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蝇蛆抗菌肽对金黄色葡萄球菌性小鼠乳腺炎治疗效果的研究

摘要

为了研究蝇蛆抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)对奶牛乳腺炎的治疗效果,本试验建立金黄色葡萄球菌(Sstaphylococcus aureus,S.aureus)性小鼠乳腺炎病理模型,用蝇蛆抗菌肽治疗小鼠乳腺炎,观察治疗过程中小鼠的临床症状、小鼠乳腺组织病理变化及HE染色病理切片,检测小鼠乳腺组织中TNF-α含量和S.aureus数,研究结果如下:

1采用考马斯亮蓝法测定蝇蛆抗菌肽的浓度,结果显示,经S.aureus诱导蝇蛆产生的抗菌肽浓度显著高于未经诱导的(p<0.05);通过K-B药敏纸片法测定,蝇蛆经S.aureus诱导产生的抗菌肽抑菌圈直径(19.97±0.65mm)显著大于未诱导的蝇蛆抗菌肽(13.82±0.79mm)(p<0.05);采用微量肉汤稀释法检测,经诱导的蝇蛆抗菌肽对S.aureus的最小抑菌浓度为1.5mg/L。

2通过S.aureus感染小鼠,建立小鼠乳腺炎病理模型。

3通过蝇蛆抗菌肽治疗S.aureus小鼠乳腺炎,分别于治疗3d、5d、7d采集小鼠的乳腺组织,观察其病理组织学变化、检测小鼠乳腺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量和S.aureus数。

(1)应用高盐甘露醇鉴别培养基检测小鼠乳腺组织中的S.aureus的数量,结果发现,在治疗过程中,抗菌肽治疗组的小鼠乳腺组织中S.aureus数量极显著降低(p<0.01),说明抗菌肽可以抑制小鼠乳腺组织中S.aureus的生长。

(2)HE染色制备病理组织切片,比较分析了致病菌对小鼠乳腺组织的损伤程度,发现蝇蛆抗菌肽可以降低小鼠乳腺组织的损伤。

(3)通过ELISA法检测小鼠乳腺组织中TNF-α含量,结果显示,与生理盐水治疗组相比,在治疗的第3、5d抗菌肽治疗组小鼠乳腺组织中的TNF-α含量极显著下降(p<0.01),说明蝇蛆抗菌肽对TNF-α有明显的抑制作用。

(4)根据小鼠乳腺组织中S.aureus数推算出各治疗组的治愈率,生理盐水治疗组小鼠S.aureus小鼠乳腺炎的治愈率为0,抗菌肽治疗组为40%,抗生素治疗组为80%。

综上所述,蝇蛆抗菌肽对S.aureus小鼠乳腺炎具有一定的治疗效果,具有替代传统抗生素成为新型治疗药物的潜力,同时也为应对抗生素的滥用和细菌耐药性方面提供了新的方向,因此,蝇蛆抗菌肽有望成为新型的抗菌制剂治疗奶牛乳腺炎,为相关研究与应用提供一定的科学依据和理论基础。

关键词:小鼠;乳腺炎;模型;蝇蛆抗菌肽;治疗

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