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721系列紫外可见分光光度计

721系列紫外可见分光光度计

721系列紫外可见分光光度计

721系列可见分光光度计,以全新的设计理念,博采众家之长。充满现代化气息的外形设计,卓越的数据处理和控制功能为该仪器鲜明的特色。广泛应用于厂矿、卫生、学校、环保及科研实验室等。我们的目标为广大用户提供高品质的分析仪器。

产品特点:

采用新型的光路设计和高质量的光栅,具有杂散光低,单色性好的特点

单片机的采用使操作更为简易,条0%T及100%T仅为轻轻一按。

四种测量模式,T、A、C、斜率法,使操作更加简便。

31/2LCD液晶显示读数方便,大样品室可使功能扩展。

721B可配100mm比色皿架,更适用于水厂、电厂进行含量分析

721P可配装打印机,测量数据可更方便打印保存。

光源6V10W进口2000小时长寿命钨卤素灯。

选配附件:

电子式恒温比色池架ф8-ф22mm试管架(单池)

水循环式恒温比色池架AC-230型智能温度/进样控制器

5-100mm光程手动多联比色池架AC-220型智能式自动进样控制器

通光宽度在1-4mm微量比色池架(单池)AC-210型智能温度控制器

100-200mm超微量比色池架(单池)各种规格的比色池

性能指标:

产品型号721 721B 721P

波长范围340-1000nm 340-1000nm 340-1000nm

波长精度±2nm ±2nm ±2nm

波长重复性1nm 1nm 1nm

光谱带宽4nm 4nm 4nm

光度精度≤±0.5%T ≤±0.5%T ≤±0.5%T

光度重复性0.5%T 0.5%T 0.5%T

杂散光≤±0.5%T ≤±0.5%T ≤±0.5%T

显示方式31/2LCD 31/2LCD 31/2LCD

操作方式手动波长手动波长手动波长

操作软件无无配

备注无100mm比色皿架微型针式打印机

UV-2600型紫外分光光度计操作指导书

UV-2600型紫外分光光度计操作指导书 1概况 仪器概况: UV-2600型紫外分光光度计是由日本岛津(Shimadzu)生产制造,与功能强大的操作软件UVProbe结合,操作简单方便,且符合SH/T0181方法的测量精度要求。 主要技术参数 波长范围185nm~900nm (使用积分球附件ISR- 2600Plus时220nm~1400nm) 分辨率 波长准确性± 谱带范围、、、1、2、5nm测光方式双光束方式 杂散光%以下检测器光电倍增管R-928 测光范围-5~5Abs比色池1cm 光源50W卤素灯、氘灯单色器切尼尔-特纳单色器 主电压AC100V~240V主频率50/60Hz 使用条件 操作温度:15~35℃ 操作湿度:30%~805% 2仪器结构 仪器由UV-2600型紫外分光光度计和计算机组成。 3操作步骤 开机 在使用前先确认仪器和计算机的工作电源,检查仪器样品室应无遮挡光路的物品。确认后先开启计算机,然后开启仪器电源。待分光光度计外侧的指示灯显示绿色时,启动电脑桌面上的UVPROBE程序。 首先从下拉式菜单的仪器项上追加需要的仪器,操作完毕如下图①所示,然后点击上图

的连接键②,这样仪器与计算机连接(当然,中间的通讯电缆的连接、通讯口的指定等都是必须的,此处不再赘述)并开始下示的初始化面。 初始化大约需要5分钟左右,进行一系列的检查和初置,如一切顺利通过就可以开始测定。 测定 首先选择测定的方式,在主菜单上能发现右图所示的各键,自左至右 分别为: ①报告生成器:用于制作各种格式的报告。 ① ② ① ② ③ ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑧ ⑨ ⑩ ⑾ ⑿ ⒀ ⒁

721可见分光光度计使用说明书

721可见分光光度计使用说明书 目次 1 仪器的主要用途..............................................(1) 2 仪器的工作环境..............................................(1) 3 仪器的主要技术指标及规格....................................(1) 4 仪器的工作原理..............................................(1) 5 仪器的光学系统..............................................(2) 6 仪器的电子系统..............................................(3)6.1 放大器线路简介...............................................(3)6.2 放大器稳压电源线路简介........................................(4) 6.3 钨灯稳压电源线路简介..........................................(4) 7 仪器的结构..................................................(9) 8 仪器的安装使用与维护.......................................(14) 9 仪器的调校与故障修理......................................(15)9.1 仪器的调校.................................................(15) 9.2 仪器使用问答................................................(17) 10 仪器的成套性...............................................(23) 11 仪器的保管及免费修理期限...................................(23) 产品执行标准的编号:Q/YXLZ41-2002 I

紫外可见分光光度计常见故障的排除

紫外可见分光光度计常见故障的排除 光源部分: (1)故障:钨灯不亮; 原因:钨灯灯丝烧断(此种原因几率最高); 检查:钨灯两端有工作电压,但灯不亮;取下钨灯用万用表电阻档检测。 处置:更换新钨灯; (2)故障:钨灯不亮; 原因:没有点灯电压; 检查:保险丝被熔断; 处置:更换保险丝,(如更换后再次烧断则要检查供电电路); (3)故障:氘灯不亮; 原因:氘灯寿命到期(此种原因几率最高); 检查:灯丝电压、阳极电压均有,灯丝也可能未断(可看到灯丝发红); 处置:更换氘灯; (4)故障:氘灯不亮; 原因:氘灯起辉电路故障; 检查:氘灯在起辉的过程中,一般是灯丝先要预热数秒钟,然后灯的阳极与阴极间才可起辉放电,如果灯在起辉的开始瞬间灯内闪动一下或连续闪动,并且更换新的氘灯后依然如此,有可能是起辉电路有故障,灯电流调整用的大功率晶体管损坏的几率最大。 处置:需要专业人士修理; 二.信号部分: (1)故障:没有任何检测信号输出; 原因:没有任何光束照射到样品室内;

检查:将波长设定为530nm,狭缝尽量开到最宽档位,在黑暗的环境下用一张白纸放在样品室光窗出口处,观察白纸上有无绿光斑影像; 处置:检查光源镜是否转到位?双光束仪器的切光电机是否转动了(耳朵可以听见电机转动的声音)? (2)故障:样品室内无任何物品的情况下,全波长范围内基线噪声大; 原因:光源镜位置不正确、石英窗表面被溅射上样品; 检查:观察光源是否照射到入射狭缝的中央?石英窗上有无污染物? 处置:重新调整光源镜的位置,用乙醇清洗石英窗; (3)故障:样品室内无任何物品的情况下,仅仅是紫外区的基线噪声大; 原因:氘灯老化、光学系统的反光镜表面劣化、滤光片出现结晶物; 检查:可见区的基线较为平坦,断电后打开仪器的单色器及上盖,肉眼可以观察到光栅、反光镜表面有一层白色雾状物覆盖在上面;如果光学系统正常,最大的可能是氘灯老化,可以通过能量检查或更换新灯方法加以判断; 处置:更换氘灯、用火棉胶粘取镜面上的污物或用研磨膏研磨滤光片(注意:此种技巧需要有一定维修经验者来实施); (4)故障:样品室放入空白后做基线记忆,噪声较大,紫外区尤甚; 原因:比色皿表面或内壁被污染、使用了玻璃比色皿或空白样品对紫外光谱的吸收太强烈,使放大器超出了校正范围; 检查:将波长设定为250nm,先在不放任何物品的状态下调零,然后将空比色皿插入样品道一侧,此时吸光值应小于0.07Abs;如果大于此值,有可能是比色皿不干净或使用了玻璃比色皿;同样方法也可判断空白溶液的吸光值大小; 处置:清洗比色皿,更换空白溶液; (5)故障:吸光值结果出现负值(最常见); 原因:没做空白记忆、样品的吸光值小于空白参比液; 检查:将参比液与样品液调换位置便知; 处置:做空白记忆、调换参比液或用参比液配置样品溶液; (6)故障:样品信号重现性不良;

752紫外可见分光光度计使用方法解析

752紫外可见分光光度计 一、仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光的吸收效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理—一比耳定律。 τ=I/Io log I/Io=KCL A= KCL 从以上公式可以看出,当入射光、吸收系数和溶液的光径长度不变时.透过的光是根据溶液的浓度而变化的,752紫外可见分光光度计的基本原理是根据上述物理光学现象而设计的。 二、仪器的安装、使用、安装 1 仪器在安装使用前应对仪器的安全性进行检查,电源电压是否正常,接地线是否牢固可靠,在得到确认后方和接通电源使用。 2 仪器经过运输和搬运等原因,会影响波长准确度,应进行仪器调校后使用。 使用:仪器使用前需开机预热30min。 本仪器键盘共有4个键,分别为; 1 A /τ/C/F 1SD 2 ▽/0% 3?/100% 4 A /τ/C/F键:每按此键来切换A、τ 、C、F之间的值。 A——吸光度(Absorbance) T——透射比(Trans) C——浓度(conc) F——斜率(Factor) (2)F值通过按键输入(后面介绍如何设置) 5SD键:该键具有2个功能 a)用于RS232串行口和计算机传输数据(单向传输数据,仪器发向计算机)。 b)当处于F状态时,具有确认的功能,即确认当前的F值,并自动转到C,计算当前的C 值(C=F*A)。 6 ▽/0%键:该键具有2个功能 a)调零;只有在τ状态时有效,打开样品室盖,按键后应显示0.000。 b)下降键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动减1,如果按住本键不放,目动减1会加快速度;如果F值为0后,再按键它会自动变为1999。而按键开始自动减1。 7 ?/100%键;该键具有2个功能 a)只有在A、τ状态时有效,关闭样品室盖,按键后应显示0.000、100.0。 b)上升键:只有在F状态时有效,按本键F值会自动加1,如果按住本键不放,自动加1会加快速度,如果F值为1999后,再按键它会自动变为0,再往键开始自动加l。 例如:设置斜率为1500。 方法一 T)按A/τ/C/F键切换到F状态。 b)如果当前F值为1000,则按?/100%键,直到F值为1500。 C)再按SD键,表示当前的F值为1500,然后自动回到C状态,假如所测的A值为0.234,则此时显示C值为0351。

紫外可见分光光度计的校正

实训二紫外可见分光光度计的校正 一、实训目的 1、了解紫外-可见分光光度的基本构造。 2、熟悉紫外可见分光光度计的操作技术。 3、熟悉校正波长和测量吸收值精度的原理和方法。 二、仪器与试剂 1、仪器:紫外-可见分光光度计,石英吸收池(1cm),容量瓶(1000m1),烧杯。 2、试剂:0.0600g→1000ml的K2Cr2O7的硫酸标准溶液(0.005mol/L),NaI溶液(10g/L),NaNO2溶液(50g/L)。 三、实训原理 紫外-可见分光光度计是单光束手工操作仪器,备有钨灯及氢灯两种光源,可用于可见及紫外光区。它是具有色散能力较高的单色器,狭缝可调,可得到较纯的单色光,适用于定性鉴别和定量分析。 新仪器启用前或仪器修理后或长期使用后均需对仪器的性能进行检定。仪器的性能主要是波长准确度与重现性、单色器的分辨能力、吸光度的准确性和重现性及杂散光等。 四、实训操作 1、吸收池配对性试验 每次测定前,应先用蒸馏水做吸收池配对性试验。两个吸收池透光率T相差应<0.5%。 2、波长准确性与重现性 校验波长是否准确,可用谱线校正法。在吸收池中置一白纸挡住光路,转动波长至486nm附近,遮光观察白纸上蓝色斑。轻微移动波长,至使此蓝色光斑最亮时止。根据调整的波长范围观察所得到的相应颜色,并进行对比核对,判断波长的准确性。 3、吸收度的准确性与透光率重现性 在紫外-分光光度计中用作读取透光率的电位器的精度可达到0.2%,但是,由于其他原因,例如电压变化等,实际测得的透光率误差大于0.2%。一般要求透光率的精度、稳定性和重现性不超过0.5%。透光率的准确性可用已知吸光系数的物质核对,常用的是重铬酸钾。取在120℃干燥至恒重的基准K2Cr2O7约60mg,精密称定,用H2S04溶液(0.005mol/L)溶解并稀释至1000ml,摇匀。按下表规定的吸收峰与谷波长处测定。 将测得的吸光度,计算出其吸光系数,取平均值与表中规定值核对,如相对偏差在土1%以内,则透光率准确性好。K Cr O的H S0溶液(0.005mol/L)的E cm1% 透光率重现性可结合透光率准确性实验同时进行,即在固定波长、溶液浓度以及狭

721可见分光光度计使用方法

721可见分光光度计使用方法 一、开机预热 仪器在使用前应预热30分钟。 二、波长调整 转动波长旋钮,并观察波长显示窗,调整至需要的测试波长。 注意事项:转动测试波长调100%T/0A后,以稳定5分钟后进行测试为好(符合行业标准及质监局检定规程要求)。 三、设置测试模式 按动“功能键”,便可切换测试模式。相应的测试模式循环如下:*开机默认的测试方式为吸光度方式 四、结果打印(721型无此功能) 在得到测试结果后按动“打印”键便可打印结果(需外接标准串行打印机)。 五、光源切换(适用于752、754、755B型) 因为仪器在紫外区和可见区使用不同的光源,所以需要波动光源切换杆来手动的切换光源。建议的光源切换波长为340nm,即200nm-339nm适应氘灯,340nm-1000nm使用卤素灯。 注意事项:如果光源选择不正确,或光源切换杆不到位,将直接影响仪器的稳定性。特殊测试要求除外。 六、比色皿配对性 仪器所附的比色皿是经过配对测试的,未经配对处理的比色皿将影响样品的测试精度。适应比色皿一套两只,供紫外光谱区使用,置入样品架时,两只石英比色皿上标记Q或箭头方向要一致。玻璃比色皿一套四只,供可见光谱区使用。 石英比色皿和玻璃比色皿不能混用,更不能和其他不经配对的比色皿混用。用手拿比色皿应握比色皿的磨砂表面,不应该接触比色皿的头光面,即透光面上不能有手印或溶液痕迹,待测溶液中不能有气泡、悬浮物,否则也将影响样品的测试精度。比色皿在使用完毕后应立即清洗干净。 七、调T零(0%T) 1.在T模式时,将遮光体置入样品架(如图七所示),合上样品室盖,并拉动样品架拉杆使其进入光路。然后按动“调0%T”键,显示器上显示“00.0”或“-00.0”,便完成调T零,完成调T零后,取出遮光体。 注意事项:1.测试模式应在透射比(T)模式; 2.如果未置入遮光体合上样品室盖,并使其进入光路便无法完成调T零;

紫外可见分光光度计 文档

紫外可见分光光度计 一.基本简介 紫外可见分光光度计简介1852年,比尔(Beer)参考了布给尔(Bouguer)1729年和朗伯(Lambert)在1760年所发表的文章,提出了分光光度的基本定律,即液层厚度相等时,颜色的强度与呈色溶液的浓度成比例,从而奠定了分光光度法的理论基础,这就是著名的比尔朗伯定律。1854年,杜包斯克(Duboscq)和奈斯勒(Nessler)等人将此理论应用于定量分析化学领域,并且设计了第一台比色计。到1918年,美国国家标准局制成了第一台紫外可见分光光度计。此后,紫外可见分光光度计经不断改进,又出现自动记录、自动打印、数字显示、微机控制等各种类型的仪器,使光度法的灵敏度和准确度也不断提高,其应用范围也不断扩大。 [1]从仪器理论上讲,各种紫外可见分光光度计,都是根据比耳定律设计的;而比耳定律研究的是在平行光、单色光的条件下,物质对光的吸收。但是,紫外可见分光光度计的单色器不可能得到真正的单色光。并且,单色器系统不同,它产生的单色光的纯度(光谱带宽)也不同,并且光通过物质时,也不可能是真正的平行光。因此,严格地说,实际工作中,任何紫外可见分光光度计,都不可能真正满足比耳定律。所以,紫外可见分光光度计都是针对近似平行光、近似单色光的条件设计的。所以,就看谁设计、制造仪器最能满足或接近比耳定律(或产生的比耳定律的偏离最小),谁的仪器到了使用者手里,由于非平行光或非单色光产生的分析误差最小,谁的仪器就最好(当然还有杂散光、噪声、稳定性等要求)。这就是从仪器学理论,去看紫外可见分光光度计的设计、制造误差的最根本、最本质的问题;也是使用者从仪器学理论去看紫外可见分光光度计的分析误差的最根本、最本质的问题。 二.工作原理 吸收光谱 物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有各自不同的分子、原子和不同的分子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这就是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。

紫外-可见光分光光度计

紫外-可见光分光光度法 一、技术原理 紫外-可见分光光度法是在190?800mn波长范围内测定物质的吸光度,用于鉴别、杂质检查和定量测定的方法。当光穿过被测物质溶液时,物质对光的吸收程度随光的波长不同而变化。因此,通过测定物质在不同波长处的吸光度,并绘制其吸光度与波长的关系图即得被测物质的吸收光谱。从吸收光谱中,可以确定最大吸收波长λmax和最小吸收波长λmix。物质的吸收光谱具有与其结构相关的特征性。因此,可以通过特定波长范围内样品的光谱与对照光谱或对照品光谱的比较,或通过确定最大吸收波长,或通过测量两个特定波长处的吸收比值而鉴别物质。用于定量时,在最大吸收波长处测量一定浓度样品溶液的吸光度,并与一定浓度的对照溶液的吸光度进行比较或采用吸收系数法求算出样品溶液的浓度。 二、浓度测定基本原理 朗伯一比尔(Lambert - Beer)定律是分光光度法的基本原理。当一束单色光通过一均匀的溶液时,一部分被吸收,一部分透过,设入射光的强度为I0,透射光强度为I,则I/I0为透光度,用T表示。 当溶液的液层厚度不变时,溶液的浓度越大,对光的吸收程度越大,则透光度越小。 即:-lgT=a1*c(式中a1为常数,c为浓度) 当溶液浓度不变时,溶液的液层厚度越大,对光的吸收程度越大,则透光度越小。

即:- lgT=a2*b(b为液层厚度) 将以上两式合并可用下式表示:lgT=a*b*c 研究表明:溶液对光的吸收程度即吸光度(A)又称消光度(E)或光密度(OD)与透光度(T)呈负对数关系,即:A=-lgT 故A=a3*b*c(a3为吸光系数)。 上式为朗伯比尔定律,其意义为:当一束单色光通过一均匀溶液时,溶液对单色光的吸收程度与溶液浓度和液层厚度的乘积成正比。 三、仪器的矫正和检定 1.波长矫正 常使用高氣酸钦溶液校正双光束仪器,以10%高氯酸溶液为溶剂,配制含氧化钬(Ho2O3 ) 4 % 的溶液,该溶液的吸收峰波长为241. 13nm,278. 10nm,287. 18nm,333. 44nm,345. 47nm,361. 31nm,416. 28nm,451. 30nm,485. 29nm,536. 64nm和640. 52nm。仪器波长的允许误差为:紫外光区±1nm,500nm附近±2nm。 2.吸光度的准确度 可用重铬酸钾的硫酸溶液检定。取在120℃干燥至恒重的基准重铬酸钾约60mg,精密称定,用0.005mol/L硫酸溶液溶解并稀释至1000mL,在规定的波长处测定并计算其吸收系数,并与规定的吸收系数比较,应符合表中的规定。

(完整版)紫外分光光度计的使用方法

UV2600型紫外分光光度计操作规程 一、开机 1.打开仪器电源。 2.打开电脑,点击UV Analyst 进入光谱分析软件。 3.软件将自动搜索仪器端口,点击“联机”,软件与仪器联机成功。 二、选择测试模式 根据实验需求选择测试模式。仪器提供的测试模式有“波长扫描”“时间扫描”“定点测量”“定量测量”“核酸测量”和“蛋白质测量” 【波长扫描】主要用以检测样品对一定范围波长光的吸收情况,以便对样品进行定性测量。 1.点击左侧主功能栏中的“波长扫描”即可进入波长扫描界面。 2. 根据实验要求,在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以扣除空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 注意:在“基线测量”中所选择的基线必须与参数设置中基线一致! 【时间扫描】是检测样品在特定波长范围内吸光度(或透过率)随时间的推移而发生变化情况。主要用以检测样品的稳定性或进行化学动力学研究。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求,在“设置”设定检测参数。 3 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“基线测量”以后扣除样品空白的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“扫描”。以完成样品波长扫描检测。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存谱图。 【定点测量】是检测样品在特定波长中的吸光度(或透过率)。 1. 点击左侧主功能栏中的“定量测量”即可进入定量测量界面。 2. 根据实验要求,在“设置”设定检测参数。 3. 在样品室内参比及检测光路同时放入装有空白溶液的比色皿。 4. 点击“自动校零”,以扣除该波长中空白溶液的背景吸收。 5. 将检测光路中的空白溶液换成待测样品。 6. 点击“测量”,以完成样品的吸光度(或透过率)的测量。 7. 点击“保存”并选择保存路径即可保存测量结果。 【定量测量】可通过检测标准样品或输入特定的系数建立标准曲线后测量样品的浓度值。

721分光光度计分解

1 仪器的主要用途 721可见分光光度计是专供工厂、矿山、医院以及各科研单位的化验室,在可见光谱区范围内(360nm~800nm)进行定量比色分析用。仪器在410nm~710nm之间可增加消光片或采用有色溶液作被测溶液的陪衬代空白,以便提高分析灵敏度和提高消光读数范围。 2 仪器的工作环境 该仪器应安放在干燥的房间内,使用时放置在坚固平稳的工作台上,室内照明不宜太强,热天时不能用电扇直接向仪器吹风,防止灯泡灯丝发光不稳。尽量远离高强度的磁场、电场及发生高频波的电器设备。避免在有硫化氢、亚硫酸氟等腐蚀性气体的场所使用。推荐使用交流稳压电源,以加强仪器的抗干扰性能。使用功率为100W以上的电子交流稳压器或交流恒压稳压器。 3 仪器的主要技术指标及规格 a)波长范围:360nm~800nm。 b)波长准确度:360nm~600nm±3nm;600nm~700nm±5nm;700nm~800nm±8nm。 c)透射比准确度:±2%。 d)透射比重复性:≤0.5%。 e)稳定性:暗电流漂移不超过0.5%/3min。 f)仪器外形尺寸:480mm长×370mm宽×210mm高。 g)仪器净重:18kg。 4 仪器的工作原理 分光光度计的基本原理是溶液中的物质在光的照射激发下,产生了对光吸收的效应,物质对光的吸收是具有选择性的。各种不同的物质都具有其各自的吸收光谱,因此当某单色光通过溶液时,其能量就会被吸收而减弱,光能量减弱的程度和物质的浓度有一定的比例关系,也即符合于比色原理——比耳定律。 τ=I/I o logI o/I=KCL A=KCL 其中:τ透射比I o 入射光强度 I 透射光强度 A 吸光度 K 吸收系数L 溶液的光径长度 C 溶液的浓度

722可见光分光光度计操作规程

722可见光分光光度计操作规程 环境要求 1、仪器应安装在无震动,无强烈电磁场干扰、无强光照射的室内工作台上,避免灰尘及腐蚀性气体。 2、室内环境温度为5-35℃,相对湿度小于85%。 3、电源电压220V±22V,频率50HZ±1HZ。 操作要点: 1、插上电源,打开开关,打开试样室盖,按“A/T/C/F”键,选择“T%”状态,选择测量所需波长,预热20分钟。 2、调节波长旋钮至测定波长,并稍等几分钟。 3、开始测量前要先调节仪器的零点,方法为: 保持在“T%”状态,使光路通畅,当关上试样室盖时,屏幕应显示“100.0”,如否,按“T100%”键;打开试样室盖,屏幕应显示“000.0”,如否,按“0%”键,重复2-3次,仪器本身的零点即可调好,可以开始测量。 以标准对比法为例: 3、用空白溶液润洗一个比色皿,装样到比色皿的3/4处(必须确保光路通过空 白溶液中心),用吸水纸吸干比色皿外部所沾的液体,将比色皿的光面对准光路 放入比色皿架,用同样的方法将所测样品装到其余的比色皿中并放入比色皿架中。4、将装有待测溶液的比色皿拉入光路,关上试样室盖,按“A/T/C/F”键,调 到“Abs”,按“Abs0”键,屏幕显示“0.000”,将其余测试样品一一拉入光路,记下测量数值即可(不可用力拉动拉杆)。 5、测量完毕后,将比色皿清洗干净(最好用乙醇清洗),擦干,放回盒子,关 上开关,拔下电源,罩上仪器罩,并打扫卫生,才可离开。 6、本操作要点只针对测量吸光度而言。 注意事项: 1、仪器使用前需开机预热20分钟。 2、开关试样室盖时动作要轻缓。 3、不要在仪器上方倾倒测试样品,以免样品污染仪器表面,损坏仪器,一定 要将比色皿外部所沾样品擦干净,才能放进比色皿架进行测定。 4、每套仪器所配套的变色皿,不能与其它仪器上的比色皿单个调换。 5、如大幅度改变测试波长,在调整“0”和“100%”后稍等片刻,稳定后重新调整即可工作。 6、仪器表面宜用温水擦拭,请勿使用酒精、丙酮等溶剂清洁,不使用时请加防尘罩。比色皿每次使用后应清洗干净,并用镜头纸轻拭干净,存于比色皿盒中备用。 7、有任何疑问请报告指导老师。

紫外可见分光光度计及其应用

紫外可见分光光度计及其应用 科技论文写作期末作业 西北民族大学生命科学与工程学院 11级生物技术(1)班 符朝方 学号:P112114841 紫外可见分光光度计及其应用 李诗哲 西北民族大学生命科学与工程学院兰州 730100 摘要:紫外可见分光光度计对于分析人员来说是最有用的分析工具之一,几乎每一个分析实验室都离不开紫外可见分光光度计。下面介绍了紫外分光光度计的原理、结构及其特点,并介绍了它在生物领域的应用及其他方面的应用1引言:紫外可见分光光度计是一类很重要的分析仪器,无论在物理学、化学、生物学、医学、材料学、环境科学等科学研究领域,还是在化工、医药、环境检测、冶金等现代生产与管理行业,紫外可见分光光度计都获得了日益广泛的应用。 2原理:紫外可见分光光度法 【1】紫外可见分光光度法是根据物质分子对波长为200~760nm的电磁波的吸收特性所建立起来的一种定性、定量和结构分析方法。操作简单、准确度高、重现性好。波长长的光线能量小,波长短的光线能量大。分光光度测量是关于物质分子对不同波长和特定波长处的辐射吸收程度的测量。物质的吸收光谱本质上就是物质中的分子和原子吸收了人射光中的某些特定波长的光能量,相应地发生了分子振动能级跃迁和电子能级跃迁的结果。由于各种物质具有不同的分子、原子和不同的分

子空间结构,其吸收光能量的情况也就不会相同,因此,每种物质就有其特有的、固定的吸收光谱曲线,可根据吸收光谱上的 某些特征波长处的吸光度的高低判别或测定该物质的含量,这是分光光度定性和定量分析的基础。分光光度分析就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。 【2】2.1有机化合物的紫外可见吸收光谱 有机化合物的电子跃迁 与紫外可见吸收光谱有关的电子有三种[[4],即形成单键的σ电子、形成双键的π电子以及未参与成键的n电子。 跃迁类型有:σ?σ*、n?σ*,π?π*、n?π四种。 饱合有机化合物的电子跃迁类型为σ?σ*,n?σ*跃迁,吸收峰一般出现在真空紫外区,吸收峰低于200nm,实际应用价值不大。不饱合机化合物的电子跃迁类型为n?π*,π?π*跃迁,吸收峰一般大于200nm. 2.2有机化合物的吸收带 吸收带(absorption band):在紫外光谱中,吸收峰在光谱中的波带位置。根据电子及分子轨道的种类,可将吸收带分为四种类型。 (1)R吸收带 (2)K吸收带 (3)B吸收带 (4)E吸收带 2.3无机化合物的紫外可见吸收光谱 无机化合物的UV-Vis光谱吸收光谱主要有:电荷 迁移跃迁及配位场跃迁。 (1)电荷迁移光谱

721型分光光度计使用及波长的检测与校正

在目标:1.掌握比色分析的基本原理 2.规范使用721型分光光度计及利用镨钕滤光片法对其波长的检测实验用品:721型分光光度计、镨钕滤光片、5%CuSO 4液、纱布、比色杯等内容: 一、721型分光光度计的使用 【原理】 利用被测物的有色溶液对某一特定波长的光谱具有选择性吸收的特性,将吸收的光谱按不同强度转变相应的电能,再将电量的变化用检流计显示出来,将显示的电量以光量强度(D或A)计算,根据朗伯-比尔定理,即D=KCL,即吸光度与溶液的浓度与厚度的乘积成正比关系。 【操作步骤】 接通电源→选择波长→粗调透光度T“O”(开盖)和透光度T“100%”(关盖)→预温20min→放入被测液→精确调节透光度T“O”(开盖)和透光度T“100%”(关盖)→测定,读取各管吸光度→收场(关电源、罩仪器罩、登记、清洗比色杯和纱布等) 【注意事项】 1.仪器需防震、防潮、避光。 2.比色时,手拿比色杯的毛面,液体倒杯高的或,比色杯不能用硬毛刷刷洗,也不能用高温烘烤。 二、721型分光光度计波长的检测与校正(镨汝滤光片法) 1.在比色槽的光路上放一张小白纸,调节波长至580nm。 2.旋动光量T100%的旋钮至最大,在小白纸上应看到桔黄色的光斑。 3.若光斑不是橘黄色,左右旋转波长调节旋钮使之出现橘黄色的光斑,粗略判断波长偏离的程度,选择检测的起始波长。

4.调节波长至起始波长,用蒸馏水或空气调T“0”和T“100%”。 5.将镨汝滤光片推入光路中,记录T或A值,退出镨汝滤光片。 6.调节波长至另一值,用蒸馏水或空气调T“0”和T“100%”。 7.再将镨汝滤光片推入光路中,记录T或A值,退出镨汝滤光片8.如此反复测定直至T值为最小或A值为最大,记录此点的指示波长。 9.将A值最大时的波长减去镨汝滤光片最大的吸收波长529nm,即得被校比色计的波长误差。 10.如波长精度超出允许误差. (360~600nm≤3nm;600~700≤5nm;700~800≤8nm),打开分光光度计左侧调节窗口盖板,用螺丝刀试调波长的调节杆。具体位置详见仪器使用说明书。 11.试调波长的调节杆后,再按步骤3~8操作,直至分光光度计的波长精度误差在其允许范围内即可。

72型分光光度计工作原理

72型分光光度计工作原理 72型分光光度计是可见光分光光度计,波长范围为420nm~700nm,它由三大部分组成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。 72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律,它是根据相对测量原理工作的,即先选定某一溶剂作为标准溶液,设定其透光率为100%,被测试样的透光率是相对于标准溶液而言的,即让单色光分别通过被测试样和标准溶液,二者能量的比值就是在一定波长下对于被测试样的透光率。如图所示,白色光源经入射狭缝、反射镜和透光镜后,变成平行光进入棱镜,色散后的单色光经镀铝的反射镜反射后,再经过透镜并聚光于出射狭缝上,狭缝宽度为0.32nm。反射镜和棱镜组装在一可旋转的转盘上并由波长调节器的凸轮所带动,转动波长调节器便可以在出光狭缝后面选择到任一波长的单色光。单色光透过样品吸收池后由一光量调节器调节为适度的光通量,最后被光电电池吸收,转换成电流后由微电计指示,从刻度标尺上直接读出透光率的值。 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。 分光光度计的简单原理 分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被

吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 核酸的定量 核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。每种核酸的分子构成不一,因此其换算系数不同。定量不同类型的核酸,事先要选择对应的系数。如:1OD的吸光值分别相当于50μg/ml的dsDNA,37μg/ml的ssDNA,40μg/ml的RNA,30μg/ml的Olig。测试后的吸光值经过上述系数的换算,从而得出相应的样品浓度。测试前,选择正确的程序,输入原液和稀释液的体积,尔后测试空白液和样品液。然而,实验并非一帆风顺。读数不稳定可能是实验者最头痛的问题。灵敏度越高的仪器,表现出的吸光值漂移越大。 事实上,分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度。如EppendorfBiophotometer的准确度≤1.0%(1A)。这样多次测试的结果在均值 1.0%左右之间变动,都是正常的。另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液,如TE,可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素:由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗

(完整版)紫外可见分光光度计--原理及使用

应用 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸、蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。我们实验室主要是用来测物质的光度以求得物质的浓度或者酶活。 基本原理 分子的紫外可见吸收光谱是由于分子中的某些基团吸收了紫外可见辐射光后,发生了电子能级跃迁而产生的吸收光谱。它是带状光谱,反映了分子中某些基团的信息,可以用标准光谱图再结合其它手段进行定性分析。 朗伯-比尔定律:当一束平行单色光通过含有吸光物质的稀溶液时,溶液的吸光度与吸光物质浓度、液层厚度乘积成正比,即 A= kcl 式中比例常数k与吸光物质的本性,入射光波长及温度等因素有关。c为吸光物质浓度,l为透光液层厚度。 组成 各种型号的紫外-可见分光光度计,就其基本结构来说,都是由五个基本部分组成,即光源、单色器、吸收池、检测器及信号指示系统。 1.光源 在紫外可见分光光度计中,常用的光源有两类:热辐射光源和气体放电光源。热辐射光源用于可见光区,如钨灯和卤钨灯;气体放电光源用于紫外光区,如氢灯和氘灯。 2.单色器 单色器的主要组成:入射狭缝、出射狭缝、色散元件和准直镜等部分。 单色器质量的优劣,主要决定于色散元件的质量。色散元件常用棱镜和光栅。 3.吸收池 吸收池又称比色皿或比色杯,按材料可分为玻璃吸收池和石英吸收池,前者不能用于紫外区。吸收池的种类很多,其光径可在0.1~10cm之间,其中以1cm光径吸收池最为常用。 4、检测器 检测器的作用是检测光信号,并将光信号转变为电信号。现今使用的分光光度计大多采用光电管或光电倍增管作为检测器。 5、信号显示系统 常用的信号显示装置有直读检流计,电位调节指零装置,以及自动记录和数字显示装置等。

紫外可见分光光度计操作规程

紫外可见分光光度计操作规程 1、目的 规范设备管理,正确使用、维护设备,防止设备事故发生,确保检测工作顺利开展。 2、适用范围 适用于TU-1810S紫外可见分光光度计的操作。 3、基本要求 3.1准备工作 3.1.1确认环境温度、相对湿度是否满足要求(要求温度为15℃~35℃、相对湿度不大于80%); 3.1.2开机前打开仪器样品室盖,观察确认样品室无挡光物后再打开电源。 3.2启动 3.2.1打开电源,仪器显示初始化工作界面,仪器将进行自检并初始化,若初始化正常结束,系统将进入仪器操作主界面; 3.2.2仪器需进行预热使光源达到稳定后开始测量,预热时间一般为15~30分钟。 3.3运行 3.3.1选择数字键“3”→按“F1”→按“1”键选择工作模式为“标样法”→按“2”键用数字键将波长值输入,输入完成按“ENTER”键→按“3”键选择需要的浓度单位。 3.3.2继续按“F1”键进入标样法工作曲线参数设置界面→按“1”键输入标样数,输入完成按“ENTER”键→按“2”键,按照系统提示用数字键输入标样浓度,输入完成按“ENTER”键→再按“2”键,在一号池位置放置空白溶液,按“A/Z”键进行自动校零,校零结束将要测量的标样放入对应的比色池位置,按“START/STOP”键对当前测试的标样进行测量→测量结束系统提示输入下一号标样的浓度值,重复以上操作,直至标准曲线测试完成。

3.3.3按“3”键可看到标准曲线、曲线方程及相关系数,将线性方程及相关系数记录在原始记录本上,按“RETURN”键返回定量测量参数设置界面。 3.3.4按“F3”键进入试样池设置→再按“1”键选择试样池为5联池→按“2”键可利用数字键对样品池数进行设置,输入完成后按“ENTER”键→继续按“3”键选择一号池空白校正为“否”→按“4”键对移动试样池数进行设置,按“RETURN”键返回到定量测量画面→在一号池位置放入空白溶液,按“A/Z”键对当前工作波长进行零吸光度校正,将测量的样品依次放入设定的使用样品池中,按“START/STOP”键测量样品的浓度值。 3.4结束 测量结束将比色皿用去离子水冲洗干净倒置晾干,清理台面,关闭电源开关,并及时填写相关记录。 4、维护方法 4.1每次使用后应检查样品室是否积存有溢出溶液,经常擦拭样品室,以防废液对部件或光路系统腐蚀。 4.2仪器使用完毕应盖好防尘罩,可在样品室及光源室内放置硅胶袋防潮,但开机时必须取出。 4.3仪器液晶显示器及键盘日常使用时应注意防止划伤,并注意防水、防尘、防腐蚀等。 4.4定期进行性能指标检测,发现问题及时上报。 4.5长期不使用仪器时,应定期更换硅胶,每隔两星期开机运行一小时,确保仪器的正常使用。 5、安全操作注意事项 5.1操作设备时应确保环境的温度及相对湿度满足要求(温度为15℃~35℃、相对湿度不大于80%)。 5.2操作时不允许碰伤光学镜面,且不可以擦拭其镜面。 5.3仪器周围无有害气体及强腐蚀性气体,且不应该有强震动源。 5.4设备使用电源为220±10%,开机前应确认电源是否符合设备要求。 6、紧急应对措施

721G型可见分光光度计

1 适用范围 规范可见分光光度计的操作规程,保证仪器的正确运行和检测工作的顺利进行,维护仪器安全,适用于721G型可见分光光度计的使用、维护与保养、期间核查。 2安装环境要求 温度:5-35℃;湿度:≤85%; 电压:AC220V(±22V);电频:50HZ±1HZ; 3 操作方法 3.1 开机预热 仪器接通电源,微机进行系统自检,LCD显示窗口显示相应的产品型号后,仪器进入工作状态。此时显示窗口在默认的工作模式T。 注:为使仪器内部达到热平衡,开机预热时间不小于30分钟。 3.2 改变波长 通过旋转波长手轮可改变仪器的波长,并在波长观察窗的刻度选择所需的波长。 3.3 放置参比与待测样品 选择测定用的比色皿,把盛放参比和待测的样品放入样品架内,通过样品架拉杆来选择样品的位置。当拉杆到位时有定位感,到位时轻轻推拉一下以保证定位的正确。 3.4 调0%T、调100%T/0A 键和 键对仪器进行调零和调满度、吸光度零。 3.5显示方式的选择 本仪器具有四种显示方式,开机时仪器的初始状态为透射比显示方式(T)。 1.透射比(Trans) 2.吸光度(Absorbance) 3.浓度(Conc.) 4.浓度因子(Factor) 3.6 浓度直读设定 按键,选择浓度直读(C)方式,按和键输入用户 需要的标样浓度设定值。再放入标样后再按键确认,再进行未知样品的测试。此时浓度因子也会自动计算后相应的改变,用户可查看F值后记录,在以后的测试中直接以浓度因子设定来进行测试同样的样品,无需再用标样来进行标定。 注:在进行浓度直读设定时,应放入标准样品后设定。 4 维护和保养 4.1 平时注意保持仪器内光检测器的高度干燥,以维持具高灵敏度及信号的稳定性。 4.2 比色皿用毕,应立即用蒸馏水或清水冲洗清洁,并用干燥柔软的纱布或纸将水迹擦干,以防表面光 洁度的变化,影响光透光率。 4.3 保持仪器的清洁,为避免仪器积尘和玷污,在其不使用期间,应用布或塑料防尘罩盖住整台仪器; 4.4 仪器在长期间使用后或经运输中剧烈震动后,需检查仪器波长准确度(具体事项参考说明书); 5期间核查 5.1仪器检定周期为1年,每2次检定之间对本仪器进行1次期间核查。 5.2检查仪器各部件(开关、指示灯等)能否正常工作,各易损零部件有无松动、老化现象,及时更换。

721分光光度计操作规程

721分光光度计操作规程 一、操作基本规范 1、基本操作程序 1)按6.1说明开机预热(如为持续测试则免去此步骤)。 2)按6.2说明调整波长。 3)按6.3说明调整滤光片位置。 4)按6.4说明,打开样品室盖,将参比样品(或留一个空位)和测试样品放入槽架,拉动“比色皿槽架拉杆”调整比色皿槽架位置,是参比样品对准光路后,合上样品室盖。5)按6.5说明,选择透射比测试模式。如初开机可免选择。 6)按6.6说明,在样品室盖合上时,按100%键使仪器自动调整100%。 7)按6.7说明,打开样品室盖,按0%键使仪器自动调整0%。 如发现调整100%和调整0%相互有影响,可交替进行多次,直至成功。允许最后一位跳1。成功后测透射比可立即进行测试,要测吸光度可按“模式”键进入吸光模式测试。 2、测定非浑浊性液体样品的透射比 1)拉动比色皿槽架拉杆,使待测样品的比色皿对准光路,此时左侧有箭头指向“测量中” 并闪动,数据稳定后箭头消失,可由数据显示窗读出样品的透射比值,记录数据。 2)继续测试其它待测样品。测试结束,或转其它测试,关闭仪器电源。 3、绘制非常浑浊性液体样品的透射比图谱 1)在要求测量的波长范围内按所需波长间隔,每个波长执行7.1和7.2各步骤,记录每个波长的波长值和相应的透射比值。 2)取一坐标纸,横坐标(X轴)为波长,纵坐标(Y轴)为透射比,将要求的波长范围内每一组数据标记在坐标纸上,用曲线尺光滑地连接各数据点,得到待测样品的波长—透射比曲线图谱。 4、测定浑浊性液体样品的吸光度 1)按“模式”键,进入吸光度测试模式。 2)拉动比色皿槽架拉杆,使待测样品的比色皿对准光路,由数据显示窗读出样品的吸光度值,记录数据。 3)继续测定其它样品。测试结束,或转其它测试,或关闭仪器电源。 5、绘制非浑浊性液体样品的吸收图谱 1)按“模式”键,进入吸光度测试模式。 2)在要求测量的波长范围内按所需波长间隔,每个波长执行7.1和7.4各步骤,记录每个波长的波长值和相应的吸光度值。 3)取一坐标纸,横坐标(X轴)为波长,纵坐标(Y轴)为吸光度,将要求测量的波长范围内每一组数据标记在坐标纸上,用曲线尺光滑地连接各数据点,得到测量样品的波长---吸光度曲线图谱。 6、使用标准曲线对样品定量 1)配置系列标准样品溶液A、B、C…,分别注入比色皿。 2)每个标准样品执行7.1和7.4各步骤,记录每个标准样品的编号和相应的吸光度值。3)继续测量待测样品,记录其吸光度值。 4)如有多个待测样品,逐一进行测量并记录他们的吸光度值。 5)制作标准工作曲线:取一坐标纸,以横坐标(X轴)为浓度坐标,纵坐标(Y轴)为吸光度坐标,适当标定坐标标尺,在图纸上找出各个对应样品溶液浓度和相应吸光度值的坐标点,画一直线,使各坐标点分布在直线两侧,且与直线间的距离最小。直线是否通

分光光度计的原理分类

分光光度计的原理分类 一.分光光度计的一般原理是什么? 分光光度计是利用分光光度法,通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析。 不同种类的分光光度计的基本原理相似,都是利用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源。光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,通过测量样品的吸光值,经过计算可以转化成样品的浓度。样品的吸光值与样品的浓度成正比。 二.分光光度计有哪些不同的类型,不同种类的应用领域有什么区别? 分光光度计有哪几种不同的分类方式: 1.分光光度计按照波长及应用领域的不同可以分为:(1)可见光分光光度计:测定波长范围为400~760 nm的可见光区;(2)紫外分光光度计:测定波长范围为200~400nm的紫外光区;(3)红外分光光度计:测定波长范围为大于760nm的红外光区;(4)荧光分光光度计:用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱;(5) 原子吸收分光光度计:光源发出被测的特征光谱辐射,被经过原子化器后的样品蒸气中的待测元素基态原子所吸收,通过测定特征辐射被吸收的大小,来求出被测元素的含量。 2.分光光度计按自动化程度分类:可分为手动、半自动、自动分光光度计。 3.分光光度计按软件可分为:带扫描、不带扫描。 三.分光光度计最常见的用途和常用波长有哪些? 1.核酸的定量 核酸的最高吸收峰的吸收波长260 nm。利用260nm的波长可以定量测量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA的浓度。 除了核酸浓度,分光光度计同时显示几个非常重要的比值表示样品的纯度。如A260/A280的比值,用于评估样品的纯度,因为蛋白的吸收峰是280nm。纯净的样品,比值大于1.8(DNA)或者2.0(RNA)。如果比值低于1.8 或者2.0,表示存在蛋白质或者酚类物质的影响。

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