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葡萄籽中白藜芦醇提取和检测方法的研究现状

葡萄籽中白藜芦醇提取和检测方法的研究现状
葡萄籽中白藜芦醇提取和检测方法的研究现状

葡萄籽中白藜芦醇提取和检测方法的研究现状

黄德成 李 华 王 华

(西北农林科技大学葡萄酒学院,杨凌,712100)

摘 要 介绍了白藜芦醇的理化性质及其提取和检测方法的研究现状,并对这些方法的优缺点作出简要总结,为葡萄籽功能性食品中白藜芦醇的检测提供参考。关键词 葡萄籽,白藜芦醇,理化性质,提取,检测

第一作者:硕士(李华教授为通讯作者)。收稿日期:2006-08-14

白藜芦醇(resveratrol ),化学名称为3,5,4′2三羟

基21,22二苯乙烯(trans 23,5,4′2trihydroxy 2stilbene ),是一种含有茂类结构的多酚化合物;少量以游离态的形式广泛存在于葡萄、虎杖和花生等天然植物或果实当中,到目前为止至少己在21科、31属的72种植物中发现了白藜芦醇[1]。多年来人们对白藜芦醇研究结果表明,白藜芦醇具有抗癌、抗菌、抗氧化、降血脂和抗诱变等作用[2]。在日本,已将含白藜芦醇植物提取物作为食品添加剂使用;在我国,也有将白藜芦醇提取物制成降脂、美容、减肥和抗癌天然保健食品及胶囊[3]。但是目前国内外对白藜芦醇的检测还没有统一的方法标准[4],本文从白藜芦醇的理化性质、提取和检测方法3个方面作出简要综述,为葡萄籽功能性食品中白藜芦醇检测提供参考。

1 白藜芦醇的理化性质

白藜芦醇为无色针状结晶,分子式为C 14H 12O 3,相对分子质量228125,其结构式有顺、反2种,并各自可以与葡萄糖结合形成顺、反式白藜芦醇苷(其结构见图1),白藜芦醇常与葡萄糖结合以糖苷的形式存在;白藜芦醇熔点256~257℃,261℃升华,易溶于乙醚、甲醇、乙醇、丙醇等。在366nm 的紫外光照射下能产生荧光,并能和三氯化铁2铁氰化钾起显色反应[5]。其反式异构体的生物活性强于顺式异构体,在紫外光照射下反式白藜芦醇能够转化为其顺式异构体。纯白藜芦醇对光不稳定,在完全避光条件下,反式白藜芦醇可在乙醇中稳定数月,仅在高p H (≥10)下稳定性差一些;顺式白藜芦醇在避光条件下只有中性p H 下较稳定。反式与顺式白藜芦醇在紫外光(UV )210nm 处有强吸收,其第二吸收峰分别在305~330nm 和280~295nm 。在乙醇中,反式在308nm 的摩尔吸收系数为30000,顺式于288nm 的摩

尔吸收系数为12600[6]

R =H.trans resveratrol R =H.cis resveratrol R =G lu.trans piceid R =G lu.cis piceid

图1 白藜芦醇及其苷的化学结构

2 白藜芦醇的提取

目前,国内外大多采用葡萄皮、葡萄籽和虎杖等

植物为原料提取白藜芦醇。先将原料粉碎,采用有机溶剂(如甲醇、乙醇、乙酸乙酯等)进行提取,经过滤后将滤液浓缩,即得白藜芦醇粗品。有机溶剂提取方法主要分为回流法、浸渍法、索氏法、超声波法等。211 回流法

加热回流提取白藜芦醇的溶剂主要有甲醇、乙醇和乙酸乙酯,对提取液萃取分离的萃取剂有石油醚、氯仿、乙酸乙酯等。朱鸿津[7]利用加热回流提取虎杖中白藜芦醇的方法是称取虎杖粉末(过40目筛)50g ,用体积分数95%乙醇水浴回流提取3次,第1次用4倍质量乙醇回流提3h ,第2、3次分别用3倍质量乙醇回流提取各1h ,合并提取液,冷却,过滤,滤液减压浓缩,得到白藜芦醇粗品溶液。回流法有着提取率较高,成本低的优点;然而由于提取时间较长,导致白藜芦醇的氧化,使检测结果失真。212 浸渍法姚宝书[8]等人以乙酸乙酯为提取剂,考察浸提时间、浸提温度、浸提次数、料液比对提取效果的影响,确定的最适的浸提条件:提取时间40min ,温度

综述与专题评论

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60℃,提取次数2次,料液比(g∶mL)1∶30。浸渍法提取效果比回流法和超声波稍低,且提取时与空气接触时间长,也会导致白藜芦醇的氧化。

213 索氏法

于红霞[9]等人利用索氏法提取葡萄籽中白藜芦醇,并测定其含量,方法如下:称取适量经烘干的葡萄籽粉,置索氏提取器中,加无水乙醇回流6h,蒸干溶剂,用无水乙醇定容,测定前,将样品经流动相溶剂稀释,用高效液相色谱仪测定,以白藜芦醇标准作对照。索氏法提取效果差,提取时间长;进一步延长提取时间,可能会有好的得率,但同时也延长了生产周期,效率反而不高。

214 超声波法

李华[10]等人研究利用超声波辅助提取葡萄籽中总多酚。考察了超声波的频率、作用时间、温度、提取时间、料液比及提取次数5个单因素对总多酚提取率的影响,并在单因素的基础上进行正交实验得到多酚提取的最佳工艺条件:温度45℃,频率为40kHz,料液比(g∶mL)为1∶12,共提取5次,每次提取时间为55min。超声波提取法提取率高,提取时间短,且能够避免白藜芦醇在高温下的反应,已广泛应用于白藜芦醇的实验室提取。

刘树兴[11]等人以虎杖为样品考察了回流提取、热水浸提、索氏提取、超声波提取这4种方式的提取效果。所得结果见表1。

表1 不同提取方法比较表[12]

提取方法回流提取热水浸提索式提取超声波提取

提取条件60℃,6h60℃,7h75℃,10h60℃,30min

白藜芦醇得率/%3117218621183121

由表1明显可以看出,回流提取与超声波提取的效果较好,索氏提取的效果最差。

3 白藜芦醇的检测

目前,白藜芦醇的检测方法主要有高效液相色谱(HPLC)、毛细管电泳(CE)、薄层扫描(TLC)和气相色谱2质谱联用(GC2MS)等。

311 高效液相色谱法

高效液相色谱是在定性的基础上定量,以纯物质作为标准物,由已知量的被测物标样推算混合物中被测物的量[12]。它是中药制剂质量评价中常用的分析方法,也是目前企业及科研单位精确定量白藜芦醇的主要方法。王华[4]等人采用直接进样法将处理好的酒样通过C18柱,乙腈2水流动相(体积比=1∶9~9∶1)进行梯度洗脱,紫外检测器306nm下,外标法定性、定量地测出不同葡萄酒中的白藜芦醇的含量。张予林[13]等人采用HPLC法测定葡萄酒中的白藜芦醇,将酒样经超滤脱气后直接进样,色谱条件为:固定相为shim2park VP2ODS C18柱,流动相为乙腈-水(体积比40∶60)进行等压洗脱;流速:110mL/min,检测波长为306nm,进样量10μL。结果表明,白藜芦醇含量在0125~40mg/L的范围内呈良好的线性关系。高年法等人[14]采用SCR2101H柱,流动相为含40%体积乙腈的水溶液,流速为016mL/min,柱温为25℃,检测波长为306nm,进样量20μL,测出了葡萄酒中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量。高效液相色谱法具有简便快捷、选择性好、准确度高的特点;但因白藜芦醇的异构化会导致测定损失,样品需要量大,待测组分损失较为严重。

312 毛细管电泳法

毛细管电泳是利用不同离子所带电荷及性质的不同,迁移速率不同以达到分离目的,其高效、高速、微量和低消耗等优点在分析领域中占有重要的应用和发展前景。刘芳华[15]等人以毛细管电泳结合电化学检测(ED)测定了葡萄和葡萄酒中的白藜芦醇含量。在优化条件下,以300μm直径的碳圆盘电极为工作电极,工作电位为+0185V(vs1SCE),在100 mmol/L硼酸盐(p H=912)的运行缓冲液中,被测物浓度与峰电流在3个数量级范围内呈良好线性,检出限为1×10-7g/mL。曹佳[16]等人在80mmol/L硼酸盐(p H=8193)的运行缓冲液中,采用电动进样,进样电压为12kV,进样时间10s,分离电压15kV的条件下,测定葡萄皮中白藜芦醇和白藜芦醇苷的含量,检出限为1125×10-4g/L,线性动态范围分别是4188×10-4~0131g/L和5137×10-4~0134g/L。用毛细管电泳法测定白藜芦醇,所需设备和程序较简单,测定的定量分析结果与高效液相色谱和气2质联用一致[17],准确度高。

313 薄层扫描法

薄层扫描利用薄层色谱斑点(组分)发出的荧光强度或利用荧光薄层板上暗斑的荧光淬灭程度进行定量分析;在对二苯乙烯类化合物的含量测定研究中,TLC法是较早应用的分析方法。陈敏[18]等人以薄层扫描法同时测定葡萄酒中顺反白藜芦醇及其糖苷异构体的方法,样品用C18固相柱提取,以聚酰胺薄膜为固定相,苯2甲醇2甲酸(体积比为10∶5∶1)为展开剂进行分离,荧光扫描法定量,4种组分的线性关

食品与发酵工业FOOD AND FERMENTATION INDUSTRIES 114

 2006V ol.32No.10(Tot a l226)

系良好,相关系数为019972~019996,平均回收率为9711%~9815%,RSD为210%~312%。薄层荧光扫描法的检测灵敏度较低,与高效液相色谱相比,适用范围较窄。

314 气2质联用法

气2质联用法就是利用气相色谱对混合物的高效分离能力和质谱对纯物质的准确鉴定能力而开发的分析仪器法。气相色谱是质谱的样品处理器,质谱是气相色谱的检测器[1]。李攻科[19]等人在SPE2GC2 MS法测定葡萄酒中顺反式白藜芦醇中确定了GC2 MS操作条件:色谱条件,进样口温度280℃,柱温采用程序升温,初温100℃,保持2min后,以10℃/min 速度升至300℃,恒温10min,载气为纯氦气,流速为110mL/min;质谱条件,接口温度280℃,EI离子源,电子能量70eV,离子源温度230℃,四极杆温度106℃,电子倍增器电压1400V,质量扫描范围30~550。气2质联用法耗时少、样品用量少、待测组分损失少;但如果不衍生化而直接进样,色谱峰拖尾严重,且处理后的样品容易带水;样品衍生化后测定其含量,会更为简便、快速、损失小,适于大批量样品的测定。

4 小 结

检测白藜芦醇时,应根据各组分的理化性质,采取相应纯化和浓缩措施,减少干扰物质对检测白藜芦醇的影响,提高白藜芦醇的浓度,从而提高检测效果。

葡萄籽中白藜芦醇含量很少,见光易发生异构化,因此在测定过程中要求避光。不论采用哪种提取和检测方法,都应该根据白藜芦醇的性质及实验室的条件进行合理的预处理,选择最优化的提取和检测条件,从而取得较理想的检测结果。

参考文献

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4 王华,尉亚辉1葡萄酒中白藜芦醇的HPLC测定[J]1西北农业大学学报,1999,27(4):81~87

5 向 敏,匡晓东,杨 勇,等1白藜芦醇及其药理保健功能的研究[J]1中国食品添加剂,2004,(5):16~20

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7 朱鸿津1HPLC法测定虎杖中白藜芦醇的含量[J],中国野生植物资源,2005,01(20),49~50

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9 于红霞,徐贵发,赵秀兰,等1葡萄籽中的黄酮和白藜芦醇含量测定[J]1卫生研究,2000,29(3):189

10 李 华,沈 洁1超声波法从葡萄籽中提取多酚的研究[J]1酿酒科技,2005(5):89~91

11 刘树兴,程丽英,陈志亮,等1白藜芦醇提取工艺的研究[J]1食品与发酵工业,2004(12):45~147

12 朱明华1仪器分析[M]1北京:高等教育出版社,2003.64~80

13 张予林,王 华,魏冬梅,等1HPLC法直接进样测定葡萄酒中的白藜芦醇[J]1酿酒,2004(1):68~69

14 高年法,姜 丽,张 健,等1HPLC法测定葡萄酒中白藜芦醇的基础性研究[J]1酿酒,2005(1):79~81

15 刘芳华,彭友元,叶建农1毛细管电泳-电化学检测法测葡萄酒中的白藜芦醇[J]1分析测试学报,2005,24(3):125~127

16 曹 佳,陈冠华,杜钰珊,等1毛细管区带电泳法测定白藜芦醇与白藜芦醇苷[J]1河北大学学报,2006,26(1): 97~100

17 Prasongsidh B C,Skurray G R1Capillary electrophoesis anal2 ysis of tran-and cis-resveratrol,quercetin,catechin and gal2 lic acid in wine[J]1Food Chem,1998,62(3):355

18 陈 敏,舒友琴,何计国,等1薄层荧光扫描法测定葡萄酒中的白藜芦醇及其糖苷异构体[J]1分析化学,2005(5): 49~52

19 李攻科,李晓东,马 亭,等1SPE2G C2MS法测定葡萄酒中顺反式白藜芦醇[J]1中山大学学报,2000,39(1):63~67

Extraction and Determination of R esveratrol from G rape Seed

Huang Decheng Li Hua Wang Hua

(College of Enology,Northwest Sci2Tech University of Agriculture and Forestry,Y angling712100,China) ABSTRACT The physicochemical property,extraction and determination of resveratrol were introduced and the relative merits of these methods were briefly summarized.All of these provided references for the determination of resveratrol from grape seed.

K ey w ords grape seed,resveratrol,physicochemical property,extraction,determination

综述与专题评论

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白藜芦醇的提取工艺

白藜芦醇的提取工艺 专业:化学工程与技术学号:2010001220班级:生研1004班姓名:刘珊珊 摘要:从虎杖等植物中提取的白藜芦醇具有抗肿瘤、抗炎、抗菌、保护肝脏、保护心血管等功能,鉴于白藜芦醇的多种重要的应用价值,本文综述了白藜芦醇的提取方法,其中包括有机溶剂提取法、超声波及微波辅助萃取法等。通过对各种方法的综合比较,找出了最佳优化条件。 关键词:白藜芦醇;提取;正交实验 1.1白藜芦醇的理化性质 白藜芦醇分子式是C14H12O3,相对分子质量为228.25,化学名称为3,4,5’—三羟基—1,2—二苯乙烯,是一种蒽醌萜类化合物,熔点为256~257℃。它主要存在于葡萄、虎杖、花生、朝鲜槐等植物中,尤其在种皮中含量较高[1]。白藜芦醇易溶于甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、氯仿等有机溶剂中。其存在形式主要有四种,分别是顺式-白藜芦醇、反式-白藜芦醇、反式-白藜芦醇糖苷及顺式-白藜芦醇糖苷,但只有反式异构体具有生物活性[2]。 图1反式白藜芦醇的结构式 白藜芦醇是一种天然的抗氧化剂,可降低血液粘稠度,抑制血小板凝结和血管舒张,保持血液畅通,可预防癌症的发生及发展,具有抗动脉粥样硬化和冠心病,缺血性心脏病,高血脂的防治作用。抑制肿瘤的作用还具有雌激素样作用,可用于治疗乳腺癌等疾病。它既是肿瘤疾病的化学预防剂,也是对降低血小板聚集,预防、治疗动脉粥样硬化,心脑血管疾病的化学预防剂。20世纪90年代,我国科技工作者对白藜芦醇的研究不断深入,并揭示其药理作用:抑制血小板非正常凝

聚,预防心肌硬塞、脑栓塞,对缺氧心脏有保护作用,对烧伤或失血性休克引起的心输出量下降有效恢复,并能够扩张动脉血管及改善微循环。 1.2白藜芦醇的提取方法 1.2.1溶剂提取法 溶剂法是国内外最广泛应用的提取方法。常用溶剂主要有水、甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙醚等。溶剂法对设备要求简单,产品得率较高,但缺点是成本高,杂质含量也高。常见报道的溶剂法有三种:浸提法、渗漉法、回流法[3]。浸提法对温度要求不高,但费时较长,效率不高;渗漉法由于保持一定的浓度差,所以提取率较高,浸液杂质较少,但费时较长,溶剂用量大,操作麻烦;回流法较前两种方法效率高,速度快,但容易对受热敏感的原料造成破坏,因此根据不同的原料应采取不同的提取方法。 1.2.2碱性水或碱性稀醇提取法 白藜芦醇具有弱酸性,在碱性条件下酚羟基可以被转变成盐而使水溶性显著增加。碱提取法的原理是利用白藜芦醇这一性质,使其在一定条件下和某些无机碱、碱性盐形成酚盐而从体系里溶解出来;再通过调节溶液pH值的方法使之沉淀而得以分离,从而富集提取白藜芦醇。常用的碱性溶液为NaOH、KOH、Na2CO3、NaHCO3 。 1.2.3超声波提取法 超声技术对中药有效成分提取分离有许多优点,如提高提取率、缩短提取时间、需求温度低等。超声波提取是一种物理破碎过程,对媒质主要产生独特的机械振动作用和空化作用,用超声波辅助提取白藜芦醇,有利于保持较高的白藜芦醇的相对含量[4]。 超声波提取的工艺流程:样品处理→加入适量的提取试剂→热水浸提→超声波提取→离心分离样液→浓缩过滤→固相萃取,富集白藜芦醇→提取物样品[5]。 1.2.4酶解法 近年来文献对白藜芦醇的提取工艺报道较多,但白藜芦醇的提取率和提取物中白藜芦醇的含量较低,生产成本高。如果直接提取,白藜芦醇苷不易转化为白藜芦醇;其次白藜芦醇包裹在细胞壁内,若直接用有机溶剂提取,白藜芦醇难以溶出,酶解作用可以使细胞壁疏松、破裂,减小传质阻力,加速有效成分的释放,从而

葡萄籽中白藜芦醇提取和检测方法的研究现状

葡萄籽中白藜芦醇提取和检测方法的研究现状 黄德成 李 华 王 华 (西北农林科技大学葡萄酒学院,杨凌,712100) 摘 要 介绍了白藜芦醇的理化性质及其提取和检测方法的研究现状,并对这些方法的优缺点作出简要总结,为葡萄籽功能性食品中白藜芦醇的检测提供参考。关键词 葡萄籽,白藜芦醇,理化性质,提取,检测 第一作者:硕士(李华教授为通讯作者)。收稿日期:2006-08-14 白藜芦醇(resveratrol ),化学名称为3,5,4′2三羟 基21,22二苯乙烯(trans 23,5,4′2trihydroxy 2stilbene ),是一种含有茂类结构的多酚化合物;少量以游离态的形式广泛存在于葡萄、虎杖和花生等天然植物或果实当中,到目前为止至少己在21科、31属的72种植物中发现了白藜芦醇[1]。多年来人们对白藜芦醇研究结果表明,白藜芦醇具有抗癌、抗菌、抗氧化、降血脂和抗诱变等作用[2]。在日本,已将含白藜芦醇植物提取物作为食品添加剂使用;在我国,也有将白藜芦醇提取物制成降脂、美容、减肥和抗癌天然保健食品及胶囊[3]。但是目前国内外对白藜芦醇的检测还没有统一的方法标准[4],本文从白藜芦醇的理化性质、提取和检测方法3个方面作出简要综述,为葡萄籽功能性食品中白藜芦醇检测提供参考。 1 白藜芦醇的理化性质 白藜芦醇为无色针状结晶,分子式为C 14H 12O 3,相对分子质量228125,其结构式有顺、反2种,并各自可以与葡萄糖结合形成顺、反式白藜芦醇苷(其结构见图1),白藜芦醇常与葡萄糖结合以糖苷的形式存在;白藜芦醇熔点256~257℃,261℃升华,易溶于乙醚、甲醇、乙醇、丙醇等。在366nm 的紫外光照射下能产生荧光,并能和三氯化铁2铁氰化钾起显色反应[5]。其反式异构体的生物活性强于顺式异构体,在紫外光照射下反式白藜芦醇能够转化为其顺式异构体。纯白藜芦醇对光不稳定,在完全避光条件下,反式白藜芦醇可在乙醇中稳定数月,仅在高p H (≥10)下稳定性差一些;顺式白藜芦醇在避光条件下只有中性p H 下较稳定。反式与顺式白藜芦醇在紫外光(UV )210nm 处有强吸收,其第二吸收峰分别在305~330nm 和280~295nm 。在乙醇中,反式在308nm 的摩尔吸收系数为30000,顺式于288nm 的摩 尔吸收系数为12600[6] 。 R =H.trans resveratrol R =H.cis resveratrol R =G lu.trans piceid R =G lu.cis piceid 图1 白藜芦醇及其苷的化学结构 2 白藜芦醇的提取 目前,国内外大多采用葡萄皮、葡萄籽和虎杖等 植物为原料提取白藜芦醇。先将原料粉碎,采用有机溶剂(如甲醇、乙醇、乙酸乙酯等)进行提取,经过滤后将滤液浓缩,即得白藜芦醇粗品。有机溶剂提取方法主要分为回流法、浸渍法、索氏法、超声波法等。211 回流法 加热回流提取白藜芦醇的溶剂主要有甲醇、乙醇和乙酸乙酯,对提取液萃取分离的萃取剂有石油醚、氯仿、乙酸乙酯等。朱鸿津[7]利用加热回流提取虎杖中白藜芦醇的方法是称取虎杖粉末(过40目筛)50g ,用体积分数95%乙醇水浴回流提取3次,第1次用4倍质量乙醇回流提3h ,第2、3次分别用3倍质量乙醇回流提取各1h ,合并提取液,冷却,过滤,滤液减压浓缩,得到白藜芦醇粗品溶液。回流法有着提取率较高,成本低的优点;然而由于提取时间较长,导致白藜芦醇的氧化,使检测结果失真。212 浸渍法姚宝书[8]等人以乙酸乙酯为提取剂,考察浸提时间、浸提温度、浸提次数、料液比对提取效果的影响,确定的最适的浸提条件:提取时间40min ,温度 综述与专题评论 2006年第32卷第10期(总第226期) 113

【CN110066834A】一种白藜芦醇的提取方法【专利】

(19)中华人民共和国国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910293456.4 (22)申请日 2019.04.12 (71)申请人 长沙市惠瑞生物科技有限公司 地址 410000 湖南省长沙市芙蓉区隆平高 科技园雄天路1号湖南金丹科技创业 大厦B栋第5层505号房 (72)发明人 王中华  (74)专利代理机构 长沙中海宏图专利代理事务 所(普通合伙) 43224 代理人 罗霞 (51)Int.Cl. C12P 7/22(2006.01) C07C 37/68(2006.01) C07C 37/72(2006.01) C07C 39/21(2006.01) A01H 4/00(2006.01)A01G 22/25(2018.01)A01C 21/00(2006.01) (54)发明名称 一种白藜芦醇的提取方法 (57)摘要 本发明涉及一种白藜芦醇的提取方法,其包 括以下步骤:1)粉碎;2)煎煮;3)接种发酵;4)酶 解;5)萃取;6)脱色干燥。本发明选用高白藜芦醇 含量的虎杖为提取原料,从源头上提高白藜芦醇 的提取率;提取方法上,釆用微生物发酵+酶解 +超声波萃取相结合的技术,最大限度地保持白 藜芦醇的生物活性,并使天然白藜芦醇(98%)的 得率达到了1.8%以上,并且基本实现了三废零排 放, 有效保护了生态环境。权利要求书1页 说明书6页CN 110066834 A 2019.07.30 C N 110066834 A

权 利 要 求 书1/1页CN 110066834 A 1.一种白藜芦醇的提取方法,其特征在于包括以下步骤: 1)粉碎:选择高白藜芦醇含量的虎杖为原料,经破碎后其颗粒在0.5cm以下,再经超微粒化球磨成300目左右; 2)煎煮:加水煎煮60分钟,冷却到35℃-40℃; 3)接种发酵:接种复合菌种母液,混合均匀,密封,恒温发酵24-48h; 4)酶解:先加入5‰的仿人胃消化液,消化8-12h,加热至100℃约30-60min;再调ph值为6.5-8,然后加入5‰仿人肠消化液,消化8-12h,加热至100℃约30-60min; 5)萃取:粗滤,滤液通过超声波和加有机溶剂萃取; 6)脱色干燥:萃取液经膜分离后再上柱脫色,浓缩比重为1.2-1.25,啧雾干燥即得白藜芦醇粉。 2.根据权利要求1所述的白藜芦醇的提取方法,其特征在于所述的高白藜芦醇含量的虎杖为白藜芦醇含量在1%以上的虎杖原料。 3.根据权利要求1或2所述的白藜芦醇的提取方法,其特征在于所述的高白藜芦醇含量虎杖由以下方法培育: 1)虎杖繁育培植:选择白藜芦醇含量高的野生虎杖,进行植物培育,育种挑选出白藜芦醇含量在0.9%以上的虎杖种株进行扩大栽培; 2)虎杖栽培施肥:虎杖栽培管理期间,使用专用农肥,该专用农肥是以虎杖提取加工后的废渣60-70%,配合人工合成白藜芦醇生产废渣废水30-40%,接种微生物发酵后加工而成。 4.根据权利要求3所述的白藜芦醇的提取方法,其特征在于所述的植物培育为植物组织细胞培育,具体操作如下: 选择野生虎杖的根或茎切段,经无菌水清洗干净,用70%乙醇浸润消毒10-30秒,在无菌室放入准备好的组培瓶内,在25℃条件下培养7-15天; 其中培育采用的培养基由以下方法制得:1)培养基制备:愈伤组织诱导培养基即SM培养基,蔗糖含量为10g/L、2,4-D含量2mg/L;2)试验培养基:在SM培养基中加入吲哚乙酸、6-苄基氨基腺嘌呤和白藜芦醇3g/L;3)培养基灭菌:将配好的培养基加入琼脂加热溶解,调至PH5.6-5.8,无菌分装于100ml组培瓶中,每瓶约30ml,冷却后盖上组培瓶盖,在1kg/C㎡压力、121℃条件下灭菌20mim。 5.根据权利要求1所述的白藜芦醇的提取方法,其特征在于所述的复合菌种母液为乳酸杆菌、复合酵母菌和芽孢杆菌等量混合而成。 6.根据权利要求1所述的白藜芦醇的提取方法,其特征在于所述的仿人胃消化液为复合食用酸、胃蛋白酶和纤维素酶构成的混合酸,其中:所述复合食用酸由浓度为10%的食用盐酸、浓度为10%的食用醋酸及浓度为15%乳酸按体积1:1:1的比例构成,该复合食用酸的ph 值为1-2;所述胃蛋白酶活力1:400,按混合酸体积每1000ml加入3g;所述纤维素酶按混合酸体积每1000ml加入3g。 7.根据权利要求1或2或4或5或6所述的任一白藜芦醇的提取方法,其特征在于所述的仿人肠消化为胰蛋白酶和木瓜酶解等量接入。 2

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