转基因植物中报告基因表达检测-gus活性检测的思考题

1、对实验结果进行文字描述。

2、根据你的实习谈谈gus活性检测时应注意哪些问题。

注意事项：用于染色的植物材料的制备方法要因涉及的特定组织和器官的不同而异。例如，拟南芥的根、花和叶片以及烟草幼苗的根就可以不作任何预处理而直接染色。但是像烟草和马铃薯这些植物的茎和叶就必须在染色前切成薄片（1-3mm）。当操作大的组织和样品时，可以选用真空渗入法来帮助底物和酶渗入细胞。

3、gus基因为什么被称之为报告基因？在转基因应用中有哪些优缺点。

报告基因是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因，也就是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因，或与其它目的基因相融合，在调控序列控制下进行表达，从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控，筛选得到转化体。报告基因必须具备的条件：(1)已被克隆和全序列已测定; (2)表达产物在受体细胞中不存在，即无背景，在被转染的细胞中无相似的内源性表达产物; (3) 报告基因编码的产物的检测应该快速、简便、灵敏度高而且重现性好，表达产物能进行定量测定。(4) 细胞内其它的基因产物不会干扰报告基因产物的检测。

GUS活性检测优点

（1）在大多数植物组织中GUS活性的本底低；

（2）反应产物基本不扩散，在植物细胞内积累；

（3）通过简单的扩散或真空渗入，底物易被植物细胞吸收。

GUS基因作为报告基因的优势：

1GUS蛋白在植物细胞中稳定存在，对较高的温度和去污剂有一定的耐受性；

2检测方法简单，可定性或定量：使用X-Gal为底物，通过显色反应来观察；使用4-MU为底物，反应以后生成荧光物质，通过相应的荧光检测仪来进行经确定量；

3多数植物组织中GUS背景表达低，样品表达能够很好区分。

缺点

（1）不适用于活体组织的观察；

（2）在GUS表达水平很高的组织中会发生无色反应产物渗漏的现象，但是可以通过在底物溶液中加入氧化剂氰化钾或亚铁氰化钾或者二者都加（终浓度为5mmol/L），来使这种渗漏减至最少。

普通植物病理学试题套

普通植物病理学 测试题一 一、名词解释（5×3=15分） 真菌的营养体病原生物内含体营养体亲和性垂直抗病性 二、问答题（4×10=40分） 1. 植物病害的防治措施按照原理有哪些？每一类列举2～3种具体的办法。 2. 当前在农作物抗病品种选育和使用方面存在哪些主要问题？应采取哪些改进措施？ 3. 植物侵染性病害发生和流行的基本因素各有什么不同? 4. 何谓病害循环？为什么说它是制订防治措施的重要依据？ 三、写出下列拉丁学名的中文含义，并编制它们的分类检索表。（15分） Uncinula Phyllactinia Pseudoperonospora Plasmopara Peronospora Puccinia Uromyces Fusarium Exserohilum Macrophoma 四、选择填空（10分） 1. 植物病毒的核酸类型主要为（）。 A . +ssRNA B. -ssRNA C. dsRNA D. dsDNA 2. 蠕传病毒属的传播介体为（）。 A. 叶蝉 B.飞虱 C. 蚜虫 D 线虫 3. 烟草花叶病毒常简称（） A. TMV B. CMV C. PVY D.SBMV 4.（）病害通过喷菌现象可进行简易鉴别。 A. 真菌 B.病毒 C. 线虫 D.细菌 5. 下列（）属于真菌的营养体。

A. 菌核 B. 假根 C. 双核菌丝 D. 菌索 6. 有些真菌在完成其生活史的过程中需要两种亲缘关系相距较远的寄主，这种现象称为（）。 A. 专化型 B. 专性寄生 C. 单主寄生 D. 转主寄生 7. 下列担子菌中属于裸果型的是（）。 A. 锈菌 B. 木耳 C. 黑粉菌 D. 香菇 8. 有些病原物侵入寄主后常具有潜伏侵染特性，这类病原物最可能是（）。 A. 弱性寄生物 B. 专性寄生物 C. 腐生物 D. 活体寄生物 9.病原物侵入寄主后产生对寄主有害的代谢产物而致病，一种瘤肿症状可能是由于病原物分泌（）所致。 A. 酶 B. 生长调节物质 C. 植保素 D. 毒素 10. 发病部位出现的霉状物是（）。 A. 线虫 B. 病毒 C. 真菌 D. 细菌? 五、填空题（共20分） 1. 植物病原真菌的五个亚门分别是。 2. 子囊菌分纲的依据是。 3. 植物病害根据病原的性质分为和。 4. 初侵染源主要有。 5. 植物线虫病害的症状特点为。 6. 植物病毒的鉴定方法主要有。 7. 病原菌的生理小种指。 8. 真菌病害的病征主要有。 9. 植物病毒的非介体传播方式有。 10. 真菌产子囊孢子的子实体有。 参考答案及评分标准 一、名词解释（本大题共5小题，每小题3分，共15分） 1. 真菌的营养体：指真菌营养生长阶段所形成的结构。 2. 病原生物：引起植物发生病害的有害生物。 3. 内含体：指植物感染病毒后，有些产物会与病毒的核酸、寄主的蛋白等物质聚集起来，形成的具

植物及其产品转基因成份检测抽样及制样方法征求意见稿

SN/T1194—×××× I ICS SN 植物及其产品转基因成份检测 抽样及制样方法 Methods of sampling and preparation of samples for detection of genetically modified components in plants and their derived products （征求意见稿） 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局发布

SN/T1194—×××× II 前言 本标准由中华人民共和国国家认证认可监督管理委员会提出并归口。 本标准由中华人民共和国质量监督检验检疫总局批准发布。 本标准代替SN/T1194-2003《植物及其产品转基因成份检测抽样和制样方法》。 本标准起草单位：辽宁出入境检验检疫局、厦门出入境检验检疫局、中国检验检疫科学研究院。本标准主要起草人：曹际娟、郑江、陈红运、黄新、陈颖、朱水芳。 本标准系代替了SN/T1194-2003。

SN/T1194—×××× 植物及其产品转基因成份检测 抽样和制样方法 1 范围 本标准规定了植物及其产品转基因成份检测的抽样和制样方法。 本标准适用于植物及其产品转基因成份检测的抽样和制样。 2 规范性引用文件 下列文件对本文件的应用是必不可少的。凡是注明日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注明日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。 SN/T 0798 进出口粮油、饲料检验检验名词术语 SN/T 0799 进出口粮油、饲料检验检验一般规则 SN/T 0800.1 进出口粮油、饲料检验抽样和制样方法 SN/T 0952 进出口商品抽样检验程序孤立批计数抽样批不合格品率的估计及样本量的选（适用于批量较大的情形） GB/T 10111 随机数的产生及其在产品质量质量抽样检验中的应用程序 GB/T19495.1 转基因产品检测通用要求和定义 GB/T19495.7 转基因产品检测抽样和制样方法 3 定义及术语 3.1 定义 转基因植物 Genetically Modified Plants 指用基因工程技术或者现代生物技术改变基因组构成的植物。 3.2 术语 本标准采用SN/T 0798中的一般术语以及GB/T19495.1、GB/T19495.7中的术语。 4 总则 4.1 一般规定 4.1.1 抽取及制备的样品应具有代表性。 4.1.2 应确保抽样器具清洁、干燥、无异味，抽样、制样器具及样品容器所用材质不应对待抽取样品造成污染。 4.1.3 为避免交叉污染，尽可能使用不同的抽样和制样器具或设备抽取和制备不同交付批的样品，盛装样品的容器或包装应尽可能一次性使用。如果不能做到（例如使用机械取样设备时），则应在抽取和制备一个交付批的样品后使用适当方法清洁所有器具和设备。 4.1.4 在所有抽样过程中应避免样品散落，防止有活性的生物污染生态环境。 4.1.5 应在物理隔离的区域制备样品，防止对其他区域或实验室的污染，并应及时清洁制样区域。4.1.6 必要时使用DNA销毁剂处理抽样和制样器具和设备、样品容器及制样区域。 4.1.7 适用时，应参照GB/T 1949 5.1《转基因产品检测通用要求和定义》中的规定防止污染。 4.1.8 抽样时应注意保护样品，抽样器具和样品容器应存放于清洁的环境中，避免雨水和灰尘等外来物引起的污染。 1

植物病理学试题题库

植物病理学试题题库 （种子工程专业） 一、名词解释： 植物病害；病状；病征；寄生性；致病性；非侵染性病害；侵染性病害；真菌的生活史；病毒；寄生性植物；病害循环；病原物的越冬越夏；侵染过程；初侵染；再侵染；单循环病害；多循环病害；病程；毒素；抗病性；小种专化抗病性；垂直抗性；水平抗性；主动抗病性；被动抗病性；基因对基因学说；植物病害流行；单年流行病害；积年流行病害；植物检疫；农业防治；生物防治；化学防治 二、填空题： 1、病原物产生的致病物质有：、、3种。 2、确小麦“三锈”分别是指：、和。 3、小麦条锈病主要发生在________上，也可发生在_______和_______上，叶片正面形成许多鲜黄色_________。 4、小麦条锈病菌越夏场所是。 5、小麦叶锈病菌以_______在小麦_______上越冬，条件适宜时萌发 ________孢子进行再侵染。 6、小麦白粉病主要发生在_______上,也可侵染植株的_______ ______和 ______上,病菌是一种_______寄生菌。 7、稻瘟病的发病高峰期有两个，分别是和。 8、稻瘟病根据危害时期和部位的不同，可分为___ ___ ___ ____和 ___。 9、稻瘟病在叶片上可产生四种类型病斑，即 _______、______、_____和 ______。 10、水稻纹枯病病原属________，主要以_______在________中越冬， 也能以 ________和_______在病稻草等处越冬。 11．植物病原真菌产生的无性孢子的类型有、、。 11、水稻白叶枯病菌的侵入途径主要是和。 引起水稻白叶枯病的病原是一种______。病害初侵染源主要来自 _______ 和病稻草堆等。

转基因植物论文

课程名称：转基因植物及其生物安全性主讲教师：曹前进 学号 2010212569 姓名凌泽广成绩： 谈谈学习本课程后的心得及有关转基因 争论的看法 摘要：从2012年2月15日开始本学期“转基因植物及其生物安全性”的第一堂课，到即将结束于6月13日的最后一堂课，在这段时间里，我没有翘过一节课，在曹老师的指引下，我深刻的学习并了解了许多关于转基因的知识，不仅如此，也锻炼了我上课时积极思考的能力以及增添了敢于发言的勇气。对有关于转基因的利弊争论，我也有了自己的看法。我坚信，在未来的世界里，随着人们的需要，很多有限资源都满足不了，而唯有靠着科技的力量解决一系列随之产生的需要。 关键词：转基因植物心得争论 本文我将会从俩个方面进行解读，第一，关于学习本课程后的心得；第二，对于有关转基因争论，我提出了些自己的看法。 （一）学习本课程后的心得 在选修这门课之前，我完全是因为它是上午的第一节课，在有些人眼中，也许不会选择在上午的第一节课，因为好多人在早上是不愿意起床的，他们更愿意选择在床上度过自己美好的早晨，而我却认为，学习应该就从早上开始，因此在周一至周五的第一节课里，我都是有课程安排的。早上也是一天中最清醒的时候，我庆幸自己选修了这门课程，更加庆幸的是有一个好老------曹老师。 尽管从第一节课里面的位置坐得满满，到以后上课的稀稀疏疏，但这丝毫没有削落我对这门课程的喜爱，我只能说，他们不来上课是他们的损失，因为他们没有了解到曹老师的课堂是多么的有意思。她不仅给大家时间在课堂里讲解自己感兴趣的话题，还组织我们辩论，那次的题目是化学合成剂（如农药）弊大于利，还是利大于弊。大家查阅资料后，在课堂里纷纷得提出自己的见解，从各个角度进行阐述，大家讨论激烈，但这也没有影响我们课后的朋友关系。 每次上课的时候，我都坐在第二排的位置，好像那已经成为了我的专座，也许是因为大家都不喜欢坐在前面吧，这样也好，上课我就可以听老师讲得更清楚了。几乎每节课，老师都会提前十几分钟到达教室，当我发现还没有多少人来时，老师就已经把多媒体打开了。我觉得老师用实际行动在告诫我们这些年轻人，一天之计在于晨。老师在上每堂课之前，我都可以感受到老师准备了很长时间。她的认真负责的教学态度，值得我去学习！ 我清晰的记得，老师在讲各种各类的花时，列举了很多花的图片，然后让我们一一识别，老师的讲解弥补了我有些关于生活中常见的花的知识。老师还顺便提到了华师目前开放的石楠花，还跟我们解释了石楠花为什么有一种臭味。我也清晰的记得，老师在讲解各种转基因食品时，给我们阐述了我国现阶段是用于商业用途的转基因植物，她还让我们自己去商店里寻找一些关于添加了转基因植物的食品。我还清晰的记得，老师给我们讲解各种疾病时，提到了狂犬病（又叫恐水症），然后她也解答了我的一些疑问。因为在小时候我也被狗咬过，但并没有出血，只是有点痕迹，然后老师告诉我那并不会影响你今后的生活。我还清晰的

转基因植物产品检测实验室一览

转基因植物产品检测实验室一览 序号仪器名称用途参考品牌型号与配置大大致预算 1 高速冷冻离心机生物样品的高速分离 （冷冻保持样品生活 活性）。 德国eppendorf；美国 Thermo；德国Sigma； 德国Herolab。 50000 120000 2 定性PCR扩增仪 微量基因片段 （DNA/RNA）的扩增 德国Peqlab、美国ABI、 德国eppendorf、美国 Bio-rad。 50000 110000 定量CR扩增仪 （荧光定量PCR） 扩增的同时对基因片 段做定量检测。 美国ABI、德国 eppendorf、美国 Bio-rad。 250000 780000 3 PCR专用工作台保证PCR时的无污 染。（或建设标准的 PCR层流实验室） 德国Peqlab。 （国产超净台也可替 代。） 10000 34000 4 电泳槽、电泳 仪 基因片段扩增之后跑 凝胶。 德国Peqlab、美国 Bio-rad。或北京六一。 15000 40000 5 凝胶成像系统对凝胶进行分子量、 等定性分析 法国VL，美国Bio-rad、 或国产。 350000 150000 6 紫外透射仪国产6000 15000 7 制冰机国产20000 35000 8 CO2培养箱美国Tehrmo。美国 shellab 20000 50000 9 液氮罐国产。4000 10000 10 超纯水 美国millipore；美国 Tehrmo。 40000 76000 双蒸馏水发生 器 国产 4000 18000 11 分子生物常用耗 材与试剂 5000 10000 12 转基因专用试剂5000 10000 其他设备： 细胞融合仪、核酸提取仪、紫外分光光度计、核酸蛋白检测仪磁力搅拌机杂交仪、-30℃低温冰箱、超低温冰箱、漩涡混合器、超声波细胞粉碎仪、自动恒温酶标。

植物病理学题库

普通植物病理学试题题库 第一部分：拉丁学名 一、病原菌拉丁学名 1、真菌 Plasmodiophora （根肿菌属）Physoderma （节壶菌属） Achlya （绵霉属）Pythium （腐霉属） Phytophthora（疫霉属）Peronospora（霜霉属） Spongospora （粉痂菌属）Polymyxa （多粘菌属） Saprolegnia （水霉属）Aphanomyces（丝囊霉属）Sclerospora（指梗霉属）Plasmopara （单轴霉属） Pseudoperonospora （假霜霉属）Bremia （盘梗霉属）Albugo（白锈属）Peronophthora（霜疫霉属） Rhizopus （根霉属）Mucor（毛霉属） Choanephora（笄霉属）Absidia（犁头霉属） Taphrina（外囊菌属）Blumeria（布氏白粉属） Ceratocystis（长喙壳属）Gibberella（赤霉属） Valsa（黑腐皮壳属）Elsinoe（痂囊腔菌属） Guignardia（球座菌属）Venturia （黑星菌属） Sclerotinia （核盘菌属） Erysiphe（白粉属属）Sphaerotheca（单丝壳属） Podosphaera （叉丝单囊壳属）Phyllactinia（球针壳属） Uncinula （钩丝壳属）Microsphaera（叉丝壳属） Meliola（小煤炱属）Glomerella （小丛壳属） Gaeumannomyces（顶囊壳属）Cryphonectria（隐球丛赤壳属）Gnomonia（日规壳属）Phyllachora（黑痣菌属）

普通植物病理学实验指导(王海光)

中国农业大学自编教材 普通植物病理学实验指导 （农学专业用） 王海光编 二零一一年

前言 《普通植物病理学实验》本来是《普通植物病理学》的实验教学部分，作为《普通植物病理学》的一部分，不是单独一门课。学校对本科生教学计划调整之后，《普通植物病理学》的实验教学部分独立作为一门必修课，由原来的18学时，调整为32学时。该课程的教学目的是使学生从感性上认识植物病害的症状、病害发生规律、主要病原真菌、细菌、病毒、线虫的形态特征等相关知识，掌握植物病害诊断、病原分离、纯化、接种、鉴定等植物病理学研究的常规方法和技术，提高学生的实验能力和实际动手能力，同时，结合实验课程内容培养学生科学的思维方法。 《普通植物病理学实验》根据教学计划、教学要求、实验条件等，共设置了8个实验，每个实验4个学时。实验材料可能根据实际情况有所调整，实验内容安排顺序也可能根据田间病害发生情况和实验材料的准备情况进行临时性调整。 本实验指导是在去年教学的基础上整理修改编写的，在编写过程中，参考了以往的一些实验指导书和网上的教学资源，在此一并感谢！本实验指导尚显单薄，内容尚欠丰富，在今后的教学中将日臻完善。 编者 2011年8月

实验课注意事项 1.实验课前必须通过实验指导或通过教学网络平台下载课件了解课堂实验内容，明确实验 目的，了解操作步骤。 2.按时参加实验课教学，不准迟到。上课期间注意课堂纪律，严禁喧哗、随意走动等扰乱 教学的行为发生。 3.注意实验室安全。实验时，要严格按照教师要求操作，爱护实验仪器和材料。遇到仪器 发生故障，必须及时报告教师，损坏仪器或用具必须登记。按照学校有关规定处理或赔偿。 4.实验报告一律用铅笔书写，必须使用学校统一印制的实验报告纸，按时交实验报告。 5.绘图一定认真，不许虚构或艺术加工。绘图时选用硬度合适的铅笔，笔尖要保持圆滑。 所绘图形的一切特征用线条和圆点表示，线条要光滑、粗细一致，用圆点疏密表示色泽深浅，严禁涂抹，圆点要求大小一致。图形要求大小适中，各部分结构比例合理，细微部分需放大表示时，可单独绘制。图形中各部分名称一律用虚线引出标注在图形右侧，图名写在图形下方，并在图名下面注明放大倍数。 6.实验结束后，整理好自己的物品，将所用仪器或材料整理好放在适当的位置，如有需要， 应做好使用情况登记。 7.轮流值日，保持实验室整洁。

植物基因转化及转基因植物的分析与鉴定

植物基因转化及转基因植物的分析与鉴定 〖实验目的〗 1．了解创建烟草突变体库的方法； 2．理解每种方法的基本原理； 3．掌握农杆菌介导的转基因方法以及转基因产物筛选和鉴定的基本过程。 〖实验原理〗 随着越来越多植物的全基因组测序工作的完成，在此基础上开展功能基因组的研究是目前的核心研究内容之一。植物插入突变体库的建立是功能基因组研究的一个重要内容，在此基础上也能进行正向遗传学及反向遗传学的研究。在创制突变体的策略上，传统方法是使用物理或化学诱变方法获得，其优点是可在尽可能短的时间内获得饱和突变体。与传统的物理和化学诱变方法相比，生物诱变(T-DNA和转座子插人诱变)通常可标记突变基因，从而较为容易地分离鉴定靶基因。最近数年，通过农杆菌介导的T-DNA插入突变已成为国际公认的植物功能基因组学的主要研究方法之一。 烟草是植物基因组研究的一种模式植物，其突变体库的创建是烟草功能基因组学研究中的重要内容，其目的是通过大规模的突变体库平台快速全方位的了解基因组中各个基因的功能。突变体的创制是遗传学研究的基础，也是分离基因和基因功能鉴定的最要途径。通过诱导培养，使烟草产生愈伤组织，利用土壤农杆菌感染愈伤组织，实现T-DNA标签在烟草愈伤组织基因组中大量随机插人，利用植物细胞的全能性，经过抗性筛选，诱导分化，从抗性愈伤组织获得烟草突变体再生植株，获得各突变体的纯合材料，从而建立烟草突变体的数据库，然后分析突变性状与T-DNA的共分离关系，存在共分离的材料用适当的Tail-PCR克隆技术获得T-DNA的侧翼基因组序列，用其作探针筛选基因文库，获取目标基因或克隆，再进行下一步的分析（图实验4-1）。 T-DNA 载体构建 转化植物（T1，T-DNA杂合子)收获T2种子

国家转基因植物研究与产业化专项

国家转基因植物研究与产业化专项 课题申请指南 为充分发挥科学技术第一生产力作用，依靠科技进步加速我国农业结构调整，提高农业整体效益，增加农民收入、加快实现转基因植物研究及其产业化进程、提高我国农业国际竞争力，科技部决定启动“国家植物基因研究中心”、“国家转基因棉花中试与产业化基地”、“转基因林草新品种培育与示范”等项目的申报工作，特制定本指南。 第一章申请须知 一、申请要求 （一）申请范围与组织申报原则 1、“国家植物基因研究中心”项目由2000年初步进行论证的上海、广州、北京和武汉4家单位分别申请，其所在省、直辖市科技厅（科委），国务院有关部门科技司为该项目申报组织单位。各组织单位只准上报一份，组织单位应提出申报意见，并由省、部级政府部门推荐。 2、“国家转基因棉花中试与产业化基地”项目由主产棉区有关省、自治区、直辖市、新疆建设兵团科技厅（科委）为申报组织单位，并根据指南要求，组织区域内专业研究单位进行申报。各组织单位只准上报一份，组织单位提出申报意见，并由省级人民政府推荐。 3、“转基因林草新品种培育与示范”项目由各有关省、自治区、直辖市科技厅（科委），国务院有关部门科技司为申报组织单位，根据指南要求组织本地区（部门）有关单位进行申报。 （二）具体要求 1、申报工作自本公告公布之日起开始，欲申报单位必须根据《申请指南》要求参与申报活动。 2、申请单位所在省（自治区、直辖市、新疆建设兵团、国务院有关部委）和申请单位应按国拨经费的1：1提供配套资金。申请单

位可以通过企业投资、银行贷款等方式（必须出据证明）自筹部分经费。国拨经费的使用按《国家转基因植物研究与产业化专项暂行管理办法》有关规定执行。 3、寄送申请文件的截止日期为2002年9月25日，逾期到达的申请文件恕不接受。 （三）项目实施期限 本项目实施年限为2年。 （四）申请人资格 凡在中华人民共和国境内注册，在上述申请范围之内，具有独立法人资格的事业单位均可根据《申请指南》的要求申请。 二、申请文件的编制 1、申请文件编写 以中文编写，语言要求精练，所提供的数据真实、可靠。 2、申请文件的格式要求 所提供的申请文件一律用A4纸装订。 3、申请文件构成 ——申请函 ——申请人资格审查文件 ——申请书 ——附件 三、申请文件的递交 1、申请书及有关资料应有法定代表人（或委托授权人）签字并加盖公章，全部申请文件须包装完好，并注明申请项目、申请单位名称、地址、邮政编码、电话及联系人。 2、申请文件一式10份，正本1份，副本9份，在每份申请书上要注明正本和副本，正、副本分别封装，并在封面上注明。一旦正本和副本不符，则以正本为准。 3、递交申请文件的截止日期为2002年9月25日。 4、“国家植物基因研究中心”项目申请文件寄送地点为：中国生物工程开发中心。 地址：北京市海淀区皂君庙乙七号（北京8118信箱)

转基因植物的安全性评价.

1转基因植物安全评价的意义 转基因植物育种,是利用遗传工程的手段,有目的地将外源基因或DNA构建导 入植物基因组,通过外源基因的直接表达,或通过对内源基因表达的调控,甚至通过直接调控植物相关生物如病毒的表达使植物获得新的性状的一种品种改良技术,可最大限度地满足人类的需要[1]。 与此同时,转基因技术使物种的进化速度远远超过生物自然变异与选择的速度,对于这种急剧的生物物种变化,自然界能否容纳和承受?自然界的其他组成部分是否会因此受到伤害或破坏?转基因植物及其产品被人们食用时,是否会向人体肠道微生物发生基因转移?是否会出现由于某种新物质的形成对人体健康产生危害或潜在影响?要消除这些疑虑就要进行转基因植物的安全性评价。要经过合理的实验设计和严密科学的实验程序,积累足够的数据,根据这些数据判断转基因植物的大田释放和大规模商业化生产是否安全,对实验证明安全的转基因植物正式用于农业生产,对存在安全隐患的加以限制,避免危及人类生存及破坏生态环境[2]。因此,制定科学完善的安全性评价的原则与方法,对确保人类健康和环境安全及转基因技术的健康发展具有十分重要的意义。 2转基因农产品安全评价的内容 2.1转基因植物的环境安全性 转基因植物的环境安全性评价要解决的核心问题是转基因植物释放到田间后是否会将基因转移到野生植物中;是否会破坏自然生态环境,打破原有生物种群的动态平衡[2]。 转基因植物演变为农田杂草的可能性:转基因植物可通过传粉进行基因转移,可能将一些抗虫、抗病、抗除草剂或对环境胁迫具有耐性的基因转移给近缘种或杂草,如果杂草获得了这些抗性,就会变成超级杂草,使农田杂草难以控制。 基因漂移到近缘野生种的可能性:在自然生态条件下,有些栽培植物会和周围生长的近缘野生种发生天然杂交,从而将栽培植物中的基因转入野生种中。在进行转

植物病理学试题库

侵染性病害:有病原生物因素侵染造成的病害叫侵染性病害。因病原生物能在植株间传染，又叫传染性病害 非侵染性病害：由于植物自身的生理缺陷或遗传性疾病，或生长环境中不适宜的因素直接或间接引起的一类病害。 植物病程：接进入、潜伏、发病 病征：寄主发病部形成的肉眼可见的病原物的营养体、繁殖体和休眠结构等 病害循环：一种病害从寄主的前一生长季开始发病，到后一生长季再度发病的全过程。病情指数：是全面考虑发病率与严重度的综合指标。一叶片（植株）为单位，当严重度用分级代表值表示时，病情指数计算公式为： ∑[各级病叶（株）数×各级代表值] 病情指数= ×100 调查总叶（株）数×最高一级代表值 单循环病害：在一个生长季中植物病原物只发生一次侵染的病害。 单主寄生：有的真菌在同一寄主植物上就可以完成其整个生活史的现象。 多分体病毒：病毒的基因组分布在几条不同的核酸链上，分别包装在不同的颗粒里。多型现象：有些真菌在其整个生活史中的不同阶段，可以产生多种类型孢子的现象 多循环病害：在一个生长季中，病原物连续繁殖多代，而发生多次再侵染的植物病害发病率：发病植株或植物器官占调查植株或器官总数的百分率，表示发病的普遍程度非小种专化抗病性：具有该种抗病性的寄主品种与病原物小种间无明显特异性相互作 用，是由微效基因控制的能针对病原物整个群体的一类抗病性 过敏性坏死反应：植物对非亲和性病原物侵染表现高度敏感的抗性表现，此时手侵细胞及其邻近细胞迅速坏死，病原物受到遏制或被杀死，或被封锁在枯死组织中活体营养型：只能从活的寄主细胞或组织中获得所需要的营养物质的营养方式 基因对基因学说：对应于寄主植物中一个决定抗病性的基因，病原物方面也存在一个与之匹配的无毒基因。 寄生专化性：有些专性寄生菌，其寄生的寄主范围很窄，或寄生于同一寄主植物种的不同品种间，对寄主品种有严格选择性。 假根：有些真菌菌体的某些部位长出分支，外表像根的根状菌丝，可以伸入基质内吸收养分并固着菌体。 菌核：真菌菌丝或菌丝与寄主组织共同构成的一种较为坚硬的颗粒状物，对不良环境条件具有很强的抵抗能力，在条件适宜时可以形成产孢结构进行繁殖菌物：广义的真菌，包括卵菌、黏菌、壶菌、接合菌、子囊菌、担子菌 喷菌现象：由细菌侵染所致病害的病部，无论是维管束系统受害的，还是薄壁组织受害的，都可以在病健交界处通过显微镜看到有大量细菌从病部喷出的现象潜育期：病原物与寄主建立寄生关系到植物开始显症的过程。 侵染过程：从病原物与寄主接触、侵入到寄主发病的过程 侵染剂量：病原物侵入寄主并引起发病所需的最低数量 侵入期：从病原物侵入寄主植物到与寄主植物建立营养寄生关系的时期 生理小种：病原物不同菌株间在一组鉴别品种上表现毒性差异分化的类群，在形态，生化性状上无差异 生物防治：农业生态系统中利用有益生物或有益生物的代谢产物来调节植物的微生态环境，使其利于寄主植物而不利于病原物，从而达到防治植物病害的措施

普通植物病理学实验

实验二、真菌一般形态观察和临时玻片制备 【字号：大中小】【打印此页】【关闭窗口】一、目的和要求 熟悉不同临时玻片制作方法；通过观察，认识病原真菌的营养体及其变态，认识真菌 的子实体、有性繁殖、无性繁殖产生的各种类型孢子。 二、实验用具 挑针、刀片、木板、酒精灯、火柴、载玻片、盖玻片、纱布、（棉蓝）乳酚油、二甲苯、显微镜、擦镜纸、吸水纸等。 三、内容与方法 1．临时玻片的制作 临时玻片制作方法很多，如涂、撕、粘、挑和切片等，可以根据病原物的类型选择使用。 （1）涂抹法：细菌和酵母菌的培养物常用涂抹法制片。将细菌或酵母菌的悬浮液均匀地 涂在洁净的载玻片上，在酒精灯火焰上烘干、固定，再加盖玻片封固。加盖玻片前还可进行染色处理，使菌体或鞭毛着色而易于观察。 （2）撕取法：用小金属镊子仔细撕下病部表皮或表皮毛制成临时玻片。 （3）粘贴法：将塑料胶带纸剪成边长5mm左右的小块（注意胶带上不要印有指印）， 使胶面朝下贴在病部，轻按一下后揭下制成玻片。 （4）挑取法：用挑针从病组织或基物（如培养基）上挑取表面的霉状物、粉状物或孢子 团制成玻片。 （5）组织透明法：将少量病组织材料切成细丝后放在载玻片上，滴加乳酚油后在酒精灯 上徐徐加热至蒸气出现。如此处理数次使组织透明，冷却后加盖玻片进行镜检。此法可以观察到病原物在寄主内的原有状态。 （6）徒手切片：徒手切片时选取病状典型、病征明显的病组织材料，先在病征明显处切 取病组织小块（边长5－8mm），放在小木块上，用食指轻轻压住，随着手指慢慢地后退，用刀片的刀尖将压住的病组织小块切成很薄的丝或片，用沾有浮载剂的挑针或接种针挑取薄而合适的材料放在一干净载玻片上的浮载剂液滴中央，盖上盖玻片，仔细擦去多余的浮载剂（注意浮载剂过多会使观察物出现晃动不稳定现象），即制成一张临时玻片。 浮载剂： 水：溢菌、线虫活动、真菌孢子萌发、大小测量 –优点：方便 –缺点：产生气泡；易干燥 乳酚油：除上述外均可用。

植物基因转化及转基因植物的分析与鉴定

植物基因转化及转基因植物的分析与鉴定 Company number：【WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998】

植物基因转化及转基因植物的分析与鉴定 〖实验目的〗 1．了解创建烟草突变体库的方法； 2．理解每种方法的基本原理； 3．掌握农杆菌介导的转基因方法以及转基因产物筛选和鉴定的基本过程。〖实验原理〗 随着越来越多植物的全基因组测序工作的完成，在此基础上开展功能基因组的研究是目前的核心研究内容之一。植物插入突变体库的建立是功能基因组研究的一个重要内容，在此基础上也能进行正向遗传学及反向遗传学的研究。在创制突变体的策略上，传统方法是使用物理或化学诱变方法获得，其优点是可在尽可能短的时间内获得饱和突变体。与传统的物理和化学诱变方法相比，生物诱变(T-DNA和转座子插人诱变)通常可标记突变基因，从而较为容易地分离鉴定靶基因。最近数年，通过农杆菌介导的T-DNA插入突变已成为国际公认的植物功能基因组学的主要研究方法之一。 烟草是植物基因组研究的一种模式植物，其突变体库的创建是烟草功能基因组学研究中的重要内容，其目的是通过大规模的突变体库平台快速全方位的了解基因组中各个基因的功能。突变体的创制是遗传学研究的基础，也是分离基因和基因功能鉴定的最要途径。通过诱导培养，使烟草产生愈伤组织，利用土壤农杆菌感染愈伤组织，实现T-DNA标签在烟草愈伤组织基因组中大量随机插人，利用植物细胞的全能性，经过抗性筛选，诱导分化，从抗性愈伤组织获得烟草突变体再生植株，获得各突变体的纯合材料，从而建立烟草突变体的数

据库，然后分析突变性状与T-DNA的共分离关系，存在共分离的材料用适当的Tail-PCR克隆技术获得T-DNA的侧翼基因组序列，用其作探针筛选基因文库，获取目标基因或克隆，再进行下一步的分析（图实验4-1）。 T-DNA 载体构建 转化植物（T1，T-DNA杂合子)收获T2种子 筛选T2，获突变子，应为3:1分离 确定T-DNA与突变型共分离的个体 产生纯合后代 克隆T-DNA两侧的植物DNA（Tail PCR) 利用侧翼DNA序列作探针从该植物的cDNA文库中钓取基因 基因功能的验证（遗传互补测验，分离的野生基因转化突变体，回复功能）图实验4-1 T-DNA标签克隆基因的基本流程 TAIL-PCR分离法是利用多个嵌套的T-DNA插入序列特异性引物（根据T-DNA中靠近右边界处的核苷酸序列设计的引物，Tm值57-62℃和一个短的随机简并引物（AD，Tm值44-46℃）组合，以突变体基因组DNA为模板，进行多次PCR反应，采取高温特异性扩增与低温随机扩增相间进行的方法，最后获得T-DNA插入侧翼区特异性扩增片段（实验图4-2），可作为探针，筛选分离基因。 TAIL-PCR分离法可以降低非侧翼区特异产物的背景，同时它可以产生2个以上嵌套的目的片段，与其它方法相比TAIL-PCR方法具有简便、特异、高效、快速和灵敏等特点，已经在拟南芥和水稻等植物中获得了成功及广泛的应用。

转基因食品快速检测试纸的检测原理

转基因食品快速检测试纸的检测原理 一、转基因食品快速检测试纸简介概述： 托普云农转基因食品快速检测试纸用于快速检测种子或植物叶片等样品中的转基BtCry1Ab/1Ac，灵敏度为1%，整个检测过程只需要10-15分钟，适用于各类企业及检测机构。 大多数转基因植物有可能在耕种、收割、运输、储存与加工过程同时混入食品，不管是要对转基因食品贴示标签，亦或是对转基因与非转基因原料分别进行输送，转基因食品的原料和食品检测都是必不可少的；还有，要区别开来转基因和非转基因食品，对转基因食品进行进行标识，而食品中转基因含量的多少加以限制，更加需要有效准确的基因检测设备与良好的检测技术。 跟随着每个国家转基因标识制度纷纷相继建立和老百姓对转基因产品高度关注度的提高，老百姓对转基因技术的认知度与准确性相继提出了更加严格性的要求，而因此各个转基因检测技术与转基因检测设备更成为了大家研究的热点和探讨的话题，最近十几年来国外的科学研究一直处于前沿，为了促进我国转基因作物相关科技技术研发、推广发展，托普云农也致力于让老百姓对转基因检测技术的现状以及未来发展趋势有较为清晰和全面的认知了解！ 托普云农专业检测团队采用PCR技术，从分子水平检测农产品、加工原料、成品中的转基因成分，为食品生产加工和流通企业、检测机构、研究院所提供全面快速、简便经济的专业基因检测服务。为您食品的安全保驾护航！ 二、转基因食品快速检测试纸仅需30秒转基因现真身 在实验室里，托普云农工作人员演示转基因快速检测的过程。桌上的两个纸袋中，分别装有转基因和非转基因稻谷。工作人员各取数粒研磨成粉，分别装入两只试管，滴入缓冲液静置，待固体物质沉底后，取出2张转基因检测试纸分别蘸取上面的清液。30秒后，试纸呈现出不同的标记。 其中1张上、下两条检测线均呈现紫红色，为转基因样本，另外一张仅下检测线呈现紫红色，为非转基因。“试纸样式、检测原理、使用方法与早孕试纸类似。”试纸应用双抗体夹心免疫层析原理，如果样本中存在转基因抗原，与试纸上的转基因抗体结合就会使上、下检测线同时显色。 三、转基因食品快速检测试纸快速检测意义不凡 农业部印发《2015年农业转基因生物安全监管工作方案》，其中提到对水稻、玉米等进行重点监管，建议利用试纸条等快速检测方法，降低成本，扩大监测范

园艺植物病理学试试题库及答案

网上下的仅供参考哈 《园艺植物病理学》 一、名词解释（每小题1 分，共10 分） 1、症状 2、致病性 3、无隔菌丝 4、无性繁殖 5、游动孢子囊 6、分生孢子 7、子囊果 8、质粒 9、多分体病毒 10、全寄生性种子植物 二、填空题（每空1 分，共18 分） 1、植物侵染性病害由侵染引起，非侵染性病害由引起。 2、卵菌的无性孢子是，着生在。 3、接合菌的有性孢子称为。 4、子囊有性生殖时，两性配子囊是指和。 5、真菌的有性生殖过程一般经过、和等三个时期，最后形成单倍体的有性孢子。 6、白粉菌的菌丝特点是、。

7、细菌是属于界的单细胞生物，有细胞壁但没有固定的细胞换。 8、从自然孔口进入的细菌都可以从侵入。 9、高等植物的病毒粒体由和组成。 10、TMV 粒体的形状是，CMV 粒体的形状是的。 三、判断题（正确的用“√”，错误的的“×”表示。每小题1 分，共15 分） 1、植物病害引起的萎蔫可以恢复。（） 2、白菜霜霉病病斑上的霜霉状物是菌丝体。（） 3、无隔菌丝始终不形成隔膜。（） 4、菌核是由拟薄壁组织和和疏松组织组成的。（） 5、鞭毛菌亚门的真菌多为水生或在潮湿的土壤中。（） 6、闭囊壳通常着生于寄主细胞。（） 7、游动孢子借水流传播，孢囊孢子借气流传播。（） 8、担子菌有两种菌丝，即无隔菌丝和有隔菌丝。（） 9、西瓜枯萎病是一种细菌性病害，剖开根茎可见维管未变黑褐色。（） 10、植物病原细菌都是杆状，都有鞭毛。（） 11、病毒和真菌、细菌一杆有细胞结构。（） 12、每种植物病毒有多种蛋白质和核酸（） 13、植物对病毒的交叉保护作用是一种获得免疫性。（） 14、寄生性种子植物都是双子叶植物。（） 15、植物寄生线虫都是专性寄生物。（） 四、选择题（每小题1 分，共15 分）

转基因食品的检测方法材料

生命科学前沿讲座论文 转基因食品的检测方法 姓名：陈继款 系别：生命科学学院 专业：生物信息学 年级：2008级 学号：080567011 指导老师：薛李春 总成绩： 2010年07月02日

转基因食品的检测方法 自1983年世界第一例转基因作物问世以来，目前全球转基因农作物种植面积已达到5 000万hm2以上，大量的转基因农产品被直接或间接的制成人类的食品，呈迅猛发展的趋势。但是转基因作物作为一种新物种，其对人体健康、生态平衡是否具有危害还未确定。许多国家以立法或其他形式要求对转基因产品进行标记。我国于2001年5月23日颁布《农业转基因生物安全管理条例》，2002年3月20日开始实行的《农业转基因生物标识管理办法》规定，国家对农业转基因生物实行检验检疫和标识制度。世界各国均对转基因食品及其加工产品出具是否为转基因产品的认定报告。因此转基因产品的检测就显得尤为重要。转基因食品的检测主要从两个方面人手，一是核酸水平，即检测遗传物质中是否含有插入的外源基因；二是蛋白质水平，即通过插入外源基因表达的蛋白质产物或其功能进行检测，或者是检测插入外源基因对载体基因表达的影响，主要检测外源基因对插入位点附近基因影响及对其代谢产物的影响，由于该类型检测成本高，所需时间长，且被认为重要性较低，目前该类检测实际工作中较少涉及。本文分别对核酸和蛋白质两种水平上的检测方法进行综述。 1核酸水平 主要检测报告基因、启动子和终止子，是当前转基因产品检测的重要手段。椰菜花叶病毒(CaMV)35s启动子、胭脂碱合酶NOS终止子等10多种基因和基因片段广泛存在于转基因植物中，这就为检测转基因食品提供了便利。核酸水平的检测可以分为定性和定量两种。 1．1定性检测 1．1．1聚合酶链式反应(PCR) 1996年德国伯恩斯坦大学的Meyer Rolf等论证了PCR检测转基因食品的可能性。利用该方法在鉴定转基因抗除草剂大豆RoundUp ReadyTM Soybean(RRS)和转基因抗虫玉米系列标准品Btl76 Maxi maizer的实验中，可以检测到仅为0．5％转基因成分。Matsuoka等通过对7种转基因玉米转入的外源基因的序列分析，设计了14对检测该7种转基因玉米启动子、终止子和结构基因的引物，分别对转基因玉米、非转基因玉米、转基因大豆、非转基因大豆进行了PCR扩增检测，同时为检测所设计引物的特异性，还对其他作物如水稻、大麦、小麦等进行了PCR扩增，检验结果表明该方法能够快速有效地检测转基因玉米品种。每一次实验均需要设有阴性及阳性对照以确保实验结果可靠性。在样品采集及处理过程中也需要注意防止污染。 1．1．2多重PCR 多重PCR是常规PCR方法的改进，它是在同一个反应中同时扩增两个或多个目标基因序列。这种方法具有更大的可靠性和适应性，并且能降低检测成本。多重PCR可以同时针对几个靶位点进行PCR技术检测。V．T．Forte等利用其设计的多重PCR方法对转基因大豆和Bt玉米样品进行实际检测，结果表明该方法能够准确的检测食品中是否含有转基因成分，其检测结果可以精确到2％～0．1％的范围。Permingeat等仅用两

植物病理学试题和答案

《植物病理学》 一、名词解释（每小题 1 分，共10 分） 1、症状：植物生病后表现出来的不正常的状态。 2、致病性：是指病原物对寄主植物的致病和破坏能力。 3、无隔菌丝：菌丝体有分枝、无隔膜、为单细胞。 4、无性繁殖：是否经过性器和性细胞的结合，直接从营养体上产生孢子。 5、游动孢子囊：菌丝顶端形成囊状结构，其内产生游动孢子。 6、分生孢子：菌丝分化具有一定形状的分生孢子梗，其顶端形成外生的孢子。 7、子囊果：着生子囊和子囊孢子的结构体。 8、质粒：在有些细菌中，独立于核质之外呈环状结构的遗传因子。 9、多分体病毒：病毒内几种大小或形状不同的粒体所组成，只有当这几种粒体同时存在时才能表现该病毒的全部性状。 10、全寄生性种子植物：无叶片或叶片退化或鳞生化，不能进行光合作用，它们完全依靠从寄主植物上吸取营养。 1、病征：植物感病后，由病原物在病部构成的特征。 2、寄生性：指一种生物依附于其他生物而生存的能力。 3、菌核：由菌丝紧密交织而成的一种较坚硬的颗粒装物。 4、有性生殖：是通过性细胞或性器官结合而进行的一种繁殖方式。 5、卵孢子：由两个异型配子囊（藏卵器和雄器）结合而形成的有性孢子。 6、转主寄生：病原菌需要寄生两种不同植物上，才能完成其生活史的现象。 7、荚膜：细菌细胞外比较厚而稳定的粘质层。 8、交互保护作用：先侵染植物的病毒可以保护植物不受另一种病毒的侵染。 9、稀释限点：把病株组织的榨取液稀释，超过一定限度时便失去侵染力，这稀释限度即为稀释限点。 10、卫星病毒：有些RAN病毒伴随有低分子量的小粒体病毒，这种小粒体病毒称卫星病毒。 1、专性寄生物：只能从活体的寄主细胞或组织中吸取营养而生存，寄主细胞亡便终止寄生关系。 2、初生菌丝：由担孢子萌发形成的单核菌丝。 3、厚垣孢子：菌丝顶端或中间个别细胞膨大，原生质浓缩，细胞壁加厚形成休眠孢子。 4、准性生殖：菌丝形成异核体，通过核配，有丝分裂、染色体交换，最后形单倍体细胞核的过程。 5、同宗结合：单个菌株自行交配完成有性生殖。 6、分生孢子器：球形或瓶形有孔口的容器，其内着生分生孢子。 7、极鞭：着生在细菌菌体一端或两端的鞭毛。 8、持久性病毒：病毒在昆虫体内转移时间长，并能进行增殖，然后才能传毒。 9、卫星RNA有些RNA病毒伴随小分子星的RAN它与辅助病毒RAN无同源性单独不能侵染，要依赖辅助病毒才能侵染和增殖。这些小分子量RAN即为卫星RAN 10、系统侵染：病原物侵入植株后沿生长点或维管束蔓延至主株的侵染方式。 1、非侵染性病害：由不适宜的环境因素引起的植物病害，这类病害不能传染。 2、子实体：真菌具有一定形状并着生孢子的结构体。 3、接合孢子：由两个同型配子囊结合而成的一种厚壁有性孢子。 4、吸器：菌丝在寄生细胞内长出侧枝形成球状、丝状、指状等形状用以吸收养分的特殊结 5、次生菌丝：初生菌丝交配后形成的双核菌丝。 6、原核生物：遗体物质分散在细胞质中，没有固定的细胞核的单细胞生物。

常用的植物转基因技术

五种常用的植物转基因技术 植物转基因技术是通过各种物理的、化学的和生物的方法将从动物、植物及微生物中分离的目的基因整合到植物基因组中，使之正确表达和稳定遗传并且赋予受体植物预期性状的一种生物技术方法。1983年，首例抗病毒转基因烟草的成功培育标志着人类开始尝试利用转基因技术改良农作物。目前，植物转基因技术已在作物改良和育种领域发挥了重要作用。通过植物转基因技术，一些来自于动物、植物及微生物的有益基因如抗病／虫基因、抗非生物胁迫性状基因及特殊蛋白基因已被转化到农作物中以改良现有的农作物和培育新的农作物品种。以DNA重组技术为基础的植物转基因技术极大地扩展了基因信息的来源，打破了远缘物种间自身保持遗传稳定性的屏障。植物转基因技术已应用到玉米、水稻、小麦、大豆和棉花等许多农作物。同时，该技术也正在被尝试用于茄子和草莓等其它的作物中‘1’纠。目前，根据转基因植物的受体类型，植物转基因方法可以分为3大类：以外植体为受体的基因转化方法，如农杆菌介导法、基因枪法和超声波介导法；以原生质体为受体的基因转化方法，如聚乙二醇法、电击法、脂质体法及磷酸钙-DNA共沉淀法；以种质系统为受体的基因转化方法，如子房注射法和花粉管通道法。由于以原生质体为受体的基因转化方法有原生质体培养难度大，培养过程繁杂，培养工作量大且培养技术不易掌握；原生质体再生植株的遗传稳定性差、再生频率低并且再生周期长；相关的转化方法的转化率低、效果不理想等缺点，所以该类基因转化方法未被作为植物转基因的常规方法广泛使用。本文将对农杆菌介导法、基因枪法、超声波介导法、子房注射法和花粉管通道法的原理、基本步骤和优缺点作以简要介绍。 1以外植体为受体的基因转化方法 1.1农杆菌介导法 农杆菌介导法是最早应用、最实用有效并且具有最多成功实例的一种植物转基因方法。农杆菌是一类普遍存在于土壤中的革兰氏阴性细菌。目前，用于植物转基因介导的农杆菌是根癌农杆菌和发根农杆菌。某些根癌农杆菌和发根农杆菌分别含有大小为200 -800bp的结构和功能相似的Ti质粒和Ri质粒。Ti质粒和Ri质粒含有3个功能区：参与农杆菌侵染植物过程的vir区、参与农杆菌基因整合到宿主植物基因组过程的T-DNA区、在农杆菌中启动质粒复制的ori区。在vir区上的vir操纵子群作用下，Ti 质粒和Ri质粒能将自身的T-DNA转入宿主植物细胞内，而后将T-DNA整合到植物基因组中。T— DNA 是质粒上一段10—30kb的序列，它的两端各有一段高度保守的25bp的同向重叠序列。由于T-DNA 转化无序列特异性，因此可用任何基因片段代替原来的T-DNA基因片段进行。 农杆菌介导法的原理是：在农杆菌基因ehvA，chvB， pscA，and att家族所编码的蛋白和植物伤口产生的酚类物质和糖类物质的共同作用下，农杆菌识别并附着在宿主细胞壁上。virD4和virB基因编码蛋白组成的type IV分泌系统将单链VirD2-T-DNA复合体运送到宿主细胞内。此外，VirE3、VirE2和VirF蛋白也通过该系统进入宿主细胞质中。在宿主细胞质中，VirE2蛋白与VirD2-T-DNA复合体结合。在VirD2核定位信号、某些农杆菌蛋白和宿主细胞蛋白的共同作用下，VirD2-T-DNA复合体进入细胞核。在VirD2、VirE2、某些宿主细胞核蛋白如AtKu80和DNA连接酶的作用下，T-DNA被整合到宿主基因组中，但具体过程不详。 农杆菌介导法的基本步骤是：(1)诱导目标植物外植体；(2)构建含有目的基因的质粒；(3)质粒导人合适的农杆菌菌株中及该菌株的活化过程；(4)植物愈伤组织的微伤口处理及农杆菌侵染；(5)共培养及脱菌处理；(6)愈伤组织筛选、分化与植株再生；(7)再生植株及其后代的外源基因及其表达产物的分子检测；(7)转基因T1代的目标性状鉴定。 农杆菌介导法具有操作简单、转化效率较高、重复性好、单拷贝整合、基因沉默现象少、转育周期