新生神经元组织解离

原代海马神经元细胞培养

原代海马神经元细胞培养 溶液的配制： (1) 4%多聚甲醛溶液：4g多聚甲醛溶于100ml pH=7.4的0.01mol/l PBS中，混匀过滤， 室温保存。 (2)磷酸盐缓冲液（PBS）（0.01mol?l-1）：KH2PO4，0.1g；Na2HPO4?12H2O，1.7g；KCl， 0.1g；NaCl，4.0g，双蒸水加至500ml，pH=7.2～7.4。用0.2μm滤膜过滤，4℃保存。 (3) 1%蛋白酶的配制：用磷酸缓冲液（pH=7.2～7.4）配制成浓度为1%的胰蛋白酶母液 冻存。使用时，用解剖液稀释至0.25%。 (4) 培养皿涂被多聚赖氨酸：配制0.01%的多聚赖氨酸，分装冻存。将上述多聚赖氨酸 放入培养皿中涂两遍，自然晾干后备用。 (5) 解剖液：葡萄糖，3.0g；蔗糖，7.5g；NaCl，8.0g；KCl，0.4g；Na2HP04?7H20，0.18g； KH2PO4，0.03g；HEPES，2.14g；加双蒸水1000ml，调pH=7.0～7.4，过滤，4℃保存。 (6) 种植液：DMEM 79%，胎牛血清，10%；马血清，10%；谷氨酰胺培养液1%。 (7) 饲养液：Neurobasal培养基，97%；谷氨酰胺培养液，1%；B-27，2%。 (8) 阿糖胞苷：用双蒸水配制成浓度为l mg?ml-1的母液储存。用0.2μm滤膜过滤，-20℃ 储存。使用时，取6μl母液加入2ml培养液中，终浓度为3μg?ml-1。（根据实验情况调整浓度） 大鼠原代海马神经元细胞的培养 (1) 新生SD大鼠（＜12h），75%酒精浸泡消毒后断头，剥离出全脑并将其放入盛有解 剖液的培养皿中。 (2) 在解剖液中解剖大脑，分离出海马，移入另一盛有解剖液的培养皿中。在分离出全 部的海马后，去除血管等组织，然后用剪刀将海马分成数小块，放入盛有0.25%胰蛋白酶的培养皿中，将培养皿放入9%CO2、37℃消化20min。 (3) 将培养皿中的海马碎片移入离心管中，去除含胰蛋白酶的液体并用种植液将海马碎 片冲洗2～3遍，终止酶的消化作用。

大学新生适应性问题团体辅导方案

大学新生适应性问题团体辅导方案 大学新生适应性问题团体辅导方案 大学新生适应性问题团体辅导方案团体名称：“新起点，青春飞扬”领导者：XXX督导者：XX 团体性质：同质性的、封闭式的、结构式的人际关系提升小组成员对象：在校的大学新生，男女生数量要求基本平衡团体人数：15~18人 筛选方式：可采取新生自主报名，或是新生辅导员推荐团体时间：20xx年5月28日起，总计两个小时团体次数：三次 团体地点：需要备有活动桌椅、多媒体的教室 【活动目标】 （1）通过团体辅导，协助成员认识自我，对自己的认可以及自我概念的明确把握，并且对自己在新环境中的定位有一定的了解。 （2）通过团体辅导，使成员之间在活动中相知相识，相互引导，发展良好的人际关系，让他们形成团体氛围、增进成员间的相互信任，对大学生活有全新的理解与把握。 （3）通过团体辅导，明确本次系列活动的目的，交流参加此次系列活动所要达到的期望，并培养对新环境的一种归属感和被接纳感。【活动过程】1、热身活动内容：刮大风 目的：活跃团体气氛，营造良好的团体环境，激发团员参与团体活动的积极性。时间：10分钟 方法：要求团员围坐一圈，按照领导者的指令迅速地抢一个座位。如：领导者

说：大风吹呀大风吹，吹所有穿黑色衣服的同学，那么所有穿黑色衣服的同学就迅速起身换座位，这时，领导者加入其中，让没有座位的同学继续主持游戏。规则：若是成员成为三次领导者，则该成员需要表演一个节目，用来展现自己，让成员更好的了解自己。 2、主要活动 A.内容：解开千千结 目的：使成员体验到，人际关系错综复杂，常常需要人们之间相互帮助， 才能顺利渡过“难关”，并帮助同学们了解及时沟通的重要性和团队协作对一个团队成长的重大意义。时间：10~15分钟 方法：首先，领导者让大家手拉手围成圈，认清自己的左手和后手分别拉 的是那位同学，然后松手。随着领导者说开始，大家开始自由走动，领导者说停的时候，大家寻找自己刚才左右手拉的同学，这样就形成了一个错综复杂的结，大家在手不松开的情况下，无论用什么方法，将交错的“千千结”解成一个大圆圈。解开后给自己与队友一个热烈的掌声。 B.内容：信任之旅 目的：培养成员间的相互接纳和信任，体验信任别人和被别人信任的感受。时间：30分钟左右 方法：团体成员四人一组，一组做“盲人”，一位做帮助“盲人”的人， 另外两人可以做一些道路上的障碍，妨碍“盲人”的行走。盲人蒙上眼睛，原地转三圈，暂时失去方向感。在帮助人的搀扶下，沿着主持人选定的路线，带领“盲人”顺利通过路障。期间不能讲话，只能用动作帮助“盲人”通过路障到达目的地。之后互换角色，再来一遍。

七年级新生入学适应团体心理辅导方案

七年级新生入学适应团体心理辅导方案 集团标准化小组：[VVOPPT-JOPP28-JPPTL98-LOPPNN]

十中，你好同学，你好 一、活动目标：在新生开学第一周通过团体心理辅导，促使班级成员尽快相识，初步形成班级集体意识，建立互信互助关系，提高应对困难和挫折的意识和能力，为个人与班级的和谐发展打下良好基础。 二、团体成员：初一各班同学 三、活动时间： 四、活动地点：自定 五、指导者：心理健康教师 六、具体操作过程： （一）暖身阶段： 活动：马兰花开 目的：增强新生的互动与了解，尤其体验到集体归属感的重要性，培养新生的团队意识。 操作要点： 1、请大家手拉手围成一个圈，指导老师站在中间。听到“开始”指令后，大家拉着手逆时针跑起来。 2、指导老师说：“马兰花儿开”，同学问：“开几瓣？” 3、老师答：“开n瓣！”（n可以是随意的数字），所有同学立即自动组成一个正好有n个人的小组。 成长：活动结束后请同学谈体会，分别找无家可归次数最多的同学和总能顺利找到组织的同学分享自己的收获，启发同学认识到在人际互动中要积极主动，不能只是消极被动的等待；同时启发同学认识到集体归属的重要性。 活动：一元五角 1.女生代表一元男生代表五角 2.一男一女分割开围成大圆圈，听到“开始”指令后，大家拉着手逆时针跑起来。 3.组织者说出一个数额，参加者迅速找到朋友抱在一起组成要求的数额，如 组织者说“两元五角”两女生与一男生便是正确组合 （二）相识阶段：

活动一“滚雪球” 目的：.增进彼此相识，在短时间内认识更多的人。 时间：20分钟。 操作要点： 1、通过“一元五角”的形式给同学分组，。 2、小组成员站成一个圆，逆时针方向开始“滚雪球”式介绍。第一人介绍自己的名字、毕业学校、爱好（比如：“我叫xx毕业于xx爱好xx”）；第二个人重复介绍一下第一人的情况，再介绍自己；第三人重复介绍前两人，再介绍自己；依此类推，最后一人需复述所有人的情况，最后介绍自己。 3、每个小组推举一名成员把本小组的成员介绍给大家。分组可不断变换，交叉认识。 成长：大家在欢快的气氛中通过不断强化，尽快熟悉彼此。最后指导老师引导大家谈谈活动体会，看哪位同学通过活动准确记住的同伴信息最多。 提问：这个活动，你有什么感受，请与大家分享。请4-5位同学发言。 活动二“打开千千结” 目的：增强班级的凝聚力。 时间：10分钟。 操作要点： 1．将全班学生分成若干个小组，每组10—12人，让每组成员手拉手围站成一个圆圈，记住自己左右手各相握的人。 2．大家放开手，随意走动，音乐一停，脚步即停。找到原来左右手相握的人分别握住。 3．小组中所有参与者的手都彼此相握，形成了一个错综复杂的“手链”。主持人要求大家在手不松开的情况下，无论用什么方法，将交错的“手链”解成一个大圆圈。 6．全班交流，分享感受。 活动四“一年后的我……” 目的：让学生初步交流自己学习规划。 时间：20分钟。

新生鼠海马、皮层神经元原代培养

新生鼠海马、皮层神经元原代培养 实验材料 1. 实验动物 新生Wistar大鼠，当天出生（<12 h）的乳鼠，SPF级。 2. 试剂 Hibernate A Neurobasal A B27 serum-free supplements Papin （木瓜蛋白酶） DNAase I OptiPrep Density Gradient Medium Poly-L-lysine （多聚赖氨酸） L-glutamine （L-谷氨酰胺） Penicillin （青霉素） Streptomycin （链霉素） D-Hank’s solution dd H2O 3. 溶液配制 1. 多聚赖氨酸：取多聚赖氨酸25 mg，用双蒸水溶解并稀释浓度为50μg/ml，用0.2 μm的微孔滤膜过滤，4 °C保存备用。（可配成25×） 2. 解剖液：HA：含0.5mM L-谷氨酰胺的Hibernate A，0.22μm微孔滤膜过滤，4°C保存备用。 3．Papin：用HA配制含Papin 2mg/mL的消化液，37°C孵育20~30min，0.22μm 微孔滤膜过滤，冰上保存至实验。在使用前3h内配制。

4．DNAase I：取DNAase I粉末用D-Hank’s液配制成50μg/mL，0.22μm微孔滤膜过滤。可一次配好，-20°C保存，每次取用。 4．终止消化液：HABG：含2% B27的HA。现用现配，37°C保存备用。 5．Optiprep离心介质：Optiprep medium∶HABG为124∶876，每离心管1~1.5mL。 5．种植液和培养液：Neurobasal-A/B27：含2% B27，0.5mM L-谷氨酰胺的Neurobasal-A。现用现配，37°C保存备用。 4．实验方法 1. 包被培养皿 使用前2 d，在无菌条件下取6孔培养板，加多聚赖氨酸1 mL/孔，放置2 h，吸去多余多聚赖氨酸，自然干燥，灭菌水洗板2次，干燥备用。 2. 组织剥离 取出生12 h以内的Wistar大鼠，用75%乙醇擦拭全身消毒。无菌条件下断头，沿正中剪开皮肤和颅骨，向两边分开，小心取出全脑，浸于冰浴的解剖液。首先切除小脑和脑干部分，然后沿正中切为左右两半球，海马位于半球的腹内侧。分别在解剖显微镜下剥离出海马并置于冰浴的解剖液中，完整的海马（半侧）呈月牙形。用精细镊小心除去中脑、纹状体等非皮层结构，剥离出皮层。 3. 消化和分散 用精细剪将海马剪成1~2 mm3的组织块，在6 cm培养皿中用配好的木瓜蛋白酶在37 °C下消化30 min，4个半皮层或16个半海马/10mL消化液，并加入500 μL DNAase I。消化结束后小心吸去消化液，加入2~3mL HABG，200 μL DNAase I，

氟西汀对海马神经元生长的影响

氟西汀对海马神经元生长的影响 各位读友大家好，此文档由网络收集而来，欢迎您下载，谢谢 【关键词】氟西汀;细胞培养;海马神经元;大鼠 氟西汀是5-羟色胺（5-HT）再摄取抑制剂之一，是应用较广的抗抑郁药。氟西汀除有抗抑郁作用外，尚可治疗其他中枢神经系统疾病。有研究表明，氟西汀对海马的神经保护作用是其发挥抗抑郁效应的机制之一［1］。关于氟西汀对体外培养的海马神经元生长的影响未见报道，本研究初步探讨了氟西汀对原代培养的海马神经元生长的影响。 1材料与方法 新生大鼠海马神经元的分离和培养 技术方法在参考文献［2］基础上加以改进。取出生24h内的新生SD大鼠（东南大学医学院动物实验中心提供），无菌分离出双侧海马，用显微剪剪碎，

D-Hank#39;s液清洗2或3次，将剪碎的海马组织转移至离心管中，加入等量%的胰酶（美国Sigma公司），37℃消化30min，中间振摇1或2次，加入10%的DMEM/F12（美国Gibco公司）5ml，轻轻吹打15次，然后1000r·min-1离心5min，制成单细胞悬液，置于CO2培养箱（德国Heraeus公司产品）中，差速贴壁30min，去除成纤维细胞，吸取未贴壁的细胞，并用200目的不锈钢滤网过滤，收集过滤后的单细胞悬液于培养皿中，然后至离心管中，取一滴单细胞悬液进行计数，并用DMEM/F12将细胞密度调到1×106ml-1，然后接种于200μg·ml-1多聚赖氨酸（美国Sigma公司）包被的6孔培养板中，转移至培养箱内培养，4h后换为无血清培养基，即含2%B27的Neurobasl培养基（美国Gibco公司），以后每3天半量换液1次。使用培养6d的神经元进行染色鉴定。 大鼠海马神经元的鉴定 烯醇化酶（NSE）免疫细胞化学染

大学生团体心理辅导活动方案

团体心理辅导活动方案 活动主题：“彼此相知，同舟共济” 设计理念： 现代社会独生子女很多，个个都是父母眼中的“宝”。家里的“小皇帝”。所以以自我为中心的现象很普遍，在人际交往上也就稍显被动。加之青春期的到来，小群体的现象比较突出。造成同在一个班级生活几个月都不知“她是谁”。然而，在全球化发展浪潮下的今天，社会劳动分工日趋复杂和精细。仅凭一人之力，已经很难获得真正意义上的成功。所以，辅导员在新建立的班级中很有必要，对他们进行团体心理辅导。社会心理学家研究发现，如果要在一个彼此陌生疏远的人群中快速地建立起一个团体，最好的方法就是给这群人一个共同的任务。让他们在完成任务的过程中自发地分工、合作。最后我们会惊喜地发现，当他们完成了任务时，团体就会建立起来。他们会在合作的过程中彼此了解、彼此欣赏、互相鼓励。感受到集体的智慧，团结的力量。 活动目的： 1. 使团体成员展现自我，增强自信； 2. 使团体成员彼此信任、相互协助、融洽相处； 3. 使团体成员感受团结的力量，体会集体的温暖。 活动对象：12级汽车学院某班 活动场地：篮球场或汽车实验场 准备材料：6张报纸彩笔纸

活动时间：40分钟 活动过程： 一、开场： 亲爱的各位同学，你们好！今天我们将和大家共同开展一次充满活力、充满趣味的活动。活动的主题是：“彼此相知，同舟共济”。在活动时，需要大家按照我的指示、积极配合，你们能做到吗？ 好，刚才大家的声音让我充分感受到了你们的热情与信心，让我们一起为这份热情与信心表示一下鼓励，好吗。（鼓掌） 写名字：每个人在纸上以自己独特的方式介绍自己，做一个小小的名片，放在自己身上的任何部分，让大家能通过名片认识你。 同心圆： 接下来，在我们今天的活动正式开始之前，先请大家在5秒钟之内，男女相间，手拉手，以我为中心围成一个大的圆圈。（学生演练，主持人倒计时5-4-3-2-1）。好，我们已围成了一个大的圆圈，我们把它叫做“同心圆”，请各位成员站在原地不动，然后轻轻地松开手。 二、热身活动 请所有成员看着我，跟我做同一个动作。 1.深呼吸 请伸出你的双手，十指交叉，双手紧握，放在胸前。请慢慢闭上你的双眼，暂停八秒钟的呼吸（辅导员从1至8，轻声数数）。 好，非常好，现在开始深深吸一口气，感受空气的清新，感受气体从

胎鼠海马神经元培养及其鉴定

［作者简介］李玉（1965～），男，云南昆明市人，医学硕士，副教授，主要从事癫痫外科和功能神经外科临床研究 工作. 昆明医学院学报2011，（5）：17～19Journal of Kunming Medical University CN 53-1049/R 胎鼠海马神经元培养及其鉴定 李玉1），王波1），但齐琴2 ） （1）昆明医学院第一附属医院神经外科，云南昆明650031；2）昆明医学院神经科学研究所，云南昆 明650031 ）［摘要］目的建立胎鼠海马神经元体外培养方法，观察细胞生长情况，免疫组织化学染色鉴定神经元特 异性．方法取胎鼠海马，分裂获得细胞悬液，接种于24孔板，经2h 差速帖壁去除成纤维细胞，将细胞液转移并继续培养，以获娶纯度较高的海马神经元．培养第5、11、15天观察细胞和突起生长情况，用NeuN 抗体以免疫组化SP 二步法染色鉴立神经细胞．结果培养头3d ．细胞生长缓慢，5d 时细胞开始生长，可见突起， 11d 时突起连成网状．经Neun 染色培养细胞呈阳性反应，证明是神经元．结论 本方法获取生长良好，纯度 较高的海马神经元． ［关键词］胎鼠；海马神经元；Neun ；培养 ［中图分类号］Q831.1+1［文献标识码］A ［文章编号］1003－4706（2011）05－0017－03 I dent ificat ion and Cult ur e of Hippocampus Neur ons in Fet al Rat s LI Yu 1），WANG Bo 1），DAN Qi －qin 2 ） （1）Deat.of Neurosurgery ；2）Institute of Neuroscience ，Kunming Medical University ， Kunming Yunnan 650031，China ） ［Abstract ］Objective To establish the protocol for culturing hippocampus neurons in vitro and explore the neuronal growth character istics ．Methods Tissues from hippocampus of fatal rats were harvested ，then digested into cell suspension by using 0.125%trypsin ．After planted into wells for 2hours ，cell suspension was transferred into next well for continuing incubation ．The cell growth was observed at day 5，11and 15．Neurons specific Enolase （NSE ）antibody ，recognized specifically NSE antigen in cultured cells ，was used to identify neurons by SP-two-step staining method ．Results After incubated for 2hours ，transferred suspensions in wells showed some pure neurons ，which is identified by NSE staining ．However ，they grew slowly during 1～3days ，then grew well from 5th day ，with gradual increasing the neuritis outgrowth ．Conclusion Purified neurons with neurite outgrowth states can be acquired by this method. ［Key words ］Fetal rats ；Hippocampus neurons ；NSE staining ；Culture 海马神经元细胞培养是研究神经细胞生物学特性和外源干扰因素作用（细胞因子）的有效细胞模型，其在神经生物学，发育生物学体外实验研究中已被广泛应用[1-3]．然而，要获得纯度较高， 生长状态较好的海马神经元也不是一件易事．本实验长期从事海马神经细胞生物特性及其应用研究，故需建立该细胞模型．鉴于胚胎来源的细胞 生长状态较成年动物来源者好[4，5] ．本实验建立大

大学新生团体辅导方案(完整版)

新生适应性团体辅导方案 第一次活动—我们相识 本次活动目的：构建团体关系，融洽团体氛围，让团体成员找到团体支持的资源建立安全 的氛围，培养团体凝聚力，为以后的班级建设和相关团体辅导 活动的开展打下基础。 本次活动时间：1小时30分钟左右 活动场地：建议室内 一：融洽团体关系，建立团体动力 活动一：暖身：刮大风 目的：寻找彼此间的相识性，迅速暖身，打破一开始作为的规则。 活动规则：全体成员围成一圈坐好，领导者介绍活动规则。指导者说：“刮大风，刮大风，大风刮到所有…….（具有某一特征的人，比如说戴眼镜的人）身上”，那么具有这些特征的人就必须离开自己的位置，寻找新的位置坐下。 时间和材料：10分钟左右 注意事项：这个活动常用于暖身阶段，由于带有运动的成分，容易使气氛活跃起来。但是要注意，内容易于流于表面，因此活动的时间不宜过长。 活动二：花样握手——接龙——相互敲打放松 目的：让成员进一步相识，产生亲密感 活动规则：1.根据指导者的口令进行花样握手，口令包括：以前见过你——现在见到你——衷心祝福你！具体的花样握手动作由指导者演示。 2.双方握住手以后相互间进行自我介绍，介绍的内容可以包括姓名，籍贯，爱好等。相互介绍完毕后进行猜拳（石头剪刀布），输的一方将双手搭在对方的肩膀上，组成龙。 3.组成龙后，可在团体中自由走动，与其他的龙或者成员重复以上的活动，最后所有的人结成一条巨龙。接成巨龙后，可适当的走动一下，让大家感受一下，可适当的让大家分享一下接成一条龙的时候是什么感觉，当然不必强求。 4.将巨龙的首尾相接，组成一个圈，后面的成员帮前面的成员揉肩膀，捶背。过段时间后大家集体向后转，为刚才帮自己揉肩的成员服务。可适当的让成员分享感受，但不必强求。时间和材料：20分钟左右 注意事项：活动中会有成员不适应身体的拍触，有些部位会比较敏感，特别是女生，此时指导者注意适当的调节。 活动三：无家可归

初一新生入学适应团体心理辅导方案

乐凯中学初一新生入学适应团体心理辅导方案 一、活动目标：通过团体心理辅导，促使班级成员尽快相识，初步形成班级集体意识，建立互信互助关系，提高应对困难和挫折的意识和能力，为个人与班级的和谐发展打下良好基础。 二、团体成员：初一各班同学 三、活动时间：90分钟 四、活动地点：教室 五、指导者：心理健康教师 六、活动方案 七、具体操作过程： （一）暖身阶段：（5分钟） 活动一“大风吹” 目的：让同学们很快地行动起来，在活跃的气氛中放松心情；建立团体契约。操作要点： 1. 全体围坐成圈，主持人没有位置，立于中央。 2. 主持人开始说：“大风吹!”大家问：“吹什么?”主持人说：“吹所有带手表的人。”则凡是带手表者，均要移动，另换位置，主持人抢到一位置，使得 一人没有位置成为新主持人，再吹。 备注：可“吹”之资料：穿X颜色衣服的人、戴眼镜的人、长头发的人......

活动二“订立团体契约”（5分钟） 为使我们这个团队形成一个彼此接纳、安全、关怀、支持、亲切温暖的大家庭，在活动中，我们大家要订立一些规则：①要专注；②要坦诚；③要不评价； ④要保密。 （二）相识阶段：（45分钟） 活动一“滚雪球” 目的：.增进彼此相识，在短时间内认识更多的人。 时间：30分钟。 操作要点： ①两人一组自我介绍：主持人先让全体同学自由漫步，见到其他同学，微笑着握握手。给一定的时间让同学自然相遇，鼓励同学尽可能多地与其他人握手。当主持人说：“停”，每个同学面对或正在握手的人就成了朋友，两人一组，面对面坐下，采用“剪刀、锤子、布”的形式确定发言次序，分别进行自我介绍（姓名），以及个人愿意让对方了解的有关自我的资料等。每人2分钟。当对方自我介绍时，倾听者要全身心地投入，通过语言与非语言的观察，尽可能多地了解对方。 ②四人一组他者介绍：刚才自我介绍的两个组合并，形成4人一组，每位成员将自己刚才认识的同学向另外两位同学介绍。 ③八人一组重叠自我介绍：两个4人小组合并，8人围圈而坐。从其中一个人开始，每人用一句话介绍自己。一句话中必须包括3个内容(来自哪个小学、爱好、姓名)。规则是当第1个人说完后，第2个人必须从第1个人开始讲起，第3个人一直到第8个人都必须从第1个人开始讲起。 例如：第1个人说：我是来自新市场小学的爱好吹葫芦丝的xxx”, 第2个同学说“我是来自新市场小学的爱好吹葫芦丝的xxx旁边的来自爱民小学的爱打乒乓球的xxx” 第3个人说：“我是来自新市场小学的爱好吹葫芦丝的xxx旁边的来自爱民小学的爱打乒乓球的xxx旁边的来自乐凯小学的喜欢游泳的xx”…… ④十六人连环自我介绍：两个8人组合并，里一圈朝外，外一圈朝内，里外成员面对面一一对应，开始“循环沟通”。对面而坐的两人分别自我介绍，并讨

小鼠海马神经元细胞使用说明

小鼠海马神经元细胞 小鼠海马神经元细胞产品说明： 为使客户能尽快开展实验，派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期，且每次发货为汇合率达到70%的细胞，收到细胞后即可开展实验。 派瑞金提供的小鼠海马神经元细胞取自新鲜的组织，按照标准操作流程分离培养。研发的小鼠海马神经元细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件，降低杂细胞污染，保证不同批次间细胞质量的稳定。 同时，派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程，所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测，保证细胞纯度在90%以上；同时也需经过微生物检测，保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。 注意事项： 1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。 2. 仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。 3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。 4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态。 5. 该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。 小鼠海马神经元细胞产品简介： 产品名称：小鼠海马神经元细胞(Mouse hippocampal neuron cells)组织来源：小鼠海马组织区 产品规格：5×105cells/25cm2 培养瓶 小鼠海马神经元细胞简介： 海马椎体神经元是海马区的主要成分，主要功能是参与近期记忆、情绪及内脏功能调节、是老年性痴呆、癫痫等疾病的主要病灶之一。海马神经元细胞培养是研究神经细胞生物学特性和外源干扰因素作用(细胞因子)的有效细胞模型,其在神经生物学,发育生物学体外实验研究中已被广泛应用。 本公司生产的小鼠海马神经元细胞采用胰酶消化制备而来，细胞总量约为 5×105 个/瓶，细胞纯度可达 80%以上，且不含有 HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

海马神经元细胞免疫荧光检验

海马神经元细胞免疫荧光检验 神经元鉴定： 一、烯醇化酶鉴定： 培养细胞用100%乙醇固定---10min---PBS漂洗5min×3次---3%H2O2室温孵育30min，目的用于去除内源性过氧化物酶---PBS 漂洗5min×3次---5%羊血清（0.3%TritonPBS配制），室温封闭30min 以减少排特异背景颜色------加第一抗体特异烯醇化酶（chemicon，1:1000），4℃冰箱孵育18~24小时---PBS漂洗5min×3次---加入2步法：PV9000试剂Ⅰ,37℃，30min---PBS漂洗5min×3次---PV9000试剂Ⅱ,37℃，30min---PBS漂洗5min×3次---DAB显示红棕色；70%，80%，90%，100%I，100%II 梯度酒精透水；二甲苯Ⅰ，Ⅱ透明2次，每次30min---中性树胶灯片---镜下观察。 二、β-微管蛋白Ⅲ（β-tubulinⅢ）荧光显示： 培养细胞用预冷PBS液轻柔漂洗3次，4%多聚甲醛固定，1h，4℃---吸去多余甲醛---PBS漂洗5min×3次---0.25%triton，室温，15min---3%H2O2室温孵育30min，目的用于去除内源性过氧化物酶---PBS漂洗5min×3次---5%羊血清（0.3%TritonPBS配制），室温封闭30min以减少排特异背景颜色------弃血清，加入β-tubulinⅢ抗体（1:100稀释），4℃，过夜---PBS漂洗5min×3次---滴加FITC 标记的山羊抗小鼠lgG（体积比1:200稀释），37℃，1h---DAPI复染10min---抗荧光猝灭封片液封片---荧光显微镜观察---选择10个视野，统计学处理。

成年小鼠海马神经细胞培养及其鉴定

昆明医学院学报2011，（6）：29～32 CN53-1049/R Journal of Kunming Medical University 成年小鼠海马神经细胞培养及其鉴定 李玉1），但齐琴2），习杨彦彬2） （1）昆明医学院第一附属医院神经外科，云南昆明650031；2）昆明医学院神经科学研究所， 云南昆明650031） ［摘要］目的观察体外培养成年小鼠海马神经细胞生长情况及其形态学变化．方法获取成年海马组织，制成细胞悬液，接种于培养板，分别于1，3，7，10，13，15d观察细胞生长情况，用神经元特异烯醇化酶抗体经免疫组织化学染色技术鉴定神经元．结果成年海马神经元接种后1～3d，有较多的杂质和部分细胞漂浮，贴壁细胞较少量．每隔3d半量换液后，杂质不断减少，但第1周细胞生长缓慢，第7～10d才见细胞生长良好．培养15d后，大部分细胞出现有明显的颗粒等早期退化征象．免疫组化染色证实培养细胞呈现神经元特异烯醇化酶染色阳性染色，免疫阳性产物主要分布于细胞质；证明是神经元．结论体外培养成年海马神经元早期生长缓慢，7～10d才显示良好的生长状态，2周左右细胞则开始退变．提示10d以前的细胞是供体外研究用的理想细胞． ［关键词］大鼠；神经细胞；海马；细胞培养；免疫组化 ［中图分类号］Q813.1+1［文献标识码］A［文章编号］1003－4706（2011）06－0029－04 Cult ur e and Ident ificat ion of Hippocampus Neur ons in Adult Rat s LI Yu1），DAN Qi－qin1），XIYANG Yan－bin2） （1）Dept.of Neurosurgery，The1st Affiliated Hospital of Kunming Medical University，Kunming Yunnan 650032；2）Institute of Neuroscience，Kunming Medical University，Kunming Yunnan650031，China） ［Abstract］Objective To observe the morphology and characteristics of hippocampus neurons in adult rats in vitro．Method The hippocampus tissues from adult rats were collected，then digested into cell suspension by using0.125%trypsin．Cell suspension was planted into wells and observed at day1，3，7，10，13，and15 after incubation．Neurons specific Enolase（NSE）antibody，recognized specifically NSE antigen in cultured cells，was used to identify neurons by SP-two-step staining method．Results During1-3days，the extensive bodies of floating cells and tissue blocks were seen，but a few cells attached to the bottom of well．The growth of attached cells was also extensively slow，specifically within1week，while it began to grow quickly after7days，and maintained till15days．Amazingly，cells exhibited aging character with more particles in cytoplasm after15 days．NSE staining showed that cultured cells were positive staining by neuronal specific enalose antibody．Conclusion Adult hippocampus neurons grow slowly during the first week，but they are better from7day to15，then begin to degenerate after15days in vitro．This suggests that neurons from hippocampus of adult rats cultured in10days could be better for related neurobiological studies. ［Key words］Adult rats；Hippocampus neurons；NSE staining；Culture ［作者简介］李玉（1965～），男，云南昆明市人，医学硕士，副教授，主要从事癫痫外科和功能神经外科临床研究工作.

新生团体辅导方案

团体辅导方案 团体辅导总体方案名称为《幸福之旅》,其中涉及的主题主要有:积极自我认知、积极情绪、积极人际、积极人生、心流体验、感恩、希望等。这些主题的确定主要是考虑到以下两个方面: 一方面:大学新生心理健康状况,即大学新生主要面临的心理问题有对自我的认知失调,情绪容易受外界影响,人际关系处理不合理,缺乏生命意义教育、感恩教育等。 另一方面:积极心理学提出,真正的幸福可以分成三个部分,即快乐生活、充实生活和有意义的生活。其中快乐生活包含:快乐、希望等;充实生活包含:积极自我认知、积极人生、心流体验、感恩等;有意义的生活包含:积极人际等。 根据积极心理学理念以及团体辅导相关实践,每次干预过程具体设计如下: 积极心理团体辅导干预第一次主题为《开启幸福之旅》 单元目标:帮助成员相互认识,初步建立团队;确定本系列团体辅导主题——幸福之旅。 第一、热身游戏:桃花朵朵幵。目的:活跃气氛、打破沉默。操作:主持人伴随着音乐说:"桃花朵朵开",成员集体问"几朵开","X朵开",成员听后立即根据相应数字抱团。 第二、叠罗汉。目的:打破陌生,相互认识。操作:每个人说一句话或一个夸张的动作介绍自己以让他人记住自己;第二个人在介绍自己之前要从第一个人介绍起,如"我坐在爱上网的XXX边上的XXX",第三个人在介绍自己之前要从第一个人开始介绍起,依次类推。 第三、棒打无情郎。目的:加强组员相互认识。操作:每人依次说出小组中每个組员的名字,说错了则受到棒打。 第四、組建小组,开启幸福之旅。目的:加强团队凝聚力。操作:为小组选一名组长;起一个小组名称,要求本期系列团体辅导主题:幸福之旅相关;为小组设计LOGO;设计-小组成员展示方式,确立小组口号,组歌等。 第五、订立团体契约。目的:约束成员,规范团体。操作:带领者介绍本期系列团体辅导主题;鼓励成员共问制定团体契约。 2积极心理团体辅导干预第二次主题为《遇见最美的自己》 单元目标:帮助成员认识正确地认识自我;鼓励成员看到自己的闪光点,正确的对待自己的缺点,悦纳自我。

新生适应团体心理辅导方案设计

新生适应团体方案设计 方案设计：2011级社会工作一班赵莹宋卉秦昕玥 一、团体名称 相逢是首歌 二、选题理由 大学新生由于各种原因而形成的理想与现实的强烈反差，给他们带来了各种困扰，特别是大学新生的适应问题，严重地影响了他们的学习和生活。因此，采取有力的措施，解决他们的困扰，使之尽快地适应大学生活，是当务之急。 三、团体性质类型 封闭式、发展性团体 四、团体对象 文法学院大一新生 五、团体规模 以班级为单位 六、团体活动次数及时间 从开始上课的第一个星期开始，一周一次，为期四周，具体时间待定 七、团体活动地点 文法学院社会工作团体实训室 八、理论依据 1、根据以人为中心理论的基本观点，人性是积极的，向上的，具有解决个人问题的能力。个体能对自己负责，有正面的人生取向，具有成长的冲动，只要提供适当的心理环境和气氛，他们就能产生自我理解，改变对自己和他人的看法，形成积极的行为，并最终达成心理健康。因此，本团体充分借鉴这一观点，相信成员的积极性和主动性，创设条件，积极引发成员心理潜能，促进他们对新环境的有效适应。 2、交互理论。阿伦森的研究发现，人际关系的基础是人与人之间的相互重视、相互支持。任何人都不会无缘无故地接纳他人、承认他人的价值、对他人起支持作用，除非从他人那里感受到了尊重、接纳和支持。 九、团体目标 1、消除新生陌生感、孤独感 2、增强人际沟通能力 3、感受集体的温暖，增强机体凝聚力 4、帮助成员形成客观的自我意识，积极的自我体验，促进成员有效适应新环境。

十、领导者介绍 工作员：赵莹，女，社会工作专业学生。学习过《小组社会工作》等课程，为人乐观、活泼，开朗，热情，沟通和协作能力强。 助手：秦昕玥，女，社会工作专业学生。为人友善，亲和力强，思维灵活，有过团体培训经验。 观察员：宋卉，女，社会工作专业学生。为人开朗，性情随和，思维敏捷，做事认真负责。 十一、团体评估方法 项目一：小组成员的自我总结 项目二：观察员的观察记录 项目三：工作员自我总结 十二、团体活动

大一新生团体辅导方案

南通大学大学新生团体辅导方案—新环境，新同学，新朋友 一、团体性质 结构式、发展式、同质性团体

二、团体目标 （1）帮助团体成员能够更好的适应新学校的生活，团员能够主动的去适应、接纳、肯定新的环境，积极主动的建立新的人际关系。 （2）增强团体的凝聚力，建立团体成员对新班级的归属感。 （3）帮助成员学会相信尊重他人，在团体中自我成长。 三、团体领导者 1、南通大学心理系大三的学生3名（接受过正规的理论培训，具备扎实的理论基础与丰富的实践经验。 2、心理学专业的指导老师1名。 3、助手1名 四、团体对象与规模 南通大学应用心理学大一新生40人 五、团体活动时间 共三次，每周一次，每次1小时30分钟 六、团体活动场所 南通大学18号楼919团体辅导室 七、团体设计理论依据 团体动力理论社会学习理论人本主义学习理论人际沟通理论 八、团体计划书 第一单元 1、主题：我们相识 2、活动目的:促进团体成员间的进一步了解认识，强化团体氛围，建立团体成员在团体内的个人安全感为以后的班级建设和团体活动打下基础。 3、具体内容： 活动一：暖身：刮大风 目的：寻找彼此间的相识性，迅速暖身，打破一开始作为的规则。

活动规则：全体成员围成一圈坐好，领导者介绍活动规则。指导者说：“刮大风，刮大风，大风刮到所有…….（具有某一特征的人，比如说戴眼镜的人）身上”，那么具有这些特征的人就必须离开自己的位置，寻找新的位置坐下。 时间和材料：10分钟左右 注意事项：这个活动常用于暖身阶段，由于带有运动的成分，容易使气氛活跃起来。但是要注意，内容易于流于表面，因此活动的时间不宜过长。 活动二：花样握手——接龙——相互敲打放松 目的：让成员进一步相识，产生亲密感 活动规则：1.根据指导者的口令进行花样握手，口令包括：以前见过你——现在见到你——衷心祝福你！具体的花样握手动作由指导者演示。 2.双方握住手以后相互间进行自我介绍，介绍的内容可以包括姓名，籍贯，爱好等。相互介绍完毕后进行猜拳（石头剪刀布），输的一方将双手搭在对方的肩膀上，组成龙。 3.组成龙后，可在团体中自由走动，与其他的龙或者成员重复以上的活动，最后所有的人结成一条巨龙。接成巨龙后，可适当的走动一下，让大家感受一下，可适当的让大家分享一下接成一条龙的时候是什么感觉，当然不必强求。 4.将巨龙的首尾相接，组成一个圈，后面的成员帮前面的成员揉肩膀，捶背。过段时间后大家集体向后转，为刚才帮自己揉肩的成员服务。可适当的让成员分享感受，但不必强求。 时间和材料：20分钟左右 注意事项：活动中会有成员不适应身体的拍触，有些部位会比较敏感，特别是女生，此时指导者注意适当的调节。 活动三：棒打薄情郎 目的：尽快相识，增进团体凝聚力。 时间及材料：20分钟 用挂历纸或旧报纸卷成一根纸棒，或使用轻巧的吹气塑料棒。 活动规则：1、成员分成两组，两组成员对面站好后蹲下，在中间竖一块板，使

小鼠海马神经元的培养

小鼠海马神经元的培养 一、实验材料： 1、所有用于细胞培养的器械、器皿剂溶液必须灭菌消毒。 2、多聚赖氨酸铺板以磷酸盐缓冲液(PBS)或蒸馏水溶解多聚赖氨酸（分子量为30-70KD）至1mg/ml。分装储存。临用前稀释至终浓度为20-60mg/ml过滤备用。在培养板或皿中加少量多聚赖氨酸溶液，以覆盖底部为宜，在37℃、CO2孵箱中过夜。次日，用移液管吸取多聚赖氨酸，并用水洗2-3遍，晾干备用，如果培养目的适用于电生理的单细胞记录或者免疫组化和荧光染色，则在培养皿的底部加上盖玻片，多聚赖氨酸铺于盖玻片上，则更易得到强烈的荧光信号。 3解剖液（HEPES平衡盐溶液）取100ml10x平衡盐溶液（Hank’s balance salt solution,HBSS） HEPES 3.9g, NaHCO30.84g， 青霉素104U, 链霉素100mg， H2O800ml。 以1mol/LHCl调节PH至7.2，再加H2O之后总体积为1L，以0.2μm 直径的滤菌器过滤，4℃保存。 4、DMEM培养基（Dulbecco’s modified Eagle’s medium）DMEM培

养基500ml，加小牛血清和或马血清各10%（血清需经56℃，30min灭活）1%的青/链霉素. 5、无血清培养基最常用的一种无血清培养基为，Neurobasal+2% 的b27+1%抗生素 6、2.5%胰蛋白酶（typsin）溶液临用前以解剖液稀释至终浓度0.125%。 7、台盼蓝(typan blue)溶液终浓度为0.2%-0.4%。 8、阿糖胞苷终浓度为8-10μmol/L。 9、动物妊娠天数的选择通常选择出生24h之内的乳鼠。 二、实验步骤： 1、脱臼处死乳鼠，75%的酒精浸泡3-5min，将清洗完的乳鼠放入含预冷解剖液的培养皿中。 2、用两把尖镊逐个去除鼠的头部皮肤和颅骨，取出全脑，置于另一含预冷解剖液的（PBS）培养皿中，小心剥离并去除脑膜及脉络丛。 3、在中线处用尖镊分离大脑半球，在解剖显微镜下小心去除嗅球、中隔、丘脑及下丘脑，剥离脑膜及脉络丛，在大脑皮层下方小心取出海马，置于含冰冷解剖液的6cm培养皿中。 4、用弯头尖镊把海马剪成小碎片，收集全部海马碎片，置于一含有0.25%胰蛋白酶溶液的培养皿中（该溶液必须在37℃孵箱中预暖）,在孵箱中消化5-7min。 5、收集全部海马碎片，置于10ml预暖的DMEM培养基的试管中（培养基中含有10%的胎牛血清和或马血清各，1%抗生素，以及谷氨酰胺）。

大学新生适应团体辅导

大学新生适应团体辅导 （一）团体名称 携梦起航 （二）团体性质 异质的、封闭式的新生适应小组 （三）团体规模 40人左右，8~10人一组 （四）参加对象 小组成员为大一新生，且在新生普查中属于轻微心理问题的学生。新生普查结果出来之后，约去面谈，经告知团体的目的和性质之后，自愿参加的学生。 （五）团体活动时间、活动地点 每周一次，共四次，每次2个小时左右 学校心理健康中心的团体辅导室 （六）团体目标 本团体希望刚进入大学有适应不良的大学新生提高适应能力，通过认识自我、澄清价值观、人际关系的练习提高在大学的适应力。通过为组员营造一个真诚、尊重和温暖的小组分为，引导他们认识自我，思考自己的性格、价值观、优缺点、人际关系和人生目标等内容，以及和小组其他成员的沟通、探讨，使组员认识自己、了解自己、自我接纳，增强自我尊重和自信，不但深入了解自己的个性，而且学会欣赏自己的长处，勇敢面对自己的短处。 终极目标：自我认识、促进自我成长，协助参与者发展成为有良好适应力的人。 过程目标：个人探索，了解自己，同时让别人认识自己。 （七）理论依据 按照埃里克森的心理发展观，青年期主要面临的问题和困惑是自我统一性，同一性混乱具体表现为自我认识不全面、不客观，自我目标不明确，自我与环境适应不良，由此导致了自我认识的偏差、自卑、人际关系不良、生涯规划不明确等一系列迷失性的问题。成年早期可能出现的主要问题是亲密感缺乏，以及和爱情有关的一些问题，具体表现为了孤独、自我封闭，恋爱关系的适应不良。因此这一阶段的主要发展任务就是要建立同一性和亲密关系，即帮助青年人认识自我、了解自我，思考自身的角色和责任，以及自己与周围环境的关系，确立自己的正确位置和发展方向。 设计小组的形式、小组结构，确定组长责任时，参考了个学派的治疗理论和方法。主要采用当事人中心治疗小组的理念，充分相信组员的潜力，相信在小组中，组长的主要任务是为小组开创出一个滋润性和具有治疗功能的氛围，而组员只要得到组长起码的帮助和催促，就可以找到自己的方向和应采取的行动。因此强调为小组开创和维持一个充满着真诚、尊重和同感的气氛，以便组员内在的丰硕潜能得到发挥，导致个人的自我形象、基本态度和个人自主的行为有所改变，迈向成长。 单元单元主题单元目标内容与活动准备 （一）相见欢小组成员相识 凝聚力初现 向团体成员说明团体大风吹 团队建设：分组、队名、起 口号、团队造型，并展示 打印团体契约