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【课 题】专题一——基因工程——第 1.3 基因工程的应用第 1。4 蛋白质工程的崛起
【教学目标】1.举例说出基因工程应用及取得的丰硕成果。 2.关注基因工程的进展。 3.认
同基因工程的应用促进生产力的提高。 4.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。 5.简述蛋白质
工程的原理。 6.尝试运用逆向思维分析和解决问题。
【教学流程】
一、知识预习:
1、植物基因工程技术主要用于提高农作物的
(如
、
、
、
和
等),以及
和
利用植物生产
等方面。
2、目前防治作物虫害的发展趋势是从某些生物中分离出
,将其导
入
中,使其具有
。用于杀虫的基因主要是
、
、
、
等。
3、引起植物生病的微生物称为
,主要有
、
和
等。抗病转基因植物所采用的基因,使用最多的是
和
;抗真菌转基因植物中可使用的基因有
和
。
4、目前科学家利用一些可以调节
的基因,来提高农作物的抗盐碱和
能力;将鱼的
导入烟草和番茄,提高其耐寒能力;将
导入
作物,使作物抗除草剂。
5、利用转基因技术可以提高生物中的
的含量、延长贮存时间、改变花色等,
从而提高作物品质。
6、动物基因工程可用于
,
,
,
。
7、基因工程药物包括
、
、
、
、
等。
8、治疗遗传病的最有效手段是
,这种方法是把
导入病人体
内,使该基因的表达产物发挥功能,从而达到
的目的,可分为
和
两条途径。
9、基因工程的实质是将一种生物的
转移到另一种生物体内,使后者产生本不能
产生的
,进而表现出
。其缺点是在原则上只能生产
,而天然蛋白质的
符合
的需要,
却不一定完全符合
的需要。
10、蛋白质工程是指以蛋白质分子的
及其与
的关系作为基
础,通过
或
,对
进行改造,或制造
,以满足
的需求。
11、蛋白质工程的途径是:预测蛋白质功能→设计预期的
→推测应有的
→找到相对应的
。
12、蛋白质工程具有
的前景,但
。
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第五章第三节发酵工程简介 教学目标 1.知识方面 (1)发酵工程的概念(知道)。 (2)发酵工程中培养基的配制、菌种选育、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离、提纯等相关内容(知道)。 (3)有关发酵工程在医药工业和食品工业中应用的内容(知道)。 2.态度观念方面 (1)通过学习发酵工程的有关内容,培养学生理论联系实际的科学态度。 (2)通过学习有关发酵工程在医药工业和食品工业中应用的知识激发学生学习生物学的兴趣,提高学生把所学知识转化为技术,并服务于社会的STS 意识。 3.能力方面 通过对发酵过程中菌种选育、发酵条件控制等相关内容的讨论,培养学生综合运用知识去解决实际问题的能力。 重点、难点分析 1.教学重点: (1)通过对谷氨酸发酵实例的分析、讨论,使学生了解发酵工程的概念,了解菌种选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离、提纯等内容是本节的重点。 (2)让学生收集有关发酵工程应用的资料,并相互交流、讨论,使学生了解发酵工程在医药工业、食品工业中的应用知识也是本节的教学重点之一。 2 .教学难点:有关发酵工程的内容是本节教学的难点,因为这些内容中涉及了细胞工程、基因工程、杂菌污染对发酵工业造成的危害以及发酵条件对菌种代谢途径的影响等多点知识,比较繁杂,学生较难理解。 教学模式 启发讲解与学生讨论相结合。 教学手段谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的代谢途径及发酵的的示意图的投影片,影响谷氨酸代谢途径的因素表格及谷氨酸发酵所用培养基的成分的表格。 课时安排二课时。 设计思路 1.前期知识准备: (1)复习有关谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径及其人工控制的内容。 (2)复习有关微生物群体生长的规律及影响微生物生长的环境因素的内容。 (3)复习有关微生物的营养、培养基、代谢产物等内容。2.通过讨论谷氨酸发酵过程,使学生了解从菌种选育、培养基配制到产品生成等简要的发酵生产过程,了解发酵生产的主体设备发酵罐及其控制部分,并了解发酵工程的概念。 3.通过分析、讨论有关发酵过程的内容,使学生了解培养基的配制、菌种选育、灭菌、扩大培养接种、发酵过程和产品的分离、提纯等相关知识。 4.通过学生讨论、交流等活动,总结出发酵工程在医药工业和食品工业上的应用的知识。第一课时 一、设疑引出新课题 前面我们学习了有关微生物的代谢的内容,我们知道了微生物的代谢是指微生物细胞内所发生的全部的化学反应。在微生物的代谢过程中,会产生多种多样的代谢产物,如氨基酸、维生素、抗生素等。而且,这些代谢产物又是我们人类所需要的。那我们能不能通过微生物的培养来大量生产各种代谢产物呢?这就是我们今天所要讨论的“发酵工程”。
第三节蛋白质工程 1.简述蛋白质工程。 2.蛋白质的分子设计。(难点) 3.蛋白质工程的应用。(重点) 1.蛋白质工程 (1)依据:蛋白质的精细结构和生物活性之间的关系。 (2)改造对象:利用生物技术手段对蛋白质的DNA编码序列或直接对蛋白质进行有目的的改造。 (3)产物:创造出自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子,也就是产生新的蛋白质。 (4)本质:改造控制该蛋白质合成的基因结构。 2.蛋白质的分子设计 (1)小范围改造 对已知结构的蛋白质进行少数氨基酸的替换。 (2)蛋白质拼接组装 对不同来源的蛋白质进行拼接组装。 (3)蛋白质从头设计 从氨基酸的排列顺序出发,设计制造出自然界不存在的全新蛋白质。 3.蛋白质工程的基础 蛋白质工程的基础是基因工程。所以蛋白质工程又叫第二代基因工程。 [合作探讨] 蛋白质分子的设计是一项复杂而艰巨的工程,其基本流程可以用下图表示:
探讨1:构建新的蛋白质模型是分子设计的关键环节,你认为构建蛋白质模型的依据是什么? 提示:构建蛋白质模型的依据是控制这种蛋白质合成的基因以及蛋白质的空间结构。 探讨2:通过DNA合成形成的新基因怎样才能得到准确的表达? 提示:通过基因工程技术,将新基因导入大肠杆菌等受体细胞中,新基因在受体细胞中指导合成新的蛋白质。 探讨3:有的学者认为,蛋白质工程本身也是研究蛋白质结构和功能的一种有力工具。你是怎么看待的? 提示:这些学者认识恰当,蛋白质结构直接影响其功能活性,要想研究蛋白质结构与功能的关系,蛋白质工程就是有力工具,利用这种工具可以改变蛋白质的空间结构,探究功能的改变而做出相应的科学结论。 [思维升华] 1.蛋白质工程的概念 蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。 2.蛋白质工程的目标 是根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。由于基因决定蛋白质,因此要对蛋白质的结构进行设计改造,最终还必须通过改造基因来完成。 3.蛋白质工程的基本途径 从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列(基因)。 1.下列关于蛋白质工程的基本流程中正确的是( ) ①蛋白质分子结构设计②DNA合成③预期蛋白质功能④根据氨基酸序列推出脱氧核苷酸序列 A.①→②→③→④B.④→②→①→③
1.限制酶可辨识并切割DNA分子上特定的核苷酸序列。下图为四种限制酶BamHⅠ、EcosR Ⅰ、HindⅢ及BglⅡ的辨识序列及每一种限制酶的特定切割部位。 其中哪两种限制酶切割出来的DNA片段末端可以互补结合,其末端互补序列是() A.BamHⅠ和EcoRⅠ;末端互补序列:—AA TT— B.BamHⅠ和HindRⅢ;末端互补序列:—GA TC— C.BamHⅠ和BglⅡ;末端互补序列:—GATC— D.EcoRⅠ和HindⅢ;末端互补序列:—AATT— 答案:C 解析:BamHⅠ和BglⅡ切出的黏性末端碱基能互补配对,互补序列都含有—GA TC—。 题干评注: 问题评注: 2.基因工程生产人体糖蛋白时,自然状况下的大肠杆菌不宜作为受体细胞,因为它缺少() A.内质网和高尔基体B.需氧呼吸所需酶C.高尔基体和核糖体D.线粒体和内质网答案:A 解析:糖蛋白需要内质网、高尔基体加工,大肠杆菌是原核细胞,没有内质网和高尔基体。题干评注: 问题评注: 3.ω-3脂肪酸是深海“鱼油”的主要成分,它对风湿性关节炎以及糖尿病等有很好的预防和辅助治疗作用。科学家从一种线虫中提取出相应基因,然后将该基因导入猪胚胎干细胞,以期得到富含ω-3脂肪酸的转基因猪。下列相关叙述正确的是() A.从线虫中提取目的基因需用特定的限制性内切酶,此酶作用于氢键 B.构建重组DNA时,常用的运载体是质粒,受体细胞只能是胚胎干细胞 C.将含ω-3脂肪酸基因导入胚胎干细胞后,可用特定的选择培养基筛选导入成功的受体细胞 D.培育转基因猪需利用转基因技术、动物细胞培养技术、核移植技术 答案:C 解析:限制性内切酶不是作用于氢键,而是作用于磷酸二酯键。受体细胞可以是胚胎干细胞,也可以是受精卵。培育转基因猪未涉及核移植技术。 题干评注: 问题评注: 4.下列关于生物工程相关知识的叙述,正确的是() ①在人工合成目的基因时,蛋白质中氨基酸的顺序可为合成目的基因提供资料 ②若想通过植物细胞培养的方法来生产紫草素,需由愈伤组织分化为植物体 ③用放射性同位素、荧光素等标记的DNA分子作为探针可进行基因诊断 ④限制酶基因只存在于微生物体内,通常用鸟枪法来获得 ⑤质粒的复制既能在自身细胞中完成,也能在宿主细胞内完成 A.①②⑤ B.③④⑤C.①③⑤D.②③④ 答案:C 解析:本题主要考查基因工程的相关知识。在人工合成目的基因时,可通过蛋白质中氨基酸
“基因工程与蛋白质工程”知识归纳及试题例析一、知识归纳 名称作用参与的生理过程应用 限制性核酸内切酶切割某种特定的脱氧核苷酸序列基因工程 DNA连接酶连接两个DNA片段基因工程 DNA聚合酶在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧酸DNA复制 RNA聚合酶在核苷酸链上添加单个核糖核苷酸转录 解旋酶使碱基间氢键断裂DNA复制及转录 逆转录酶以RNA为模板合成DNA 逆转录及基因工程特别注意: (1)限制性核酸内切酶的来源:多数来自原核生物;作用特点:主要切割外源DNA,对自身的DNA不起作用从而达到保护自身的目的;作用结果:形成DNA片断末端。 (2)各种酶都具有专一性,特别是限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定的碱基之间切开。 2.基因工程的基本操作程序 (1)获取目的基因 ①基因文库:是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中通过克 隆而储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 ②基因组文库:基因文库中含有一种生物所有的基因就叫做基因组文库。 ③部分基因文库:含有一种生物的部分基因,就叫做部分基因文库,如cDNA文库。 比较项目PCR技术DNA复制 相 同 点 原理DNA双链复制((碱基互补配对) 原料四种游离的脱氧核苷酸 条件模板、ATP、酶等 不 同 点 解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化 场所体外复制主要在细胞核内 酶热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)细胞内含有的DNA聚合酶 结果在短时间内形成大量的DNA片段形成整个DNA分子 (2)基因表达载体的构建(基因工程的核心) ①构建目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目 的基因能够表达和发挥作用。 ②一个基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因等。 ③构建方法
“基因工程与蛋白质工程”知识归纳及试题例析 一、知识归纳 1.与DNA分子相关的酶 名称作用参与的生理过程应用限制性核酸内切 酶 切割某种特定的脱氧核苷酸序列基因工程DNA连接酶连接两个DNA片段基因工程 DNA聚合酶在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧 酸 DNA复制 RNA聚合酶在核苷酸链上添加单个核糖核苷 酸 转录 解旋酶使碱基间氢键断裂DNA复制及转录 逆转录酶以RNA为模板合成DNA逆转录及基因工程 特别注意: (1)限制性核酸内切酶的来源:多数来自原核生物;作用特点:主要切割外源DNA,对自身的DNA不起作用从而达到保护自身的目的;作用结果:形成DNA片断末端。 (2)各种酶都具有专一性,特别是限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定的碱基之间切开。 2.基因工程的基本操作程序 (1)获取目的基因 ①基因文库:是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中通过 克隆而储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 ②基因组文库:基因文库中含有一种生物所有的基因就叫做基因组文库。 ③部分基因文库:含有一种生物的部分基因,就叫做部分基因文库,如cDNA文库。 PCR技术与DNA复制的比较 比较项目PCR技术DNA复制 相 同 点 原理DNA双链复制((碱基互补配对) 原料四种游离的脱氧核苷酸 条件模板、ATP、酶等 不 同 解旋方式DNA在高温下变性解旋解旋酶催化 场所体外复制主要在细胞核内
点 酶 热稳定的DNA聚合酶(Taq 酶) 细胞内含有的DNA聚合酶结果 在短时间内形成大量的DNA 片段 形成整个DNA分子 (2)基因表达载体的构建(基因工程的核心) ①构建目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目 的基因能够表达和发挥作用。 ②一个基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因等。 ③构建方法 生物 种类 植物细胞动物细胞微生物细胞常用 方法 农杆菌转化法显微注射技术Ca2+处理法受体 细胞 体细胞受精卵原核细胞 转化 过程 将目的基因插入Ti质粒 的TDNA上→农杆菌→导 入植物细胞→整合到受体细 胞的DNA→表达 将含有目的基因的表达 载体提纯→取卵(受精卵) →显微注射→受精卵发育→ 获得具有新性状的动物 Ca2+处理细胞→感受态 细胞→重组表达载体与感受 态细胞混合→感受态细胞吸 收DNA分子特别注意:受体细胞中常用植物受精卵或体细胞(经组织培养)、动物受精卵(一般不用体细胞)、微生物──大肠杆菌、酵母菌等,但要合成糖蛋白、有生物活性的胰岛素则必 需用真核生物酵母菌──需内质网、高尔基体的加工、分泌。一般不用支原体,原因是它营 寄生生活;一定不能用哺乳动物成熟红细胞,原因是它无细胞核和众多的细胞器,不能合成 蛋白质。
. 知识归纳及试题例析”“基因工程与蛋白质工程一、知识归纳分子相关的酶1.与DNA作用参与的生理过程应用名称基因工程限制性核酸内切酶切割某种特定的脱氧核苷酸序列 基因工程DNA连接酶DNA片段连接两个DNA复制在脱氧核苷酸链上添加单个脱氧酸DNA聚合酶转录RNA聚合酶在核苷酸链上添加单个核糖核苷酸 DNA 解旋酶复制及转录使碱基间氢键断裂 逆转录及基因工程逆转录酶以RNA为模板合成DNA 特别注意:,DNA(1)限制性核酸内切酶的来源:多数来自原核生物;作用特点:主要切割外源不起作用从而达到保护自身的目的;作用结果:形成DNA片断末端。对自身的DNA)各种酶都具有专一性,特别是限制酶只能识别特定的脱氧核苷酸序列,并在特定(2 的碱基之间切开。.基因工程的基本操作程序2 (1)获取目的基因 ①基因文库:是将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中通过克隆而储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因。 ②基因组文库:基因文库中含有一种生物所有的基因就叫做基因组文库。 ③部分基因文库:含有一种生物的部分基因,就叫做部分基因文库,如cDNA文库。 PCR技术与DNA复制的比较 比较项目PCR技术DNA复制 原理DNA双链复制((碱基互补配对)相原料同四种游离的脱氧核苷酸 点条件模板、ATP、酶等 解旋方式解旋酶催化DNA在高温下变性解旋不主要在细胞核内场所体外复制同热稳定的DNA聚合酶(Taq酶)细胞内含有的酶DNA聚合酶点在短时间内形成大量的DNA片段形成整个DNA分子结果 (2)基因表达载体的构建(基因工程的核心) ①构建目的:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时,使目的基因能够表达和发挥作用。 ②一个基因表达载体的组成:目的基因、启动子、终止子、标记基因等。 ③构建方法 资料Word .
浅谈对发酵工程专业的认识 当今世界是一个快速发展的时代,众所周知,科学技术的进步是经济发展的重要指标。而生物科技是其中的一个重要组成部分。通过微生物的发酵工程构成了生物科技的核心。所谓发酵工程,是以微生物通过上游(分子改造,代谢工程等)、中游(发酵优化,智能控制等)、下游(分离纯化,清洁生产等)各种生物学操作,以得到人们所需要的一系列产品(细胞,代谢产物)的综合性科学。从生物发酵工程角度来说,这一专业的发展与经济全球化存在着相辅相成的关系。即经济的快速发展,推动了发酵工程专业的交流和创新,提供了发酵工程进一步前进的良好平台。发酵工程的应用领域非常广泛,包括农业、工业、医学、药物学、能源、环保、冶金、化工原料、动植物、净化等。它必将对人类社会的政治、经济、军事和生活等方面产生巨大的影响,为世界面临的资源、环境和人类健康等问题的解决提供美好的前景。 1. 发酵工程简介 发酵工程,是指采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。发酵不仅仅体现在食品领域,还存在于医药品、化妆品、能源、环境等领域。因此,发酵对于我们生活的方方面面都有着重要的影响,有光明的应用前景。 对于发酵工程而言,是指利用微生物的生长繁殖和代谢活动来大量生产人们所需要的产品过程的理论和工程技术体系,是生物工程与生物技术科学的重要组成部分。发酵工程也称微生物工程,该技术体系主要包括菌种选育和保藏、菌种的扩大生产、微生物代谢产物的发酵生产和分离纯化制备。进一步可以分为上游、中游和下游。 现代发酵工程的发展,是生物科学与数学、物理学、化学等科学之间相互交叉、渗透和相互促进的结果。发酵工程与有关科学的高度的双向渗透和综合,也已经成为当代生物科学的一个显著特点和发展趋势。 2. 上游领域(分子改造,代谢工程等) 发酵工程的上游领域是整个发酵过程的基础,随着近年来分子生物学的蓬勃发展,系统代谢工程定向改造目的产品生产菌株已经成为发酵领域的发展趋势。因此,上游领域主要集中在分子改造和代谢工程等相关方面。
高中生物选修3基因工程的应用和蛋白质工程知识点 1.基因工程培育转基因生物的优点: (1)打破了常规育种难以突破的物种之间的界限(生殖隔离) (2)定向改变了生物的遗传性状。 2.基因工程的应用: (1)用于提高动植物生长速度。 (2)用于改善畜产品的品质。 (3)用转基因动物生产药物。 (4)用转基因动物作器官移植的供体。 3.膀胱生物反应器:将外源基因导入到受精卵膀胱上皮细胞进行表达。优点: 雌雄个体都能生产。 4.乳腺生物反应器或乳房生物反应器缺点:只有雌性个体才能生产药物。 5.干扰素:干扰素是动物或人体细胞受到病毒侵染后产生的一种糖蛋白,干扰 素几乎能够抵抗所有病毒引起的感染。 6.基因治疗:是把正常基因导入病人体内,使该基因的表达产物发挥功能,从 而达到治疗疾病的目的,这是治疗遗传病的最有效的手段。 7.基因治疗不能替代原有基因,它替代的是缺陷基因的功能。 8.大肠杆菌是原核生物,生产出来的干扰素没有活性,原核细胞内没有内质网 和高尔基体,只有核糖体,只能合成相应的蛋白质,无法添加糖基,要使干扰素具有活性,还必须经过人工处理,加上糖基。 9.基因诊断:也称DNA诊断或基因探针技术,即在DNA水平分析检测某一基 因,从而对特定的疾病进行诊断。 10.基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质。 11.蛋白质工程的目标:根据人们对蛋白质的特定需求,对蛋白质进行分子设计。 12.天然蛋白质的合成过程:按照中心法则进行的,基因→表达(转录和翻译) →形成氨基酸序列的多肽链→形成具有高级结构的蛋白质→行使生物功能。 13.蛋白质工程合成蛋白质的过程:从预期的蛋白质功能出发→设计预期的蛋白 质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 14.蛋白质工程中进行基因操作的原因: (1)改造过的蛋白质可以遗传。 (2)对基因的改造比对蛋白质直接改造容易操作,难度少的多。 15.蛋白质工程:蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关 系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。原理是改造基因,实质是对编码蛋白质的基因进行改造。
基因工程与蛋白质工程 1.利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状。 基因工程的四个基本操作步骤是_______________________________、基因表达载体的构建、__________________________和_______________________________。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表达载体必须包括:人干扰素基因及其启动子、_________________、_________________等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是_________________,为获得能大量产生人干扰素的转基因牛,该基因表达载体应导入的受体细胞是_________________(受精卵、乳腺细胞)。 2.下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答: (1)在基因工程中,A表示_________________,如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因,①过程使用的酶区别于其他酶的特点是______________________________________________________________________ _______________,B表示_________________。 B→D的过程中,若使用的棉花受体细胞为体细胞,⑤表示的生物技术是要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出在个体水平上的鉴定过程______________________________________________________________________ _____________________________________________________________________。 3.农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因,现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花,培育抗病棉花品系。请回答下列问题: (1)要获得该抗病基因,采用_________________、_________________ 等方法。为了能把该抗病基因转入棉花细胞中,常用的载体是_________________ 。 (2)假如载体切割后,得到的分子末端序列为: 请写出能与该载体连接的抗病基因分子末端是 _________________。 (3)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌,然后用该农杆菌去_______棉花细胞,从培养出的植株中____________出抗病的棉花。 (4)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是() A.淀粉 B.脂类 C.蛋白质 D.核酸 (5)转基因棉花获得的_________________是由该表达产物来体现的。 4.目的基因的分离是基因工程研究中的主要方面和操作关键。下面甲、乙图表示
蛋白质工程的崛起 (建议用时:40分钟) 1.下列有关蛋白质工程的叙述,不正确的是( ) A.收集大量的蛋白质分子结构的信息,以便分析结构与功能之间的关系 B.可以预测具有一定氨基酸序列的蛋白质的空间结构和生物功能 C.根据特定的生物功能,设计蛋白质的氨基酸序列和空间结构 D.根据人们的需要,直接对氨基酸的分子结构进行改造 D解析蛋白质工程是根据人们的需要,通过对基因的改造从而实现对蛋白质的改造,而不是对氨基酸的分子结构进行改造。 2.当前,蛋白质工程是发展较好、较快的分子工程。它将蛋白质与酶的研究推进到崭新的时代,为蛋白质和酶在工业、农业和医药方面的应用开拓了诱人的前景。蛋白质工程开创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的蛋白质的新时期。那么,蛋白质工程中需要直接进行操作的对象是( ) A.氨基酸的结构 B.蛋白质的空间结构 C.肽链的结构 D.基因结构 D解析蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活的需求。 3.某种微生物合成的蛋白酶与人体消化液中的蛋白酶的结构和功能很相似,只是其热稳定性较差,进入人体后容易失效。现要将此酶开发成一种片剂,用于治疗临床消化不良,最佳方案是( ) A.替换此酶中的少数氨基酸,以改善其热稳定性 B.将此酶与人蛋白酶进行拼接,形成新的蛋白酶 C.重新设计与创造一种蛋白酶 D.减少此酶在片剂中的含量 A解析要想使蛋白酶热稳定性有所提高,就要改变蛋白质的结构,解决此类问题的方法一般是将蛋白质中的个别氨基酸进行替换。 4.2008年诺贝尔化学奖授予了三位在研究绿色荧光蛋白(GFP)方面做出突出贡献的科
选修 3 现代生物科技专题出题人:刘秀平审核:高二生物组时间:2013 年12 月28 日班级姓名学号 获取目的基因, 其原因是。 (2) 在乙图中,c 过程在遗传学上称为, d 过程称为,d 过程需以mRNA为模板, 以为原料, 还需要的条件是 ATP、、DNA聚合酶等。第17 周生物作业——基因工程与蛋白质工程 (3) 除了上述两种方法可以获取目的基因外, 请你再写出一种方法: 1. (2010 海南)利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是、基因表达载体的构建、5. 下图是利用基因工程技术生产人胰岛素的操作过程示意图,请据图作答。 。 和。若要获得的转基因牛分泌的乳汁中含有人干扰素,则所构建的基因表 达载体必须包括:某种牛乳腺分泌蛋白基因及其启动子、、 、和复制原点等。将该基因表达载体导入受体细胞所采用的方法是 (显微注射法、农杆菌转化法),为获得能大量产生人干扰素的转基因牛,该基因表达载体应导入 的受体细胞是(受精卵、乳腺细胞)。 2.下图为利用生物技术获得生物新品种的过程,据图回答: (1) 在基因工程中, A 表示 (1)能否利用人的皮肤细胞来完成①过程?,为什么? ________ ,如果直接从苏云 (2)过程②必需的酶是酶,过程③必需的酶是酶。 金杆菌中获得抗虫基因,①过程使 (3)在利用AB获得C的过程中,必须用切割A 和B,使它们产 用的酶区别于其他酶的特点是 生,再加入,才可形成C。 ________ ,B 表示_______ 。 (4)为使过程⑧更易进行,可用(药剂)处理D。 (2)B→D的过程中,若使用的棉花受体细胞为体细胞,⑤表示的生物技术是植物组织培养技术。 (5)由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率,所以在导入后通常需要进行操作。要确定目的基因( 抗虫基因) 导入受体细胞后,是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作, (6)将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌,从两者中生产的胰岛素在功能和序 请写出在个体水平上的鉴定过程:。 列上是相同的。 3. 农业科技工作者在烟草中找到了一抗病基因,现拟采用基因工程技术将该基因转入棉花,培育 6. 豇豆对多种害虫具有抗虫能力,根本原因是豇豆体内具有胰蛋白酶抑制剂基因(CpTI 基因)。 抗病棉花品系。请回答下列问题: 科学家将其转移到水稻体内后,却发现效果不理想,主 (1)要获得该抗病基因,采用、等方法。为了能把该抗 “信号肽”“内质网滞留 要原因是CpTI 蛋白质的积累量不足。经过在体外对CpTI 序列CpTI基因信号”序列 病基因转入棉花细胞中,常用的载体是。 基因进行了修饰后,CpTI 蛋白质在水稻中的积累量就得 ① (2)假如载体切割后,得到的分子末端序列为: 到了提高。修饰和表达过程如下图所示: 修饰后的CpTI基因 请写出能与该载体连接的抗病基因分子末端是。 (3)再将连接得到的DNA分子导入农杆菌,然后用该农杆菌去棉花细胞,利用植物请根据以上材料,回答下列问题: (1)CpTI 基因是该基因工程中的____________基因,“信 A ②号肽”序列及“内质网滞留信号”序列的基本组成单位 细胞具有的性进行组织培养,从培养出的植株中出抗病的棉花。 CpTI蛋白质 是___________________,在①过程中,首先要用 (4)该抗病基因在棉花细胞中表达的产物是()A. 淀粉 B. 脂类 C.蛋白质 D. 核酸 _____________酶切开,暴露出_______________再用______________酶连接。 (5)转基因棉花获得的是由该表达产物来体现的。
发酵工程简介 第一课时 一、设疑引出新课题 前面我们学习了有关微生物的代谢的内容,我们知道了微生物的代谢是指微生物细胞内所发生的全部的化学反应。在微生物的代谢过程中,会产生多种多样的代谢产物,如氨基酸、维生素、抗生素等。而且,这些代谢产物又是我们人类所需要的。那我们能不能通过微生物的培养来大量生产各种代谢产物呢?这就是我们今天所要讨论的“发酵工程”。 二、进行新课 (一)介绍谷氨酸发酵的生产实例 教师活动:出示谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径的投影片,指导学生观察并作适当讲解。 讨论后教师小结如下:从投影片我们可以看出,谷氨酸棒状杆菌在一定的条件下能够利用环境中的营养物质来合成谷氨酸。下面我们就来看看在工厂里是怎样应用谷氨酸棒状杆菌来生产谷氨酸的。 提出问题:谷氨酸发酵最重要的无疑就是选择菌种了,是不是所有的谷氨酸棒状杆菌都可用于谷氨酸发酵生产呢?我们应该选育什么样的谷氨酸棒状杆菌作为菌种呢? 教师活动:以前面出示的投影片为依托组织学生就所提问题进行讨论。 讨论后教师小结:只有选择细胞膜通透较强,在细胞内不积累谷氨酸的谷氨酸棒状杆菌做菌种才有可能获得大量的谷氨酸。 提出问题:有了菌种用什么样的培养基去培养呢? 教师活动:通过复习有关培养基的知识,使学生理解培养基应满足微生物生长所需要的碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等营养需求。 教师活动:出示谷氨酸发酵所需培养基的成分表格并指导学生观察、思考。 通过讨论使学生把培养基中的各种成分按照水、无机盐、氮源、碳源、生长因子的分类方法进行分类,进而得出这种培养基能满足谷氨酸棒状杆菌所需各种营养的结论。
提出问题:这种培养基从组成成分和物理性质上看属于哪种培养基? 通过讨论得出结论:从物理性质上看是液体培养基,从化学成分上看是天然培养基。 提出问题并组织学生讨论:在工业生产过程中常采用这种天然成分作为营养物质的液体培养基,这在发酵生产中有什么好处呢? 引导学生通过讨论得出以下结论: (1)液体培养基能使营养物质在发酵过程中得到充分的利用,还能为菌体提供更大的生存空间。同时,也有利于生产过程中培养条件的控制以及产物的提取。 (2)采用天然物质作营养物质既能满足菌体的营养需求,又能降低生产成本,还能减少对环境的污染。 提出问题:有了菌种和合适的培养基,那发酵的主体设备又该是什么样的呢? 教师活动:出示发酵罐的示意图,并对发酵罐的组成结构进行简单介绍。通过介绍使学生了解发酵的主体设备由发酵罐及其控制部分构成。 提出问题:设备中的这些控制部分在生产过程中有什么用呢? 教师启发讲解使学生了解:在发酵过程中,发酵罐内的温度、pH、溶氧量都会变化,从而影响微生物的生长。因此,必须有相应的控制结构来保持发酵条件的稳定。 提出问题并指导学生阅读教材中有关内容:在发酵罐中是怎样进行谷氨酸发酵生产的? 师生共同总结出大致过程 在以上总结的基础上使学生了解发酵工程的概念,即采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程中的一种新技术。 (二)深入讨论发酵工程的相关内容 通过刚才的谷氨酸发酵的实例我们不难看出,发酵工程主要包括了菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等内容,对于发酵工程的这些内容我们应该注意些什么呢?
一、教学目标 1.举例说出蛋白质工程崛起的缘由。 2.简述蛋白质工程的原理。 3.尝试运用逆向思维分析和解决问题。 二、教学重点和难点 1.教学重点 (1)为什么要开展蛋白质工程的研究? (2)蛋白质工程的原理。 2.教学难点 蛋白质工程的原理。 三、教学策略 1.建议采用"问题-探究-新问题-再探究"的教学模式。 本节内容是基因工程的延伸和发展。由于蛋白质工程刚刚起步,学习内容较少。如何学得充实,又让学生悟出些终身学习的道理,建议采用"问题-探究-新问题-再探究"的教学模式。 新课一开始,可以带领学生回忆原有知识:要想让一种生物的性状在另一种生物中表达,在种内可以用常规杂交育种的办法实现,但要使有生殖隔离的种间生物实现基因交流,就显得力不从心了。基因工程的诞生,为克服这一远缘杂交的障碍问题,带来了新的希望。于是取得了丰硕成果:大肠杆菌为人类生产出了胰岛素,牛的乳腺生物反应器为人类制造出了蛋白质类药物,烟草植物体内含有了某种药物蛋白......至此,人们也只是实现了世界上现有基因在转基因生物中的表达。但一个新问题出现了,生物产生的天然蛋白质是在长期进化过程中形成的,它的结构、性能不能完全满足人类生产和生活的需要。为了加深这一点的认识,可调动学生从书中找实例(干扰素例子、工业用酶的例子)加以佐证。于是要对现有蛋白质进行改造,制造出目前从天然蛋白质中找不到的蛋白质。这样人们又开始了新一轮的探索,蛋白质工程应运而生了。 2.建议加强与已有知识的联系,用逆向思维的方法解决新问题。 学生在必修课中已学习过中心法则及蛋白质具有复杂的空间结构等知识。中心法则告诉我们遗传信息的流动方向如图1-4所示。 图1-4 遗传信息的流动方向 这是学习新知识的基础。既然蛋白质的功能是由dna决定的,那么要制造出新的蛋白质,就要改造dna。所以蛋白质工程的原理应该是中心法则的逆推。结合课本中插图,可以较明确地说明这一点。 还有两点教学建议需要说明。第一,蛋白质工程的诞生是有其理论与技术条件支撑的,正如课本中开头描述的,它是随着分子生物学、晶体学以及计算机技术的迅猛发展而诞生的,也与基因组学、蛋白质组学、生物信息学的发展等因素有关(本书"前沿动态"中有简要介绍)。第二,说明蛋白质工程目前的现状:成功的例子不多,主要是因为蛋白质发挥其功能需要依赖于正确的空间结构,而科学家目前对大多数蛋白质的空间结构了解很少。这样学习,可以使学生认识到科学探索之路的漫长、艰辛和永无止境。 四、答案和提示 (一)思考与探究 1.蛋白质工程是应怎样的需求而崛起的? 提示(供教师在教学中参考):蛋白质工程的崛起主要是工业生产和基础理论研究的需要。而结构生物学对大量蛋白质分子的精确立体结构及其复杂的生物功能的分析结果,为设计改造天然蛋白质提供了蓝图。分子遗传学的以定点突变为中心的基因操作技术为蛋白质工程提
第三节蛋白质工程 一、选择题 1.蛋白质工程的目标是( ) A.通过对基因进行诱变,产生新的蛋白质 B.通过基因重组,合成生物体本来没有的蛋白质 C.根据人们对蛋白质功能的特定需求,改造或制造蛋白质 D.生产大量的蛋白质 解析:蛋白质工程是指为了满足人类的生产和生活的需要,以蛋白质分子的结构规律和生物功能为基础,通过基因修饰或合成新的基因,对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质。 答案:C 2.对蛋白质的改造有大改、中改和小改之分,其划分的依据是( ) A.蛋白质分子的复杂程度 B.操作过程的复杂程度 C.蛋白质改造部位的多少 D.蛋白质数目的多少 解析:蛋白质的改造有大改、中改、小改,其划分的依据是蛋白质改造部位的多少。 答案:C 3.蛋白质工程中对蛋白质分子进行设计时,主要包括哪几种?( ) ①进行少数氨基酸的替换 ②对不同来源的蛋白质进行拼接 ③从氨基酸的排列顺序出发设计全新的蛋白质 ④直接改变蛋白质的空间结构 A.①② B.①②③
C.②③④ D.①②④ 解析:蛋白质工程中对蛋白质分子进行设计时,不能直接改变蛋白质的空间结构。但是能进行少数氨基酸的替换,能对不同来源的蛋白质进行拼接,能够从氨基酸的排列顺序出发设计全新的蛋白质。 答案:B 4.蛋白质工程与基因工程相比,其突出特点是( ) A.基因工程原则上能生产任何蛋白质 B.蛋白质工程能对现有的蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质 C.蛋白质工程可以不通过转录和翻译来实现 D.蛋白质工程是在基因工程的基础上,延伸出来的第三代基因工程 解析:蛋白质工程通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质,以满足人类的生产和生活需求,蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程。 答案:B 5.下列关于蛋白质工程应用的叙述,不正确的是( ) A.蛋白质工程可以改造酶的结构,提高酶的热稳定性 B.通过蛋白质工程可以改变蛋白质的活性 C.利用蛋白质工程可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素 D.蛋白质工程可以对胰岛素进行改造和修饰,合成速效型胰岛素制剂 解析:蛋白质工程是依据人们设计的蛋白质分子结构来改造基因,进而控制合成或改变自然界中的蛋白质。在大肠杆菌中生产人胰岛素利用的是基因工程。 答案:C 6.下列不属于蛋白质工程成果的是( ) A.改造酶的结构,提高酶的热稳定性 B.生产出鼠—人嵌合抗体 C.将t PA分子中的天冬酰胺替换为谷氨酰胺 D.蛋白酶洗衣粉容易洗掉奶渍、血渍
基因工程和蛋白质工程要求:1基因工程的诞生I 2、基因工程的原理及技术n 3、基因工程的应用n 4、蛋白质工程I 一、基因工程的概念 基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。 (一) 基因工程的基本工具1?“分子手术刀”一一限制性核酸内切酶(限制酶、限制性内切酶) (1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。 (2)功能:能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列,并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开,因此具有专一性。 (3)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端等。 2. “分子缝合针” 一一DNA连接酶 (1功能:缝合磷酸二酯键。 (2)与DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。DNA1接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。 3. “分子运输车”一一载体 (1)载体具备的条件:①能在受体细胞中复制并稳定保存。②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。 (2)______________________________________________________________________________________________ 最常用的载体是质粒,它是一种裸露的、结构简单的、独立于细菌染色体之外,并具有自我复制能力的双链环状_____________________________________________________________________________ DNA分子。 (3)其它载体:噬菌体、动植物病毒 (二) 基因工程的基本操作程序第一步:目的基因的获取 1. 目的基因是指:编码蛋白质的基因。 2. 原核基因采取直接分离法获得,真核基因是人工合成法。人工合成目的基因的常用方法有反转录法_和化学合成法_。 直接分离法:供体细胞中的DNA^ DNA片段T 受体细胞T DNA片段扩增T含目的基因的细胞T目的基因 反转录法:逆转录合成mRNA T单链DNA —双链DNA 化学合成法:根据已知的蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的mRNA序列,推测出结构基因的核苷酸序列,再通过化学方法,合成目的基因。第二步:重组载体的构建
编写人:张瑞萍班级姓名 1、基因工程用到的工具、酶有和。 2、常用载体有、、等。 3、载体需要具备的特点: (1)、 (2)、,为了防止。 (3)、,为了。 (4)、。 4、限制性核酸内切酶,切割键,从中提取得来,能识别特定的 序列,能切出末端与末端。 5、DNA连接酶,连接DNA的键,按来源包括 DNA连接酶 和 DNA连接酶。 6、质粒是中,独立于其DNA之列的小型状分子,能在宿主 细胞内并稳定遗传。 7、基因工程的原理是。 8、基因工程的基本步骤是:(1)、(2)、 (3)、(4)、 9、目的基因的获得方法: (1)、,又叫鸟枪法,可以文库中用提取,用仪扩增。 (2)、,又包括法与法,并写出这两种方法的流程。 10、重组载体的构建: 用同种酶切割与。然后用酶,连接形成重组载体。 11、重组载体导入受体细胞方法: (1)、植物。 (2)动物:受体细胞为,方法。 (3)、微生物受体细胞为等,应为它们。具体操作方法为用 处理微生物细胞,使之通透性改变,易于接受。 12、重组载体导入受体细胞后筛选: 利用培养基,筛选出含的受体细胞。 13、目的基因的表达与鉴定: 分子水平:(1)、检测目的基因,用技术。(2)、检测mRNA,用技术。 (3)、检测蛋白质,用技术。 个体水平:对转基因生物进行的接种实验。 14、基因治疗 将基因或有作用的基因通过一定方式导入靶细胞内,可以纠正基因缺陷而达到治疗疾病的目的。 15、蛋白质工程的基础是,蛋白质工程的产物是自然界(“有”或“没有”)的蛋白质。蛋白质工程的直接操作对象是。 16、写出蛋白质工程的流程。
17、蛋白质分子设计包括三类: (1)少数的替换 (2)不同来源蛋白质的。(3)蛋白质分子的设计。
第三节发酵工程简介 教学目的 1.发酵工程的概念和内容(A:知道)。 2.发酵工程在医药工业和食品工业中的应用(A:知道)。 重点和难点 1.教学重点 发酵工程的概念和内容。 2.教学难点 在发酵过程中,如何保证菌种生长和代谢的正常进行。 教学过程 【板书】 实例:谷氨酸发酵 发酵工程的概念 菌种选育 发酵工程培养基的配制 发酵工程灭菌 的内容扩大培养和接种 发酵过程 产品的分离和纯化 在医药工业方面的应用 发酵工程的应用在食品工业方面的应用 【注解】 一、实例:谷氨酸发酵 (一)获取菌种:谷氨酸棒状杆菌、黄色短杆菌 (二)配制培养液:五种因子 (三)灭菌:高压蒸汽灭菌 (四)接种:无菌条件下加入菌种 (五)发酵:在发酵罐中进行,其中的关键步骤是“溶氧”。通入无菌空气并不断搅拌 (六)分离提取产物 二、发酵工程的概念 (一)概念:采用现代工程技术手段,利用微生物的某些特定功能,为人类生产有用的产品,或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。 (二)发酵工程的内容 1.菌种选育:自然分离、人工诱变、基因工程、细胞工程 2.培养基的配制:物质种类、比例、适宜的PH 3.灭菌:去除杂菌,主要杀灭培养基中和发酵设备中的杂菌 4.扩大培养和接种:菌种多次培养达到一定数量 5.发酵过程:控制各种条件生产发酵产品 菌体:用过滤、沉淀等方法 6.产品的分离和纯化 代谢产物:用蒸馏、萃取、离子交换等方法 在医药工业方面:生产药品和基因工程药品 三、发酵工程的应用在食品工业方面:生产传统发酵产品、食品添加剂、单细胞蛋白(菌
体)等 【同类题库】 发酵工程的概念和内容(A:知道) .工业上利用谷氨酸棒状杆菌大量积累谷氨酸,应采用(C) A.加大葡萄糖的投放量 B.加大菌种的密度 C.改变菌体细胞膜通透性 D.改变培养基碳源和氮源的比例 .发酵是指(D) A.微生物的呼吸过程 B.一种微生物的繁殖过程 C.微生物的新陈代谢 D.微生物产生代谢产物和菌体的过程 .暴露在空气中,下列哪种微生物不能生存(D) A.酵母菌 B.真菌 C.放线菌 D.产甲烷杆菌 .发酵过程中,用一定的转速搅拌,除能使菌种和发酵液充分接触提高原料利用率外,还能增加(D) A.放料速度 B.冷却水循环 C.进料速度 D.溶解氧 .关于菌种的选育不正确的是(C) A.自然选育的菌种不经过人工处理 B.诱变育种的原理是基因突变 C.通过有性杂交可以形成工程细胞 D.采用基因工程的方法可构建工程菌 .有关谷氨酸发酵的叙述中,正确的是(B) A.发酵中要不断通入空气(无菌) B.培养条件不当将得不到所需要的产品C.搅拌的唯一目的是使空气成为小泡 D.冷却水可以使酶的活性下降 .谷氨酸发酵过程中,如果环境条件控制不当,则可能使代谢产物成为乳酸,那么乳酸是下列哪种条件下的产物(D) A.PH值过小 B.PH值过大 C.溶氧过多 D.溶氧不足 .当谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时,发现产物中出现了谷氨酰胺,则应当加入(C)A.新培养基 B.缓冲液 C.碳酸氢钠 D.盐酸 .在谷氨酸发酵过程中,必须不断地调整培养液的PH值,原因是(B) ①谷氨酸发酵的最适PH值是7.0-8.0 ②在发酵过程中,培养液的PH值会发生变化 ③当PH呈酸性时,谷氨酸的产量会下降④不调节PH值,培养液中生成的谷氨酸会变成其他物质 A.①②③ B.①②③④ C.①② D.①④ .谷氨酸棒状杆菌生产谷氨酸的培养基中,五大类营养要素物质不可缺少。但其中哪种物质要保持适量状态,若缺乏,则菌体生长十分缓慢,若过量,则为乳酸发酵(C) A.碳源 B.氮源 C.生长因子 D.水和无机盐 (生长因子过多,会使菌体生长过快,消耗大量氧气,从而导致无氧呼吸) .对谷氨酸发酵的叙述正确的是(D) A.菌体是异氧厌氧型微生物 B.培养基属于液态的合成培养基 C.谷氨酸的形成与搅拌速度无关 D.产物可用离子交换法提取 .关于菌种的选育不正确的是(C) A.自然选育的菌种不经过人工处理 B.诱变育种原理的基础是基因突变 C.通过有性杂交可形成工程细胞 D.采用基因工程的方法可构建工程菌 .发酵工程灭菌的目的(C) A.灭杀细菌 B.杀死杂菌 C.杀灭所有微生物 D.加大氮源、碳源的比例