsaWI识别位点 BsaXI识别位点 BseRI识别位点 BseYI识别位点
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活动育人课程建设与实施制度
东冢初中活动育人课程建设与实施制度 我校十分重视活动育人课程的建设和开发，在全校师生的共同努力下，开发了四大体系的活动育人课程：励志修身课程——经典诵读；活动体验课程——传统节日；实践探究课程——生活化教育；心理疏导与家庭教育——让我们的身心更健康 课程目标： （一）励志修身课程——《经典诵读》 我们中华民族历史悠久，文化博大精深，很多优秀的传统文化是我们成人成事的根本，需要我们去继承和发扬，传承与发扬中华民族优秀的传统文化是我们的义务与责任。我们从中华民族优秀的传统文化中，选编了《诗文选粹》《弟子规》《论语》《大学》等经典诵读课程，作为学生励志修身的活动育人课程。 1、根据古诗文朗朗上口，易于记忆的特点，引导学生大量诵读，营造积极的诵读氛围，为学生的诵读搭建有利的平台。激发学生的诵读兴趣，提高诵读效果。 2、通过课内外的有效结合，拓展诵读的时间和空间。让学生在丰富的综合实践活动中，大量接触古文学，领略祖国语言的魅力，将古诗文内化为自己的语言，促进学生语言能力的发展。 3、在诵读过程中，以锻炼学生搜集处理信息的能力，提高学生的综合素质。 （二）活动体验课程——传统节日 1、了解各种传统节日的来历，知道传统节日的习俗及文化内涵，乐于参与学习和纪念的活动。 2、通过各种节日纪念日开展各种形象生动有教育意义的活动，营造优良的育人环境，使学生得以健康成长。 3、以开展挖掘传统节日、纪念日教育资源活动为切入点，以人文传统教育为主线，以实践体验为途径，大胆创新，不断深化，开拓新的领域，赋予传统节日活动以新的内容。 4、在传统节日教育内容的基础上，紧紧围绕时代教育主题和特点，传统节日活动更具有时代性，使传统节日活动不断取得新的教育效果。 5、引导学生走进历史、了解传统、认识传统、继承传统，激发学生的爱国主义情感和民族自豪感。 6、结合传统节日的教育活动的实施，逐步形成我校的活动育人课程。 7、这种充分利用各种重大节日、法定节日、传统节日和历史纪念日所蕴含的教育资源，以此作为教育素材做好德育育人文章的举措，大大拓宽了学校德育管理的实践途径，进一步增强学校德育工作的针对性和实效性 （三）实践探究课程——生活化教育 1、优化生活环境，陶冶了学生情操 2、加强生活指导，培养了生活能力 3、注重实践体验，提高了德育实效 二、课程目录： 1、励志修身课程——经典诵读； 2、活动体验课程——传统节日； 3、实践探究课程——生活化教育；
常用限制性内切酶酶切位点汇总复习过程
常用限制性内切酶酶切位点汇总
Acc65I识别位点AccI识别位点AciI识别位点AclI识别位点AcuI识别位点AfeI识别位点AflII识别位点AflIII识别位点AgeI识别位点AhdI识别位点AleI识别位点AluI识别位点 AlwI识别位点AlwNI识别位点ApaI识别位点ApaLI识别位点ApeKI识别位点ApoI识别位点AscI识别位点AseI识别位点AsiSI识别位点AvaI识别位点AvaII识别位点AvrII识别位点BaeI识别位点BamHI识别位点BanI识别位点BanII识别位点
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