金樱子中总黄酮和多糖的微波提取与含量测定_薛梅

真菌多糖的功能

真菌多糖的功能 在国际上，真菌多糖被称为称为“生物反应调节物”，简称“BRM”，按研究表明，药用菌的活性多糖成份β－D（1－73）葡萄糖对异源的、同源的甚至遗传性的肿瘤都有变化。此外，它还具有抗细菌、抗病毒和抗凝聚的作用，提高肝功能和解毒力，提高动物耐缺氧能力和氧的利用率，降低血液的粘稠度，增加心肌收缩力，改善心律，降血糖、镇静、镇痛、平喘、止咳、化痰的功效。 一、多糖对肿瘤的作用 1、多糖对肿瘤的治疗作用不是直接杀伤肿瘤细胞，而是通过增强患者的免疫防御系统，达到防癌抗癌的效果。实验证明，从香菇、黄芪、柏树菌中提出的多糖能增强 T 细胞的功能，使免疫功能低下的动物恢复正常，特别对具有杀伤肿瘤细胞功能的 T细胞 NK 细胞及LAK 细胞有激活作用。 2 、多糖又是免疫 B 细胞活化剂，像黄芪多糖、香菇多糖、柏树菌多糖、灵芝多糖等等能促进B细胞的增殖，使其产生大量免疫球蛋白抗体，从而增强抗病能力。 3 、巨噬细胞，特别是毒性巨噬细胞对肿瘤的细胞有很强杀伤力，它能合成和分泌肿瘤坏死因子（TNF），使肿瘤出血坏死。多糖类的物质是强大的 TNF 诱导剂，给动物注射多糖第 8 天，TNF 的产生达到高峰，从而发挥抗癌功效。 4 、干扰素（IFN）是机体内自己制造的抗病毒和抗癌物质。柏树菌多糖能够诱导机体产生干扰素。加进每毫升10－100微克浓度的柏树菌可使正常人产生α干扰素和γ干扰素的分别提高 8 倍和 4 倍。 5 、白细胞介素2（I L－2）为T细胞生长因子，由活化的 T 细胞所产生，即能维护免疫 T 细胞长期存活，又可诱导 T 杀伤细胞及 LAK 细胞的生长，因此成为治疗肿瘤和爱滋病等病毒的最新药物。多糖类药物可激活 T 细胞诱导内源性白介素2 产生，从而避免商品白介素2 的毒性与副反应。还能提高细胞对白介素2 的敏感性，使其能在较低剂量下产生最大治疗效果。 二、真菌多糖对糖尿病和哮喘的作用 研究发现真菌多糖治疗糖尿病是通过两方面发生作用的。二是改变血液循环，使机体胰脏血液循环加快，胰岛 B细胞得到了足够的氧，从而增加了胰岛素的分泌量。另一方面，提高肌肉细胞胰岛素靶细胞受体的功能，使得同样量的胰岛素能发挥更大的效果。有些老年糖尿病患者的内分泌功能检测时，胰岛素的量处于正常范围，其所以会产生糖尿病，主要是胰岛素靶细胞对胰岛素敏感性降低的原因。 哮喘患者气管肥大细胞的细胞透性较大，所以致喘物质组织胺容易从肥大细胞中释放出来。哮喘患者服用真菌多糖后，气管平滑肌肥大细胞、细胞膜的创作修复就会加快人。肥大细胞之组织胺释放受到了抵制，从而抑制了哮喘。真菌多糖的抗疲劳作用，现在知道，也是提高细胞生理功能，提高细胞乳酸脱酶的活性实现的。 三、真菌多糖抗病毒抗感染的作用 研究发现，是由于真菌多糖对细胞的作用。真菌多糖可以提高机体细胞的生理功能，修

总黄酮、多酚含量的测定

燕麦总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 （一）、样品处理及总黄酮的提取 1. 将样品籽粒分别称取 2.5 g置于小信封里，80℃烘干24 h。 2. 研成粉末，称取500±2 mg样品于10 mL离心管中，使样品位于试管底部（重复3次）。 3. 每管加4 mL 60％乙醇，放水浴锅60℃浸提2 h。6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于10 mL容量瓶中。 4. 再向离心管中加4 mL的60％乙醇，放水浴锅60℃浸提1 h。6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应的10 mL容量瓶中。60％乙醇定容至10 mL，待测。 （二）、标准曲线绘制 1. 精确量取浓度200 μg/mL芦丁标准溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL 分别置于10 mL容量瓶中。 2. 向容量瓶中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。 4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。 5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为纵坐标，以吸光度为横坐标，绘制标准曲线。 （三）、样品提取液总黄酮含量的测定 准确吸取总黄酮提取液2.0 mL于10 mL容量瓶中，按二的方法测定吸光度，

金樱子质量标准及检验操作规程

XXXXXXXXXXX有限公司原料质量标准及检验操作规程 1 品名： 1.1 中文名：金樱子 1.2 汉语拼音：Jinyingzi 2 代码： 3 取样文件编号： 4 检验方法文件编号： 5 依据：《中国药典》（2020年版一部）。 6 质量标准：

7 检验操作规程： 7.1 试药与试剂：乙醇、乙酸乙酯、甲醇、金樱子对照药材、三氯甲烷、甲酸、硫酸、无水葡萄糖。 7.2 仪器与用具：电子天平、水浴锅、烘箱、硅胶G板、马弗炉、超声波清洗器、高效液相色谱仪紫外分光光度计。 7.3 性状：取本品适量，自然光下目测色泽，嗅闻气味。 7.4 鉴别： 7.4.1取本品制片置10×10显微镜下做显微观察。 7.4.2取本品粉末2g，加乙醇30ml，超声处理30分钟，滤过，滤液蒸干，残渣加水20ml使溶解，用乙酸乙酯振摇提取2次，每次30ml，合并乙酸乙酯液，蒸干，残渣加甲醇2ml使溶解，作为供试品溶液。另取金楼子对照药材2g，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法（附录7）试验，吸取上述两种溶液各2μl分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲垸-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（5 : 5 : 1 : 0.1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105°C 加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。

7.5 检查： 7.5.1水分不得过18.0%(附录15 第二法)。 7.5.2总灰分不得过5.0%（附录17）。 7.5.3二氧化硫残留量照二氧化硫残留量测定法（附录58）测定，不得过150mg/kg。 7.6 含量测定： 对照品溶液的制备取经105°C干燥至恒重的无水葡萄糖60mg，精密称定,置100ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度,摇匀，即得(每lml中含无水葡萄糖0. 6mg)。 标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.5ml、1.0ml、1. 5ml、2. 0ml、2. 5ml，分别置50ml量瓶中，各加水至刻度，摇勾。分别精密量取上述溶液2ml，置具塞试管中，各精密加4%苯酚溶液lml，混匀，迅速精密加人硫酸7ml，摇匀，置40°C水浴中保温30分钟，取出，置冰水浴中放置5分钟，取出，以相应试剂为空白，照紫外-可见分光光度法（附录5)，在490nm的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。 测定法取金櫻子肉粗粉约0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加水50ml,称定重量，静置1小时，加热回流1小时，放冷，再称定重量，用水补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液lml，置100ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取25ml，置50ml量瓶中，加水至刻度，摇匀，精密量取2ml，置具塞试管中，照标准曲线的制备项下的方法，自“各精密加4%苯酚溶液lml”起,依法测定吸光度，从标准曲线上读出供试品溶液中金櫻子多糖的重量(μg)，计算，即得。

总黄酮含量测定方案

总黄酮含量测定 一样品溶液的制备 70%乙醇溶液，料液比1﹕8 ，80度下回流2h。取10g样品放入圆底烧 瓶中加入80ml 70%乙醇溶液回流2h,抽滤定容至100ml备用。使用时先离心再用70%乙醇稀释10倍做样品溶液。 二芦丁标准品的配置 精密称取芦丁2mg，加无水乙醇定容至10ml。制得浓度为0.2mg/ml芦 丁标准品溶液。 三显色方法的确定 1 扫描原液分别取芦丁溶液和样品溶液各1ml，加无水乙醇定容至25ml，空白对照，全波扫描。 2硝酸铝显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加5%亚硝酸 钠溶液（1.25g亚硝酸溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中) 1ml, 摇匀，放置6min，加10%硝酸铝溶液(4,4014g硝酸铝.九水溶于无水乙醇中定容到25ml 容量瓶中) 1ml，摇匀，放置6min，加4%氢氧化钠试液(2g氢氧化钠溶于无水乙醇中定容到50ml容量瓶中）10ml, 再加无水乙醇定容至25ml，摇匀，放置15min，空白对照，全波扫描bb 。 3氯化铝显色法分别取芦丁对照溶液和样品溶液各5ml ,加1%的氯化 铝溶液（1g氯化铝溶于无水乙醇中定容到100ml容量瓶中)10ml，摇匀放置10min，空白对照，全波扫描。 4 氢氧化钾显色法分别取芦丁对照品溶液和样品溶液各5ml，加3ml10% 氢氧化钾溶液（2.5g氢氧化钾溶于无水乙醇中定容到25ml容量瓶中）， 充分摇匀显色5min后，用无水乙醇定容至25ml, 摇匀，空白对照，全波 扫描。 四显色条件的确定 五标准曲线的绘制 分别取1ml,2ml,3ml,4ml,5ml,6ml芦丁对照品溶液，按所选的显色方法测定吸光度，绘制标准曲线。 六精密度实验 按标准曲线绘制方法，分别准确量取1.0ml芦丁标准液5份，按所选显色剂和所确定的最优显色条件在所选波长下测定吸光度。

总黄酮、多酚含量的测定

总黄酮含量的测定 一、仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、超声波提取器、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、10mL容量瓶15个、10mL具塞试管、100mL烧瓶、10mL离心管10个、试管架2个 二、药品 芦丁标准品40mg、无水乙醇1000mL、亚硝酸钠500g、硝酸铝500g、NaOH 500g 三、实验步骤 （一）、标准曲线绘制 1. 芦丁标准品40mg置于称量瓶中80℃烘干至恒重，取烘干后的20mg芦丁标准品用水定容至100mL,得200μg/mL芦丁标准贮备液，精确量取上述浓度芦丁标准贮备溶液0、0.2、0.4、0.8、1.2、1.6、 2.0 mL分别置于10 mL具塞试管中。 2. 向具塞试管中分别加60％乙醇5、4.8、4.6、4.2、 3.8、3.4、3.0 mL。 3. 然后加5％亚硝酸钠0.3 mL，摇匀，静置6 min。 4. 再加10％硝酸铝0.3 mL，摇匀，静置6 min。 5. 加4％氢氧化钠4.0 mL，用60%的乙醇定容至刻度，摇匀，静置12 min。 6. 于510 nm波长下测定吸光度，并以芦丁标准浓度值为横坐标，以吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。研究表明芦丁标准品含量在0～0.5mg 范围内与吸光度具有良好的线性关系。 （二）、样品处理及总黄酮的提取（以60%乙醇提取为例） 1. 将样品在80℃烘干24 h，粉碎后过80目筛置于干燥器中备用。 2. 称取500±2 mg样品于25 mL具塞三角瓶中，使样品位于三角瓶底部（重复3次）。 3. 每瓶加4 mL 60％乙醇，放超声波提取器提取2 h。提取液转至10 mL具塞离心管中。 4. 再向具塞三角瓶中加4 mL的60％乙醇，放超声波提取器提取1 h，提取液转至相应10 mL具塞离心管中，6000 r/min离心10 min，离心后取上清液于相应

金樱子

金樱子 姓名：王正非学号：110205111 班级：资源1101 课程：中药资源学【概述部分】金樱子（药材拉丁名：Rosae laevigatae fructus），本品为蔷薇科植物金樱子的果实。10-11月果实成熟变红时采收，干燥，除去毛刺。根皮可提制栲胶；果实、叶根均可入药。扦插或用种子繁殖。金樱子在我国有悠久的药用历史，始载于《雷公炮炙论》，李时珍在《本草纲目》上称“金樱子，[气味]酸、甘、涩，无毒。[主治]脾泄下痢，止小便利，涩精气。久服，令人耐寒轻身。补血益精，有奇效。”1其他如《蜀本草》、《开宝本草》、《梦溪笔谈》、《植物名实图考长编》等均有记载。金樱子原产我国，广泛分布于我国华东、华中、华南及西南地区的陕西、江西、江苏、浙江、湖北、湖南、广东、广西、台湾、福建、四川、云南、贵州等省区。据报道皖西大别山区年可收获金樱子果实总产量约900～1400吨。广东省药材公司估计该省年产量可达2000吨以上。而贵州金樱子则分布广、产量高，年收购量在10000吨以上。西藏地区也有金樱子分布，主要分布于藏南亚东、樟木一带及波密-林芝-米林-墨脱一线海拔1500～3500m的山野向阳区的灌木丛中，因特定的西藏气候条件，其金樱子的质量优于内地省区品种2。 【分布与生境】 药材名资源植物分布区域 金樱子Rosae laevigatae fructus 金樱子Rosa laevigata Michx.分布于我国华东、华中、 华南及西南地区的陕西、江 西、江苏、浙江、湖北、湖南、 广东、广西、台湾、福建、四 川、云南、贵州等省区。 金樱子喜生长于向阳的山野、田边、溪畔灌木丛中，海拔200-1600米。喜温暖涧，阳光充足的环境。对土壤要求不严，宜生于阳坡。 【生物学特性】金樱子为常绿蔓性灌木，无毛；小枝除有钩状皮刺外，密生细刺。小叶3，少数5，椭圆状卵形或披针状卵形，长2-7cm，宽1.5-4.5cm，边缘有细锯齿，两面无毛，背面沿中脉有细刺，叶柄、叶轴有小皮刺或细刺；托状线形，和叶柄分离，早落。花单生侧枝顶端，白色，直径5-9cm；花柄和萼筒外面密生细刺。蔷薇果近球形或倒卵形，长2-4cm，有细刺，顶端有长而外反的宿存萼片。花期5月，果期9-10月。3 金樱子喜温暖干燥的气候。以排水良好、疏松、肥沃的砂质壤土为宜。用种子和扦插繁殖。以扦插繁殖为主。种子繁殖：冬季用新鲜的种子播种，按30cm行距开浅沟，种子均匀撒入沟里，覆土1.5cm，每1h㎡播种量30-37.5kg。第2年春季出苗，出苗2-3年后，春季移栽。扦插繁殖：在春季发芽前，选健壮的母株，剪取1-2年生枝条作为插条，长12-15cm，斜插于砂床中，压紧，浇水，保持经常湿润，盖以芦帘遮荫。约经2月左右即可生根发芽。至翌年2-3月或9-10月间移植。按行、株距各40-60cm开穴，每穴栽种1株，覆土压实，浇水。 不同产地的金樱子成分差异，除了受气候、环境、温度、湿度、日照、土壤等地理因素的影响外，采收季节和加工方法等人为因素也是导致不同产地的中药成分存在差异性的重要原因。 【化学成分】金樱子果实风味独特，有蜂蜜味和幽香，营养极丰富，内含糖(主要是果糖等还原糖)、柠檬酸、苹果酸、鞣质、维生素、20余种氨基酸、18种矿物元素以及树脂、皂甙等成份，尤以维生素C和还原糖含量较高。且金樱子含有丰富的锌和硒，这两种元素为人体所必需的具有特定保健和防癌功效的微量元素。 金樱子果实中总糖含量达24%，其中多糖含量约为金樱子果实的8.73%，金樱子多糖为

银杏叶黄酮提取及含量测定

银杏叶黄酮提取及含量测定 一、实验目的 1、掌握银杏叶中黄酮的提取方法 2、了解银杏叶中黄酮的含量测定 二、实验原理 近几年来，随着对黄酮类化合物研究的日益深入与重视，黄酮类化合物提取技术的发展也得到了促进。目前提取黄酮类化合物的方法主要包括有机溶剂浸提法、超声波提取法、超临界流体萃取法、微波提取法和酶提取法等。 １．１有机溶剂浸提法 目前国内外使用最广泛的银杏叶中黄酮的提取方法就是有机溶剂提取法，一般可用乙酸乙酯、丙酮、乙醇、甲醇或某些极性较大的混合溶剂，如甲醇－水（１＋１）溶液。由于甲醇的毒性、挥发性较大，因此一般采用乙醇作为提取剂。银杏叶干燥粉碎后用有机溶剂浸泡、提取、过滤，滤液中的溶剂经减压蒸馏除去后得银杏叶浸膏粗提物。徐桂花等［１］提取银杏叶中黄酮类化合物时，采用乙醇（７０＋３０）溶液为提取剂，提取温度为７０℃，料液质量浓度比为１ｇ比４０ｍＬ，提取时间为４ｈ。由于乙醇提取工艺在安全性、溶剂成本、效率及杂质酚酸去除等方面都不能应对日益严酷的市场竞争，张林涛等［1］提出了以硼砂－ 氢氧化钙碱水为溶剂提取银杏叶黄酮，其黄酮提取率与文献值相近，但提取工艺时间缩短为１ｈ。 １．２超声波提取法 超声波提取法是利用搅拌作用、强烈的振动和空间效应、高的加速度等使药物有效成分进入溶剂，从而提高提取率，缩短提取时间，并能消除高温对提取成分影响的一种提取法。刘晶芝等［2］运用了超声波技术与水浸提取相结合的方法得出超声波提取的最佳工艺条件为：超声频率４０ｋＨｚ，超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比１００，提取温度３５℃，静置３ｈ，提取率为８１．９％。郭国瑞等［3］以水为介质，超声波提取银杏叶中黄酮苷，与常规水浸提法比较，超声波提取效率大大提高，确定超声波提取的最佳工艺为：超声处理时间５５ｍｉｎ，料液质量比１比３０，提取温度５０℃，提取率为８２．３％。 １．３超临界流体萃取法 超临界流体萃取法是一种以超临界流体代替常规有机溶剂对有效成分进行萃取和分离的新技术。可作为超临界流体的物质很多，其中二氧化碳临界温度（ＴＣ＝３１．３℃）接近室温，且具有无色、无毒、无味、不易燃、化学惰性、价廉、易制成高纯气体等优点而被广泛应用，特别在中药材及其制剂中更显示出其独特、简便、快速、具有较高的选择性、提取杂质少、可直接进样分析的优点。邓启焕等［4］探讨了超临界萃取银杏叶有效成分的影响因素，最佳条件为萃取压力２０ＭＰａ、时间９０ｍｉｎ、粒度３．９ｍｍ、温度４０℃，经测定银杏叶黄酮的质量分数为２８％，高于国际公认标准。 １．４微波提取法 微波提取法是利用分子或离子在微波场中的导电效应直接对物质进行加热从而提取植物细胞内耐热物质的新工艺。曾里等［5］的研究表明以乙醇溶液作溶剂比以水作溶剂的效果好，最佳条件为以乙醇 （６０＋４０）溶液为提取剂，解冻处理２０ｍｉｎ。张鹏等［6］对微波法提取银杏叶中黄酮类物质进行了研究，最佳提取条件为以乙醇（５０＋５０）溶液

光果金樱子和金樱子质量比较研究薄层色谱鉴别显微鉴定

光果金樱子和金樱子质量比较研究 来源：233网校论文中心[ 2010-10-27 10:44:00 ]阅读：99编辑：studa20 作者：林芳花，彭永宏，柴素芬，何淑华 【摘要】目的对光果金樱子和金樱子进行质量研究，并比较其异同，为金樱子质量标准的完善及光果金樱子资源的综合开发利用提供参考。方法采用性状、显微、薄层色谱法进行定性鉴别; 除光果金樱子果实光滑无刺外，二者的性状基本一致，显微特征和薄层色谱行为相似;光果金樱子多糖质量分数为(36.42±0.05)%，金樱子多糖的平均质量分数为38.46%。结论光果金樱子外观性状、显微特征、薄层色谱行为和多糖含量与金樱子相似，有可能作为金樱子的来源。 【关键词】金樱子;光果金樱子;质量研究;多糖;性状;显微;薄层色谱(Department of Life Science/Research Institute of Biotechnology,Huizhou College,Huizhou,Guangdong 516007,China)Abstract:Objective To improve the quality standard of Rosa laevigata Michx. and provide reference for comprehensive exploitation and utilization on Rosa laevigata var. Leiocarpus.Methods Macroscopic,microscopic and TLC were used for identification,and phenol sulfuric acid method was used to determine the content of polysaccharide.Results Both Rosa laevigata var. Leiocarpus and Rosa laevigata Michx. presented resemblance in appearance,microstructure and TLC behavior except that the fruits of Rosa laevigata var. Leiocarpus have a smooth surface without any thorn.The average polysaccharide content of Rosa laevigata var. Leiocarpus was (36.42 ± 0.05)%,and that of Rosa laevigata Michx.was 38.46%.Conclusion Rosa laevigata var. Leiocarpus and Rosa laevigata Michx.were similar on appearance,microscopic structure,TLC and polysaccharide content.Rosa laevigata var. Leiocarpus may be a new source of Rosa laevigata Michx. Key words:Rose laevigata Michx.; Rosa laevigata var. Leiocarpus;quality research; polysaccharide; appearance; microscopic structure;TLC

真菌多糖的研究概况

真菌多糖的研究概况 郭凯，原雪 （中国药科大学生命科学与技术基地 ，江苏南京， 210038） E-mail：smallrians@https://www.sodocs.net/doc/a613697573.html, 摘要：真菌多糖具有重要的药用价值，尤其是其免疫调节功能，在抗肿瘤、保肝、抗氧化等方面发挥重要的药理作用。本文对近年来真菌多糖免疫调节功能及药理作用的研究做一概述，为进一步研究和开发利用真菌多糖提供参考。 关键字：真菌多糖，免疫调节功能，药理作用 多糖（polysacharides，PS）是一种广泛存在于植物、动物和微生物组织中，具有多种生物活性的天然大分子化合物，是生命有机体的重要组成部分。真菌多糖是从真菌子实体、菌丝体、发酵液中分离出的，能够控制细胞分裂分化，调节细胞生长衰老的一类活性多糖[1]。与动、植物多糖不同的是真菌多糖分子单体之间，大多以β (1→3)与β(1→6)糖苷键结合，形成链状分子，具有螺旋状的立体构型[2]。 近年来对真菌多糖化学结构和生物活性的深入研究已经取得了丰硕的成果。实验证明真菌多糖具有很广泛的免疫调节作用，在抗肿瘤、抑制癌细胞、保肝、降血压、降血脂、抗血栓、抗辐射等方面起着重要的作用。目前已经广泛应用于临床。本文就近几年的研究成果做一总结。 1．免疫调节功能 目前普遍认为多糖的广泛免疫调节功能是其发挥药理作用的基础，研究已经深入到了分子和受体水平，发现多糖在机体免疫反应中的作用相当于抗原，可以激活多种免疫细胞，还能促进细胞因子生成，激活补体系统，促进抗体产生，对免疫系统发挥多方面的调节作用。 1.1巨噬细胞 巨噬细胞在机体的免疫系统中占有极其重要的地位，它担负着吞噬病原微生物，处理抗原并提呈给淋巴细胞，启动特异性免疫应答并参与免疫调节等作用，是多糖作用的最主要靶点。真菌多糖能明显提高巨噬细胞的吞噬能力。唐庆九[3]等实验表明灵芝多糖可刺激小鼠巨噬细胞分泌TNF-α和IL-1β，产生NO，并可增强巨噬细胞的吞噬能力。这可能是其增强机体免疫力的主要机制之一。马兴铭[4]等实验表明小鼠腹腔注射猪苓多糖、茯苓多糖、灵芝多糖100mg/kg，能显著提高正常小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬指数，加强小鼠腹腔巨噬细胞的非特异性吞噬能力。 1.2淋巴细胞 近年来大量临床医学试验表明，冬虫夏草能刺激和恢复T淋巴细胞和B淋巴细胞，增强淋巴细胞的转化作用[5]。用香菇多糖给小鼠皮下注射，可促进小鼠溶血空斑及外周血E-玫瑰环形成，增加体内淋巴细胞转换率，显著的增强对刀豆球蛋白（ConA）诱导的淋巴细胞增殖[6]。灵芝多糖具有促进同种异型抗原刺激的淋巴细胞转化作用，其作用机制是通过间接诱导 DNA多聚酶α的产生，促进免疫细胞中 DNA的合成，从而促进细胞的增殖，加速免疫应答的过程[7]。 1.3网状内皮系统 绝大多数的真菌多糖能刺激动物机体网状内皮系统（RES）的吞噬功能，使之释放一些细胞因子如肿瘤坏死因子（TNF）和白细胞介素（IL）来杀死肿瘤细胞，有效增强巨噬细胞

总黄酮测定含量

1 各批次药材含量测定 使用已经确定的总黄酮含量检测方法分别进行5个批次原料含量的测定 总黄酮含量测定：分别精密称取药材粗粉0.5g，置100ml锥形瓶中，加70%乙醇50ml，称定重量，超声60分钟，放冷，称定，加入70%乙醇补足减失重量，摇匀，过滤，弃去粗滤液，精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂，待充分吸附后，用乙醇进行洗脱，至流出液基本无色，以洗脱液定容至25ml量瓶中，备用。精密量取供试品溶液5ml，置10ml比色管中，加 5％亚硝酸钠溶液0.4ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6 分钟，加2mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加30%乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录Ⅴ B），在504nm 的波长处测定吸收度。 表1 不同批次药材总黄酮含量测定结果 批号含量（%） 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035 20140516紫外扫描色谱图 2 药材总黄酮转移率研究 2.1 单个药材转移率研究

2.1.1 单个药材的转移率测定 同一批次的各药材，分别按照产品生产工艺提取得单个药材的总黄酮浓缩液样品，进行总黄酮含量检测，与“1”项下同批药材的总黄酮含量相比得出单个药材的转移率（如下式），分别进行5批次药材测定。 黄芪、桑叶、黄精、山茱萸：分别取黄芪、桑叶、黄精、山茱萸各100g，加水煎煮两次（回流），第一次加水12倍量，煎煮2.0h，过滤；第二次加水10倍量，煎煮1.0h，过滤，合并滤液浓缩至100ml，备用。 黄芪不同浓缩程度的考查：取黄芪100g，加水煎煮两次（回流），第一次加水20倍量，煎煮2.5h，过滤；第二次加水20倍量，煎煮2.0h，过滤，合并滤液，重复试验三次，分别浓缩至50ml、100ml、200ml，备用。 精密量取上述溶液5ml，加乙醇15ml，摇匀，过滤，弃去粗滤液，精密量取续滤液10.0ml上聚酰胺树脂，待充分吸附后，用乙醇进行洗脱，至流出液基本无色，以洗脱液定容至25ml量瓶中，备用。精密量取供试品溶液5ml，置10ml 比色管中，加5％亚硝酸钠溶液0.4ml，使混匀，放置6分钟，加10％硝酸铝溶液0.4ml，摇匀，放置6 分钟，加2mol/L氢氧化钠溶液3ml，再加70%乙醇至刻度，摇匀，放置15分钟，照分光光度法（《中国药典》2010版一部附录ⅤB），在504nm 的波长处测定吸收度。 表2 不同批次药材提取液总黄酮含量测定结果 批号含量（%） 1 2 3 X±S 20140516 0.16350.16480.17010.1661±0.0035

植物多糖及其提取方法

植物多糖及其提取方法 1 前言 多糖是自然界和生物体中广泛存在的物质，它是生物体内除蛋白质和核酸以外的又一类重要的信息分子。它具有多种生物活性，与生物机能的维持密切相关，与蛋白质、脂类形成的糖蛋白、脂多糖在细胞的识别、分泌以及在蛋白质的加工、转移方面起着不容忽视的作用。近年来，植物、海洋生物及菌类等来源的多糖已作为有生物活性的天然产物中的一个重要类型出现，各种多糖所具有的抗肿瘤、免疫、抗凝血、降血糖和抗病毒活性已相继被发现。我国对多糖研究始于20世纪70年代，植物多糖由于它们独特的功能和低毒性，作为新药发展的方向具有广阔的应用前景，越来越多的研究人员将目光投向植物多糖。 2 植物多糖的结构 植物多糖是由许多相同或不同的单糖以a或p一糖苷键所组成的化合物，普遍存在于自然界植物体中，包括淀粉、纤维素、多聚糖、果胶等。多糖有复杂的四级结构，一级结构指糖基的组成、排列顺序、相邻糖基的连接方式、异头碳构型及糖链有无分支、分支的位置与长短等；二级结构指多糖主链以氢键为主要次级键而形成的有规则构象；三、四级结构是指以二级结构为基础，糖单位之间的非共价相互作用，导致二级结构在有序地空间产生规则构象。植物多糖的

主链与支链形成了特殊的构型一凹形槽。凹形槽是一级结构与构象的体现。凹形槽的支链与活性关系为：支链度越大，凹形槽越多，生物活性越大。近年来，人们对多糖的结构和活性的研究不断深入，进一步阐明了多糖作用机制与结构的关系，其多样性的生理活性更加受到重视。 3 植物多糖的功能 多糖与蛋白质一样，具有生物大分子的复杂结构，具有一定的生理和生物学活性，概括起来多糖的生物活性包括：免疫调节性、抗肿瘤活性、降血糖活性、降血脂活性、抗病毒活性、抗衰老活性(抗氧化活性)、抗疲劳、抗突变活性，除此之外，还具有其他生物活性，包括抗凝血、抗炎、抗菌、抗惊厥、镇静、止喘及降血压等作用。 (1)免疫调节功能。由于现代医学、细胞生物学及分子生物学快速发展，人们对免疫系统的认识越来越深入。免疫系统紊乱，会导致人体衰老和多种疾病的发生。植物多糖是一种免疫调节剂。多糖对肌体的免疫调节作用，包括激活巨噬细胞，激活网状内皮系统，激活T和B细胞，激活补体，进干扰素的生成，促进白细胞介素的生成，诱生肿瘤坏死因子等。 2)抗肿瘤活性植物多糖主要是通过增强机体的免疫功能来达到杀伤肿瘤细胞的目的，许多高等植物中都含有抗肿瘤活性的多糖，如芦荟多糖、香菇多糖提取物、人参多糖具有

真菌多糖的成分

真菌多糖的成分 随着社会的发展科技的进步健康的问题也越来越严重，因为我们的物质生活，得到了极大的改善，我们在享受着美味佳肴的同时伴随而来的是空气，水，环境，食物甚至于精神方面污染。各种文明病也在吞噬着我们健康。可是在治病寻方时，又局限于传统的治疗方法。西医治疗，针对性强，见效快采取的是抑制、控制、替代。治标不治本，病是越治越多，身体是越治越差。导致恶性循环。中医治疗辨证施治阴阳平衡，但见效慢。百度高温有量无质很难坚持。可以说这些文明病，诸如高血压，糖尿病，癌症。中风，偏瘫，抗生素对他们无效。营养保健品更是无济于事，所以人们急需找到一种比中医治本。比西医见效快。既安全又有保健作用，同时还能达到治疗的功效的产品。因此瀚齐生物有限公司就独家研发和生产出来。具有以上特性的食用菌系列产品。首先我们来介绍公司的产品的原料是食用菌和药用菌。是“冬虫夏草”、“灵芝”、“柏树菌”、“冠蝉”、“鸡腿蘑”、“安络小皮伞”、“香菇”、“银耳”、“猴头菇”等等上千种药、食两用菌。没有偏性，适宜各类体质的人长服久服，孕妇、婴儿、年迈的老人都可服用，无依赖，无毒副作用，安全有效，培元固本。说到食用菌很多朋友都听说过香菇有抗癌防癌的功效，香菇就属于食用菌，药用菌就是药用价值更高的一种菌。比如冬虫夏草，灵芝等，其实食用菌属于中药的范畴，中药分为三个等级，上品、中品、下品。先看下品：大家熟悉的：巴豆、砒霜、蜈蚣、蝎子、蛇都入下品药，因为它的毒性很强，不到万不得已不能随便用，因为有生命危险，他的特点是以毒攻毒，所以要慎服。 再来看中品，它是微毒的，我们常说“是药三分毒”，指的就是中药里的中品（西药叫副作用）。中品因具有“三分毒”因而也不宜久服，必须按疗程服用，然后停服，通过人体的代谢，把微毒代谢出去，再接着服用。因此中药的中品只能间服。 最后来看上品，上品是药食同源，无毒，如薏米、百合、大枣、生姜、杏仁对身体又无害，既能入药也可入食。常服久服能强身健体。延年益寿的称为上品，老

黄酮含量的测定方法

黄酮含量的测定方法 1、对照法 1） ①对照品制备：精密称取芦丁对照品20.8mg，置于100ml容量瓶中，加70%乙 醇使溶解并稀释至刻度，摇匀。 ②样品溶液制备 精密称取样品0.50g，精密加入70%乙醇50ml，称定重量，超声处理30分钟，称定重量，用70%乙醇补足减失重量，即得。 ③标准曲线的制备 精密称取对照品溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml，分别置于25ml比色管中，加70%乙醇10ml，加5%亚硝酸钠溶液1ml，摇匀，放置6分钟，加1mol/L 氢氧化钠溶液10ml，加70%乙醇置刻度，摇匀，放置15分钟。各取10ml 置于50ml容量瓶中，用70%乙醇稀释至刻度。在510nm的波长下测定吸光度。 2） ①样品溶液的制备： 分别精确称取80℃恒温干燥的样品用50%甲醇回流提取，料液比1：15,提取两次，每次30min，将两次提取液合并浓缩至一定体积，用30%甲醇定容至50ml 容量瓶中。从其中取出12ml溶液放入100ml容量瓶中，稀释至刻度，再从100ml 容量瓶中取出1.5ml溶液，放至10ml容量瓶中，定容，为待测样品液Ⅰa和Ⅱa。 ②最大吸收波长的选择：分别作样品液Ⅰa、Ⅱa及芦丁标准品的吸收曲线，均在350 nm 处有一强吸收，因此选择350 nm为测定波长。 ③标准曲线的制定： 精密称取芦丁对照品10.3mg，用少量30%乙醇溶解后，转移至50ml容量瓶，用蒸馏水定容至刻度。分别精密量取2ml、3ml、4ml、5ml、6ml芦丁溶液置于100ml 容量瓶中，于350 nm 波长处测定吸光值，以芦丁空白为参比，以芦丁浓度为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线，提示在4.12～12.36mg／103ml浓度之间，吸光度值与浓度呈现良好的线性关系。 ④含量测定结果： 分别吸取2．2．1中Ⅰa和Ⅱa待测样品液各适量于石英比色池中，按标准芦丁一吸光度测定法，以样液空白参比，于350nm 波长下测定吸光值，计算各提取液中总黄酮含量。 计算公式为:样品总黄酮含量(%)=0.03692(A+0.1644)/W。 注:上式为通过回归方程转化而来，式中A为测得样品液的吸光度值，W为称样量。

设计实验 总黄酮的提取和测定

设计性实验： 银杏叶中总黄酮的提取和测定 小组人员：袁国明郎启国赵永仓王蓉 一、目的要求 1、探究不同浓度的乙醇和在不同时间下对黄酮类化合物提取率的影响。 2、掌握从银杏叶中提取总黄酮的操作步骤和测定方法。 3、了解提取银杏叶中黄酮类化合物制备的基本原理和方法。 二、实验原理 根据超声波具有空化、粉碎、搅拌等特殊作用，对银杏叶的细胞有破坏现象，使乙醇溶液能渗透到银杏叶中，以便让总黄酮溶解在乙醇中，在通过分离提纯的方法，来获得总黄酮的含量。 黄酮类是含酚羟基的化合物，能够和铝离子产生黄色络合物，在碱性条件下溶液呈红色。因此，本实验所采用的方法是在碱性溶液中加铝盐显色的分光光度法。其具体操作是在所测定的溶液中加入5％NaNO2；10%A1(NO3)3；5％NaOH溶液，在500nm波长下，用紫外分光光度法测定所提溶液中总黄酮的含量。 三、试剂和器材 1、试剂 芦丁标准品；5％NaNO2；10%A1(NO3)3；5％NaOH；30%、40%、50%、60%、70%、80％的乙醇（用95%的酒精31.91ml、42.55ml、53.19ml、68.83ml、74.47ml、85.11ml ）；及蒸馏水等。 2、材料 新鲜的银杏叶 3、器材 容量瓶25ml（×1） 100ml（×6）；吸管0.5ml（×2）1ml（×2），2ml（×1），5ml （×1）粉碎机；超声波清洗机；高速离心机；三角锥形瓶50ml（×6）；滤纸；分光光度

计；烧杯；具塞刻度试管；分析天平；20ml量筒等 四、操作方法 1、银杏叶的处理 把新鲜的银杏叶低温烘干，使水分小于8％，制成干粉，待用。 2、制作标准曲线 准确称取芦丁标准品5mg，用80％乙醇溶解，定容于25mL容量瓶中，摇匀，得0.2mg ／mL的标准溶液。 移液管精确吸取标准溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2ml，分别置于10mL容量瓶中，加入5％NaNO2 0.4mL，摇匀，放置5min；加入10%A1(NO3)3 0.4mL，摇匀，放置6min；加入5%NaOH 4.0mL，再加蒸馏水至刻度，摇匀，在80℃水浴中保温10min。以试剂空白作为参比溶液。用1cm比色皿，在510nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线（标样浓度和吸光度的关系）。 表1-1 标准曲线制作 管号 1 2 3 4 5 6 7 芦丁标准液（mL）0.0 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 5％NaNO2（mL）0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 放置时间(min) 5 5 5 5 5 5 5 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 10%Al(NO3)3 （mL） 放置时间(min) 6 6 6 6 6 6 6 5%NaOH（mL） 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 蒸馏水（mL） 5.2 5.0 4.8 4.6 4.4 4.2 4.0 3、探究不同时间对黄酮提取的影响 分别称取6分1g的银杏叶粉末，放在50mL的三角锥形瓶中，并作相应标记，分别加入70%的乙醇溶液各20mL，在超声波清洗机（500W）超声30 min、35 min 、40min、45 min、50min、 55min将溶液用高速离心机离心后除去滤渣，得到粗产品，用量筒量体积做记录，等待备用。 4、探究不同浓度的乙醇对总黄酮提取的影响

多糖综述

植物多糖的研究 摘要：本文对植物多糖的研究进行了综合性的论述，包括多糖的生物活性，提 取分离，含量测定方法及多糖制剂研究。 关键词：多糖提取分离活性含量测定制剂 前言：多糖普遍存在于动植物及微生物中。植物多糖是普遍存在于植物细胞壁 及细胞中的一种重要成分。关于多糖的研究，在近几年的发展很快，实验证明多科属，多组织部位的多糖成分都有一定的生物活性。这些具有生物活性的多糖及糖的复合物与细胞的各种生命现象的调节有着密切的关系。多糖已成为当今新药及保健品发展的主要方向之一，在人们的生活及医学上越来越显示出更为广阔的应用前景。 1多糖的生物活性 1.1免疫及抗肿瘤特性 多糖最为突出的特性是加强机体的免疫功能。张振凌[1]等用环磷酰胺造模法证明多糖对正常及免疫抑制小鼠均有兴奋作用。李海瑞等[2]用四基偶氮唑盐检测法证明多糖能显著提高淋巴细胞的增值反应。 与免疫相关的是抗肿瘤作用，近几年来对多糖的此特性进行的研究主要有以下几个方面：⑴影响细胞的新城代谢，进而能影响肿瘤细胞的转移和相关抗原的表达。⑵影响细胞的周期，使肿瘤细胞的生长停留在某一个分裂期[3]。⑶影响膜蛋白及肿瘤细胞的附着，而是与细胞表面蛋白结合[4]。 1,2 抗衰老作用 近几年对多糖抗衰老作用主要涉及到一下四个方面：⑴加强DNA的复制与合成，为生物的生长提供必需的微量元素和营养，进而延长生物的生长周期。⑵调节蛋白质和核酸、及脂质的代谢。⑶抗脂质过氧化和抑制脂褐质的作用。⑷提高机体超氧化物歧化酶的活力，达到清除机体内部脂质过氧化物和丙二醛的效果，已达到抗衰老的目的。 此外，芦荟多糖，南沙多糖，板蓝根多糖，天门冬多糖，野甘草多糖等均具有一定程度的清除自由基，延缓衰老的作用。 1.3降血糖作用 目前，糖尿病已经成为我国的多发病和常见病。开发安全无毒副作用、预防和治疗高血糖的药品及保健食品迫在眉睫。在近几年植物多糖的研究过程中，在对有三多一少症状的糖尿病小鼠实验时发现人参，南瓜，玉米，大麦等天然植物中含有的多糖成分具有显著地降低血糖的作用，有些多糖如茶多糖对小鼠代谢的影响还有类似胰岛素的作用[6]。 1.4降血脂的作用 高血脂症常常继发于糖尿病，肾病综合征的疾病，是动脉粥样硬化，冠心病的危险因素之一。利用动物实验（主要利用小白鼠），对多糖的降血脂作用进行研究，结果表明，部分多糖（如枸杞多糖，茶多糖，金樱子多糖，桑叶多糖，黄芪多糖等）均具有显著地降低胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白、高密度脂蛋白和游离脂肪酸含量的作用[6-9]。

植物总黄酮的提取与测定

试验植物总黄酮的提取与测定 摘要本实验采用紫外分光光度法测定芹菜体内总黄酮含量，利用黄酮类化合物与铝盐反应生成红色络合物。以芦丁为标准品在510nm处测定吸光度。得出标准曲线，然后计算样品的黄酮量。下面会就本实验出现的一些状况作出详尽想分析。 材料与方法 材料新鲜芹菜叶 方法 试剂的配制 标准品芦丁；甲醇；石油醚；磷酸；95%乙醇；硝酸铝；亚硝酸钠；氢氧化钠；去离子水 步骤 1 总黄酮提取称取新鲜芹菜叶子10.0g，研磨后于回流装置中用70ml 95%乙醇回流2h，过滤，然后用石油醚做溶剂萃取1~2次去脂溶物。溶剂用量为提取液的1/2，除脂后浓缩并定容至50ml。 2 芹菜黄酮含量的测定吸取10ml置25ml容量瓶中，加30%乙醇2.5ml，再加入5%亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀，放置5min，加10%硝酸铝液0.75ml，摇匀，放置5min，再加1mol/L NaOH溶液10ml，摇匀，加30%乙醇至刻度，放置10min，在510nm波长处测定吸光度。同时，取上述稀释液10ml，置于25ml容量瓶中，

加30%乙醇至刻度，作为对照溶液。根据测得的吸光度得出标准曲线 3 标准溶液配制精确称取与120℃真空干燥至恒重的芦丁标准品20mg，置100ml容量瓶中，加60%乙醇溶液，稀释至刻度，精确量取25ml，置于50ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀既得每1ml 含芦丁0.1mg的标准溶液。 4标准曲线制作精确量取标准溶液0。0，2.5,5.0,7.5,10.0,12.5ml，分别置于25ml容量瓶中，加30%乙醇补足至12.5ml，加5%亚硝酸钠溶液0.75ml摇匀，放置5min，精确加入10%硝酸铝液0.75ml，摇匀，放置5min，再精确加入1mol/L氢氧化钠液10ml，用30%乙醇稀释至刻度，以第一管为空白，与510nm波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准溶液。 结果 标准：A1=0.000;A2=0.121;A3=0.266;A4=0.394;A5=0.530;A6=0.673 样品：A（1）=0.000；A（2）=0.036

总黄酮的测定方法

总黄酮的测定方法 黄酮类化合物是广泛存在于植物界的一大类天然产物,种类繁多, 大多数黄酮类化合物与葡萄糖或鼠李糖结合成苷,部分为游离态或与鞣质结合存在。黄酮化合物系色原烷或色原酮的2-或3-苯基衍生物, 一般具有C6-C3-C6的基本骨架结构。近年来, 黄酮类化合物以其广谱的药理作用倍受青睐, 人们对含有黄酮的化合物进行大量研究, 以期获得黄酮含量较高的中草药。因此黄酮的含量测定成为研究的关键步骤。 一、方法 （一）高效液相色谱法 1. 原理植物类样品用石油醚脱脂后，经甲醇加热回流提取，以高效液相色谱法分离，在紫外检测器360nm条件下，以保留时间定性、峰面积定量。 2．仪器和试剂（1）高效液相色谱仪（2）紫外检测器（3）层析柱（4）超声波清洗仪（5）索氏提取器 （6）微孔过滤器（滤膜0.45um）（7）甲醇（色谱纯）（8）芦丁标准品 （9）石油醚，盐酸，磷酸（分析纯）。（10）去离子水 （11）芦丁标准溶液：精确称取经105℃干燥恒重的芦丁标谁品15.0mg，加甲醇溶解并定容至100ml，配成150ug／ml的芦丁标准溶液 3. 操作步骤 （1）样品处理 1）固体样品：称取2.0g干燥的固体样品，研细，置于索氏提取器中，用石油醚（60～90℃）提取脂肪等脂溶性成分，弃去石油醚提取液，剩余物挥去石油醚，加人甲醇50ml和25％HC1 5ml，80℃水浴回流水解1h，取出后快速冷却至室温，转移至50ml容量瓶中，甲醇定容，经0.45um滤膜过滤，供分析用。 2）液体样品：准确吸取样品2.0ml，直接以石油醚萃取脱脂，挥去石油醚后， 以甲醇溶解并定容，经微孔滤膜（0.45um）滤过后供测定用。 （2）色谱分离条件 色谱柱：CLC－ODS，6mm×150mm，5um; 流动相：0.3％磷酸水溶液：甲醇（V:V）＝40:80，临用前用超声波脱气；流速：lml／min；柱温：40℃；检测波长：360nm；灵敏度：0.02AUFS；进样量：20ul。 （3）样品测定：准确吸取样品处理液和标准液各10ul，注入高液相色谱仪进行分离，以其标准溶液峰的保留时间定性，以其峰面积计算出样品中总黄酮的含量。4、结果计算 （二）分光光度法