BDAccuriC6流式细胞仪日常操作流程

BD AccuriC6流式细胞仪日常操作流程

一、开机流程：

1.检查所有液流桶中的液流水平。

2.开电脑，打开BD AccuriC6 CSampler软件。

3.开仪器开关，仪器开机大约3-5min。

4.软件中选择当次实验所用器皿（96孔板等）

5.软件中点击Backflush和Unclog各一次。

6.放置盛有足量过滤的双蒸水于A1孔中，软件中鼠标选择A1孔，Fluidics

选择Fast，点击Run，输入模板名称及保存路径。约2min，直到使

Events/second低于10。

7.停止上样。

二、质控

1.软件中新建四个直方图，分别为FL1/FL2/FL3/FL4的H信号图。

2.将8peak beads（黑瓶）用力摇匀后，滴一滴于A2孔中，加入200ul蒸

馏水后上样。

3.Fluidics选择Slow。若FL1和FL2内可显示8个峰，FL3内可显示5个

峰，则说明仪器状态正常。

4.将Peak1（白瓶）和Peak2-6（白瓶）用力摇匀后，各滴一滴A3孔中，

加入200ul蒸馏水后上样。

5.Fluidics选择Slow。若FL4可显示6个峰，则说明仪器状态正常。

三、样本检测

1.在Manual Collect界面图版中选择实验所需通道，修改通道名称使之与

实验所用染料名称匹配。

2.Run settings中选择Run unlimited，Threshold值适当调高（默认值为

80000），选择调整用样本所在孔的位置，用中速上样，收集足够细胞数

后停止（可看清目的细胞群）。

3.根据信号特征细调Threshold，用图形缩放器调整信号在图中的位置，并

跟军实验要求设置Gate。

4.设置好的实验可以另存为实验模板（Save template as），以后的实验可以

直接使用该模板。

5.如各项实验条件设置完毕，可切换至Auto Collect界面，选择检测样本

位置，设置上样速度、自动停止标准以及清洗、震荡次数等，在点击Apply

settings和Open run display后，点击Auto run，仪器可自动上样，直到所

有样本检测完成。点击Close run display可关闭自动上样界面。

6.检测完成的样本可以直接保存成Workspace，在其他电脑中可以用C6软

件打开进行分析；或者选择全部导出成为FCS数据格式，便于进行第三

方软件的数据分析。

7.软件在Analyse界面中可实现不同数据的直方图的叠加。

8.软件在Statistics界面中可实现所选数据的批量导出，粘贴到Excel中进

行数据统计。

9.软件在Batch界面中可实现所选数据和Plot图批量导出成为PPT。

四、关机流程：

1.上样板中任意三个孔中分别加入2ml 过滤的DI水、1ml 稀释的清洗液

（或经0.2um膜过滤的有效氯浓度为0.5-1.0的漂白水）和2ml 过滤的

DI水，Auto Collect界面中选择此三个位置，设置Fast跑样各3min自动

停止。

2.轻按一下仪器开关，仪器将自动进行cleaning fluid cycle，整个过程约

13min，结束后仪器自动切断电源，完成关机。

警告：

1、不要使用BD FACS rinse，clean或非Accuri的清洗液以及去污剂。

2、为了保护仪器不受潮湿天气的影响，务必保持至少一周一次的开机频率。

若无样本检测，可上样蒸馏水5-10min后关机。

7180生化仪操作流程

7180生化仪操作流程 一、开机前的检查与准备 1．水、电的检查与准备 2．清洗剂的检查与补充，试剂盘R2的45号位上放置足量的HITERGENT；样品盘2的W1号位及1D1、2D1、仪器前面内侧的反应杯清洗剂HIALKALI—D的补充3．仪器外表面的清洁与试剂针、样品针、清洗机构各喷嘴及各清洗槽的清洁 4．打印纸及废液的处理等 二、开机。先开主机后开中文电脑 三、开机后的检查与确认 1．光度计检查（仪器自动执行）：确定打印结果340nm值〈19000； 2．上次设定项目与测定结果的清除：Workplace →Data Review →Batch Delete →Yes 3．试剂量确认与试剂的补充：Reagent→检查Tests Available，将不足的试剂补足 四、校准 1．校准项目的选择与校准点的确认：Calibration →Status →Repeat Calibration →点击欲做校准的项目→Select →选择校准点的种类→ OK，依次登记其它的校准项目。点击Calibration Now →YES 2．校准品的准备：依Calibration →Installation中登记的位置放置校准品， 3．校准的实施与结果确认：点击Grobal Menu中的Start Cond. →直接点击Start即可五、质控 1．质控项目选择: Workplace →Test Selection →Control→选择对应的质控品→选择质控项目→OK，依此方法设定其它质控品（1，2设置好后每天质控工作从此步开始即可）2．质控品的放置 3．质控的实施与结果确认：点击Grobal Menu中的Start Cond. →在Start up Control 前的方框中点击打上“√”→Start。 六、常规样品的检查 1．样品登记：Workplace →Test Selection →Routine→输入Sample No.、Disk、Position →选择相应测定项目→OK，依此方法设定其它样品 2．样品准备：将样品正确放入样品盘 3．实施：Grobal Menu中的Start Cond.→输入Start Sample Sequence No.及其它选项→

【基础科学】BD FACSCALIBUR流式细胞仪操作手册(共27页)

BD FACSCalibur流式细胞仪 FACS101 Handbook 本课程介绍「表面抗原流式分析」有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用，请至本公司网站订阅FACSinformation电子报。 如需要本课程手册，欢迎至本公司网站下载。 如需要免疫荧光染色方法，请至本公司网站下载。 一、BD FACSCalibur基本结构 1.1仪器本体： 1. 电源开关：在BD FACSCalibur仪器右侧下方，先启动仪器本体，再打开计算机。 2. 光学系统：BD FACSCalibur 基本配有一支波长488 nm 的氩离子雷射 以BD FACSCalibur 基本型为例 ?FSC Diode 只收488 nm波长散射光 ?SSC PMT 只收488 nm波长散射光 ?FL1 PMT 荧光光谱峰值落在绿色范围（波长515-545 nm） ?FL2 PMT 荧光光谱峰值落在橙红色范围（波长564-606 nm） ?FL3 PMT 荧光光谱峰值落在深红色范围（波长 >650 nm）

3. 仪器面板： 仪器前方面板的右下方有三个流速控制键、及三个功能控制键。 流速控制： LO：样品流速：12 μl /min MED：样品流速：35 μl /min HI: 样品流速：60 μl /min 功能控制： ?RUN：此时上样管加压，使细胞悬液从进样针进入流动室。（正常显示绿色；黄色时表示仪器不正常，请检查是否失压。） ?STANDBY：无样品或暖机时之正常位置，此时鞘液停止流动，雷射功率自动降低。 ?PRIME：去除流动室中的气泡，流动室施以反向压力，将液流从流动室冲入样品管，持续一定时间后，以鞘液回注满流动室。PRIME 结束，仪器 恢复STANDBY状态。 4. 储液箱抽屉： 在主机左下方之储液箱抽屉。可向前拉开，内含鞘流液筒、废液筒、鞘液过滤器Sheath Filter，及空气滤网 Air filter。请注意气路减压阀VENT TOGGLE之位置。

流式细胞仪细胞分选的操作步骤

细胞分选的简要操作步骤 一、上样前的准备 FACSCalibu可以分选细胞进行培养或功能性研究，而这些研究需要清洁环境以保持分选后细胞不受污染继续培养，因此在样本制备，上机检测分选等过程中需严格按无菌技术操作。 1、应用无菌技术制备下列无菌工作液。 3L 70%乙醇（用无菌蒸馏水配制） 5L无菌蒸馏水 5L无菌PBS 2、在干净的鞘液筒中加入3L 70%乙醇。盖紧盖子，振摇鞘液筒，确保桶内壁被乙醇充分洗 涤。安好鞘液筒。 3、将过滤器短接，否则乙醇将破坏滤膜。。 4、用70%乙醇冲洗收集管接口处，并喷洒进样口处的空气。 5、在收集管接口处安装2支BD 50ml收集管（若不使用浓缩器）。 6、放上一支装有70 %乙醇的进样管。 7、设分选门（画一个空门使机器进行分选操作）。 9、从Acquire menu选择SortSetup。在Sort Gate菜单中选择步骤7设定的分选门。按液流控制 键RUN。 10、在Setup 方框中打叉，点击Acquisition Control 菜单中Acquire。。 11、跑乙醇直至2支收集管注满（每管注满需要9min ），点击Pause, Abort。 12、再重复上述步骤2次，共需要1h。 13、断开鞘液筒，在鞘液筒中加入500mL无菌蒸馏水，振摇鞘液筒，倒掉液体，反复操作直 至洗净桶内壁残余乙醇。 14、在鞘液筒中加入3L无菌蒸馏水，盖紧盖子。安好鞘液筒。 15、在收集管接口处安装2支新的收集管。 16、放上一支装有无菌蒸馏水的进样管。 17、点击Acquisition Control 菜单中Acquire。 18、跑无菌蒸馏水直至2支收集管注满（每管注满需要9min），点击Pause Abort。 19、再重复上述步骤2次，共需要1h。 20、断开鞘液筒，在鞘液筒中加入3L无菌PBS盖紧盖子。安好鞘液筒。 21、在收集管接口处安装2支新的收集管。 22、放上一支装有无菌PBS的进样管。 23、点击Acquisition Control 菜单中Acquire。 24、第一支收集管（最左）中收集15 mL PBS后取下，使PBS由左至右流入下一收集管。重复 操作至2个管都收集了15 mL PBS为止。点击Pause, Abort。 25、在收集管接口处安装2支新的收集管。若要分选动物细胞，则应用无菌技术，用无菌 PBS4 % BSA缓冲液过夜包被50mL锥型管，将包被好的锥型管安置于收集接口。 26、按下述分选步骤分选样本 二、分选细胞

迈瑞BS自动生化仪标准操作规程

BS-420全自动生化分析仪标准操作规程 一、BS-420全自动生化分析仪标准操作规程（开/关机程序） 1开机 1.1依次打开分析部主电源、分析部电源、操作部显示器电源、操作部主机电源、打 印机电源； 1.2开启操作部主机后会自动启动操作软件，在对话框中输入用户名与密码； 1.2.1若只关闭分析部电源保持试剂盘制冷，则要依次打开分析部电源、操作部显 示器电源、操作部主机电源、打印机电源； 1.2.2若使用仪器睡眠功能，则只需在对话框中输入用户名与密码，重新登陆；2分析前准备 2.1观察各压力表是否在绿色标线之内； 2.2检查蒸馏水、去离子水是否足够、废液管道有否堵塞，废液桶是否清空； 2.3检查高浓度清洗罐是否有足够高浓度清洗液； 2.4确认试剂盘的D1号位置已放置碱清洗液，D2号位置已放置酸清洗液，W号位 置已放置蒸馏水、去离子水。 2.5确认样本盘的U号位置已放置尿液稀释液（ISE专用稀释液），D1位置已放置ISE 清洗液（如选配有ISE模块），D2位置已放置酸清洗液，D3位置已放置碱清洗 液，W位置已放置足够的蒸馏水、去离子水。 2.6对于选配ISE模块的仪器，确认ISE试剂包已安装且试剂存量充足。 2.7检查样本注射器和试剂注射器是否漏液以及是否有气泡。 2.8检查样本针，确认无污物，无弯折。如有污物，清洗样本针。如有弯折，更换样 本针。 2.9检查试剂针，确认无污物，无弯折。如有污物，清洗样本针。如有弯折，更换样 本针。 2.10检查样本搅拌杆与试剂搅拌杆，确认搅拌杆表面无污物，杆无弯折。如有污物， 清洗搅拌杆。 3关机 3.1 行关机操作。依次关闭打印机电源，操作部主机电源，操作部显示器电源，分析 部电源，分析部主电源。此时需要取走试剂仓内试剂冰箱保存。 3.2如保留试剂制冷功能，则不需要关闭分析部主电源。 3.3 以新用户登陆。 3.4 行休眠状态。 3.5清理取走样本盘所有标本。 二、BS-420全自动生化分析仪标准操作规程分析参数设置程序 1 1.1

BD流式细胞仪原理与典型故障分析

Instrumentation and Equipments 仪器与设备, 2018, 6(3), 95-98 Published Online September 2018 in Hans. https://www.sodocs.net/doc/5e9122308.html,/journal/iae https://https://www.sodocs.net/doc/5e9122308.html,/10.12677/iae.2018.63015 BD Flow Cytometer Principle and Typical Malfunction Analysis Xiusheng Qiu*, Caihui Zeng, Liting Zhang The Third Affiliated Hospital of Sun Yat-sen University, Guangzhou Guangdong Received: Aug. 23rd, 2018; accepted: Sep. 11th, 2018; published: Sep. 18th, 2018 Abstract Flow cytometry is a device for automatic cell analysis and cell separation. In this paper, the prin-ciple of BD flow cytometry is introduced, and the common faults of flow cytometry are described. After analysis, the troubleshooting process is described in detail. Flow cytometry instrument equipment failure can be divided into liquid road faults, hardware failure, software failure, and all three cases. Only by accumulating in use can we fast judge the fault, and quickly solve the problem. Keywords Flow Cytometer, Principle, Malfunction Analysis BD流式细胞仪原理与典型故障分析 丘秀生*，曾彩辉，张丽婷 中山大学附属第三医院，广东广州 收稿日期：2018年8月23日；录用日期：2018年9月11日；发布日期：2018年9月18日 摘要 流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置，已经渐渐成为生物科学重要的分析仪器。本文介绍了BD流式细胞仪的原理，并对流式细胞仪常见的典型故障做了阐述，进行分析后，并对故障的排除过程进行了详细的阐述。流式细胞仪维中设备故障可分为液路故障、硬件故障、软件故障和三者兼具的情况，只有在使用过程中不断积累，才能快速判断故障，并迅速的排除。 *通讯作者。

DOTOP系列生化仪日常简易操作规程

DOTOP 日常简易操作规程 本操作规程的应用前题是：所有项目参数均已设定好并已校准好，仅用其指导日常工作。 一、 准备工作/维护 1． 检查有无纯净水，如果不够应立即添加 2． 检查打印机和打印纸，添加打印纸 3． 取走样本盘上其它剩余的样本 4． 5． 每日维护内容：（重点在于观察注射器、擦拭工作台面，检查样品针、搅拌杆，用无水酒精擦拭其上污物）。 6． 每周维护内容：（重点在于清洗纯净水桶、清洗试剂仓及试剂盘清底）。 7． 每月维护内容：（重点在于清洗反应槽、校准结果、更换反应杯等）。 二、 开机 1． 打开分析仪电源开关（按下后其指示灯应变亮）。 2． 打开显示器电源开关、打开电脑主机电源开关、打开打印机开关。 3． 进入操作系统后，双击桌面上的“生化分析仪器系统”图标，输入登录密码后进入开机流程。 三、 检查试剂 1． 用鼠标点击主操作界面左下部的按钮“试剂盘”，认真的逐一检查试剂位置，并注意试剂剩余量，做到试剂1与试剂2都要够当天的标本，如不足当天标本要进行试剂的添加，注意一些碱性试剂（Ca ，Mg ，Cre ，TP ，CO2）及一些稳定性较差的度剂每次最多倒够三天用的，严禁续加试剂！ 2． 核对完毕后，按“返回”，退到主界面。 四、 测试申请 1． 点击主界面左上部的快捷按钮“测试申请”。 2． 在测试申请界面上输入样本编号，选择（或默认）样本盘号（1-4）和样本位，选择项目或项目组合（点击1次表示选中，点击2次表示取消），点击下方的按钮“申 3． 4．

五、 开始测试 2 ． 再次检查试剂位置、确保试剂瓶盖全部打开 3． 点出主界面的快捷按钮“开始”，在弹出的界面上输入开始条件： （1）选择欲开始测试的试剂盘号（1-5）、样本盘号（1-4），默认匀为1。 （4）如果本批测试中包含有质控测试，点击“质控测试”栏，（点击1次表示选中，再次点击则取消）； （5）点击“普通测试”栏，（点击1次表示选中，再次点击则取消），在下面的输入框中输入欲开始的、普通测试起始编号，不输入则默认为开始所有的普通测试 （6）点击按钮“确定”即可。 六、 结果查看 1． 点击主操作界面的快捷按钮“结果查看”； 2． 点击界面左边欲查看的样本编号，则在界面右下部显示出该样本所有申请的项目， 选中某个已经完成的项目后，点击下部的快捷按钮“反应曲线”，则可以查看该项目的反应曲线和反应数据； 3． 欲输入某样本的相关病人信息，选中该编号样本后，在界面上部直接输入相关病人 信息，点击右上部的按钮“保存”即可； 4． 欲查看质控结果，点击界面左下部质控液名称，则可以查看该质控液所有申请的项 目，选中某个已经完成的项目后，点击下部的快捷按钮“反应曲线”，则可以查看该项目的反应曲线和反应数据。 5． 如果需要重做某个项目的测试，将结果栏的最右边的选项“重测否”选中（点击1 次表示选中，再次点击则取消），再点击按钮“启动选择重测”即可。 七、 结果打印 1． 如果打印单个样本，则选中该样本后，点击界面底部的选项“当前选择样本”，再 点击界面右下部的按钮“打印”即可； 2． 如果打印所有样本，则选中该样本后，点击界面底部的选项“所有样本”，再点击 界面右下部的按钮“打印”即可； 3． 如果打印多个样本，点击界面底部的选项“选择样本”，再输入欲打印样本的编号 或编号范围，再点击界面右下部的按钮“打印”即可； 八、 关机 1． 所有测试完成后，直接退出生化分析仪软件即可，退出操作软件后，再关闭分析仪

流式细胞仪检测细胞凋亡操作流程 Annexin V 检测细胞凋亡

A n n e x i n V检测细胞凋亡 实验原理 Annexin V 是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS) 由质膜内侧翻向外侧。Annexin V 与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由于在发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变，因此，与DNA 碎片检测比较，使用Annexin V 可以更早地检测到凋亡细胞。因为细胞坏死时也会发生磷脂酰丝氨酸外翻，所以Annexin V 常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI 或7-AAD)合并使用，来区分凋亡细胞(Annexin V+/核酸染料-) 与死亡细胞(Annexin V+/核酸染料+)。 实验用品 1. 一次性12?75mm Falcon试管。 2. PBS缓冲液：含0.1%NaN3，过滤后2-8?C保存。 3. 微量加样器和加样头。

4. Annexin V Binding Buffer缓冲液（Cat. No. 66121E）：浓度为 10?，使用时，用稀释为1?浓度的应用液。 5. Annexin V试剂与核酸染料： Annexin V 核酸染料 Annexin V-Biotin（Cat. No. 65872X）Streptavidin-FITC（Cat. No. 13024D） PI（Cat. No. 66211E）或7-AAD（Cat. No. 34321X） Annexin V-FITC（Cat. No. 65874X）PI（Cat. No. 66211E）Annexin V-PE（Cat. No. 65875X）7-AAD（Cat. No. 34321X） 6. FACS流式细胞仪：上样检测。 7. CELLQuest软件：获取和分析试验数据。 8. Annexin V检测对照管： Annexin V A-阴性对照B-补偿1 C-补偿2 Biotin SAv-FITC Annexin V-Biotin 和SAv-FITC PI 和SAv-FITC PE 未染色细胞Annexin V-PE 7-AAD FITC 未染色细胞Annexin V-FITC PI 操作步骤 1.取Falcon 试管，按标本顺序编好阴性对照管和标本管号。 2.使用冷的PBS缓冲液洗细胞两次，再用1?Binding Buffer缓冲液制成1?106 细胞/ml的悬液。 3.Falcon试管中加入100 μl细胞悬液。 4.按以下体积加入Annexin V与核酸染料： 1阴性对照-- 2单阳1 AV-FITC - 4样本AV-FITC PI 5.轻轻混匀，室温（20?C ~25?C）避光处放置15分钟。

全自动生化分析仪操作规程

BS-400全自动生化分析仪标准操作规程 一、BS-400全自动生化分析仪标准操作规程（开 /关机程序） 1 开机 1.1 依次打开分析部主电源、分析部电源、操作部显示器电源、操作部主机电源、打 印机电源； 1.2 开启操作部主机后会自动启动操作软件，在对话框中输入用户名与密码； 1.2.1若只关闭分析部电源保持试剂盘制冷，则要依次打开分析部电源、操作部显 示器电源、 操作部主机电源、打印机电源； 1.2.2若使用仪器睡眠功能，则只需在对话框中输入用户名与密码，重新登陆； 2 分析前准备 2.1 观察各压力表是否在绿色标线之内； 2.2 检查蒸馏水、去离子水是否足够、废液管道有否堵塞，废液桶是否清空； 2.3 检查高浓度清洗罐是否有足够高浓度清洗液； 2.4 确认试剂盘的 D1号位置已放置碱清洗液， D2号位置已放置酸清洗液， W 号位置 已放置蒸馏水、去离子水。 2.5 确认样本盘的 U 号位置已放置尿液稀释液 （ISE 专用稀释液），D1位置已放置ISE 清洗液（如选配有ISE 模块），D2位置已放置酸清洗液，D3位置已放置碱清洗液， W 位置 已放置足够的蒸馏水、去离子水。 2.6 对于选配ISE 模块的仪器，确认ISE 试剂包已安装且试剂存量充足。 2.7 检查样本注射器和试剂注射器是否漏液以及是否有气泡。 2.8 检查样本针，确认无污物，无弯折。如有污物，清洗样本针。如有弯折，更换样 本针。 2.9 检查试剂针，确认无污物，无弯折。如有污物，清洗样本针。如有弯折，更换样 本针。 2.10检查样本搅拌杆与试剂搅拌杆，确认搅拌杆表面无污物，杆无弯折。如有污物， 清洗搅拌杆。 3 关机 3.1 仪器处于“空闲”状态时，可以点击关机按提示选择“退出”或“紧急退出”进 行关机操作。依次关闭打印机电源，操作部主机电源，操作部显示器电源，分析 部电源，分析部主电源。此时需要取走试剂仓内试剂冰箱保存。 3.2 如保留试剂制冷功能，则不需要关闭分析部主电源。 3.3 如需切换不同操作者，仪器处于“空闲”状态时，可点击关机后选择注销后重新' 以新用户登陆。 3.4 如需进行休眠功能，仪器处于“空闲”状态时，可点击关机后选择休眠，仪器进 行休眠状态。 3.5 清理取走样本盘所有标本。 1 点击主界面下参数二项目设置按钮 1.1 |项目设置;| 、BS-400全自动生化分析仪标准操作规程 分析参数设置程序 ，进行必须参数设置;

流式细胞仪操作规程

FACSCalibur流式细胞仪操作规程 一、编号：YQ0606 二、标题：FACSCalibur流式细胞仪操作规程 三、关键词：流式细胞仪操作规程 四、目的：保证流式细胞仪的安全及有效操作 五、背景知识：流式细胞术（Flow CytoMeter，FCM）是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段，它可高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，与传统荧光镜检查相比，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术。 六、原理 待测细胞染色后制成单细胞悬液，用一定压力将待测样品压入流动室，不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出，鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度，这样鞘液就能够包绕着样品高速流动，组成一个圆形的流束，待测细胞在鞘液的包被下单行排列，依次通过检测区域。 流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整形后的光束，垂直照射在样品流上，被荧光染色的细胞在激光束的照射下，产生散射光和激发荧光。这两种信号同时被前向光电二极管和90°方向的光电倍增管接收。光散射信号在前向小角度进行检测，这种信号基本上反映了细胞体积的大小；荧光信号的接受方向与激光束垂直，经过一系列双色性反射镜和带通滤光片的分离，形成多个不同波长的荧光信号。 这些荧光信号的强度代表了所测细胞膜表面抗原的强度或其核内物质的浓度，经光电倍增管接收后可转换为电信号，再通过A/D转换器，将连续的电信号转换为可被计算机识别的数字信号。计算机把所测量到的各种信号进行计算机处理，将分析结果显示在计算机屏幕上，液可以打印出来，还可以数据文件的形式存储在硬盘上以备日后的查询或进一步分析。 检测数据的显示视测量参数的不同由多种形式可供选择。单参数数据以直方图的形式表达，其X轴为测量强度，Y轴为细胞数目。一般来说，流式细胞仪坐标轴的分辨率有512或1024通道数，这视其模数转换器的分辨率而定。对于双

BD FACSCalibur流式细胞仪操作手册

B D F A C S C a l i b u r流式细胞仪 FACS101Handbook 本课程介绍「表面抗原流式分析」有关之基础工作原理。如希望进一步了解流式细胞技术应用，请至本公司网站订阅FACSinformation电子报。 如需要本课程手册，欢迎至本公司网站下载。 如需要免疫荧光染色方法，请至本公司网站下载。 一、BDFACSCalibur基本结构 1.1仪器本体： 1.电源开关：在BDFACSCalibur仪器右侧下方，先启动仪器本体，再打开计算机。 2.光学系统：BDFACSCalibur基本配有一支波长488nm的氩离子雷射 以BDFACSCalibur基本型为例 ?FSCDiode只收488nm波长散射光 ?SSCPMT只收488nm波长散射光 ?FL1PMT荧光光谱峰值落在绿色范围（波长515-545nm） ?FL2PMT荧光光谱峰值落在橙红色范围（波长564-606nm） ?FL3PMT荧光光谱峰值落在深红色范围（波长>650nm） 3.仪器面板： 仪器前方面板的右下方有三个流速控制键、及三个功能控制键。 流速控制： LO：样品流速：12?l/min MED：样品流速：35?l/min HI:样品流速：60?l/min

功能控制： ?RUN：此时上样管加压，使细胞悬液从进样针进入流动室。（正常显示绿色；黄色时表示仪器不正常，请检查是否失压。） ?STANDBY：无样品或暖机时之正常位置，此时鞘液停止流动，雷射功率自动降低。 ?PRIME：去除流动室中的气泡，流动室施以反向压力，将液流从流动室冲入样品管，持续一定时间后，以鞘液回注满流动室。PRIME结束，仪器恢 复STANDBY状态。 4.储液箱抽屉： 在主机左下方之储液箱抽屉。可向前拉开，内含鞘流液筒、废液筒、鞘液过滤器SheathFilter，及空气滤网Airfilter。请注意气路减压阀VENTTOGGLE之位置。 ?鞘液筒：位于抽屉左侧，容积4升。装八分满鞘液筒，仪器可以运行大约3小时。筒上装有液面感应器，鞘液用完时，仪器软件上会有显示。鞘液筒盖 上有金属环扣，保证鞘液筒密闭。 ?废液筒：位于抽屉右侧，容积4升。筒上装有液面感应器，废液盛满时，仪器软件上会有显示。注意废液可能有潜在的生物传染性。 ?鞘液过滤器：0.22?m过滤器，去除鞘液中的杂质，保证进入流动室的鞘液是干净的。 ?气路减压阀：沿箭头方向移动阀门开关，鞘液筒减压，气压恢复正常。在鞘液筒添加鞘液时，需要减压。 ?空气过滤网：用于过滤冷却雷射的空气。 5.上样品区： 上样品区是样本管的上样位置。它包括三个部分，一个是进样针 SampleInjectionTube，将样本输入流动室，还有就是支撑架 TubeSupportArm、和液滴存留系统DropletContainmentSystem。 ?进样针：是一根不锈钢管，将细胞从样本针中吸入流动室。进样管外有一套管，是液滴保留系统的一部分。 ?支撑架：用于支撑样本管、并负责启动液滴存留系统。支撑架有三个位置：位于样本管之下的中位，样本管左侧或右侧。 液滴存留系统：系统由支撑架、真空帮浦和外套管组 成。当支撑架位于左侧或右侧位置时，真空帮浦就会启 动，将液体从外管吸入废液筒内。上样时，须注意将支 撑架位于中位，以避免过多样品被抽吸到废液筒内（当 支撑架位于中位，真空帮浦停止工作）。更换样品时， 让仪器保持RUN的模式，使得进样针可以反冲；切换到 STANDBY模式前，确保液路已冲洗彻底以免碎片沈积到 流动室中。

性控冻精使用技术手册

第一部分性控技术和性控冻精的概况 一、性控技术的概念和在畜牧业生产中的重要意义 性别控制：通过人为的干预使雌性动物繁殖出人们所期望的性别后代的一种繁殖新技术。奶牛XY精子分离技术是指将公牛的精液根据精子自身X染色体和Y染色体的DNA含量不同，把这两种类型的精子通过物理方法、计算机技术等进行有效的分离，将X精子分装冷冻后，用于牛的人工授精，使母牛怀孕的技术，母牛率可以达到90％以上；根据精子自身X、Y染色体中DNA含量的不同而有效分离的冻精就叫性控冻精。从经济效益来讲，该技术的应用将直接为奶农带来更多的获得良种母牛机会，增加了奶农的收入。 其重要意义在于： 1、产母犊效益提高良种母犊出生数量，使良种奶牛的繁育数量呈几何速度增长，加速牛群改良和更新，迅速达到良种化规模养殖，增加规模效益。 2、充分利用现有优质种公牛和高产奶牛的遗传潜力母牛一生能产6～7胎，平均可以留下3头母牛，采用性控冻精使高产奶牛一生可以产6～7头优质母牛。 3、提高生产性能加速低产奶牛的改良步伐，迅速扩大良种奶牛群，产奶性能得到快速提升，产奶效益不断增加。 以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛养殖的经济效益，同时与胚胎工程技术的结合可以使奶牛的品种改良一步到位。 二、性控冻精在我国应用的重要性和在国内的应用及效果 由于我国奶牛的品种质量较差，平均单产达不到 3500公斤/头，远低于世界平均单产5500公斤/头的水平，更达不到以色列、美国等奶业发达国家奶牛单产的一半。因此从我国实际情况分析，全国各地对良种牛的需求量非常大。奶牛是单胎动物，自然状态下，一头母牛一年只能繁殖一胎，终生平均也只能提供3头左右的母牛后代。由于奶牛自然繁殖率低，繁殖速度慢，年增长速度仅为15%，使得国内现有高产、良种奶牛扩繁速度受到很大限制；若从国外大批引进良种奶牛不但成本高，而且受到国外牛源和国家检疫的限制；因此，高产纯种奶牛的缺乏成为目前我国奶业快速发展的主要瓶颈。奶牛XY精子分离技术是目前最先进、最经济的良种繁育技术，X精子分离纯度已达到90%以上，分离后受胎率和常规冻精相当；这样意味着如果得到一头良种母牛犊，采用传统的冻精配种，则需要4剂精液，花费二年的时间；而采用性控冻精，只需要2剂，花费一年的时间。XY精子分离技术不论从繁育的成本还是从良种扩繁速度上考虑，都是畜牧业良种繁殖改良技术上的一场革命。 该产品已经在全国22个省市进行了广泛的推广和使用，以可信的质量和受胎率、母牛率在同类产品中最好（下表为部分抽样统计结果）得到了各级政府部门和养殖户（场）的称赞和认可。

迈瑞BS全自动生化分析仪操作程序

迈瑞BS-380全自动生化分析仪操作程序 一、开机前检查 检查各项电源，开关是否正常，插头是否插好； 检查水箱去离子水是否充足，未满应加满；废液桶是否已满，需及时处理； 检查加样针和搅拌针是否弯曲、有污物、挂液。 二、开机 先开生化仪机身左下侧的总开关→机身左面的运行开关→启动电脑→打开操作软件→输入相应的账号密码等待机器自检（观察机器各项操作是否正常），正常进入软件后，界面左上方显示“空闲”。 三、参数设置 1、试剂：点击软件界面左边一列主菜单中的“参数”，然后点击“试剂参数”选项，找到相应的各试剂的说明书，将项目名称、R1及R2以及样本用量等选项依次录入。试剂信息录入后，点击左边菜单中的“试剂”，点击“增加”，录入各试剂名称及在试剂盘的位置。 2、样品；“参数”→“样品”，依次录入样品的相关信息，如性别、年龄、类型等。 3、质控：“参数”→“质控参数”，按照实际需要，选择质控规则及设置其他相关参数。 4、定标：“参数”→“定标参数”，按照说明书录入定标液相关的参数。 四、放置试剂及样品 按照之前设置好的各试剂及样品的位置，将其一一对应，切不可放错。 五、操作申请 1、样本申请：“样本”→“样本申请”，选择需要测试的样本，在其前面点上钩，确定后，点击“保存”。

试剂申请、定标申请、质控申请，同上，只需要勾上需要操作的对象，而后“保存”即可。 2、确认各项信息完成后，点击右上方的“开始测试”，在弹出的对话框中再次核对信息，再开始测试。 六、结果分析及处理 1、实验数据出现异常，先看质控和定标的结果，看看质控结果是否在质控规则内，定标液的值是否理想； 2、查看样本的反应曲线，是否出现异常。如果觉得测试数据无明显异常，可以将数据点击“打印/传输”，打印出来。 七、关机 1、确认不需要再进行操作后，选择退出软件，而后关闭计算机，将样本盘中定标液、质控液样本取出，试剂放置冰箱冷藏（也可放置试剂盘中短期保存，不要关闭生化仪总开关）。 2、清空废液桶，擦拭工作台面，而后盖上盖子，依次关闭生化仪运行开关和总开关。

《细胞实验》13 流式细胞仪检测细胞凋亡操作流程

流式检测细胞凋亡 Annexin V 检测细胞凋亡 (2) 实验原理 (2) 实验用品 (2) 操作步骤 (3) Annexin V Blocking (5) 凋亡细胞的DNA 断裂片段分析 (7) 实验原理 (7) 实验用品 (8) 操作步骤 (9) BrdU Flow Kits 检测细胞增殖 (12) 实验原理 (12) BrdU Flow Kits 试剂盒 (12) 结果分析 (17) 流式仪器设置指南 (18) 线粒体膜电位变化检测细胞凋亡 (22) 实验原理 (22) 实验用品 (22) 样本制备 (23) 结果分析 (24) 注意事项 (24) Active Caspase-3 检测细胞凋亡 (26) 实验原理 (26) 实验步骤 (27) 结果分析 (28)

Annexin V 检测细胞凋亡 实验原理 Annexin V 是检测细胞凋亡的灵敏指标之一。它是一种磷脂结合蛋白，可以与早期凋亡细胞的胞膜结合，而细胞质膜的改变是细胞发生凋亡时最早的改变之一。在细胞发生凋亡时，膜磷脂酰丝氨酸(PS) 由质膜内侧翻向外侧。Annexin V 与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力，因而与细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸结合。由于在发生凋亡时，磷脂酰丝氨酸外翻的发生早于细胞核的改变，因此，与DNA 碎片检测比较，使用Annexin V 可以更早地检测到凋亡细胞。因为细胞坏死时也会发生磷脂酰丝氨酸外翻，所以Annexin V 常与鉴定细胞死活的核酸染料(如PI 或7-AAD)合并使用，来区分凋亡细胞(Annexin V+/核酸染料-) 与死亡细胞(Annexin V+/核酸染料+)。 实验用品 1. 一次性12×75mm Falcon试管。 2. PBS缓冲液：含0.1%NaN ，过滤后2-8°C保存。 3 3. 微量加样器和加样头。

Senlo系列生化仪日常简易操作规程

Senlo生化仪日常简易操作规程本操作规程的应用前题是：所有项目参数均已设定好并已校准好，仅用其指导日常工作。 一、准备工作/维护 1．检查有无纯净水，如果不够应立即添加 2．检查打印机和打印纸，添加打印纸 3．取走样本盘上其它剩余的样本 4．从冰箱中取出试剂盘，放入试剂仓，并打开全部试剂瓶盖。 5．每日维护内容：（重点在于观察注射器、擦拭工作台面，检查样品针、搅拌杆，用无水酒精擦拭其上污物）。 6．每周维护内容：（重点在于清洗纯净水桶、清洗试剂仓及试剂盘清底）。 7．每月维护内容：（重点在于清洗反应槽、校准结果、更换反应杯等）。 二、开机 1．打开分析仪电源开关（按下后其指示灯应变亮）。 2．打开显示器电源开关、打开电脑主机电源开关、打开打印机开关。 3．进入操作系统后，双击桌面上的“生化分析仪器系统”图标，输入登录密码后进入开机流程。 三、检查试剂 1．用鼠标点击主操作界面左下部的按钮“试剂盘”，认真的逐一检查试剂位置，并注意试剂剩余量，做到试剂1与试剂2都要够当天的标本，如不足当天标本要进行试 剂的添加，注意一些碱性试剂（Ca，Mg，Cre，TP，CO2）及一些稳定性较差的度 剂每次最多倒够三天用的，严禁续加试剂！ 2．核对完毕后，按“返回”，退到主界面。 四、测试申请 1．点击主界面左上部的快捷按钮“测试申请”。 2．在测试申请界面上输入样本编号，选择（或默认）样本盘号（1-4）和样本位，选择项目或项目组合（点击1次表示选中，点击2次表示取消），点击下方的按钮“申 请”。 注： 计算项目编在项目组合中，只有点击项目组合（如肝功能）后，系统才能 自动计算相应的计算项目（如球蛋白、A/G等）。 3．重复上一步操作，直到所有的样本申请完毕。申请完毕后返回主界面。 4．点击样本盘，弹出新界面上，点击样本盘上的样本，仔细核对每个样本所申请的项目，确保与检验单一致。 注： （1）如果要删除某个样本，在样本盘界面上点击该样本后，点击鼠标右 键，再点击“删除单个样本”即可。 （2）如果某个样本的申请误，或想增加、减少某个样本的测试项目，先 删除该样本，返回主界面，点击主界面左上部的快捷按钮“测试申 请”，在测试申请界面上输入删除样本的样本编号，重新申请即可。

流式细胞仪操作步骤(FACSCalibur)

一、开机程序： 1.检查鞘液桶和废液桶。确认鞘液充满状态（鞘液为鞘液桶体积的3/4位 置，可以连续工作3个小时左右）、盖紧黑盖、管道畅通、废液桶有足 够空间容纳本批标本排弃的废液。如果要添加鞘液，要先释放鞘液桶中 气压。 2.依次打开流式细胞仪FACSCalibur稳压器、主机开关、电脑开关，打印 机。 3.气压阀置于加压位置，待流式细胞仪处于STANDBY状态，做Prime，以 排除管路中气泡。 二、运行FACSComp软件、检查仪器状况 1.制备三色标准微球样本。一般情况向1ml鞘液（或过滤PBS）中加入 1滴质控小微球，也可以根据实际情况调节浓度。 2.机器预热5 min，打开FACSComp软件，选择保持路径。选择所需校 正内容，如果使用的微球是新一批产品要输入微球的批号。 3.在软件界面左侧Assay Selection选项中选择质控类型，即实验过 程中是否需要清洗样品。 4.上样品，微球溶液上样之前要充分混匀。功能键设置在“RUN”。 5.仪器自动检查，并做电压、补偿等设置。 6.FACSComp软件运行完毕，显示结果通过测试。 7.做Set up。 8.打印校正结果，退出FACSComp程序。 备注：在质控过程中，如果提示收集细胞速度慢可以提高细胞收集速度，但是在调节灵敏度（Sens）时，一定要用“Low”的状态上样，保证仪器灵敏度的准确。在使用仪器过程中要养成好的习惯，在上样品过程中，仪器保持在“Low”“Standby”状态。 三、样品分析软件：CellQuest Pro 软件，选择“联机”。 1.

（2）对实验样本进行命名； （3）对实验通道进行预设（FSC,SSC,FL1-FL4）。 备注：如果界面被关闭，重新调出步骤： 2.调出质控模板。 3.画图 选择画图工具（一般选择散点图），Inspect 界面会自动弹出，对几个常用选项进行设定：将散点图选中（用鼠标点击散点图边框才能够 选中图形），将 更改横纵坐 备注：第一个散点图横坐标为FSC，纵坐标为SSC 。 （1一般获取10000个细胞。 （2 （ 3）将所有补偿调为0 （4）将非 52 （5）FSC和SSC （6 4.上阴性对照 将阴性对照管混匀，上机，功能键设置在“RUN”,散点图出现细胞信 号，第一个图：让细胞信号出现在自己看上去舒服的区域；其他三个 散点图，要将细胞信号调整到阴性区域，即左下角区域。通过移动通

(完整版)ADVIA2400生化分析仪实用操作

ADVIA 2400型自动生化分析仪标准操作规程 §1、ADVIA 2400型自动生化分析仪开/关机程序 1、开机前检查 1．1检查并打开水处理器，检查水机工作状态。 1．2检查并清洁样品针（SPP）、稀释针（DPP）、试剂针（RPP1、2）、搅拌器（Dilution Mixer、Reagent MIXER1、2），冲洗塔。 1．3检查系统清洗液（Cuvette Wash Solution、Cuvette Conditioner、ISE Buffer）是否足量。检查灯泡冷却液液面是否在警戒线以上。检查稀释样本用的生理盐水是 否足量。 2、开机 2．1打开计算机主机电源，进入登录界面。 2．2将仪器开关转至 2．3在计算机登录界面，选择⊙NEW START 输入登陆密码（bayer），点击OK登录 2．4点击INITIALIZE(复位)使仪器恢复待机状态。 3、开机后准备工作 3．1 检查系统状态：点击Maint.→System Monitor 确认仪器各项系统参数正常。 3．2 开机清洗：在CTT 51﹟放置10ml 去离子水，在RTT1、2的50﹟放置去离子水。 点击WASH →选择⊙WASH 3，Cycles循环次数设为[1]次→Execute 3．3 试剂准备：点击Reagent→Reagent Inventory检查各测试项目剩余测试数，如需追加或更换试剂，按试剂装载程序执行。 4、关机 4．1 工作结束后的的每日维护检查。 4．2 清理取走所有的标本，清洁仪器表面。 4．3 关机清洗：CTT 49﹟，RTT1、2的49﹟放置10%的Cuvette Wash Solution CTT 15﹟10ml ISE detergent,CTT 16﹟10ml 纯水 CTT 50﹟,RTT1、2的50﹟放置去离子水 点击WASH→选择⊙WASH 2 ，Cycles 循环次数设为[2]次→Execute 4．4退出系统：点击System→ Exit→进入登出界面点击 Shutdown 计算机关闭。将仪器开关转至状态。 4．5关闭水处理机开关及电源。 5、自动开机运行 5．1 设定自动开机条件：点击Maint.→System Startup / Shutdown Setting →Auto start set→执行清洗程序，New Start/Re-Start等条件。→Enable auto start→ON 5．2 确认开机清洗所需清洗液足量

8. Attune NxT流式细胞仪标准操作规程

Attune NxT流式细胞仪标准操作规程 一、启动Attune NxT流式细胞仪 1、依次打开电脑主机电源、显示器及仪器电源。电脑用户名为INSTR-ADMIN， 密码为INSTR-ADMIN（全部大写）。 2、双击Attune软件图标，用户名为admin，密码为password1（全部小写）。 3、检查仪器内四个液体容器，清空“waste”桶中的废液，确认“Focusing fluid”、 “Wash solution”和“Shutdown solution”三个桶中的液体量是否满足实验要求（液面较高）。 4、点击startup，等待机器启动，整个过程大约需要3分钟。仪器指示灯显示为 绿色，软件左下角出现绿色对勾即为启动完成。 5、点击performance test，在2mL鞘液中滴入3滴performance tracking beads， 混匀后上机，点击Run Performance test。Performance test每天运行1次。这个过程大约耗时3分钟。 二、检测样品 1、点击new experiment新建一个实验，选择tube或plate实验，输入实验名称， 采用默认的Workspace和仪器设置参数，输入Tube Groups和Tube Samples 的数量，点击OK。 2、双击软件右侧Experiment下的Compensation，在弹出的对话框中选择相应的 荧光通道，点击OK。 3、双击UC后上样，点击Run，并调节电压，电压调好后点击Record，依次将 每个单染色的样本上样，并点击Record记录其荧光信号。 4、荧光补偿调好之后双击sample，上样后点击Run即可得到样本的荧光信号。 根据需要建立散点图并建门。 三、关闭Attune NxT流式细胞仪 1、确认”wash solution”和”shutdown solution”桶中液面高度至少在桶高的一半以 上，清空“waste”桶。 2、点击shutdown，选择Quick、Standard或Full，样品管内加入3ml 10% bleach 液，点击next启动关机程序，此时请勿关闭软件或者终止shutdown过程，关

生化分析仪的日常操作

生化分析仪的日常操作 一、生化分析仪的安装及使用前准备 （一）工作环境 生化分析仪的使用环境应能保证仪器的正常运行，不会使结果无效，或对所要求的测量质量产生不良影响。 1、仪器应安装在实验室内适当的位置，仪器周围有足够的空间，避免阳光直射，并有措施避免尘灰、烟雾、振动干扰仪器的正常运行。 2、电源电压波动小于10%，电源频率、功率应符合说明书要求，应使用不间断电源系统（UPS）。 3、应远离产生强烈电池场的设备。 4、环境温度、湿度应控制在仪器生产厂家允许的范围内，温度一般在18—32℃之间，湿度在40%—80%之间。 （二）实验用水 生化分析仪都需配套纯水设备供应大量的纯水用于冲洗仪器、稀释样本等，对水质要求较高。 1、纯水供水量达到20—100L/h或更大。 2、超纯水一般要求电阻率>10M?.cm，总有机碳<50ppb，使用更细的滤膜过滤除菌，是细菌水平<5cfu/ml。

3、测定化学元素含量时（如K、Na、Cl等），应严格控制水的质量。 （三）操作人员培训 1、操作人员应参加卫生部临床检验中心组织的专门培训并考取上岗证。 2、操作人员应掌握仪器的开光机、校准、参数设定、试剂准备、样本装置、日常维护等操作。 （四）操作程序文件 1、仪器简介，包括仪器性能特点、进样系统、试剂分配系统、检测系统、中央控制系统等 2、仪器工作原理，包括比色法、透射比浊法、离子选择电极法等 3、仪器工作环境要求，包括电源、温度、湿度、纯水水质、排水口、电磁及辐射等 4、授权操作人员 5、开机程序 6、室内质控程序 7、常规样本检测程序 8、样本检验结果处理程序 9、保养与关键程序