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Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机采集血小板的比较

Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机采集血小板的比较
Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机采集血小板的比较

Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机采集血小板的比较

【摘要】目的比较Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机采集血小板的效率。方法设定相同血小板目标值(PLT=5.0ⅹ1011/袋),随机各选择28名机采献血员(采前PLT≥300×109/L),分别用Trima Accel和MCS+ 采集献血者血小板,评估两种机型的血小板采集效率。结果Trima Accel的全血处理量(2649±300ml)和采集时间(51±14min),显著低于MCS+的全血处理量(2939±400ml)和采集时间(81±14min)。结论在相同条件下,Trima Accel比MCS+处理全血量少、采集时间短,献血不良反应少。

【关键词】血小板单采采集效率血细胞分离机

近年来,随着医疗医学科技的进步,血细胞分离机制备的单采血小板的用量正逐年增长。人们不断开发提高采集效率和献血者安全的血小板采集技术。笔者在相同条件下,对比Trima Accel和MCS+两种型号血细胞分离机处理全血量和采集时间等指标,报告如下。

1材料与方法

1.1仪器与材料Trima Accel血细胞分离机(美国Gambro BCT公司);MCS+血细胞分离机(美国Haemonetics公司);耗材分别为80400及995E2,血液保存液(I)(上海输血技术公司);Sysmex KX-21血细胞计数仪及配套试剂(日本光亚公司).

1.2献血者的选择选择符合国家规定的献血体检标准[1] ,采集前1周未服用阿司匹林类药物,采前血小板计数为(PLT≥300×109/L),清淡饮食的来本站单采血小板献血者56人,随机分为Trima Accel组28人,MCS+组28人。

1.3方法

1.3.1 Trima Accel采集方法设定目标值为PLT =5.0ⅹ1011/袋,采用单针血小板收集程序,80400 耗材,采血速度60-100ml/min,回输速度150ml/min,抗凝剂与全血比例1∶10,离心转速3000r/min,采前输入献血者的身高、体重、PLT、HCT和欲采集血小板量,机器自动计算出采集的时间。

1.3.2MCS+采集方法设定目标值为PLT =5.0ⅹ1011/袋,选择LDP程序,995E2耗材,采血速度80ml/min,回输速度90ml/min,抗凝剂∶全血为1∶11,离心转速4800r/min,采前输入献血者的身高、体重、PLT、HCT和血小板目标值,机器自动计算出采集的循环次数。

2结果Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机全血处理量、采集时间等指标比较见表一。

09_Trima_Accel全自动血细胞分离机使用操作规程

发放号: 1. 目的:规范单采血小板采集程序,保护血细胞分离机的性能,保障献血者的健康,确保血液 质量。 2. 职责:操作人员负责单采血小板的采集和对献血者单采全过程的监护。 3. 适用范围:适用于血小板单采过程。 4. 工作程序: 4.1分离机准备: 4.1.1接通电源,打开设备开关,设备启动并自检。 4.1.2在Trima献血者信息/装载系统主屏幕上,触按"献血者信息”按钮,进入献血者信息 屏幕,根据界面信息提示,分别输入献血者的性别、身高、体重并触按“确认信息”确认,进入下界面。 4.1.3根据界面提示,分别输入献血者的血型、血比积、血小板计数值,按“确认信息”确认。触按“确 认信息”,进入程序选择界面。 4.1.4根据预期产品量选择最优收集程序,触按“确认程序” 。 4.2装载耗材: 4.2.1触按“装载系统”,根据界面提示,悬挂空袋,插入卡匣,装载环形血道,关闭离心机门顺序装载 管路。 4.2.2触按“继续”按钮,系统自动放低卡匣,装载所有的泵、阀门以及传感器。 4.2.3根据界面提示,关闭采血管路以及样品袋管路上的白色夹子,触按“继续”按钮。 4.3初始化: 4.3.1根据界面提示,将ACD抗凝剂袋连接到抗凝管路上。挤压滴液室,使滴液室灌注到刻度线位置。 上下拉动抗凝管,使抗凝管道卡入抗凝传感器内,注意滴液室应在传感器下方。 4.3.2触按“继续”按钮,自动进行管路ACD抗凝剂灌注。 4.3.3灌注结束后,界面提示“开始献血者准备”后,开始进行献血者准备。 4.4嘱咐献血者找到舒适位置平躺于采血床上,伸展双臂。 4.5采血针管排空后,按《采血操作规程》选择合适静脉进行穿刺,确定采血针在静脉内后用胶带纸加 以固定,打开滑轮夹。 4.6采集: 4.6.1触按“开始抽取按钮”,进行收集产品。 4.6.2收集完成时,系统将发出“哗哗”的提示音,自动进入回输过程,回输完成,仪器会发出嘟嘟的提 示音,系统状态行显示“运行完成”的消息。 4.7触按“继续”按钮。系统提示您密封及去除所有的产品袋以及AC袋。关闭进血管路上的白

血细胞分离技术

血浆置换(plasma exchange, PE,即血浆单采术)是一种特殊的体外血液净化技术,利用血浆分离器或离心的方法将患者的血浆与血细胞分离,弃掉含有致病物质的血浆,并同时补充等量的置换液,从而达到治疗疾病的目的。 血浆置换比药物治疗更快、更有效地去除致病因子,为原发病的治疗创造了有力条件。血浆置换可以去除血浆中的致病的大分子物质,如:免疫球蛋白、免疫复合物、抗体、类风湿因子、内毒素及炎性介质、胆红素、LDL、病毒等。 血浆置换的治疗模式 1.单重血浆置换:血浆分离器分离患者的血浆和血细胞,弃掉含有含有致病因子的全部血浆,然后补充相同体积新鲜冰冻血浆(FFP)或白蛋白溶液。 目前还有两种更高级的方法可以选择性地去除血浆有害物质,而保留其他的有益物质。 2.二次膜式分离(double filtration plasmapheresis,DFPP)

首先是用一级血浆分离器分离患者的血浆和血细胞,然后再用孔径较小的二级滤器分离出大分子致病物质(如:球蛋白和免疫复合物),而保留宝贵的白蛋白等中分子物质。 3.血浆吸附(plasma adsorption,PA) 血浆分离器分离患者的血浆和血细胞,然后血浆再经过吸附柱,选择性地去除有害物质分。 血浆置换的临床应用 目前血浆置换可应用于临床上多种疾病,具体如下: 1.肾脏风湿疾病:

抗肾小球基底膜病(抗GBM病)、血栓性血小板减少性紫癜、冷球蛋白血症、ANCA相关性小血管炎、肾移植后超急性或急性抗体介导的排异反应、肾移植后FSGS复发、噻氯匹定/氯吡格雷相关的血栓性微血管病、SLE及狼疮性肾炎、类风湿关节炎,溶血性尿毒症综合征等。 2.脓毒血症和多器官功能障碍综合征 3.神经系统疾病: 格林-巴利综合征、重症肌无力、慢性炎性脱髓鞘多发性神经病、儿童自身免疫性神经精神障碍合并链球菌感染、IgG/IgA相关脱髓鞘多发性神经病,急性播散性脑脊髓膜炎、多发性硬化。 4.代谢性疾病: 家族性高胆固醇血症、甲亢危象、淀粉样变性。 5.血液系统疾病: 纯红细胞再生障碍性贫血,自身免疫性溶血性贫血,多发性骨髓瘤,血友病。 6.结缔组织病: (灾难性)抗磷脂抗体综合征、重症系统性红斑狼疮。 7.皮肤疾病: 重型药疹、天疱疮、类天疱疮、重症银屑病、妊娠疱疹、迟发性皮肤卟啉病等。 8.药物、毒物中毒性疾病: 三环类药物、地高辛、茶碱、维拉帕米、地尔硫卓、毒蘑菇、对硫磷中毒,原因不明的“致死性”中毒等 9.其他疾病:

关于购置血细胞分离机的社会效益和经济效益分析

关于购入血细胞分离机的社会效益和经济效益分析 院领导,采购处: 卫生部2009年第18号文件刚刚下达,要求第三类医疗技术由卫生部准入,5月1日开始执行。已经开展该项工作并具备相应科室的医院只须申请评审即可,尚未开展的医院则需要申请开展。因为我院已开展该项治疗14例,对我院十分有利。因而尽快完善设施、设备、人员条件,并通过卫生部评审注册,将奠定我院在该领域的学术地位。上报卫生厅申请成立河北省肿瘤生物治疗中心的报告已得到答复,即待卫生部评审注册后,省厅才可以审批成立中心的有关事宜。 目前,病房准备已完成,独立核算号已申请,聘用临时工人员即将到位。目前面临的问题有两个,一是医生编制问题,二是血细胞分离机到位时间问题。一旦以上两个问题得到解决,马上可以开诊。关于设备购入的理由和效益分析如下:1、购入血细胞分离机的理由: 购入血细胞分离机,是提高疗效,提高治疗规模,降低消耗的必要条件。该项目需要采取病人外周血单个核细胞,以往应用CS3000机型的经验和教训是:因为CS3000机型的技术参数是,红细胞污染率为≤5%,所采取的细胞中混入过多的红细胞和血小板,因而不得不进行多次洗涤和大量细胞因子扩增以达到效应细胞的数量要求,因而工作量极大,效率却很低,效应细胞的制备成本高(细胞因子价格很高),细胞数量不足,同时降低了疗效。而COBE Spectra机型参数是,红细胞污染率<1%,而且能够随时观察细胞分离状态并可加以调控,因而大大提高了细胞的纯度,降低了工作量,节省了时间,细胞因子用量减少而降低了成本,更重要的是疗效得以保证。 2、社会效益: 肿瘤生物治疗目前已被国际、国内普遍认为是继手术、化疗、放疗之后的第四大肿瘤治疗模式。国外已进入III期临床,国内各大型医院如北京协和、301、肿瘤医院、沈阳军区总院、南京军区总院、广州南方医院、上海瑞金医院、青岛医学院附属医院、天津肿瘤医院等。收治病人量从每年200例到1500例不等。肿瘤生物治疗项目的临床应用创造了极大的社会效益。主要表现在:①早、中期肿瘤病人根治术后可防治肿瘤复发,改善病人生存质量,提高生存率。②晚期肿

09_Trima_Accel全自动血细胞分离机使用操作规程

1. 目的:规范单采血小板采集程序,保护血细胞分离机的性能,保障献血者的健康,确保血液 质量。 2. 职责:操作人员负责单采血小板的采集和对献血者单采全过程的监护。 3. 适用范围:适用于血小板单采过程。 4. 工作程序: 4.1 分离机准备: 4.1.1 接通电源,打开设备开关,设备启动并自检。 4.1.2 在Trima献血者信息/装载系统主屏幕上,触按“献血者信息”按钮,进入献血者信息 屏幕,根据界面信息提示,分别输入献血者的性别、身高、体重并触按“确认信息”确认,进入下界面。 4.1.3 根据界面提示,分别输入献血者的血型、血比积、血小板计数值,按“确认信息”确认。 触按“确认信息”,进入程序选择界面。 4.1.4 根据预期产品量选择最优收集程序,触按“确认程序”。 4.2 装载耗材: 4.2.1 触按“装载系统”,根据界面提示,悬挂空袋,插入卡匣,装载环形血道,关闭离心机门 顺序装载管路。 4.2.2 触按“继续”按钮,系统自动放低卡匣,装载所有的泵、阀门以及传感器。 4.2.3 根据界面提示,关闭采血管路以及样品袋管路上的白色夹子,触按“继续”按钮。 4.3 初始化: 4.3.1 根据界面提示,将ACD抗凝剂袋连接到抗凝管路上。挤压滴液室,使滴液室灌注到刻度 线位置。上下拉动抗凝管,使抗凝管道卡入抗凝传感器内,注意滴液室应在传感器下方。 4.3.2 触按“继续”按钮,自动进行管路ACD抗凝剂灌注。 4.3.3 灌注结束后,界面提示“开始献血者准备”后,开始进行献血者准备。 4.4 嘱咐献血者找到舒适位置平躺于采血床上,伸展双臂。 4.5 采血针管排空后,按《采血操作规程》选择合适静脉进行穿刺,确定采血针在静脉内后用 胶带纸加以固定,打开滑轮夹。 4.6 采集: 4.6.1 触按“开始抽取按钮”,进行收集产品。 4.6.2 收集完成时,系统将发出“哗哗”的提示音,自动进入回输过程,回输完成,仪器会发 出嘟嘟的提示音,系统状态行显示“运行完成”的消息。 4.7 触按“继续”按钮。系统提示您密封及去除所有的产品袋以及AC袋。关闭进血管路上的白 色夹子,拔出采血针,摇匀后热合、封口并留取标本供质量鉴定使用。触按“继续”按钮。

血细胞分离技术

第十八章血细胞分离技术 (Separation technique of the blood cell) 一、原理 在体外进行细胞免疫检测时,首先必须进行淋巴细胞的分离。分离淋巴细胞的 方法很多,但不管采用哪种方法,均要求分离的淋巴细胞纯度高、产量多,而且不 丧失活性,同时也要求分离技术简单、操作方便。 外周血液中红细胞和白细胞的比例在几百甚至上千比一,两类细胞的大小和密 度不同,其沉降速度也就不同。红细胞的自然沉降率较快,加入高分子量的聚合物,如明胶、右旋糖酐等还可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度离心法或二者 结合,可以将淋巴细胞从血液中分离出来。这种分离出的淋巴细胞一般包括单核细胞。除去单核细胞,可以利用单核细胞的吸附功能,如铁颗粒、玻璃面或尼龙网等,除去(或分离)单核细胞,从而提纯淋巴细胞。 二、采血 (一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶 原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的 肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一种螯合剂。用生理盐水配制成4%的溶液 备用。 · 1 ·

(3)阿氏液(Alsever液),配方如下: 枸橼酸钠(Na3C6H5O7·5H2O)0.80g 枸橼酸0.0325g 葡萄糖 2.05g 氯化钠0.42g H2O 加至100.00ml 混匀溶解后,114.3℃高压蒸汽灭菌10min备用。 阿氏液中既含有枸橼酸钠抗凝剂,又含有细胞生存的营养,所以它既可做抗凝剂,又可做血细胞的保存液。 2.针头根据不同动物和采血部位,采用不同型号的针头,用前必须灭菌或 消毒。 3.采血容器注射器或三角瓶等。 4.采血动物。 (二)操作方法 1.采血法各种动物采血方法不一。马、牛、羊等大动物一般从颈静脉采血,猪从颈静脉、前腔静脉或耳静脉采血,家禽由翼下静脉或心脏采血,兔由心脏或耳 静脉采血,犬由颈静脉或四肢静脉采血,豚鼠由心脏采血,小白鼠则可断尾或剪断 腋下血管或剪断眼球采血。 2.抗凝采集血液最关键的问题是抗凝,采用什么方法进行抗凝,则根据实 验的要求和条件而定。最常用的方法如下: (1)肝素抗凝:采血时,使每ml血液含15U~20U肝素即可。计算采集的血 液量,按1 000U/ml的量加入肝素,直接放入采血容器中,采血时,边采血边轻轻 摇动,使抗凝剂和血液混匀。对于采少量的血液或小动物采血,可直接用注射器抽 取一定量的肝素液,再采血直接抗凝。 (2)EDTA抗凝:采血前,用灭菌生理盐水将EDTA配制成4%溶液,然后 按预采血液的量,以每ml血液加入1mg~2mg的EDTA的液体量于采血容器内。 采血,并不断摇动采血容器,使之混匀。 (3)玻璃珠法:预先将适量的玻璃珠(根据采血量多少而定)清洗后,装入 采血容器中,灭菌后备用。采血过程中,边采边摇采血瓶,以使小玻璃珠在血液中 滚动,以机械地除去纤维蛋白,使血液不能凝固。本法虽较麻烦,但对淋巴细胞的 活性影响最小,且可减少血小板的混杂。 (4)阿氏液采血:以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液,边采边轻轻摇动 采血瓶,使之混匀。用阿氏液采血,除了抗凝外,多用于红细胞的保存。一般在4℃ 条件下,阿氏液中保存的红细胞2周其活性和特性不变。 · 2 ·

血细胞分离机临床应用

COBE SPECTRA 血细胞分离机临床应用 血细胞分离机可以进行的血液成份单采及相关治疗项目: 1. ELP~~~延长血小板寿命的单采程序 该程序可以从正常供者体内分离出两份满足临床需要的浓缩血小板制品,同时可以附带收集200ml-400ml血浆。有效采集时间约60-100分钟/次。COBE公司所提供的每一套管道均带有两个可保存150ml?/FONT>400ml血小板的收集袋,可在22℃恒温或振荡条件下有效保存血小板3?/FONT>5天。 应用血小板单采程序(ELP)可对血小板增多患者进行血小板去除术。操作中,只要输入的血小板计数高于40万/mm3法机器将自动判断为血小板去除并进入相关操作程序。 2.WBC~~~~~白细胞程序 白细胞(WBC)程序中有三个操作程序: MNC~~~~~单个核细胞采集程序; 用以采集外周血造血干细胞,进行造血干细胞移植; 采集淋巴细胞进行LAK细胞培养; 对急性白血病患者进行幼稚的白血病细胞去除,减少化疗药物的用量及副作用。 在没有羟乙基淀粉的情况下可用该程序采集粒细胞用以治疗粒细胞减少症的患者。 PMN~~~~~分叶核细胞采集程序: 在使用羟乙基淀粉和高浓度枸橼钠时可用该程序采集供者体内的粒细胞;应用羟乙基淀粉可采集年轻红细胞,用以治疗长期依赖输血的患者,如地中海贫血,镰刀壮红细胞贫血等。以延长其输血间隔,减少输血产生的不良反应,提高病人的生存质量。 BMP~~~~~骨髓处理程序 从骨髓中纯化出移植所需造血干细胞,尤其是在ABO血型不合的骨髓移植中减少溶血性输血反应的发生,必须将骨髓中的红细胞和血浆成份尽可能去除。应用该程序处理骨髓,造血干细胞的回受率90%以上。 3.TPE~~~~~治疗性血浆交换 应用该程序进行血浆交换治疗时,置换液量可自动计算。液体平衡范围可从75%---150%任意调节,具有操作方便,置换迅速等特点。 血浆置换的适应症非常广泛,临床常见病种如下: 血液系统疾病:(2)风湿免疫系统疾病: 巨球蛋白血症普通型天庖疮 多发性骨髓瘤类天庖疮 同种免疫性血小板减少性疾病系统性红斑狼疮 ABO血型不合的骨髓移植(受者)系统性血管炎 有第8凝血因子抗体的血友病类风湿性关节炎 免疫性血小板减少性紫癫风湿性关节炎 高冷凝素患者急性进行性肾小球肾炎

Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机采集血小板的比较

Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机采集血小板的比较 【摘要】目的比较Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机采集血小板的效率。方法设定相同血小板目标值(PLT=5.0ⅹ1011/袋),随机各选择28名机采献血员(采前PLT≥300×109/L),分别用Trima Accel和MCS+ 采集献血者血小板,评估两种机型的血小板采集效率。结果Trima Accel的全血处理量(2649±300ml)和采集时间(51±14min),显著低于MCS+的全血处理量(2939±400ml)和采集时间(81±14min)。结论在相同条件下,Trima Accel比MCS+处理全血量少、采集时间短,献血不良反应少。 【关键词】血小板单采采集效率血细胞分离机 近年来,随着医疗医学科技的进步,血细胞分离机制备的单采血小板的用量正逐年增长。人们不断开发提高采集效率和献血者安全的血小板采集技术。笔者在相同条件下,对比Trima Accel和MCS+两种型号血细胞分离机处理全血量和采集时间等指标,报告如下。 1材料与方法 1.1仪器与材料Trima Accel血细胞分离机(美国Gambro BCT公司);MCS+血细胞分离机(美国Haemonetics公司);耗材分别为80400及995E2,血液保存液(I)(上海输血技术公司);Sysmex KX-21血细胞计数仪及配套试剂(日本光亚公司). 1.2献血者的选择选择符合国家规定的献血体检标准[1] ,采集前1周未服用阿司匹林类药物,采前血小板计数为(PLT≥300×109/L),清淡饮食的来本站单采血小板献血者56人,随机分为Trima Accel组28人,MCS+组28人。 1.3方法 1.3.1 Trima Accel采集方法设定目标值为PLT =5.0ⅹ1011/袋,采用单针血小板收集程序,80400 耗材,采血速度60-100ml/min,回输速度150ml/min,抗凝剂与全血比例1∶10,离心转速3000r/min,采前输入献血者的身高、体重、PLT、HCT和欲采集血小板量,机器自动计算出采集的时间。 1.3.2MCS+采集方法设定目标值为PLT =5.0ⅹ1011/袋,选择LDP程序,995E2耗材,采血速度80ml/min,回输速度90ml/min,抗凝剂∶全血为1∶11,离心转速4800r/min,采前输入献血者的身高、体重、PLT、HCT和血小板目标值,机器自动计算出采集的循环次数。 2结果Trima Accel和MCS+两种血细胞分离机全血处理量、采集时间等指标比较见表一。

COBE Spectra血细胞分离机

COBE Spectra 血液成分分离机主要功能 COBE Spectra 血液成分分离机主要功能: 1)干细胞采集 具有全自动和人工辅助两种模式采集外周血干细胞功能 干细胞采集效率≥90% 红细胞混入量<1% 血小板损失少,不需补充血小板 在进行大容量循环时(>10000ml)干细胞体积<50ml/次,采集次数1-2次即可达到干细胞移植量体外循环血量<165ml 2)可采集淋巴细胞,树突状细胞等单个核细胞 3)白细胞采集与去除 进行白细胞去除治疗,白细胞去除率>50% 4)可采集粒细胞 5)血小板采集和去除 可一次采集两个治疗单位,保存五天的血小板,白细胞污染率<1×106 可进行血小板的去除治疗 6)治疗性血浆置换,血浆淋巴置换 机器可自动计算血浆容量及置换量 血小板损失量《1% 体外循环血量<131ml 可以安全用于危重休克病人抢救治疗 7)治疗性红细胞去除及置换 可设定治疗后达到的红细胞压积 系统可自动计算置换量及容量平衡 去除的红细胞压积>80% 8)骨髓浓缩纯化处理 具有骨髓采集后浓缩或淘洗功能 单个核细胞采集率>85% CD34+细胞的回收率>85% 可以进行采后红细胞浓缩。

COBE Spectra血细胞分离机可以用来进行治疗性细胞分离、单个核细胞采集、血浆置换等。其操作指南就是几百页,慢慢看吧。本人经验是: 1.了解其分离原理。 2.必须准确、熟练进行管路安装,分离单核细胞用白细胞管路。 3.必须明白屏幕英文意思。 4.良好的采集对象静脉出入口通路畅通,保持出入口压力是保障采集顺利的根本。 5.采集过程中遇到系统警报,不必惊慌,按提示寻找原因,决大多数是管路压力问题。 6.单个核细胞采集可用WBC程序,再选择其后的MNC程序进行。 总之,熟悉操作指南,按电脑提示操作,良好的护士配合,可以顺利完成任务。另外告知,网上有操作指南中文版,自己搜索吧。

血细胞分离

第七节血细胞分离技术 (Separation technique of the blood cell) 一、原理 在体外进行细胞免疫检测时,首先必须进行淋巴细胞的分离。分离淋巴细胞的 方法很多,但不管采用哪种方法,均要求分离的淋巴细胞纯度高、产量多,而且不 丧失活性,同时也要求分离技术简单、操作方便。 外周血液中红细胞和白细胞的比例在几百甚至上千比一,两类细胞的大小和密 度不同,其沉降速度也就不同。红细胞的自然沉降率较快,加入高分子量的聚合物,如明胶、右旋糖酐等还可以加速其凝聚。利用自然沉降法、密度梯度离心法或二者 结合,可以将淋巴细胞从血液中分离出来。这种分离出的淋巴细胞一般包括单核细胞。除去单核细胞,可以利用单核细胞的吸附功能,如铁颗粒、玻璃面或尼龙网等,除去(或分离)单核细胞,从而提纯淋巴细胞。 二、采血 (一)材料与试剂 1.抗凝剂 (1)肝素:肝素是含硫酸基的粘多糖,常用其钠盐或钾盐,它能阻止凝血酶 原转化为凝血酶,进而抑制纤维蛋白原形成纤维蛋白,从而阻止血液凝固。常用的 肝素溶液浓度为1 000U/ml,市售肝素多为100U~126U/mg。 (2)乙二胺四乙酸(EDTA):是一种螯合剂。用生理盐水配制成4%的溶液 备用。 · 1 ·

(3)阿氏液(Alsever液),配方如下: 枸橼酸钠(Na3C6H5O7·5H2O)0.80g 枸橼酸0.0325g 葡萄糖 2.05g 氯化钠0.42g H2O 加至100.00ml 混匀溶解后,114.3℃高压蒸汽灭菌10min备用。 阿氏液中既含有枸橼酸钠抗凝剂,又含有细胞生存的营养,所以它既可做抗凝剂,又可做血细胞的保存液。 2.针头根据不同动物和采血部位,采用不同型号的针头,用前必须灭菌或 消毒。 3.采血容器注射器或三角瓶等。 4.采血动物。 (二)操作方法 1.采血法各种动物采血方法不一。马、牛、羊等大动物一般从颈静脉采血,猪从颈静脉、前腔静脉或耳静脉采血,家禽由翼下静脉或心脏采血,兔由心脏或耳 静脉采血,犬由颈静脉或四肢静脉采血,豚鼠由心脏采血,小白鼠则可断尾或剪断 腋下血管或剪断眼球采血。 2.抗凝采集血液最关键的问题是抗凝,采用什么方法进行抗凝,则根据实 验的要求和条件而定。最常用的方法如下: (1)肝素抗凝:采血时,使每ml血液含15U~20U肝素即可。计算采集的血 液量,按1 000U/ml的量加入肝素,直接放入采血容器中,采血时,边采血边轻轻 摇动,使抗凝剂和血液混匀。对于采少量的血液或小动物采血,可直接用注射器抽 取一定量的肝素液,再采血直接抗凝。 (2)EDTA抗凝:采血前,用灭菌生理盐水将EDTA配制成4%溶液,然后 按预采血液的量,以每ml血液加入1mg~2mg的EDTA的液体量于采血容器内。 采血,并不断摇动采血容器,使之混匀。 (3)玻璃珠法:预先将适量的玻璃珠(根据采血量多少而定)清洗后,装入 采血容器中,灭菌后备用。采血过程中,边采边摇采血瓶,以使小玻璃珠在血液中 滚动,以机械地除去纤维蛋白,使血液不能凝固。本法虽较麻烦,但对淋巴细胞的 活性影响最小,且可减少血小板的混杂。 (4)阿氏液采血:以阿氏液和采血量以1︰1比例采集血液,边采边轻轻摇动 采血瓶,使之混匀。用阿氏液采血,除了抗凝外,多用于红细胞的保存。一般在4℃ 条件下,阿氏液中保存的红细胞2周其活性和特性不变。 · 2 ·

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