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电子级过氧化氢项目介绍

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HPV过氧化氢蒸汽灭菌原理

HPV过氧化氢蒸汽灭菌原理 HPV技术简介 过氧化氢蒸汽(HPV)消毒技术正迅速成为制药、生物技术和医疗卫生行业生物净化方法的选择,对与高压锅相同的生物指示剂-嗜热脂肪芽孢杆菌达到6-log的杀灭率。在试运行或停工期间可采用广泛的消毒产品和服务对设施进行生物净化。 Bioquell采用专利的Clarus双循环技术合并PLC程控将灭菌循环的效果最佳化,当过氧化氢在房间或舱体的表面形成微冷凝时达到生物消毒,这个阶段可以在显微镜下看到一个肉眼不可见的亚微米级的过氧化氢薄层,科学研究证实这个低温、无残留的过程已经在蒸汽发生阶段开始杀灭微生物。微冷凝的形成确保形成了微生物杀灭的最佳条件,当达到凝露点时,减少一个对数级别(1-log)微生物的时间(D值)最短。从灭菌动力学曲线可以看到微生物的数量陡降,伴随着微冷凝的形成,生物指示剂数量曲线从舒缓变得急剧下降。 在某些产业一个生物性洁净的环境是非常重要的,Bioquell的HPV技术相比其他消毒方法具有明显的优点。传统的消毒方法和消毒剂如甲醛熏蒸不仅冗长而且也非常危险,甲醛已经被世界卫生组织分类作为对人类致癌的物质,甲醛消毒在房间中通常推荐12小时接触时间,接下来是一个漫长的排气和通风过程(大约 24小时)。相比之下,过氧化氢在房间的消毒循环可低至2小时,对于整个约8000m3的设施可以在短至24小时内完成。 Bioquell的过氧化氢蒸汽(HPV)消毒过程是快速、无残留和安全的,生成产物只有水和氧气。HPV相比其他消毒剂也具有广泛的材料适应性,意味着对建筑物造成损坏的风险更小, 可作为设施的固定装置和设备。 在生命科学和食品行业,HPV消毒过程是一个非常好的消毒方法,被主要监管机构所接受。如需要可提供一个完整的材料兼容性指南。对于影响生命科学、食品等行业的多种微生物,HPV消毒技术已经被证实具有广谱灭菌作用,如需要也可提供一个

汽化过氧化氢验证方案

C-0303 ZW-HP020型汽化过氧化氢灭菌传递窗验证报告 第二条验证目的与验证范围 2.1验证目的 通过DQ、IQ、QQ、PQ确认证明经汽化过氧化氢灭菌传递窗灭菌原料桶后的原料桶符合生产工艺及GMP(2010修订版)要求。 设计确认DQ:检查并确认设备设计与制造工艺符合产品标准,满足用户需求(URS)和GMP要求。 安装确认IQ:检查并确认该设备的安装符合设计要求,资料和文件符合GMP要求。 运行确认OQ;检查并确认该设备的运行符合设计技术参数的要求。 性能确认PQ:检查并确认该设备的运行符合生产工艺要求,其对原料桶灭菌应符合无菌生产工艺要求。 2.2验证范围 本报告适用于粉针车间生产线的汽化过氧化氢灭菌传递窗灭菌验证。 第三条验证性质 本次确认的主要内容是设计确认、安装确认、运行确认、性能确认等,本次验证为首次验证。 第四条设备概况 4.1设备概况 4.1.1传递窗是一种洁净室的辅助设备,主要用于洁净区与洁净区之间,洁净区与非洁净区之间物料的传递,以减少洁净室的开门次数,使洁净室的污染降低到最低程度。 4.1.2汽化过氧化氢灭菌,是利用过氧化氢在常温下气体状态比液体状态更具杀孢子能力的优点,经生成游离的氢氧基,用于进攻细胞成分,包括脂类、蛋白质和DNA组织,达到完全灭菌的要求。 汽化过氧化氢灭菌器(VHPS)是将浓度为30%或50%的H 2O 2 溶液(双氧水)通过汽化器 汽化成过氧化氢蒸汽,并通过管道输入到密闭空间内(灭菌柜)进行消毒灭菌的设备,其主要技术特点是: ·低温灭菌过程,可在4~80℃范围内进行灭菌; ·残留物最少,过氧化氢最终分解产物为水蒸气与氧气,没有毒副产品,是一种环保型灭菌技术,且不需要清洗; ·快速的灭菌循环过程,运行成本低,也容易验证;

过氧化氢酶

过氧化氢酶 过氧化氢酶,是催化过氧化氢分解成氧和水的酶,存在于细胞的过氧化物体内。过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志酶, 约占过氧化物酶体酶总量的40%。过氧化氢酶存在于所有已知的动物的各个组织中,特别在肝脏中以高浓度存在。过氧化氢酶在食品工业中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的过氧化氢。过氧化氢酶也被用于食品包装,防止食物被氧化。 触酶 过氧化氢酶(CAT)是一种酶类清除剂,又称为触酶,是以铁卟啉为辅基的结合酶。它可促使H2O2分解为分子氧和水,清除体内的过氧化氢,从而使细胞免于遭受H2O2的毒害,是生物防御体系的关键酶之一。CAT作用于过氧化氢的机理实质上是H2O2的歧化,必须有两个H2O2先后与CAT相遇且碰撞在活性中心上,才能发生反应。H2O2浓度越高,分解速度越快。 来源 几乎所有的生物机体都存在过氧化氢酶。其普遍存在于能呼吸的生物体内,主要存在于植物的叶绿体、线粒体、内质网、动物的肝和红细胞中,其酶促活性为机体提供了抗氧化防御机理。 CAT是红血素酶,不同的来源有不同的结构。在不同的组织中其活性水平高低不同。过氧化氢在肝脏中分解速度比在脑或心脏等器官快,就是因为肝中的CAT含量水平高。 过氧化氢酶历史 作为一种物质,过氧化氢酶是在1811年被过氧化氢(H2O2)的发现者泰纳尔(Louis Jacques Thénard)首次发现。1900年,Oscar Loew将这种能够降解过氧化氢的酶命名为“catalase”,即过氧化氢酶,并发现这种酶存在于许多植物和动物中。1937年,詹姆斯·B·萨姆纳将来自牛肝中的过氧化氢酶结晶,并在次年获得了该酶的分子量。1969年,牛的过氧化氢酶的氨基酸序列得以解出。而后,1981年,其三维结构得以解析。 功能 过氧化氢是一种代谢过程中产生的废物,它能够对机体造成损害。为了避免这种损害,过氧化氢必须被快速地转化为其他无害或毒性较小的物质。而过氧化氢酶就是常常被细胞用来催化过氧化氢分解的工具。 但过氧化氢酶真正的生物学重要性并不是如此简单:研究者发现基因工程改造后的过氧化氢酶缺失的小鼠依然为正常表现型,这就表明过氧化氢酶只是在一些特定条件下才对动物是必不可少的。 一些人群体内的过氧化氢酶水平非常低,但也不显示出明显的病理反应。这很有可能是因为正常哺乳动物细胞内主要的过氧化氢清除剂是过氧化物还原酶(peroxiredoxin),而不是过氧化氢酶。

VHP气化过氧化氢灭菌系统

VHP气化过氧化氢灭菌系统 ? 名称:气化过氧化氢灭菌机 低温灭菌工艺(4-80°C) 蒸熏完成,残留物很少(不需再次清洁) 蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) 对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等) VHP 工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) 环保(健康& 安全) 对高效过滤器穿透性好(玻璃纤维) 在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好灭菌所需时间短,节约成本(停机时间短) ?详细介绍 VHP Concept 概念 VHP=Vaporized Hydrogen Peroxide(H2O2) 气化过氧化氢(H2O2) 俗称双氧水 过氧化氢常态为液态 经过加热变成气态 VHP 历史沿革 ?1980年代末,美国Sterilse Co 首先发现气体过氧

化氢相对于液态过氧化氢,仅需较低浓度即可达到同样灭菌效果 ?1990年气化过氧化氢正式通过美国EPA核准,作为灭菌剂,并很快在各个工业领域运用。 VHP 灭菌原理 ? 过氧化氢因具有氧化还原作用而具有杀菌效果,特别对厌氧芽孢杆菌杀灭效果好 ? 过氧化氢的作用原理是通过复杂的化学反应解离具有高活性的羟基,破坏细胞膜。 VHP 液态和气态比较

?达到同样杀菌效果,液态的浓度是气态的300倍 ??芽孢耐热 ??在疏水性和亲水性表面的作用 VHP 技术特点 ? 低温灭菌工艺(4-80°C) ? 在蒸熏程序完成,残留物很少(不需再次清洁) ? 蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) ?对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等) ? VHP 工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) ? 环保(健康& 安全) ? 对高效过滤器HEPA 穿透性好(玻璃纤维) ? 在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生 物灭菌效果很好 ? 灭菌所需时间短 ? 节约成本(停机时间短) VHP 各类型灭菌方式比较

过氧化氢酶活力的测定实验报告

竭诚为您提供优质文档/双击可除过氧化氢酶活力的测定实验报告 篇一:实验35过氧化氢酶的活性测定 植物在逆境下或衰老时,由于体内活性氧代谢加强而使h2o2发生累积。h2o2可以直接或间接地氧化细胞内核酸,蛋白质等生物大分子,并使细胞膜遭受损害,从而加速细胞的衰老和解体。过氧化氢酶可以清除h2o2,是植物体内重要的酶促防御系统之一。因此,植物组织中h2o2含量和过氧化氢酶活性与植物的抗逆性密切相关。本实验用分光光度法测定过氧化氢含量,利用高锰酸钾滴定法和紫外吸收法测定过氧化氢酶活性。 一、过氧化氢含量的测定 【原理】 h2o2与硫酸钛(或氯化钛)生成过氧化物—钛复合物黄色沉淀,可被h2so4溶解后,在415nm波长下比色测定。在一定范围内,其颜色深浅与h2o2浓度呈线性关系。 【仪器和用具】 研钵;移液管0.2ml×2支,5ml×1支;容量瓶10ml×

7个,离心管5ml×8支;离心机;分光光度计。 【试剂】 100μmol/Lh2o2丙酮试剂:取30%分析纯h2o257μl,溶于100ml,再稀释100倍;2mol/L硫酸;5%(w/V)硫酸钛;丙酮;浓氨水。【方法】 1.制作标准曲线:取10ml离心管7支,顺序编号,并按表40-1加入试剂。 待沉淀完全溶解后,将其小心转入10ml容量瓶中,并用蒸馏水少量多次冲洗离心管,将洗涤液合并后定容至10ml 刻度,415nm波长下比色。 2.样品提取和测定:(1)称取新鲜植物组织2~5g(视h2o2含量多少而定),按材料与提取剂1∶1的比例加入4℃下预冷的丙酮和少许石英砂研磨成匀浆后,转入离心管 3000r/min下离心10min,弃去残渣,上清液即为样品提取液。(2)用移液管吸取样品提取液1ml,按表35-1加入5%硫酸钛和浓氨水,待沉淀形成后3000rpm/min离心10min,弃去上清液。沉淀用丙酮反复洗涤3~5次,直到去除植物色素。(3)向洗涤后的沉淀中加入2mol硫酸5ml,待完全溶解后,与标准曲线同样的方法定容并比色。3.结果计算:植物组织中h2o2含量(μmol/gFw)= 式中c—标准曲线上查得样品中h2o2浓度(μmol);Vt —样品提取液总体积(ml);V1—测定时用样品提取液体积

过氧化氢纳米雾(超干雾)用于GMP车间空间灭菌效果研究

过氧化氢纳米雾(超干雾) 用于GMP车间空间灭菌效果研究 张超张杰刘万忠 (湖北荷普药业股份有限公司) (地址武汉市东西湖区金银湖南四街2号,邮编430000) 制药厂生产洁净区消毒是药品生产质量保证的一个重要生产环节,为了保证产品质量免受生产过程中微生物污染,必须每天每批时刻进行消毒。尽管如此,但是环境空间的微生物是比较难控制的。看似简单的消毒过程,要达到相关消毒要求,选择合适的消毒方式尤为重要。空间消毒比较普遍使用的是甲醛熏蒸,甲醛的杀菌能力不容置疑,但是随着科学技术的发展,越来越不被认证专家认可,而且甲醛是一级致癌物质,国内有些大型企业不惜重金购置了比较先进的VHP,即是汽化过氧化氢。过氧化氢容易验证,广泛被欧盟认可,我国的GMP 要与欧盟接轨,过氧化氢自然成为了大势所趋。据市场反应,VHP采用高浓度的过氧化氢,当冷凝薄雾时很容易对彩钢板造成腐蚀、使用久了出现墙壁起泡等缺点。 为了克服上述缺点,湖北荷普药业股份有限公司利用喷雾干燥和文丘里(Venturi)原理,研制出全球首台过氧化氢纳米雾发生器,这种设备可将过氧化氢消毒剂雾化并干燥至1μm以下的小颗粒,这种干燥的小颗粒消毒剂能够长时间悬浮在空气中作无规则的布朗运动,从而保证了消毒剂与空气中的细菌充分接触而达到消毒灭菌的目的。是目前用于可密闭空间(如GMP车间、医院病房、实验动物中心、小型仓库等)和各种人造设备(如隔离器、冷冻干燥机、孵化箱、传递窗、生物安全柜、高压蒸汽灭菌锅、过滤器和各类风管及管道等)理想的消毒灭菌工具。 为了验证该设备对GMP车间的消毒灭菌效果,我们选用了荷普威?活性过氧化氢消毒剂(专用杀孢子 剂)和荷普威?活性氧免洗消毒液(杀孢子型,过氧化氢浓度1.5%)进行试验,结果如下。 1.试剂与仪器 1.1 生物指示剂(嗜热脂肪芽孢杆菌孢子,孢子量106),含配套化学指示剂和TSB液体培养基(北京金 四环科技有限责任公司生产), 1.2 荷普威?活性过氧化氢消毒剂(专用杀孢子剂,过氧化氢浓度6%)(湖北荷普药业股份有限公司 生产) 1.3 荷普威?活性氧免洗消毒液(杀孢子型,过氧化氢浓度1.5%)(湖北荷普药业股份有限公司生产) 1.4 GY-02型过氧化氢气体浓度探测器。

VHP气化过氧化氢灭菌系统

?VHP气化过氧化氢灭菌系统 名称:气化过氧化氢灭菌机 低温灭菌工艺(4-80°C) 蒸熏完成,残留物很少(不需再次清洁) 蒸熏后无有毒副产品 (健康 & 安全) 对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等) VHP 工艺十分容易验证 (符合法规要求, 工艺控制) 环保 (健康 & 安全) 对高效过滤器穿透性好 (玻璃纤维) 在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好灭菌所需时间短 ,节约成本 (停机时间短) 详细介绍

VHP Concept 概念 VHP=Vaporized Hydrogen Peroxide(H2O2) 气化过氧化氢(H2O2) 俗称双氧水 过氧化氢常态为液态 经过加热变成气态 VHP 历史沿革 ?1980年代末,美国Sterilse Co 首先发现气体过氧化氢相对于液态过氧化氢,仅需较低浓度即可达到同样灭菌效果 ?1990年气化过氧化氢正式通过美国EPA核准,作 为灭菌剂,并很快在各个工业领域运用。 VHP 灭菌原理 ?过氧化氢因具有氧化还原作用而具有杀菌效果,特别对厌氧芽孢杆菌杀灭效果好 ?过氧化氢的作用原理是通过复杂的化学反应解离具有高活性的羟基,破坏细胞膜。

VHP 液态和气态比较 ?达到同样杀菌效果,液态的浓度是气态的300倍?芽孢耐热 ?在疏水性和亲水性表面的作用 VHP 技术特点

?低温灭菌工艺(4-80°C) ?在蒸熏程序完成,残留物很少(不需再次清洁) ?蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) ?对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等)? VHP 工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) ?环保(健康& 安全) ?对高效过滤器HEPA 穿透性好(玻璃纤维) ?在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好 ?灭菌所需时间短 ?节约成本(停机时间短) VHP 各类型灭菌方式比较 VHP 各类型灭菌方式比较-甲醛使用现状Formaldehyde Issues and concerns 关于甲醛的争论和忧虑

VHP气化过氧化氢灭菌系统方案

VHP气化过氧化氢灭菌系统 名称:气化过氧化氢灭菌机 低温灭菌工艺(4-80°C) 蒸熏完成,残留物很少(不需再次清洁) 蒸熏后无有毒副产品 (健康 & 安全) 对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等) VHP 工艺十分容易验证 (符合法规要求, 工艺控制) 环保 (健康 & 安全) 对高效过滤器穿透性好 (玻璃纤维) 在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好灭菌所需时间短 ,节约成本 (停机时间短) 详细介绍 VHP Concept 概念 VHP=Vaporized Hydrogen Peroxide(H2O2) 气化过氧化氢(H2O2) 俗称双氧水 过氧化氢常态为液态 经过加热变成气态 VHP 历史沿革 ?1980年代末,美国Sterilse Co 首先发现气体过氧 化氢相对于液态过氧化氢,仅需较低浓度即可达到 同样灭菌效果 ?1990年气化过氧化氢正式通过美国EPA核准,作

为灭菌剂,并很快在各个工业领域运用。 VHP 灭菌原理 ?过氧化氢因具有氧化还原作用而具有杀菌效果,特别对厌氧芽孢杆菌杀灭效果好 ?过氧化氢的作用原理是通过复杂的化学反应解离具有高活性的羟基,破坏细胞膜。 VHP 液态和气态比较 ?达到同样杀菌效果,液态的浓度是气态的300倍

?芽孢耐热 ?在疏水性和亲水性表面的作用 VHP 技术特点 ?低温灭菌工艺(4-80°C) ?在蒸熏程序完成,残留物很少(不需再次清洁) ?蒸熏后无有毒副产品(健康& 安全) ?对于其他物品无影响(装置,电器,洁净室墙板等)? VHP 工艺十分容易验证(符合法规要求, 工艺控制) ?环保(健康& 安全) ?对高效过滤器HEPA 穿透性好(玻璃纤维) ?在低气体浓度(1-2mg/l = 1000ppm)下对大多数的微生物灭菌效果很好 ?灭菌所需时间短 ?节约成本(停机时间短) VHP 各类型灭菌方式比较 VHP 各类型灭菌方式比较-甲醛使用现状 Formaldehyde Issues and concerns 关于甲醛的争论和忧虑 ?气体是由甲醛溶液或福马林加热形成 ?作用慢,需要长蒸熏时间 ?结晶状残留物 ?未有出版物证明灭菌前后的效果有效 ?十分难验证灭菌程序 ?蒸熏时人员必须撤离(停机时间长) ?剧毒且被归类为‘Class A’ 致癌和导致细

汽化过氧化氢与过氧化氢干雾对比

A Head-to-Head Comparison of Hydrogen Peroxide Vapor and Aerosol Room Decontamination Systems 汽化过氧化氢与干雾灭菌系统比较 T. Holmdahl, MD,1 P. Lanbeck, MD, PhD,1 M. Wullt, MD, PhD,1 and M. H. Walder, MD, PhD2 1. Infectious Diseases Unit, Department of Clinical Sciences, Lund University, Malm?, Sweden 瑞典伦德大学临床科学系传染疾病组 2. Medical Microbiology, Department of Laboratory Medicine, Lund University, Sk?ne University Hospital SUS, Malm?, Sweden 瑞典伦德大学医学检验系微生物医学组,瑞典马尔默斯堪大学医院 Address correspondence to M. H. Walder, MD, PhD, Klinisk Mikrobiologi Malm?, Laboratoriemedicin Sk?ne, SE-20502 Malm?, Sweden (mats.walder@med.lu.se). New technologies have emerged in recent years for the disinfection of hospital rooms and equipment that may not be disinfected adequately using conventional methods. There are several hydrogen peroxide–based area decontamination technologies on the market, but no head-to-head studies have been performed.Objective. 研究目的:最近几年,一些新兴技术被用来对医院的房间和传统灭菌方法无法充分灭菌的设备进行灭菌。市场上有几种基于过氧化的区域灭菌技术,但尚没有任何研究来对这些技术进行一一对比。 We conducted a head-to-head in vitro comparison of a hydrogen peroxide vapor (HYDROGEN PEROXIDE VAPOUR) system and an aerosolized hydrogen peroxide (aHP) system. 研究设计:因此,我们对汽化过氧化氢技术(HYDROGEN PEROXIDE VAPOUR)和过氧化氢干雾扩散技术(aHP)进行了一一对比. The tests were conducted in a purpose-built 136-m3 test room. 场地:特意建造一个136立方米试验间进行试验 One HYDROGEN PEROXIDE VAPOUR generator and 2 aHP machines were used, following recommendations of the manufacturers. Three repeated tests were performed for each system. The microbiological efficacy of the 2 systems was tested using 6-log Tyvek-pouched Methods. Geobacillus stearothermophilus biological indicators (BIs). The indicators were placed at 20 locations in the first test and 14 locations in the subsequent 2 tests for each system. 测试方法:根据厂商建议,试验中使用一台过氧化氢发生器和2台过氧化氢干雾扩散器。每种技术重复实验三次。用特卫强包装的6-log 嗜热脂肪芽孢杆菌生物指示剂来检验对于微生物的效力。第一轮测试中,生物指示剂(BIs)放置在20个位置;随后的两轮测试均放置于14个位置。

过氧化氢酶

过氧化氢酶在不同条件下的分解 1、摘要 通过本次实验来探究在各类植物中所含的过氧化氢酶。在试验中通过过氧化氢与四种不同的蔬菜然后用排水集氧气法观察实验现象。实验结果发现马铃薯的效果最好,每一种蔬菜都有不同含量的过氧化氢酶,而这些蔬菜取材都非常的方便,这也就为以后做实验的效率变得更加高。 关键词:过氧化氢酶蔬菜氧气 Summary: Through this experiment to explore the various types of plants containing catalase. In the experiment, four kinds of vegetables were treated by hydrogen peroxide, and then the experimental phenomena were observed by the method of draining oxygen. The experimental results showed that the best effect of potato, each kind of vegetables have different content of catalase, and these vegetables are very convenient, which will be more efficient in the future to do the experiment. Key world: CAT Vegetable Oxygen 1.2 实验背景 1.2.1 什么是过氧化氢酶? 过氧化氢酶(CAT),是催化过氧化氢分解成氧和水的酶,存在于细胞的过氧化物体内。过氧化氢酶是过氧化物酶体的标志酶, 约占过氧化物酶体酶总量的40%。过氧化氢酶存在于所有已知的动物的各个组织中,特别在肝脏中以高浓度存在。过氧化氢酶在食品工业中被用于除去用于制造奶酪的牛奶中的过氧化氢。过氧化氢酶也被用于食品包装,防止食物被氧化。① 1.2.2测定植物过氧化氢酶的生物学意义是? 过氧化氢酶大量分布于动植物细胞内,属于活性氧清除剂,可分解机体代谢过程中产生的活性氧如过氧化氢,超氧阴离子等,这些物质可对机体尤其是质膜产生毒害作用,测定这种酶的活力可以评价机体受活性氧毒害程度.过氧化氢酶的活性与植物的代谢强度及抗寒、抗病能力均有关系,可以根据这种酶的活性水平判断植物是否受到氧化损伤(比较某种因素或者复合因素作用下与正常状态下的酶活水平)。② 2、材料与方法 2.1实验对象 马铃薯、菠菜、苹果、青菜 2.2实验器材 锥形瓶、试管、塑料水槽、电子天平、称量纸、导管、量筒、剪刀、研钵、

过氧化氢酶活力的测定

实验三过氧化氢酶活性得测定 一、实验目得: 了解过氧化氢酶得作用,掌握碘量法测定过氧化氢酶活性得原理与方法; 二、实验原理: 过氧化氢酶就是一类色素蛋白,含有铁,它能催化过氧化氢分解为水与分子氧,在此过程中起传递电子得作用,过氧化氢既就是氧化剂又就是还原剂。 R(Fe+2)2+H2O2---R(Fe+3OH)2 R(Fe+3OH)2+ H2O2 ----R(Fe+2)2+2H2O+O2 并合上式:H2O2 ----2H2O+O2 据此,可根据消耗H2O2得消耗量或O2得生成量测定该酶活力大小。在反应系统中加入一定量得过氧化氢溶液,经酶促反应后,加入过量得KI溶液生成得I2用标准得Na2S2O3滴定,根据N a2SO3消耗得体积计算H2O2得消耗量。 三、实验材料、仪器与试剂: 1、实验材料:小白菜 2、仪器:恒温水浴锅、研钵、容量瓶、刻度吸管、100mL三角瓶 3、试剂: (1)0、05mol/L H2O2 (2)2mol/LH2SO4 (3)0、1mol/L Na2S2O3 (4)1%淀粉溶液(5)10%(NH4)6Mo7O24 (6)pH7、8得磷酸缓冲液(7)20% KI (8)CaCO3 四、实验步骤: (1)酶液提取: 称取2.5g白菜叶,加少量CaCO3,2mLpH7、8得缓冲液少量,研成匀浆,移入100ml 容量瓶,用上述缓冲液冲洗研钵数次转入容量瓶中定容,静置10分钟,过滤。取滤液10mL于另一100mL得容量瓶中稀释定容待测(根据酶活高低而定)。 (2)酶促反应: 取锥形瓶4个,编好号各加入10ml酶液之后,立即向两个瓶中加入2mol/L H2SO45mL,终止酶活性,作空白对照。向另外两瓶各加H2O25mL,摇匀,在加入H2O2得那一刻起,记录时间,5分钟后迅速向实验瓶中加入2mol/LH2SO45mL,终止酶活性。向三角瓶中加1mL 20% KI与3滴(NH4)6Mo7O24,摇匀后迅速用标准Na2S2O3溶液进行滴定至淡黄色,加入1mL1%淀粉指试剂,蓝色恰好消失,记录消耗得Na2S2O3得体积V0,V;

过氧化氢容器和输送系统

本发明公开了一种用于具有过氧化氢注射单元和外壳的消毒器的过氧化氢输送系统,该系统包括用于支撑过氧化氢溶液容器的支架、用于从容器中抽取所述过氧化氢溶液的排水装置和用于向所述过氧化氢注射单元提供所吸入的过氧化氢溶液的输送装置。所述排水装置包括用于穿透密封的针。在容器上并延伸到容器中的过氧化氢溶液中。针头驱动将针头从静止位置移动,其中针头被收回以允许将新的过氧化氢容器插入摇篮,进入穿透位置,针头穿透容器的密封,并一直延伸到容器的底部,以确保过氧化氢溶液完全从容器中排出。 技术领域 [002] 本发明一般涉及灭菌设备。更具体地,本发明涉及在真空下使用气态过氧化氢的灭菌设备的过氧化氢输送系统。 发明背景 [0003] 灭菌是对任何病毒、细菌、真菌或其他微生物的破坏,无论是在营养状态还是在休眠孢子状态,其定义是细菌水平降低10-6。医疗器械的常规无菌处理程序涉及高温(如蒸汽和干热单位)或化学品(如环氧乙烷气体、过氧化氢或臭氧)。 [0004] 使用气体消毒剂的灭菌方法和装置是众所周知的。使用过氧化氢作为消毒剂的杀菌剂被广泛使用。过氧化氢通常作为水溶液供应,并在注射到消毒器的灭菌室之前蒸发,通过加热溶液,或者通过向灭菌室施加真空,或两者兼而有之。溶液蒸发后,灭菌室的灭菌气体包括水蒸气和过氧化氢气体。在灭菌过程中,水蒸气倾向于在腔室中的物品上冷凝,这是一个缺点。在待消毒物品上产生的水冷凝液干扰了水的消毒作用。 [0005] 使用含臭氧气体作为灭菌剂的消毒器也是众所周知的。臭氧气体一般是在灭菌室外部产生的,并在真空下供应到灭菌室,以增加灭菌物品上限制空间的渗透。为了提高臭氧气

体的灭菌效果,在注入臭氧之前,通常先用水对灭菌气氛进行加湿。气体进入灭菌室,所需臭氧气体量相对较高(85 mg/l),杀菌周期较长,使臭氧灭菌工艺相对昂贵。 [0006] 使用了过氧化氢气体和臭氧气体的灭菌工艺,但效果不令人满意,特别是在内部流明较长的物品的灭菌方面,例如胃镜和结肠镜,以及循环时间和灭菌费用方面。虽然臭氧消毒工艺对长流明物品的灭菌是令人满意的,但材料相容性是一个问题 [0007] 因此,需要一种方法和设备,以解决使用气体消毒剂的已知灭菌过程的至少一个缺点。 发明内容 [0008] 本公开的目的是提供一种系统,以消除或减轻以前的灭菌输送系统的至少一个缺点。[0009] 在一方面,本发明提供了一种用于具有过氧化氢注射单元和外壳的消毒器的过氧化氢输送系统,该系统包括用于支持壳体内密封的过氧化氢溶液容器的支架、连接于支架的用于从容器中吸出过氧化氢溶液的排水装置,以及与排水装置连接的用于供应吸入的过氧化氢溶液的输送装置。过氧化氢溶液注入装置。 [0010] 在另一个方面,所述排水装置包括与输送装置相连的排水针,用于穿透容器上的密封并延伸到容器中的过氧化氢溶液中,以及用于将针头从静止位置移动的针头驱动装置,其中将针头收回以允许插入新的针。过氧化氢容器进入摇篮,进入穿透位置,针头穿透容器的密封并延伸到容器中的过氧化氢溶液。优选地,针在穿透位置一直延伸到容器的底部。最优选的是,针传动是往复的。 [0011] 在另一个方面,本发明提供了一种过氧化氢输送系统,其中,所述容器包括用于支持处于壳体内直立位置的过氧化氢溶液容器的支架。优选地,针头驱动是往复式的,用于将针头从静止位置移动,其中针头被收回以允许在支架中插入新的过氧化氢容器,到针穿透容器的密封并延伸到容器中的过氧化氢溶液的穿透位置,针头一直延伸到穿透位置的容器的底部。 [0012] 在进一步方面,本发明的输送系统使用具有锥形底部的过氧化氢溶液容器,其中容器的锥形底部以排水针的轴线为中心,用于使针尖与底部的最低点对齐。 [0013] 在另一个方面,本发明提供了一种密封的过氧化氢溶液容器,该容器包括顶部的空心体,包括密封的填充和排水口、侧壁和锥形底部、用于在插入到摇篮之前将容器保持在平面水平表面上的直立位置的支架和用于连接支架与本体的连接装置。容器底部是锥形的,以确保任何残留的过氧化氢溶液聚集在底部的最低点。优选地,所述支架安装在所述空心体上。更优选地,所述容器包括在所述身体的侧壁中的外部凹槽,所述支架为杯形,且具有径向内延伸的标签,用于与所述凹槽接合,以提供所述支架与所述身体的快速配合连接。最优选的是,凹槽是圆周延伸的连续槽,所述支架包括用于连接所述凹槽的至少两个垫片。[0014] 本公开的其他方面和特征将在结合附图审查以下对具体实施例的描述时,对本领域通常熟练的人来说变得明显。 图纸简介 [0015] 本公开的灭菌器、方法和交付系统的实施例现在将仅以参考附图的方式加以说明,其中: [0016] 图1显示根据本公开的设备的示意图,该装置的图示部分列在表III中; [0017] 图2显示了根据本披露的过氧化氢输送系统的示意图,该系统的图示部分列于表三;[0018] 图3是一种优选的灭菌方法的流程图; [0019] 图4是说明第一个消毒周期的图表; [0020] 图5是说明第二个消毒周期的图表; [0021] 图6是说明第三个消毒周期的图表; [0022] 图7示出根据本发明的过氧化氢供应单元的示范性实施例;

过氧化氢酶CAT试剂盒说明书

过氧化氢酶C A T试剂 盒说明书 集团文件版本号:(M928-T898-M248-WU2669-I2896-DQ586-M1988)

过氧化氢酶(CAT)试剂盒说明书 一、测定原理: 过氧化氢酶(CAT)分解H2O2的反应可通过加入钼酸铵而迅速中止,剩余的H2O2与钼酸铵作用产生一种淡黄色的络合物,在405nm处测定其变化量,可计算出CAT的活力。试剂一(ml) 二、试剂组成与配制: 试剂一:液体100 ml×1瓶,4℃保存6个月。 试剂二:底物液体10 ml×1瓶,4℃保存6个月。 试剂三:显色粉剂×1瓶,4℃保存6个月。加双蒸水至100 ml溶解,4℃保存1个月。(如果底部有不溶粉末沉淀,直接取上清使用,不影响测定结果) 试剂四:液体10 ml×1瓶,4℃保存6个月。天冷时会凝固,临用前37℃水浴至透明方可使用。 三、组织样本的检测 1、组织匀浆液的制备:准确称取组织重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例加入9倍体积的生理盐水,冰水浴条件下,制备成10%的组织匀浆,2500转/分离心10分钟,取上清,再用生理盐水稀释成最佳取样浓度,待测(最佳取样浓度摸索减附录)。 2、操作表:

混匀,波长405nm ,光径0.5cm ,双蒸水调零,测定各管吸光度值。 注:一般样本没有高脂等导致显着差异情况,对照管的样本更换成双蒸 水,做1-2管对照即可。如需做样本自身对照,则试剂盒所测定样本数 量减至48样。 3.组织中CAT 活力的计算: (1)定义:每毫克组织蛋白每秒种分解1umol 的H2O2的量为一个活力单 位。 (2)计算公式: )ml /mgprot (601271)OD -OD ()mgprot /U (CAT *待测样本蛋白浓度取样量 值测定值对照活力组织匀浆中 ÷???=注:*271为斜率的倒数 (3)计算举例: 取10%水稻叶片匀浆0.05ml 做CAT 检测,测得对照管吸光度为0.605, 测定管吸光度为0.332,同时测得10%水稻叶片匀浆蛋白浓度为3.1303 mgprot/ml 。则计算结果为: ()/mgprot U 7351.101303.305 .0601271332.0704.0)mgprot /U (CAT =÷???-=活力组织匀浆中注:1.测定血清和血浆时,如果样本不溶血,每批样本只需要随机挑2

过氧化氢酶及过氧化物酶的作用

生物化学实验指导 一、内容简介 生物化学是一门课堂理论与实验技术相结合的专业基础课。实验主要以生物大分子制备的一般过程以及电泳和层析等生物化学技术为主,采用经典和现代分析技术相结合的实验方法和手段进行设计,实验内容既包含生物化学研究技术的基本方法,又反映生物化学研究技术的发展水平。 开设实验为30学时,共有13 个实验可供选择,其中验证性实验4个,综合设计实验9个。由三部分所组成: 1.酶的性质及活力测定等; 2.蛋白质的分离、纯化、鉴定及含量测定; 3.DNA的提取、分离及含量测定 二、实验教学目标与基本要求 通过本课程学习,使学生掌握常用的生物化学分析与制备技术,理解其基础理论,从而使学生增强对生物化学理论的感性认识,掌握有关生物科学研究的基本技术,并提高学生的动手能力。 四、实验内容 实验1 脂肪含量及其碘值的测定 (一)、脂肪的定量测定 原理

脂肪类化合物一般都溶于有机溶剂(如乙醚、石油醚)而不溶于水或微溶于水,利用此特性,可以用索氏脂肪提取器抽提出样品中的脂肪。索氏脂肪提取器索氏(Soxhlet)脂肪提取器为一回馏装置,由浸提管,小烧瓶及冷凝管三者联接而成,浸提管两侧分别有虹吸管及通气管。盛有样品的滤纸包放在浸提管内,溶剂乙醚(或石油醚)盛于小烧瓶中,加热后,溶剂蒸汽经通气管至冷凝管,冷凝的溶剂滴入浸提管,浸提样品。浸提管内溶剂愈积愈多,当液面达到一定高度,溶剂及溶于溶剂中脂肪类物质经虹吸管流入小烧瓶。 小烧瓶的溶剂由于受热而汽化,气体至冷凝管而滴入浸提管内,如此反复提取回馏,将样品中脂肪类物质提尽并带到小烧瓶中。最后将小烧瓶中的溶剂蒸去,烘干,小烧瓶的增重,就是样品中所含脂肪的量。 因本法提取的物质,除中性脂肪外,还会有游离脂肪酸、蜡、磷脂、固醇及色素等脂溶性物质,固提出的物质只能称粗脂肪。 器材与试剂 器材:天平,索氏脂肪提取管,恒温水浴锅,滤纸。试剂:乙醚(不含有过氧化物,乙醇及水分)沸点36℃。 去过氧化物的处理:将乙醚装入分液漏斗,加入乙醚量1/5的10%硫酸亚铁(100克硫酸亚铁溶于600ml 水中,再加30ml浓硫酸酸化,并稀释至1000ml),充分混合后,澄清分层,放出水液。 过氧化物鉴定法:6ml乙醚于试管中,加 2ml10%碘化钾溶液,猛烈混合,放置1分钟,下层碘化钾呈黄色,即表示有过氧化物存在。 去乙醇的处理:加乙醚量1/5的10%氢氧化钾溶液洗涤,洗后放出水溶液,重复2-3次。去水分的处理:在乙醚瓶中加入适量细粒无水氯化钙,放置一昼夜,时加摇荡,将上层清液移入蒸馏瓶蒸馏。 方法与步骤 1.将洗净的索氏提取器小烧瓶用铅笔在磨口处编号,103-105℃烘2小时至恒重,冷却后准确称重,并记录瓶重。 2.用分析天平称取干样(需研碎过40目筛孔)约2克,用滤纸包好,放入浸提管内,纸包长度不能超过虹吸管高度。 3.于已称重的小烧瓶内倒入1/2-1/3体积的无水乙醚(其量应略大于浸提管内体积),联接索氏提取器各部分(不能涂凡士林)。置约70℃恒温水浴锅内(水必须是蒸馏水或置于电热板上)控制加热温度,使每小时回馏3-5次较宜,一般提取10小时左右。 4.提取完毕,待乙醚完全流入小烧瓶时取滤纸包,再回馏一次以洗涤浸提管。继续加热,待浸提管内乙醚面接近虹吸管上端而末流小烧瓶前,倒出浸提管中的乙醚,如果小烧瓶中尚留乙醚,则继续加热蒸发,直至小烧瓶中溶剂基本蒸完。停止加热,取下小烧瓶,用吹风机在通风橱中将瓶中残留乙醚吹尽。再置103-105℃烘箱中烘半小时,取出冷却后立即称重。 5.计算:粗脂肪含量(%)=提取瓶的增重(g)/样品重量(g)×100 注意事项乙醚为易燃品,切忌明火加热,同时要注意提取器各联接处有否漏气以及冷凝管效果是否良好,以免大量乙醚气外逸,使人麻醉。 (二)、碘值的测定 [原理] 脂肪中的不饱和脂肪酸碳链上有不饱和键,可以吸收卤素(Cl2、Br2或I2)。不饱和键数目越多,吸收的卤素量也越多。每100克脂肪,在一定条件下,所吸收的碘的克数,设为该脂肪的碘值,即碘值愈高,不饱和脂肪酸的含量愈高。 碘值是检定和鉴别油脂的一个重要常数,可以用来推算油、脂的定量组成。由于碘和脂肪的加成作用很慢,本实验采用汉诺斯(Hanus)溶液,它由碘与溴相混合产生IBr,溴化碘更易与脂肪起加成作用,该溶液中加入冰醋酸,可使溶液更加稳定,反应过程如下:

过氧化氢纳米雾(超干雾)发生器用于传递窗灭菌效果的研究

过氧化氢纳米雾(超干雾)发生器用于传递窗灭菌效果的研究 刘标兵 张超 刘万忠 (湖北荷普药业股份有限公司) (地址 武汉市东西湖区金银湖南四街2号,邮编430000) 传递窗是GMP车间一种重要的辅助设备,主要用于洁净区与洁净区之间、洁净区与非洁净区之间物 体的传递,以减少洁净室的开门次数,把对洁净室的污染降低到最低程度。传统的传递窗一般采用紫外 线进行灭菌,很难达到灭菌要求。随着新版GMP(2010版)的颁布和实施,我国制药行业对无菌生产的要求 不断提升,对传递窗的灭菌要求也不断提高,为此,有些企业不惜花重金购置比较先进的VHP设备,即是 汽化过氧化氢设备。而现有的VHP设备不仅价格很高,而且还需要使用高浓度汽化过氧化氢,这对被传递 的物体具有较大的腐蚀性,使用起来也非常危险。 为了解决传递窗的灭菌问题,降低灭菌成本,湖北荷普药业股份有限公司利用喷雾干燥和文丘里(Venturi)原理,研制出全球首台过氧化氢纳米雾发生器,这种设备可将过氧化氢消毒剂雾化并干燥至1μm 以下的小颗粒,这种干燥的小颗粒消毒剂能够长时间悬浮在空气中作无规则的布朗运动,从而保证了消毒剂与空气中的微生物充分接触而达到消毒灭菌的目的。是目前用于可密闭空间(如GMP车间、医院病房、实验动物中心、小型仓库等)和各种人造设备(如隔离器、冷冻干燥机、孵化箱、传递窗、生物安全柜、高压蒸汽灭菌锅、过滤器和各类风管及管道等)理想的消毒灭菌工具。 为了验证该设备对真空冷传递窗的消毒灭菌效果,我们选用了荷普威?活性氧消毒剂(含1.5%活性过 氧化氢)进行试验,结果如下。 1.试剂与仪器 1.1 生物指示剂(嗜热脂肪芽孢杆菌孢子,孢子量106),含配套化学指示剂和TSB液体培养基(北京金 四环科技有限责任公司生产), 1.2 荷普威?活性氧消毒剂(含1.5%活性过氧化氢)(湖北荷普药业股份有限公司生产) 1.3 GY-02型过氧化氢气体浓度探测器。 1.4 NMW-1型纳米雾TM(超干雾)消毒灭菌仪(湖北荷普药业股份有限公司生产,地址 武汉市东西 湖区金银湖南四街2号) 1.5试验传递窗 长宽高分别为0.8m×1.0m ×0. 8m,体积为0.64 m3。。 1

简要介绍过氧化氢酶

简要介绍过氧化氢酶(CAT)的基本性质,根据你对文献的查阅,CAT的活性变化可指示哪种污染物的存在?如何指示? 过氧化氢酶简述 动植物和微生物细胞内的过氧化氢酶可催化过氧化氢分解为水和分子氧 重金属污染具有范围广, 持续时间长, 不易在生物物质循环和能量交换中分解, 而且能沿食物链转移等特点, 对水生生物和人体产生严重的危害作用。因此, 沿海底质中的重金属已经成为海洋环境监测中的重要污染物[1- 3]。生物体受到重金属污染物刺激后, 产生大量的活性氧(O2- ) 物质, 造成生物体的氧化损伤如酶蛋白失活、DNA 断裂等[4- 6]。过氧化氢酶(CAT) 是生物体主要抗氧化酶之一, 其主要功能是清除活性氧自由基[6, 7] 近年来,石油、重金属对海洋污染日趋严重[1 ,2 ] ,对近岸海域生物资源及水产养殖生态系统造成威胁. 国内外关于海洋污染对鱼类生理生化过程的影响已有文献报道[3 ,4 ] ,但石油、重金属对贝类抗氧化防御系统影响的研究尚未见报道. 研究表明,许多污染物具有氧化还原循环活性, 可参与生物体内的氧化还原循环, 产生大量的活性氧, 从而导致机体内DNA 断裂、脂质过氧化、酶失活等一系列氧化应激[5 ,6 ] .抗氧化防御系统的一个重要特征是其活性成分或含量可由于污染的胁迫而发生改变. 因而,可间接反映环境中氧化污染的存在,可作为环境污染胁迫的指标[5 ] . 本文以海洋贝类毛蚶为材料,采用体内、体外染毒实验,探讨以CAT活性变化作为氧化污染生化指标的可能性,并为抗氧化防御系统的毒理学研究提供基础资料. 生物体内许多酶促反应和非酶促反应都能产生H2O2 , 它是有毒害作用的活性氧的前体。过氧化氢酶(简称Cat) 可非常有效地催化H2O2 的分解,使其失去活性氧的作用,保护机体。因此在环境监测、生态毒理学等方面,Cat 作为一项重要指标得到广泛应用[1 ,2 ] 。Rainbow 1992 年研究指出, 海洋软体动物种类繁多, 它们对重金属的积累是非常普遍的, 但有关重金属对其Cat 活性的影响未见报道。本文以扁玉螺Nevertia diyma (Roding) 为试验材料,研究了铁、锌、铜等生物必需微量元素及非必需元素铅对Cat 的影响,旨在从生理角度探讨软体动物对重金属积累的意义。 过氧化氢酶( Hydrogen peroxidase ) 又称触酶(Catalase ,CA T) ,是一类广泛存在于动物、植物和微生物体内的末端氧化酶,是以过氧化氢为底物,通过催化一对电子的转移而最终将其分解为水和氧气。该酶是在生物演化过程中建立起来的生物防御系统的关键酶之一,并在食品、医药、纺织、造纸、环保等行业具有重要的应用[1 ,2 ] 。 过氧化氢酶(catalase,简称Cat)是一种广泛存在于动植物及好氧微生物中的氧化还原酶,它的主要作用是催化H2O2 分解为H2O 和O2-,使得H2O2 不至于与O2- 在铁螯合物作用下反应生成非常有害的·OH,即可减少自由基和过氧化脂质的形成,能对机体起重要的保护作用。已有从动物肝和血、细菌等提纯过氧化氢酶[1~5],从海洋软体动物贻贝中提取过氧化氢酶也有报道[6],这些不同来源的

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