压片法观察植物染色体

压片法观察植物染色体

植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。根尖染色体压片法，是观察植物染色体最常用的方法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。

1.实验材料

1.1 实验器材

镊子、烧杯、培养皿、载玻片、盖玻片、温度计、试剂瓶、显微镜

1.2 材料

新鲜培养的豆芽根尖

2.实验过程

2.1 实验步骤

2.1.1 材料准备：

培养：取黄豆若干浸泡24h后放入沙盘，25℃下培养，当主根长至0.5—1cm 时去掉根尖，继续培养，直至侧根长度>0.5cm，剪下备用；

前处理：用0.02%的秋水仙素处理剪下的根尖4h；

固定：将上述根尖放入卡诺固定液（无水酒精：冰醋酸=3:1）中，固定24h；

解离：酸解。取出根尖用蒸馏水漂洗后再放到0.1mol/L的HCl中，60℃水浴中解离15min；

染色：将上述根尖用蒸馏水漂洗后放在载玻片上，滴上几滴醋酸洋红溶液，染色20—30min，根尖着色后解压片观察；

压片：把染色后的根尖放在洁净的载玻片上，盖上盖玻片，用滤纸吸去多余的染液，并用铅笔轻轻的敲打盖玻片5—8min，使细胞尽量分散开来；

观察：将敲打好的片子放在显微镜下观察，找出最佳视野。

2.实验结果及分析

经过上述操作，最终在显微镜下观察到了根尖细胞的染色体。如下图：

从上图中可以观察到这些是有丝分裂中期的细胞，染色体散乱的排列在赤道板上，并且可以清晰地数出染色体的数目。

实验注意事项：压片材料要少，以免细胞贴在一起，重复太多；用铅笔敲打

盖玻片时要注意用力适中均匀，否则盖玻片很容易破裂。

植物染色体制片与观察实验报告

植物染色体制片与观察实验报告（洋葱组） 姓名：蔡梦雅 1230170010 同组成员：曹鉴云陈锦容刘艳马彦霞 一、中文摘要：染色体（Chromosome），是细胞内具有遗传性质的物体，易被碱性染料染成深色，又叫染色质。其本质是脱氧核甘酸，是细胞核内由核蛋白组成、能用碱性染料染色、有结构的线状体，是遗传物质基因的载体。这里我们用洋葱染色体作为代表使用压片法制片并且进行观察。 二、关键词：染色体洋葱压片法 三、引言：洋葱（onion）是百合科（Liliaceae）葱属中以肉质鳞片和鳞芽构成鳞芽的2年生草本植物，其学名为Allium cepa L，染色体数为2n=2x=16。由表1和图1可见,洋葱的8对染色体中,有7对(第1~7对)染色体,臂比在1·01~1·70之间,为中部着丝点染色体,1对(第8对),臂比为4·74,为近端部着丝点且带随体的染色体;依据STEB-BINS[4]的核型分类标准,洋葱的染色体核型在遗传进化上属较古老的2A型。100多年来有关染色体与染色体组结构功能的研究一直是生命科学最活跃的研究领域之一，现今人们完成基因组测序后回到对染色体上进行基因定位和作图，因此有关染色体的研究在基因组合功能基因组时代都有重要意义，陈瑞阳教授历时25年的研究完成的《中国主要植物染色体研究》对我国2834种植物染色体数目进行了报道，完成了1045种植物的核型分析，积累了宝贵的染色体基础数据创建了我国植物染色体研究信息平台。研究染色体进化与生物进化的有不可分割的关系,国际对染色体的化学成分,DNA含量,碱基组成和以染色体数目、形态、结构、大小等为特征的核型进化与物种形成和演化关系的研究,为揭示生物进化趋势提供染色体方面的科学资料，总的来说对染色体的研究在各类学科领域内都有着重要的意义。国内外对洋葱的研究主要在其成分和药用方面，在细胞遗传上张自力和陈瑞阳等对洋葱的C带显示法进行过研究，田秋元等对洋葱的核型分析及有关制片方法进行了探讨。植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞核染色体。我们设计了不同的实验方案探究如何制作优良的植物染色体玻片，掌握染色体技术。 四、材料与方法： 1.取材 洋葱（Aillum cepa）的鳞茎 2.实验器具和药品 2.1器具 a.载玻片 b.盖玻片 c.烧杯 d.量筒 e.培养皿 f.滤纸 g.玻璃棒 h.镊子i.手术刀 2.2药品 a.0.1mol/L醋酸钠溶液 b.0.25%秋水仙素 c.冰醋酸 d.无水乙醇 e.1mol/LHcl f.纤维素酶 g.果胶酶 h.卡宝品红 2.3试剂配制 卡诺固定液：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。 酸解液：一份无水乙醇与一份1mol/L 盐酸1:1进行配制。 酶解液：用0.4g的纤维素酶和0.15g的果胶酶溶解在20ml蒸馏水里。

低温诱导植物染色体数目的变化

低温诱导植物染色体数目的变化 低温诱导植物染色体数目的变化一、实验教学目标 1.知识目标:理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制。 2.能力目标:学会低温诱导植物染色体数目变化的方法。 3.情感态度价值观:体会实验结果带来的成就感,感受团队合作的快乐。 二、实验原理 进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞,在有丝分裂后期,染色体的着丝点分裂,子染色体在纺锤丝的作用下,分别移向两极,最终被平均分配到两个子细胞中去。 用低温处理植物分生组织细胞,能够抑制纺锤体的形成,以致影响染色体被拉向两极,使细胞也不能分裂成两个子细胞。结果,植物细胞染色体数目发生变化。 三、实验仪器材料 洋葱或大葱、蒜、培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜、载玻片、盖玻片、冰箱、卡诺氏液、改良苯酚品红染液、体积分数为15%的盐酸溶液、体积分数为95%的酒精溶液。 四、实验方法 1.培养根尖:将洋葱放在装满清水的广口瓶,让洋葱的底部接触水面。 2.低温诱导:待洋葱长出1cm左右的不定根时,将整个装置放入冰箱的低温室（4℃）内,诱导培养36小时。 3.固定细胞形态:剪去诱导处理的根尖约0.5-25px,放入卡诺氏液中浸泡0.5-1小时,以固定细胞的形态,然后用体积分数约95％的酒精冲洗2次。 4.制作装片:取固定好的根尖,进行解离;漂洗;染色;制片4个步骤,具体操作方法与“观察植物细胞的有丝分裂”实验相同。

5.观察装片:先用低倍镜寻找染色体形态较好的分裂相。视野中既有正常的二倍体细胞,也有染色体数目发生改变的细胞,发生染色体数目变化的细胞中染色体数目可能为正常细胞的两倍。确认某个细胞发生染色体数目变化后、再用高倍镜观察。 6.记录结果:对看到的发生染色体数目加倍的细胞拍照记录。 试剂及用途: (1)卡诺氏液:固定细胞形态。 (2)95%酒精:冲洗附着在根尖表面的卡诺氏液。 (3)解离液:(质量分数为15%HCI和体积分数为95%酒精1:1混合)使组织中的细胞分离开。 (4)清水:洗去解离液,防止解离过度,便于染色。 (5)改良苯酚品红染液:使染色体着色。 五、实验数据的采集分析 （一）学生观察到的较好的实验结果后,由老师拍照记录。 （二）造成看不到染色体数加倍细胞原因较多,常见原因有:1.没有培养出分生区或没有剪取到分生区2.低温诱导时间不足3.解离不充分或漂洗不干净造成染色不足4.染色时间控制不当,看不清染色体5.没有低倍镜寻找过程六、实验总结反思与修正 1.针对新洋葱不容易生根的问题,解决方法为:先将新洋葱放在干燥、通风、阳光下晒10天左右,再放入冰箱中低温室内（4℃左右均可）3-5天左右,可以解除休眠,就很容易发根了。 2.针对剪取根尖时,很多根尖已经被上一个班级的同学剪掉,导致实验失败的问题,解决方法为:每次剪取根尖时先把根从基部剪掉,然后剪取上面的根尖,这样,就可以避免以上问题的出现。

实验一 物染色体压片技1.

实验一植物染色体压片技术 一、实验原理: 植物染色体压片技术是利用化学或物理的方法,将具有分裂能力的细胞保持原有的分裂状态,并对其染色体进行染色,压片后观察它的染色体分裂的一种方法。 二、实验目的: 植物染色体压片技术是细胞遗传学和细胞分类学等研究中应用最为普遍的基本技术,是其他新技术所不能完全取代的,是从事染色体研究的工作者首先应该掌握的一项基本的实验方法。 三、材料的制备: 黑麦根尖(2n=14 根尖材料的制备: 1.浸泡:大、油、壳→浸泡24h(23~25℃;小、裸的不浸泡。 2. 发根:将材料放入具有团粒结构条件的土壤中培养(锯木屑、土壤、砾石、麦杆、谷草;最适温度(23~32℃;培养24h→再放入0~4℃冰处理1~7天。目的:(1使分裂速度减慢,根尖长度整齐一致; (2调节工作时间。再将材料从冰箱中取出又放回最适温度条件下培养1~2天;待根尖长度为1.5~2Cm即可处理。 3. 愈伤材料的制备:(适合春、夏两季用刀片将树杆割去保护组织露出伤口,用75﹪乙醇消毒包裹一天,再用50~75ppm赤霉素处理;几天后长出白色幼嫩的愈伤组织即可固定。 四、预处理:

1. 方法:(化学和物理两种 (1 化学方法:(适合所有生物 a. 秋水仙素0.05~0.2﹪(白色粉末,易溶于水的巨毒药品; b. 0.002M 8-羟基喹啉(淡黄色晶体,用少量的乙醇溶解再稀释, 对禾本科植物的随体表现很清楚; C.а-溴萘饱和液(淡黄色的乳浊液,易溶于乙醇和苯;难溶于水, 100ml水中倒入1~2滴剧烈的振动5分钟; (以上abc三种药剂在15~18℃温度下处理3~5h d. 对二氯苯饱和液(淡黄色的晶体,难溶于水;具有强烈的腐蚀 性,只能处理1~1.5h。 (2 物理方法:(适合禾本科作物,本次实验所采用 冰水混合物在0~4℃温度下处理24h。 预处理的目的破坏或抑制纺锤体形成;增加中期图象,改变细胞质的粘度,使染色体缩短变粗,易于染色体的显带及研究。五、固定: 卡诺氏Ⅰ 3︰1 (乙醇︰醋酸; 卡诺氏Ⅱ 6︰3︰1 (5︰3︰2(乙醇︰氯仿︰醋酸; 固定的目的利用药剂迅速杀死正在分裂的细胞,使之保持细胞中的染色体处于被固定前的原有状态。 六、保存:

植物染色体的制片与观察

植物染色体的制片与观察以及核型分析组员：郑石悦陈雨佳吴俊强 植物染色体的制片与观察 一.实验目的： 1.了解预处理，固定，解离，染色，烤片，及压片的步骤和作用。 2.掌握植物有丝分裂染色体常规制片技术。 3.观察有丝分裂过程中染色体的形态特征以及动态变化。 二．实验原理： 1.植物根尖分生组织的细胞有丝分裂比较旺盛，每天都有分裂高峰时期。 2.不同植物分裂高峰时期是不同的。大蒜和洋葱细胞的有丝分裂高峰时期通常在上午九点到十一点。 3.把分裂时期的根尖用固定液固定，再经染色后压片，在显微镜下进行观察，就能看到处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 4.预处理可以使染色体缩短变粗，易于计数。同时抑制细胞分裂过程中纺锤丝的形成，使更多细胞停留在分裂中期。这时，染色体分散在整个细胞质中，有利于染色体的形态数目观察。 三．实验材料： 洋葱 实验用具： 显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，镊子，解剖针，恒温培养箱，恒温水浴箱，棉签，刀片 试剂： 95%乙醇，冰醋酸，盐酸，醋酸洋红染色液，秋水仙素，2甲苯 四.实验步骤： 1.材料的培养：洋葱置于盛有湿沙的托盘中，20~25度培养至根长1~2厘米时取材。取材时使用解剖针及镊子。 2.预处理： （1）化学药物处理：0.05%~0.2%秋水仙素水溶液在室温条件下处理2~4个小时（注意时间不能过长，过长染色体会变得很短，不利于研究）

（2）冷冻处理：将根尖置于盛有冰雪混合物的烧杯中，保存于1~4度的冰箱20~24个小时（化学药物处理对染色体有破坏。冷冻处理无破坏，对禾本科植物效果良好） 3.固定:将材料再用蒸馏水冲洗两次，转入卡诺氏固定液（乙醇和冰醋酸以三比一混合）中固定24个小时（注意取材和固定时要在有丝分裂高峰期）。 4.解离：将根尖用蒸馏水冲洗后放入已经在60度恒温水浴箱中预热的1mol每升的盐酸中，60度水浴约十分钟，当根尖的伸长区变透明而分生区呈米黄色或乳白色时即可取出，用蒸馏水冲洗后备用。 5.染色及压片：取出根尖，去掉伸长区，留1~2mm的分生组织区滴一滴醋酸洋红染色液，染色2~3分钟，然后盖上盖玻片，在酒精火焰上方加热至手背触摸盖玻片时感到微烫（酒精灯加热的作用是 1.软化细胞，易于压片2.使细胞质颜色变浅，使染色体颜色反差加大，利于观察）。在盖玻片上盖上吸水纸，用左手大拇指和二拇指固定盖玻片两端，右手拿棉签垂直敲击盖玻片几下，使材料分散。然后用右手大拇指用以按压盖玻片，将材料压成一层。 6.观察：将压好的片现在低倍镜下观察，找到处于分裂时期的细胞后，再转换到高倍镜下观察染色体的形态特征，观察不同分裂时期的细胞即可了解染色体在整个细胞分裂时期的动态变化特点。 核型分析实验

核型分析实验报告

核型分析 摘要植物核型分析是指对植物细胞染色体的数目、形态、长度、带型和着丝粒位置等内容的分析研究,是植物分类和遗传研究的重要手段。本实验利用Photoshop软件，对栽培四棱大麦的染色体进行核型分析。本方法主要是物理分析法，在本试验中，我们先对大麦的染色体进行配对，再利用Photoshop软件对染色体进行分析，并测量了大麦染色体的臂长和随体长。 1.引言 核型指染色体组在有丝分裂中期的表型，包括染色体数目、大小、形态特征的总和。一个体细胞中的全部染色体，按其大小、形态特征(着丝粒的位置）顺序排列所构成的图像就称为核型。将待测细胞的核型进行染色体数目、形态特性的分析，确定其是否与正常核型完全一致，称为核型分析。以目前的技术水平，已实现使用计算机自动完成核型分析，我们学生也可以利用Adobe Photoshop 很容易地完成染色体的测量、排序等工作，再利用Excel 表格和Photoshop结合做出核型模式图。 2.实验材料 2.1实验材料 栽培四棱大麦的分散良好的有丝分裂中期细胞的显微照片、Adobe Photoshop等软件2.2实验方法 2.2.1绘制核型图 在Photoshop中对照片进行必要的处理。首先是剪裁照片，用套索工具将每条染色体分离出来，对染色体进行配对并将每条染色体的着丝点排在一条线上，并对染色体进行适当的旋转变换。其次是利用标尺工具测量每条染色体的臂长、随体长。再根据测量结果计算出染色体的臂比，总长，随体长，相对长度等数据。 2.2.2写出核型公式 根据上面的测量结果写出四棱大麦的核型公式。 2.2.3画核型模式图 将所测并经过计算后的数据在Excel表格中绘制成堆积柱形图，并在Photoshop里切出着丝点和次缢痕。除此之外，还需将整个图像转换成黑白。 3.结果与讨论 3.1染色体核型分析图 图1 染色体核型分析图

压片法制片

1. 压片法 在生物技术上，除用切片法观察细胞外，还可用压片法，尤其是观察细胞中的染色体数目，用压片法最为合适，不仅省事，结果也比切片法好。压片法是将材料置载玻片上，用解剖刀或解剖针拨开，加染液一滴，盖以盖玻片，施以压力，使材料破碎，细胞分散，然后进行观察。压片法种类很多，下面介绍两种： (1). 醋酸——洋红法 此法多用于制备幼小花药，观察花粉母细胞减数分裂的压片。而对根尖压片有时染色不好(但对洋葱根尖染色较好)。其步骤如下： a. 将花药或根尖(先切成0.5cm长)，投入卡诺氏固定液中固定1刻钟至l小时，然后移至70％酒精中保存。 b. 取固定保存的材料放入盐酸酒精解离液(95％酒精一份，浓盐酸一份，将二者混合即成)中5～8分钟。或置1N盐酸(取比重1.19的盐酸82.5毫升，加水至1000毫升即成)中于60℃的水浴温度下，处理6～8分钟，至透明为止。 c. 用清水冲洗干净解离液。 d. 取洗净的材料，放在载玻片上，用醋酸洋红染液(或醋酸苏木精染液)染色5～10分钟。 e. 然后将材料移至另一清洁的载玻片上。重新用染液装片，覆以盖玻片，以铅笔的橡皮头端轻轻压盖玻片，使材料呈现分散的薄层，置镜下观察。 (2). 铁矾——苏木精法 此法一般用于细胞有丝分裂中的染色体计数，由于染色体被染成紫兰黑色，用于显微照相，效果较好。（由于各种植物有自己的特殊性，因此，取材的时间、取材的部位、预处理的时间、固定的时问、水解的时间、染色的时间等，都有可能不同。在此只作了大致的介绍，具体材料还需作预备实验进行摸索。另外还要注意，各次水洗一定要洗干净沾在材料上的药液，以免影响下一个步骤的结果。）染色步骤如下(以蚕豆根尖作材料为例)： a. 取材：将蚕豆种子萌发。待种子根长至1cm左右，在上午8时～11时之间，切下长约0.5cm的根尖，进行预处理。 b. 预处理：目的使分裂细胞的染色体缩短和比较分散，便于压片观察。预处理是在固定以前进行，方法是将材料切下放入以下溶液： 0.05～0.2％秋水仙碱水溶液中处理2～5小时； 或：对二氯苯饱和水溶液中处理3-5小时； 或：8-羟基奎啉(0.004～0.005％)，处理2～12小时； 或：富民隆乳剂(0.01％)，处理24～48小时； 或：在0～3℃下冷冻处理24小时。 c. 固定：通常用95％酒精—冰醋酸(3：1)固定液固定1～24小时。固定后换入70％酒精中保存。一般可保存1～2星期，如放入冰箱中(3～8℃)则可保存数月。(4) 离析：将保存在70％酒精中的根尖，用刀纵切成两半，换入蒸馏水，然后移入1N盐酸中，在60℃的水浴中离析10～15分钟。 d. 水洗：离析后必须用水洗净残留盐酸，否则会影响染色。 e. 媒染：将根尖移入4％铁矾水溶液中，媒染20～30分钟，然后用水洗净。 f. 染色：放入0.5％苏木精水溶液染色3～5小时，如果需要染色较久(例如过夜)则可将苏木精溶液浓度稀释。 g. 压片：用镊子夹取根尖一段，放在载玻片上，滴上一小滴醋酸，迅速捣碎根尖，盖上盖玻片，用铅笔的橡皮头轻压，使材料分散成一薄层。 h. 镜检：将材料压好后，放置显微镜下观察。

人类染色体的识别及核型分析

生命与环境科学学院实验报告 实验课名称遗传学实验实验名称人类染色体的识别及核型分析成绩______________ 姓名王大锤实验报告系列年级学号组别一时间2015.温度6℃ 实验原理及目的 实验目的 1、学习并掌握染色体核型的分析方法； 2、熟悉人类染色体的特征； 3、了解人类染色体结构畸变的表示方法。 实验原理 1．染色体组型（核型）的基本含义 含义：生物体细胞所有可测定的染色体表型特征的总称。 包括：染色体的总数，染色体组的数量，每个染色体组内染色体基数，每条染色体的形态、长度、着丝粒的位置，随体或次缢痕等。 染色体组型是物种特有的染色体信息之一，具有很高的稳定性和再现性。 2．人类染色体特征 Denver体制 1960年，在美国Denver市召开了第一届国际遗传学会议，讨论并确定正常人核型（karyotype）的基本特点即Denver体制，成为识别人类各种染色体病的基础。 3.染色体显带标本 显带技术（banding technique）：用各种不同方法，以及用不同染料处理染色体标本后，每条染色体上出现明暗相间或深浅不同带纹的技术。 每条染色体带纹相对固定，可用于鉴别。 显带技术种类：Q带、G带、C带、R带、T带. G带是目前被广泛应用的一种带型。主要是被Giemsa染色后而显带，故称之为G显带技术，其所显示的带纹分布在整个染色体上。 4.遗传学中一些常用于对染色体和核型分析的指标描述 界标(landmark)：稳定、明显标记的指标.包括末端、着丝粒和带. 区（region）：两相邻界标之间. 带（band）：着色处.（浅、深；亮、暗）. 臂（arm）：p、q 实验材料、仪器及试剂 1.人类染色体标本——非显带标本和显带标本 2.直尺，剪刀，计算机等。 实验步骤 ①染色体制片 制片方法：植物染色体——压片法（酸解、酶解） 动物染色体——滴片法（骨髓细胞、外周血细胞）标本种类：非显带染色体；显带染色体 图片要求：染色体分散；数目全；形态好 ②选择最佳图象拍照 ③测量、计算 ④配对 ⑤剪贴 ⑥排列 排列原则：从大到小；短臂向上；着丝粒在一条线上；性染色体单排。

(整理)低温诱导植物染色体数目的变化

低温诱导植物染色体数目的变化 1、白话原理 细胞进行有丝分裂可以实现将亲代细胞的染色体经过复制以后，精确地平 均分配到两个子细胞中去，有丝分裂后期，着丝点分离后，新的染色体在纺锤 丝的牵引下移向细胞两极，这就保证了染色体的平均分配，但如果细胞未能形 成纺锤体的话，新的染色体就无法分开，这样，细胞也就无法继续分裂，就会 导致细胞内的染色体加倍。 低温以及秋水仙素处理均可抑制纺锤体的形成。 2、拨云见日 （1）低温处理必须在培养出1cm左右不定根之后。如若生根前就送进冰箱，低温抑制新陈代谢也就抑制了根尖分生区的形成，不会发生根尖分生区的有丝分裂受低温影响的过程。 （2）剪取根尖时间一般在中午10点左右，此时分裂旺盛，受低温影响较大，实验效果明显。 （3）染色时间要严格控制，如染色不足染色体看不清，染色过度，会导致视野中染色体一团糟，无法分辨。 1. 有关“低温诱导大蒜根尖细胞染色体加倍”的实验，正确的叙述是 A. 可能出现三倍体细胞 B. 多倍体细胞形成的比例常达100% C. 多倍体细胞形成过程无完整的细胞周期 D. 多倍体形成过程增加了非同源染色体重组的机会 释疑：形成多倍体细胞的原因是低温阻止了纺锤体的形成，使加倍后的染色体无法进入两个细胞中，导致细胞分裂不能继续进行，因此无法完成完整的细胞周期。 答案：C 2. 对于低温诱导洋葱染色体数目变化的实验，正确的描述是 A. 处于分裂间期的细胞最多 B. 在显微镜视野内可以观察到二倍体细胞和四倍体细胞 C. 在高倍显微镜下可以观察到细胞从二倍体变为四倍体的过程 D. 在诱导染色体数目变化方面，低温与秋水仙素诱导的原理相似 答案：ABD 3. 下列实验中，需要使用显微镜的是 A. 探究影响酶活性的因素 B. 模拟尿糖的检测

实验一 物染色体压片技1

实验一植物染色体压片技术 一、实验原理： 植物染色体压片技术是利用化学或物理的方法，将具有分裂能力的细胞保持原有的分裂状态，并对其染色体进行染色，压片后观察它的染色体分裂的一种方法。 二、实验目的： 植物染色体压片技术是细胞遗传学和细胞分类学等研究中应用最为普遍的基本技术，是其他新技术所不能完全取代的，是从事染色体研究的工作者首先应该掌握的一项基本的实验方法。 三、材料的制备： 黑麦根尖(2n=14) 根尖材料的制备： 1.浸泡：大、油、壳→浸泡24h(23~25℃)；小、裸的不浸泡。 2. 发根：将材料放入具有团粒结构条件的土壤中培养（锯木屑、土壤、砾石、麦杆、谷草)；最适温度(23~32℃)；培养24h→再放入0~4℃冰处理1~7天。目的:(1)使分裂速度减慢，根尖长度整齐一致； (2)调节工作时间。再将材料从冰箱中取出又放回最适温度条件下培养1~2天；待根尖长度为1.5~2Cm即可处理。 3. 愈伤材料的制备：(适合春、夏两季)用刀片将树杆割去保护组织露出伤口，用75﹪乙醇消毒包裹一天，再用50~75ppm赤霉素处理；几天后长出白色幼嫩的愈伤组织即可固定。

四、预处理： 1. 方法：(化学和物理两种) (1) 化学方法：(适合所有生物) a. 秋水仙素0.05~0.2﹪(白色粉末，易溶于水的巨毒药品)； b. 0.002M 8-羟基喹啉(淡黄色晶体，用少量的乙醇溶解再稀释， 对禾本科植物的随体表现很清楚)； C.а-溴萘饱和液(淡黄色的乳浊液，易溶于乙醇和苯；难溶于水， 100ml水中倒入1~2滴剧烈的振动5分钟)； （以上abc三种药剂在15~18℃温度下处理3~5h） d. 对二氯苯饱和液(淡黄色的晶体，难溶于水；具有强烈的腐蚀 性，只能处理1~1.5h)。 (2) 物理方法：(适合禾本科作物，本次实验所采用) 冰水混合物在0~4℃温度下处理24h。 预处理的目的破坏或抑制纺锤体形成；增加中期图象，改变细胞质的粘度，使染色体缩短变粗，易于染色体的显带及研究。五、固定： 卡诺氏Ⅰ 3︰1 (乙醇︰醋酸); 卡诺氏Ⅱ 6︰3︰1 （5︰3︰2）(乙醇︰氯仿︰醋酸); 固定的目的利用药剂迅速杀死正在分裂的细胞，使之保持细胞中的染色体处于被固定前的原有状态。 六、保存： 冲洗置换，从95﹪~70﹪的乙醇梯度置换；每次置换需停留

粉末直接压片法

粉末直接压片法 “药片者，即以一种或数种药物或与辅药和后制成之固体片状物。”作为大家日常生活中最常接触到的药物剂型之一，片剂出现的年代相当久远——如古罗马时期的英格兰地区，在制作一种治疗视力模糊的药物时，会将药物成分与树胶或其它粘性物质混合在一起，硬化并印制成片状，易于在应用时溶解。 虽然以现代人的眼光看，古老片剂的原料及工艺都相当令人忧心，但从中体现的基本的压片方法却一直影响着后世。如今，为了适应现行药品生产质量管理规范（GMP）及现代医疗对片剂质量的要求，即使片剂已在临床应用上处于主导地位，但在处方开发中，仍需要对其不断地进行工艺创新，如何研制出畅销片剂也成为了众多制药企业共同的战略目标。 目前的制片工艺主要可分为4小类，分别为『湿法制粒压片法』、『干法制粒压片法』、『粉末直接压片法』及『半干式颗粒压片法』。其中，粉末直接压片法具备操作简单、生产周期短、生产成本低、工艺适应性强等特点，被认为是目前最值得推广的一种片剂制备工艺。 一、粉末直接压片法简介 粉末直接压片法是指不经过制粒过程直接把药物和辅料的混合物进行压片的方法。粉末直接压片法避开了制粒过程，因而具有省时节能、工艺简便、工序少、适用于湿热不稳定药物等突出优点。目前，各国的直接压片品种不断上升，有些国家高达60%以上。 但需要注意的是，由于大多数药物的理化性能无法满足粉末直接压片的要求，因此需要选用性能优越的新型辅料来改善药物的流动性和可压性。1963年喷雾干燥乳糖以及微晶纤维素的首次出现，从根本上改善了粉末的流动性能，突破了粉末直接压片工艺的主要技术瓶颈，对于制药工业具有里程碑式的意义。 二、粉末直接压片法的优势 1、提高片剂的崩解性能 片剂的崩解主要是依靠片剂中的崩解剂通过毛细管作用或膨胀作用来促使片剂崩解。采用粉末直接压片法制备片剂时，其崩解剂不会由于前期接触水分而降低崩解性能，从而保证了良好的崩解特性。 2、提高难溶性药物片剂的溶出性能 由于溶解度小的药物受其比表面积和药物成品表面性质的影响较大。采用粉末直接压片工艺，选用亲水性好的辅料（例如乳糖）作为填充剂，在保证片剂迅速崩解的

压片法实验报告

题目：压片法实验报告 目的：掌握压片法的基本技术，以葱为例观察植物有丝分裂的各个时期,并对葱的染色体计数。 材料：葱根尖。 方法与操作步骤 一、取材：上午8:30取洁净的葱根尖，取尖端2-3cm长于称量瓶中。 二、前处理：为了得到更多中期分裂项的细胞，同时使染色体缩短和良好分散， 可对根尖进行预处理。处理方法为：浓度为0.002M的8-羟基喹啉前处理3小时 三、固定：卡诺氏（无水乙醇：冰醋酸=3:1）固定液（用量应在材料大小的20 倍以上）固定9个小时。 四、解离 1、用蒸馏水冲洗材料后，用50%乙醇处理30分钟。 2、1mol／L盐酸解离37分钟。 3、软化45%冰醋酸处理30min。 五、染色：改良苯酚品红染色10-18个小时。 六、制片 1、取一个根尖放于一张洁净的载玻片的中间。 2、切取根尖端的3-4mm。 3、在材料上滴一滴蒸馏水，盖上盖玻片。 4、用食指和中指固定住盖玻片，然后用笔平整的一端撞击盖玻片，用吸水纸吸 取多余水分。 七、镜检 1、镜检时先用10*10倍需找比较适合观察的各分裂相细胞。 2、然后在换10*40倍进一步观察所选细胞的染色体分散效果如何，是否在一个近似的平面上。选取染色体分散比较好，且近似在一个平面上的中期分裂相的细胞做染色体计数；选取典型的各分裂时期观察有丝分裂的前期、中期、后期和末期。 3、将10*40倍下选好的细胞换到油镜（10*100）倍观察，在100倍物镜下观察需要滴香柏油在盖玻片上。 结果与分析 一、结果分析 1、染色体计数的观察如下列图片所示

2n=16 2n=16

2n=16 通过以上的观察数出葱染色体条数为2n=16。

植物染色体常规分析技术

第一章植物染色体常规分析技术 染色体由DNA和组蛋白构成，不仅是生物，包括植物，的遗传信息载体，起到调节基因活动和有性后代重组频率的作用，而且还控制着真核生物的育性。因此无论是在植物遗传育种，还是在植物系统进化领域，染色体研究技术都是重要手段之一。此外该技术还是染色体分带、基因和基因组原位杂交技术的基础。也就是说染色体常规分析技术是生物学研究的基本技术之一，学习掌握该技术是学生将来从事科学研究工作的必要知识储备。 仪器设备、试剂及其他用品 明视野显微镜（每人一台）；水浴锅一个；控温培养箱一台；载玻片，盖玻片若干(清水洗过，70%酒精保存备用，用前纱布擦干)；纱布，滤纸若干；钟表镊子, 铅笔(未销)，双面刮胡刀片各一个；500ml烧杯（或广口瓶）若干只；培养皿若干（最好直径90mm）；小药瓶或1.5ml 塑料离心管若干。 对二氯代苯饱和水溶液；0.002M八羟基喹啉；改良石炭酸品红；1mol/L盐酸；0.1mol/L盐酸；45%乙酸； 材料 玉米、燕麦、小麦、蚕豆种子，洋葱、大葱鳞茎或种子，最好当年产。或者自己准备其他感兴趣的材料，如校园及周围环境中采集和市场购买，要有一定数量,至少几百颗。有意向后及时与老师联系，了解你预备的种子是否适合用于实验，因有些种子存在休眠，短时间不能萌发。实验流程 1 种子和鳞茎根尖的培养 种子培养前首先进行种子筛选，去除空瘪和霉变者以及杂质，保留饱满种子,10至30倍自来水浸泡24小时。取培养皿内垫湿滤纸，将浸泡后的种子铺于培养皿内，注意滤纸表面不要有流动水，种子量要适当，不要太多而互相堆积在一起，室温培养即可。每天流水洗一次，培养过程中如发现有霉烂种子及时清除以免影响种子萌发。 鳞茎培养采用水培。取烧杯一只盛满自来水，将鳞茎外部干皮和鳞茎盘底部残留泥土及根去掉，洗净，坐于烧杯口上，使底部浸泡水中。 虽然是染色体分析实验，一定不要忽略材料培养，要提供具体材料以理想的培养条件。只有根尖生长旺盛，才可能获得具有高比例分裂细胞的根尖，这是得到满意中期分裂相的前提。一般质量好的根尖为乳白色，可见大量根毛。 2 预处理 所谓预处理是指使用化学试剂和物理方法（如低温）抑制细胞纺锤体微管的形成和活动，保证更多的细胞处于有丝分裂中期，同时使染色体缩短变粗利于观察。待根尖伸长约1厘米，取根尖或在小种子情况下，如小麦，连带种子置小药瓶内对二氯代苯饱和溶液中处理3-6小时。注意环境温度不要过高以免产生药物毒害作用。还要注意不要盖瓶盖，保证材料呼吸所需氧气供应。如果处理时间较长，如超过5小时，应该间隔一定时间摇晃小药瓶以增加溶液中的溶解氧。 3 固定 固定就是在化学试剂的作用下使细胞内染色体结构保持不变。染色体制片常用的固定剂为卡诺固定液。方法很简单，倾去预处理液，加卡诺固定液[95%(或100%)酒精:冰乙酸=3:1]固定过夜。常温下材料在固定液可以保存一周左右，冰箱冷藏可以保存一个月左右。保存时间过长，压片时染色体粘连而不易分散。 4 解离 解离的作用是使根尖分生组织的细胞易于分散。一般是将材料从固定液中取出装入小瓶或离心管中，蒸馏水洗一次，加入1mol/L盐酸，放入事先预热到60℃的水浴锅中，保持5至10分钟取出，用吸管吸出解离液，加入蒸馏水洗一次，加45%醋酸软化。 5 染色和压片 染色和压片的目的是使细胞中的染色体着色并分散开以利于染色体形态结构的观察。截取

实验二十八植物染色体压片法

遗传学实验指导

实验须知 一、实验课的目的 1、培养锻炼科学的思维方法、实事求是的科学态度和严格的科学作风，提高分析问题解决问题的能力。 2、通过实验加深对理论的理解，学习掌握基本的分子生物学实验技能与实验方法，为今后的学习和研究打下一定的基础。 3、培养学生爱护公物、爱护集体、团结互助的优良道德品质。 二、实验课的要求 1、课前必须预习，了解基本原理和主要步骤及意义，写出预习报告。 2、上实验课必须穿白大衣，带实验讲义和实验报告纸。 3、遵守实验制度，注意安全（如水、电、煤气、强酸、强碱、有毒物质等）。 4、实验中要正规操作，动手动脑主动进行实验；掌握关键，力求得出准确结果；仔细观察，认真思考，及时做好记录；综合分析得出正确结论。 5、在实验过程中不许大声喧哗，有问题及时请教老师。 6、器材、药品等按规定使用，严禁乱用乱放。 7、爱护仪器，实验过程中因个人未能按实验要求操作而导致的器材损坏，按规章制度进行赔偿。 8、实验结束后，相关器材要彻底清洗干净，放到指定位置。 9、废弃物按要求分类收集、处理。 10、值日生要打扫干净实验台、地面等，并负责关好门窗，检查水、电、煤气等。 11、因故不能上实验者应有请假手续，是否进行补课由教研室研究决定。

目录 实验须知 1 实验一洋葱根尖压片与有丝分裂观察 3 实验二染色体组型分析 5 实验三减数分裂 7 实验四人工诱发多倍体植物 9 实验五植物的离体培养和快速繁殖 11 实验预习报告格式要求 13 实验报告格式要求 13

实验一洋葱根尖压片与有丝分裂观察 一、实验原理 植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。 二、实验目的 1、学习根尖染色体压片法。 2、掌握有丝分裂过程。 三、实验材料 洋葱（Aillumcepa）的鳞基 四、实验器具和药品 1.用具：染色板，载玻片，盖玻片，指管，温度计，试剂瓶，滴瓶，镊子，解剖针，毛边纸。 2.药品：无水酒精，70％酒精，冰醋酸，对二氯苯或秋水仙素，碱性品红，石碳酸，甲醛，山梨醇，二甲苯。 卡诺固定液的配制：用3份无水酒精，加入1份冰醋酸（现配现用）。 染色液的配制： 配方Ⅰ.石碳酸品红（Carbol.fuchsin），先配母液A 和B。 母液A：称取3 克碱性品红，溶解于100 毫升的70％酒精中（此液可长期保存）。 母液B：取母液A10 毫升，加入90 毫升的5％石碳酸水溶液（2 周内使用）。 石碳酸品红染色液：取母液B45 毫升，加入6 毫升冰醋酸和6 毫升37％的甲醛。此染色液含有较多的甲醛，在植物原生质体培养过程中，观察核分裂比较适宜，后来在此基础上，加以改良的配方Ⅱ，称改良石碳酸品红，可以普遍应用于植物染色体的压片技术。 配方Ⅱ：改良石碳酸品红 取配方Ⅰ.石碳酸品红染色液2—10 毫升，加入90—98 毫升45％的醋酸和1.8 克山梨醇（sorbitol）。此染色液初配好时颜色较浅，放置二周后，染色能力显著增强，在室温下不产生沉淀而较稳定。 五、实验说明 1.根尖由于取材方便，是观察植物染色体最常用的材料，有些植物种子难以发芽，或仅有植株而无种子，也可以用茎尖作为材料。 2.植物细胞分裂周期的长短不尽相同，通常在十到几十小时之间，温度明显地影响分裂周期，对于一个不太熟悉的实验材料，最好在特定温度下长根，掌握有丝分裂高峰期，以便得到更多的有丝分裂的细胞。 3.前处理的目的是降低细胞质的粘度，使染色体缩短分散，防止纺锤体形成，让更多的细胞处于分裂中期，一般在分裂高峰前，把根尖放到药剂中处理3—4 小

植物染色体显带技术

细胞遗传学实验 实验一植物染色体去壁、低渗、火焰干燥制片技术 一、实验原理： 用此法可以显著提高染色体的分散程度和平衡性，可以减少染色体的变形、断裂等现象，也可以减轻细胞质对染色体的覆盖。使染色体各组成部分—长臂、短臂、着丝粒、随体、染色单体等都显示得比较清楚，有利于染色体测量和显带的分析。此法也很简单，首先用酶解法去除植物细胞壁，再利用热胀冷缩的原理，将植物细胞在冰片上用火焰烧烤，用力甩片能使细胞膜破裂，不需要特殊设备，同时也省去了繁杂的压片手续，显著提高了制片的效率。 二、实验目的： 学习植物染色体标本制备去臂、低渗法的技术，为染色体显带实验提供了优良的标本。 三、实验步骤： 1材料的制备： 黑麦根尖(2n=14) 根尖材料的制备： 1. 发根：将材料放入具有团粒结构条件的土壤中培养（锯木屑、土壤、砾石、麦杆、谷草)；最适温度(23~32℃)；培养24h 再放入0~4℃冰处理1~7天。目的:(1)使分裂速度减慢，根尖长度整齐一致；(2)调节工作时间。再将材料从冰箱中取出又放回最适温度条件下培养1~2天；待根尖长度为1.5~2cm即可处理。 2 预处理：化学和物理两种 (1) 化学方法：(适合所有生物) a. 秋水仙素0.05~0.2﹪(白色粉末，易溶于水的巨毒药品)； b. 0.002M 8-羟基喹啉(淡黄色晶体，用少量的乙醇溶解再稀释，对禾本科植物的随体 很清楚)； C.а-溴萘饱和液(淡黄色的乳浊液，易溶于乙醇和苯；难溶于水，100ml水中倒入1~2 滴剧烈的振动5分钟)； （以上abc三种药剂在15~18℃温度下处理3~5h） d. 对二氯苯饱和液(淡黄色的晶体，难溶于水；具有强烈的腐蚀性，只能处理1~1.5h)。 (2) 物理方法：(适合禾本科作物，本次实验所采用)

染色体核型分析

姓名程开源系年级2010级临床医学八年制同组者孙琳、孙晶鑫、窦云德 科目分子细胞生物学题目染色体核型分析学号201000232012 【实验目的】 1.了解小白鼠睾丸细胞染色体的形态及数目。 2.初步掌握小白鼠睾丸细胞染色体的玻片标本制作方法。 3.观察动物细胞染色体的数目和形态。 【实验原理】 染色体的制备在原则上可以从所有发生有丝分裂的组织和细胞悬浮液中得到。最常用的途径是从骨髓细胞、血淋巴细胞和组织培养的细胞中制备染色体。小型动物的染色体制片最好最有效的材料就是骨髓组织。骨髓细胞中，有丝分裂指数相当高，因此可以直接得到中期细胞而不必象淋巴细胞或其它组织那样要经过体外培养；对大型动物通常采用对骨骼、脊或胸骨穿刺术吸取红骨髓，小型动物多采用剥离术取股骨以获得骨髓细胞。 制作染色体标本的先决条件 1. 细胞具有旺盛的分裂能力 选择活跃的组织：胸腺，骨髓，睾丸，小肠 施加药物使细胞分裂：PHA 2. 设法得到大量的中期细胞：秋水仙素 (1) PHA：粗细胞分裂，使淋巴细胞返幼，变为淋巴母细胞 (2) 秋水仙素：破坏微管装配，使纺锤体不能形成，使大量细胞停止在分裂中期。 (3) 低渗作用：水进入细胞内，细胞内容空间变大，染色体间的距离拉大，易于染色体展开 (4) 空气干燥：使细胞和染色体展开 (5) 固定：用甲醇：冰醋酸=3:1作用使蛋白质变性，对染色体内的组蛋白讲，变性后硬度增加，保持了染色体的“及时形态”，对细胞膜蛋白讲，变性使细胞膜硬度增强，形成屏障作用，防止了细胞内物质外溢和丢失。 对于小鼠精巢染色体标本的制作，一般包括以下几个要点: 1. 用一定剂量的秋水仙素破坏纺锤丝的形成，使细胞分裂停滞在中期, 使中期染色体停留在赤道面处; 2. 用低渗法使将细胞膨胀, 以至于在滴片时细胞被胀破, 使细胞的染色体铺展到载玻片上; 3. 空气干燥法可使使细胞的染色体在载片上展平, 经Giemsa染色后便可观察到染色体的显微图象。 【实验材料】 1.材料：小白鼠。 2.试剂：秋水仙素、0.3%KCl溶液、甲醇、冰醋酸、磷酸缓冲液（pH=6.8）吉 姆萨原液。 3.器械：手术刀、手术剪、镊子、试管架、解剖盘、注射器、针头、吸管、离 心管、离心机、玻片(冰片)、天平、试镜纸、二甲苯、吸水纸、香柏油、烧杯、水浴锅。 【实验步骤】 4.取雄性小鼠以每克体重4ug注射秋水仙素，经14-16小时后，断头法杀死小 鼠，取出睾丸，用生理盐水（0.9%的NaCl）吸去血污。 5.放入装有1ml 0.3% KCl 液的小烧杯中剪碎（呈乳白色）。

植物染色体核型分析 日文版

３１ 植物染色体の核型分析の試み １ 研究の動機 生物の授業で体細胞分裂について学習し、生物には相同染色体が２本ずつ含まれることを学んだ。このことを身近な植物について、核型分析を行って調べてみたいと思った。 ２ 実験方法 染色体標本を得るためには、根の先端の分裂組織（根端分裂組織）を用いた。 （１） 発根処理 ここで紹介するキク科のエンシュウハグマについては、0.01％のハイポネクス水溶液に浸し、エアーポンプで空気を送りながら2～3週間放置した。キンポウゲ科のケキツネノボタンの場合は水につけても発根しなかったため、採集場所で新鮮な根を切り取り、その場でコルヒチン処理した。（２）コルヒチン処理→固定→解離処理上記の操作で発根したもの、あるいは直接切り取ったものを、0.002mol/?-８-オキシキノリンと0.1％コルヒチンの１：１混合液に常温で４～５時間浸した。続いてその根端をカルノア液（エタノール：酢酸＝３:１混合液）に移し、冷蔵庫（４℃）で顕微鏡観察前日まで保存した。そして実験の24時間前には解離処理のため、１mol/?塩酸と45％酢酸の１:９混合液に移し、冷蔵庫（４℃）に入れておいた。 （３） 顕微鏡観察（押しつぶし法） 解離処理した根をスライドグラス上に置き、先端から１～２㎜程度のところで切り、残した先端部を柄付き針で潰した後、酢酸オルセイン液を加えてさらに潰した。続いてカバーグラスを気泡が入らないようにかぶせ、ずれないように注意しながら上から軽くたたいた。最後にろ紙をかぶせてカバーグラスの上から指で強く押した。作成したプレパラートを顕微鏡で観察し、分裂中期の染色体がうまく散らばった細胞を探した。そして、ディジタルカメラまたはフィルムカメラによる顕微鏡写真撮影装置で撮影した。 （４） 核型分析 撮影した写真をプリントアウトし、染色体の形状にそって切り取り、全体長や長腕、短腕の長さを基準に相同染色体の組み合わせをつくり、全体長の長い順に並べた。ケキツネノボタンついては、各染色体の長腕及び短腕の長さをノギスで計り、データを表計算ソフトを用いて分析した後、核型イディオグラムを作成した。 ※ 私達が用いた「押しつぶし法」は、物理的な力を加えることから、染色体を変形させてしまう恐れもある。従って、相同染色体を見つける作業においてもこのことを念頭におき、一部で完全に形状が一致しない場合でも、全体とのバランスを見て止むを得ないとすることもあった。 ３ 実験結果 （１）キツネノボタン （キンポウゲ科キンポウゲ属） ケキツネノボタンは、水辺や水田の近くなどの湿った土壌に生育するキンポウゲ科の植物である。本校近くを流れる二俣川周辺にも生育するが個体数が少なく、十分な根端試料がとれなかったので、磐田市内のひょうたん池（磐田市西貝塚）周辺および旧豊岡村の水田の畔に生育していたものを用いた研究結果を示す。 ア ひょうたん池周辺で採集したもの ２つの核型分析が可能な染色体標本Ａおよび標

实验五 植物根尖染色体压片技术

实验五植物根尖染色体压片技术 一、实验目的 1．学习植物根尖压片方法的基本技术。 2．熟悉细胞有丝分裂各个时期的形态特征及染色体的变化。 二、实验原理 有丝分裂是体细胞分裂的主要方式，一般发生在植物根尖或茎尖的分生组织中。在有丝分裂时，细胞核与细胞质有很大的变化，但以细胞核内染色体的变化最为明显，而且是有规律地进行。各种生物染色体在数目上和形态上是相对恒定的，并随科属种的不同而具有一定的特征。大蒜体细胞中有8对共16条染色体，在有丝分裂过程中，每个染色体能复制一份，然后分配到两个子细胞中，所以两个子细胞与母细胞所含的染色体在数目、形态和性质上都是相同的。在细胞遗传学研究中，人们常常需要了解某一物种的染色体数目，而最有效的方法就是观察细胞有丝分裂的中期，这样能得到较为准确的结果。 三、实验材料 大蒜根尖。 四、实验器具和药品试剂 显微镜、培养箱、恒温水浴锅、温度计、镊子、解剖针、刀片、载玻片、盖玻片、烧杯、量筒、滴瓶、大培养皿、纱布、吸水纸等。 卡诺氏固定液（甲醇或95%乙醇3份，冰醋酸1份）、改良苯酚品红染色液。 五、实验方法和步骤 1、材料准备选取大蒜茎块放在培养皿中，放清水浸泡，放进20～25℃培养箱内培养。当根尖长1～2cm 时，即可以进行处理。 2、低温处理将材料，浸入蒸馏水内，放置到4℃冰箱中处理24小时以上。 3、固定通常采用的是卡诺氏固定液。固定的目的是用化学的方法把细胞迅速杀死，使蛋白质变性，并尽量保持原来的分裂状态，同时更易于着色。固定时，将根尖投入固定液中4℃冰箱处理24小时。材料若不及时用，可经过90%酒精和70%酒精浸洗一次，再换入新的70%酒精中，置于冰箱内0～4℃保存备用。经过较长时间保存的材料，在进行观察前可用固定液再处理一次，效果较好。 4、解离目的是使分生组织细胞之间的果胶质层解掉，并使细胞壁软化，便于压片。解离的时间视根尖的粗细老嫩不同而有差异。方法是：将固定后（或保存后）的根尖分装到青霉素试管内，用清水洗几次，吸干水，加入1mol/L HCl溶液，在60℃下水解6~8分钟，解离成功的根尖，分生组织发白，伸长区已呈半透明，似烂状。解离后的根尖用水轻洗2～3次，以利于着色。 5、染色、压片将解离后的根尖放在培养皿内，滴加希夫试剂染色10分钟左右。制片时，

压片法观察植物染色体

压片法观察植物染色体 植物根尖的分生细胞的有丝分裂，每天都有分裂高峰时间，此时把根尖固定，经过染色和压片，再置放在显微镜下观察，可以看到大量处于有丝分裂各时期的细胞和染色体。根尖染色体压片法，是观察植物染色体最常用的方法，也是研究染色体组型、染色体分带、染色体畸变和姊妹染色单体交换的基础。 1.实验材料 1.1 实验器材 镊子、烧杯、培养皿、载玻片、盖玻片、温度计、试剂瓶、显微镜 1.2 材料 新鲜培养的豆芽根尖 2.实验过程 2.1 实验步骤 2.1.1 材料准备： 培养：取黄豆若干浸泡24h后放入沙盘，25℃下培养，当主根长至0.5—1cm 时去掉根尖，继续培养，直至侧根长度>0.5cm，剪下备用； 前处理：用0.02%的秋水仙素处理剪下的根尖4h； 固定：将上述根尖放入卡诺固定液（无水酒精：冰醋酸=3:1）中，固定24h； 解离：酸解。取出根尖用蒸馏水漂洗后再放到0.1mol/L的HCl中，60℃水浴中解离15min； 染色：将上述根尖用蒸馏水漂洗后放在载玻片上，滴上几滴醋酸洋红溶液，染色20—30min，根尖着色后解压片观察； 压片：把染色后的根尖放在洁净的载玻片上，盖上盖玻片，用滤纸吸去多余的染液，并用铅笔轻轻的敲打盖玻片5—8min，使细胞尽量分散开来； 观察：将敲打好的片子放在显微镜下观察，找出最佳视野。 2.实验结果及分析 经过上述操作，最终在显微镜下观察到了根尖细胞的染色体。如下图：

从上图中可以观察到这些是有丝分裂中期的细胞，染色体散乱的排列在赤道板上，并且可以清晰地数出染色体的数目。 实验注意事项：压片材料要少，以免细胞贴在一起，重复太多；用铅笔敲打 盖玻片时要注意用力适中均匀，否则盖玻片很容易破裂。