川产虎杖中自藜芦醇与虎杖苷的含量测定

白藜芦醇与人体健康的关系

白藜芦醇与人体健康的关系 白藜芦醇( Resveratrol，Res ) 与白藜芦醇甙( Polydatin，PD) 是从植物中提取的天然化学物质。白藜芦醇最初是作为葡萄属植物的一种抗逆物质植物抗毒素( Phytoalexin)而被发现的。1989年WHO 证实优质葡萄酒中所含白藜芦醇大大降低了法国人心脏病发病率和死亡率(即法国悖论现象) 。Ja ng M1 等报道，在数百种植物提取物中，白藜芦醇具有抗癌活性。最为独特的是，白藜芦醇有化学预防癌症的功能。我国在这方面的研究是由北京中医药大学于1998年开展起来的，目前已经成为研究的热点。 白藜芦醇广泛存在于葡萄皮中，是植物体在应激霉菌感染和作用时产生的一种非类黄酮植物抗毒素葡萄中主要以反式白藜芦醇以及反式顺式白藜芦醇糖苷存在，葡萄酒中存在4种形式：顺式白藜芦醇反式白藜芦醇以及顺式白藜芦醇糖苷反式白藜芦醇糖苷，反式形式相对顺式形式稳定，白藜芦醇糖苷能够在糖苷酶的作用下释放出白藜芦醇游离态和糖苷结合态，均具有抗氧化效能反式醇(苷) 在紫外照射下可以等摩尔转化为顺式体，但顺式异构体光敏性强极不稳定，所以自然界中的白藜芦醇均以反式异构体形态存在，顺式体非常少。由于白藜芦醇主要是在葡萄浆果的表皮合成易溶于醇，微溶于水干红葡萄酒是带皮发酵，在发酵过程中，由于酒精的浸提作用，能将葡萄皮中的白藜芦醇转移到葡萄醪中干白葡萄酒是用纯汁发酵，葡萄皮与汁的接触时间较短，可以看出，由于葡萄品种及加工工艺的不同，造成了白藜芦醇在干白与干红葡萄酒中的含量的差异。 白藜芦醇是作为一种重要的植物抗毒素（植保素）而被发现并得以深入研究，它在植物体内的合成积累和变化都同植物抗逆抗病性有着直接的联系，是植物系统获得性抗性（systemic acquired resistance，SAR）的主要指标之一。白藜芦醇的保健功能及其研发主要有以下几方面： 1.预防心血管病：许多含白藜芦醇的植物作为抗高血脂症抗动脉样硬化等药物在民间应用已久，如虎杖和首乌。白黎芦醉及其糖苷：类物质可以有效地抑制血小板聚集、降血脂、降低总胆固醇、抗高血压、提高冠状动脉血管扩张活性等等可防止并减轻心脏病的发生和发展，作为心脑血管疾病的化学预防剂，可防御缺血性脑中风等多种疾病，起到相当的防病治病功用，适当饮葡萄酒能降低血清脂质水平研究表明，白藜芦醇的化学结构与一种雌性激素己烯雌酚非常相象，可以竟争其受体的结合空间，对受体进行活化，起雌性激素的信号转导作用，调节血液中胆固醇水平。人体中雌性激素不仅影响着血管质量的好坏，而且对血液中的胆固醇的含量起到调节作用；同时芦醉具有很强降低血脂功能，能够的有效地防止人体低密度脂蛋白(LDL)的氧化，研究证明这种氧化作用才是动脉硬化症发病的真正原因，而不是由于它(低密度脂蛋白)管内壁上的附着造成的。

常见的微生物检测方法

常见的微生物检测 方法

摘要：微生物的检测，无论在理论研究还是在生产实践中都具有重要的意义，本文分生长量测定法，微生物计数法，生理指标法和商业化快速微生物检测简要介绍了利用微生物重量，体积，大小，生理代谢物等指标的二十余种常见的检测方法，简要介绍了这些方法的原理，应用范围和优缺点。 概述： 一个微生物细胞在合适的外界条件下，不断的吸收营养物质，并按自己的代谢方式进行新陈代谢。如果同化作用的速度超过了异化作用，则其原生质的总量（重量，体积，大小）就不断增加，于是出现了个体的生长现象。如果这是一种平衡生长，即各细胞组分是按恰当的比例增长时，则达到一定程度后就会发生繁殖，从而引起个体数目的增加，这时，原有的个体已经发展成一个群体。随着群体中各个个体的进一步生长，就引起了这一群体的生长，这可从其体积、重量、密度或浓度作指标来衡量。微生物的生长不同于其它生物的生长，微生物的个体生长在科研上有一定困难，一般情况下也没有实际意义。微生物是以量取胜的，因此，微生物的生长一般指群体的扩增。微生物的生长繁殖是其在内外各种环境因素相互作用下的综合反映。因此生长繁殖情况就可作为研究各种生理生化和遗传等问题的重要指标，同

时，微生物在生产实践上的各种应用或是对致病，霉腐微生物的防治都和她们的生长抑制紧密相关。因此有必要介绍一下微生物生长情况的检测方法。既然生长意味着原生质含量的增加，因此测定的方法也都直接或间接的以次为根据，而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。微生物生长的衡量，能够从其重量，体积，密度，浓度，做指标来进行衡量。 生长量测定法 体积测量法：又称测菌丝浓度法。 经过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000 rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。 称干重法：

白藜芦醇,到底是何方神圣

白藜芦醇,到底是何方神圣 说了这么多适度饮用红酒的益处，不难发现，大多数益处都和“白藜芦醇”有关。那么白藜芦醇到底是种什么样的物质呢？既然白藜芦醇对身体的益处这么多，那么服用白藜芦醇补充剂是不是效果更好呢？ 白藜芦醇是一种多酚类化合物，具有抗氧化的作用，常见于红葡萄的皮中，但是花生和莓类当中也含有一定量的白藜芦醇。大多数美国进口的白藜芦醇胶囊的内容物都是从一种叫做“阴阳草”（又名虎杖）的中药中提取的，其他的白藜芦醇补充剂可能是从红酒或者是红葡萄中提取的。 白藜芦醇并非包治百病 确实有很多研究都发现了白藜芦醇与心脑血管疾病、痴呆和2型糖尿病等疾病患病风险降低之间存在相关，因此，商家也一直在宣扬白藜芦醇的功效。但是，白藜芦醇可不是包治百病的神药，想要单独补充白藜芦醇，还需三思而后行。首先，大部分有关白藜芦醇的研究都只研究了其在实验室条件下的短期效果，而且研究对象大多是动物而不是人类。而且我们并未完全弄清楚白藜芦醇的吸收和代谢过程，以及摄入白藜芦醇对肝脏会有怎样的影响。 可能会与其他药物发生相互作用

有些药物是由肝脏进行吸收代谢的，比如洛弗斯塔特因（用于降低血液中的胆固醇）、酮康唑和伊曲康唑等，而白藜芦醇可能会降低肝脏代谢药物的速度。如果在服用药物的同时摄入一定剂量的白藜芦醇的话，可能会增加药物的效用和副作用。所以，在服用白藜芦醇补充剂前一定要先咨询医生。 安全摄入剂量是多少？ 一般来说，通过食物摄入白藜芦醇是安全的；如果是口服补充剂形式的白藜芦醇的话，每天最多摄入250mg，且持续时间不能超过3个月；如果是涂抹含有白藜芦醇的药膏，那么使用的时间不能超过30天。如果摄入的剂量过高，就可能会造成消化问题和肾脏疾病。 特殊人群摄入白藜芦醇时要小心 1.孕妇和哺乳期妇女：对于这两类女性来说，通过食物摄入少量的白藜芦醇一般来说是安全的。但是，白藜芦醇的来源是非常重要的。白藜芦醇常见于葡萄皮、葡萄汁、红酒和坚果等食物中，而孕妇和正处于哺乳期的女性最好不要通过饮用红酒来补充白藜芦醇。 2.凝血障碍患者：白藜芦醇可能会降低血液凝固的速度。也就是从理论上来说，白藜芦醇可能会增加有凝血障碍的患者出血的风险。 3.需要手术的患者：白藜芦醇可能会增加手术期间和术

高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量

反相高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量 白祖海，文刚，张艳 （长沙市疾病预防控制中心，长沙410001） 摘要：采用HPLC法测定虎杖中白藜芦醇含量。以聚酰胺柱对样品进行 预处理，排除其它成分的干扰，获得较好分离度和高回收率。选用自填 装ODS-C18色谱柱(200 mm×4.6 mm，5μm)，以乙醇-水(2：3,v/v)作流 动相，流速为0.6 ml/min，紫外光检测波长304nm，柱温为25℃。白藜 芦酵在0.05-0.40μg/mL 范围内具有良好的线性关系。r=0.9996，平均回 收率为98.51%(n=5)。结论：该方法简便、准确可靠，适合于中药材虎 杖中白藜芦醇含量的测定。 关键词：白藜芦醇；虎杖；反相高效液相色谱法 Determination of Resveratrol in the Polygonum Cuspidatum by Reversed-Phase HPLC BAI Zu-hai, WEN Gang, ZHANG Yan (Changsha Municipal Center for Prevention and Control of Diseases, Changsha 410001, China) Abstract：A simple and sensitive Reversed-Phase HPLC method for the determination of resveratrol in the roots of Polygonum cuspidatum was described，including the pretreatment of samples by poamide colutah. The separation was performed on an ODS column(200 mm×4.6 mm，5μm)，with the mobile phase of

HPLC法测定藜芦中虎杖苷和白藜芦醇的含量

a a b B 图３ ＨＰＬＣ色谱图 Ａ．　虎杖苷 Ｂ．　白藜芦醇 Ｃ．样品ａ－虎杖苷色谱峰　ｂ－白藜芦醇色谱峰 ＨＰＬＣ法测定藜芦中虎杖苷和白藜芦醇的含量 丛悦，王金辉，李铣 （沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳 １１００１６） [摘要] 目的：建立HPLC 法测定由甲醇加热回流和甲醇超声两种方法提取的藜芦中虎杖苷和白藜芦醇的含量的方法。方法：采用Spherigel C 18 色谱柱（150mm ×4.6mm ，5μm ），流动相为四氢呋喃－乙腈－水（40∶40∶220），流速1.0 mL·min -1，检测波长303nm 。结果：虎杖苷在0~50mg·L -1内成良好线性关系，平均回收率甲醇加热回流提取102.4%，RSD1.1%；甲醇超声提取97.2%，RSD1.1%。白藜芦醇在0~100mg·L -1内成良好线性关系，平均回收率甲醇加热回流提取96.6%，RSD1.5%；甲醇超声提取96.6%，RSD1.2%。结论：本法可作为藜芦质量控制的手段之一。 [关键词] 藜芦；虎杖苷；白藜芦醇 藜芦为百合科藜芦属植物Veratrum nigrum L.的根及根茎部分，入药历史可追溯到《神农本草经》，通常认为藜芦有涌吐风痰、杀虫疗疮的功效，治疗中风痰壅、喉痹不通、癫痫等［１］。虎杖苷和白藜芦醇是其有效成分之一，具有保护心血管和保肝等作用。目前认为藜芦的有效成分是生物碱，所以质量控制主要集中在生物碱，对虎杖苷和白藜芦醇的含量测定少见报道，作者利用HPLC 法首次对由甲醇加热回流和甲醇超声两种制备方法提取的藜芦中虎杖苷和白藜芦醇进行了测定，为藜芦的质量控制提供了一种方法。１　仪器与药品 色谱仪：HITACHI Pump L －7110，HITACHI UV －VIS Detector L －7420，Anastar 色谱工作站，FA1004N 型电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司），乙腈（色谱纯，天津市康科德科技有限公司），四氢呋喃（色谱纯，天津市康科德科技有限公司），水（纯净水，杭州娃哈哈集团有限公司）。 藜芦购于河北安国药材市场，经沈阳药科大学孙启时教授鉴定，虎杖苷对照品（批号：0407056，含量：９８％）和白藜芦醇对照品（批号：0407057，含量：９８％）为西安宇源生物工程有限责任公司产品。虎杖苷和白藜芦醇的结构式分别见图1、2。２　方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：瑞士Spher igel C 18柱(150mm×4.6 mm ，5μm)，流动相：四氢呋喃－乙腈－水（40∶40∶220），检测波长：303n m ，流速：1.0 mL·min -1，柱温为室温。 2.2 系统适应性试验 在上述色谱条件下，虎杖苷和白藜芦醇达到基线分离(R>>1.0)，保留时间分别为14.78、54.64min ，理论塔板数均不低于2300。色谱图见图3。 HO CH CH OH O O HO CH 2OH OH OH HO CH CH OH OH 图１ 虎杖苷结构式 图２ 白藜芦醇结构式

白藜芦醇抗衰老研究新进展

网络出版时间：2012-08-29 15:14 网络出版地址：https://www.sodocs.net/doc/9617630310.html,/kcms/detail/51.1705.R.20120829.1514.002.html 白藜芦醇抗衰老研究新进展 楼旭丹1 汪海东1 夏世金2 （复旦大学附属华东医院：1.内分泌科；2.上海市老年医学研究所，上海 200040） 【摘要】白藜芦醇是一种植物抗毒素，主要来源于虎杖、葡萄及花生等植物中，具有抗肿瘤、 抗心血管疾病、抗炎、抗氧化、抗自由基、保肝、保护神经系统、调节雌激素及骨代谢等多 种药理学作用，还可以模拟热量限制（CR）的抗衰老效应，激活沉默信息调节因子1（SIRT1）， 参与有机生物平均生命期的调控。白藜芦醇对衰老的干预主要表现为抗氧化、抗自由基，免 疫调节，抗炎作用以及对神经系统的影响，本文就白藜芦醇及其抗衰老干预研究进行综述。 【关键词】白藜芦醇；抗衰老 【中图分类号】R285 【文献标志码】A 衰老是自然界一切生命由遗传因素和内外环境互相作用下的生物学过程，这个过程从出生、发育、成长直到死亡，是机体功能退行性下降及紊乱的综合变化，具有累积性、普遍性、 渐进性、内生性、危害性5个生理特征[1]。白藜芦醇是广泛存在于自然界的一种植物抗毒素， 作为沉默信息调节因子1（SIRT1）最强的激活剂，白藜芦醇可以模拟热量限制（CR）的抗 衰老效应，参与有机生物平均生命期的调控[2,3]。已有报道指出[4]白藜芦醇能增加酵母、后 生动物和其他动物的寿命，其抗衰老作用的细胞学和分子生物学机制也因此成为国内外学者 研究的一个新热点。本文综述了白藜芦醇的一般性质、代谢途径以及近年来白藜芦醇抗衰老 机制的研究进展，展望了白藜芦醇在临床应用中的良好前景及所存在的问题，为进一步开展 白藜芦醇生理药理活性研究提供参考。 1 白藜芦醇的一般性质 白藜芦醇（Resveratrol, Res）化学名为3,5,4’-三羟基-1,2-二苯乙烯 （3,5,4’-trihydroxystilbene），分子式C14H12O3，相对分子质量228.25，为无色针状晶体， 难溶于水，易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮等有机溶剂。早在1940年白藜芦醇首次 被发现存在于白藜芦（white hellebore）的根中，至20世纪70年代发现传统的中草药虎 杖（polygonum cupsidatum）中也含有该种物质，但受到越来越多学者的关注与青睐是源于 1992年Seimann和Creasy报道[5]在红葡萄酒中亦发现有白藜芦醇的存在，并提出白藜芦醇 是红葡萄酒中发挥心血管保护作用的主要功能因子。在对其自然资源进行广泛的研究后，白 藜芦醇被认为是一种重要的植物抗毒素，一种至少存在于包括葡萄、虎杖、花生、桑葚、松 树、朝鲜槐等12科、31个属的72种植物中含有芪类结构的非黄酮类多酚基化合物[6]。自然 界中白藜芦醇以顺式和反式两种同分异构体的形式存在，反式异构体可在紫外光照射下转化 为顺式异构体，这两种结构可分别与葡萄糖结合，形成顺式或反式白藜芦醇苷，发挥各自的 生物学功能。植物中白藜芦醇主要以反式形式存在，表明反式异构体的生理活性强于顺式异 构体，另有报道指出反式白藜芦醇才是红葡萄酒能抗动脉粥样硬化和冠心病的重要成分[7]。 2 白藜芦醇的代谢 无论在人类或者啮齿类动物，摄入的白藜芦醇吸收入血后70%以上具生物活性，其血浆 浓度一般在30min内达到高峰，但白藜芦醇及其他多酚类物质的生物利用度均较低，如口服 25 mg反式白藜芦醇其血浆浓度峰值仅为2 μmol/L，半衰期约8-14 min[8]。白藜芦醇的药 基金项目：上海市科委科技发展基金基础研究重点课题（No.10JC1404800）；国家自然科学 基金面上项目（No.31171129）

HPLC测定虎杖茎中虎杖苷含量的研究毕业论文

HPLC测定虎杖茎中虎杖苷含量的研究毕业 论文 目录 摘要.................................................................. I Abstract................................................................ II 前言 (1) 1材料与方法 (4) 1．1 材料、仪器与试剂 (4) 1．2对照品溶液的制备 (5) 1．3标准曲线的绘制 (5) 1．4超临界二氧化碳流体萃取工艺流程 (5) 1．5萃取物中虎杖苷含量的测定 (5) 1．6 单因素试验 (6) 1．7最佳萃取工艺条件实验设计 (6) 2结果与分析 (7) 2．1虎杖苷对照品标准曲线的绘制 (7) 2．2单因素试验结果 (8) 2．3正交试验结果直观分析 (8) 3 结论 (15) 参考文献 (16) 致谢 (18)

HLPC测定虎杖茎中虎杖苷含量的研究 学院生物与化学工程系08级生物工程 422000 敖普章 指导老师蒋盛岩 摘要 目的:研究超临界CO2萃取压力、温度、时间和携带剂甲醇的添加量对虎杖茎中虎杖苷提取的影响，探讨虎杖茎中虎杖苷的最佳提取参数。方法:采用正交试验，用超临界CO2萃取虎杖茎中虎杖苷，并用HPLC和紫外分光光度计对提取液进行分析。结果:正交试验结果表明，影响虎杖茎中虎杖苷CO2超临界萃取的主要因素为D＞C＞B＞A（A为萃取压力，B为萃取温度，C为萃取时间，D为携带剂甲醇的添加量），其最佳组合是D1C3B2A2。结论:超临界CO2萃取虎杖茎中虎杖苷的最佳参数为：萃取温度30℃，萃取剂甲醇的添加量为50mL，萃取时间是60min，萃取压力是12Mpa。 关键词:虎杖；虎杖苷；超临界CO2萃取；高效液相色谱

白藜芦醇抗肿瘤作用机制

白藜芦醇抗肿瘤作用机制 白藜芦醇(resverat rol) 广泛存在于自然界中,是植物在受到外来侵害时所产生的一种抗体性物质,具有保护心血管、调节血脂、抗病原微生物、护肝等多种生物学作用1 ,2 。J ang 等3 于1997 年系统地报道了白藜芦醇的抗肿瘤作用,研究认为白藜芦醇作为天然的肿瘤化学预防剂,对肿瘤的起始、促进、发展三个阶段均有抑制作用;能够抗突变、抗氧化,清除自由基, 并诱导Ⅱ期药代谢酶(抗起始活性) 和环氧化酶(cyclooxygenase , COX) 及过氧化氢酶活性,有很强的抗炎作用(抗促进活性) ;并能诱导人早幼粒细胞性白血病细胞株HL60 (抗发展作用) 的分化4 ～6 ,本文就白藜芦醇的抗肿瘤作用机制进行简述如下。 1 抗氧化作用 自由基损伤被公认是引起细胞DNA 损伤进而导致细胞恶变的重要机制之一,白藜芦醇即3 ,5 ,8- 三羟基二苯乙烯(3 ,5 ,8 - t ri hydroxyl2stilbene) 是一种强抗氧化剂,对由氧化应激引起的细胞组织损伤有明显的保护作用,白藜芦醇还能减少H2O2产生,明显抑制大鼠红细胞的自氧化溶血和由H2O2引起的氧化溶血,对小鼠心、肝、脑、肾等脏器的体外过氧化脂质的产生有明显的抑制作用7 ,8 ,能有效的清除AAPH(盐酸2 ,2’- 偶氮(异丙基脒) 和Fe/ 抗坏血酸产生的自由基和抑制硫代巴比妥酸反应物生成9 。De Salvia 等10 研究了白藜芦醇清除活性氧的能力,结果表明,白藜芦醇能干预氧化代谢过程,减轻H2O2产生的活性氧自由基对DNA 分子的损伤。Yen 等11 则通过研究表明, 白藜芦醇在10～100μmol/ L范围内能有利于谷胱甘肽的生成,调节抗氧化酶———谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶的活力,抑制过氧化氢酶的活力,减轻自由基对淋巴细胞DNA 的损伤。白藜芦醇能抑制Fenton反应产生的羟自由基(hydroxy radical ,OH·) 对小牛胸腺DNA 的氧化损伤。Lopez 等12 利用高效液相色谱分析了白藜芦醇对自由基诱导的DNA 损伤所产生的生物标志物———82羟基脱氧鸟苷(82hydroxy2 22deoxyguanosine ,82OH2dG) 的影响,结果表明,白藜芦醇能明显抑制OH·引起的DNA 损伤,其半数抑制浓度( IC50 ) 为10. 9 ±0. 3μmol/ L ,且白藜芦醇与维生素C、褪黑素有协同效应,并能以剂量依赖的形式抑制由佛波酯诱导的HL60细胞株产生自由基,因而减轻DNA 氧化损伤。白藜芦醇还通过对Cu2 + 的螯合作用而抑制低密度脂蛋白(low density lipopro2 tein ,LDL) 的氧化。白藜芦醇能抑制膜脂的过氧化,对大鼠肝细胞微粒体中脂质过氧化的半数抑制浓度比槲皮素低3 倍。白藜芦醇对β2淀粉样蛋白引起的PC12 细胞凋亡有预防作用,能降低β2淀粉样蛋白的细胞毒性及因此而产生的细胞凋亡及 细胞间活性氧介导物的积累,抑制β2淀粉样蛋白诱导激活的核因子kappaB (nuclear factor kappaB , NF2κB) 活性和因β2淀粉样蛋白影响所致的线粒体膜电位的降低13 。白藜芦醇的抗氧化、抗自由基作用对于预防和治疗因氧化损伤引起的各种紊乱和失调具有非常深远的意义。 2 抑制NF2κB活性 白藜芦醇的抗肿瘤作用与抑制κ B 激酶活化密切相关,Holmes2McNary 等14 对白藜芦醇是否可以调整NF2κ B 活性进行研究,发现白藜芦醇具有抑制NF2κB 活化调控的关键因子———κ B 激酶活性的作用,白藜芦醇通过阻断κ B 激酶活性,抑制NF2κ B 活化而抑制癌症,为阻断肿瘤发生方面提供了合理的分子机理。白藜芦醇是NF2κ B 活化和NF2κ B 依赖性基因表达的强效抑制剂,其机理可能是抑制上游的信号元件,白藜芦醇可以阻断编码单细胞化学诱 导物蛋白21 基因(属于NF2κ B 调控的基因) 表达,诱导纤维母细胞凋亡。Afaq 等15 对白藜芦醇干预紫外线B(ult raviolet B ,UVB) 辐射引起的SKH21 裸鼠皮肤损伤进行了研究,0. 2 ml 25 μmol/ L 白藜芦醇丙酮溶液干预能明显抑制短期UVB 暴露的

虎杖提取工艺的探讨

虎杖提取工艺的探讨 【摘要】目的：探寻虎杖有效成分提取的最佳工艺条件。方法：运用超声技术辅助提取虎杖的虎杖苷，采用高效液相测定其含量，辅以适当的分析及实验对比。结果：提取方法影响大于提取次数，大于溶剂量优选条件为采用超声辅助回流提取3次。加入20倍的溶剂量。结论：该方法稳定，可靠，简便，快速，准确。 【关键词】虎杖；提取工艺；提取率 虎杖为蓼科植物虎杖Polygonum CuspidatumSieb.et Zucc.的干燥根茎及根。［1］具有清热解毒，活血定痛，祛风利湿，化痰止咳，泻下通便的功效，其制剂目前许多法定标准及各类文献均有记载，多数厂家的提取工艺大都采用水煮醇沉法或醇提法，其法存在一些不合理因素，从而影响了成品的主要成分含量，为了进一步提高产品质量，我们对虎杖的提取工艺进行了探讨并对提取溶媒的用量，提取方法，提取次数等工艺条件进行了实验，并以虎杖苷为指标进行提取条件论证及含量测定。通过实验对比，从中选择最佳提取工艺条件。希望可以为虎杖有效成分提取的新方法研究提供参考。 1仪器与试药 1.1仪器 高效液相色谱仪2.3对照品制备：精密称取经五氧化二磷为干燥剂减压干燥24小时的虎杖苷对照品11.26mg。置25mL量瓶中，加乙醇溶解并稀释至刻度。摇匀，精密量取1mL，置25mL量瓶中，加乙醇至刻度。摇匀，即得（C对=18.02mg·L-1）。 2.4线性关系 分别精密吸取2.3项下虎杖苷对照品溶液2.0，4.0，8.0，12.0，16.0和20.0mL 进样，以峰面积积分值为纵坐标（Y），虎杖苷的进样量为横坐标（X）进行线性回归，得到回归方程为：Y=7.1606X+0.5551，r=0.9999，结果表明虎杖苷进样量在36.04—360.40mg范围内呈良好的线性关系。 2.5精密度试验 精密吸取对照品溶液10μL，重复进样5次，测得对照品溶液峰面积，计算RSD为0.6%（n=5）表明精密度良好。 2.6稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液10μL，分别于0，1，2，4，8和24小时进行测定，结果24小时内测定结果稳定，RSD为1.05%（n=6）。

高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量

高效液相色谱法测定虎杖中白藜芦醇的含量 摘要:采用高效液相色谱法测定了虎杖不同生长条件及不同部位的白藜芦醇含量?建立了以色谱柱为Zorbax CB-C18(4.6×250 mm,5 μm),流动相为甲醇-水(35∶65,V/V),流速为0.8 mL/min,检测波长为306 nm,柱温为室温,进样量为80 μL 的高效液相色谱方法?结果表明,白藜芦醇浓度在2~100 μg/mL范围内与峰面积积分值呈良好线性关系(r=0.999 9);平均回收率为99.1%,RSD=1.2%(n=6)?野生虎杖和组织培养虎杖白藜芦醇含量存在较大差异,虎杖不同部位白藜芦醇含量也存在较大差异,其中以野生虎杖根中白藜芦醇含量最高?虽然在不同培养条件下,虎杖的不同部位都含有白藜芦醇,但与野生虎杖根相比含量差距较大,不能代替野生虎杖根的药用价值? 关键词:虎杖;白藜芦醇;高效液相色谱法 Determination of Resveratrol in Polygonum cuspidatum by HPLC Abstract: The contents of resveratrol in different growing condition and different part of Polygonum cuspidatum were detected by HPLC. The separation was performed on Zorbax CB-C18 column (250 mm×4.6 mm, 5 μm) in methanol-water (V/V=35/65)with the flow rate of 0.8 mL/min and detected at 306 nm in room temper ature after injecting 80 μL sample. The linear range of resveratrol was 2~100 μg/mL with an average recovery of 99.1% (RSD=1.2%,n=6). The content of resveratrol in wild and tissue culture of Polygonum cuspidatum were different, and the contents of resveratrol in different parts of Polygonum cuspidatum also varied. The highest resveratrol in Polygonum cuspidatum was observed in wild plants. Though resveratrol of Polygonum cuspidatum differed in different culture conditions, the highest resveratrol content was detected in the roots of wild Polygonum cuspidatum, which indicated that the medical value of wild Polygonum cuspidatum was irreplaceable. Key words: Polygonum cuspidatum; resveratrol; HPLC 白藜芦醇(Resveratrol)又称芪三酚,现代药理研究证明:白藜芦醇具有抗肿瘤?抗氧化?抗菌?抗炎?抗自由基?保护肝脏?保护心血管和抗心肌缺血?免疫调节?降血糖?降血脂等作用[1,2]?另外白藜芦醇还有抗衰老?皮肤保健和美容功效[3,4]?朱鸿津采用HPLC法测定虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc.)中白藜芦醇含量,测定结果表明,虎杖根中白藜芦醇含量可高达千分之一,可作为白藜芦醇的提取原料[5]?然而,由于虎杖根的野生资源有限,大量采挖使野生资源日趋减少,近年来有一些利用组织培养快速繁殖虎杖的报道?文涛等[6]测定发现虎杖愈伤组织中也含有白藜芦醇,并对虎杖不同部位白藜芦醇含量进行分析,结果发现虎杖根?茎?叶中均含有白藜芦醇,其中多年生根中含量最高[7]?综上所述,虎杖不同生长条件?不同部位均含有白藜芦醇?准确测定虎杖不同生长条件及不同部位白藜芦醇含量,将

定量核磁共振波谱法同时测定中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量

DOI :10.11895/j.issn.0253_3820.140654 定量核磁共振波谱法同时测定 中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量 禹珊1 郭强胜1 王会琳2 高建平2 许旭*1,3 1(上海应用技术学院化学与环境工程学院,上海201418)2 (上海中医药大学中药学院,上海201203) 3(中国科学院天然产物有机合成化学重点实验室,上海200032)摘 要 建立了定量核磁共振波谱法同时测定虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的方法三样品用80%乙醇和丙酮两次超声提取净化,再用定量核磁共振波谱法测定三考察了样品预处理和核磁共振实验条件对测定结果的影响,选择氘代二甲亚砜_重水(10?1,V /V )为溶剂,用基准物质邻苯二甲酸氢钾标定的2,3,5_三碘苯甲酸为内 标,选择脉冲延迟时间为5s,采样次数为32次三定量峰为6.388~6.391(白藜芦醇:H_2,6,d,2H)和 6.322~6.330(虎杖苷:H_4,t,1H)三结果表明,NMR 测定的精密度均小于0.6%,线性相关系数(r )均大于0.999,白藜芦醇和虎杖苷的检出限分别为0.23和0.24g /L,定量限分别为0.69和1.57g /L,包括样品提取过程的回收率分别为9 7.7%~103.5%(RSD =2.4%)和94.5%~99.2%(RSD =1.6%),显示出定量核磁共振法在中药定量时的可靠性三实际测定4种虎杖饮片及配方颗粒样品中白藜芦醇和虎杖苷含量分别为3.57~5.69mg /g 和12.73~24.07mg /g三关键词 定量核磁共振;虎杖;白藜芦醇;虎杖苷 2014_08_20收稿;2014_10_05接受本文系中国科学院天然产物有机合成化学重点实验室研究基金资助项目(2013_2014)*E_mail:xuxu3426@https://www.sodocs.net/doc/9617630310.html, 1 引 言 虎杖为蓼科植物虎杖(Poilgonum cuspidatum Sieb.et Zucc )的干燥根茎及根,主要功效为利湿退黄, 清热解毒,散瘀止痛,具有抗菌抗病毒二扩张血管二抗肿瘤二调节代谢等药理作用[1]三虎杖作为常用中药已收入中国药典[2],不久也会被收入欧洲药典[3]三虎杖含有大黄素和大黄素甲醚等蒽醌类化合物二白藜芦醇和虎杖苷(白藜芦醇苷)等二苯乙烯类化合物二鞣质和多糖等成分三其中,白藜芦醇和虎杖苷是虎杖中两种主要药效成分[1,2](化学结构见图1),这两种成分测定主要以高效液相色谱[2,4]和液相色谱_ 图1 白藜芦醇和虎杖苷的结构式Fig.1 Chemical structure of resveratrol and polydatin 质谱联用[5]为主三定量核磁共振波谱(Quantitative nuclear magnetic resonance spectroscopy,qNMR)方法简单二快捷,实际样品测定时可以不使用待测 组分的对照品[6]三已先后被美国药典二英国药 典[7]二欧洲药典收录,中国药典2010版也已收录[8]三近几年来,qNMR 方法已被广泛用于化学药物[9~13]二中药与植物提取物[14~19]二体液样品[20,21]二异构体[22]二食品[23,24]等的定量分析三本研究在对虎杖样品进行有效提取的基础上,建立了qNMR 定量测定其中白藜芦醇和虎杖苷两种药效成分的方法,考察了实验条件的影响,对所建立的方法进行了验证,并用于实际样品分析三2 实验部分 2.1 仪器与试剂Bruker AVANCE III 500MHz 核磁共振谱仪(德国Bruker 公司);M2P 精密天平(精度0.001mg,德第43卷 2015年1月 分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第1期69~74

白藜芦醇总结

白藜芦醇资料总结 一、白藜芦醇简介 白藜芦醇(Resveratrol，简称Res)又称芪三酚，化学名称为3，4，5一三羟基二苯乙烯(3，4，5-~ihy-一drolystilbence)，是含芪类结构的二苯乙烯芪类、非黄酮类多酚物质[4-5]。目前已经在21科、31属、72种植物中发现Res，如葡萄科的葡萄属、蛇葡萄属，豆科的落花生属、决明属、槐属，百合科的芦醇属，桃金娘科的桉属，蓼科的蓼属等。存在Res的植物多是常见的药用植物，如决明、藜芦、虎杖等，有的是食物，如葡萄。 二、白藜芦醇用于保健品 白藜芦醇应用于保健品，临床实验研究表明，经常服用大量的富含白藜芦醇的食品，可以有效降低心血管疾病发生的可能，同时能减少总的胆固醇。近年来以白藜芦醇为活性成分的保健食品层出不穷：在日本，白藜芦醇作为食品添加剂使用，减少了人血清脂质，加速肝脏代谢活动。将白藜芦醇作为食品添加剂加到各种酒中，配制出对心血管疾病有良好预防作用的低醇，高白藜芦醇的新型保健佐餐酒；Paradise her Resveratrol 及加拿大的Natrol resveratrol 均为含白藜芦醇的保健品；我国已将白藜芦醇的植物提取物制成降脂、美容和减肥的天然保健食品，如天津天狮集团的天狮活力康（天狮活力康胶囊，已由中华人民共和国卫生部批准，每粒胶囊白藜芦醇含量大于或等于25毫克，0.35gx60粒，198元/盒），上海纳贝生物制品有限公司的益生胶囊。Res的保健食品通常为片剂、胶囊、软胶囊、颗粒剂、冲剂、口服液等形式，产品价格为30美元／瓶，每瓶产品中Res含量约为100mg。白藜芦醇作为抗氧化剂具有血管扩张功能，可有效抑制血管细胞中组织因子和细胞质的异常表达，从而防止心血管疾病的发生。它还能有效抑制血浆中的甘油三酯、脂类过氧化物，以及血小板凝结，具有预防和治疗动脉硬化、心脑血管疾病的功能，还可防治缺血性脑中风如脑梗塞、脑血栓的形成。1998年美国艾尔?敏德尔编撰《抗衰老圣典》时，将白藜芦醇列为“100种最热门有效抗衰老物质”之一。 三、白藜芦醇用于化妆品 白藜芦醇分子结构具有捕获自由基、抗氧化、吸收紫外光的特性，在化妆品方面表现出卓越的功效，是一种很好的天然抗氧化剂。此外，白藜芦醇还能够有效的促进血管扩张，具有抗炎、杀菌和保湿作用，适合祛除皮肤粉刺、包疹、皱纹等，可用于保湿、晚霜、润肤类化妆品。

HPLC法测定虎杖白藜芦醇的含量及其稳定性研究

HP LC 法测定虎杖白藜芦醇的含量及其稳定性研究 Ξ C AO Y 曹　庸1,2,于华忠2,张　敏2,李国章2,萧浪涛1 (1.湖南农业大学省教委植物激素重点实验室,湖南长沙410128;2.吉首大学湖南省林产化工工程重点实验室,湖南张家界427000) 摘　要:　白藜芦醇已被列为抗心血管、抗癌最有前途的药物之一。由于白藜芦醇对光、热不稳定,本研究建立了一套简单而提取率高的从虎杖中提取白藜芦醇的样品处理方法,研究了高效液相色谱法测定虎杖白藜 芦醇的条件。采用色谱柱:岛津Shim 2park C LC 2ODS (150mm ×6.0mm ,i.d.5μm ),以乙腈∶水(体积比为41∶59 )溶液为流动相,流速1.0m L/min ,检测波长306nm 。在此条件下,样品溶液进样质量浓度范围在500～1000μg/ m L 时,白藜芦醇含量与峰面积呈良好的线性关系。检出限为10ng/m L ,且回收率高。 关键词:　虎杖;白藜芦醇;高效液相色谱法 中图分类号:T Q91;S789 文献标识码:A 文章编号:0253-2417(2004)02-0061-04 HP LC DETERMINATION OF RESVERATRO L CONTENT IN PO L YG ONUM CUS PIDATUM AND THE ST ABI LITY OF RESVERATRO L C AO Y ong 1,2,Y U Hua 2zhong 2,ZH ANG Min 2,LI G uo 2zhang 2,XI AO Lang 2tao 1 (1.Hunan Provincial K ey Laboratory o f Phytohormones ,Hunan Agriculture Univer sity ,Changsha 410128,China ;2.K ey laboratory o f Hunan Forest Product &Chemical Industry Engineering ,Jishou Univer sity ,Zhangjiajie 427000,China ) Abstract :Resveratrol is one of the m ost feasible medicine for preventing human cancer.It is unstable against light and heat.An extracting method was established in this study ,which is simple ,and of high yield.S tudy on theconditions of high perfor 2mance liquid chromatography for the determination of resveratrol content was investigated to be as follow :Shim 2park C LC 2ODS column (150mm ×6.0mm ,i.d.5μm ),m obil phase CH 3CH 2C N ∶H 2O (14∶59),flow rate 1.0m L/min ,wavelength 306nm.The lineal correlation between content of resveratrol and peak area is g ood.The lower detection limit was 10ng/m L.K ey w ords :Polygonum cuspidatum ;resveratrol ;HP LC 虎杖(Polygonum cuspidatum Sieb.et Zucc )为蓼科蓼属小灌木,为传统中药。其根茎有祛风利湿,散痰定痛,止咳化痰的作用[1]。白藜芦醇的化学名称为反-3,4′,5-三羟基二苯乙烯,分子式C 14H 12O 3,分子质量228.25[2]。存在于虎杖、葡萄等植物中,虎杖中白藜芦醇含量远远高于葡萄等其他植物[3]。现代药理学试验表明白藜芦醇对人体具有许多医药保健作用。主要包括降低血脂[4],抑制血小板活性[5],对动脉粥样硬化、冠心病具有保护作用[6],对癌症具有预防作用[7～8],实验证明它对5种人体肿瘤细胞模型均有抑制作用[9],并具有雌激素样作用[10]。20世纪90年代以来,国外对葡萄酒中白藜芦醇的保健作 Ξ 收稿日期:2003-09-28 　基金项目:湖南省科技厅重点科技攻关资助项目(03J ZY 3020)　作者简介:曹庸(1966-),男,湖南泸溪人,副教授,博士生,从事天然产物开发及生物化学的研究。 第24卷第2期2004年6月 林　产　化　学　与　工　业Chemistry and Industry of F orest Products V ol.24N o.2June 2004

虎杖中虎杖苷的微生物发酵转化研究

虎杖中虎杖苷的微生物发酵转化研究 摘要:从中药材虎杖中筛选到一株具有转化虎杖苷能力的根霉菌株T-34,利用该菌株产生 的B-葡萄糖苷酶能将虎杖苷转化为白藜芦醇.虎杖的液体发酵动力学研究结果显示:根霉菌 T-34能够直接利用虎杖煮提液中的碳源、氮源等作为其生长所需的营养,并且产生的B-葡萄糖苷酶与底物虎杖苷的转化具有相对应的关系,用HPLC测得虎杖苷的转化率达98%. 关键词:微生物转化;虎杖;虎杖苷;白藜芦醇;B-葡萄糖苷酶 Biotransformation of polydatin fromPolygonum cuspidatum byRhizopussp. T-34 Abstract:, isolated by strain-screening test, could transform polydatin into resveratrol during fermentation ofPolygonum cuspidatumin this experiment. Kinetics of fermentation was studied to follow the transformation process, and the results suggested could utilize carbon re- source, nitrogen resource and etc directly as its nutrition, furthermore,B-glucosidase produced by the strain was correspondingly related to the transformation of polydatin, and the transformation rate of polydatin could reach 98%. Key words:microbial transformation,Polygonum cuspidatum,polydatin, resveratrol,B-glucosidase 1 引言 虎杖始载于5名医别录6,为蓼科植物虎杖的干 燥根茎,主要有效成分为二苯乙烯类和蒽醌类化合 物,前者包括白藜芦醇及其糖苷[1].据报道白藜芦 醇具有抑制肿瘤、抗氧化、抗自由基、抗血栓、抗过 敏、抗动脉粥样硬化和具有冠心病、缺血性心脏病、 高血脂症的防治作用,白藜芦醇已被列为抗心血 管、抗癌最有前途的药物之一[2].干燥虎杖根茎中 白藜芦醇含量仅为%~% ,而虎杖苷含量 约为2%左右[3],虎杖苷可在肠道中被糖苷酶分解 释放出白藜芦醇,发挥其药理作用[4].目前有研究 用酸水解法对虎杖苷进行分解[5],但是酸碱会造 成环境污染,降低产量,因此不宜用化学法进行水 解.也有用改性纤维素酶直接对虎杖苷进行分 解[6],但成本较高、工艺较为复杂,不利于推广应 用.本项研究采用微生物发酵法转化虎杖苷,即没 有强烈的酸碱反应发生,又无需粗提苷,有效的避 免了上述两种方法存在的缺陷.因此利用专一微 生物进行发酵是提高虎杖中白藜芦醇含量的有效 2008年4月