Fermentas非预染蛋白marker Ladder

Fermentas非预染蛋白Ladder/marker

（一）简单介绍：未预染蛋白Ladder/marker设计用于SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、硝酸纤维膜、尼龙膜或PVDF膜精确鉴定蛋白的分子量大小。其经SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离后PageBlue TM Protein staining solution（#R0571）、Pagesilver TM silver staining kit （#k0681）或其他蛋白染色方法染色。#R0571也可用于PVDF膜上未预染分子量标准条带的染色观察。

（二）图谱及简单介绍：

1 PageRuler? Unstained Protein Ladder（SM0661）

（1）介绍：此Ladder是由14条高纯度的未预染的重组蛋白组成，分子量范围为10-200 kDa。其中的每种蛋白均含有内在的Strep-tag?II序列，Western杂交时可经Strep-Tactin?-AP 偶联物或Strep-tag?II抗体直接检测。Fermentas不提供Strep-tag?II检测系统。

（2）图谱：（下左）

2 Unstained Protein Molecular Weight Marker（SM0431）

（1）介绍：此Marker是由7种预染的天然蛋白组成，分子量范围为：14.4-116kDa

（2）图谱：（上右）

（三）特点：条带窄，宽分子量范围，即用型。

（四）应用：SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳、Western杂交精确鉴定蛋白大小。

（五）保存液成分：

（1）Ladder:蛋白浓度0.02-0.05mg/ml 62.5mM Tris-H3PO4(PH7.5,25℃)，1mM EDTA,2%SDS,10mM DTT，1mMNaN3，0.01%溴酚蓝和33%甘油。

（2）Marker: 蛋白浓度0.1-0.2mg/ml 62.5mM Tris-HCl (PH7.5,25℃)，1mM EDTA,2%SDS,50mM DTT，30mMNaCl 1.5mMNaN3，0.01%溴酚蓝和50%甘油。

（六）质量控制：Western杂交检测和SDS--聚丙烯酰胺凝胶电泳

（七）保存：-20℃保存

彩虹130广谱蛋白marker说明书

彩虹130广谱蛋白marker说明书 货号：PR1950 规格：20T(100μL)/50T(250μL)/100T(250μL×2)/500T(250μL×10) 保存：-20℃保存，有效期至少2年。 产品特点： ●三色预染，颜色鲜亮，条带整齐，便于观察。 ●用量少，节约成本，仅5ul即可完美呈现（1.5mm，10孔梳）。 ●广谱多带，一支即可满足多种实验需求。 产品简介： 本产品包含9种彩色预染的已知分子量标准蛋白，分子量范围为15kD-130kD，每种蛋白含量约为 0.2-0.4mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的9条彩色蛋白条带，其中70kD条带为红色，25kD条带为绿色，其余条带为蓝色。 使用说明： 1.本产品是即用型液体，可直接上样电泳。上样前无需加热，稀释或添加还原剂。 2.上样5ul，SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。 3.建议分离胶浓度为15%。 电泳示意图说明： 第1页，共2页

第2页，共2 页注意事项： 1.本产品含有较高浓度甘油，常规-20℃保存为液体状态，可直接使用。若冰箱温度不稳，导致结冰，可 适当分装后置于4℃保存，至少稳定6个月。 2.Marker分离效果与PAGE胶浓度相关，若分离胶浓度低于15%，25kD以下条带不易分离，但不影响绿色 （25KD）及以上条带。如果目的条带小于25KD，建议分离胶浓度大于或等于15%。 3.转膜效果与转膜时间有关，需根据客户目的条带大小而定，如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜 成功，属于正常现象。

考马斯亮蓝染色套装使用说明

考马斯亮蓝染色套装使用说明 货号：P1305 保存：室温保存，至少一年有效。 规格：100ml+500ml 产品简介： 本考马斯亮蓝染色套装(Commassie Blue Staining Kit)采用了最经典的 考马斯亮蓝染色和脱色方法，以考马斯亮蓝G-250为染料，可用于SDS-PAGE或非变性PAGE等蛋白电泳凝胶的常规染色和脱色，或Western 转膜后PAGE胶上残余蛋白的检测。 产品内容： 考马斯亮蓝染色液100ml 考马斯亮蓝脱色液500ml 说明书1份 使用方法： 1、电泳结束后，取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中(至少5倍胶体积)，确保染色液可以充分覆盖凝胶。 2、将凝胶置于摇床上缓慢摇动，室温染色至少2小时，低丰度蛋白染 色需4小时以上。 3、染色结束后移除染色液，染色液通常可重复利用2-3次，但染色效

果会略有影响。 4、将凝胶浸泡于和染色液等量体积的脱色液中，摇床上脱色4-8小时，期间更换3-5次脱色液。 注意事项： 1.染色时间4小时以上效果最佳。 2.脱色可根据目的蛋白丰度和脱色效果随时终止，或延长脱色时间。 3.脱色越彻底，检测的蛋白量越低，脱色24小时一般可以检测出0.1ug蛋白量。 4.脱色后，将凝胶保存在水中，拍照或扫描保存图像。或制成干胶保存。 相关试剂： P1300-500考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液 PC0020BCA蛋白浓度测定试剂盒 PR1400低分子量蛋白MARKER PR1700预染次高分子量蛋白MARKER I1020IPTG溶液(50mg/ml) A101030%丙烯酰胺(29:1) T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒

彩虹245广谱蛋白marker使用说明

彩虹245广谱蛋白marker使用说明 货号：PR1920 规格：20T(100μ1)/50T(250μ1)/100T(250μ1×2)/500T(250μ1×10) 保存：-20℃保存，有效期至少2年。 产品特点： ●三色预染，颜色鲜亮，条带整齐，便于观察。 ●稳定性能突出，经检测4℃放置两年无明显降解。 ●用量少，节约成本，仅5ul即可完美呈现（1.5mm，10孔梳）。 ●广谱多带，一支即可满足多种实验需求。 产品简介： 彩虹245广谱蛋白marker包含12种彩色预染的已知分子量标准蛋白，分子量范围为 11kD-245kD，每种蛋白含量约为0.2-0.4mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的12条彩色蛋白条带，其中25kD为绿色条带，75kD为红色条带，其余10条是蓝色条带。 使用说明： 1.彩虹245广谱蛋白marker是即用型液体，可直接上样电泳。上样前无需加热，稀释或添加还原剂。 2.上样5ul，SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。 3.建议分离胶浓度为15%。 电泳示意图说明：

彩虹245广谱蛋白marker经15%浓度的SDS-PAGE凝胶电泳后，转移至PVDF膜上。 注意事项： 1，本产品含有较高浓度甘油，常规-20℃保存为液体状态，可直接使用。若冰箱温度不稳，导致结冰，可适当分装后置于4℃保存，至少稳定6个月。 2，Marker分离效果与PAGE胶浓度相关，若分离胶浓度低于15%，25kD以下条带不易分离，但不影响绿色（25KD）及以上条带。如果目的条带小于25KD，建议分离胶浓度大于或等于15%。3，转膜效果与转膜时间有关，需根据客户目的条带大小而定，如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜成功，属于正常现象。 相关试剂： P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT） P1300-1SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 D106010×电泳转移缓冲液 PR1910彩虹180广谱蛋白marker

4×蛋白上样缓冲液(含DTT)使用说明

4×蛋白上样缓冲液（含DTT）使用说明 货号：P1015 规格：10ml 保存：-20℃保存，建议分装冻存，避免反复冻融，自发货之日起至少12个月有效。 产品简介： 4×蛋白上样缓冲液（含DTT）适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，DTT，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。 使用说明： 1、请按每30微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(4倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。 3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。 注意事项： 4、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右，胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。 5、本试剂因含DTT，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。 相关试剂： P10182×蛋白上样缓冲液（含DTT） P10174×非变性蛋白上样缓冲液 P001210×丽春红染色液 P1300-500考马斯亮蓝快速染色液 P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 PR1700预染次高分子量蛋白MARKER

PH0302-超低分子量蛋白Marker II (3.4-100kD)使用手册

PH0302|超低分子量蛋白Marker II(3.4-100kD) Ultra Low Molecular Weight Protein Marker 货号：PH0302规格：?10T（50ul）保存：Store@-20℃ ◆产品简介 本产品包含5种多肽和3种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.4kD-100kD。可以用来判断SDS-PAGE上多肽和小蛋白的分子量。 ◆使用说明 第一次收到该产品，室温融化后，彻底混匀，离心快甩将溶液完全收集到管底，根据需要适量分装成小管，-20℃贮存，每次取一小管使用；本产品为即用型，融化后既能使用，不能95℃加热处理。 一.制胶： I配制分离胶 1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA（19:1）、凝胶缓冲液和乙二醇加入到小烧杯中混合。 2．加入10%APS和TEMED，立即混匀5-10秒，以使溶液充分混匀。 3．在凝胶模具中迅速灌入适量分离胶溶液，然后在分离胶溶液上轻轻覆盖一层1-3cm的水层，使凝胶表面保持平整。4．静置30-60分钟，待分离胶和水层之间出现一个清晰的界面表示凝胶已聚合。 表一（一块0.75mm mini胶用量） 分离胶浓缩胶 18％T,5%C/6.0ml5％T,3.3%C/2ml 40%PAA（19:1） 2.7ml/ 40%PAA(29:1)/0.25ml 4×凝胶缓冲液 1.5ml0.5ml 乙二醇（电泳级） 1.8ml/ ddH2O/ 1.25ml 10％APS50-65μl20μl TEMED6μl2μl 注：如非必须，不要使用1.0mm和1.5mm的凝胶，尽量使用厚度0.75mm的凝胶，这样会减少电泳后染色和脱色的时间。 II配制浓缩胶 去除覆盖在分离胶上的水层，用滤纸将残留的水吸去。 1．按照表一将不同体积的双蒸水、40%PAA（29:1）和凝胶缓冲液加入到小烧杯中混合。

次高分子量蛋白质 Marker (43kD-200kD)使用说明

次高分子量蛋白质Marker(43kD-200kD)使用说明 货号：PR1500 规格：10T 保存：-20℃可保存至少六个月。避免反复冻融，建议分装保存。 产品简介： 次高分子量蛋白质Marker包含5种蛋白质混合物，分子量范围为43kD-200kD，每种蛋白的含量约为20ug。经SDS-PAGE电泳，用考马斯亮蓝染色后可以得到分布均匀密度相近的5条带。可以用来判断SDS-PAGE电泳后蛋白质的分子量。 本产品配有一支蛋白上样缓冲液（150ul）。 使用说明： 将两支试剂开启，取110ul蛋白上样缓冲液加入蛋白Marker干粉中，混匀，取出液体，置于 1.5ml离心管中，100℃沸水浴加热5分钟，冷却后根据需要分装成小管，建议每管分装10μl，-20℃贮存，每次取一管使用。 注：如长期贮存后使用，使用前最好取分装后的小管99℃预热3分钟后再上样电泳。 用考马斯亮蓝G-250染色后可见5条蛋白带（见下示意图）。

注意事项： 1.建议分离胶浓度7%，浓缩胶浓度4%，制胶时先配制分离胶，聚合后再配制浓缩胶。电泳时，80v电压大约跑1小时后，待指示剂沿到达分离胶上沿时，将电压调至120v，直到电泳结束。整个电泳过程大约需3-4个小时。 2.电泳之后可将胶进行染色观察，如果使用配方进行染色时效果不好或考虑其毒性，可以选择考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液，具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。 相关试剂： P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT） T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 P1300-1SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 P1300-500考马斯亮蓝快速染色液

BCA微量蛋白浓度测定试剂盒使用说明

BCA微量蛋白浓度测定试剂盒 货号：PC0050 规格：500微孔(500T)/1000微孔(1000T)/2000微孔（2000T） 保质期：本试剂盒自订购之日起一年内有效。 产品内容： 包装500微孔1000微孔2000微孔保存 BCA试剂100ml2×100ml4×100ml室温 Cu试剂3ml6ml12ml室温 PBS稀释液30ml60ml120ml室温 BSA蛋白标准 0.3ml0.5ml1ml-20℃ (5mg/ml BSA) 产品简介： 碱性条件下，蛋白将Cu2+还原为Cu+，Cu+与BCA试剂形成紫颜色的络合物，测定其在562nm处的吸收值，并与标准曲线对比，即可计算待测蛋白的浓度。常用浓度的去垢剂SDS，Triton X-100，Tween不影响检测结果，但受螯合剂(EDTA，EGTA)、还原剂（DTT，巯基乙醇）和脂类的影响。实验中，若发现样品稀释液或裂解液本身背景值较高，可试用Bradford蛋白浓度测定试剂盒。 操作说明： 一.微孔酶标仪法 1.配制工作液:根据标准品和样品数量，按50体积BCA试剂加1体积Cu试剂（50:1）配制成BCA工作液，充分混匀(混合时可能会有浑浊，但混匀后就会消失)。BCA工

作液室温24小时内稳定。 2.稀释标准品：先用PBS将BSA标准品稀释至终浓度为0.8mg/ml备用。再依次稀释至80、40、20、10、5、2.5ug/ml.。 3.高浓度蛋白可将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。 4.各孔加入200微升BCA工作液和40ul稀释后的蛋白或标准品溶液，对照孔加入PBS稀释液。37℃放置4小时。用酶标仪测定A562nm，根据标准曲线计算出蛋白浓度。使用温箱孵育时，应注意防止因水分蒸发影响检测结果。 二.分光光度计法 如没有酶标仪，在离心管中混匀样品后加入比色皿，用分光光度计比色。 采用分光光度计测定蛋白浓度方法与酶标仪法相似，只需要按照分光光度计比色皿容量要求按照比例配置相应的BCA工作液和标准品溶液。 常规比色皿用量为200ul有样本加入1mlBCA工作液或400ul样本加入2mlBCA工作液。微量比色皿用量为20样本加入100ul BCA工作液。或根据仪器情况自行调整。 附：样本及标准品稀释示意图 样本管号A B C D E PBS稀释液用量180100100100…… 标准品用量20（原液） 100 （从A管吸出） 100 （从B管吸出） 100 （从C管吸出） …… 终浓度（ug/ml）80402010…… 注意事项：

蛋白标准品(Marker)知识汇总

蛋白Marker可分为：一、未预染的Marker即宽分子量蛋白标准、高分子量蛋白标准以及低分子量蛋白标准;二、预染的Marker即单色预染和多色预染。 在western blot 过程中，分子量Marker就像个螺丝钉一样没虽然是个小细节，然而就是这样一个小细节对实验结果有着不可忽视的作用。这个Western Blot 参照家族的一员的作用主要是用来指示蛋白条带所对应的分子量大小，只有标准量精确无误了，实验结果才有说服力，除此之外，蛋白标准还有表示转移成功或者蛋白在凝胶上的电泳程度等等的作用，所以选择正确的蛋白Marker也是western blot实验成功的必要条件之一。 总体来说，蛋白分子量标准可以分成未染蛋白分子量标准、预染蛋白分子量标准二个级别。以下是关于蛋白分子量标准的小叙： 一. 未染色(pre mixed)蛋白分子量标准 未染色的蛋白分子量标准是最简单，也是最准确的一种。由于没有附带染料分子或者是标记分子，所示大小正好是蛋白原本的大小，是精确判断蛋白大小必须的。现在的Marker多数都选用预混和的Marker，方便不同大小的蛋白比较。预混的Marker通常有几条带加倍浓度作为指示，因为混合的条带越多，越不好记，谁知道哪条是那条!数到眼都花了。所以当看到特别浓的那几条标志带就记得是哪里了。不过要记得，小带通常都不那么容易看清楚的。在选择上来说，当然是选择其中至少有一条条带和自己的目的蛋白大小相近的最好，越近越好。如果你的蛋白不幸在两条跨度较大Marker条带之间，选别的Marker吧。预混的Marker 使用上不如预染Marker(pre-stained)好用，因为电泳过程中完全看不到，要和目标蛋白一起等到最后染色才―开蛊‖，无法对实验起预示参照作用。完全属于―后知后觉‖型的，当然还是比―不知不觉‖不做对照的要好。 ①宽分子量蛋白标准

低分子量蛋白质Marker(14.4kD-97.4kD)使用说明

低分子量蛋白质Marker（14.4kD-97.4kD)使用说明 货号：PR1400 规格：20T 保存：-20℃可保存至少一年。避免反复冻融，建议分装保存。 产品简介： 低分子量蛋白质Marker包含6种蛋白质混合物的冻干粉，分子量范围为14.4kD-97.4kD，每种蛋白的含量约为20-30μg。经过SDS-PAGE（聚丙烯酰胺凝胶）电泳后，用考马斯亮蓝染色可以得到分布均匀密度相近的6条带。可以用来判断SDS-PAGE电泳后蛋白质的分子量。 使用说明： 1.开封后，溶于400μL体积的1×蛋白上样缓冲液（含巯基还原剂），于沸水浴中加热5分钟，冷却后可根据需要进行小量分装，每管20μL，-20℃贮存，每次取一管使用。 2.如长期贮存后使用，使用前最好取分装后的小管沸水浴预热3-5分钟后再上样电泳，用考马斯亮蓝G-250染色后可见6条蛋白带(见下示意图)。 注意事项： 1.建议分离胶浓度12%，浓缩胶浓度5%，制胶时先配制分离胶，聚合后再配制浓缩胶。电泳时，80v电压大约跑1小时后，待指示剂沿到达分离胶上沿时，将电压调至120v，直到电泳结

束。整个电泳过程大约需3-4个小时。 2.电泳之后可将胶进行染色观察，如果使用配方进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液，该试剂具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。 相关试剂： P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT） P10164×蛋白上样缓冲液（含巯基还原剂） T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 P1300-1SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 P1300-500考马斯亮蓝快速染色液

Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明

Bradford蛋白浓度测定试剂盒使用说明 货号：PC0010 规格：2500T 保存：开封使用后请密封保存，本试剂盒自订购之日起九个月内有效。 产品内容： 组成包装（2500微孔)保存 5×G250染色液100ml2-8℃ PBS稀释液30ml2-8℃ 蛋白标准(5mg/ml BSA)1ml-20℃产品简介： 考马斯亮蓝G-250染料，在酸性溶液中与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰的位置（Imax），由465nm变为595nm，在一定的浓度范围内，测定的吸光度值A595与蛋白质浓度成正比。Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，样品中巯基乙醇的浓度可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM，但受略高浓度的去垢剂影响，需确保SDS的浓度低于0.1%，Triton X-100低于0.1%，Tween20,60,80低于0.06%。 操作说明： 一．微孔酶标仪法 1.完全溶解蛋白标准品，取10ul，稀释至250ul，使终浓度为0.2mg/ml。待测蛋白样品在什么溶液中，标准品也宜用什么溶液稀释。但是为了简便起见，也可以用0.9%NaCl 或PBS稀释标准品。

2.5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取1ml5×G250染色液，加入4ml双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。 3.将标准品按0,2,4,6,8,12,16,20微升分别加到96孔板中，加PBS稀释液补足到20微升。 4.将样品作适当稀释（最好多做几个梯度，如作2倍、4倍、8倍稀释），加20微升到96孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点可能不很准确，所以尽可能的让样品点落在标准线1/2后。 5.各孔加入200微升稀释后的1×G250染色液，室温放置3-5分钟。 6.用酶标仪测定A595，或560-610nm之间的其它波长的吸光度。 7.根据标准曲线计算出样品中的蛋白浓度。 二．分光光度计法 如无酶标仪，染色反应可在离心管中进行，反应液混匀后加入比色皿中，使用分光光度计测定吸光值。 步骤如下： 1.取八支（或者更多）干净的10ml离心管，标记上号。 2.取100ulBSA加入PBS2.4ml稀释至终浓度为0.2mg/ml。 3.5×G250染色液使用前请颠倒3-5次混匀，取10ml5×G250染色液，加入40ml 双蒸水，混匀成1×G250染色液，此1×G250染色液可在4℃保存一周。 4.按下表加入试剂(以每孔5ml计，多余的用来清洗比色皿)

中分子量蛋白Marker

中分子量蛋白Marker I 使 用 说 明 书 包 装 量： 浓 度：每种蛋白约0.1－0.2mg/ml 在1×loading Buffer 储运温度：收到产品后分装冻存，避免反复冻融降解蛋白，-20℃ (长期保存请置于-70℃ )(用于小胶5μl/次 可用20次 用于大胶10μl /次 可用10次) 制品说明：本产品是由6种蛋白质分别纯化后混合而成的蛋白质溶液，分子量范围为14KD －94KD ，经SDS －聚丙烯酰胺凝胶电泳后，用考马斯亮蓝R －250（Coomassie Blue R-250）染色后可得清晰的7条蛋白带。建议使用分离浓度为12%～15%。 适用胶浓度：最优适用于12% (37.5:1 丙烯酰胺:双丙烯酰胺)的聚丙烯酰胺凝胶。 该Marker 也可用于8-15%的胶。胶浓度为8-10% 时蛋白Marker 中低分子量的蛋白易于同染料前沿跑在一条线上不易区分，在12-15%的胶上及梯度电泳中，所有的条带都能锐利清晰分开。 推荐上样量： 上样量 胶厚度大小 5μl 0.75mm thick mini 10μl 1.5mm thick mini 0.75mm thick large 20μl 1.5mm thick large 操作步骤： 1. 室温融解Marker 或37- 40°C 温浴几分钟使之融解，混匀均一，不要高温加热。 2. 为避免污染最好分装保存以备使用，取所需体积的Marker 置于一干净离心管中并封好口。 3. 上样并进行 SDS-PAGE 电泳。

4.该Marker适用于考马斯亮蓝, 银染或其他蛋白染色方法。 注意：银染比考马斯亮蓝染色敏感度高10～100 倍，相应的银染需要减少用量。 5.变性蛋白Marker储存于-20°C。 6.在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳中不要使用该Marker，因为在该Marker的储存缓冲液中存在SDS。 质量检测： 5μl 的该Marker 用于12% 的凝胶进行SDS-PAGE电泳(mini gel)并用考马斯亮蓝R-250染色,能得到6条亮度相同的锐利条带。 NOT FOR HUMAN OR DRUG USE

TaKaRa 蛋白质分子量标准(低)

? o Protocols o Standard Protocol o Manual/Datasheet ? Cat.# Product Size Note 3450 Protein Molecular Weight Marker (Low) 200 lanes 3451 Protein Molecular Weight Marker (High) 200 lanes 3452 Protein Molecular Weight Marker (Broad) 200 lanes Description Protein Molecular Weight Markers are designed for use in SDS-Polyacrylamide gel electrophoresis. There are 3 kinds of Protein Molecular Weight Marker, Low (Molecular weight range : 14.3 - 97.2 kDa) , High (Molecular weight range : 44.3 - 200 kDa) and Broad (Molecular weight range : 6.5 - 200 kDa). Each protein is proportioned to yield uniform band intensities when perform staining Coomassie Brilliant Blue R-250 after run on SDS polyacrylamide gel. 5μl of 20-fold diluted marker is loaded per lane of SDS-PAGE minigel for standard use. In this case, this marker is sufficient for 200 lanes. Electrophoresis Result Low(Cat.# 3450) High(Cat.# 3451) Broad(Cat.# 3452) 15% SDS-PAGE 7.5% SDS-PAGE 5-20% gradientSDS-PAGE Storage

预染超低分子量蛋白质Marker(3.3kD-31.0kD)说明书

预染超低分子量蛋白质Marker（3.3kD-31.0kD)说明书 货号：PR1900 规格：20T(200μ1) 保存：-20℃保存，有效期为一年。避免反复冻融，建议分装冻存。 产品简介: 本产品包含预染的3种多肽和2种低分子量蛋白质组成，分子量范围为3.3kD-31.0kD。可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经Tricine-甘油SDS-PAGE凝胶电泳时以及转移到PVDF或NC膜上可看到清晰的5条蓝色的蛋白条带。本品为蛋白质和多肽混合物的冻干粉，每种预染蛋白含量约为40μg，配有一支1×上样缓冲液。 使用说明: 1.开封后，溶于200μ11×上样缓冲液，可根据需要进行小量分装，每管10μl，-20℃贮存，每次取一管使用，避免反复冻融。 2.使用前取分装后的小管室温融化后即可上样电泳。 电泳示意图： 凝胶的配置方法: 分离胶夹层胶浓缩胶 20%/4.5ml16.5%/4.5ml15.5%/4.5ml10%/2ml4%/2ml 49.5%T3%C///0.407ml0.160ml 49.5%T6%C1.82ml1.50ml 1.395ml// 凝胶缓冲液 1.50ml 1.50ml 1.50ml0.667ml0.496ml 甘油0.48ml0.48ml0.48ml//

ddH 2 O0.70ml1.02ml1.125ml0.926ml1.344ml 10%PAGE胶凝固剂40μl40μl40μl20μl20μl PAGE胶促凝剂5μl5μl5μl3μl3μl 凝胶制备及染色注意事项: 1.先配制分离胶，聚合后再配制夹层胶，最后配制浓缩胶，3种胶的制胶体积比为4:1.5:1。电泳时，30V 跑1-2h后，待指示前沿到达分离胶上沿时，把电压调至100V，至电泳结束，整个电泳过程大约需要6-8h。 2.电泳之后可将胶置于固定液中固定20min，再进行染色，能得到较好的蛋白条带；如时间不允许，也可不进行固定直接染色。如果使用配方7进行染色时效果不好或考虑其毒性，请选择本公司的考马斯亮蓝蛋白胶快速染色液(货号:P1300)，该产品具有染色快，无毒，灵敏性高等特点，是常规染色液的替代品。 3.由于多肽所含的氨基酸数目较少，因此如该多肽含有过多的极性氨基酸(碱性或酸性)，则会影响其在SDS-PAGE图上的条带迁移率，即其表观分子量可能和多肽的氨基酸理论推算分子量有一定距离。 4.由于SDS-PAGE的图谱上，蛋白质对数分子量和迁移率成正比直线关系的分子量范围为15,000-200,000，因此对于分子量小于10000的蛋白质或多肽的分子量，只能根据标准分子量进行估计，推断其是否落入预测的分子量范围。 5.由于超低分子量多肽（3000及3000以下），极易从凝胶上浸出，因此染色及脱色时间不宜太长，脱色后凝胶也不宜在水中浸泡保存过久，否则条带会消失。 附:小分子蛋白质SDS-PAGE电泳试剂配制 1.49.5%T3%C(配制夹层股和浓缩胶) Acr48g Bis 1.5g 用ddH 2 0溶解后定容至100ml 2.49.5%T6%C(配制分离胶) Acr46.5g Bis 3.0g 用ddH 2 0溶解后定容至100ml 3.凝胶缓冲液

彩虹245广谱蛋白marker说明书

彩虹245广谱蛋白marker说明书 货号：PR1920 规格：20T (100μ1)/50T(250μ1) /100T(250μ1×2) /500T(250μ1×10) 保存：-20℃保存，有效期至少2年。 产品特点： ?三色预染，颜色鲜亮，条带整齐，便于观察。 ?稳定性能突出，经检测4℃放置两年无明显降解。 ?用量少，节约成本，仅5ul即可完美呈现（1.5mm，10孔梳）。 ?广谱多带，一支即可满足多种实验需求。 产品简介： 本产品包含12种彩色预染的已知分子量标准蛋白，分子量范围为11kD-245kD，每种蛋白含量约为0.2-0.4mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC膜上可得到清晰的10条彩色蛋白条带，其中25kD为绿色条带，75kD为红色条带，其余10条是蓝色条带。 使用说明： 1. 本产品是即用型液体，可直接上样电泳。上样前无需加热，稀释或添加还原剂。 2. 上样5ul，SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。 3. 建议分离胶浓度为15% 。 电泳示意图说明：

彩虹245广谱蛋白marker经15%浓度的SDS-PAGE凝胶电泳后，转移至PVDF膜上。 注意事项： ?本产品含有较高浓度甘油，常规-20℃保存为液体状态，可直接使用。若冰箱温度不稳，导致结冰，可适当分装后置于4℃保存，至少稳定6个月。 ?Marker分离效果与PAGE胶浓度相关，若分离胶浓度低于15%，25kD以下条带不易分离，但不影响绿色（25KD）及以上条带。如果目的条带小于25KD，建议分离胶浓度大于或等于15%。 ?转膜效果与转膜时间有关，需根据客户目的条带大小而定，如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜成功，属于正常现象。 相关产品： P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT） A101030%丙烯酰胺(29:1) P1300-1SDS-P AGE凝胶制备试剂盒 T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 D106010×电泳转移缓冲液 PR1910彩虹180广谱蛋白marker

5×蛋白上样缓冲液(含DTT)使用说明

5×蛋白上样缓冲液（含DTT）说明书 货号：P1040 规格：10ml 保存：-20℃保存，建议分装冻存，避免反复冻融，自发货之日起至少12个月有效。 产品简介： 5×蛋白上样缓冲液（含DTT）适用于SDS-PAGE(SDS-变性聚丙烯酰胺凝胶电泳)时作蛋白质上样用。其主要成份为SDS，DTT，溴酚蓝，缓冲盐溶液等。SDS可与蛋白质结合使蛋白质-SDS复合物上带有大量的负电荷，这时蛋白质本身的电荷完全被SDS掩盖，消除了各种蛋白质本身电荷的差异；SDS还可以断开分子内和分子间的氢键，破坏蛋白质分子的二级和三级结构。DTT可以断开半胱氨酸残基之间的二硫键，破坏蛋白质结构，消除了蛋白结构之间的差异。最终无电荷及结构上差异的蛋白（亚单位），电泳速度只是与其分子量大小有关。溴酚蓝用作电泳时的指示剂，可大概指示电泳结束的时间。 使用说明： 1、请按每40微升蛋白样品加入10微升上样缓冲液的比例(5倍稀释)来使用。如果蛋白样品浓度过高，可用双蒸水稀释。 2、混匀后，100℃水浴加热5-10分钟，使蛋白变性。 3、冷却至室温后，10000-14000rpm离心2-5分钟，取上清直接上样电泳即可。 注意事项： 4、聚丙烯酰胺凝胶浓度为8%时溴酚蓝指示条带的位置大概在30kd左右，胶浓度为12%时，约在20kd左右，胶浓度为15%时，大概在10kd。请根据自己目的条带来判断电泳时间。 5、本试剂因含DTT，有一定的毒性，为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

6、蛋白上样缓冲液含有溴酚蓝指示剂，PH值受保存温度影响，在低温冻存状态下，溶液可能会呈现深棕色，不影响产品使用。 相关产品： P10182×蛋白上样缓冲液（含DTT） P10174×非变性蛋白上样缓冲液 P001210×丽春红染色液 P1300-500考马斯亮蓝快速染色液 P1300SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 PR1700预染次高分子量蛋白MARKER

GE SDS marker kit说明书

LMW-SDS marker kit (17-0446-01) SDS低分子量标准试剂盒 SDS低分子量标准试剂盒是由六种高纯度的已鉴定蛋白(分子量：14,400-97,000)的干粉混合物组成，用于SDS－PAGE电泳中分子量的测定。通过比较待测蛋白和试剂盒中已知分子量蛋白的电泳迁移率，推出未知蛋白的分子量。每瓶含有 576μg 蛋白混合物。该试剂盒储存于2－8°C 。 SDS 低分子量标准 (14 000?97 000) 蛋白 分子量 来源 量（ug) Phosphorylase b 97 000 rabbit muscle 67 Albumin 66 000 bovine serum 83 Ovalbumin 45 000 chicken egg white 147 Carbonic anhydrase 30 000 bovine erythrocyte 83 Trypsin inhibitor 20 100 soybean 80 α-Lactalbumin 14 400 bovine milk 116 两倍稀释后每个泳道上样3ul，采用自制的15％T，2.7%C凝胶在SE260电泳槽上20mA恒流电泳1小时55分钟,考染结果。 1. 重溶： 按下述方法直接重溶，六种标准蛋白将溶于25％蔗糖溶液中，所以样品缓冲液中不必加入密度增强剂。为了更好的重复性，避免反复冻溶蛋白溶液，最好将其分装，于-80oC可保存3个月。 考马斯亮兰染色： 对于Laemmli 胶,每支瓶加入 200 μl标准的1x样品缓冲液[0.0625 M Tris-HCl,2% SDS,10% (v/v) 甘油(可选的),0.1 M DTT 和 0.01% 溴酚蓝,pH 6.8]。 对于 PhastGel T M , ExcelGel T M 和 CleanGel T M 预制胶，每支瓶加入 200μl[10 mM Tris-HCl,2% SDS, 0.1 M DTT,0.01% 溴酚蓝和 1 mM EDTA, pH 8.0]。 银染： 像上述考染一样，每支瓶加入200ul相应的溶液，然后用1x样品缓冲液稀释50倍。 2.蛋白变性 将重溶的蛋白溶液于 95–100°C 加热 5 分钟。 3. 上样 从表中选择合适的上样量： 凝胶类型 上样量（ul) 小型垂直电泳（8 x 10cm) 1-8 标准垂直电泳（14x16cm) 2-8 Multiphor II 水平电泳 1-3 PhastSystem 水平电泳 0.3-4

所有的Fermentas蛋白Marker(新)

Fermentas 蛋白Marker/Ladder 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 编号 货号 名称 包装报价推荐上样量 使用次数 预染蛋白Marker/Ladder SM0671 2x250μl 870 1 SM067 2 PageRuler? Prestained Protein Ladder 10x250μl 3480 5/10ul （小/大） 100/50（大/小） SM1811 2x250μl 1100 2 SM1812 PageRuler? Plus Prestained Protein Ladder 10x250μl 4400 5/10ul （小/大） 100/50（大/小） SM1841 2x250μl 1000 3 SM1842 Spectra? Multicolor Broad Range Protein Ladder 10x250 μl 4500 10/20ul （小/大） 50/25（大/小） 4 SM1851 Spectra? Multicolor High Range Protein 2x250 μl 1300 10/20ul （小/大） 50/25（大/小） 5 SM1861 Spectra? Multicolor Low Range Protein 1x250 μl 1200 5/10ul （小/大） 50/25（大/小） 6 SM0441 Prestained Protein Molecular Weight Marker 2x250μl 400 5/10ul （小/大） 100/50（大/小） 非预染蛋白Marker/Ladder 7 SM0431 Unstained Protein Molecular Weight Marker 2x1000μl 400 5/10ul （小/大） 400/200（大/小）8 SM0661 PageRuler? Unstained Protein Ladder 2x250μl 500 5/10ul （小/大） 100/50（大/小） 9 SM1881 PageRuler? Unstained Broad Range Protein 2x250 μl 500 5/10ul （小/大） 100/50（大/小） 10 SM1891 PageRuler? Unstained Low Range Protein 2x250 μl 500 5/10ul （小/大） 100/50（大/小）

Western Blot Marker说明书

Western Blot Marker说明书 货号：PR1800 规格：10T(50μL)/20T(100μL) 保存：-20℃可保存2年。避免反复冻融，建议分装保存。 产品简介: 传统的Western Blot试验需要使用预染蛋白Marker来跟踪检测阳性抗原信号和转膜效率，但预染蛋白Marker无法在胶片上曝光，曝光信号需要根据膜上的预染蛋白Marker来判断。Western Blot Marker是专门为Western Blot试验设计的分子量标准，由9种发光蛋白和9种预染蛋白组成；9种发光蛋白分别为23、30、36、44、50、62、90、120和160KDa，这些蛋白均可与抗体结合，因此能与抗原在同一张膜上曝出信号，阳性信号可以直接通过Western Marker的位置来判断；9种预染蛋白分别为15、25、35、40、55、70、100、130和180KDa，其中70KDa为红色，其他为蓝色，转膜完毕后在膜上肉眼可见。 主要特征： 1.可与抗原同时检测信号，使Western blot结果判断更加简便 2.发光Marker没有偶联和标记其他分子，分子量更加准确 3.综合发光Marker和预染Marker的优势，既能监测转膜又能与抗原同时检测 使用说明: 1.取出后于室温放置融化； 2.温和地充分混匀，取5-10μL该Western Blot Marker至上样孔中，进行SDS-PAGE电泳。 3.电泳完毕后转至PVDF膜或NC膜，与一抗二抗孵育。 4.孵育完毕，将Western Blot Marker与抗原一起通过ECL曝光至胶片或荧光显色。 图示： 1、HRP标记的Goat anti mouse IgG二抗（一抗：mouse anti p38）ECL化学发光检测 第1页，共2页

Western Blot marker

预染发光Western Blot Marker 120 Cat.No.: C0301 Size: 100 μl (20~50次) 描述：海基预染发光Western Blot Marker 120是专门为Western Blot试验设计的分子量标准。传统的Western Blot 试验需要使用预染蛋白Marker来跟踪检测阳性抗原信号和转膜效率。但预染蛋白Marker无法在胶片上曝光，曝光信号需要根据膜上的预染蛋白Marker来判断，另外预染蛋白Marker都经过化学修饰，经过化学修饰的蛋白在SDS-PAGE电泳过程中迁移率发生改变，分子量信息不再准确，往往导致Western Blot结果判断出现较大偏差。海基Western Blot Marker由7种不同分子量的蛋白组成(14、20、22、35、60、70、120 KDa)，其中14、20、70KDa三条带为蓝色预染蛋白，用于SDS-PAGE胶电泳时控制蛋白的电泳分离率和监测蛋白转膜效率，其他4种蛋白都可与人、小鼠、大鼠、山羊、绵羊、兔的IgG恒定区结合, 因此该发光Western Blot Marker就能与抗原在同一张胶片上曝出信号，阳性信号可以直接通过Western Blot Marker的位置来判断。另外，发光Western Blot Marker还可作为Western Blot试验的阳性对照。 储存：-20°C保存，有效期2年。避免反复冻融，建议分装后于-20°C保存。 使用方法 1. 于-20°C 或4°C冰箱取出后于室温放置融化，务必使其完全融合，否则影响实验结果； 2. 温和地充分混匀，取5~10 μl该预染发光Western Blot Marker120至上样孔中，进行SDS-PAGE电泳。 3. 电泳完毕后转至PVDF膜或NC膜，与一抗二抗孵育。 4. 孵育完毕，将预染发光Western Blot Marker 120与抗原一起通过ECL曝光至胶片。 注意： 1. 本产品可直接使用，不需要加热。 2. 该产品与少数抗血清或高浓度多克隆抗体一起孵育时可能会出现非特异性条带，此时可降低该预染发光Western Blot Marker的上样量。 3.使用新配制的凝胶，及时更换电泳缓冲液和转膜液，以免影响实验结果。

彩虹180广谱蛋白marker使用说明

彩虹180广谱蛋白marker使用说明 货号：PR1910 规格：20T(100μL)/50T(250μL)/100T(250μL×2)/500T(250μL×10) 保存：-20℃保存，有效期至少2年。 产品特点： ●三色预染，颜色鲜亮，条带整齐，便于观察。 ●稳定性能突出，经检测4℃放置两年无明显降解。 ●用量少，节约成本，仅5ul即可完美呈现（1.5mm，10孔梳）。 ●广谱多带，一支即可满足多种实验需求。 产品简介： 彩虹180广谱蛋白marker包含10种彩色预染的已知分子量标准蛋白，分子量范围为11kD-180kD，每种蛋白含量约为0.2-0.4mg/ml。预染marker可以用于直接观察蛋白质电泳状况以及清晰地判断Western Blot的转膜效果。经SDS-PAGE凝胶电泳或转移到PVDF或NC 膜上可得到清晰的10条彩色蛋白条带，其中25kD为绿色条带，75kD为红色条带，其余8条是蓝色条带。 使用说明： 1.彩虹180广谱蛋白marker是即用型液体，可直接上样电泳。上样前无需加热，稀释或添加还原剂。 2.上样5ul，SDS-PAGE电泳过程及转膜后可看见清晰的彩虹条带。 3.建议分离胶浓度为15%。 电泳示意图说明：

彩虹180广谱蛋白marker经15%浓度的SDS-PAGE凝胶电泳后，转移至PVDF膜上。 注意事项： 1.本产品含有较高浓度甘油，常规-20℃保存为液体状态，可直接使用。若冰箱温度不稳，导致结冰，可适当分装后置于4℃保存，至少稳定6个月。 2.Marker分离效果与PAGE胶浓度相关，若分离胶浓度低于15%，25kD以下条带不易分离，但不影响绿色（25KD）及以上条带。如果目的条带小于25KD，建议分离胶浓度大于或等于15%。 3.转膜效果与转膜时间有关，需根据客户目的条带大小而定，如果转膜后较大分子量条带有部分未转膜成功，属于正常现象。 相关试剂： P10154×蛋白上样缓冲液（含DTT） P1300-1SDS-PAGE凝胶制备试剂盒 T10705×Tris-甘氨酸电泳缓冲液 D106010×电泳转移缓冲液 PR1920彩虹245广谱蛋白marker