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试剂配制

试剂配制
试剂配制

1xHBS

Nacl 8.76g ddw 900ml 1M HEPES 20ml 用NaoH 调PH7.4 定容至1L 0.22um过滤,4度保存

1xPBS

Nacl 8.0g Kcl 0.2g Na2HPO4·7H2O 2.16g /Na2HPO4·12H2O 3.4785g KH2PO4 0.2g

ddw 定容至1L PH7.4 高压灭菌

RNase配制

RNase 0.1g 加33ul 3M NaAc 再加ddw至9ml,100°C 15min,冷却至室温,再加1M Tris-Hcl(PH7.4)1ml,分装后-20°C保存

细胞消化胰酶的配制(TE Trypsin EDTA )0.25% Trypsin 0.02% EDTA

100mlPBS 高压灭菌后,趁热加入0.02g EDTA,溶解后,调PH 7.4 ,放在4度冷却,再称取胰酶0.25g加入,用转子溶解混匀,0.22ul过滤

考马斯亮蓝染色液配制(500ml)

甲醇Methenol 225 ml 乙酸Acetic acid 50ml ddw 225ml R-250 1g ,棕色瓶子避光保存

考马斯亮蓝脱色液配制

甲醇Methenol 225 ml 乙酸Acetic acid 50ml ddw 225ml

5%BSA

5gAlbumin Bov(BSA)用TBST定容至100ml

20xTBST配制

TrisBase 48.4g Nacl 160g 20%Tween 20ml 浓Hcl 12M 23.75ml 调PH 7.6 ddw至1L

RIPA细胞裂解液

EGTA 1mM ,Na2EDTA 1mM,TrisHCL 25mM,Nacl 150mM,1% NP-40,1% Sodium deoxycholate(脱氧胆酸钠)ddw至1L

还可以加入2.5mM Sodium Pyrophosphate (焦磷酸钠), 1mM b-glycerophisphate (b磷酸甘油),1mM Na3VO4,1ug/ml Leuptin

1% NP-40 (去垢剂),0.1% SDS (去垢剂),2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入),2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入),1 mM PMSF (蛋白酶抑制剂) 1.5 mM EDTA ( 蛋白酶抑制剂),1mM NaVanadate (磷酸脂酶抑制剂)

PMSF(苯甲基磺酰氟)0.1mmol/L(100μg/ml)

Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂) 1 μmol/L(0.7μg/ml)

Leupeptin(亮抑制肽)0.5mg/ml

Aprotinin(抑蛋白酶肽)0.3μmol/L(1μg

/ml)

(注:PMSF 贮存液:100mmol/L即17.4mg/ml于异丙醇中; Aprotinin 贮存液:10mg/ml溶于0.01mol/LHEPES(pH8.0); Leupeptin 贮存液:10mg/ml溶于水中;

Pepstatin 贮存液 10mg/ml于甲醇液中

均于-20℃保存

细胞裂解液的主要目的:

1.利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;

2. 溶解蛋白;

3. 蛋白变性使其稳定;

4. 抑制蛋白酶活性

实验室常规试剂配制

实验室常用试剂、缓冲液的配制 1 MTris-HCI(pH7.4,7.6,8.0) 组份浓度1 MTris-HCI 配制量1 L 配制方法1.称量121.1 gTris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 按下表量加入浓盐酸调节所需要的pH值。 4. 将溶液定容至1 L。 5. 咼温咼压火菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化差异很大,温度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 1.5 MTris-HCl(pH8.8) 组份浓度1.5 MTris-HCl 配制量1 L 配制方法1.称量181.7 gTris置于1 L烧杯中。 2. 加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。 3. 用浓盐酸调节pH值至8.8。 4. 将溶液定容至1 L。 5. 高温高压火菌后,室温保存。 注意:应使溶液冷却至室温后再调定pH值,因为Tris溶液的pH值随温度的变化 差异很大,温 度每升高1 C,溶液的pH值大约降低0.03个单位。 10 X TEBuffer(pH7.4,7.6,8.0) 组份浓度100 mMTris-HCl,10 mMEDTA 配制量1 L 配制方法1.量取下列溶液,置于 1 L烧杯中。 2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水,均匀混合 3. 将溶液定容至1 L后,高温高压火菌。 4. 室温保存。 3 M醋酸钠(pH5.2) 组份浓度配制量配制方法PBSBuffer 组份浓度137 mMNaCl,2.73 M琴磁柚 IQO ml 1. N.1OAC - 3H.OH于100-200 m:疑杯中.加人對40讪的去两子水披扌半渚孵 2、加入冰酯敌讷帑pH值至4 3加去离子庆粕増液證容至20ml. mMKCl,10 mMNa2HPO4,2 mMKH2PO4 配制量1 L 配制方法1.称量下列试剂,置于 1 L烧杯中。 2. 向烧杯中加入约800ml的去离子水,充分搅拌溶解。

常用试剂的配制

1、2,4-二硝基苯肼溶液 I.在15mL浓硫酸中,溶解3克2,4-二硝基苯肼。另在70mL95%乙醇里加20mL 水,然后把硫酸苯肼倒入稀乙醇溶液中,搅动混合均匀即成橙红色溶液(若有沉淀应过滤)。 Ⅱ.将1.2克2,4一二硝基苯肼溶于50mL30%高氯酸中,配好后储于棕色瓶中,不易变质。 I法配制的试剂,2,4-二硝基苯肼浓度较大,反应时沉淀多便于观察。Ⅱ法配制的试剂由于高氯酸盐在水中溶解度很大,因此便于检验水中醛且较稳定,长期贮存不易变质。2、卢卡斯(Lucas)试剂 将34克无水氯化锌在蒸发皿中强热熔融,稍冷后放在干燥器中冷至室温。取出捣碎,溶于23mL浓盐酸中(比重1.187)。配制时须加以搅动,并把容器放在冰水浴中冷却,以防氯化氢逸出。此试剂—般是临用时配制。 3、托伦(Tollens)试剂 I.取0.5mL10%硝酸银溶液于试管里,滴加氨水,开始出现黑色沉淀,再继续滴加氨水,边滴边摇动试管,滴到沉淀刚好溶解为止,得澄清的硝酸银氨水溶液,即托伦试剂。 Ⅱ.取一支干净试管.加入1mL5%硝酸银,滴加5%氢氧化钠2滴,产生沉淀,然后滴加5%氨水,边摇边滴加,直到沉淀消失为止,此为托伦试剂。 无论I法或Ⅱ法,氨的量不宜多,否则合影响试剂的灵敏度。I法配制的Tollens试剂较Ⅱ法的碱性弱,在进行糖类实验时,用I法配制的试剂较好。 4、谢里瓦诺夫(Seliwanoff)试剂 将0.05g间苯二酚溶于50mL浓盐酸中,再用蒸馏水稀释至100mL。 5、希夫(Schiff)试剂 在100mL热水中溶解0.2g品红盐酸盐,放置冷却后,加入2g亚硫酸氢钠和2mL浓盐酸,再用蒸馏水稀释至200mL。 或先配制l0mL二氧化硫的饱和水溶液,冷却后加入0.2g品红盐酸盐,溶解后放置数小时使溶液变成无色或淡黄色,用蒸馏水稀释至200mL。 此外,也可将0.5g品红盐酸盐溶于l00mL热水中,冷却后用二氧化硫气体饱和至粉红色消失,加入0.5g活性炭,振荡过滤,再用蒸馏水稀释至500mL。 本试剂所用的品红是假洋红(Para-rosaniline或Para-Fuchsin),此物与洋红(Rosaniline或Fuchsin)不同。希夫试剂应密封贮存在暗冷处,倘若受热或见光,或露置空气中过久,试剂中的二氧化硫易失,结果又显桃红包。遇此情况,应再通入二氧化硫,使颜色消失后使用。但应指出,试剂中过量的二氧化硫愈少,反应就愈灵敏。 6、0.1%茚三酮溶液 将0.1g茚三酮溶于124.9mL95%乙醇中,用时新配。 7、饱和亚硫酸氢钠 先配制40%亚硫酸氢钠水溶液,然后在每100mL的40%亚硫酸氢钠水溶溶液中,加不含醛的无水乙醇25mL,溶液呈透明清亮状。 由于亚硫酸氢钠久置后易失去二氧化硫而变质,所以上述溶液也可按下法配制:将研细的碳酸钠晶体(Na2CO3?10H2O)与水混合,水的用量使粉末上只覆盖一薄层水为宜,然后在混合物中通入二氧化硫气体,至碳酸钠近乎完全溶解,或将二氧化硫通入1份碳酸钠与3份水的混合物中,至碳酸钠全部溶解力止,配制好后密封放置,但不可放置太久,最好是用时新配。 8、饱和溴水 溶解15克溴化钾于100mL水中,加入10g溴,振荡即成。 9.莫利许(Molish)试剂

试剂配制方法

试剂的配制 1、酚酞指示剂:酚酞1g+无水乙醇100ml混合液0.5+50mL 2、淀粉指示剂:淀粉0.5g + 100ml水(加热100℃保持2-3分钟),冷却至室温备用。 随配随用,6天失效。 3、冰乙酸氯仿(三氯甲烷)混合液:冰乙酸60ml + 三氯甲烷40ml 4、树脂粉二硫化碳饱和溶液:纯净的树脂粉2-3g + 二硫化碳100ml,摇晃几分钟使 其成为饱和溶液,再用滤纸过滤后即可。 5、碘化钾KI饱和溶液:碘化钾10g + 蒸馏水5ml 6、乙醇乙醚混合液:无水乙醇100ml + 无水乙醚100ml + 5滴1%的酚酞指示剂 7、KOH-甲醇溶液配制:K(OH)11.2 g + 甲醇100ml 8、KOH配制:KOH称取14g + 2000ml蒸馏水,放置一个月标定 KOH标准溶液的标定及浓度: 清洗2个瓶子→称重(取平均值误差小于0.00005g)→邻苯二甲酸氢钾0.6g(烘105℃90分钟)→加蒸馏水80ml完全溶解→加2-3滴1%酚酞指示剂. 用上面配制好的邻苯二甲酸氢钾溶液来滴定待标定的KOH标准溶液, 滴加到变为微红色(30秒不变色)即可。记下滴定体积V。 邻苯二甲酸氢钾重量M KOH标准溶液的浓度= 滴定体积V ×邻苯二甲酸氢钾分子量(0.2042) 9、硫代硫酸钠溶液:硫代硫酸钠26g + 碳酸钠0.2g(或硼砂3.8g)+ 蒸馏水 至1000ml ,放置一周标定。 标定:称取0.15g在120℃干燥的重铬酸钾,置于500ml碘量的瓶中,加入50ml蒸馏水使之溶解,加入2g碘化钾使之溶解,再加入(1+8)比例的硫酸溶液20ml(10ml的浓硫酸+80ml 蒸馏水),密塞摇匀。放置阴暗处10分钟后加250ml蒸馏水。 用硫代硫酸钠的溶液滴至浅黄色, 再加入0.5%的淀粉指示剂3ml,继续滴定滴至蓝色消失而显亮绿色。 重铬酸钾M 硫代硫酸钠溶液的浓度= 滴定体积V ×重铬酸钾分子量(0.04903) 4. 硫代硫酸钠滴定液(0.1mol/L)

高中生物实验试剂配制方法

高中生物实验试剂配制方法 1、斐林试剂 试剂甲:将34.5克结晶硫酸铜溶于500亳升水中,加0.5亳升硫酸,混合均匀。 试剂乙:将125克氢氧化钠和137克酒石酸钾钠溶于500毫升蒸馏水中。(贮于带橡皮塞的瓶中) ※临用时试剂甲与试剂乙等量混合 ※斐林试剂是由氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液和硫酸铜的质量分数为0.05 g/mL的溶液配制而成的。它与可溶性的还原性糖(葡萄糖、果糖和麦芽糖)在加热的条件下,能够生成砖红色的氧化亚铜沉淀 因此,斐林试剂常用于检测可溶性的还原性糖的存在与否。2、双缩脲试剂 取10 g氢氧化钠放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.1 g/mL的氢氧化钠溶液,瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂A。 取1 g硫酸铜放入量筒中,加水至100 mL,待充分溶解后倒入试剂瓶中,配成质量浓度为0.01 g/mL的硫酸铜溶液(蓝色)。瓶口塞上胶塞,贴上标签,写上试剂B。

※双缩脲试剂使用时,先向蛋白质溶液中加入NaOH溶液(2mL),振荡摇匀,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,与蛋白质发生紫色反应,因此,双缩脲试剂常用于检测蛋白质的存在与否 注意∶林试剂和双缩脲试剂都由NaOH溶液和CuSO4溶液组成,但二者有如下三点不同: (1)溶液浓度不同 斐林试剂中NaOH溶液称为斐林试剂甲,其浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液称为斐林试剂乙,其浓度为0.05g/ml;双缩脲试剂中NaOH溶液(双缩脲试剂A)的浓度为0.1g/ml,CuSO4溶液(双缩脲试剂B)的浓度为0.01g/ml。 (2)使用原理不同 斐林试剂是新配制的Cu(OH)2溶液,它在加热条件下与醛基反应,被还原成砖红色的Cu2O沉淀,可用于鉴定可溶性还原糖的存在。用斐林试剂鉴定可溶性还原糖时,溶液的颜色变化过程为:浅蓝色→棕色→砖红色(沉淀)。 鉴定生物组织中是否含有蛋白质时,常用双缩脲法,使用的是双缩脲试剂,发生的是双缩脲反应。双缩脲反应实质是在碱性环境下的Cu2+与双缩脲试剂发生的紫色反应。而蛋白质分子中含有很多与双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)结构相似的肽键,所以蛋白质都能与双缩脲试剂发生紫色反应,可以用双缩脲试剂鉴定蛋白质的存在。

常用试剂的配制.

常用试剂的配制 1.无Ca2+、Mg2+Hanks液 NaCl 4.5g KCl 0.2g NaHCO 3 0.175g Na 2HPO 4 ·12H 2 O 0.076g KH 2PO 4 0.03g 葡萄糖 0.5g 0.4%酚红 2.5ml 将上述成分依次溶解或加入到双蒸水中, 最后补加双蒸水至500ml, 以5.6%NaHCO 3调整 pH 值至7.4,4℃冰箱保存备用。 2.甲基红试剂 (1)成份 甲基红 0.1g 蒸馏水 200ml 95%乙醇 300ml (2)用途:测定甲基红反应。 3.Hanks液(原液) 原液甲: NaCl 160g KCl 8g MgSO 4·7H 2 O 2g MgCl 2·6H 2 O 2g 上述试剂加入800ml双蒸水。溶解。 CaCl 2 2.8g溶于100ml双蒸水 上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。 原液乙: Na 2NPO 4 ·12H 2 O 3.04g KH 2PO 4 1.2g 葡萄糖 20g 加入800ml双蒸水,溶解。 0.4%酚红溶液100ml 上述二液混合,加双蒸水至1000ml,再加2ml氯仿防腐,4℃保存。 使用时甲,乙原液按下列比例配成Hanks 液使用液:原液甲1份、原液乙1份、双蒸水18份滤过,8磅20min灭菌,放4℃冰箱保存,使用前用NaHCO 3 调整PH值。 4.0.4%酚红溶液 称取0.4g酚红置研钵中研碎,逐渐加入0.lmol/LNaOH并不断研磨,直到所有的颗粒

几乎完全解,加入0.lmol/LNaOHl0ml,然后倒入容量瓶中,并加蒸馏水至l00ml,棕色瓶保存备用。 5.pH7.2 Tris-NH 4 CI溶液(红细胞崩解液) Tris (三羟甲基氨基甲烷) 1.03g NH 4 Cl(氯化氨) 3.735g 加双蒸水至500ml,用浓HCl调pH=7.2,10磅15min灭菌后放4℃保存。 6.0.05moI/L pH8.6 巴比妥缓冲液 巴比妥 1.84g 加蒸馏水 200ml 加热溶解 巴比妥纳 10.3g 叠氮纳 0.2g 加蒸馏水溶解 , 并补加到 1000ml 。 7.磷酸盐缓冲液(PB) A 液:为 0.2mol/L 磷酸二氢钠水溶液 ,NaH 2PO 4 ·H 2 O 27.6g, 溶于蒸馏水中, 最 后补加蒸馏水至 1000ml 。 B 液:为 0.2mol/L 磷酸氢二钠水溶液 ,Na 2HPO 4 .7H 2 O 3.6g(或 Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g, 或Na 2HPO 4 · 2H 2 O 35.6g ), 加蒸馏水溶解,最后加水至 1000ml。若再加 蒸馏水至200ml则成为0.1mol/LPB。 8.0.1mol/LPH8.4 硼酸缓冲液(BBS) 硼酸钠(Na 2B 4 O 7 .10H 2 O) 0.46g 硼酸(H 2BO 3 ) 0.51g 加蒸馏水至100ml 溶解。9.PH7.4 0.01mol/L 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法一: 0.2mol/L Na 2HPO 4 ( Na 2 HPO 4 ·12H 2 O 71.6g加蒸馏水至1000ml) 0.2mol/L NaH 2PO 4 (NaH 2 PO 4 ·2H 2 O 35.6g加蒸馏水至1000ml) 取0.2mol/L Na 2HPO 4 81.0ml 加0.2mol/L NaH 2 PO 4 19ml,再加1900mlH 2 O和 17gNaCl即为PH7.4 0.01mol/L PBS。 PH7.4 0.01mol/L PBS再加入0.05%Tween-20即为ELISA试验的洗涤液。 配制方法二: 甲液(0.1mol/LKH 2PO 4 溶液):KH 2 PO 4 13.608g,加蒸馏水至1000ml。 乙液(0.1mol/L Na 2HPO 4 溶液):Na 2 HPO 4 35.814g,加蒸馏水至1000ml。 取甲液19ml,乙液81ml NaCl8.5g、Tween-20 0.5ml混合后加蒸馏水至1000ml即可。

实验室常用溶液及试剂配制(重新排版)

实验室常用溶液及试剂配制 一、实验室常用溶液、试剂的配制-------------------------------------------------------1 表一普通酸碱溶液的配制 表二常用酸碱指示剂配制 表三混合酸碱指示剂配制 表四容量分析基准物质的干燥 表五缓冲溶液的配制 1、氯化钾-盐酸缓冲溶液 2、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 3、邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钾缓冲溶液 4、乙酸-乙酸钠缓冲溶液 5、磷酸二氢钾-氢氧化钠缓冲溶液 6、硼砂-氢氧化钠缓冲溶液 7、氨水-氯化铵缓冲溶液 8、常用缓冲溶液的配制 二、实验室常用标准溶液的配制及其标定-----------------------------------------------4 1、硝酸银(C AgNO3=0.1mol/L)标准溶液的配制 2、碘(C I2=0.1mol/L)标准溶液的配制 3、硫代硫酸钠(C Na2S2O3=0.1mol/L)标准溶液的配制 4、高氯酸(C HClO4=0.1mol/L)标准溶液的配制 5、盐酸(C HCl=0.1mol/L)标准溶液的配制 6、乙二胺四乙酸二钠(C EDTA =0.1mol/L)标准溶液的配制 7、高锰酸钾(C K2MnO4=0.1mol/L)标准溶液的配制 8、氢氧化钠(C NaOH=1mol/L)标准溶液的配制 三、常见物质的实验室试验方法 ----------------------------------------------------------6 1、柠檬酸(C6H8O7·H2O) 2、钙含量测定(磷酸氢钙CaHPO4、磷酸二氢钙Ca(H2PO4)2·H2O、钙粉等) 3、氟(Fˉ)含量的测定 4、磷(P)的测定 5、硫酸铜(CuSO4·5H2O) 6、硫酸锌(ZnSO4·H2O) 7、硫酸亚铁(FeSO4·H2O) 8、砷 9、硫酸镁(MgSO4) 四、维生素检测--------------------------------------------------------------------------------8 1、甜菜碱盐酸盐 2、氯化胆碱

一般试剂的配制

附录3:一般试剂的配制 01) . 1mol/l 氯化钾标准溶液: 准确称取74.246g预先在105。C烘箱中干燥2h的优级纯氯化钾(或基准试剂),用新制的高纯水溶解后移入1L 的容量瓶中,并稀释至刻度,混匀。 2). 0.1mol/l 氯化钾标准溶液: 准确称取7.4365g预先在105。C烘箱中干燥2h的优级纯氯化钾(或基准试剂),用新制的高纯水溶解后移入1L 的容量瓶中,并稀释至刻度,混匀。 3). 0.01mol/l 氯化钾标准溶液: 准确称取0.7440g预先在105。C烘箱中干燥2h的优级纯氯化钾(或基准试剂),用新制的高纯水溶解后移入1L 的容量瓶中,并稀释至刻度,混匀。 4). 0.001mol/l 氯化钾标准溶液: 于使用前准确吸取0.01mol/l氯化钾标准溶液100ml,移入1L的容量瓶中,用新制的高纯水稀释至刻度,混匀。 注:以上氯化钾标准溶液,应放入聚乙烯塑料瓶或硬质玻璃中,密封保存。 5).PH4 标准缓冲液:(25C: 4.01) 准确称取10.21g 邻苯二甲酸氢钾( KHC 8H2O4 ),溶于试剂水并定容至1 升由于此溶液稀释效应小,称量前不必干燥。此溶液放置几周后会发霉,加入少许微溶性酚或其化合物(如百里酚)作防霉剂,即可防止此现象的发生。 6).PH7 标准缓冲液:(25C: 6.86) 分别准确称取3.55g经120± 10C干燥2小时并冷却至室温的优级纯无水磷酸氢二钠 (Na2HPO4),及3.40g优级纯磷酸二氢钾(KH 2PO4), —起溶于试剂水并定溶至1升,配好的溶液应避免被空气中的二氧化碳污染,使用期为6 周。 7). PH9 标准缓冲液:(25 C: 9.18) 准确称取3.80g优级纯硼砂(Na2B4O7.10H2O),溶于无二氧化碳的试剂水并定溶1升。配好的溶液应避免被空气中的二氧化碳污染,使用期为4周。 8). PNa2 标准贮备液(10-2mol/l): 精确称取1.1690g经250?350 C烘干1?2小时的基准试剂氯化钠,溶于I级试剂水中,然后用2 升聚乙烯塑料定容。 9).PNa4 标准溶液(10-4mol/l) 取PNa2标准贮备液用I级试剂水稀释100倍。 10).PNa5 标准溶液(10-5mol/l ) 使用时取PNa4标准溶液,用I级试剂水稀释10倍。依次类推。保存于塑料容器内。 11 ) . 钙红指示剂: 称取1g钙红[HO(HO 3S)C1O H5NNC1O H5(OH)COOH]与100g氯化钠固体研磨混匀。 12). 氨---氯化铵缓冲溶液: 称取67.5g 氯化铵溶于500ml 水中,加入570ml 的浓氨水,加入1gEDTA 二钠镁盐,用水稀释至1L。 13). 0.5%酸性铬蓝K (乙醇溶液): 称取0.5g酸性铬蓝K与4.5g盐酸羟胺,在研钵中研匀,混合,加入10ml氨---氯化铵缓冲溶液和40ml水,溶解后用95%乙醇稀释至100ml,贮存于棕色瓶中备用。使用期不超过一个月。14). 0.5%铬黑T 指示剂(乙醇溶液) : 称取4.5g盐酸羟胺,加18ml水溶解,另在在研钵中加0.5g铬黑T磨匀,混合后,用95%的乙醇稀释至100ml,贮于棕色瓶中备用。使用期不超过一个月。 15). 10%盐酸羟胺: 称取10g 的盐酸羟胺加入少量的高纯水,待溶解后用高纯水稀释至100ml ,摇匀并贮与于棕

常用实验试剂配制

1DEPC水(1‰) 1000ml 水 1ml DEPC 根据需要确定要配的体积,泡实验器具的DEPC水静止4小时后备用,泡24小时。配液体的DEPC水37℃过夜,送至高压,然后配相关溶液。 20.1M tris(ph 7.5) 12.114g tris 1000ml DEPC水 用HCL调ph至7.5,高压备用。 3 4%PFA的配制(ph 7.0)40g PFA 1000ml 0.1m tris(DEPC水配制高压) 将溶液持续加热至60℃左右,搅拌之至完全溶解,注意温度不要超过65℃,否则PFA降解失效。 30.2% 甘油/0.1M tris 20ml 甘油 980ml 0.1Mtris 4 20XSSC Nacl 175.3g (ph 7.0)柠檬酸钠88.2g DEPC水1000ml 分别稀释至2XSSC和0.2XSSC备用 5 HEPES 溶液HEPES 23.8g (ph6.8-8.0)DEPC H2O 100ml 6 50X Denhaldt′s 液 聚蔗糖(Ficoll 400)0.2g 聚乙烯吡咯烷酮(polyvinypyrrolidone) 0.2g 牛血清蛋白(BSA)0.2g DEPC 水20ml 7 预杂交buffer Deinoized formanmid 5ml 20X SSC 1.5ml 1M HEPES 0.5ml 50X Denhanldt′s液1ml 龟精DNA 0.6ml(4ug/ul) DEPC水 1.4ml 龟精DNA 要先95℃10-15min加热变性,随即冰浴。杂交buffer分装后-20℃保存。 8Washing buffer (ph7.5) maleic acid 5.8g NACL 4.4g Tween(吐温) 1.5ml 定容至500ml溶质浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 0.3% Tween 9Maleic acid buffer (ph7.5) Maleic acid 5.8g Nacl 4.4g 定容至500ml 溶质的浓度最后分别为0.1M maleic acid 0.15M nacl 10Detection buffer

关于生物化学常用试剂配制

常规试剂配制和测定方法 一、溶液的配制 1. Mandels营养盐溶液(1000 mL) 名称重量(g) 硫酸铵((NH4)2SO4)14 磷酸二氢钾(KH2PO4)20 尿素(H2NCONH2) 3 硫酸镁(MgSO4·7H2O) 3 氯化钙(CaCl2·2H2O) 4 注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。 2. Mandels微量元素溶液(1000 mL) 名称重量(g) 氯化钴(CoCl2·6H2O) 硫酸锌(ZnSO4·7H2O) 硫酸锰(MnSO4·H2O) 硫酸亚铁(FeSO4·7H2O) 注:用煮沸10 min后的蒸馏水配制。 3. DNS试剂的配制(1000 mL) (1)取:3,5-二硝基水杨酸(C7H4N2O7)7.5 g 氢氧化钠(NaOH )14.0 g 充分溶解于1000 mL 水中(水预先煮沸10 min) (2)加入:酒石酸钾钠(C4H4O6KNa·4H2O)216.0 g 苯酚(在50 ℃水浴中融化)mL 偏重亚硫酸钠(Na2S2O5) 6.0 g

(3)充分溶解后盛于棕色瓶中,放置5天后便可使用,平时盛一小瓶(250 mL)使用,要放在冰箱中冷藏。此溶液每月配制一次。 注意:倒入瓶中时要尽量装满!! 4. 考马斯亮蓝G-250的配制(1000 mL) 称考马斯亮蓝G-250 100 mg即0.1g溶于50mL 95%乙醇中,加入100 mL 85 %磷酸,用蒸馏水稀释至1000 mL ,滤纸过滤。最终试剂中含%(w/v)考马斯亮蓝 G-250,%(w/v)乙醇,%(w/v)磷酸。 5. 1.0 M柠檬酸缓冲溶液的配制(1000 mL) 名称分子量Mn 重量(g) 柠檬酸(C6H8O7·H2O)210 210 NaOH 40 准确称取柠檬酸210 g,溶于约750 mL煮沸(10 min)蒸馏水中,待柠檬酸充分溶解后加入氢氧化钠74.5 g,完全溶解后将上述溶液转移到1000 mL容量瓶中,冷却后将容量瓶定容到1000 mL(原始)。(检验方法:取1.0 M柠檬酸缓冲溶液稀释20倍,测定稀释液的pH值,pH值应为) 6. 标准糖溶液的配制和标准方程的测定 (1)标准糖溶液的配制 准确称取2.000 g葡萄糖/木糖(葡萄糖/木糖需105 ℃烘干3 h),蒸馏水溶解,全部转移至1 L容量瓶内,摇匀,配制成2 g/L葡萄糖/木糖溶液。 取9个100 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管,分别吸取2 g/L葡萄糖/木糖溶液10 mL、20 mL、30 mL、40 mL、50 mL、60 mL、70 mL、80 mL、90 mL依次加入容量瓶,蒸馏水定容,摇匀。即为0.2 g/L、0.4 g/L、0.6 g/L、0.8 g/L、1.0 g/L、1.2 g/L、1.4 g/L、1.6 g/L、1.8 g/L、2.0 g/L葡萄糖/木糖标准溶液。 取6个30 mL容量瓶、1支20 mL刻度吸管,分别吸取2 g/L葡萄糖溶液10 mL、12 mL、14 mL、16 mL、18 mL、20 mL依次加入容量瓶,每瓶再加入mL柠檬酸缓冲液,蒸馏水定容,摇匀。即为1.0 g、1.2 g、1.4 g、1.6 g、1.8 g、2.0 g酶解葡萄糖。(2)标准方程的测定: ①葡萄糖/木糖标准方程的测定

各实验试剂配制方法

NOx的测定试剂配制 1、1.00g/L盐酸萘乙二胺贮备液:称取0.50g(N-l-萘基)乙二胺盐酸盐(C10H7NH(CH2)NH2·2HCl)于500ml容量瓶中,用水稀释至标线。此溶液贮于密闭的棕色试剂瓶中,在冰箱中冷藏可稳定三个月。 2、显色液:称取5.0g对氨基苯磺酸(NH2C6H4S03H),溶解于约200ml热水中,将溶液冷却至室温,全部移入1000ml容量瓶中,加入50.0ml盐酸萘乙二胺贮备液和50ml冰乙酸,用水稀释至标线。此溶液于密闭的棕色瓶中,在25℃以下暗处存放,可稳定三个月。若呈现淡红色,应弃之重配。 3、吸收液:临用时将显色液和水按4+1(V/V)比例混合,即为吸收液。吸收液的吸光度不超过0.005(540nm,lcm比色皿,以水为参比)。否则,应检查水、试剂纯度或显色液的配制时间和贮存方法。 4、亚硝酸钠标准贮备液:准确称取0.3750g亚硝酸钠(NaN02,优级纯,预先在干燥器内放置24h)溶解于水,移入1000ml容量瓶中,用水稀释至标线。贮于密闭的棕色试剂瓶中,可稳定三个月。此溶液每毫升含0.250mg亚硝酸根。 5、亚硝酸钠标准使用液:吸取亚硝酸钠标准贮备液1.00ml于100ml容量瓶中,用水稀释至标线。临用前现配。此溶液每毫升含2.5μg亚硝酸根。 6、硫酸溶液C(1/2H2S04)=lmol/L:取15ml硫酸(ρ=1.84g/m1)徐徐加入500ml水中。 7、酸性高锰酸钾溶液:称取25g高锰酸钾,稍微加热使其全部溶解于500ml水中,然后加入lmol/L硫酸溶液500ml,混匀,贮于棕色试剂瓶中。

SO 2的测定试剂配制 1、环己二胺四乙酸二钠溶液C(CDTA-2Na)=0.0050mol/L :称取1.82g 反式-l ,2-环己二胺四乙酸((trans-1,2-Cyclohexylenedinitrilo)tetraacetic acid ,简称CDTA),加入1.50mol/L 的氢氧化钠溶液6.5ml ,溶解后用水稀释至100ml 。 2、甲醛缓冲吸收液贮备液:吸取36%~38%的甲醛溶液5.5ml ,0.050mol/L 的CDTA-2Na 溶液20.0ml ;称取2.04g 邻苯二甲酸氢钾,溶解于少量水中;将三种溶液合并,用水稀释至100ml ,贮于冰箱,可保存10个月。 3、甲醛缓冲吸收液:用水将甲醛缓冲吸收液贮备液稀释100倍而成,此吸收液每毫升含0.2mg 甲醛,临用现配。 4、氢氧化钠溶液C(NaOH)=1.50mol/L 。 5、0.60%(m/V)氨磺酸钠溶液:称取0.60g 氨磺酸(H 2NSO 3H)于烧杯中,加入1.50mol/L 氢氧化钠溶液4.0ml ,搅拌至完全溶解后稀释至100ml ,摇匀。此溶液密封保存可使用l0d 。 6、碘贮备液C(1/2I 2)=0.10mol/L :称取12.7g 碘(I 2)于烧杯中,加入40g 碘化钾和25ml 水,搅拌至完全溶解后,用水稀释至1000ml ,贮于棕色细口瓶中。 7、碘使用液C(1/2I 2)=0.05mol/L :量取碘贮备液250ml ,用水稀释至500ml ,贮于棕色细口瓶中。 8、0.5%(m/V)淀粉溶液:称取0.5g 可溶性淀粉,用少量水调成糊状,慢慢倒入100ml 沸水中,继续煮沸至溶液澄清,冷却后贮于试剂瓶中。临用现配。 9、碘酸钾标准溶液C(1/6KIO 3)=0.1000mol/L :称取3.5667g 碘酸钾(KIO 3,优级纯,经110℃干燥2h)溶解于水,移入1000ml 容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀。 10、盐酸溶液(1+9)。 11、硫代硫酸钠贮备液C(Na 2S 2O 3)=0.10mol/L :称取25.0g 硫代硫酸钠(Na 2S 2O 3·5H 2O),溶解于1000ml 新煮沸并已冷却的水中,加入0.20g 无水碳酸钠(Na 2CO 3),贮于棕色细口瓶中,放置一周后备用。如溶液呈现混浊,必须过滤。 12、硫代硫酸钠标准溶液C(Na 2S 2O 3)=0.05mol/L :取250.0ml 硫代硫酸钠贮备液,置于500ml 容量瓶中,用新煮沸并已冷却的水稀释至标线,摇匀。 标定方法:吸取三份0.1000mol/L 碘酸钾标准溶液10.00m1分别置于250ml 碘量瓶中,加入70ml 新煮沸并已冷却的水,加入1g 碘化钾,摇匀至完全溶解后,加入(1+9)盐酸溶液10ml ,立即盖好瓶塞,摇匀。于暗处放置5min 后,用硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液至浅黄色,加入2ml 淀粉溶液,继续滴定溶液至蓝色刚好褪去为终点。硫代硫酸钠标准溶液的浓度按下式计算: V C 00 .101000.0?= (2-1-1) 式中:C ——硫代硫酸钠标准溶液的浓度,mol/L ; V ——滴定所消耗硫代硫酸钠标准溶液的体积,ml 。 13、0.05%(m/V)乙二胺四乙酸二钠盐(Na 2EDTA)溶液:称取0.25gNa 2EDTA(C 10H 14N 2O 8Na 2·2H 2O),溶解于500ml 新煮沸但已冷却的水中,临用现配。 14、二氧化硫标准溶液:称取0.200g 亚硫酸钠(Na 2SO 3),溶解于200mlNa 2EDTA 溶液中,缓缓摇匀以防充氧,使其溶解。放置2~3h 后标定。此溶液每毫升相当于320~400μg 二氧化硫。 标定方法:吸取三份20.00ml 二氧化硫标准溶液,分别置于250ml 碘量瓶中,加入50ml 新煮沸但已冷却的水、20.00ml 碘使用液及lml 冰乙酸,盖塞,摇匀。于暗处放置5min 后,用硫代硫酸钠标准溶液滴定溶液至浅黄色,加入2ml 淀粉溶液,继续滴定至溶液蓝色刚好

流式常用试剂配制

一、流式细胞术常用试剂 1、10%NaN3:将10gNaN3溶解于100ml蒸馏水中,室温保存;活体实验或在辣根过氧化酶反应中可不使用NaN3。 2、3%BSA/PBS:100ml PBS中加入3g BSA,使之溶解,再加入0.2ml 10%的NaN3。 3、500mmol/L EDTA:将186g EDTA?Na2?2H2O溶解于400ml蒸馏水中,用NaOH将PH调至8.0,补充蒸馏水至500ml,分装,高压灭菌,室温保存。 4、4%多聚甲醛:在磁力搅拌下,将4g多聚甲醛溶于100ml PBS,加入数滴NaOH,在通风柜中于60度加热,使其溶解,调整PH至7.4,使用前新鲜配制。 5、消化液:0.25%胰蛋白酶(用培养液或PBS配制)或0.25%胰蛋白酶与0.02%EDTA的混合液。 6、红细胞裂解液:NH4Cl 4.16g,KHCO3 0.5g,EDTA?2Na 0.02g,溶于100ml水中,调PH 至7.2,补充蒸馏水至500ml,4度储存,使用时需恢复至室温。 7、流式细胞抗体稀释剂:0.1mmol/L PBS液(PH 7.4)+1%BSA+0.1%Na2N3。 8、常用细胞破膜剂:PBS液(PH 7.4)+1%FBS(或BSA)+0.1%NaN3+0.1%saponin(Sigma 的效果不错)。 9、流式细胞染色洗涤液:含2%的BSA、0.1%NaN3的PBS(PH 7.4)。 10、PI染液(保存液,10×,用于细胞周期和凋亡检测):10mg PI溶于10ml PBS,加入2mg 无DNA酶的RNA酶,4度保存备用。应用时,10倍稀释,每管加0.3ml~0.5ml PI染液。 11、Hanks液的配制(BSS,主要用于培养液、稀释剂和细胞清洗液,不能单独作为细胞、组织培养液) 原液A NaCl 160g MgSO4?7H2O 2g KCl 8g MgCl?6H2O 2g CaCl2 2.8g 溶于1000ml双蒸水 原液B 1)Na2HPO4?12H2O 3.04g KH2PO4 1.2g 葡萄糖20.0g 溶于800ml双蒸水 2)0.4%酚红溶液:取酚红0.4g置玻璃研钵中,逐滴加入0.1N NaOH并研磨,直至完全溶

药剂配制方法

化学需氧量的药剂配制方法 1.重铬酸钾标准溶液: 浓度为C=0.2500mol/L的重铬酸钾标准溶液:将13g(25g)的重铬酸钾在105℃干燥箱里烘干,时间为2小时放置干燥器内空气冷却(冷却时,要用定性滤纸把口盖住烧杯口,以防潮气),再用精细天平称重(称后的重量为12.258g[24.516g],当天烘干,当天称量),放置烧杯中用纯水稀释,随放随搅,保证完全溶解,然后放入容量瓶中,稀释至1000ml(2000ml)。 2.硫酸-硫酸银试剂:向2.5L硫酸中加入25g硫酸银,放置3-4 天使之溶解,并混匀,使用前小心摇动。 3.硫酸亚铁铵标准滴定溶液: a:称40g(80g)硫酸亚铁铵放入大烧杯中。 b:加入700ml(1400ml)纯水。 C:加入20ml(40ml)浓硫酸。 d:搅棒搅匀,放24小时。 e:最后稀释至1000ml(2000ml). 4.试亚铁林指示剂: 溶解0.7g七水合硫酸亚铁于50ml的水中,加入1.5g邻菲罗啉,搅动加热至完全溶解,冷却后加水稀释至100ml。

阴离子表面活性剂试剂配制方法 1.4%氢氧化钠溶液: 取4g氢氧化钠用水定容至100ml。 2.3%硫酸 取3ml硫酸用水定容至100ml. 2.亚甲蓝溶液:称取50g一水合磷酸二氢钠(56.5g二水合磷酸 二氢钠)置于烧杯中,溶于水,慢慢岩壁加入6.8ml浓硫酸,混匀,转移入1000ml容量瓶中。另称取30mg亚甲蓝(指示级),用50ml水溶解后也移入容量瓶中,用水稀释至标线,摇匀。此溶液贮存于棕色试剂瓶中。 3.酚酞指示剂溶液: 将1g酚酞溶于50ml乙醇,然后边搅拌边加入50ml水,滤去沉淀物。

中学生物实验中常用试剂的配制及作

用 1.碘液 配制:取2g碘化钾,溶解在5ml蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后用蒸馏水稀释至300ml。 溶液在光亮处容易变成紫色,必须保存在暗色玻璃瓶里。 作用:用来测定淀粉,淀粉遇碘后,形成紫色的复合物。 2.xx试剂 配制:斐林试剂(Fehling'ssolution)是德国化学家斐林(Hermann von Fehling,1812年--1885年)在1849年发明的。斐林试剂斐林试剂A和斐林试剂B配制而成的。斐林试剂A是氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的溶液,斐林试剂B是硫酸铜的质量分数为0.05g/mL的溶液。临用时斐林试剂A与斐林试剂B等量混合。 作用:鉴定还原性糖:C6H12O6、果糖、麦芽糖、乳糖等。 还原性糖与斐林试剂发生作用,水浴加热,生成砖红色沉淀。如用于鉴定组织液中是否有还原性糖、糖尿病人尿成分分析、酶专一性探索等。 3.xx尿糖定性试剂 配制:173克柠檬酸钠和100克无水碳酸钠溶解于800毫升水中。再取 17.3克结晶硫酸铜溶解在100毫升水中,慢慢将此溶液加入上述溶液中,最后用水稀释到1升,边加边搅,如产生沉淀可滤去。 作用:鉴定还原性糖,在沸水浴加热条件下与还原糖反应而生成砖红色的Cu 2O沉淀,使用原理同斐林试剂,都是二价铜离子与醛基在沸水浴加热条件下反应而生成砖红色的沉淀,所不同的是班氏试剂可长期使用。4.双缩脲试剂

配制:双缩脲试剂(biuret reagent)是由双缩脲试剂A(NaOH)和双缩脲试剂B(CuSO 4)两种试剂组成。双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1g/mL的水溶液;双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。 作用:鉴定蛋白质,蛋白质与双缩脲试剂发生作用,可产生紫色反应。也可用于鉴定多肽。双缩脲试剂使用时,先向2mL蛋白质溶液加入2mL双缩脲试剂A,振荡摇匀,造成碱性的反应环境,然后再加入3~4滴双缩脲试剂B,振荡摇匀后观察现象。 具体方法是先将双缩脲试剂A加入组织样液,振荡均匀(必须营造碱性环境),再加入双缩脲试剂B,摇荡均匀。如果组织里含有蛋白质,那么会看到溶液变成紫色。具有两个或两个以上肽键的化合物皆可与双缩脲试剂产生紫色反应。蛋白质的肽键在碱性溶液中能与Cu2+络合成紫红色的络合物。颜色深浅与蛋白质浓度成正比。 5.xxⅢ染液 配制:苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ干粉0.1g;95%酒精10 ml;过滤后再加入10 ml甘油。或者取 0.1克苏丹Ⅲ,溶于20毫升95%酒精中,即成0.5%苏丹Ⅲ染液。 作用:鉴定脂肪,脂肪可以被苏丹Ⅲ染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。 6.xxxx染色剂 配制:配制质量分数为1%健那绿染液:将0.5g健那绿溶解于50mL生理盐水中,加温到30-40摄氏度,使其充分溶解。 作用:专一性用于线粒体染色的活细胞染料。将线粒体染成蓝绿色 7.吡罗红甲基绿染色剂 配制:

生物学常用试剂配制完整版

生物学常用试剂配制 HEN system office room 【HEN16H-HENS2AHENS8Q8-HENH1688】

常用试剂 储存注意事项:储存于阴凉、通风的地方;远离火种、热源。避免光照。室温不超过30℃,相对湿度不超过80%。包装必须密封,切勿受潮。应与易(可)燃物、还原剂、碱类、醇类、食用化学品分开存放,切忌混储,储区应备有合适的材料收容泄漏物。 操作注意事项:尽量在通风橱操作,加强通风,避免粉尘扩散。远离易燃、可燃物,避免与还原剂、碱类、醇类接触,防止包装及容器损坏。 EDTA(PH ) 组分浓度: mol/L EDTA(MW:) 配制量: 500ml 配制方法: 1.称取93g Na2EDTA·2H2O置于500ml蓝盖瓶中。 2.加入400ml的去离子水,置于磁力搅拌器上充分搅拌。 3.用NaOH调节调节pH值至(约需加入20g固体NaOH),当pH 接近时, EDTA方可完全溶解,加入去离子水定容至1L。 4.高温高压灭菌后,室温保存半年。 5M NaCl 组份浓度: 5mol/L NaCl (MW: 配制量: 1L 配制方法: 1.准确称取氯化钠,置于1L的蓝盖瓶中。 2.用去离子水溶解并稀释至1L。 3.高温高压灭菌后,常温保存。 CaCl2 组份浓度:L CaCl2 (MW: 配制量: 50ml 配制方法: 1.准确称取氯化钙 g于50ml的conical tube中。 2.用去离子水溶解并稀释至500ml,用μm滤膜过滤除菌滤膜过滤除菌到进口的conical tube。 3.贮存于4℃。 50% 甘油 组分浓度: 50%(V/V) glycerol 配制量: 100ml 配制方法: 1. 量取下列试剂,置于250ml蓝盖瓶中: 100% glycerol 50ml 2.加入50ml去离子水,充分搅拌溶解。 3.高温高压灭菌,4℃保存。 4.使用时,到超净台分装。 Amp-氨苄青霉素(钠盐) 放置:置于4°C冰箱

试剂的配制

附录1 生物实验室常用试剂的配制 一、检验酸碱性的试剂 1.酚酞试液取0.1g酚酞,溶解在100mL60~90%的乙醇溶液里,装在试剂瓶内密闭保存。酚酞试液在碱性溶液中呈红色。 2.甲基橙试液甲基橙是橙黄色粉末或晶状鳞片。取0.1g甲基橙溶解在100mL蒸馏水里制成。当pH值由 3.1~ 4.4时,颜色为红至黄色。 3.甲基红试液甲基红是红紫色晶体或红色粉末。把0.1g甲基红溶在100mL60%乙醇里制得。当pH值由 4.4~6.2时,颜色由红色至黄色。 4.麝香草酚酞(百里酚酞)试液把0.1g白色的麝香草酚酞溶解在100mL 90%乙醇里制得。当pH值由9.4~10.6时,颜色为无色至蓝色。 5.溴甲酚紫指示剂将0.1g溴甲酚溶于9.25mL的0.02mol/L氢氧化钠溶液中,加蒸馏水稀释至250mL制得。当pH值由 6.2~6.8时,颜色由淡黄色变为淡紫色,变色点在pH 6.7。 6.溴甲酚绿试液溴甲酚绿是黄色晶体或红棕色粉末。把0.1g溴甲酚绿溶于100mL 20%乙醇中,或把0.1g溴甲酚绿与2.9mL 0.05mol/L 氢氧化钠溶液研匀,用水稀释到100mL制得。当pH值由3.8~5.4时,颜色由黄至蓝色。 7.甲基紫(结晶紫)试液把0.1g深绿紫色的甲基紫溶解在100mL的水里制得。当pH值由0.13~0.5时,颜色由黄至绿;pH值由1.0~1.5时,颜色由绿至蓝;pH值由2.0~3.0时,颜色由蓝至紫。 8.甲酚红指示剂把0.1g深红色的甲酚红溶解于100mL 50%的乙醇中,或将0.1g甲酚红与5.3mL 0.05mol/L氢氧化钠研匀,用水稀释到100mL制得。当pH值由0.2~1.8时颜色由红至黄;pH值由7.0~8.8时,颜色由亮黄至紫红。甲酚红指示剂遇少量二氧化碳,能快速变色,反应灵敏,效果明显。 9.刚果红试纸(红色)把 0.5g峋果红溶解于1L水中,加入5滴乙酸,滤纸用温热溶解液浸透后,取出晾干。遇酸性溶液变蓝色。当pH值变化范围为 3.0~5.2时,颜色由蓝至红。 二、反应试剂 1. 鉴定葡萄糖的试剂 (1)班氏(Benedict)试剂 ①在600mL蒸馏水中溶解173g柠檬酸钠和100g 无水碳酸钠,冷却后稀释到850mL。 ②在100mL热蒸馏水中溶解17.4g无水硫酸铜。冷却后稀释到150mL。把硫酸铜溶液缓缓倒入上述柠檬酸钠一碳酸钠溶中,边加边搅拌,如产生沉淀。要过滤,班氏试剂配制后能长期使用。如存放较久而产生沉淀时,可取上层清液使用,不必重配。 (2)斐林氏(Fehling’s Solution)试剂 ①取35g硫酸铜,溶解在400mL蒸馏水里,加蒸馏水到500mL。 ②取85g氢氧化钾(或70g氢氧钠)和175g酒石酸钾钠,溶解在400mL蒸馏水里,加水馏水到500mL。 上述两种溶液要分别保存,使用时再等量地混和并搅拌。如溶液里有葡萄糖,加等量斐林试剂,煮沸,会产生红色的氧化亚铜沉淀。 2.鉴定淀粉用的碘液取2g碘化钾,溶解在10 mL蒸馏水中,再加1g碘,待溶解后用蒸馏水稀释到300mL,即成碘液。溶液在光亮处容易变成氢碘酸,

常用试剂配制及显色方法

https://www.sodocs.net/doc/6110602855.html, 常用试剂配制及显色方法 (一)通用显色剂 1.重铬酸钾——硫酸 一般有机物均能显色,不同化合物显示不同颜色。 喷洒剂:5克重铬酸钾溶于100ml,40%硫酸中。喷洒后加热至150o C斑点出现。2.碘:检查一般有机物 (1)碘蒸汽:在一个密闭玻璃皿先放入碘片,使缸内空气被碘蒸气饱和将薄层或纸层放入缸内数分钟即显色,有时在缸内放一盛水的小杯,增加缸内的湿度,可提高 显色的灵敏度。 (2)0.5%碘的氯仿溶液,取出挥发散过量的碘再喷1%淀粉的水溶液,斑点转成蓝色。3.碘——碘化钾溶液:很我有机物虽黄色(配法见后)。 4.5%——磷钼酸乙醇溶液:喷后120o C烤,还原性物质显兰色,再用氨气熏,则背景变为无色。 5.20%磷酸乙醇溶液:喷后120o C,还原性物质显兰色。 6.碱性高锰酸钾试剂:还原性物质在淡红背景上显黄色。溶液I:1%高锰酸钾溶液。 溶液II:5%碳酸钠溶液。 溶液I和溶液II等量混合使用。 7.中性0.05%高锰酸钾溶液:易还原性物质在淡红背景上显黄色。 8.硝酸银——氢氧化铵(Tollen’s--zoffaronl)试剂,喷后105o C烤5~10分钟,还原性物质显黑色。 溶液I:0.1N硝酸银溶液。溶液II:氢氧化铵溶液。 临用前溶液I和溶液II以1:5混合。注意:放久则形成爆炸性的叠氦化银。 9.硝酸银——高锰酸钾试剂:还原性物质在兰绿色背景上立即显黄色。 溶液I:0.1N硝酸银溶液:2N氢氧化铵溶液:2N氢氧化钠(1:1:2)。临用前配制。 溶液II:高锰酸钾0.5g,碳酸钠1g,加水成100ml溶液,临用前溶液I和溶液II等量混合。 10.四唑试剂:还原性物质,在室温或微加热时显紫色。 溶液I:0.5%四唑兰甲醇溶液。溶液II:6N氢氧化钠溶液。临用前溶液I和溶液II等量混合。 11.铁氰化钾:三氯化铁试剂:还原性物质显兰色,再喷射2N/L盐酸溶液,则兰色加深。 溶液I:1%铁氰化钾溶液。溶液II:2%三氯化铁溶液。临用前溶液I和溶液II

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