病理组织切片制作技术
病理组织切片制作技术
病理组织切片常用的制作方法有三种。即石蜡切片法，冰冻切片法和火棉胶切片法。以石蜡切片法为代表，切片的基本制作过程是：
组织取材T固定T冲洗T脱水T透明T浸蜡T组织包埋T组织切片T展片附贴T切片脱蜡
T染色T脱水T染片透明T封固。
以上基本过程是互相联系的，任何一环节出现问题，都将使整个切片制作归于失败。因此应细致、耐心、认真负责，并事先做好计划安排。
一、取材采取病料，要刀剪锐利，剪切时不可挤压，扯拉病料，以防人为损伤。切取的工具要清洁。采取病料越新鲜越好，一般不超过死后24 小时。应选择病变部与可疑病变部切取，切取时要由表及里，有浅入深并包括周围正常组织一部分。特殊病料应根据器官的结构特点切取。管状，囊状和皮肤组织应注意垂直切取（横切）。带有薄膜的组织，要防止切时薄膜分离和脱落。
切取组织块大小，以 1.5X 1.5X 0.3厘米为宜，最厚不宜超过0.5厘米。组织块病变一面应平整光滑，另一面可不平整，以便包埋时辨认。切取后，放入事先准备好的装有固定液的磨口玻璃广口瓶中，并做好标记。
二、固定
固定的目的是迅速将组织细胞杀死，使细胞中的蛋白质，糖，脂肪等凝固，从而保持与活组织相似的结构状态。材料取下后，应迅速固定。固定液数量应为病理组织块的5到20倍。由于一般把组织块浸入固定液后数小时，固定液渗入组织液的深度只达2到3厘米。因此，可以放置冰箱内固定，使组织内酶失去作用，细菌也能停止滋生。
最常用的固定液是10%的福尔马林溶液：使用时，用40%的甲醛饱和水溶液10毫升，加水90 毫升配成。
三、冲洗
固定后的组织块，应将固定液洗去。一般均用流水（自来水）冲洗12到24小时左右。及时
冲洗尚有停止固定的作用，防止固定过度，有利于制片染色。
冲洗时如不方便用流水冲洗，也可用较大容器盛装水浸洗，每隔相当时间换水一次。整个浸洗时间比流水冲洗应稍长一些。酒精固定的组织材料不需冲洗。
四、脱水
经过固定的组织，冲洗后要进行脱水。脱水的目的在于将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，为石蜡等其他包埋剂浸入组织创造条件。
常用的脱水剂为酒精。由于酒精可以任何比例与水结合，对组织穿透力强，又能使组织硬化，因而不能将组织从水中直接移入浓度高的酒精中，应从低浓度逐渐到高浓度。脱水必须充分，否则给浸蜡造成困难。
除用酒精作脱水剂外，还可以用正丁醇（N—Butyla alcohol）。正丁醇微溶于水，能与各种浓
度酒精混合，也能直接溶解石蜡。故组织经正丁醇脱水后，不须经二甲苯透明。用正丁醇作脱水剂，组织块收缩减低，也不会过硬，故比酒精优越。
五、透明
透明的目的是将组织内的酒精用矿物油或植物油置换出来，并溶解石蜡，帮助石蜡浸透组织。由于经过透明剂处理的组织块用肉眼观察呈透明状，故称这一过程为透明。
常用的透明剂为二甲苯（Xylol）,因其穿透力较强，因而组织在二甲苯中停留时间不宜过长，一般透明时间在30分钟左右即可。
六、浸蜡
浸蜡是指组织经过透明作用以后，放入溶化的石蜡中浸渗，使石蜡浸入组织块中，冷却后，才能进行
切片。
通常选择熔点在52?56C之间的石蜡，并视切片时环境的气温而选择。室温高则选用熔点稍高的石蜡，反之，则选用熔点较低的石蜡，这样可防止切片时石蜡太软或易碎裂。
浸蜡的过程是：
二甲苯石蜡混合液（1：1） 1 小时
二甲苯石蜡混合液（1：2） 1 小时
石蜡（1） 1 小时30 分
石蜡（2） 1 小时30 分
上述过程可在56 C?58C恒温箱中进行，含二甲苯的混合液可用磨口小瓶盛装。
七、包埋包埋就是将已浸渗好的组织包埋于浸渗剂中。根据需要，包埋的方法常有石蜡包埋法和火棉胶包埋法。
石蜡包埋法：
（1）先将熔化的石蜡倒入包埋框，用加热的镊子将欲包埋的组织块在蜡液内放置好。注意各组织块之间的距离和每个组织块的位置和方向。
（2）迅速第二次往平皿内倾倒蜡液，淹没组织块。待蜡液出现凝固层后，即轻轻放入冷水盆中或冰箱中使其凝固。石蜡完全凝固后，倒出冷缩的蜡块片，用加热的外科刀，按组织块位置修整蜡片待用。
对于实验动物（狗和兔等）组织，一般的脱水透明和浸蜡时间如下：
处理步骤处理时间（min）处理步骤处理时间（min ）
①75%酒精长短不定二甲苯I、n⑥30
②85%酒精120 —300二甲苯川⑦ 60
③95%酒精I和H 120 —300 56 —58 C石蜡⑧ 30
④无水酒精I、□、川30 56 —58C石蜡⑨ 60 —120
⑤无水酒精川60 —120 56 —58 C石蜡⑩ 120—180 注：摘自病理学技术，人民卫生出版社，王伯，李玉松，黄高，张远强主编。
八、组织切片
不同的切片制备方法，其切片方法也有较大差别，组织切片法包括石蜡切片法、冰冻切片法、火棉胶切片法、石蜡包埋半薄切片法、树脂包埋薄切片法和大组织石蜡切片法等。常用的切片工具包括组织切片机、切片刀和自动磨刀仪器等。以下分别加以叙述。
（一）石蜡切片法组织经石蜡包埋后制成的蜡块，用切片机制成切片的过程称为石蜡切片法。为现在病理诊断常用的制作切片的方法。在切片前应先切去标本周围过多的石蜡（此过程称为修块）但也不能留得太少，否则易造成组织破坏，连续切片时分片困难。一般切4-6卩m的切片，特殊
情况可切1 —2卩m。要观察病变的连续性，可制作连续切片。除此之外，石蜡包埋的组织便于长期保存，因此石蜡切片仍是目前各种切片制作方法中最常用，最普遍的一种方法。
1．切片前的准备
（1）固定后的标本经脱水、透明、浸蜡和包埋后，制成蜡块。高质量的蜡块和锋利的切片刀是保证切片质量的关键环节。检查切片刀是否锋利，简便的方法是用头发在刀锋上碰一下，如一碰即断，说明刀锋锋利。用显微镜观察可确定刀口是否平整，有无缺口。
（2）准备充足的经过处理的清洁载玻片和恒温烤片装置，大中号优质狼毫毛笔和铅笔（用于在载玻片的粗糙端写号），如用普通载玻片，可用碳素墨水和蛋白甘油按3：1 体积混合后书写。
2．切片制作过程
(1)将预先修好的组织块先在冰箱中冷却，而后装在切片机固定装置上。将切片刀装在刀架上，刀刃与蜡块表面呈5C夹角。将蜡块固定，调整蜡块与刀至合适位置，并移动刀架或蜡块固定装置，使
蜡块与刀刃接触。
(2)切片多使用轮转式切片机，使用时左手执毛笔，右手旋转切片机转轮。先修出标本，直到组织全部暴露于切面为止，但小标本注意不要修得太多，以免无法切出满意的用于诊断的切片，标本应注意切全。切出蜡片后，用毛笔轻轻地托起，尔后用眼科镊夹起，正面向上放入展片箱(展片温度根据作用的石蜡熔点进行调整，一般低于蜡熔点10?12 C)，待切片
展平后，即可进行分片和捞片。切片经30%的酒精初展后，再用载玻片捞起放入展片箱更易展平。为减少切片刀与组织块在切片过程中产生的热量，使石蜡保持合适的硬度，切片时可经常用冰块冷却切片刀和组织块，尤其在夏季高温季节更为必要。
(3)轮转式切片机切取组织，是由下向上切，为得到完整的切片，防止组织出现刀纹裂缝，应将组织硬脆难切的部分放在上端(如皮肤组织，应将表皮部分向上。而胃肠等组织，应将浆膜面朝上) 。
(4)捞片时注意位置，要留出贴标签的空间，并注意整齐美观。捞起切片后，立即写上编号。
(5)切片捞起后，在空气中略微干燥后即可烤片。一般在60C左右烤箱内烤30min即可, 也可用烤片器烤片。血凝块和皮肤组织应及时烤片。但对脑组织待完全晾干后，才能进行烤片。否则，可能产生气泡影响染色。
3．注意事项
(1)组织的取材和固定取材时，组织块的大小厚薄应适当，过大、过厚的组织，固定液不易渗透，易引起固定不良。过小、过薄的组织，在固定和脱水的过程中易变硬或产生弯曲扭转，同样影响切片质量。陈旧、腐败和干枯的组织不宜制作切片。用陈腐组织制成的切片，往往核浆共染，染色模糊，组织结构不清，无法进行观察。固定不及时和固定不当的组织，染色时常出现核质着色较浅，轮廓不清，出现不同程度的片状发白区。组织固定时，固定液的量应充足，至少要在 4 倍以上，同时注意组织块不要与容器粘连。至于组织固定的时间，根据具体情况加以掌握。有关固定时应注意的事项，可参见有关章节。
(2)组织脱水、透明和浸蜡组织脱水用的各级酒精，应保证相应浓度，以便组织脱水彻底。但无水酒精中，组织块放置时间不宜过长，否则组织过硬，切片困难。遇到此情况，可将组织浸在香柏油中软化，用二甲苯洗去香柏油后，再重新浸蜡和包埋。脱水酒精，尤其是无水酒精中混有水分，则组织脱水不干净。经二甲苯时，组织也无法透明，呈现浑浊。此时应将组织在新的酒精中重新脱水。二甲苯透明也应充分，否则不利于石蜡的浸透。但组织在二甲苯内的时间应严格掌握，时间过长组织易碎，也无法切出好的切片。时间不足，则石蜡不易浸透。浸蜡的温度也不宜过高，时间长短也应加以控制。总之，组织脱水、透明和浸蜡对于切片质量都有一定影响，组织脱水、透明和浸蜡过度，组织块变硬变脆，因此对于小块组织或小动物标本应注意时间。但若时间不够，组织块硬化不够，也不利于切片和染色，因此，应注意各具体环节的操作，并注意保证各种试剂的质量。
( 3)切片切片刀要求锋利且无缺口，切片自行卷起多由切片刀不锋利所致，切片刀有缺口时，易造成切片断裂破碎和不完整。骨组织切片时，用重型刀较好。全钢刀或单面钨刀也适合石蜡或火棉胶包埋的骨组织。
(4)切片刀和切片机切片刀放置的倾角以20- 30C为好。倾角过大切片上卷，不能连在一
起。过小则切片皱起。应注意维护切片机，防止因螺丝松动产生震动，切片时会造成切片厚
薄不均。遇硬化过度的肝、脑、脾等组织时，应轻轻切削，防止由于震动产生空洞现象。
(5)特殊要求切片的制作石蜡切片虽然有很多优点，但制片过程中要经过酒精和二甲苯等有机溶剂处理，因此很易造成组织内抗原性的丧失，在用于免疫组织化学染色时影
响结果的准确性。因而有人采用冷冻干燥包埋法，即将新鲜组织低温速冻，利用冷冻干燥机在真空和低温条件下除去组织内的水分，然后用甲醛蒸汽固定干燥后的组织，而后在进行浸蜡、包埋和切片。此法可保存组织内的可溶性物质，防止蛋白质变性和酶的失活，减少抗原的丢失。用于免疫荧光标记、免疫酶标记和放射自显影。
（二）冰冻切片法冰冻切片在组织学技术中应用广泛，对临床快速病理诊断尤其具有重要意义。另外，因冰冻
切片制作时不经各级酒精的脱水，二甲苯的透明等过程，因此对脂肪和类脂的保存较好，在进行脂肪染色和神经组织髓鞘的染色常用。
冰冻切片多用于新鲜组织，甲醛固定的组织和低温冰箱冷藏的组织块等。组织不经任何包埋剂而直接放在制冷台上冷却后进行切片。
1．恒冷箱切片将组织块在恒冷箱的切片机上切片。恒冷箱切片机的种类较多，可根据实际情况加以选用。一般调节温度为-25 C左右。箱内温度下降后，打开观察窗，将组织固着器放置到速冻台上，先放少量OCT 或羧甲基纤维素，待冻结后将组织块放上，并在其周围加适量包埋剂，将组织块包埋。组织冻结后，将组织固着器装到切片机上，调整组织的切面与刀刃平行并贴近刀刃，将厚度调至适当位置后，关闭观察窗。初步修出组织切面后，放下抗卷板，开始切片。切出切片用载玻片贴附后，进行吹干或固定。这种切片用于科研和教学的连续切片，效果较好。在切片前，应预先启动进行预冷，同时准备多个冷却台，用于多块组织切片。
2．半导体制冷冰冻切片法组织块放置在半导体制冷台上，加少许蒸馏水，调好切片
的厚度。接通循环流水后，再接通电源，而且在使用的全过程中流水不能中断，关闭电路后，才能停水。还应注意电源正负极不能接反，用整流电源控制温度。冰冻组织周围的水不宜过多，用手检查组织块的硬度，当可切成厚薄一致的切片时，即可切片。切片用毛笔展平后，立即用载玻片贴附，待切片刚要融化时，即刻入固定液内固定1min。已固定的组织切片，
收集于清水中。根据目的进行染色。暂时不染色的切片，用载玻片吸附。
3．甲醇制冷器制冷箱为附有带导管的制冷台和制冷刀的甲醇循环装置，其冷却速度较快，属开放式，做一般常规冰冻切片用。
4．二氧化碳冰冻法将组织块用蒸馏水洗后，放在冰冻切片机的冷冻台上，加蒸馏水
少许。打开冷冻台的二氧化碳开关，二氧化碳气体喷出，待组织出现冷霜时，关闭二氧化碳，即可切片。组织冷冻过硬易碎，若冷冻不够，组织块硬度不足，切片呈粥糜状，无法成片，应用间歇冷却法继续冷却。硬度一般在刚开始解冻时最适合，应迅速切片。
5．冰冻切片粘片法冰冻切片粘片法基本按石蜡切片的粘片处理，但烤片温度不宜超过40C。烤干后立即取出，温度过高，时间过长，则切片易碎。烤干后用70%酒精和自来水略
洗后即可染色。
九、苏木精－伊红染色方法
苏木精-伊红染色方法，简称HE染色方法，是生物学和医学的细胞与组织学最广泛应用的染色方法。在病理学实验室中称为常规染色方法。病理细胞和组织学的诊断，教学和研究都是用HE染色方法观察正常和病变组织的形态结构。因此病理学工作者必需学习和掌握这种染色方法。
（一）HE染色的基本原理
1．细胞核染色的原理
细胞核内的染色质主要是去氧核糖核酸（DNA），DNA 的双螺旋结构中，两条链上的磷酸基
向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的苏木精硷性染料以离子键或氢键结合而染色。苏木精在碱性染料中呈蓝色，所以细胞核被染成蓝色。
2．细胞浆染色的原理细胞浆内主要成分是蛋白质，在染液中加入醋酸使胞浆带正电荷（阳离
子），就可被带负电荷（阴离子）的染料染色。伊红Y 是一种化学合成的酸性染料，在水中离解成带负电荷的阴离子，与蛋白质的氨基正电荷（阳离子）结合而使细胞浆染色，细胞浆、红细胞、肌肉、结缔组织、嗜伊红颗粒等被染成不同程度的红色或粉红色，与蓝色的细胞核形成鲜明的对比。伊红是细胞浆的良好染料。
随着科学技术快速发展和电子计算机的广泛应用，染色自动仪器的出现，许多实验室已用全自动染色机代替人工染色。
（二）人工操作苏木精伊红染色方法
1．染色步骤二甲苯I 脱蜡10min. 二甲苯II 脱蜡5min 。
无水乙醇洗去二甲苯1min x 2次。
95%酒精1min。
90%酒精1min。
85%酒精1min。
自来水洗2min 。苏木精染色1min 至5min 。自来水洗1min 。
1%盐酸酒精分化20s。
自来水洗1min 。
稀氨水（1%）反蓝30s。自来水洗或蒸馏水洗1min。
伊红染色20s 至5min 。
自来水洗30s。
85%酒精脱水20s。
90%酒精30s。
95%1 酒精1min。
95%11 酒精1min。
无水乙醇I 2min。
无水乙醇II 2min。
二甲苯I 2min 。
二甲苯II 2min 。
二甲苯III 2min。中性树胶或加拿大树胶封片。
2．染色结果细胞核呈蓝色，细胞浆、肌肉、结缔组织、红细胞和嗜伊红颗粒呈不同程度的红色。钙盐和各种微生物也可染成蓝色或紫蓝色。
（三）自动染色机苏木精伊红染色程序
1 ．二甲苯I 10min 。
2．二甲苯II 10min。
3．无水乙醇1min 。
4．无水乙醇1min 。
5．95%酒精I 1min。
6．95%酒精II 1min。
7．90%酒精I 1min。
8．80%酒精1min 。
9．自来水洗1min 。
10．苏木精染色1至5min。
11．自来水洗1min 。
12．1%盐酸酒精分化30s。
13．自来水洗5min 。
14．伊红染色30s 至5min 。
15．自来水洗30s。
16．85%酒精20s。
17．90%酒精30s。
18．95%酒精1min。
19．95%酒精1min。
20．无水乙醇I 2min 。
21．无水乙醇II 2min 。
22．二甲苯I 2min 。
23．二甲苯II 2min 。
24．二甲苯III 2min 。
25．中性树胶或加拿大树胶封片。
（四）冰冻切片苏木精伊红染色
1．恒冷箱冰冻切片，粘贴在载玻片上，用95%酒精95ml 和冰醋酸5ml 的混合固定液
固定1min 。自来水洗。
2 ?苏木精染色1?2min。
3．自来水洗30s。
4. 1%盐酸酒精分化20s。
5. 自来水洗20s。
6. 稀氨水30s。
7. 自来水洗20s。
8. 伊红染色20s?1min。
9. 自来水洗10s。
10. 85%酒精20s。
11. 90%酒精30s。
12. 95%酒精1min。
13. 无水乙醇I 1min 。
14. 无水乙醇II 2min。
15. 二甲苯I 1min。
16. 二甲苯II 2min。
17. 二甲苯III 2min。
18 .中性树胶或加拿大树胶封片。
（五）染色液的配制
1 .苏木精（素）
苏木精是一种纯天然染料，是从苏木素树提炼出来的，苏木树主产墨西哥的坎偑切，苏木精的染色性能差，经过一百多年精心加工配制，现用的苏木精配方，染色性能好，保持时间长，是世界上唯一的常规细胞核染料，
2．苏木精的配制苏木精的配方很多，可根据不同需要选用，Harris 配方最常用。
（1）Harris 苏木精的配制
苏木精1g
硫酸铝钾15g
无水乙醇10ml
蒸馏水200ml 先用蒸馏水加热溶解硫酸铝钾，用无水乙醇溶解苏木精再倒入已溶解的硫酸铝钾蒸馏水
中，煮沸1min后，稍冷却，慢慢加入红色氧化汞0.5g,继续加热至染液变为紫红色，用纱布盖
瓶口，用前滤纸过滤后每100ml 加冰醋酸5ml 。
（2）Mayer 苏木精改良配法
A液
苏木精2g
无水乙醇40ml
B液
硫酸铝钾100g
蒸馏水600ml
稍加热使硫酸铝钾在水中溶解，将苏木精溶于酒精中，再将A液与B液混合煮沸2min。用
蒸馏水补足600ml ，加入400mg 碘酸钠充分混匀，苏木精染液呈紫红色。
（3）Gill 改良苏木精染液的配制
苏木精2g
无水乙醇250ml
硫酸铝钾17g
蒸馏水750ml
碘酸钠0.2g
冰醋酸20ml
先将苏木精溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水中。两液溶解后将其混合，加入碘酸钠待苏木精氧化成紫红色，再加入冰醋酸。
3．伊红溶液的配制
（1 ）水溶性伊红
伊红Y0.5－1g
蒸馏水100ml
先将水溶性伊红加入蒸馏水中，用玻璃棒将伊红搅起泡沫后过滤，每100ml加冰醋酸1滴。（2）乙醇性伊红液的配制
伊红Y 0.5?1g
90%酒精100ml
先将伊红溶于酒精中，用玻璃棒研碎溶解后，每100ml 加冰醋酸 1 滴。用乙醇性伊红液染细胞浆后不可经水洗直接用85%酒精脱水。
4．盐酸酒精分化液的配制
浓盐酸0.5?1ml
75%酒精99ml 此液用一段时间后需要延长或更换液体，新液分化时间要短。
5．染色中注意事项
（1 ）脱蜡
石蜡切片必需经过脱蜡后才能染色，脱蜡前切片要经烘烤，这样使组织与玻璃片粘贴牢固。组织切片脱蜡应彻底，脱蜡好坏主要取决于二甲苯的温度和时间，所有的时间都是指新的二甲苯在室温
25C以下时，如果二甲苯是用过一段时间，切片又比较厚，室温低应增加脱蜡时间，脱蜡不净是影响染色不良的重要原因之一。
（2）染色石蜡切片经水洗后放入Harris 苏木精染色，一般情况下在新配的苏木精溶液中只需要染1min 左右，应根据染片的多少，逐步把染色时间延长。苏木精染色后，不宜在水中和盐酸酒精停留过长，切片分化程度应在镜下观察，分化过度，应水洗后重新在苏木精中染色，再水洗分化和使切片在自来水或稀氨水中充分变蓝。
新配的伊红染色快，切片染色不宜过长，应根据染切片的多少逐步延长染色时间，切片经伊红
染后，水洗时间要短。
（3）脱水
切片经过染色后，通过各级酒精脱水，首先从低浓度到高浓度，低浓度酒精对伊红有分化作用，切片经过低浓度时间要短，向高浓度时逐步延长脱水时间；脱水不彻底，使切片发雾，在显微镜下组织结构模糊不清。
（4）透明与封片石蜡组织切片染色经过脱水后必须经二甲苯处理，使切片透明，才能用树胶封片。
常用切片封片胶有国产的中性树胶，光学树胶，加拿大树胶和合成树脂（DPX。在封片时，树胶不能太稀或太稠，不能滴加的太多或太少，太稀或太少切片容易空泡，树胶也不可太多，不要使树胶溢出玻片四周太多。标签要附贴牢固。封片中不能对着切片呼气。
（5 ）常规石蜡切片和HE染色标本的质量标准（全国统一评定标准）
①切片完整，厚度 4 —6um，薄厚均匀，无褶无刀痕。
②染色核浆分明，红蓝适度，透明洁净，封裱美观。
病理组织切片的制作过程
病理组织切片的制作过程 1．取材组织取材的方法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和方法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和方法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm 即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 (7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法：比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。
组织病理切片以及HE染色
组织病理切片以及HE染色 （一）实验原理：苏木素-伊红染色（hematoxylin-eosin staining ，HE染色）能较好地显示组织结构和细胞形态，可 用于观察、描述正常和病变组织的形态学，而且HE切片可较长时间保存，被称为常规染色方法。 （二）实验步骤： 一、制作切片 1、取材、固定：取小鼠肾脏组织适当大小，并且放入盛有固定液的小瓶中保存。 2、组织的脱水、透明、浸蜡与包埋 组织固定后还需经过脱水、透明、浸蜡等过程才能制成蜡块，进行石蜡切片。脱水是指用某些溶媒置换组织内水分的过程。组织脱水后，必须经过一种既能与酒精相混合又能溶解石蜡的溶剂，通过这种溶剂的媒介作用，使石蜡浸入组织块。在此过程中，因组织块中的水分被溶剂所取代，组织块变得透亮，因此称之为透明。组织染色后也要进行透明。最常用的透明剂为二甲苯，处理时间为30min左右。 组织经透明后在溶化的石蜡内浸渍的过程称浸蜡。用其他浸
透剂（如火棉胶、碳蜡和明胶等）渗入组织内部的过程 称为浸透或透入。为使石蜡充分渗入组织块中，常需经过3小时的浸渍，期间需更换3次石蜡。一般用于浸蜡的石蜡熔点为52- 56Co 组织块经过浸蜡或浸透，用包埋剂（石蜡、火棉胶、碳蜡和树脂等）包起的过程称包埋，包埋后便制成含组织的块。这种包埋块可使组织达到一定的硬度和韧度，有利于切成薄片。石蜡包埋是病理日常工作中最常用的包埋方法。用于包埋的石蜡熔点一般为60C左右。但在有些情况下，如某些酶染色时，则需采用低温石蜡包埋，以保存组织内酶的活性。 3、切片、制片 石蜡切片常用的切片机有轮转式切片机和平推式切片 机，以前者为多用。切片厚度一般为3-5卩m切片时先将组 织片平摊于一块玻璃上，迅速滴加30%的酒精水溶液使组织片完全展开，再移入40C恒温热水器中。也可直接将组织切片移入40C的恒温热水器中，待组织片完全展开后将其贴附于载玻片上，经56-60C烤片30-60min后即可进行染色。 二、HE染色 1. 二甲苯脱蜡2X 10 min ;
病理组织切片的制作
病理组织切片的制作 卢文丽吴中华方肇勤 （2007/01/04） 一、器材（按一小组，约4-6人） 眼科镊：直无勾10cm 、弯无勾10cm各5把； 组织镊；12.5cm 2把； 眼科剪：直尖10cm 4把； 解剖剪：cr/14，4把； 普通双面刀片：10片/盒×1盒； 染色架：5个； 染色缸：1000ml，14-15个； 切片盒：50片/盒×3盒或100片/盒×2盒； 37度、60度恒温箱：各1个； 磨砂载玻片：50片/盒×3盒； 盖玻片：100片/盒×2盒； 广口瓶：30ml或60ml×20个； 滴管及配套吸头：4个； 玻璃漏斗：φ90 3个；玻璃搅棒：2支 普通粗孔大张滤纸：20张； φ90mm玻璃培养皿：4个； 中号普通毛笔：2支； 烧杯：500ml 、1000ml 各1个； 量筒：100ml、500 ml、1000 ml各1个； 组织切片机及配套刀片：4台； 摊片用水浴锅：2台； 生物切片石蜡：5盒，熔点：56-58℃； 电子天平：1台； 酒精灯：150ml，4台； 脱水篮：1-2个； 打火机、标签纸、铅笔各一，卷筒纸、乳胶手套、口罩、医用纱布足量。 二．试剂 苦味酸（2.4.6-三硝基苯酚）：30g/瓶×1瓶； 37%~40%福尔马林液：500ml/瓶×1瓶； 冰醋酸：AR，500ml/瓶×1瓶； 无水乙醇：AR，500ml/瓶×10瓶； 二甲苯：AR，500ml/瓶×10瓶； hematoxylin苏木色素（苏木精）：10g/瓶×1瓶； 酸性品红（曙红丫水溶）：25g/瓶×1瓶； 碘酸钠：AR，500g/瓶×1瓶；柠檬酸：AR，500g/瓶×1瓶; 水合氯醛：AR，250g/瓶×1瓶;铵矾（ALNH4(SO4)2·12H2O）或钾矾（ALK(SO4)2·12H2O）：500g/瓶×1瓶 蛋白甘油（甘油/鸡蛋清=1/1）：50ml 中性树胶：100g/瓶×2瓶。若中性树胶过于粘稠，可与二甲苯按7/3的比例稀释。 蒸馏水：5000ml
病理实验切片描述
病理实验切片描述 1、肝细胞脂肪变性:肝细胞浆内出现大小不等、数量不一的圆形空泡（为脂滴所在位置），肝小叶的中央带和中间带改变较明显。病变严重时空泡增大，肝细胞核被挤压向肝细胞一侧 2、肉芽组织：主要由纤维母细胞、新生毛细血管及大量炎细胞组成。表浅部新生毛细血管的方向大致与肉芽的表面垂直；间质疏松水肿，有较多炎细胞，多为中性粒细胞，此外可见淋巴细胞、巨噬细胞及浆细胞；纤维母细胞体积大，形态不规则，常为有突起的星形或梭形，胞浆丰富略呈嗜碱性，细胞核圆形、卵圆形，染色质疏松，染色浅，核仁明显 3、慢性肺淤血：肺泡壁毛细血管扩张充血，纤维结缔组织增生致使肺泡壁增厚。肺泡腔可见较多巨噬细胞和心力衰竭细胞，后者胞浆内含多量棕色颗粒。部分肺泡腔内可见红细胞（出血）及淡粉色的蛋白质水肿液 4、混合血栓：闭塞静脉内可见粉染带状、条索状或块状的血小板梁，有分枝相互连接，其间有粉染丝状纤维素网，网眼内可见大量红细胞及少量白细胞。血栓周边可见肉芽组织长入 5、肾贫血性梗死:梗死区为淡粉色，无细胞核结构，但仍可见肾组织结构轮廓。梗死区周围可见充血出血带。 6、纤维素性心包炎：心包表面为纤维素渗出，纤维素为粉染颗粒状无结构物质，呈网状分布。 7、肠假膜性炎（肠粘膜纤维素性炎）：切片取自结肠，粘膜坏死，有处表面有脱落的膜样物，坏死的粘膜表层组织和纤维素、白细胞形成膜样物--假膜。粘膜下层可见毛细血管扩张充血，间质水肿，淋巴细胞、嗜酸性粒细胞浸润 8、蜂窝织炎性阑尾炎：阑尾壁各层均有大量中性粒细胞浸润，并见脓细胞，小血管扩张充血，阑尾系膜也有改变 9、肺脓肿：肺组织内可见脓肿灶，脓肿中心为变性坏死的中心粒细胞。周围肺泡内有多量纤维素渗出，并有大量中性粒细胞及脓细胞浸润，周边肺组织肺泡壁毛细血管扩张充血，肺泡腔内有大量粉染水肿液 10、皮肤乳头状瘤：鳞状上皮乳头状增生，由表及里分别为鳞状上皮角化层、颗粒细胞层、棘细胞层及基底细胞层。间质随上皮长入乳头内，其中可见疏松结缔组织、毛细血管和少量淋巴细胞。 11、鳞状上皮细胞癌:切片中有大小不等、形态不一的癌细胞团，即癌巢，周围绕以间质结缔组织。癌巢中心可见层状角化物，即角化珠或癌珠，相当于正常鳞状上皮的角化层。周边的细胞与棘细胞相似，可见细胞间桥。癌巢周围的癌细胞较小，立方状，深染，与基底层细胞相似。间质中可见淋巴细胞和浆细胞浸润。 12、腺癌:癌细胞排列成大小不等、形态不整的腺管样。癌细胞呈明显异型性，多数癌细胞柱状或立方状，细胞核大深染。腺管上皮细胞呈多层，且参差不齐，极向紊乱，并可见较多核分裂和病理性核分裂。间质为纤维结缔组织，内有炎细胞浸润。
病理科常规切片(HE切片)质量PDCA管理循环案例示范剖析
病理科常规切片（HE切片）质量PDCA管理循环案例示范病理切片质量的好坏关系到病理诊断质量和水平的高低，正确的病理诊断往往取决于准确的显微镜下观察，因此病理切片质量的好坏将直接影响诊断结果的准确性，甚至会带来错误的结果。一张好的病理切片与标本的固定、取材、脱水、包埋、切片、染色等环节有密切的关系。过去，我科一直严抓病理切片质量，每月都随机抽查30例常规切片进行质量评价，总体来说切片质量较高，基本达到诊断的要求。但是每月的切片质量检查或多或少总发现存在一些缺陷，如切片刀痕、裂隙、气泡、胶液外溢等。 目的：通过检查常规切片质量，发现存在影响切片质量的问题，查找原因，提高切片质量。 数据收集：参照《临床技术操作规范病理学分册》中的常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准（见表1），对今年1-7月常规病理切片进行质量分级评定（每月随机抽查30例常规切片，见表2），总的优级率87.1%，优良率97.6%，总体达标。 表1 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准 优质标准满分（分）质量缺陷减分 组织切面完整，内镜咬检、穿刺标本切面数10 组织稍不完整：减1～3分；不完整： 减4～10分；未达到规定面数：减5 分 切片薄(3～5μm)，厚薄均匀10 切片厚(细胞重叠)，影响诊断：减6～ 10分；厚薄不均匀：减3～5分
切片无刀痕、裂隙、颤痕10 有刀痕、裂隙、颤痕，尚不影响诊断： 减2分；有刀痕、裂隙、颤痕，影响 诊断：减5分 切片平坦，无皱褶、折叠10 有皱褶或折叠，尚不影响诊断：各减2 分；有皱褶折或折叠，影响诊断：各减 5分 切片无污染10 有污染：减10分 无气泡（切片与载玻片间 /盖片与切片、载玻片间）， 盖片周围无胶液外溢 10 有气泡：减3分；胶液外溢：减3分 透明度好10 透明度差：减1～3分；组织结构模糊： 减5～7分 细胞核与细胞浆染色对比清晰10 细胞核着色灰淡或过蓝：减5分红(细 胞浆)与蓝(细胞核)对比不清晰：减5 分 切片无松散，裱贴位置适当10 切片松散：减5分；切片裱贴位置不 当：减5分 切片整洁，标签端正粘牢，编号清晰10 切片不整洁：减3分；标签粘贴不牢： 减3分；编号不清晰：减4分 合计100 注：切片质量分级标准：①甲级片：≥90分（优）；②乙级片：75～89分（良）；③丙级片：60～74分（基本合格）；④丁级片：≤59分（不合格）
HE组织切片制备标准操作程序
HE染色标准化操作程序 一、目的 保证病理切片质量，以达到准确的病理诊断。 二、范围 石蜡包埋组织 三、试剂，仪器 酒精、二甲苯、苏木素、伊红、盐酸酒精、脱水机、包埋机、切片机、漂烘仪、染色机。 四、工作流程 （一）制片前 制片前过程从标本送到实验室至包埋结束为止。包括： 1.标本的交接编号记录及检查 （1）实验室人员收检标本时人必须认真执行查对制度，包括：送检标本种类和数量与送检单上填写的是否一致；容器上的联号或姓名与送检单上是否符合；固定液的种类（通常要求为10％中性缓冲甲醛液）和量是否符合要求；送检单是否按规定用墨水笔逐项填写清楚。若发现有错误、疑问或不符合要求时，应立即查询清楚和适当处理，在合格后方可签名接收。如标本已干涸、腐败或其它明显不符则不应接收。接收标本应在初级人员接收后，再由中级人员和主检或具体负责人员复核，以确保没有差错发生。 （2）收到标本后应按标本顺序逐一在申请单上编上病理检查号，并在标本容器外壁贴上相应的号码，然后按号码先后顺序排列放好，再在申请单上打上收到日期。将收检的标本，按申请单逐一向负责处理的医师交代清楚，包括标本种类、数量、临床诊断及有无特殊注意事项等。 （3）取检过程中，实验室人员应认真记录填写好工作单，包括标本号、块（包）数、有无特殊处理、标本名称，如标本全取、标本过小等均应记录在案以备日后查对。对一些易碎、小而少的标本应用尼龙丝小袋或擦镜纸包裹好后再做上机处理，以防丢失。标本的取材块通常控制在2cm×2cm×0.3cm左右。标本取检多于一个包埋块者，在标本病理检查号后缀写-1或-2等，以便于查找校对。取好的标本应及时浸泡在指定的固定液中，来不及取完的标本特别是大标本应缝上号码投入固定池内以备次日再取。标本取检完后，自报告发出之日起，通常规定小标本保留1月以上，大标本保留6月以上。 （4）标本在上机处理之前，必须由初级和中级实验技术人员共同检查标本总数与申请单和工作单是否一致，确定无疑后方可上机处理。 2.标本的处理 利用全自动脱水机处理。（根据组织的大小、分类分别设置程序） 所有试剂由专人负责定时检测定期更换，并做好详细记录。 3.标本的包埋 首先清点检查标本，确认完好无缺后方可开始包埋操作，操作时应注意核对标本与工作单记录是否吻合。包埋的石蜡温度应尽量与标本浸蜡温度一致，大约控制在65℃～70℃之间，温度太低会造成包埋平面凹凸不平，尤其是内镜活检等小块标本，易出现切片不完整而发生漏诊现象。
病理切片描述
7?慢性肺淤血 低倍镜：肺泡壁增厚，肺泡壁内毛细血管扩张充血。高 倍镜：肺泡腔内含淡红色水肿液及心衰细胞、 8?慢性肝淤血 中央静脉及周围肝窦扩张充血，近中央静脉的肝细胞萎缩甚至消失 9.混合血栓 低倍镜：粉红色不规则小梁与浅红色区域交织存在高倍镜：粉红色小梁为已经崩解而凝聚成颗粒的血小板，小梁边缘附近有较多的中性粒细胞，血小板小梁间的浅红色区域为丝网状的纤维素及自溶的红细胞 14.急性化脓性阑尾炎蜂窝织炎 低倍镜：阑尾各层内有弥漫的炎细胞浸润，腔内有炎性 渗出及坏死脱落的粘膜上皮，浆膜面有炎性渗出物，血 管扩张充血 高倍镜：各层浸润的炎细胞为中性粒细胞，浆膜面渗出 物由纤维素和中性粒细胞组成 20.食管鳞状细胞癌 低倍镜：可见癌巢，与间质分界清楚，高分化的癌巢中 可见层状红染的角化珠，低分化者不可见高倍镜：高分 化癌细胞体积较大，核大深染，可见病理性核分裂像和 细胞间桥，癌巢中间的角化珠内可见角化不全的蓝色细 胞核碎屑。低分化的癌细胞分化差，癌巢内细胞极性， 层次不明，癌细胞排列紊乱，大小不等，可见核分裂 像，五角化珠与细胞间桥，间质有炎细胞浸润 21.胃腺癌 低倍镜：分化好者，癌细胞排列成腺管状，排列不规 则，多层排列。分化差者，癌细胞形成癌巢，与间质分 界清楚，癌细胞突破粘膜层向深层浸润高倍镜：癌细胞 表现不同程度的异型性，大小不一, 形态各异，排列紊乱，可见病理性核分裂像 22.淋巴结转移腺癌 低倍镜：正常淋巴结结构尚存，部分淋巴结破坏，于淋 巴结边缘窦及皮质，髓质内可见多量大小不一，形态不 规则的癌性腺体， 高倍镜：癌细胞有明显的异型性，可见病理性核分 裂像23.骨肉瘤 低倍镜：癌组织由大小不等，异型性显著的癌细胞构成，可见肿瘤性类骨质形成 高倍镜：癌细胞多为立方形，多边形，梭型，排列不规则，核大，深染，部分可见核仁，异型性明显 31.急性风湿性心内膜炎theumatic myocarditis 低倍镜：心肌间质充血，水肿，心肌纤维排列疏松，血管周围可见由簇细胞构成的梭型或椭圆形病灶，即风湿小体 高倍镜：小体中央有少许红色絮状物质，为纤维素样坏死，其外部见许多风湿细胞，体积较大，梭型或多边形，胞浆丰富，嗜碱性，核大，卵圆形，空泡状，染色质集中于核中央，有细丝放射至核膜，似枭眼，纵切像毛虫。外层有少量淋巴细胞，单核细胞及浆细胞浸润。 诊断要点：心肌间质形成具有特征性的Ashoff小体 32.主动脉粥样硬化 atherosclerosis of aorta 低倍镜：主动脉内膜部分增厚，表层纤维结缔组织增生，并有玻璃样变。内膜深层见一片浅依红色无结构样坏死物，为粥样斑块。其中有许多呈斜方形，菱形和针样空隙，为胆固醇结晶 高倍镜：可见泡沫细胞及胆固醇结晶，中膜肌层不同程度的萎缩，外膜疏松有少量淋巴细胞浸润诊断要点：内膜表面纤维组织增生，玻璃样变性内膜深层为大量坏死物，并可见胆固醇结晶内膜底 部和边缘科技那肉芽组织增生，外周可见少许泡沫细胞中膜不同程度萎缩 33.冠状动脉粥样硬化 冠状动脉内膜部分增厚，半月形向管内突出，表层纤维结缔组织增生，部分玻璃样变，下位依红色无结构粥样斑块，中膜平滑肌萎缩。 34.肺气肿 低倍镜：部分肺泡管和肺泡囊，肺泡腔明显扩张成囊状，细小支气管壁增厚 高倍镜:肺泡间隔变薄，断裂，相互融合成囊状，肺泡壁毛细血管数量减少，细小支气管管壁可见炎细胞浸润 诊断要点：肺泡扩张融合，肺泡间隔断裂细小 支气管慢性炎细胞浸润
病理组织切片制作
实验四病理组织切片制作 一、实验目的 组织切片技术是病理学中不可缺少的一个组成部分。通过实验，能够使学生了解和掌握病理组织切片的基本方法之一，即石蜡包埋的组织切片法。 二、实验原理 根据病变及检查的要求，合理采集病料，经固定、脱水、透明、浸蜡、包埋后进行切片，在进行染色得到结果。固定是用化学药品把组织原来的结构保存下来，以便观察。脱水是除去组织中的水分，以利于透明和浸蜡。组织的透明是便于透蜡包埋。包埋的是使石蜡透入组织内部，把软组织变为适当硬度的包埋块，以便切成薄片。最后使用切片机，将包埋块中组织切成薄片。 三、主要仪器及试材 已固定好病料，石蜡，手术刀，手术剪，镊子，脱水框，染色缸，梯度脱水酒精和透明剂一套，烘箱，切片机，毛笔，玻片，蛋白甘油，染色架，酒精灯，三角架，大烧杯，温度计，火柴，切片刀，记号笔或铅笔。 四、实验方法与步骤。 （一）固定 采取的病理材料必须立即放入10％福尔马林固定液中。 （二）脱水 组织经固定后，尚含有多量水分，而水与透明剂苯、石蜡根本不相融合。必须先把组织中的水分除去。但脱水剂必须是与水在任何比率下均能混合的液体，脱水剂常兼有硬化组织的作用。最常用的脱水剂为酒精、丙酮等。 1．酒精沸点78．4℃，为最常用的脱水剂。脱水能力强，并能使组织硬化，能较好地与二甲苯透明剂相混合。最终结果表明，只要脱水环节处理好，都会得到好的切片。脱水的程序为70％一80％一95％一100％。各级酒精2—4小时，视材料的大小、厚薄而定。100％酒精有硬化组织的作用，时间不宜太长，一般不超过3小时。脑组织、脂肪组织或疏松结缔组织，脱水时间要适当延长。 2．丙酮沸点为56℃。脱水作用比乙醇强，但对组织块的收缩较大，主要用于快速脱水或固定兼脱水。脱水时间l一3小时左右。 （三）透明 透明对组织有脱酒精及透明两种作用。当组织中全部为透明剂占有时， 光线可以透过，组织可呈现不同程度的透明状态，此种现象称为透明，具有这种作用的试剂称为透明剂。常用的透明剂有： 1．二甲苯是最常用的良好透明剂，不影响各种染色。二甲苯易溶于酒精，能溶解石蜡，也是封固剂，不吸收水，透明能力强，易使组织收缩、变脆，故组织块在二甲苯中不宜久留，特别对小动物组织材料必须严格控制好(各种器官的透明差异很大)，通常为半小时到1小时左右。 当二甲苯透明时必须持组织放在专用二甲苯皿器中，这样可减少透明时间，有利于组织透明彻底，在换组织块透明时候，所用的镊子等器具必须干燥，不得将水滴混入二甲苯中，因水滴易被组织吸收而影响透明程度，潮湿天气更应引起注意。2．冬青油（水杨酸甲酯）为无色油样液体，易溶于醇、醚及冰醋酸，难溶于水。透明速度较慢，数小时或数天。一般经无水乙醇脱水后再入冬青油。 （四）浸蜡（透蜡） 组织经脱水透明后要用石蜡等支持剂透入内部，并除去组织中的透明剂，把软组织变为适当硬度的蜡块，以便切成切片。
组织病理切片的制作过程
组织病理切片的制作过程 1．取材组织取材的法是制作切片的一个重要程序，根据教学、科研及外检的具体要求取自人体（外科手术切除标本、活检标本、尸检标本）或动物，并确定取材的部位和法。取材者需要掌握解剖学、组织学、病理学的基本理论知识，还要掌握实际操作技术，每个组织器官的取材都有一定的部位和法，不能任意切取组织作为制片材料，不然，无法达到教学、科研和临床诊断的目的，具体要求如下： (1)材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 (2)组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。 (3)勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 (4)规取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规化取材。 (5)选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 (6)保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。
(7)保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 (1)小块组织固定法：这是最常用的法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 (2)注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 (3)蒸汽固定法：比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。 3．脱水透明标本经过固定和冲洗后，组织中含有较多的水分，必须将组织块的水分置换出来，这一过程叫做脱水。无论是用蜡切片，还是用火棉胶切片，都必须除去组织中所含水分，因含水组织与蜡、火棉胶等包埋材料不相容，常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。 脱水的步骤是：80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时，此过程可用脱水机自控完成。 丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂，但因其脱水能力很强，对组织有剧烈收缩作用，在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于蜡，还要经过一个能溶于蜡的溶剂替代过程称为透明。常用的透明剂有二甲苯、三氯甲烷、水酸甲酯等。 4．浸蜡、包埋
病理切片1
病理切片，是指取一定大小的病变组织，用病理组织学方法制成病理切片〔通常将病变组织包埋在石蜡块里，用切片机切成薄片，再用苏木精－伊红(H-E)染色〕，用显微镜进一步检查病变。病变的发生发展过程，最后作出病理诊断。 病理切片： 病理标本的一种。 制作时将部分有病变的组织或脏器经过各种化学品和埋藏法的处理，使之固定硬化，在切片机上切成薄片，粘附在玻片上，染以各种颜色，供在显微镜下检查，以观察病理变化，作出病理诊断，为临床诊断和治疗提供帮助。 制作 1．取材 （1）材料新鲜：取材组织愈新鲜愈好，人体组织一般在离体后，动物组织在处死后迅速固定，以保证原有的形态学结构。 （2）组织块的大小：所取组织块较理想的体积为2.0cm×2.0cm×0.3cm，以使固定液能迅速而均匀地渗入组织内部，但根据制片材料和目的不同，组织块的较理想体积也不同，如制作病理外检、科研切片，其组织块可以薄取0.1～0.2cm即可，这样可以缩短固定脱水透明的时间，若制作教学切片厚取0.3 ～0.5cm，这样可以同一蜡块制作出较多的教学切片。（3）勿挤压组织块: 切取组织块用的刀剪要锋利，切割时不可来回锉动。夹取组织时切勿过紧，以免因挤压而使组织、细胞变形。 （4）规范取材部位: 要准确地按解剖部位取材，病理标本取材按照各病变部位、性质的不同，根据要求规范化取材。 （5）选好组织块的切面:根据各器官的组织结构，决定其切面的走向。纵切或横切往往是显示组织形态结构的关键，如长管状器官以横切为好。 （6）保持材料的清洁:组织块上如有血液、污物、粘液、食物、粪便等，可用水冲洗干净后再放入固定液中。 （7）保持组织的原有形态:新鲜组织固定后，或多或少会产生收缩现象，有时甚至完全变形。为此可将组织展平，以尽可能维持原形。 2．固定 （1）小块组织固定法：这是最常用的方法，从人体或动物体取下的小块组织，须立即置入液态固定剂中进行固定，通常，标本与固定液的比例为1:4～20，但组织块不宜过大过厚，否则固定液不能迅速渗透。故取组织块的大小一般为2.0cm×2.0cm×0.3cm。 （2）注射、灌注固定法：某些组织块由于体积过大或固定液极难渗入内部，或需要对整个脏器或整个动物体进行固定。这时宜采用注射固定或灌注固定法。将固定液注入血管，经血管分支到达整个组织和全身，从而得到充分的固定。 （3）蒸汽固定法：比较小而厚的标本，可采用锇酸或甲醛蒸汽固定法。如血液涂片，则应在血片未干燥前采用锇酸或甲醛蒸汽接触固定。 最常用的固定液有10%甲醛固定液和95%乙醇固定液。 3．脱水透明 标本经过固定和冲洗后，组织中含有较多的水分，必须将组织块内的水分置换出来，这一过程叫做脱水。无论是用石蜡切片，还是用火棉胶切片，都必须除去组织中所含水分，因含水组织与石蜡、火棉胶等包埋材料不相容，常用的脱水剂为一系列不同浓度的乙醇。 脱水的步骤是：80%、90%、95%、100%各种浓度乙醇2小时，此过程可用脱水机自控完成。丙酮也是一种脱水能力很强的脱水剂，但因其脱水能力很强，对组织有剧烈收缩作用，在制作科研、教学切片时一般不用该试剂。因乙醇、丙酮等不溶于石蜡，还要经过一个能溶于石
病理科常规切片(HE切片)质量PDCA管理循环案例示范教学资料
病理科常规切片(H E 切片)质量P D C A管理循环案例示范
病理科常规切片（HE切片）质量PDCA管理循环案例示 范 病理切片质量的好坏关系到病理诊断质量和水平的高低，正确的病理诊断往往取决于准确的显微镜下观察，因此病理切片质量的好坏将直接影响诊断结果的准确性，甚至会带来错误的结果。一张好的病理切片与标本的固定、取材、脱水、包埋、切片、染色等环节有密切的关系。过去，我科一直严抓病理切片质量，每月都随机抽查30例常规切片进行质量评价，总体来说切片质量较高，基本达到诊断的要求。但是每月的切片质量检查或多或少总发现存在一些缺陷，如切片刀痕、裂隙、气泡、胶液外溢等。 目的：通过检查常规切片质量，发现存在影响切片质量的问题，查找原因，提高切片质量。 数据收集：参照《临床技术操作规范病理学分册》中的常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准（见表1），对今年1-7月常规病理切片进行质量分级评定（每月随机抽查30例常规切片，见表2），总的优级率87.1%，优良率97.6%，总体达标。 表1 常规石蜡包埋-HE染色切片质量的基本标准 优质标准满分 （分） 质量缺陷减分 组织切面完整，内镜咬检、穿刺标本切面数10 组织稍不完整：减1～3分；不完 整：减4～10分；未达到规定面数： 减5分 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢2
切片薄(3～5μm)，厚薄均匀10 切片厚(细胞重叠)，影响诊断：减 6～10分；厚薄不均匀：减3～5分 切片无刀痕、裂隙、颤痕10 有刀痕、裂隙、颤痕，尚不影响诊 断：减2分；有刀痕、裂隙、颤痕， 影响诊断：减5分 切片平坦，无皱褶、折叠10 有皱褶或折叠，尚不影响诊断：各减 2分；有皱褶折或折叠，影响诊断： 各减5分 切片无污染10 有污染：减10分 无气泡（切片与载玻片 间/盖片与切片、载玻片 间），盖片周围无胶液 外溢 10 有气泡：减3分；胶液外溢：减3分 透明度好10 透明度差：减1～3分；组织结构模 糊：减5～7分 细胞核与细胞浆染色对比清晰10 细胞核着色灰淡或过蓝：减5分红(细 胞浆)与蓝(细胞核)对比不清晰：减5 分 切片无松散，裱贴位置适当10 切片松散：减5分；切片裱贴位置不 当：减5分 切片整洁，标签端正粘牢，编号清晰10 切片不整洁：减3分；标签粘贴不 牢：减3分；编号不清晰：减4分 仅供学习与交流，如有侵权请联系网站删除谢谢3
病理切片的制作过程
1.7.1 修整组织 将手术切取的乳腺肿瘤切成一个平整面，各组织块不宜太大，以便固定剂穿透和组织脱水等操作，通常以10 mm×10 mm×3mm或5mm×5mm×3mm为宜。找到不同的部位切取2块，以备后用。 1.7.2 组织洗涤 组织经修整后，组织中的福尔马林等必须冲洗干净，尤其是含有重金属的物质存在。因为残留在组织中的福尔马林，有的不利于染色，有的产生沉淀或结晶影响观察，所以组织修整后应冲洗12h左右。 1.7.3 组织脱水 组织经洗涤后，组织中含有大量水分，由于水与石蜡不能互溶，所以必须将组织中的水分除去。 80%乙醇溶液：2h 95%乙醇溶液:1h 95%乙醇溶液:1h 100%乙醇溶液:30min 100%乙醇溶液:30min 1.7.4 组织透明 由于乙醇与石蜡不相溶，而二甲苯既能溶于乙醇又能溶于石蜡，所以脱水后还要经过二甲苯以过渡。当组织中全部被二甲苯占有时，光线可以透过，组织呈现出不同程度的透明状态。 二甲苯Ⅰ：30min 二甲苯Ⅱ：10min 1.7.5 组织浸蜡 浸蜡的目的是除去组织中的透明剂（如二甲苯等），使石蜡渗透到组织内部达到饱和程度以便组织包埋。浸蜡时间根据组织的透蜡时间较长，需3h左右。浸蜡应在恒温箱内进行，并保持箱内温度在55℃左右，注意温度不要过高，以免组织发脆。 石蜡Ⅰ：1h
石蜡Ⅱ：1h。 石蜡Ⅲ：1h 1.7.6 组织包埋 将经过透蜡的组织连同熔化的石蜡，一起倒入容器内，然后立即投入冷水中，使其立刻凝固成蜡块的过程。包埋时，将纸盒放在温箱旁边，用镊子夹取组织平放于纸盒底部，，再用温镊子轻轻拨动组织，从温箱中取出盛放纯石蜡的蜡杯，沿壁倒入包埋用的纸盒中，速度要慢。待石蜡凝固（约30min）后放入冰箱保鲜层内以备后用。包埋时应根据组织材料、切片厚度、气候条件等因素，选择不同熔点的石蜡，新的石蜡一般要熬顿几次，以免石蜡固定后有气泡，影响切片。用于包埋的石蜡的熔点在50~60℃之间。 1.7.7 组织切片 （1）从冰箱里拿出蜡块，进行修快 （2）将已固定和修好的石蜡块台木装在切片机的夹物台上。 （3）将切片刀固定在刀夹上，刀口向上。 （4）摇动推动螺旋，使石蜡块与刀口贴近，但不可超过刀口。 （5）调整石蜡块与刀口之间的角度与位置，刀片与石蜡切片约成15度左右。 （6）调整厚度调节器到所需的切片厚度，先调约为25um，待切平后改为5um。 （7）一切调整好后方可以开始切片。此时右手摇动转轮，让蜡块切成蜡带，左手持毛笔将蜡带提起，摇转速度不可太急，通常以40-60r/min。 （8）切成的蜡带到10-20cm长时，右手用另一支毛笔轻轻地将蜡带挑起，以免卷曲，并牵引成带，平放在蜡带盒上，靠刀面的一面较光滑，朝下，较皱的一面朝上。 （9）感觉效果较好的蜡片一小段，用单面刀片切取，再放入约43℃的水浴锅中展片，观察切片是否良好。 （10）切片工作结束后，应将切片刀取下用氯仿擦去刀上沾着的石蜡，把切片机擦拭干净妥为保存。 1.7.8 贴片
病理切片详细描述
老师归纳的 1. 肾小管水样变 肾小球周围肾小管体积大，染色淡红 近曲小管上皮细胞肿胀，向管突出，官腔不规则变小，胞浆有粉红色小颗粒，分布均匀，大小一致，细胞核结构清晰 2. 肝脂肪变性 小叶周围肝细胞胞浆出现大小不等的圆形空泡 有的空泡较大，将核挤到一边 3. 肾小管玻璃样变 近曲小管上皮出现大小不一的红色球形颗粒 4. 脾动脉硬化(玻璃样变) 低倍镜：脾动脉增厚，脾小梁增粗，脾小体中央动脉及其小梁的小动脉壁增厚，红染 高倍镜：脾小体中央动脉壁增厚，管腔变小，膜下可见均匀红染无结构物质 5. 脾梗死 低倍镜：红染区即为坏死区，其中散落着一些深蓝色碎屑，为坏死的细胞核 高倍镜：核固缩，碎裂，溶解，脾小体和小梁结构模糊，尚可辨认 6. 肉芽组织 低倍镜：表面有一层炎性渗出物，其下可见大量的新生的毛细血管垂直表面生长，其间有成纤维细胞。深部血管减少，成纤维细胞逐步变为纤维细胞，并有胶原纤维生成 高倍镜：新生毛细血管由单层皮细胞构成，成纤维细胞大，胞浆丰富淡红色，成梭型或分支状，可见各种炎细胞 7. 慢性肺淤血 低倍镜：肺泡壁增厚，肺泡壁毛细血管扩充血。 高倍镜：肺泡腔含淡红色水肿液及心衰细胞、 8. 慢性肝淤血 中央静脉及周围肝窦扩充血，近中央静脉的肝细胞萎缩甚至消失 9. 混合血栓 低倍镜：粉红色不规则小梁与浅红色区域交织存在 高倍镜：粉红色小梁为已经崩解而凝聚成颗粒的血小板，小梁边缘附近有较多的中性粒细胞，血小板小梁间的浅红色区域为丝网状的纤维素及自溶的红细胞 10. 肾贫血性梗死 低倍镜：正常肾组织与梗死组织交错分布，梗死灶可见轮廓模糊的肾小管和肾小球，梗死灶周边部有较多的中性粒细胞浸润 高倍镜：坏死的肾小球及周围肾小管结构模糊，胞质红染，肾小管数目明显减少，残留的细胞核呈固缩状态
病理切片诊断性描述重点
1，大叶性肺炎：肺泡比毛细血管扩张充血；肺泡腔内充满大量中性粒细胞，红细胞，巨噬细胞；肺泡内纤维素渗出及穿过肺泡间孔的现象明显； 2，小叶性肺炎：病变以细支气管为中心，为累计肺小叶的化脓性炎症；细支气管壁有炎性病变，管腔内充满脓性渗出物；有的病灶见毛细血管扩张充血，肺泡腔有浆液，纤维素渗出或伴有中性粒细胞浸润； 3，急性肺粟粒性结核：肺组织内有许多以增生为改变的结核结节，肺组织结构被破坏；有的结节可见红染无结构颗粒的干酪样坏死物，周围绕以许多类上皮细胞喝一些朗汉斯巨细胞，外围有许多淋巴细胞和成纤维细胞；有的结节无坏死组织； 4，慢性肺淤血：肺泡壁毛细血管扩张充血，致肺泡间隔变宽；肺泡腔内可见粉染水肿液，红细胞，心力衰竭细胞；心力衰竭细胞体积大褒奖中有多数棕黄色的含铁血黄素颗粒5，主动脉粥样硬化：动脉内膜局限增厚形成粥样斑块，斑块深部为红染无定形坏死物，内含有胆酷醇结晶，斑块浅表部由纤维结缔组织覆盖形成纤维帽；斑块底部及边缘为含泡沫细胞的肉芽组织；中膜平滑肌不同程度萎缩变薄 6，风湿性心脏病：aschoff小体散在分布在心肌间质；低倍镜下为境界清楚的梭形细胞团，内有aschoff细胞，体积大，呈圆形或类圆形，胞浆丰富，核大，膜清，核呈空泡状，核横切面似枭眼状，纵切面为毛虫状，小体周围有淋巴细胞浸润； 7，霍奇金淋巴瘤：淋巴结构被瘤组织取代；瘤组织以多种反应性炎细胞浸润为背景；单核或诊断性R-S细胞均多见； 8，胃溃疡：由内向外有四层结构，表浅渗出层有中性粒细胞和纤维素渗出，其下红染无结构的坏死组织层，再下为新生肉芽组织层，最下层由肉芽组织和瘢痕组织的过渡层；溃疡底小动脉可见增殖性动脉内膜炎，神经节细胞结节状增生 9，慢性肾小球肾炎：大量肾小球纤维化玻变；周围肾小管萎缩消失，残存肾小球代偿性肥大；间质增生；间质有淋巴细胞浆细胞浸润；肾细小动脉硬化，管壁增厚，管腔狭窄10．弥漫性毒性甲状腺肿：甲状腺有许多新生小滤泡，滤泡腔内可见吸收空泡，上皮细胞呈立方状或柱状，少数滤泡上皮呈乳头状增生突入腔内；间质内血管丰富，淋巴细胞弥漫增生，并可见淋巴滤泡形成； 11，肾小管上皮细胞水肿：区别髓质和皮质，着重看皮质的近曲小管，上皮细胞体积增大或界限不清，胞浆内有许多匀细粉然颗粒，近曲小管腔缘参差不齐呈星芒状，管腔内有淡粉色絮状蛋白物 12，葡萄胎：绒毛明显增大，间质高度水肿及粘液性变；间质内血管消失或异常稀少；细胞滋养层和合体滋养层细胞混合存在，细胞滋养层细胞境界清楚，胞浆淡染，核呈空泡状；合体滋养层细胞胞浆红，核多染色深 13，乳头状瘤：瘤组织由皮肤表面而呈外生性生长，形成手指样结构，表面为肿瘤实质，即层次较多，排列规则的鳞状上皮；深部为纤维结缔组织和血管组成的纤维脉管束为轴心14，高分化鳞癌：癌细胞突破基底膜向下呈浸润性生长，形成大小不一的细胞团，称为癌巢；中心见层状红染的角化珠，周边为基底样癌细胞，棘细胞样癌细胞位于两者之间，细胞之间可见细胞间桥，实质间质分界清楚，间质内有较多以淋巴细胞为主的炎细胞浸润 15，低分化鳞癌：癌细胞大小不等，有巨核瘤细胞，异型性明显，有粗大的核仁及核分裂象，不见细胞间桥和角化珠的形成 16，结肠腺癌：低倍镜下，可见大量密集腺管样结构，浸润于肠壁内，腺管大小不等，形状不一，有的腺管不完整，有的可见背靠背现象；排列多层极性紊乱或消失；癌细胞体积增大，核分裂像易见 17，肺门淋巴结转移癌：淋巴结原有结构破坏代之以转移性的腺癌组织，癌细胞排列呈许多不规则的腺管，有的呈实性细胞条索，癌细胞异型性明显，可见病理性核分裂象
大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色
大鼠肝脏组织病理切片的制作和HE染色 步骤如下： （一）固定与修块 取组织块放入Bouin氏液中，组织块的直径应小于7mm。6小时左右后用双面 刀片将组织块修剪成3-5mm3大小。 （二）脱水与透明 1. 75%乙醇50分钟 2. 85%乙醇50分钟 3. 95%乙醇(I) 30分钟 4. 95%乙醇(II) 30分钟 5. 100%乙醇(I) 30分钟 6. 100%乙醇(II) 30分钟 7 1/2二甲苯（乙醇与二甲苯等体积）20分钟 &二甲苯（I）20分钟 9 .二甲苯（II）10分钟（可依据透明效果而定） 若脱水不好，二甲苯溶液颜色会变混浊。在每一步骤之后，要充分滤干组织块，一般用筒纸吸干组织块上的液体，以免影响其他液体的浓度，但也要防止组织块干燥。全过程约需要5h。（三）浸蜡、包埋与修蜡块 1.浸蜡：将60C恒温箱打开，使石蜡充分溶解，待脱水与透明结束后，将组织块转入石蜡里，放置于60 C恒温箱120分钟。 2 .包埋：将60 C的石蜡倒入纸盒内，然后用小镊子将各组织块按一定的顺序排列好，使切面朝下。不同组别的同一组织包埋于一个蜡块中，以保证切片和染色条件相同。为防止倒入纸盒内的石蜡底部立刻凝固，可将纸盒置于一玻璃板 上（或大培养皿内），然后将玻璃板置于80-90 C左右热水上，包埋时蜡盒底部要放平，做蜡块的蜡要反复冻融较好。 3 .修蜡块：待纸盒内蜡凝固后，用刀片将其修成梯形，组织块与蜡块边缘之间的距离不得小于2mm。 （四）切片 在载玻片上擦少量甘油蛋白。可滴半滴甘油蛋白于载玻片上，用手指充分抹 匀，呈半干状为佳。切片厚约4-8卩m，将切片在55C左右水浴中展开，展开程度 以带黄颜色的组织完全摊平为准。用涂有甘油蛋白的载玻片从水浴中捞取切片，放入37C烘箱中过夜。每个组织块捞片2张。过夜后，将载玻片置于玻片架上， 进行下面的实验。 （五）脱蜡、染色与脱水 倾斜玻片架，将玻片架和载玻片下缘的试剂用筒纸吸干，减轻对其他试剂浓 度的影响。全过程约需要60分钟。 1.脱蜡 （1）二甲苯（I）15分钟 （2）二甲苯（II）15分钟 （3）100%乙醇2分钟 （4）95%乙醇（I）1分钟 （5）95%乙醇（II）1分钟 （6）蒸馏水浸洗1分钟 2 .染色
病理实验切片描述
①肝细胞水样变性：肝小叶结构不清，肝窦受压变狭或消失。肝细胞肿大，胞核位于细胞中央，胞质疏松，内含粉红色嗜酸性颗粒。有的变圆、胞浆空亮，形成气球样变。 ②肝细胞脂肪变性（脂肪肝）：胞浆中出现许多大小不等的空泡（脂肪滴），边界清晰，将细胞核挤向一侧。肝细胞体积增大、肿胀，细胞核明显，细胞与细胞之间界限不清。 ③肉芽组织：新生毛细血管由单层内皮细胞构成，内皮细胞核大，胞浆红染。成纤维细胞呈星形或梭形。可见中性白细胞、单核细胞、淋巴细胞等各种炎症细胞。 ④慢性肺淤血：肺泡壁变厚及纤维化，肺泡腔内含淡红色水肿液，还可见大量含有含铁血黄素颗粒的巨噬细胞即心衰细胞，肺泡壁内毛细血管扩张充血。 ⑤混合血栓：白色血栓：淡红色无结构的呈分支状或不规则珊瑚状的血小板小梁，边缘可见中性粒细胞附着。红色血栓：充满小梁间纤维蛋白网的红细胞所构成。 ⑥亚急性感染性心内膜炎：心瓣膜损伤，在心瓣膜上附有一巨大的赘生物，赘生物由血小板和纤维素构成，其内含有大量淡紫兰颗粒状的细菌团及深蓝色的块状钙化灶。 ⑦风湿性心肌炎：在心肌间质尤其血管周围，有一些梭形细胞团，即风湿小体，中间为纤维蛋白样坏死灶，周围有枭眼或毛虫样的风湿细胞，及少量组织细胞及炎细胞。 ⑧主动脉粥样硬化：内膜增厚凸起，中膜萎缩。纤维组织增生、玻变形成纤维帽，深部可见大量粉红染的无定形的脂质和坏死物及柳叶状的胆固醇结晶，底部及周边部可见肉芽组织、少量泡沫细胞和淋巴细胞浸润。 ⑨急性蜂窝织炎性阑尾炎：阑尾横断面，由内向外共4层，分别为黏膜层、黏膜下层、肌层、浆膜层。部分粘膜上皮及固有层变性坏死，阑尾腔内及浆膜层有炎性渗出物，由中性粒细胞，脓细胞和少量纤维素组成，血管扩张充血。 ⑩肺结核：典型结核结节中央有干酪样坏死，红染无结构的颗粒状物。周围由上皮样细胞、朗格汉斯巨细胞加上外周局部集聚的淋巴细胞和少量反应性增生的成纤维细胞构成。 11肠阿米巴：低倍镜可见肠粘膜溃疡呈口小底大烧瓶状。高倍镜可见溃疡边缘坏死组织与活组织交界处有散在或成群的阿米巴滋养体，呈圆形或略呈椭圆形，胞膜清晰，胞浆呈空泡状，核小而圆，周围有空隙。 12血吸虫性肝硬化（血吸虫肝）：肝小叶正常，散在分布结节状结构，为虫卵结节。结节中央有几个血吸虫卵，组织大片坏死伴嗜酸性粒细胞聚集和大量单核巨噬细胞堆积。 13 胃溃疡：表层可见少量渗出的纤维素和中性粒细胞，渗出层下方为数量不等的坏死组织，坏死层下方为大量增生的肉芽组织，最下层为瘢痕组织层，血管、细胞少而胶原纤维多，溃疡周围胃粘膜有肠上皮化生。 14 门脉性肝硬化：形成假小叶，假小叶内肝细胞排列紊乱有脂肪变性，坏死及再生，中央静脉多偏位或缺如，假小叶周围增生的纤维组织中有淋巴细胞和单核细胞及新生小胆管。 15 肝细胞性肝癌：肿瘤细胞成索状和片状排列，肿瘤细胞大小不一，可见多核瘤巨细胞，细胞核大深染，核分裂像增多，部分肿瘤细胞胞质丰富而红染，细胞核呈圆形或卵圆形。16 毒性甲状腺肿：滤泡呈弥漫性增生，滤泡大小不一，以小形滤泡为主，内有胶质样物质及大量空泡，间质中毛细血管丰富，血管扩张充血，有纤维组织增生，少量炎性细胞浸润。 17 弥漫性系膜增生性肾小球肾炎：肾小球体积增大，肾小球内细胞数目增多，以内皮细胞和系膜细胞增多为主，毛细血管腔狭窄或闭塞，近曲小管上皮细胞变性，肾小管管腔内出现蛋白管型、红细胞或白细胞管型及颗粒管型。 18 新月体肾炎：肾小球内有新月体形成。新月体主要由肾小球壁层上皮细胞增生和渗出的单核细胞组成，在肾球囊内毛细血管丛周围呈新月形或环状。增生的上皮细胞间可见红细胞、中性粒细胞和纤维素性渗出物。 19 肾透明细胞癌：是来源于肾小管上皮细胞的腺癌。肿瘤细胞常排列成片状、乳头状或管