细胞支原体污染一般情况及预防措施

细胞支原体污染一般情况及预防措施

细胞株若受到细菌、真菌、支原体、或是特定病毒等之污染时，会严重的影响实验的结果。而细菌、真菌等之微生物污染时，较易自培养基等的外观变化察觉。但是若受到支原体之污染时，细胞之外观较无明显变化，但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化。

各国细胞库支原体污染的统计表，如下：

国家受支原体污染(%) 报告年度

USA－FDA 15 1993(past 30 years)

USA－ATCC 15-20 1992

Japan－(IFO，RIKEN，JCR 80~30~22 1981 1987-19931998

Germany－DSM 36 1990-1994

Argentina 65 1987

Israel 32 1986-1993

China 95 1990

造成支原体高污染率的原因为：

1、支原体size 0.1~0.8 um，无细胞壁，可透过一般过滤膜（0.22-0.45 um）

2、支原体污染时，没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化

3、过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式

4、细胞流通间缺乏品管，造成实验室间的相互污染

5、研究或操作人员忽略污染问题

支原体污染了来源：

1、已受污染的细胞

2、操作人员的疏失

3、已受污染的培养基、血清

4、操作环境不良、实验器具不洁等

由于支原体为人体口腔中之正常菌丛，实验室之操作人员的污染亦可能为污染源，须十分注意。而万一细胞已受支原体污染时，最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃，以免污染其它洁净的细胞株。但是若是坚持要作去除支原体污染，有以下几种方法，只不过结果会与原始的细胞特性有差异。

去除支原体污染：

1、抗生素处理：BM-cyclin（Roche），MRA（mycoplasma removal agent，ICN），Ciprofloxcin（B ayer），Enrofloxacin（Bayer）

2、Nucleic acid metabolites：5-bromouracil，Hoechst 33258，bromodeoxyuridine

3、Anti-sera

预防与控制方面可从以下各点加强注意：

设备方面：

1、使用已作支原体测试ok之细胞株

2、于另一隔离之区域操作未知是否有支原体污染之细胞

3、使用不添加抗生素的培养基培养细胞

检测方面：定期以标准的支原体检测方法检测细胞、培养基、血清、ddH2O有否被支原体污染。

实验操作人员之无菌观念与无菌操作技术之要求

有关支原体污染之问题与回答：

1、应如何避免细胞污染？

细胞污染的种类可分成细菌、酵母菌、霉菌、病毒和支原体。主要的污染原因为无菌操作技术不当、操作室环境不佳、污染之血清和污染之细胞等。严格之无菌操作技术、清洁的环境、与品质良好之细胞来源和培养基配制是减低污染之最好方法。

2、如果细胞发生微生物污染时，应如何处理？

直接灭菌后丢弃之。

3、支原体(mycoplasma) 污染的细胞，是否能以肉眼观察出异状？

不能。除极有经验之专家外，大多数遭受支原体污染的细胞株，无法以其外观分辨之。

4、支原体污染会对细胞培养有何影响？

支原体污染几乎可影响所有细胞之生长参数，代谢及研究之任一数据。故进行实验前，必须确认细胞为mycoplasma-free，实验结果之数据方有意义。

5、侦测出细胞株有支原体污染时，该如何处理？

直接灭菌后丢弃，以避免污染其它细胞株。

支原体之检测：

直接培养法

原理：直接培养支原体于培养基中，观察其生长及菌落生成。

特点：是目前最直接与灵敏之步骤，亦是用来评估其它侦测新步骤之标准步骤。

缺点：培养时间长，须3－5星期才能判断。有些支原体不能在培养基培养出来(例如M. hyorhinis)。需同时培养支原体株作为正反应对照组，可能会造成污染。

材枓：dextrose、L-arginine HCl、Difco PPLO broth (Difco 0554-17-1) horse serum、15% yeast ext ract solution (autoclaved)、Bacto agar、无菌有盖螺旋试管(autoclaved)、无菌培养皿﹙60x15mm﹚、L -玻棒、37℃培养箱、厌氧缸（厌氧缸长期培养易有污染，所以厌氧包应用无菌水，每次打开厌氧缸后，用70% ethanol擦拭内壁。）

培养基制备：

基本配方为Difco PPLO broth(60%), 马血清(20%), 15% yeast extreat solution (10%), 10x stock sol ution (10%)。由于培养时间长，可加入penicillin(50u/ml)至10x stock solution或加入thallium acetate (1：2000)至培养基中以防止其它细菌污染。

·10x stock solution (1 liter) ：称取50 g dextrose，10 g L-arginine HCl，溶于1 liter蒸馏水中。以0. 22μm无菌过滤膜过滤灭菌。分装100 ml至瓶中，保存于-70℃。

·液体培养基(1 liter) ：称取21 g之Difco PPLO broth，0.02 g phenol red 于600ml蒸馏水中，加热搅拌溶解之。灭菌121℃，15分钟。待温度降低至室温后，于无菌操作台内加入200ml马血清，100ml

之15% yeast extract solution，及100ml解涷之10x stock solution，混合均匀后，分装至已灭菌之有盖螺旋试管中，10ml/管。保存于4℃，期限1个月。

·固体培养基(1 liter )：称取21 g之Difco PPLO broth，0.02 g phenol red，15g Bacto agar于600 ml蒸馏水中，加热溶解之。灭菌121℃，15分钟。放在50℃水中浴中，待温度降低至50℃时，于无菌操作台内加入200ml马血清，100ml之15% yeast extract solution 及100ml解冻之10x stock solution，混合均匀后，倒入60x50㎜之无菌培养皿中，5ml/培养皿。保存于4℃，期限1个月。

步骤：

·取1 ml细胞培养液或0.2ml细胞悬浮液，接种于液体培养基中，置于37℃培养二周，观察是否有混浊或是pH值改变之情形。培养一周及二周后，分别取0.1 ml液体培养液涂在agar plate上，将其倒放置于37℃厌氧箱培养，培养至少3星期，持续观察是否有支原体之菌落出现。

·另取1 ml细胞培养液或0.2ml细胞悬浮液，涂抹在agar plate上，37℃厌氧培养3星期，持续观察是否支原体菌落出现。

·另作正负反应对照组，正反应对照组为Acholeplasma laidlawii (ATCC 23206) 与M. arginini (ATCC 23838)。负反应对照组为待测细胞之新鲜培养基。

结果判读：

·支原体生长较慢，所以先在液体培养基培养1~2周增殖后，再培养于agar plate上。需至少培养3星期后，才可断定是否有支原体污染。所以整个测试需5个星期才知正确结果。

·典型之支原体菌落类似荷包蛋(fried- egg like)，乃是由于支原体往agar下层生长所致，为圆形无色透明菌落，大小约10-55μm。但是并非所有的支原体皆为似荷包蛋菌落，有些是圆形菌落或是类似粘菌类形态（slime）。

·若要区分细胞或是气泡造成的类似菌落，可将其自agar plate上切下，重新培养于液体培养基中，培养一星期后再种入agar plate，若是细胞则不会生长。

细胞支原体污染相关知识简介

细胞支原体污染相关知识简介 （2016年10月16日） （1）支原体简介： 支原体（Mycoplasma）是一种没有细胞壁的原核生物，大小约0.1 - 0.6微米。目前，已发现的支原体品种有100多种。其中，有近20种曾经在各种细胞培养体系中检测到，但超过98%以上的支原体污染是由6-8种引起的（注：具体的支原体种类，上海易色的《一步法恒温支原体检测试剂盒》说明书中有详细介绍）。而且同一种细胞经常被多种支原体污染。 （2）支原体污染细胞的途径： 由于支原体直径较小，经常可以穿过实验室常规的0.20微米孔径的除菌滤膜，高压过滤时，甚至可以穿过0.10微米孔径的除菌滤膜,造成细胞的支原体污染。 细胞培养的支原体污染来源主要有：（1）细胞之间的交叉污染，这是支原体污染的最主要原因；（2）细胞培养操作人员的口腔、皮肤等。（3）细胞培养用的组分，如血清、培养液等。 （3）细胞支原体污染的隐蔽性： 由于支原体体积比细菌小很多，通常支原体污染密度非常的高，可达107-9/mL培养液，但即使这么高密度的支原体污染也无法通过普通显微镜的肉眼观察进行判断。 而且，轻度到中度的支原体污染并不会导致细胞形态或生长速度的明显改变，也不会明显改变培养液的浑浊度或培养液的pH值。 以上两个原因就导致体外培养的细胞即使被支原体污染了，一般的科研工作者也不会觉察到。也就是说：如果不进行支原体的常规检测，你甚至不知道你培

表1，细胞支原体污染统计结果，数据来自参考文献 [4]

3. Edward Burnett and Liz Penn, European Collection of Cell Culture (ECACC?). Mycoplasma Detection and Elimination. Don Finley, Market Segment Manager, Sigma? Life Science. Biofiles, Vol. 8, No. 18 4. John Ryan (2008). "Understanding and Managing Cell Culture Contamination". Corning Incorporated. p. 24.

细胞培养中支原体污染

细胞培养中的支原体污染的预防及处理 Mycoplasma国内主要有三种译名，医学文献译为“支原体”（分枝原体，枝原体，类菌质体），动物医学文献译为“霉形体”或“支原体”，台湾、香港则译为微浆菌。 支原体是目前已知一类能在无生命培养基上生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。自然界分布广泛，种类多，有80余种，分为两个属：一为支原体属（Mycoplasma），有几十个种；另一为脲原体属（Ureaplasma），仅有一种。与人类感染有关的主要是肺炎支原体和解脲脲原体。 支原体无细胞壁，多呈不规则球状、长丝状，可分枝，营寄生共生或腐生。一般侵害对象为动植物，可造成多种疾病。 细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。国内外研究表明，95%以上是以下四种支原体：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）和菜氏无胆甾原体（https://www.sodocs.net/doc/3113351404.html,idlawii），为牛源性。国外调查证明，大约有二十多种支原体能污染细胞，有的细胞株可以同时污染两种以上的支原体。 支原体污染的来源包括工作环境的污染、操作者本身的污染（某些支原体在人体是正常菌群）、培养基的污染、被污染细胞造成的交叉污染、实验器材的污染、制备细胞的原始组织或器官的污染，等等。 体外生长的细胞对微生物及一些有害有毒物质没有抵抗能力，因此培养基应达到无化学物质污染、无微生物污染（如细菌、真菌、支原体、病毒等）、无其他对细胞产生损伤作用的生物活性物质污染（如抗体、补体）。对于天然培养基，污染主要来源于取材过程及生物材料本身，应当严格选材，严格操作。对于合成培养基，污染主要来源于配制过程，配制所用的水，器皿应十分洁净，配制后应严格过滤除菌。 由于体外培养细胞自身没有抵抗污染的能力，而且培养基中的抗生素抗污染能力有限，因而培养细胞一旦发生污染多数将无法挽回。支原体污染后，因为它们不会使细胞死亡可以与细胞长期共存，培养基一般不发生浑浊，细胞无明显变化，外观上给人以正常感觉，实则细胞手到多方面潜在影响，如引起细胞变形，影响DNA合成，抑制细胞生长等。 组织细胞培养工作中，可以从以下几方面来预防支原体的污染：控制环境污染；严格实验操作；细胞培养

支原体感染属于性病吗

支原体感染属于性病吗 感染人类支原体有十余种，以女性生殖道分离出人型及解脲支原体最常见。人型支原体感染多引起阴道炎、宫颈炎和输卵管炎，解脲支原体引起非淋菌性尿道炎。可以说，因为支原体感染主要为性接触传播疾病，所以属于性病的范围。但是可治疗的，服用中药利脲消炎丸可以把副作用降到最低。 对于支原体感染这类疾病很多人不清楚它是什么样的一种病种，有些人对这类疾病有着这样的疑问：支原体感染是性病吗?答案是肯定的，它是一种常见的性传播性疾病，所以很多有几个性伴侣的人很容易患上这样的疾病。 支原体可分为人型支原体、生殖支原体、解脲支原体、肺炎支原体。前三者可以引起泌尿生殖系统的感染。如为男性感染了解脲支原体就是非淋菌性尿道炎。如患有非淋的男性，通过性接触而引起女性支原体感染。产生的宫颈炎，这种情况下，都属于性传播疾病。如果男性无解脲支原体，女性在阴道内有时可查到一定量的支原体。如无阴道炎症，这种情况属于寄生的支原体，无需治疗。支原体是一种微生物，支原体感染主要是由不洁性行为，通过性接触感染，当然也可通过接触支原体感染者污染的物品，间接感染。一般来说，通过性接触所传染的急病都可成为性病。但是支原体可以是泌尿生殖道的正常寄居微生物。 感染人类支原体有十余种，以女性生殖道分离出人型及解脲支原体最常见。人型支原体感染多引起阴道炎、宫颈炎和输卵管炎，解脲支原体引起非淋菌性尿道炎。可以说，因为支原体感染主要为性接触传播疾病，所以属于性病的范围。 支原体感染一般潜伏期为1-3周，典型的急性期症状与其他非淋病性生殖泌尿系统感染相似，表现为尿道刺痛，不同程度的尿急及尿频、排尿刺痛，尿道口轻度红肿，分泌物稀薄，量少，为浆液性或脓性，多需用力挤压尿道才见分泌物溢出，常于晨起尿道口有少量粘液性分泌物或仅有痂膜封口，或见污秽裤裆。 女性患者多见以子宫颈为中心扩散的生殖系炎症。多数无明显自觉症状，少数重症病人有阴道坠感，当感染扩及尿道时，尿频、尿急是引起病人注意的主要症状。感染局限在子宫颈，表现为分泌物增多、混浊、子宫颈水肿、充血或表面糜烂。感染扩及尿道表现为尿道口潮红、充血、挤压尿道可有少量分泌物外溢，但很少有压痛出现。 通常随着性成熟和性活动的增加，泌尿生殖道支原体的寄居可以增加，虽然支原体感染是可以通过性接触来传播，但是，支原体可以是泌尿生殖道的正常寄居微生物。因此泌尿生殖道支原体感染并不能一概视为是患了性病。

人型支原体阴性正常吗

人型支原体阴性正常吗 可能当我们偶尔听到人型支原体这一名字时会十分陌生，其实人型支原体是一种微生物，而如果人体感染了这种微生物的话就会引起一系列的不适，如果不及时治疗还会给身体造成很多的危害。因此对有相关症状的患者要做及时检查，那么人型支原体阴性正常吗？ 人型支原体阴性正常吗 人型支原体阴性是正常的。人型支原体（M.hominis，MH），人型支原体是支原体的一种，它存在于泌尿系和生殖器中，可以引起泌尿系的感染和生殖器的炎症，如果您担心的话，可以来院做相关检查，明确是否有感染。 无细胞壁及前体，细胞器极少。DNA的G+C含量低，菌体内具有非常小的染色体组，其分子量约为45×108，菌体细胞大小约为0.2-0.3μm，很少超过1.0μm。由三层蛋白质和脂质组成的膜样结构以及一层类似毛发结构组成。支原体由二分裂繁殖，形态多样。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。 人型支原体可在鸡胚绒毛尿囊膜上或细胞培养中生长。用培养基培养。营养要求比细菌高。由于它没有细胞壁，因此对影响细胞壁合成的抗生素等不敏感，可抑制或影响支原体的蛋白质合成，特别是含PHMB杀菌成分的洁阴洗液有杀伤支原体作用，支原体对热抵抗力差，通常55℃经15分钟处理可使之灭活。石碳酸，来苏儿易将其杀死。在培养基中置入脲素并以硫酸锰作指示剂极易与其他支原体作出鉴别。 人型支原体感染有什么危害 支原体是非淋性尿道炎的一种特殊类型，是微生物。支原体感染临床表现为：“尿黄，尿道口微红，尿频，尿不尽，尿道痛，烧灼感”等症状。人型支原体，其特点是生长时需要类固醇物质。人型支原体菌落较大，直径在300～1000微米，典型的菌落具有“油煎蛋”的外观。长期的或反复的衣原体和支原体感染会破坏子宫颈和输卵管内的内膜层，造成不孕。衣原体和支原体的感染大多数是通过性行为传染的，有杜绝互相传染而反复感染，就应该对性伴侣同时治疗。 人型支原体感染后会导致患者身体出现多种不适的症状，人型支原体阴性的检查结果就说明了患者并没有真正的感染上这种微生物，这是一件值得高兴的事情。并且在生活中我们也要注意做好这种疾病的预防，这样才能远离疾病给我们身体带来的危害。

支原体

简介 支原体是在1898年发现的，又称人形支原体，是一种简单的原核生物。其大小介于细菌和病毒之间。 结构也比较简单，多数呈球形，没有细胞壁，只有三层结构的细胞膜，故具有较大的可变性。支原体的基因组多为双链DNA，散布于整个细胞内没有形成的核区或拟核。这种细胞内含有DNA,RNA和多种蛋白质，包括上百种酶。支原体可以在特殊的培养基上接种生长，用此法配合临床进行诊断。与泌尿生殖道感染有关的主要是分解尿素支原体和人型支原体两种，约有 20-30%的非淋菌性尿道炎的病人，是由以上两种支原体引起的，是非淋菌性尿道炎及宫颈炎的第二大致病菌。在成年人的泌尿生殖道中分解尿素支原体和人型支原体感染率主要与性活动有关，也就是说，与性交次数的多少、性交对象的数量有关，不管男女两性都是如此。据统计女性的支原体感染率更高些，说明女性的生殖道比男性生殖道更易生长支原体。另外，分解尿素支原体的感染率要比人型支原体的感染率为高. 特征 (1)形态与结构 支原体的大小为0.1～0.3um,可通过滤菌器，常给细胞培养工作带来污染的麻烦。菌落小（直径0.1~1.0mm），在固体培养基表面呈特有的"油煎蛋"状。无细胞壁，不能维持固定的形态而呈现多形性，对渗透压敏感，对抑制细胞壁合成的抗生素不敏感。革兰氏染色不易着色，故常用Giemsa染色法将其染成淡紫色。细胞膜中胆固醇含量较多，约占36%，对保持细胞膜的完整性具有一定作用。细胞膜含甾醇，比其他原核生物的膜更坚韧。凡能作用于胆固醇的物质（如二性霉素B、皂素等）均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。 支原体基因组为一环状以双链DNA，分子量小（仅有大肠杆菌的五分之一），合成与代谢很有限。 肺炎支原体的一端有一种特殊的末端结构（terminal

支原体

支原体：又称霉形体，为目前发现的最小的最简单的细胞，也是唯一一种没有细胞壁的原核细胞。支原体细胞中唯一可见的细胞器是核糖体。 【发现】 支原体是在1898年发现的，是一种简单的原核细胞。其大小介于细菌和病毒之间。结构也比较简单，多数成球形，没有细胞壁，只有三层结构的细胞膜，故具有较大的可变性。【性状】 形态与结构 支原体的大小为0.2～0.3um,可通过滤菌器，常给细胞培养工作带来污染的麻烦。无细胞壁，不能维持固定的形态而呈现多形性。细胞膜中胆固醇含量较多，约占36%，对保持细胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用于胆固醇的物质（如二性霉素B、皂素等）均可引起支原体膜的破坏而使支原体死亡。 支原体基因组为一环状以双链DNA，分子量小（仅有大肠杆菌的五分之一），合成与代谢很有限。 肺炎支原体的一端有一种特殊的末端结构（terminal structure），能使支原体粘附于呼吸道粘膜上皮细胞表面，与致病性有关。 ·培养特性 营养要求比一般细菌高，除基础营养物质外还需加入10～20%人或动物血清以提供支原体所需的胆固醇。最适pH7.8～8.0之间，低于7.0则死亡，但解脲脲原体最适pH6.0～6.5。 大多数兼性厌氧，有些菌株在初分离时加入5%CO2生长更好。 繁殖方式多样，主要为二分裂繁殖，还有断裂、分枝、出芽等方式，盖因缺乏细胞壁造成分裂时二个子细胞大小均所致。 ·生化反应与分型 一般能分解葡萄糖的支原体则不能利用精氨酸，能利用精氨酸的则不能分解葡萄糖，·抵抗力 支原体对热的抵抗力与细菌相似。对环境渗透压敏感，渗透压的突变可致细胞破裂。对重金属盐、石炭酸、来苏尔和一些表面活性剂较细菌敏感，对影响壁合成的抗生素如青霉素不敏感。·致病性与免疫性 支原体不侵入机体组织与血液，而是在呼吸道或泌尿生殖道上皮细胞粘附并定居后，通过不同机制引起细胞损伤，如获取细胞膜上的脂质与胆固醇造成膜的损伤，释放神经（外）毒素、磷酸酶及过氧化氢等。 巨噬细胞、lgG 及lgM 对支原体均有一定的杀伤作用。呼吸道粘膜产生的SlgA抗体已证明有阻止支原体吸附的作用。在儿童中，致敏淋巴细胞可增强机体对肺炎支原体的抵抗力。 【感染】 致病支原体中，肺炎支原体起肺炎，人型支原体、解脲支原体和生殖器支原体主要泌尿生殖道感染。支原体肺炎又称原发性非典型肺炎，支原体肺炎全年均可发病，以冬季多见，可有小流行。支原体脑炎是学龄前儿童及青年人常见的一种肺炎，支原体肺炎主要通过飞沫传播，潜伏期较长，可达2～3周。支原体肺炎虽然病程较长，肺部病变较重，炎症吸收较慢，但绝大多数预后都是良好的，合并症亦少机制起重要作用。MB抗原位于解脲支原体膜的表面，N端固定于膜上使C端重复区暴露于微生物周围的微环境。N端可以作为其分群分型的基础，C端最可能首先与宿主的防御系统相遇而引起主要的抗体反应，是理解它的发病机制和免疫机制的基础。MB抗原与疾病的关系，以及它在疾病中的作用还有待进一步探讨。 【培养】细胞培养（特别是传代细胞）被支原体污染是个世界性问题。国内外研究表明，

人型支原体感染是什么

人型支原体感染是什么 我们常说支原体衣原体，其实这是性/病的一类，在划分细点，支原体还可以分为解脲支原体、人型支原体、肺炎支原体，而衣原体中最多见的是沙眼原体。临床很多的患者被检查出有解脲支原体，而检查出有人型支原体的比较在少数。于是很多人对自身检查出人型支原体阳性不懂是什么意思？ 人型支原体感染，和解脲支原体一样是生殖道支原体感染的一种，主要可以通过血培养和生殖泌尿道分泌物培养而检测出，若是为阳性就是表明有感染，其中，分泌物的培养多准确点，以MH-DNA阳性表现有感染。若是有症状的患者或是无症状的备孕夫妻是需要治疗的，治疗上可服用妇炎丸治疗。 人型支原体既不是细菌也不是病毒，是介乎于细菌和病毒之间的病原体，是人类泌尿生殖道最常见的寄生菌，同时也是一种条件致病菌，就是在特定的环境下可以致病。这里的特定的环境下，可以是在人体抵抗力差的时候致病，也可以是在长期的抗生素大剂量使用下，导致体内的菌群失调下致病。 人型支原体感染是怎么得的？ 人型支原体主要通过性接触或分娩时经产道感染人体，前者多是在有过多人性/交史或者有过不洁性/交史的成人身上，后者多是有过人型支原体感染的孕妇顺产的婴儿身上。 人型支原体感染有什么危害的？ 人型支原体由于只对粘膜细胞敏感，尤其是对男性的尿道粘膜和女性的宫颈粘膜、尿道粘膜敏感，它不侵入机体组织与血液，而是在泌尿生殖道上皮细胞黏附并定居后，通过不同机制引起细胞损伤，引起粘膜发生炎性反应和炎性细胞浸润，从而导致一些类的生殖道疾病、泌尿道疾病，甚至是直接减低男女的生育能力。 女性有人型支原体感染，前期表现是支原体宫颈炎，此时经过妇炎丸治疗多是会取得满意的效果。若是此阶段没有重视或是治疗方法不对，支原体会继续感染，进入生殖道后可附着于细胞膜受体上，引起粘膜发生炎性反应和炎性细胞浸润，以巨噬细胞及中性粒细胞等炎性细胞为主，被激活的巨噬细胞产生大量的肿瘤坏死因子和干扰素、白介素等细胞因子，使宿主细胞结构和机能受损，造成子宫颈管内膜的慢性炎症，且易逆行传播至子宫内膜及输卵管粘膜使其受损。 人型支原体的治疗，若是经抗生素治疗效果不佳或者已经产生耐药性，建议转为中药的治疗同时，需要多注重个人生活卫生，保持良好的个人卫生!最好不好进行房事，以免交叉感染！

支原体感染怎么治疗

支原体感染怎么治疗? 妇科支原体感染是最为常见的性/传播疾病，潜伏期长，多为1-3周，且容易与其他生/殖泌/尿系统感染相混淆。很多人感染上支原体，反反复复治疗却总也不能治愈。妇科支原体感染怎么治疗？这成了感染了支原体患者最为头痛的事情。 敏感药物，支原体，是区别于病毒和细菌的第三类致病原，而它的抑制用青霉素和头孢类药物效果都不好，解脲支原体对红霉素敏感，人型支原体对林可霉素敏感。患者在选择药物前需做药敏试验来决定。随着社会的进步，更多人愿意选择中西医结合来治疗。 足量治疗，不管是用哪种方法治疗，西药也好，服用中药妇炎丸也好，都要有足够的疗程。一般药物治疗7-10天才能完全控制感染，杀灭病原。倘若因症状缓解而自行停药，而体内的致病原没有得到控制，药物停止后，支原体会再度来袭，再服用以前的消炎药可能会不起作用，这也是很多患者会觉得支原体感染难治的原因之一。 预防二次感染，任何感染性疾病都要预防二次感染的发生。这就要患者做好自身卫生工作。支原体、衣原体可通过性/接触，还可通过手、眼、毛巾、衣物、浴器、便具和游泳池等传播。与多人发生性/关系、男方有尿道炎、卫生习惯差等都容易感染。做好预防二次感染，要求同时治疗性/伴侣，对患者的用具进行彻底消毒，治疗期间禁止性/生活，以免影响治疗效果。 定期复查，支原体感染疾病是否治愈，需要通过复查来裁定。在治疗一段时间后，到正规医院做相关检查，没有发现支原体，才能停止治疗。定期复查也可以检验治疗的效果，从而调整药品的剂量或更换药品。也可以再次进行药敏试验，然后选择敏感的药物进行治疗。 以上就是我们对妇科支原体感染怎么治疗的一个简单介绍，只要患者遵循以上四个原则，及时治疗，很快能治愈疾病。

人型支原体感染有什么症状

人型支原体感染有什么症状 随着现在的精神文化生活日渐丰富，人们的思想观念与西方日益接轨，人型支原体这种主要依赖于性传播的疾病日渐猖獗，在成人男女中发病率特别高，特别是女性朋友，感染人型支原体的几率和感染的严重程度都比男性要高。那么人型支原体感染有什么症状，缘何爱盯上女性呢? 女性人型支原体感染症状 其实女性人型支原体感染是一种妇科炎症，主要通过性接触传播。一般来说，女性如果有支原体感染的情况，会有以下症状： 1、早期的女性人型支原体感染，患者会出现尿道口红、肿、痒、刺痛、白带增多的情况;少数患者无明显症状; 2、女性人型支原体感染一段时间后，可引起宫颈炎、子宫内膜炎或输卵管及卵巢炎，这时候，患者会出现畏寒、发热、恶心、呕吐、纳差、腹痛、腹泻及白带增多等情况;有些患者伴有尿急、尿痛及尿频。 3、如果女性患人型支原体感染时间较长，没有得到及时治疗，膝、腕、踝及肘等关节会有肿胀、疼痛及活动受限的情况，严重的话甚至可能发生脓毒性关节炎。 4、人型支原体感染严重者，或者免疫力异常低下的女性，还可伴发心肌炎、心内膜炎及淋菌性脑膜炎等。 5、女性人型支原体感染，若前庭大腺受侵，可出现外阴红肿、疼痛及破溃流脓等情况。 女性感染人型支原体后，症状还是比较明显的，一旦出现了早期感染症状，要及时去医院检查治疗，以免耽误治疗，引发严重的后果。那么女性为什么容易感染人型支原体，症状为何比男性重，其实这是由于女性的生理结构决定的，我们继续往下看。 人型支原体感染爱盯上女性的原因 1、女性尿道短，仅约3～5cm，直而宽，尿道括约肌薄弱，且尿道口大，细菌易上行侵入膀胱。而女性膀胱排空不如男性完全，残余尿量较多，尿液在膀胱内停留时间过长，有利于细菌滋生。 2、女性尿道口距阴道、肛门近，尿路上皮细胞对细菌粘附性及敏感性较男性为高，月经血也是细菌良好的培养基，如不注意外阴清洁则细菌容易滋生，受到外界的感染。

细胞支原体污染一般情况及预防措施

细胞支原体污染一般情况及预防措施 细胞株若受到细菌、真菌、支原体、或是特定病毒等之污染时，会严重的影响实验的结果。而细菌、真菌等之微生物污染时，较易自培养基等的外观变化察觉。但是若受到支原体之污染时，细胞之外观较无明显变化，但是其污染会造成细胞之生长速率缓慢、细胞产生病变之型态改变等等变化。 各国细胞库支原体污染的统计表，如下： 国家受支原体污染(%) 报告年度 USA－FDA 15 1993(past 30 years) USA－ATCC 15-20 1992 Japan－(IFO，RIKEN，JCR 80~30~22 1981 1987-19931998 Germany－DSM 36 1990-1994 Argentina 65 1987 Israel 32 1986-1993 China 95 1990 造成支原体高污染率的原因为： 1、支原体size 0.1~0.8 um，无细胞壁，可透过一般过滤膜（0.22-0.45 um） 2、支原体污染时，没有明显的肉眼或一般光学显微镜可观察到的特征变化 3、过去缺乏简单、快速且可靠的检测方式 4、细胞流通间缺乏品管，造成实验室间的相互污染 5、研究或操作人员忽略污染问题 支原体污染了来源： 1、已受污染的细胞 2、操作人员的疏失 3、已受污染的培养基、血清 4、操作环境不良、实验器具不洁等 由于支原体为人体口腔中之正常菌丛，实验室之操作人员的污染亦可能为污染源，须十分注意。而万一细胞已受支原体污染时，最佳的处理原则为将细胞高压灭菌后丢弃，以免污染其它洁净的细胞株。但是若是坚持要作去除支原体污染，有以下几种方法，只不过结果会与原始的细胞特性有差异。 去除支原体污染： 1、抗生素处理：BM-cyclin（Roche），MRA（mycoplasma removal agent，ICN），Ciprofloxcin（B ayer），Enrofloxacin（Bayer） 2、Nucleic acid metabolites：5-bromouracil，Hoechst 33258，bromodeoxyuridine 3、Anti-sera 预防与控制方面可从以下各点加强注意： 设备方面： 1、使用已作支原体测试ok之细胞株

细胞培养中常见的污染的处理

细胞培养中常见的污染情况总结如下: 常见的污染如下： 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液 一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养 液是否存在浑浊的现象！ 可在培养液中加相应的抗生素处理 2、霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的 消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期 清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。 其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。 预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就 要注意操作 3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体 感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。 用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用 8ug/ml的浓度。 4、黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。 5、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 6、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。

解脲支原体感染的原因和预防措施

解脲支原体感染的原因和预防措施 解脲支原体感染对人体产生了不良的影响，那么它是怎么一回事呢?以下是小编整理的关于这方面的相关内容，欢迎阅读和参考! 1、有不少人将“支原体、衣原体”和“性病、不洁性交”等同起来，这是极不科学的，也导致了患者夫妻相互猜疑、争吵甚至家庭破裂，这是不道德的。 2 、在对孕妇的研究中：解脲支原体在孕妇生殖道的寄居率可高达80%。你就应该知道，检查出支原体、衣原体寄居是很的事。 解脲支原体在孕妇生殖道的寄居率可高达80% 3、其实，如果医生为你进行全身的微生物培养，至少可以分离出数十种病原体的，但这并不代表你有数十种疾病。 4、国内外资料提示，不孕症夫妇的宫颈粘液、精液中解脲支原体培养阳性率高达50%以上，由此可见，解脲支原体感染与不孕症的发生可能有相关关系。 5、解脲支原体感染造成不良的另一个原因是流产，有人从流产的组织中检查出解脲支原体的阳性率高达40%以上。因此，对不明原因的流产，尤其是多次流产者，应考虑有解脲支原体感染的可能。 6、妇女妊娠后，由于孕激素的增加，抑制了细胞免疫，机体抵抗力下降，更易受到解脲支原体的感染，解脲支原体

(UU)在孕妇生殖道的寄居率可高达80%。 妇女妊娠后，由于孕激素的增加 7、解脲支原体引起的围产期感染已是现代产科面临的新问题。解脲支原体可以经胎盘垂直传播或由孕妇下生殖道感染上行扩散。 引起宫内感染，两者均可导致流产、早产、胎儿宫内发育迟缓、低体重儿、胎膜早破，甚至造成胎死宫内等一系列不良后果。 8、在分娩过程中，胎儿经产道娩出时，也易被感染。常见的有新生儿眼炎，其次为新生儿呼吸道感染，其他还有中耳炎、咽喉炎等。 一：治疗期间，性伴侣也要检查，发现问题也要治。 二：内衣内裤要单独洗，最好用开水煮五分钟以上(这个方法可防止多种病原体反复感染。 三：是增强体质，注意休息。而且白带出现异常也是需要治疗的。 危害男性生殖 解脲支原体是一类原核细胞微生物，体积介于细菌与病毒之间，对人类致病的支原体有三种，其中解脲支原体是人类泌尿生殖道的常见病原体，与许多泌尿生殖道感染症、围产期感染和不育症等都有关系，是性传播疾病的病原体之一。 解脲支原体在自然界中分布很广。除人以外，许多动物

细胞支原体污染的图片、危害、表现和怎么办

细胞支原体污染的图片、危害、表现和怎么办 （2016年10月16日） 一、细胞支原体污染的图片 我们首先来认识一下，细胞支原体污染与非污染的图片有什么区别。 如上图所示，左侧为未经支原体清除试剂处理的人Hela细胞,经DAPI染色后，除了细胞核为蓝色外，细胞质也有大量的絮状核酸物质被染成蓝色，这些处于细胞质的核酸物质就是支原体DNA，说明细胞支原体污染非常严重。 而右侧为经过本公司的支原体清除试剂2处理7天的Hela细胞，经DAPI 染色后，除了细胞核为蓝色外，细胞质没有任何絮状核酸物质被染成蓝色，说明支原体已经被清除。（版权声明：上图来自上海易色医疗科技有限公司网站。） 二、细胞支原体污染的危害和表现 细胞支原体污染的危害（1） 培养的细胞被支原体污染后，几乎可以改变细胞的所有功能，其可以导致细胞染色体的异常和损伤，改变细胞的代谢、生长、形状、附着，影响病毒的扩增能力和产量等等。例如，Miller CJ等人通过Microarray的研究表明：支原体污染严重改变被污染细胞的基因表达谱 [1, 2]，支原体污染后与无污染的同一细胞系相比，表达差异达2倍以上的基因就有200多个！！！（详细数据请见参考文献1）。Edward Burnett 和 Liz Penn认为：被支原体污染的细胞系已经不是原来的细胞系，而是另外一个细胞系了 [3]！此外，严重的支原体污染将彻底摧毁一株细胞系。

从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测。相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。 总之，在细胞系上进行生物医学方面的科学研究，如果不能保证所用的细胞系无支原体污染（Mycoplasma-free），则所得出的结论是极端不可靠甚至是完全错误的！可以想象：全球范围内，每年因支原体污染导致白白浪费的科研经费的数量是多么的巨大，有人估计至少高达数十亿美金！ 细胞支原体污染的危害（2） 1. 细胞生物学：支原体污染将直接导致最常用的MTT细胞毒性实验结果的 严重错误！ ●结果：由于支原体对MTT的额外还原作用，对阿霉素（Doxorubicin, 一种抗 肿瘤药物）的抗性，支原体污染和非污染的细胞二者相差15倍！（Due to an additional reduction of tetrazolium by mycoplasmas, contaminated cells appeared up to 15 fold resistant to doxorubicin.） ●参考文献：Falsification of tetrazolium dye (MTT) based cytotoxicity assay results due to mycoplasma contamination of cell cultures. Anticancer Res. 1999 Mar-Apr; 19(2A):1245-8. 2. 免疫学：支原体污染本身将可以直接诱导树突状细胞的成熟！这对于目前 国内外普遍开展的人体免疫细胞的肿瘤治疗将是灾难性的。 ●结果：（1）The capacity of these cell lines to induce DC maturation was due to their contamination by mycoplasma. Our results reveal that DC are able to sense mycoplasma infection and mature as they do in response to most viruses and bacteria.（2）Further investigation demonstrated that the changes in DC phenotype and functions were due to the presence of mycoplasmas in these two cell lines; eradication of mycoplasmas completely abolished the observed effects, and importantly, pure mycoplasmas in the absence of tumor cell supernatants were able to produce the same effects. ●参考文献：（1）Dendritic cell maturation is induced by mycoplasma infection but not by necrotic cells. Eur. J. Immunol. 2000.30: 705–708。（2）Mycoplasma-mediated alterations of in vitro generation and functions of human dendritic cells. J Biomed Sci. 2005;12(1):31-46.

人型支原体的预防措施

主持人：各位网民朋友，大家晚上好，欢迎登陆中国生殖健康网，今天我们请到的专家是北京中医药大学附属东方医院皮肤性病科主任李元文，今天的话题是衣原体和支原体感染的中医药治疗。首先请专家给我们做一下讲解，之后回答网民朋友的问题。 李元文：说起衣原体和支原体的感染，我们就想到了性病中最常见的非淋菌性的尿道炎，或者是非淋菌性的宫颈炎，这个病是非常常见的，有人认为发病率在目前的状态下可能是排在第一位的，也有人认为他是仅次于淋病，或者是梅毒，总之发病率非常高的一种性病。由支原体和衣原体感染引起的这种非淋菌性的尿道或者是宫颈炎，是一种危害非常大的性病，为什么这么说呢？一般的性病，危害性首先是局部可以出现炎症的损害，或者我们叫感染，表现就是泌尿或生殖道的疼痛，灼热、红肿，或者是脓性分泌物，这样的话引起泌尿生殖道的炎症反应，这是第一个危害。第二个危害，由衣原体和支原体感染引起的泌尿生殖道的炎症，往往逆行从前尿道向后尿道转化，比如说男性出现了衣原体、支原体感染的前列腺炎以及精囊炎，女性出现宫颈炎，慢性的疾病可能引起不孕不育，因为泌尿生殖道的炎症，特别是慢性的炎症，可能引起不孕不育。[20:03:44] 李元文：在支原体感染的患者中，由于支原体和精子的结合，导致了精子活动度的下降，以及精子质量明显的下降，或者是出现早产、流产的情况，所以大家感觉到，有衣原体和支原体感染引起的性病，它的危害性是比较大的。所以说这种病往往引起慢性的损害，很多患者感觉到轻微的自觉症状，使得治疗延误，比如说有的患者感染了支原体数年，但是他并不知道，他没有意识到，因为症状很轻微，比如说女性患者只感觉到我的白带稍微多一些，或者是腹部隐隐作痛，她认为是不是着凉，或者是月经前不规则的出血，是不是慢性的炎症，到妇科检查，往往有一些宫颈的糜烂，宫颈的炎症，或者是不典型增生，这时候导致的延误治疗，使得病情复杂化，所以说这个病的危害性和后果，我们经常也有认识不足的问题。所以我今天就这个话题讲一下治疗，在讲治疗前，我想重点让大家明白，什么样的症状要检查。[20:06:01] 李元文：性病绝大多数是通过性途径传播的，比如说不洁的性交，当然性传播的途径不是每个人都非常清楚，我给大家举个例子，我的一个病人，有支原体的感染多长时间不知道，怎么感染不知道，有的女性患者也可能有无辜性的感染，比如说夫妻俩，如果是丈夫有所谓的嫖娼史，但是没有把这种情况告诉妻子，妻子又出现了支原体、衣原体的感染，症状又不是很明显，所以很难给自己断定我就是感染了支原体，也不可能积极主动地寻求治疗。所以说，我们讲治疗前，我们给大家先讲一下什么样的情况应该检查支原体。对男性患者，如果出现尿道有不适的症状，包括了尿频、尿急、尿痛，以及尿道口的灼热、瘙痒，或者是憋不住尿，有这种感觉的时候，考虑是否有支原体的感染。 主持人：比如说这两天有这种症状，或者说一周有，之后就没有了，或者说这种症状是持续性的？ 李元文：由衣原体、支原体感染引起的尿道炎，往往是慢性的尿道炎，它绝对不会说两三天症状就消退了，往往是断断续续，比如说1周前有明显的症状，但是1周后可能减轻了，但是过一段时间又出现了，这时就一定要小心，这就符合慢性、复发性感染的疾病症状，男性就是尿频、尿急、尿痛，尿道的灼热、不适，会阴的酸胀、不适，这时就要考虑到是不是有衣原体、支原体的感染。如果发现自己有不舒服的症状，观察到尿道口在晨起的时候，尿道口有一些清晰的，或者是粘滞的分泌物的时候，一定要高度怀疑是衣原体、支原体的感染。

人型支原体阳性

目录 1简述 2特点 3流行病学 4传播途径 5感染原因 6感染误区 7临床表现 1. 7.1 相关疾病 2. 7.2 临床表现 8感染对策 9治疗 10预防措施 简述 人型支原体（M.humenis，MH），人型支原体是支原体的一种，它存在于泌尿系和生殖器中，可以引起泌尿系的感染和生殖器的炎症，如果您担心的话，可以来院做相关检查，明确是否有感染。 2特点 无细胞壁及前体，细胞器极少。DNA的G+C含量低，菌体内具有非常小的染色体组，其分子量约为45×108，菌体细胞大小约为0.2-0.3μm，很少超过1.0μm。由三层蛋白质和脂质组成的膜样结构以及一层类似毛发结构组成。支原体由二分裂繁殖，形态多样。支原体用普通染色法不易着色，用姬姆萨染色很浅，革兰染色为阴性。人型支原体可在鸡胚绒毛尿

囊膜上或细胞培养中生长。用培养基培养。营养要求比细菌高。由于它没有细胞壁，因此对影响细胞壁合成的抗生素，如青霉素等不敏感，但红霉素、四环素、卡那霉素、链霉素、氯霉素等作用于核蛋白体的抗生素，可抑制或影响支原体的蛋白质合成，特别是含PHMB杀菌成分的娇妍洁阴洗液有杀伤支原体作用，支原体对热抵抗力差，通常55℃经15分钟处理可使之灭活。石碳酸，来苏儿易将其杀死。在培养基中置入脲素并以硫酸锰作指示剂极易与其他支原体作出鉴别。 3流行病学 由于诊断条件所限和命名上的问题。国内尚无系统的人群调查资料，支原体可存在于健康携带者，而在性乱者、同性恋、妓女、淋病患者中检出率较高，我国报道7个地区健康人携带率为解脲支原体（UU）占10.59%，人型支原体（MH）占5.34%。性乱者UU的检出率为71.7%，MH为19.57%。调查表明，性伴数越多，性活跃指数越大，UU和MH 感染率越高。 4传播途径 成人主要通过性接触传播，新生儿则由母亲生殖道分娩时感染。成人男性的感染部位在尿道粘膜，女性感染部位在宫颈。新生儿主要引起结膜炎和肺炎。 5感染原因 支原体是非淋性尿道炎的一种特殊类型，是微生物。支原体感染临床表现为：“尿黄，尿道口微红，尿频，尿不尽，尿道痛，烧灼感”等症状。人型支原体，其特点是生长时需要类固醇物质。人型支原体菌落较大，直径在300～1000微米，典型的菌落具有“油煎蛋”的外观。 长期的或反复的衣原体和支原体感染会破坏子宫颈和输卵管内的内膜层，造成不孕。衣原体和支原体的感染大多数是通过性行为传染的，有杜绝互相传染而反复感染，就应该对性伴侣同时治疗。 有人做了调查，其中男性支原体感染率为33。7%，女性支原体感染率为74。4%，经统计学检验P<0。05，可认为支原体感染在性别上有显著性差异，女性高于男性。人型

支原体

支原体（mycoplasma）感染是一种性接触传播疾病。支原体可存在于健康携带者，而在性乱者、同性恋、妓女、淋病患者中检出率较高。性伴数越多，性活跃指数越大，感染率越高。 目录 1基本概述 2流行病学 3病原学 4检查诊断 1. 4.1 血常规 2. 4.2 x线检查 3. 4.3 直接涂片镜检 4. 4.4 快速抗原检测 5. 4.5 衣原体分离 6. 4.6 血清学检全 7. 4.7 PcR技术 5感染概率 概述 从人体分离的16种支原体中，5种对人有致病性，即肺炎支原体（M.pneumoniae）、解脲支原体（Ureaplasma urealyticum）、人型支原体（M.homins）、生殖支原体 （M.genitalium）及发酵支原体（M.fermentans）。脲解支原体属（ureaplasma）含脲解支原体等体、脲解支原体及人型支原体等对人有致病性。肺炎支原体是呼吸道感染、肺炎的主要原因。脲解支原体、人型支原体则引起泌尿生殖道感染（即支原体感染）。 支原体（mycoplasma）是细胞外生存的最小微生物。是一类缺 支原体模型 乏细胞壁的原核细胞型微生物，大小一般在0.3-0.5um之间，呈高度多形性，有球形、杆形、丝状、分枝状等多种形态。它不同于细胞，也不同于病毒。种类繁多、分布广泛、造成的危害相当大，涉及人、动物、植物及昆虫等多个领域，给人类健康和科研工作带来不利影响。

支原体是一种不同与细菌和真菌的另一类微小病原体，支原体属有80余种，与人类有关的支原体有肺炎支原体（MP），人型支原体（MH）、解脲支原体（UU）和生殖支原体（MG），前者引起肺炎，后三者引起泌尿生殖道感染。 支原体、衣原体感染人体后，首先侵入柱状上皮细胞并在细胞内生长繁殖，然后进入单核巨噬细胞系统的细胞内增殖。由于支原体、衣原体在细胞内繁殖，导致感染细胞死亡，同时尚能逃避宿主免疫防御功能，得到间歇性保护。支原体、衣原体的致病机理是抑制被感染细胞代谢，溶解破坏细胞并导致溶解酶释放，代谢产物的细胞毒作用，引起变态反应和自身免疫。 2流行病学 2000年我国研究者骆丹等用PCR法对广东、昆明、上海、南京、广州等地区患性传播性疾病（STD）的妇女进行了生殖器支原体（Mh）的检测，结果其总阳性检出率为16.05%，对照组（未患STD）仅为1.79%；广东、昆明地区的阳性检出率分别是21.69%和19.20%，显著高于上海、南京等地区。2001年西班牙对不孕患者的研究发现，47.3%的不孕妇女有感染史，而解脲支原体（Uu）和Mh的分离率分别为23.5%和408%。西非2000年对孕妇的横断面研究证实，妊娠期妇女生殖道的支原体检出率为73%，其中Uu22%、Mh20%。国外有学者报道在13—19岁患STD的青少年，支原体检出率为50%，显著高于成年对照组的检出率28%。总之，支原体的检出率和支原体类型、地区和人群有关。孕妇、性生活活跃的年轻人、STD 患者是支原体感染的高危人群。 3病原学 目前已知的支原体有80多种。从人体分离出的主要种类有：人型支原体（Mh）、解脲支原体（Uu）、灵长类支原体、生殖器支原体、穿透支原体、亲脂支原体、肺支原体等。电镜下支原体呈烧瓶状或梨形，菌体长0.6—0.7μm，靠近底部宽0.3—0.4μm，顶部末端宽0.06—0.08μm，末端向下延伸有约7nm的茸毛，没有细胞壁，对干燥敏感，其代谢产物的堆积不利于其生长繁殖。不同的支原体具有不完全相同的生物学特征。 4检查诊断

细胞支原体污染常用支原体检测方法和试剂盒介绍

细胞支原体污染常用支原体检测方法和试剂盒介绍 （2016年10月16日） 哺乳动物细胞的培养，支原体（Mycoplasma）污染是个世界性的问题。支原体污染几乎可以改变细胞的所有参数，导致实验结果的不准确、甚至完全错误。从2013年开始，《Nature》期刊已正式要求投稿的文章，如涉及细胞培养都要进行支原体检测。相信会有越来越多的高水平期刊将做出同样的支原体检测要求。 目前，细胞支原体污染常用的支原体检测方法主要有： 一、培养法 ●原理：将待检测样品先接种到支原体液体培养基中大量繁殖，然后再转 接种到支原体固体培养基中，培养一段时间后（大约一个月），如果固体 培养中，出现典型的支原体菌落，则说明待测样品有支原体污染。 ●优点：支原体培养法是相对可靠的支原体检测技术，也是我国药典认可 的方法之一。 ●缺点：（1）培养法非常耗时的，需要数周，不适合作为细胞培养液中支 原体污染的快速检测；（2）通过固体培养法无法检测污染细胞的一种最 常见的支原体，即猪鼻支原体（M.Hyorhinis）。这是因为猪鼻支原体无 法在支原体固体培养基上形成可见的菌落。而猪鼻支原体约占所有细胞 支原体污染的20-50%。 ●《培养法支原体检测试剂盒》》主要厂家：读者可以根据《中国药典》中 收录的培养法支原体检测方法进行操作。 二、荧光染色法 ●原理：将待检测样品接种到专门的指示细胞（如：Vero细胞）中，培 养一段时间后，用DNA荧光染料（如：Hoechst 33258，DAPI）进行染色， 如果除了细胞核被染色外，细胞质也有大量的絮状核酸物质被荧光染料 染色，那么这些处于细胞质的核酸物质就是支原体DNA。 ●优点：荧光染色法也是我国药典认可的方法之一。 ●缺点：（1）该方法灵敏度太低，当检测成阳性时，细胞经常已经严重污 染；（2）需要用到专门的指示细胞（如：Vero细胞），如果不用指示细