萎胃康颗粒剂对大鼠实验性慢性萎缩性胃炎的作用研究

【】目的探讨萎胃康颗粒治疗大鼠实验性慢性萎缩性胃炎CAG时对胃黏膜G细胞和D细胞的调节作用及机制。方法采用多重刺激复制大鼠CAG模型,应用大、小剂量萎胃康颗粒进行治疗,并以三九胃泰作为阳性对照药物,应用计算机图象自动分析系统分析给药前后各组胃黏膜G细胞、D细胞的数量和平均光密度变化。结果萎缩性胃炎模型大鼠G细胞和D细胞数量和平均光密度明显减少P0.01，给药结束后萎胃康颗粒组G、D细胞数量均明显增多P0.01。结论萎胃康颗粒具有改善胃肠激素对胃功能的调节作用而发挥治疗作用。 【关键词】萎胃康颗粒;慢性萎缩性胃炎;胃黏膜;G细胞;D细胞 【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheregulatingeffectsandmechanismsonGcellandDcellofstomachmucousmembraneinexperimentalratssufferingfromchronicatrophicgastritisCAG,withtheuseofWeiweikangWWKgranulethodsAdaptmultistimulationtoduplicateratCAGmodelandtreatwithlargeorsmalldosesofWWKgranule,withSanjiuweitaiSJWTasthepositivecontrastmedicine,applyingcomputerphotoautoanalysissystemtoanalyzethenumberandlightdensitychangeofGcellandDcellindifferentgroupsofstomachmucousmembraneaftertakingmedicine.ResultsThenumberandlightdensityofGcellandDcellinCAGmodelratobviouslydeclineP0.01,thenumberofGcellandDcellinWWKgroupdistinctivelyincreaseP0.01.ConclusionWWKgranuleplaysatherapeuticrolebyimprovingthestomachintestinehormone’sregulatingeffects. 毕业论文网 【Keywords】WWKgranule，chronicatrophicgastritis，stomachmucousmembrane，Gcell,Dcell 慢性萎缩性胃炎chronicatrophicgastritis，CAG发病率高,病程较长,病因病机错综复杂,是严重危害身体健康的一种疾病。是临床常见的多发病疑难病症之一，目前尚缺乏特效疗法与药物。我们根据中医传统理论，结合现代医学知识，研制了纯天然植物药制剂的萎胃康颗粒，实验表明对大鼠实验性慢性萎缩性胃炎有良好的治疗作用[1]。为探讨其作用机制,为临床应用提供科学依据,我们进行了以下实验研究。 1材料与方法 1.1实验动物选择成年雄性健康SD大鼠山东绿叶制药有限公司实验动物中心提供80只，体重200±20g，架式笼养。购回后饲养3d，随机分为正常对照组16只，模型组64只。 1.2实验试剂萎胃康颗粒由烟台大学医院制剂室制备;三九胃泰为三九医药公司生产，批 Z;水杨酸钠为国药集团化学试剂有限公司产品，分析纯，批 T;兔抗大鼠GAS多克隆一抗、兔抗大鼠SS多克隆一抗、SP试剂盒均购自北京中杉金桥生物技术有限公司。 1.3实验分组治疗和标本处理慢性萎缩性胃炎动物模型复制采用多重刺激复制法[2]。大鼠购回饲养3d后，随机分为正常对照组16只，模型组64只。造模结束后,两组各随机抽取7只大鼠,处死,取胃经

过常规病理学检查确定造模成功。随后，将模型组剩余大鼠随机分为萎胃康溶液大剂量组、萎胃康溶液小剂量组、三九胃泰组、生理盐水组和正常对照组，均予标准鼠饲料，同样环境与条件下饲养，自由饮水。每周测体重1次，确定给药量。萎胃康溶液大剂量组加用萎胃康溶液含生药0.3gml相当人正常用量的40倍20mlkg·d灌胃;萎胃康溶液小剂量组加用萎胃康溶液含生药0.15gml，相当人正常用量的20倍20mlkg·d灌胃;三九胃泰组加用三九胃泰溶液含生药0.08gml相当人正常用量的20倍20mlkg灌胃;模型组加用0.85%氯化钠20mlkg，均1次日灌胃。 毕业论文网 实验进行至30d时，大鼠禁食、水24h后，处死动物。取全胃，沿胃大弯剪开，取胃小弯侧胃窦部，4%多聚甲醛固定，常规石蜡包埋,连续切片3张，切片厚5μm。其中1张切片做HE染色，进行常规病理检查;另2张切片做G细胞、D细胞免疫组化染色。 1.4免疫组织化学检测采用免疫组织化学SP法。染色步骤简述如下;切片脱蜡至水，3%H2O2封闭内源性过氧化酶，PBS洗涤5min×3次，微波抗原修复，PBS洗涤5min×3次，加入非免疫的羊血清封闭非特异性抗原，吸去血清,加入一抗，4℃孵育过夜，PBS洗涤5min×3次，加入生物素标记的二抗孵育，PBS洗涤5min×3次，加入过氧化物酶链酶卵白素孵育，PBS洗涤5min×3次，DAB显色，梯度酒精脱水，二甲苯透明，中性树胶封片。兔抗大鼠GAS多克隆一抗效价为1∶120，兔抗大鼠SS多克隆一抗效价为1∶150，两种均以PBS代替一抗做阴性对照。 在相同的高倍镜10×40下，每张免疫组化切片随机将5个胃黏膜视野，应用计算机图象自动分析系统，分别测量G、D细胞的阳性细胞数及胞体平均光密度值。取5个视野的均数作为每张切片的G、D细胞的阳性细胞均数及平均光密度值。 1.5统计处理数据以x±s表示，应用SPSS13.00统计软件进行方差分析及组间的两两比较。 2结果 毕业论文网 2.1病理学检查正常对照组大鼠胃较小，胃壁弹性良好，皱襞表面光滑且规整，有较多粘液，黏膜呈粉红色，有光泽，无出血点，黏膜下血管不明显。镜下观察胃黏膜厚度大，上皮完整，上皮细胞排列整齐，无脱落或缺损，细胞呈单层柱状，腺上皮与腺管分界清楚，固有膜腺体形状规则。模型组大鼠胃壁变薄，弹性差，胃内容物增多，皱襞低平，走向紊乱，较多区域，尤其是胃窦部皱襞消失，粘液少，黏膜色泽灰白，可见散在出血点，黏膜下血管清晰可见。镜下观察胃黏膜层变薄，不完整，可见不同程度的变性或坏死的脱落细胞，腺体不同程度的萎缩或消失，间质有多种炎性细胞主要为淋巴细胞和浆细胞浸润。