EM有效微生物培育技术
EM有效微生物
培
育
技
术
兴达生态有限公司
一、EM有效微生物培育技术
EM有效微生物是一种功能强大的微生物菌剂，在养殖业使用它后，养殖场臭味大幅度减少或消失，饲料利用率提高，抗病增强，产值增加，繁殖率提高等，且生产出的动物产品为绿色食品。中国农业大学从1992年就开始对EM菌进行了研究实验，对其神奇的效果给予了肯定，但目前由于受出售价格过高的影响，致使没能大规模地推广。现将一简单的培育技术传授给大家，其培育一公斤成本不足一毛钱，而使用效果基本一致。
生产培育场地选择在光线较暗的室内，先准备数个能容纳50公斤以上（容量越大越好）的红色塑料桶（质量要求能容装饮用水的干净塑料桶，不可用废旧曾装过有毒物质的塑料桶），在每个桶中放入1.5～2.5公斤红糖（也称赤砂糖、黄砂糖，也可用黄片糖代替）或4～5公斤糖蜜（糖厂的三级废糖）倒入46～48公斤干净的生水（井水、河水。而自来水含有漂白粉不可用来培育EM），然后加入1公斤EM菌种（菌种数量多少与发酵快慢成正比），最后盖上桶盖，不必完全密封，放在光线较暗的室内让其在半封闭状态下进行发酵，温度15℃～35℃，发酵进行到第四天时，水面会出现泡沫，泡沫个体由小变大，在十天左右泡沫慢慢消失，水面浮起一片白色的悬浮物，到第15天左右悬浮物沉入水底，发酵结束。以上发酵变化只指在温度20℃～35℃时的变化，如果温度低，发酵时间会延长。在培育过程中，如果你经常掀开盖来看，发酵时就不会或很少有泡沫出现，但无泡沫并不影响EM的质量。（如果发酵到第12时在每50公斤正在发酵的EM中加入0.3公斤蜂蜜，培育出来的EM质量会更好，气味、口感、使用效果也更好。）
附：人体饮用EM培育的配方：46公斤冷开水中加入3.5公斤红糖，1公斤EM菌种，操作方法同上，12天左右加入0.5公斤蜂蜜。检测方法同下。
检测EM是否成功的方法：①一看颜色：一般为棕或黄褐色，若变成乳白色说明失败;
②二闻气味：一种较浓的甜酸味或酸味，变成变成另一种气味说明已变质不能使用：③测试PH值;PH值在3.8以下，PH值未达标说明发酵时间不够或红糖放的太少，继续发酵或加糖后再发酵;④把EM装入到一个矿泉水瓶中，拧紧盖，用手摇几下，如果瓶中会产生大量的气体，说明成功，否则失败。里面还有一些悬浮物为正常现象。（注意：如果发现EM变质或你认为，甚至好像觉得变质等情况，应马上停止使用特别是在人体保健上！！）培育好的的EM不能长时间用透明容器装，否则会变质，在一个月内使用，把EM半密封保存即可；若长时间不使用，要放在阴暗干燥处密封保存。培育好的EM在一个月内使用效果最好。在培育过程中，有的会发现上面浮起些小虫，这是由于放在光线较强地方培育的原因，由于光线较强的地方有小家蝇出没，小家蝇会在同的边缘产卵，卵孵化成小蛆，小蛆个体很小，轻松地爬入到了桶中。你只要放在没有小家蝇出没的地方培育，就不会有这个情况了。发现有了小虫，捞出即可，不会造成对EM的使用效果。
当你接种成功第一批EM以后，就重复以上方法不断地培育。以上所培育的每一桶EM 均可做菌种不断地循环培育。只要你不把杀菌的物质（如漂白粉等）弄入到EM菌中，你就可永远像用酵母发酵面粉做包子留老面再发酵一样循环下去……
EM菌种在零下二十度仍可存活，自然解冻后就可使用;温度超过45℃就会开始死亡，60℃就会完全死亡;EM放置一年使用仍有效，但要加大用量。
二、EM菌制剂使用说明
EM原露是目前国内外综合性最强、活性最强的微生物制剂。其适应范围及效果：养殖业使用于一切畜禽及特种养殖，包括猪、牛、羊、兔、狗、鸡、
鸭、鸽、蚕、蚯蚓等。
1、发酵料。制作方法：根据本地饲养习惯取用饲料（或糠、麦麸等），按比例1（EM
原露）：10～20（饲料）：3%水（视材料干湿程度增减水量，目测方法是以手捏成团，指缝见水但不滴水珠，松手一触即散，注意：水多了易酸，少了发酵不透），先用温水融化红糖后，兑入水中同时倒入EM原露混匀，在徐徐倒入饲料反复搅拌均匀成粉末状（不能有团块），然后装入能密闭的容器（桶、缸或厚塑料袋），不能漏气，放置在常温、防鼠的地方厌氧发酵，经4（夏）6（春、秋）10天（冬），即会发出带酸甜的浓郁酒曲香味，表明发酵成功。若出现异味或只酸不香，没有酒曲香味，应查明原因，继续发酵，可将发酵失败的饲料晒干后按要求重新发酵。
制作发酵饲料应注意掌握好：绝对密封，不能漏气；适宜温度为25℃～45℃.EM 原露添加的比例应达到饲喂料总量20或10分之一，如在饲料中掺发酵饲喂，则发酵料中的EM原露和红糖应按实际喂料总量的上述比例添加（提高EM原露与红糖用量）。
2、制作1：（10～20）的EM原露稀饲饮（饲喂发酵饲料的畜禽可一周饲饮一次，不
喂发酵饲料的应全天候饲饮）。
3、用EM原露稀释液（10倍，加防虫液更好）喷洒栏舍，开始2～3喷1次，臭气消
失后10天至15天喷一次。
4、对有病的畜禽可全天饲饮2～4倍稀释液，病重的可用EM原露直接灌服，每天两
次，牲畜每次20～100克，病重禽类（如瘟病）灌服2克（注射器拔去针头后推入），或灌服1～2倍稀释液。
用EM原露发酵饲料可使菜子饼脱毒95%以上，EM原露发酵鸡粪喂猪牛可掺入35%，霉变饲料（包括各种粮食）经严格发酵后能达到品质如新（发酵不成功的不能饲喂）。
效果：
1、促进生长，增进动物食欲，增强动物对营养物质的消化、合成功能，提高饲料报酬。
2、增强禽畜抗病能力，改善体内环境，提高动物免疫力，降低畜禽发病率和死亡率、提高禽畜的成活率、受胎率、饲料转化率，缩短饲养时间10至15天。
3、改善产品质量，消除化学和生物污染，降低了畜禽产品中脂肪、胆固醇含量。
4、提高饲料吸收利用率，以EM菌发酵农作物秸秆，可明显改善秸秆的适口性，提高消化吸收利用率。
5、无环境污染，减少养殖场用药成本，光和菌分解粪臭素，固氮菌抑制氨气排放，放线菌阻断臭素生成，最大限度地减少了畜禽舍的臭味，明显抑制了蚊蝇滋生和传染源。
二、种植业（稻、麦、豆、薯、玉米、油、棉、麻、蔗、烟、蔬菜、果树、花卉、中药材、各种食用菌等）：
1、发酵有机肥施底肥。发酵方法：将有机肥材料（就地取材，垃圾、粪便、秸秆等，应切碎）和6～10倍的EM原露稀释一起用搅拌机搅拌均匀，如没有搅拌机，可以将材料放在阴凉干燥处堆成锥形后，用铁扦均匀插孔，再用6～10倍的EM原露稀释液喷灌进去，水量应是发酵物的 3.5%左右，内外喷湿，以不流淌水为宜（或堆一层20厘米厚一层一层均匀喷洒），最后压实用塑膜覆盖密闭发酵，10天左右表面会出现白丝或红丝，没有臭味即成。视土壤情况每亩施500～1000公斤。
2、兑清水制成稀释液浸种或加2倍清水与EM原露稀释液浇根（10～16倍）及叶面喷施（16～20倍，注意：如比例太高容易造成叶黄、斑点等生理故障），一茬作
物一般不少于3次，最好每5～7天（稻、麦、果树10～15天）喷洒根、叶面一次，持续使用。
3、制作防虫液。原料为EM原露、红糖、烧酒（30度以上）、醋、井水，按1：1：1：1：10的比例，还可以加些辣椒、花椒、大蒜等刺激性的材料，装入聚乙烯塑料容器里（不可用玻璃瓶）拧紧瓶盖，放在常温的室内发酵，数天后瓶里产生气体，这时松盖放气，在拧紧，直至不产生气体即可。使用时加水16～20倍稀释，如效果不明显，可提高浓度到24倍，但嫩叶、幼苗不能低于16倍，喷洒时与10～20倍EM 原露稀释液混合使用效果更好，喷洒植物时叶子两面都要喷到。要及早使用，防重于治。病虫害大量发生后效果不明显。因此用EM原露改善土壤是根本。
上述方法全程配套使用效果最佳，（一茬作物每亩约需1.5～2公斤EM原露），单项使用也可以，但一定要施入土壤（底肥或定根水；或水田苗期及旱地出苗后用20倍稀释液喷洒）以发挥其改良土壤，增加肥力，防治土传病虫害的作用。EM原露可与化肥和除草剂等混用。
效果：分解土壤有机物质，溶磷、解钾、固氮，提高肥效抑制有害微生物，改良土壤性质，增强植物代谢功能，提高光合作用，促进种子发芽、根系发育、开花、结果、提前成熟、提高产量，真正改善品质，生产绿色食品，价值更高更走俏。
三、水产业（使用于所有水产养殖种类，如鱼、虾、憋、鲍鱼、蟹、蛙、螺、鳗、泥鳅等）：
1、放养前3～10天用2倍EM原露稀释液喷洒水面，放养后根据水质情况，开始时每15天喷洒一次，以后一个月左右喷洒一次，每亩水面约需EM原露0.5～1公斤（一次用量）。特种水产应缩短喷洒时间，浓度应适当提高。
2、投入鱼池的粪便应用1（EM原露）：1～3（粪便）的比例处理后投喂（混匀后密闭发酵7天）。
3、制作2倍EM原露稀释液喷洒颗粒料和饲草，现拌现喂。
效果：改善和稳定水质，水体颜色清爽，增加溶氧量，增加有益微生物，明显提高养殖对象的免疫力和抗病性，降低发病率，提高成活率，缩短饲养时间，增重率明显提高，肉质更鲜嫩而不腥。
注意事项：
1、EM原露应在常温下保存，宜存放在避光、凉爽的地方，底部稍浑浊及浮有少量白色物质均属正常，如气味不酸或腐臭即为变质，人畜禁用。
2、每次用完务必盖紧瓶盖。如果用量小，可用干净的小瓶分装出3日左右的用量，用完再倒，尽量减少开启大瓶的次数。若保管的好，一年后没有发生异味可使用，只是活性有所降低，需适当加大用量。
3、在水产上EM原露最好不要与各种抗生素和杀菌剂等药物同时混用。若不小心混用造成池水变臭，要立即换水，再按技术要求用EM原露拌料投喂和稀释液喷洒。
4、EM原露如果结冰，可在自然条件下（屋内或地窖等）自然解冻，不影响使用效果。切不可采用蒸煮等方法人工加热，以免烫死有益微生物。
5、本使用说明为一般方法，由于我国地域辽阔，南北差异较大，请在应用中因地制宜，注意摸索和总结，比如上述方法中20倍为一般标准用量，若您的生产环境状况较差，可将此比例提高至10倍更为保险。
三、EM培育和使用疑难问答
一、EM有效微生物是一项高科技的生物技术产品，按照你们的技术这
么简单就可以培育，这么简单培育的依据是什么？
1、EM是由多种微生物组合而成的生物制剂，它最为高明之处在于把多种微生物组合，形成一个共生态体系。简单地说，这个微生物群如果没有外界的因素对其危害，在没有新的食物供给它们的情况下，它们能自供自给，不会死亡。
2、微生物，即我们日常所说的细菌，只要供给细菌适合的食物，细菌就会大量繁殖，这是铁的事实。我们还经常看到报道，如“福州用生物法治理内河污染”，报道中说：“8月上旬，日本株式会社EM研究机构福州代表处共向福州市内河茶园河下游100米处投入了1吨多EM有效微生物混合液。这标志着福州市内河生物治理计划正式启动。此次治理在河流底泥中注入了含EM菌固液制剂的博卡因，让微生物菌在河水和底泥中大量繁殖，吃掉污物中的化学物质和污泥及各种腐败物，除去氨气、硫化氢、甲烷等物质，使水体恶臭消除并逐渐清洁起来……”（摘自中国化工报/2000.8.15）。这就是说，EM有效微生物只要遇到新的养分，它们就会大量繁殖。
3、EM是一个共生态体系，只要再给它们新的养料就肯定会大量繁殖！现在我们把红糖做为它们的养料（即食物），再给它们一个良好的生存环境，他们就大量的繁衍后代了。
4、我们还能看到另外一种微生物可以不断接种繁衍下去的现象，第一次做馒头时需要在面粉里加入酵母以使面团发酵才能让馒头膨大。发酵好的面团做馒头时要留一小团不做，留在第二天，第二天再做馒头的面粉中不再加入新的酵母，而是把头一天留下的那一小面团加入新面粉中就可使面团发酵；然后做馒头时再留下一小团给第三天做发酵接种……，如此不断繁衍，而不必添加新的酵母。
5、工厂生产的EM使用说明书中，总是叫你在EM使用前或使用时加入少量红糖后再使用效果会更好……
综上种种证据、理由、事实证明，EM是完全可以自己培育生产！
二、工厂是用什么材料培育生产EM的？这种简单培育生产出来的EM 质量与工厂生产的EM质量有什么区别？
1、工厂一般用糖蜜来培育生产EM的。糖蜜是什么呢？糖蜜是榨塘厂的泔水，是糖厂的三级产品（一级产品为白砂糖，二级产品为红糖），工业名称叫糖蜜。糖蜜为液体，用途不大，糖厂对外很难销售的，环保部门又禁止糖厂排放于河流中。因此现在的糖厂一般把糖蜜用来深加工生产酒精。小型糖厂自己没有能力生产酒精，就卖给酒精生产厂家，价格一般为350元/吨，由于便宜，酒精生产厂家也很乐意接受。糖蜜一般在市场上很少有卖，只能通过熟人直接到糖厂才能买到。糖蜜的含糖量没有标准，一般3～4公斤糖蜜等于1公斤的红糖的含糖量。
2、工厂培育生产的EM由于基本用糖蜜，用量很大，因此出厂的EM颜色呈深褐色，包装的瓶底有一层很厚的沉浮物，闻其气味有一种明显的甜味（即糖蜜味）。品其味时酸味中微微还夹杂着一点涩味。
3、因此，如果你也采用糖蜜来培育EM,在我们告诉你用红糖配方数量的基础上，加大4倍采用糖蜜，培育出来的EM颜色、气味、质量就基本与工厂的一样了。
4、简单方法培育出来的EM每毫升中含有有效菌数量在1亿以上，与工厂的EM 是一样的。使用效果也无多大区别，由于自己培育的EM成本大幅下降，在有的地方使用时加大一两倍的用量，使用效果比工厂的还要好一些。如用EM处理垃圾、发酵饲料、栏舍喷洒、蔬菜叶面喷施、粪肥发酵等；在人体饮用方面，口感比工厂的EM 要好，没有涩味，对肠胃疾病有较为明显的效果。由于工厂EM售价太高（每公斤20元以上），他们要顾及到使用者成本承受能力范围，因此使用说明总是叫你先把EM加红糖用水稀释过几小时或一两天后才能使用，其原因是激活细菌，二是让EM
扩大繁殖以达到使用效果。
三、为什么蜂蜜要在12天时加入正在培育的EM中?
在培育EM中加入蜂蜜，其好处主要有二：一是能增强EM品质，即能提高菌种的健壮；二是能提高EM的口感、气味等。这主要是蜂蜜不但含有丰富的营养，还有它那特有的自然香味。实践证明，培育EM如果过早就加入蜂蜜，培育出来的EM蜂蜜香味和口感就会大大降低。培育过程中加入蜂蜜，在EM液体温度在20～30度时，加进约10～30分钟时就会发现EM中涌现出大量的白色泡沫，这是微生物活跃的标志。加入不同香味的蜂蜜，培育出来的EM气味也会有所改变。
四、黄片糖可否代替红糖?为什么我培育的EM颜色和你们的不一样？
1、黄片糖（白砂糖不可代替红糖）可以完全代替红糖（注：红糖又称红砂糖、赤砂糖、黄砂糖）。但假冒的黄片就不行了，假冒的黄片糖一般采用白砂糖加大米粉添加色素制成，你一定要自己会鉴别。
2、糖的颜色不一样培育出来的EM颜色就不一样，但只要不变成乳白色（变成乳白色一般是在培育过程中，不小心把其中的部分微生物品种杀死了，而使EM的生态体系遭到破坏造成的），都不算失败。EM的气味与红糖、蜂蜜有关，不同的蜂蜜，气味也就不一样。但不管怎样，一定要有一种酸味为基础。如果没有了酸味而变成了另一种异味，说明失败。
五、EM培育过程中为什么不见泡沫？
在温度10℃～35℃的环境下，EM在培育到3～5天时，表面会出现泡沫，不出现泡沫的原因：1、环境温度太低，一般环境温度低于15℃时泡沫就较少出现；2、在培育过程中，培育者由于心急和好奇，经常掀开培育桶的桶盖，致使刚出现的泡沫遇到空气就破了。你不必担心的是，泡沫的有无，一般不会影响培育的质量。
六、EM培育完成后，为什么表面的悬浮物沉不下去？
EM培育中，显示出现泡沫，后来泡沫会变成悬浮物，当PH值达到4.5以下时，悬浮物就会自动往下沉，最后表面只有少量的悬浮物沉不下去，但有时发现悬浮物连成一大片，沉不下去，这是因为：1、培育时菌种放的过多，每50公斤糖水中放入菌种超过2公斤，且培育的环境温度不适合；2、红糖放的太多，50公斤水中超过4公斤。悬浮物沉不下去对质量没有影响，在培育过程中发现悬浮物连成片，用棍子把它搅烂即可，或把它捞出倒掉。
七、EM表面上浮起许多小虫是什么原因？
这是由于放在光线较强地方培育的原因，由于光线较强的地方有小家蝇或其他小昆虫出没，小家蝇或其它小昆虫闻到桶里面的糖香味就会在桶的边缘产卵，卵孵化成小蛆，小蛆个体很小，轻轻地爬入到了桶中。解决办法：你只要放在没有小家蝇或其它小昆虫出没和光线较暗的地方培育，就不会出现这个情况了。发现有了小昆虫，捞出即可，不会影响对EM的使用效果。
八、在EM使用过程中，我发现没有以前那么好的效果了，为什么？
1、可能你把EM中的某些细菌杀死了，结果产不出以前那么好的功效出来。解决办法是：重新到你的培训单位或EM生产厂家要回EM再重新培育。
2、你的使用发法不当，或对EM的功效过于理解太大。解决办法：认真阅读EM 的使用方法，重新了解它的作用机理。
3、使用环境有影响，比如使用的对象对EM有反杀作用。像自来水（自来水中含有漂白粉，漂白粉中含有氯，氯是能杀死EM的），环境温度低于10℃或高于45℃等等。
九、用EM处理猪粪养殖蝇蛆，为什么不能有效地清除粪中的臭味？
1、EM对清除臭味有较为明显的效果，比如用EM添加到饲料中或饮水中饲养禽畜，EM就会阻止臭味素的生成，禽畜的粪便就基本没有臭味，用这种粪便养殖蝇蛆是基本没有臭味的。
2、但是，现在很多蝇蛆养殖户是买别人的禽畜粪便来生产蝇蛆的，EM对这种禽畜粪便只能清除部分臭味，而不能清除粪便中的全部臭味。其原因是：①养殖蝇蛆的粪便含水量在100%，发酵时会产生极高的温度，EM进入粪料中来不及完成使命就被高温杀死了，虽然在发酵的第三天再添加一次EM，但同样被高温杀死；②如果把含水量降低，虽然能使发酵的温度降低，但发酵后的粪便对养殖蝇蛆而言又会失去很多的养分；③如果把发酵时间延长，可使粪料中臭味进一步降低，但如果粪料的发酵时间超过6天以上，粪料中的养料对蝇蛆而言也会大大降低。因此，由于种种矛盾因素，要达到两全其美是很难的。解决办法是：把发酵了6天养殖蝇蛆的粪料送进蝇蛆养殖房堆成堆后，马上用50倍的EM原露稀释液在粪料上洒一层，粪料中臭味就很难散发出来了。
十、培育EM一定要用红色塑料桶吗？
不一定，但红色的塑料桶培育成功率最高，到现在还没有失败过。你也可以采用非红色的塑料桶，但偶尔会失败。培育EM不可使用金属器具，因EM是酸性的液体，不但会对金属器具腐蚀，且EM也会发黑，陶瓷的缸培育EM效果不太好。
十一、EM培育过程中，浮起的悬浮物长毛是怎么回事？
悬浮物上长毛，是因为密封不严引起的，把它捞出倒掉，半密封的意思是：培育密封时只要在桶盖上用筷子打一小孔就行了。
十二、我培育出的EM变成了像机油一样的粘性液体，为什么？
你在培育过程中把EM中的某一种菌给弄死了，使EM的共生态组成变得不完整，EM便无法完成相互生存的生态平衡而造成的。这样变样的EM就该倒掉，重新采用好的EM菌种培育。
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6种微生物肥料在不同作物上的应用效果
6种微生物肥料在不同作物上的应用效果 吕爱英,王永歧,沈阿林,王守刚,薛毅芳 (河南省农业科学院土壤肥料研究所,河南郑州450002) 摘要:在辣椒、花生、烟草和怀山药上进行6个微生物肥料的田间试验,结果表明:施用微生物肥料可使花生和辣椒的氮肥用量降低20%,磷肥用量降低50%,并使花生和辣椒产量比常规施肥最高增加7.5%和20%;在烟草栽培中,当N、P、K用量各降低17%时,3个微生物肥料能使烟草产量略有增加;怀山药栽培,N、P、K用量比常规施肥各降低30.7%,42.4%,50%时,怀山药产量最高可增加27%;在无公害辣椒栽培中,施用微生物肥料可以替代40%的有机肥,并且产量比常规施肥最高增加28%。同一微生物肥料针对不同作物会出现增产或减产2种相反的结果,应针对不同作物研发相应的专用微生物肥料。 关键词:微生物肥料;花生;辣椒;烟草;怀山药;效果 中图分类号:S144 文献标识码:B 文章编号:1004-3268(2004)04-0049-03 化肥在农业生产中的广泛应用,使粮食产量大幅增加,据统计,从1950~1984年,我国粮食产量的增长与化肥投入量密切相关。全国化肥使用量逐年攀升,由1980年的1269kt增加到1995年的35940kt,年增长率为12.2%[1],而化肥的利用率偏低,如氮肥的利用率为30%~40%[2],磷肥的利用率为10%~25%,钾肥的利用率为40%~60%[3]。大量未被利用的化肥在土壤中经过物理的、化学的和生物的转化,最终进入大气、地下水或呈固定态滞留于土壤,从而造成越来越严重的环境污染。化肥的持续大量施用还导致土壤团粒结构破坏,耕性变差,良性的微生物群落遭到破坏,加剧土传病害的发生,同时还使化肥报酬率降低和作物品质下降。在倡导可持续发展的今天,研发微生物肥料,部分替代化肥是科研工作的重要任务。 微生物肥料是富含有益微生物的接种剂,因其种类的不同,可分别含有根瘤菌、固氮菌、解磷 收稿日期:2004-01-09 基金项目:河南省杰出人才创新基金项目(0121000200) 作者简介:吕爱英(1951-),女,陕西宝鸡人,助理研究员,本科,主要从事微生物肥料研究。 不尽人意的地方,但在绿色农产品生产、固氮、启动土壤磷钾库资源、减少化肥的投入及环保等诸多方面具有深远的意义,选育优良菌株是该领域持续的科研目标。土壤中存在着种类繁多的固氮、解磷、解钾菌,具有丰富的菌种资源,在实际工作中,在短期内分离纯化出发菌可达上百种之多,没有必要也不可能在研究初期对每一菌株一一鉴定,通过菌株在不同培养基上的菌落特征,对菌株进行初步鉴别,从而有效避免后续科研工作中有可能针对相同菌株的重复劳动。本文仅就从Ashby分离纯化的菌株作了初步论述,利用这一方法研究从无机磷培养基、硅酸盐培养基上分离纯化的菌株同样取得了良好效果。通过交叉接种试验,比较菌株在Ashby培养基、无机磷培养基、硅酸盐细菌培养基上菌落的大小,还可以对菌株在固氮、解磷、解钾性能方面进行定性分析,为进一步的效能测定提供参考。 参考文献: [1] 许光辉.土壤微生物分析方法手册[M].北京:农业 出版社,1986.246-248. [2] 余利岩.微生物生态学研究方法的新进展[J].微生 物学通报[J].2001,28(1):89-92. [3] 陈华葵.土壤微生物学[M].上海:上海科技出版社, 1981. 49 2004年第4期
微生物技术在城市生活垃圾处理中的应用(新编版)
( 安全论文 ) 单位：_________________________ 姓名：_________________________ 日期：_________________________ 精品文档 / Word文档 / 文字可改 微生物技术在城市生活垃圾处理中的应用(新编版) Safety is inseparable from production and efficiency. Only when safety is good can we ensure better production. Pay attention to safety at all times.
微生物技术在城市生活垃圾处理中的应用 (新编版) 摘要：本文结合堆肥化、卫生填埋两种现行的城市生活垃圾处理工艺，主要介绍了城市生活垃圾生物处理过程中的微生物种群，以及通过分析开发出的新的微生物技术，指出了应用于城市生活垃圾处理的高效的微生物技术的研究方向。 关键词：城市生活垃圾微生物强化微生物处理技术基因工程 随着城市化进程在全球范围的加速，城市化带来的环境污染和人类聚居状况恶化等问题，已成为世界各国共同关心的问题。城市生活垃圾（Municipalsolidwaste,简称MSW）是在城市日常生活及为城市生活提供服务的活动中产生的固体废弃物，是城市环境的主要污染物之一。目前，城市生活垃圾处理处置的方法主要包括卫生填埋（Sanitarylandfill）、堆肥化(Composting)、焚烧(Incineration)
三种，其中前两种处理方式均属于生物处理技术。具体来说，MSW生物处理技术就是城市生活垃圾中固有的或外添加的微生物，在一定控制条件下，进行一系列的生物化学反应，使得MSW中的不稳定的有机物代谢后释放能量或转化为新的细胞物质，从而MSW逐步达稳定化的一个生化过程。 1.城市生活垃圾生物处理中主要的微生物 MSW生物处理技术主要包括好氧和厌氧生物处理。好氧生物处理如：好氧堆肥、生物反应器填埋等，其工艺中的微生物主要有细菌、放线菌、真菌等微生物种群。厌氧生物处理，如：厌氧消化、厌氧填埋等，其工艺中的微生物又称“瘤胃微生物”，主要有水解细菌、产氢产乙酸菌群和产甲烷菌群等。 1.1城市生活垃圾好氧生物处理中的微生物 1.1.1细菌 在MSW好氧生物降解过程中，细菌凭借强大的比表面积，可以快速将可溶性底物吸收到细胞中，进行胞内代谢。总的来说，其数量要比放线菌和真菌多得多。当然，在不同的环境中分离的细菌在
微生物培养方法
微生物的培养方法 实验目的：学习掌握无菌操作技术；学习接种方法；学习常用的分离、纯化菌种的方法。 一、接种 将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。 １、接种工具和方法 在实验室用得最多的接种工具是接种环、接种针。由于接种要求或方法的不同，接种针的针尖部常做成不同的形状，有刀形、耙形等之分。有时滴管、吸管也可作为接种工具进行液体接种。在固体培养基表面要将菌液均匀涂布时，需要用到涂布棒。（图1） 图1 接种和分离工具 1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 常用的接种方法有以下几种： １）划线接种这是最常用的接种方法。即在固体培养基表面作来回直线形的移动，就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环，接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。 ２）三点接种在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上，成等边三角形的三点，让它各自独立形成菌落后，来观察、研究它们的形态。除三点外，也有一点或多点进行接种的。 ３）穿刺接种在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时，用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是：用接种针蘸取少量的菌种，沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺，如某细菌具有鞭毛而能运动，则在穿刺线周围能够生长。
４）浇混接种该法是将待接的微生物先放入培养皿中，然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后，置合适温度下培养，就可长出单个的微生物菌落。 ５）涂布接种与浇混接种略有不同，就是先倒好平板，让其凝固，然后再将菌液倒入平板上面，迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布，让菌液均匀分布，就可长出单个的微生物的菌落。 ６）液体接种从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养物中，用移液管将菌液接至液体培养基中，或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中，都可称为液体接种。 ７）注射接种该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内，如人或其它动物中，常见的疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。 ８）活体接种活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物；也可以是某个离体活组织，例如猴肾等；也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射，也可以是拌料喂养。 ２、无菌操作 培养基经高压灭菌后，用经过灭菌的工具（如接种针和吸管等）在无菌条件下接种含菌材料（如样品、菌苔或菌悬液等）于培养基上，这个过程叫做无菌接种操作。在实验室检验中的各种接种必须是无菌操作。 实验台面不论是什么材料，一律要求光滑、水平。光滑是便于用消毒剂擦洗；水平是倒琼脂培养基时利于培养皿内平板的厚度保持一致。在实验台上方，空气流动应缓慢，杂菌应尽量减少，其周围杂菌也应越少越好。为此，必须清扫室内，关闭实验室的门窗，并用消毒剂进行空气消毒处理，尽可能地减少杂菌的数量。 空气中的杂菌在气流小的情况下，随着灰尘落下，所以接种时，打开培养皿的时间应尽量短。用于接种的器具必须经干热或火焰等灭菌。接种环的火焰灭菌方法：通常接种环在火焰上充分烧红（接种柄，一边转动一边慢慢地来回通过火焰三次），冷却，先接触一下培养基，待接种环冷却到室温后，方可用它来挑取含菌材料或菌体，迅速地接种到新的培养基上。（图2）然后，将接种环从柄部至环端逐渐通过火焰灭菌，复原。不要直接烧环，以免残留在接种环上的菌体爆溅而污染空间。平板接种时，通常把平板的面倾斜，把培养皿的盖打开一小部分进行接种。在向培养皿内倒培养基或接种时，试管口或瓶壁外面不要接触底皿边，试管或瓶口应倾斜一下在火焰上通过。
微生物絮凝剂
微生物絮凝剂 摘要：微生物絮凝剂是一种具有广阔应用前景的天然高分子絮凝剂，因其具有高效、无毒、无二次污染等性质而备受人们的关注，并广泛应用于水处理、食品加工和发酵工业。本文综述了微生物絮凝剂的研究与应用进展，包括合成絮凝剂的微生物种类、微生物絮凝剂的分类及特点、结构、微生物絮凝剂的絮凝机理和絮凝能力的影响因素，最后提出了微生物絮凝剂的发展趋势。 关键词：微生物絮凝剂；絮凝机理；研究进展 絮凝剂被广泛地应用于工业废水处理、食品生产和发酵等工业中。一般把絮凝剂分为3 类：1、无机絮凝剂，如硫酸铝、聚合氯化铝、聚合硫酸铁等；2、有机合成高分子絮凝剂，如聚丙烯酰胺及其衍生物、聚乙烯亚胺、聚苯乙烯磺酸盐等；3、天然高分子絮凝剂，如改性淀粉、聚氨基葡萄糖、壳聚糖、藻酸钠、几丁质和微生物絮凝剂[1]。 人们逐渐认识到：无机絮凝剂一般使用量较大，容易造成二次污染。如水中残留铝离子过多，不但对水生生物和植物有害，还可造成老年人的铝性骨病及痴呆症。铁离子虽对人体无害，但铁离子会使处理的水呈现红色，并刺激铁细菌繁殖，从而加速对金属设备的微生物腐蚀。目前使用的PAM 等高分子有机絮凝剂，通常价格昂贵，在水中的残留物不易降解，而且有些聚合物单体具有毒性和致癌作用。随着人们生活水平的提高，以及对卫生及环境的关注，急需研究和开发絮凝效果好、价格低廉、易降解、环境友好、应用范围广、无二次污染的新型絮凝剂。 当今国内外对絮凝剂研究和发展方向是由无机向有机、低分子向高分子，单一向复合、合成型向天然型发展。基于生物多样性，开展了微生物絮凝剂的研究。微生物絮凝剂是一类由微生物在生长过程中产生的，可以使水体中不易降解的固体悬浮颗粒、菌体细胞及胶体粒子等凝集、沉淀的特殊高分子聚合物。是一种具有生物分解性和安全性的新型、高效、无毒、廉价的水处理剂，近些年来受到极大关注, 有逐步取代传统絮凝剂的趋势[2]。 1 合成絮凝剂的微生物种类 能产生絮凝剂的微生物有很多种类，细菌[3，5]、放线菌[4]、真菌[5]以及藻类[6]等（见表1）都可以产生絮凝剂。这些已经鉴定的絮凝微生物，大量存在于土壤、活性污泥和沉积物中，从这些微生物中分离出的絮凝剂不仅可以用于处理废水和改进活性污泥的沉降性能，还能用在微生物发酵工业中进行微生物细胞和产物的分离。 表1 一些能产生絮凝剂的微生物 微生物种类Microorganisms 絮凝剂主要成分Components of flocculats 细菌Bacteria Rhodococcus erythropolis蛋白质Protein Alcaligeues cupidus 酸性聚多糖Acid polysaccharide Pseudomouas sp 粘多糖Mucopolysaccharide Lactobacillus fermeutum 蛋白质Protein Flavobacterium sp 蛋白质Protein Zoogolea sp 氨基多糖Animopolysaccharide 放线菌Antinomyces Nocardia amarae 蛋白质Protein
微生物肥料
微生物肥料研究发展、应用现状及开发对策 农业生产中化肥和农药的使用量逐年增加，引起土壤退化、生态环境恶化等问题，对农产品安全和农业可持续发展构成威胁和挑战。微生物肥料具有改良土质、增进土壤肥力、促进作物的营养吸收、增强作物抗病和抗逆能力等重要功能[1- 2]，其研究和开发面临很好的发展机遇。 一、微生物肥料的概念及研究进展 微生物肥料是一类含有活性微生物、具有肥料效应的特定制品。微生物肥料可分为2 类，一类通过其中所含微生物的生命活动来增加植物营养元素的供应量，改善植物营养状况，进而增加产量，如根瘤菌肥；另一类通过其中所含微生物的生命活动及其产生的次生代谢物质（如激素类等），提供植物营养元素的供应，促进植物对营养元素的吸收利用，抵抗某些病原微生物的致病作用，减轻病虫害的发生，如近年开发的植物促生根际细菌（Plant Growth- Promoting Rhizobacteria,PGPR）。 1887 年研究者发现豆科植物根瘤具有固氮功能并成功培养根瘤菌，此后，微生物肥料的研究与应用迅速增多。国外对微生物肥料的研究和应用历史较我国长，其主要的品种是各种根瘤菌肥。早在20 世纪20 年代在美国、澳大利亚等国就开始有根瘤菌接种剂（根瘤菌肥料）的研究和试用，一直到现在根瘤菌肥依然是最主要的品种。
我国微生物制剂的发展经历了根瘤菌剂、细菌肥料（菌肥）到微生物肥料的变迁，由豆科接种剂、菌种拌种发展为各种农作物的基肥，有的微生物由于能产生活性物质，有时也用作叶面喷施肥料。我国微生物肥料的研究应用是从豆科植物上应用根瘤菌接种剂开始的，起初只有大豆和花生根瘤菌剂；20 世纪50 年代，开始从原苏联引进自生固氮菌、磷细菌和硅酸盐细菌剂，称为细菌肥料；20 世纪60 年代推广使用放线菌制成的“5406”抗生菌肥料和固氮蓝绿藻肥；70～80 年代中期开始使用VA 菌根以改善植物磷素营养条件和提高水分利用率；80 年代中期至90 年代相继应用联合固氮菌和生物钾肥作为拌种剂；近几年来主要推广应用由固氮菌、磷细菌、钾细菌和有机肥复合制成的生物肥料，做基肥施用[3-5]。 目前，国内外出现了基因工程菌肥、作基肥和追肥用的有机无机复合菌肥、生物有机肥、非草炭载体高密度的菌粉型微生物接种剂肥料以及其他多种功能类型和名称的微生物肥料。 二、微生物肥料的种类及应用现状 微生物肥料的种类很多，如果按其制品中特定的微生物种类可分为细菌肥料（根瘤菌肥、固氮菌肥）、放线菌肥（如抗生菌类、5406）、真菌类肥料（如菌根真菌）等；按其作用机理可分为根瘤菌肥料、固氮菌肥料、解磷菌类肥料、解钾菌类肥料等；此外，还可以根据组成成分简单的划分为单纯微生物肥料和复合微生物肥料两大类型[3- 4]。研究较多的微生物肥料有以下几种。 2.1 根瘤菌和固氮菌类
利用微生物技术处理废水
利用微生物技术处理废水 摘要随着工业的发展,污水成分已愈来愈复杂。某些难降解的有机物质和有毒物质,需要运用微生物的方法进行处理,污水具备微生物生长和繁殖的条件,因而微生物能从污水中获取养分,同时降解和利用有害物质,从而使污水得到净化。废水生物处理是利用微生物的生命活动,对废水中呈溶解态或胶体状态的有机污染物降解作用,从而使废水得到净化的一种处理方法。废水生物处理技术以其消耗少、效率高、成本低、工艺操作管理方便可靠和无二次污染等显著优点而备受人们的青睐。 关键词污水生物处理好氧生物处理厌氧生物处理水质 1. 污水生物处理的特征 1.1 污水与污水生物处理 污水中的污染物质成分极其复杂，一般生活污水的主要成分是代谢废物和食物残渣，工业废水可能含有较多的金属、酚类、甲醛等化学物质。此外污水中还含有大量非病原微生物和少量病原菌及病毒。污水的生物处理就是以污水中的混合微生物群体作为工作主体，对污水中的各种有机污染物进行吸收、转化，同时通过扩散、吸附、凝聚、氧化分解、沉淀等作用，以去除水中的污染物。因此，污水生物处理实际上是水体自净的强化，不同的是，在去除了污水中的污染物后，必须将微生物从出水中分离出来，这种分离主要是通过微生物本身的絮凝和原生动物、轮虫等的吞食作用完成的。 1.2 生化需氧量及生物处理的应用 在污水处理中，通常是以有机物在氧化过程中所消耗的氧量这一综合性指标来表示有机污染物的浓度，如生化需氧量（BOD）和化学需氧量（COD）。生化需氧量是指在特定的温度和时间（通常这5 d、20℃下，微生物分解污水中有机物所消耗的氧量，称为BOD5。BOD5约占生化需氧总量的2/3，故采用BOD5来表示污水中可降解有机物的浓度是比较合适的。但污水中有机物并不是都能较快降解的，在工业废水中，可以结合COD等指标表示有机污染物的浓度。 只有BOD高的废水才适宜采用生物处理，COD很高但BOD不高的废水不宜采用生物处理。对于有毒的废水，只要毒物能降解，就可用生物法处理，关键是控制毒物浓度和驯化
实验8-微生物的纯培养技术
实验八微生物纯培养技术——划线法 一、实验目的 1、巩固微生物分离纯化的原理 2、掌握微生物分离纯化的常用方法 二、实验原理 微生物学中将实验室条件下从一个单细胞繁殖得到的后代称为纯培养，人们希望研究或利用某种微生物常常必须是一种微生物的纯培养后代。但微生物在土壤、水、空气或人及动、植物体中，不同种类的微生物绝大多数都是混杂生活在一起，欲获得某一种微生物时，就必须从混杂的微生物类群中分离它，以得到只含有这一种微生物的纯培养；另外，若人们原有用于试验研究与利用的微生物纯培养菌株，因接种转管以及保存不当等原因而被非目的菌种污染后，也必须再次进行菌种的纯化将污染的杂菌除去，以重新获得目的菌株纯培养。这种获得纯培养的方法称为微生物的分离与纯化。 为了获得某种微生物的纯培养。一般是根据该微生物对营养、酸碱度、氧等条件要求不同，而供给它适宜的培养条件，或加入某种抑制剂造成只利于此菌生长，而抑制其他菌生长的环境，从而淘汰其他一些不需要的微生物，再用稀释涂布平板法、稀释混合平板法、平板划线分离法、单孢分离法、挑取菌丝先端等方法分离、纯化该微生物，从而得到纯菌株。 当菌种被其他杂菌污染时或混合菌悬液常用划线法进行纯化（纯种分离）。此法是借助将蘸有混合菌悬液的接种环在平板表面多方向连续划线，使混杂的微生物细胞在平板表面分散，经培养得到分散成由单个微生物细胞繁殖而来的菌落，从而达到纯化的目的。 二、实验器材 1、牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、马铃薯葡萄糖糖琼脂培养基(PDA)； 2、供试的细菌及霉菌的斜面菌种、无菌水、接种环、青霉素、无菌培养皿 三、操作步骤 1、培养基平板的制备将备用的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基和马铃薯葡萄糖琼脂培养基加热融化，待加热冷却至45-50℃分别倒入90mm的无菌培养皿内，每个培养皿倒入培养基20ml，冷凝后贴上标签、并标明培养基的名称及自己的姓名。 2、菌悬液的制备取青霉菌、曲霉2种霉菌及大肠杆菌的斜面菌种试验各1支，倒入少量无菌水后以接种环刮菌苔表面，将细菌的细胞与霉菌的孢子洗下，倒入一无菌的三角瓶或培养皿，然后加入适量的无菌水稀释混匀得试验用的菌悬液。 3、取菌液将移菌环浸入菌悬液内，取一环菌液。 4、平板划线将有菌液的移菌环按图所示方法，在制备的牛肉膏蛋白胨琼脂培养基平板和马铃薯葡萄糖琼脂培养基平板上来回划线。
微生物肥料生产新技术
微生物肥料生产新技术 Company Document number：WTUT-WT88Y-W8BBGB-BWYTT-19998
微生物肥料生产新技术 一、微生物肥料生产新工艺及流程 一般传统的微生物肥料生产工艺是：保藏菌种→斜面菌种培养活化→摇瓶扩大培养→发酵罐液体发酵→按一定的比例用草炭吸附后包装或按一定的比例稀释后直接包装。建立这样的生产企业需要建立大面积的无菌培养室、购置发酵罐、空压机、过滤器等设备，而且培养、发酵条件不易控制，菌种质量难以保证，投资大、成本高。 河北省生物工程技术公司针对众多微生物肥料生产企业中存在的上述难题，联合河北农业大学、河北大学、河北省科学院微生物研究所等单位微生物专家，经多年研究攻关、多次实验，开发出微生物肥料生产新工艺，成功解决了上述难题，非常适合中小微生物肥料生产企业采用，尤其是特别适合现有的复混肥料、有机肥料生产企业生产生物有机无机肥料、生物有机肥料，作为其产品功能更新、升级或提高应用效果而添加。 河北省生物工程技术公司微生物肥料新的生产工艺是：使用公司新开发出的高活性、高含量微生物菌粉按一定比例直接加入或包衣到有机肥或复混肥料中，即可生产出符合国家农业部登记标准要求的微生物菌剂、生物有机肥、复合微生物肥料、微生物冲施肥、拌冲剂等产品。 具体工艺流程为： （1）微生物菌剂工艺： 草炭或其他吸附剂 + 菌粉微生物固体菌剂或颗粒肥包装 （2）生物有机肥工艺： 有机肥粉状或颗粒 + 菌粉生物有机肥包装 （3）复合微生物肥料（生物复混肥）：
化肥（N、P、K）配料→混合→造粒→烘干冷却→筛分→ 包装 菌粉 （4）微生物冲施肥微生物拌种剂 和其他辅料配比制成微生物冲施肥及拌种挤 上述新工艺，实际上相当于将微生物肥料生产中投资大、工艺复杂、技术难度大、质量要求高、用量少的菌剂生产环节交给我们来完成，由我们统一规模化生产提供给每个企业。这样将使微生物肥料的生产变得简便、高效、低成本。就象手机市场研发出强大的手机芯片，从而使手机生产变得简化进而出现山寨手机一样，高活性的菌粉就是这种“芯片”，只需嫁接到你的产品中，即可生产出各种成分、含量的微生物肥料。所不同的是：高活性菌粉中的有效菌是国家已认可、明确用于农业生产的菌种，用于生产出来的各种微生物肥料均可获得农业部的微生物肥料登记证。 河北省生物工程技术公司提供的菌粉产品，采用现代化的生产设备，在工业化发酵生产生物肥料的基础上，将菌剂进一步浓缩低温脱水精制而成，实现了菌剂生产的规模化、现代化，保证了菌剂的质量，降低了成本。 二、高活性菌粉技术指标： 含（胶质芽孢杆菌）活性芽孢100亿/克个以上，有效期24个月 三、在微生物肥料生产中使用高活性菌粉的特点及优势 1、生产投资成本低
微生物絮凝剂
摘要：微生物絮凝剂（MBF7）处理废水效果显著。其生长条件对絮凝效果影响十分重要。实验表明，葡萄糖培养基较察氏培养基利于MBF7号菌生长；MBF7号菌的最佳培养条件为30℃，PH为7.5～8.5，摇床转速为150～200r/min,最佳菌龄为3～4天。为了确定微生物絮凝剂（MBF7）的应用范围和了解其处理废水的特性，本实验以微生物絮凝剂（MBF7）处理餐厅、印染和味精废水。结果表明，MBF7处理餐厅废水、印染废水和淀粉废水的浊度（或色度）的去除率分别达94%，90%和96%。MBF7处理效果优于AL2(SO4)3，安全高效，有很好的实际应用价值。 关键词：微生物絮凝剂废水絮凝效果浊度去除培养基生长条件 在近年的应用里，有通过向废水中投加絮凝剂的实例，其中多数为化学絮凝剂，最常用的无机絮凝剂主要为铝盐，它具有投药少，沉降速度快，除浊度好的优点[1]。但因为铝盐的长期使用会导致老年痴呆症，而且沉淀物无法回收利用。而微生物絮凝剂是一种高效且能自然降解的新型水处理剂，相比于第一和第二代絮凝剂，有无毒无害，可自然降解，沉淀物可回收利用等优点[2，3]，近年受到人民的广泛关注。成文等［4］从广州市某污水处理厂的活性污泥中筛选出一种高效的微生物絮凝剂产生菌，经鉴定为青霉（Penicillium sp.），属于对称二轮青霉组，质地多为绒状，也有絮状，表面初为灰蓝色、蓝绿色，中间有淡黄色带，老后渐为灰绿色、暗灰色；背后为红棕色、深紫色和深褐色，色泽渗入培养基。该菌所产生的微生物絮凝剂称为MBF7。 微生物絮凝剂就是利用生物技术，从微生物或其分泌物提取、纯化而获得的一种安全、高效、且能自然降解的新型水处理剂，包括糖蛋白、多糖、纤维素、蛋白质和DNA等［5］。不同的絮凝剂产生菌产生絮凝剂的条件不同，主要影响因素为培养基的碳源、氮源、培养温度、初始pH值、通气速度等［6］。微生物的絮凝作用实际是由微生物所合成或分泌的高分子有机物质来实现的[7,8.9]。 由于影响微生物产生絮凝剂的因素很多，本文通过测定微生物在两种不同培养条件下产生的MBF7对废水的絮凝作用来探讨对微生物絮凝剂的产出有影响的环境因素以及这些因素的重要性，从而得到微生物絮凝剂产生菌的最佳生长条件。另外由于微生物絮凝剂的应用范围很广，不同生长条件的微生物絮凝剂，其应用范围也不同。为了探讨微生物絮凝剂（MBF7）的应用前景，本人利用微生物絮凝剂MBF7处理餐厅废水、印染废水、淀粉废水进行研究。 1、材料与方法： 1.1、菌种：为属于青霉的一株微生物絮凝剂产生菌，其产生的絮凝剂称作MBF7。 1.2、培养基： 葡萄糖培养基PDA medium（g/L）： 葡萄糖20.0g，尿素0.5g，酵母膏2.0g，KH2PO4 2.0g，K2HPO4 5.0g，NaCl 0.1g，（NH4）2SO4 0.2g ,水1000ml，调节pH为7.5～8.5。 蔡氏培养基Czapek Agar(g/L )： 蔗糖30.0g ,KCl 0.5g，K2HPO4 1.0g，MgSO4.7H2O 0.5g，NaNO3 3.0g, FeSO4 0.01g，水1000ml，调节pH为7.0。 1.3、供试水样： 餐厅废水：广州某酒楼排放的餐厅废水，原水浊度为125.6。 印染废水：广州某丝绸印染厂废水，原水色度为34.5。
微生物应用技术
100学年度第一学期微生物应用技术 Final Examination 学生__________ 学号:_____________ ★请勿选择你报告的题目来回答 I. 解释名词 (30分选六题): 1. 何谓Molecular farming, 为何用植物? 2. 生分解性 3. 芽孢杆菌在工业上的应用优势 （1）Bacillus及其代谢产物已广泛应用于食品、医药、饲料中，目前尚未发现有任何毒副作用，是一种安全的菌种。 （2）Bacillus可以耐受不良的环境，如80℃的高温环境，pH2-3的酸性环境。 并且对营养要求简单，代谢快，易于分离和保存。 （3）Bacillus不仅对革兰氏阳性菌有抑菌作用，对革兰氏阴性菌和真菌也有抑制效果。 4. 生物相容性 用来描述生物医用材料与生物体相互作用情况的概念。 若生物材料相容性好，表示： a.该材料能够与身体相互适应 b.不会对身体有显着或严重的不良反应 c.身体也不会引起材料性能的改变 可分为：血液反应、免疫反应、组织反应、生物化学反应 5. 解说液化淀粉的功用 6. Plant Transformation 7. 白色生技的应用 8. NDM-1超级细菌 9. 抗药性结核分枝杆菌产生 10. 专利三特性 （1）排他性：为了保护一发明或创作其正当权益，而向政府提出申请，经过审查认为符合专利法的规定，因而给予申请人在一定期间享有专有排除 他人未经其同意而制造、贩卖、使用或为上述目的而进口该物品之权， 或专有排除他人未经其同意而使用该方法及使用、贩卖或为上述目的而 进口该方法直接制成物品之权，这种排他性就是专利权特性。 （2）时间性：发明、新型、新式样专利均自公告之日起给予专利权。 专利权只在专利权期限内有效，期限届满，权力消灭，技术内容即成公 共财产。 （3）地域性：专利系采属地主义，因此，虽已向外国申请专利，但如欲在我国
微生物絮凝剂的应用及研究进展
微生物絮凝剂的应用及研究进展 刘敏，张兴 作者简介：刘敏(1986-),女，在读研究生，主要研究方向：微生物絮凝剂 通信联系人：张兴(1964-)，男，教授，重要从事环境生物技术的研究. E-mail: kuangdazhang@https://www.sodocs.net/doc/a911472178.html, （中国矿业大学化工学院，江苏 徐州 221008） 摘要：微生物絮凝剂(MBF)是利用生物技术，从微生物或其分泌物中提取、纯化而获得的一种安全、高效，且能自然降解的新型水处理剂，微生物絮凝剂种类直接利用微生物细胞的絮凝剂、利用微生物细胞提取物的絮凝剂、利用微生物细胞代谢产物的絮凝剂。微生物絮凝剂可广泛应用于废水处理、饮料工业、生物制药、重金属废水处理及贵重金属回收与选择性絮凝选矿等方面。 关键词：微生物絮凝剂；絮凝；水处理；应用；进展 Development and Application of Microbial Flocculant Liu Min, Zhang Xing (Department of Chenistry,CUMT, JiangSu XuZhou 221008) Abstract: Microbial Flocculant (MBF) is to use biotechnology, is taken from microorganisms or their secretions extract, purification, then get a safe, efficient, and natural degradation of water dispose reagent and oakum of the main coagulant directly from the cells flocculant, using microorganisms's cell extract flocculant, using flocculant bring by microorganisms cell metabolism. Microbial flocculant widely applied in waste treatment and beverage industry, the biological waste treatment and pharmaceutical, the heavy metal waster water treatment , metal reclaim noble metal and selectivity flocculant mill run. Keywords:MBF;flocculate;water treatment;application;development 0 引言 微生物的絮凝作用首先是由路易斯·帕斯特于1876年在酵母菌中观察到的，两年后类似现象亦在细菌中发现。1976年J. Nakamura 等从霉菌、细菌、放线菌和酵母菌等214种菌株中筛选出19种具有絮凝能力的微生物，其中以酱油曲霉(Asperillussojae)AJ7002产生的絮凝剂效果最好。1985年H. Takagi 等研究了拟青霉属(Paecilomyces sp ．I-1)微生物产生的絮凝剂，精制获得PF-101絮凝剂。1986年R. Kurane 等从能降解酞酸酯的微生物中筛选出日本旱田土壤中常见的红平红球菌(Rhodococcuserythropolis)，并利用该菌研制开发了絮凝剂NOC-1。该絮凝剂对大肠杆菌、酵母、泥浆水、河水、粉煤灰水、活性碳水、膨胀污泥、纸浆废水均有良好的絮凝和脱色效果[1~4]。 生物絮凝剂能絮凝处理的对象广泛，包括粉煤灰、活性污泥、木炭、墨水、泥水、饮用水、河低沉积物、高岭土、印染废水、果汁、细菌、酵母菌以及各种生产废水等。如现已研制成的生物絮凝NOC —1是以红平红球菌为主体，在Ca 2+存在下，对大肠杆菌、酵母、泥浆水、河底泥水、河底沉积物、粉煤灰、活性炭粉水、畜产废水、膨胀污泥、瓦长废水、纸浆废水、染料废水有极好的絮凝和脱色效果，该产品已商业化。生物絮凝对悬浊液絮凝速度快、用量少、效果好，对胶体、溶液均有较好的絮凝效果，对富含有机质的屠宰水等也有较好的絮凝、去色效果，而其它絮凝剂由于各自的特点在某些应用领域的应用受到限制。不足之处是，生物絮凝的效果容易受到有毒物质的干扰，菌体生长受影响较多，因此，被处理废
微生物的培养
目录 实验二土壤中微生物分离纯化培养 实验三菌种保藏 实验四细菌形态观察及单染色 实验五放线菌及霉菌形态观察 实验六革兰氏染色及芽孢染色 实验七酵母菌的形态观察及死活细胞的鉴定 实验八微生物直接计数法及测微技术 实验九大肠杆菌生长曲线的测定 实验十水中细菌总数的测定 实验十一细菌细胞的生化反应实验 实验一常用培养基的制备、灭菌与消毒 一、实验目的 了解培养基的配制原理；掌握配制培养基的一般方法和步骤；了解常见灭菌、清毒基本原理及方法；掌握干热天菌、高压蒸汽灭菌及过滤除菌的操作方法。 二、实验原理 合物。培养基的原材料可分为碳源、氮源、无机盐、生长因素和水。根据微生物的种类和实验目的不同，培养基也有不同的种类和配制方法。 生长繁殖之用。
三、试剂与器材 微孔滤膜过滤器、镊子等。 四、实验内容 2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物 3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查 4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌 五、关键步骤及注意事项 1.要严格按配方配制。 2.调pH不要过头。 3.干热灭菌要注意物品不要堆放过紧，注意温度的时间控制，70oC以下放物、取物。 4.高压灭菌要注意物品不要过多，加热后排除冷空气，到时降压回零取物。 5.过滤除菌要注意各部件灭菌，压滤时，压力要适当，不可太猛太快，滤膜要注意清洗保存。 实验二土壤中微生物分离纯化培养 一、实验目的 掌握微生物培养方法。 二、实验原理 从混杂的微生物群体中获得只含有某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离与纯化。 释涂布平板法步骤：倒平板－制备土壤污水稀释液－涂布－培养－挑菌落；平板划线法步骤：倒平板－标记培养基名称－划线。 三、试剂与器材
微生物肥料标准
NY 227—94 微生物肥料标准 1 主题内容与适用范围 本标准规定了微生物肥料产品的分类、技术要求、试验方法、检验规则、包装、标志、运输与贮存。 本标准适用于有益微生物制成的，能改善作物营养条件(又有刺激作用)的活体微生物肥料制品。 2 引用标准 GB 8172 蛔虫卵测定方法 GB 4789 大肠菌值测定方法 GB 7468 总汞测定方法 GB 7471 总镉测定方法 GB 7466 总铬测定方法 GB 7485 总砷测定方法 GB 7470 总铅测定方法 3 产品分类 3.1 根瘤菌肥料：能在豆科植物上形成根瘤(或茎瘤)，同化空气中的氮气，供应豆科植物的氮素营养。用根瘤菌属(Rhizobium)或慢生根瘤菌属(Bradyrhizobium) 的菌株制造。 3.2 固氮菌肥料：在土壤和很多作物根际中同化空气中的氮气，供应作物氮素营养；又能分泌激素刺激作物生长。用下列菌种之一制造。 固氮菌属(Azotobacter) 氮单胞菌属(Azomonas) 固氮根瘤菌属(Azorhizobium) 根际联合固氮菌：固氮螺菌属(Azospirillum) 阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacea)经鉴定为非致病菌 粪产碱菌(Alcaligenes faecalis)经鉴定为非致病菌 肺炎克氏杆菌(Klebsiella pneumoniae)经鉴定为非致病菌
其他经过鉴定的用于固氮菌肥料生产的菌种。 这些菌主要特征是在含一种有机碳源的无氮培养基中能固定分子态氮。 3.3 磷细菌肥料：能把土壤中难溶性磷，转化为作物可以利用的有效磷，改善作物磷素营养。用下列菌种之一制造。 分解有机磷化合物的细菌： 解磷巨大芽胞杆菌(Bacillus megatherium phosphaticum) 解磷珊瑚红赛氏杆菌(Serratia carollera phosphaticum) 节杆菌属中的一些种(Arthrobacter sp.) 转化无机磷化合物的细菌： 假单胞菌属中的一些种(Pseudomonas sp.) 其他经过鉴定的用于磷细菌肥料生产的菌种。 有机磷细菌在含磷矿粉或卵磷脂的合成培养基上有一定解磷作用，在麦麸发酵液中都含 刺激植物生长的生长素物质。 无机磷细菌具有溶解难溶性磷酸盐的作用。 3.4 硅酸盐细菌肥料：能对土壤中云母，长石等含钾的铝硅酸盐及磷灰石进行分解，释放出钾、磷与其他灰分元素，改善作物的营养条件。本品的生产菌种为胶质芽胞杆菌(Bacillus mucilginosus) 的菌株及其他经过鉴定的用于硅酸盐细菌肥料生产的菌种。 该菌在含钾长石粉的无氮培养基上有一定解钾作用，菌体内和发酵液中存在刺激植物生 长的生长素物质。 3.5 复合微生物肥料：含有上述(解磷、解钾、固氮微生物)或其他经过鉴定的两种以上互不 拮抗微生物，通过其生命活动，能增加作物营养供应量。 4 技术要求 4.1 成品技术指标1) 表1成品技术指标1) 剂型→ 项目液体固体颗粒
微生物絮凝剂的污泥脱水性能研究
第28卷 第3期 2009年 5月环 境 化 学ENV I RONMENT AL CHE M I ST RY Vol .28,No .3M ay 2009 2008年6月13日收稿. 3广东省科技计划项目(2005B33301004)133通讯联系人. 微生物絮凝剂的污泥脱水性能研究 3叶何兰1 叶锦韶1,233 钟子嘉1 尹 华1 彭 辉1 张 娜 1(1 暨南大学环境工程系,广州,510632;2 中国科学院广州地球化学研究所,有机地球化学国家重点实验室,广州,510640)摘 要 采用酱油曲霉发酵制备的微生物絮凝剂对广州市猎德污水处理厂浓缩污泥的脱水性能进行研究1实验结果表明,酱油曲霉分泌的微生物絮凝剂对浓缩污泥有较好的脱水效果,调理后的污泥比阻可降至819×1011m ?kg -1,显著地改善了污泥的脱水性能1与对照样相比,脱水率提高了7%,含水率降低了6%1当絮凝剂的投加量为污泥体积的5%、干重质量浓度为518mg ?l -1时,污泥的脱水效果最佳,污泥脱水率从7516%提高到8216%,污泥含水率从8214%降到7614%1微生物絮凝剂和聚丙烯酰胺(P AM )复合使用有助于改善污泥的脱水性能,当10mL 116mg ?l -1微生物絮凝剂和6mL 1g ?l -1P AM 复合使用时,污泥的脱水率为8219%,脱水后污泥的含水率为7611%1 关键词 酱油曲霉,微生物絮凝剂,污泥1 城市污水厂的浓缩污泥含水率高,脱水性能差,不利于储藏、运输和消纳1因此,污泥的脱水技术和脱水效果直接决定了污泥的处置容积和污泥资源化的价值1脱水前,通过投加絮凝剂进行调理是改善污泥脱水性能最常用的方法1聚丙烯酰胺(P AM )和聚合氯化铝(P AC )等常用的无机和有机高分子絮凝剂,具有生物毒性、难以被生物降解,微生物絮凝剂(MBF )是利用生物技术从微生物体或其分泌物中提取、纯化而获得的一类安全、高效,且能自然降解、无二次污染的新型水处理剂和污泥调理剂,在污泥无害化脱水中,具有广阔的应有前景[1—8] 1 本文采用酱油曲霉(A spergillus sojae )发酵制备的MBF,对广州市猎德污水处理厂浓缩污泥的脱水性能进行研究,将有助于拓展MBF 的研究和应用,增强污泥的资源化利用价值11 实验方法 将酱油曲霉(A sperg illus sojae )菌体接种于250m l 培养液中,置于32℃恒温摇床培养箱内,以150r ?m in -1振荡培养3d 1培养物于3000r ?m in -1 离心机中离心5m in,然后进行污泥絮凝脱水实验1 取离心后的发酵液以真空干燥法浓缩至原体积的20%左右,放置在4℃冰箱中预冷1然后用2倍体积预冷至4℃的无水乙醇沉淀提取,在冰箱中放置16h 后离心,弃去上清液,用75%的乙醇洗涤沉淀,将沉淀真空冷冻干燥,得到生物絮凝剂,确定絮凝剂的质量浓度(质量浓度=生物絮凝剂质量/发酵液体积). 取200m l 浓缩污泥置于烧杯中,投加定量微生物絮凝剂,以150r ?m in -1 快速搅拌3m in,再以50r ?m in -1慢速搅拌6m in 1将絮凝调理后的污泥倒入装有滤布的离心管中,以3000r ?m in -1离心7m in 1然后取滤布上的污泥称重,计算污泥脱水率,脱水率=(脱水前污泥质量-脱水后污泥质量)/脱水前污泥质量1 将离心后的污泥于103—105℃烘箱中烘干至恒重,测含水率,含水率=(烘干前污泥质量-烘干后污泥质量)/烘干前污泥质量. 2 微生物絮凝剂投加量对污泥脱水效果的影响 于2007年7月至10月,采集广州市猎德污水处理厂的浓缩污泥池的污泥1污泥的含水率、比阻 和沉降比分别为9713%±017%(017%),517×1013m ?kg -1±117×1013m ?kg -1(2918%)和41%±311%(716%).由于污泥比阻高达(517±117)×1013m ?kg -1,所以猎德污水处理厂的浓缩污泥
微生物的生长和纯培养
第二章 微生物的纯培养和显微技术 [教学目标教学目标]] 通过本章的教学，使学生掌握什么是纯培养？微生物分离纯化的基本技术。 [教学的重点和难点教学的重点和难点]] 纯培养的概念和微生物的无菌操作技术。 [教学方法和手段教学方法和手段]] 应用多媒体授课，主要以讲授为辅，实验教学为主。 [教学内容教学内容]] 第一节第一节 微生物纯培养微生物纯培养 纯培养（（pure culture pure culture）：）： ）：单个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代。 克隆：对于微生物，由于其主要进行无性繁殖，故纯培养即为克隆。 建立纯培养，证实其纯度无可置疑，并保持不受污染是微生物学家最重要的任务之一。（即控制无杂菌） 一、获得纯培养的方法： （一）.平板分离法： 1、划线分离法：快速、方便。 分段划线（（适用于浓度较大的样品适用于浓度较大的样品）） 连续划线（（适用于浓度较小的样品适用于浓度较小的样品）） 扇形划线 方格划线
分段划线法 2、稀释倾注分离法： 可定性、定量。 方法：先取稀释液注入平皿，再注入45℃左右的培养基，将稀释液冲开培养基表面、中间均会出现菌落。 3、涂布平板法（培养基表面出现菌落） 简单易行，但易造成机械损伤 （二）．液体分离法
适用于细胞较大的微生物。用液体培养基对菌液做10倍系列稀释，使试管中只存在一个细胞，由此繁殖得到的后代必是纯培养。 （三）单细胞（单孢子）分离法 较大的微生物可用毛细管挑取单个个体；个体较小的微生物，需用显微操作仪，在显微镜下进行。 （四）.选择培养分离（通常做成固体的培养基） ：通过选择培养进行微生物纯培养分离的技术称为选择培养分离。 1、利用选择平板进行直接分离 2、富集培养
微生物肥料作用机理
为生物肥料作用机理 一般讲的微生物肥料,其实是一种菌剂，是一类微生物群体。这类微生物菌剂能够提供一种或多种对作物生长有益的微生物群落。由于农业上应用的微生物菌剂常常和草炭、泥炭、有机肥料等有机质含量较高的基质混合在一起，所以习惯上把微生物菌剂称为微生物肥料，人们俗称为“菌肥”。 微生物肥料的作用机理根本不同于化学肥料。能够提供一种微生物群落的叫“单一微生物肥料”或“专一微生物菌剂（肥料）”；能够提供两种以上多种微生物群落的叫“复合微生物菌剂（肥料）”。根据微生物的作用划分，可以将微生物菌剂划分为“固氮细菌（菌剂）”、“解磷细菌（菌剂）”、“解钾细菌（菌剂）”、“腐解细菌（菌剂）”等。这些微生物菌剂都可以选择性地为农业生产服务。微生物肥料的作用主要是提供对作物生长有益的“微生物群落”，而不是“营养元素”。这些有益的微生物施到土壤中后，能产生各种不同作用。例如：以固氮细菌为主的微生物肥料能通过细菌的活动，固定空气中的氮元素，供作物生长时吸收利用—即“固氮”作用；以解磷细菌为主的微生物肥料则通过细菌的活动，分解土壤中部分不能被作物吸收的磷元素，使磷从土壤中分解出来，供作物生长时吸收利用—即“解磷”作用；以解钾细菌为主的微生物肥料主要作用是：通过细菌的活动，分解土壤中部分不能被作物吸收的钾元素，使钾从土壤中分解出来，供作物生长时吸收利用
—即“解钾”作用。同时，微生物在土壤中的生活、活动，可产生很多代谢产物或分泌物，这些分泌物对作物的生长有刺激作用。总的来讲，微生物肥料的作用就是细菌的固定、分解、分泌作用，影响到土壤中的营养养分的变化。土壤中营养养分变化了，生长在土壤中的作物的生长情况当然也要变化。所以，微生物的作用是“作用”于土壤中、“反应”在作物上。如果土壤养分太低，微生物肥料（菌剂）也无回天之力，还得加施有机肥或化肥。 微生物肥料的作用 1、促进土壤形成土壤是农作物生长的基础，由岩石风化而成。岩石经过物理、化学因素长时间的作用后变成岩石粉末，再形成“土”。土中有了有机物和微生物后，通过其中微生物的活动，土慢慢变成“壤”，让农作物能够生长，并提供丰富的矿质元素。土在形成具有生物活性的土壤过程中，微生物担当了主力军的作用。可以这样说，没有微生物的作用，就不可能有供农作物生长 的土壤的形成。 2、增加土壤肥力这是微生物肥料的主要功效。所谓土壤肥力是指土壤供给农作物生长所需养料的能力。微生物是土壤肥力的最大贡献者。土壤是微生物的大本营，在那里长年生活着数量庞大、种类繁多的微生物群体。它们在生命活动过程中，不断分解土壤中的有机物，转化成腐殖质，促进土壤团粒结构形成，增