western+blotting实验操作步骤
蛋白免疫印迹杂交（Western Blot, WB）WB是将蛋白样本通过聚丙烯酰胺电泳按分子量大小分离，再转移到杂交膜上，然后通过一抗/二抗复合物对靶蛋白进行特异性检测的方法。WB 是进行微量蛋白质分析比较成熟的技术之一。以下是总结Western Blot 操作方法及常见问题分析，有助于成功完成WB。
A第一部分：蛋白样本提取制备
蛋白样品制备是Western Blotting的第一步，更是决定WB成败的关键步骤，总体原则和注意事项：
1.尽可能提取完全或降低样本复杂度只集中于提取目的蛋白（通过采用不同提
取方法或选择不同的试剂盒产品）；
2.保持蛋白处于溶解状态（通过裂解液的pH 、盐浓度、表面活性剂、还原剂
等的选择）；
3.提取过程防止蛋白降解、聚集、沉淀、修饰等，（低温操作，加入合适的蛋
白酶和磷酸酶抑制剂）；
4.尽量去除核酸，多糖，脂类等干扰分子（通过加入核酸酶或采取不同提取策
略）；
5.样品分装，长期于-80℃中保存，避免反复冻融。
方法的选择
◆自行配制抽提试剂，根据文献方法或经验提取；
◆购买商品化试剂盒，按其说明书的方法提取。
Example 1：
实验中提取肾脏总蛋白，具体实验过程如下：
1.提前一天4℃解冻RIPA，一定要完全融化；配PBS（用于细胞试验则需高压）；
2.配制裂解液：PMSF:RIPA=1:99,PMSF终浓度为100mM（根据样本数配制所需
的量，临用临配）；
3.裂解组织：每个样品称取100mg，加1ml裂解液，匀浆后4℃静置2h使其充分
裂解，14000g，4℃离心10min，取上清。
4.蛋白定量：取少量上清稀释30倍蛋白定量，然后计算出各样本原液蛋白浓度。
注意由于裂解液里含有较高浓度的洗涤剂，蛋白定量不能选用Bradford法，可以选用改良的Lowry’s法或者BCA法。
5.样品蛋白浓度均一化：根据蛋白定量计算的结果将各样品蛋白浓度调整一致。
具体方法为加入PBS稀释至样品浓度一致，本次蛋白浓度为3mg/ml。
6.分装并存于-80℃，避免反复冻融。
B 第二部分：
相关试剂的配制：
1.10%的SDS（戴口罩称取）：
称取SDS10g，先加双蒸水80ml，再用磁力加热搅拌助溶，然后定容至100ml。室温保存，如在长期保存中出现沉淀，可在50℃水浴溶化后，仍可使用。
2. 1.5M Tris/HCL（pH8.8）
Trisbase 18.17g，溶解于80ml双蒸水，用浓盐酸调pH至8.8，最后定容至100ml，室温下保存。
3.0.5M Tris/HCL（pH6.8）
Trisbase 6.06g，溶解于80ml双蒸水，用浓盐酸调pH至6.8，最后定容至100ml，室温下保存。
4.30%丙烯酰胺/0.8%N,N’-亚甲丙烯酰胺
丙烯酰胺（Acr）75g
甲叉双丙烯酰胺2g
加双蒸水150ml，37℃加热溶解后，定容至250ml，查证该溶液pH应不大于7.0，4℃棕色瓶保存。使用时恢复至室温且无沉淀。
Be careful!!!：丙烯酰胺具有很强的神经毒性并可通过皮肤吸收，其作用具有累积性。称量丙烯酰胺和N,N’-亚甲丙烯酰胺时应戴手套和口罩。可认为聚丙烯酰胺无毒，但也应谨慎操作，因为它还可能含有少量未聚合材料。
5.上样缓冲液
0.5m M Trisbase(pH6.8) 2.5ml
甘油 2.0ml
10％SDS 4.0ml
0.4%溴酚蓝（mw669.97）1ml
二巯基乙醇（mw78.14）0.5ml
注：配好后分装-20℃保存。
6.电泳缓冲液
10倍储存液1倍应用液Trisbase 30g 3g
甘氨酸144g 14.4g
SDS 10g 1g 加水至1000ml，PH值用HCl调8.3。已经配制了1000ml的储存液。电泳缓冲
液用应老师的电泳槽应用液300ml。用10倍的储存液30ml加入水270ml。
7.转移缓冲液（临用临配，铁盒子里搅拌混匀并4℃预冷）：
Tris base 甘氨酸H2O（ml）甲醇（ml）终体积（ml）
0.606g 2.88g 160 40 200
2.424g 11.52g 640 160 800
2板胶转移缓冲液的用量约为200ml。
8.洗涤缓冲液（TBS）
10倍储存液1倍应用液
Tris base 24.2g 2.42g
NaCl 80g 8g
加水800ml，用HCL调整PH为7.6，再加水至1000ml，已经配制了1000ml 的TBS液，临用时再加0.1%的Tween-20。一般做两板胶要用洗涤缓冲液500ml；用储存液50ml加入450ml水，后加0.5ml Tween-20。
9.封闭缓冲液（5%脱脂奶粉）—10ml/膜
脱脂奶粉2g
洗涤缓冲液40ml
两板胶4张膜要用封闭缓冲液40ml。
具体实验步骤：
准备：
准备器材：10%过硫酸铵；冰盒；预热恒温加热器；拿出试剂（双丙和TEMED 提前从冰箱拿出平衡，否则凝胶过程产生的热量会使低温时溶解于储存液中的气体析出而导致气泡）；电泳仪器；洗干净的板子和梳子；滤纸条用于吸水；剪刀；尺子；
剪好的膜（根据目的蛋白分子量以及样品个数决定）及比膜稍大些的干净滤纸；脱脂奶粉；干净的装封闭液的容器约50ml大小；
提前清洗玻璃板并晾干：注意不要用清洁球之类的粗糙物品清洗玻璃板，可用洗洁精泡约2h，用自来水冲洗后再用蒸馏水冲洗干净，置于架子上晾干。
做胶
分离胶：
1.先称取过硫酸胺，配两板胶用10％的过硫酸胺150μl，一般要称取过硫酸胺0.2--0.3mg，溶解到相应量的双蒸水中，混匀。
分离胶（括号里为2板胶的用量）
试剂7.5％10％12％15％
水(ml) 4.9 (7.35) 4.1(6.15) 3.4(5.1) 2.4(3.6) (ml) 1.5MTris/HCl
2.5(
3.75) 2.5(3.75) 2.5(3.75) 2.5(3.75)
(pH=8.8)
丙/双丙烯酰胺 2.5(3.75) 3.3(4.95) 4.0(6.0) 5.0(7.5) 10%SDS 100,(150) 100,(150) 100,(150) 100,(150)
50,7550,7550,7550,75 10%过硫铵
(μl)
TEMED 10,1510,1510,1510,15适用蛋白分子量＞100kDa 60-100kDa 20-60kDa ﹤20kDa
玻板间夹上胶条，用夹子将两块玻板夹紧。按以上方法配胶，加入TEMED 后立即摇匀即可灌胶。灌胶时，可用10ml 枪吸取5ml 胶沿玻璃放出，将胶加入到玻璃板的夹层中。加入的量略高于夹子的最高处（或者胶面升到绿带中间线高度时即可）加好后加入1ml的水压胶。做分离胶时，凝固时间大约为25－40分钟，要根据温度来确定。一般可以依据剩下在离心管中的胶的凝固情况来确定胶的凝固。当水和胶之间有一条折射线时，说明胶已凝了。再等3min 使胶充分凝固就可倒去胶上层水并用吸水纸将水吸干。
注意：
旧的1.0mm的板子短的玻璃在里面，新的在外面。
过硫酸铵一般现配现用。
注意各种试剂加入的顺序，“三大三小”，后面加过硫酸铵，最后加TEMED。 配制过程中每加入一种试剂要充分混匀，防止胶出现浓度不均的情况。
要根据温度调整TEMED的使用量。夏天凝结的快，冬天凝结的慢。冬天如果凝结的慢，两板胶可以加TEMED 20-30μl。
水封的时候水要慢慢加入，太快会导致胶面不平，封胶后切记勿动。
胶通常在0.5～1h内凝集最好，过快胶太硬易龟裂，而且电泳时容易烧胶。下一步实验准备
a 准备样品：
1．预热微量恒温器（98℃）；
2．准备一套中EP管并标记，以用于混匀样品和上样缓冲液；
3．取出样品，marker，上样缓冲液置于冰上；
4．样品：上样缓冲液=3:1混匀，置于微量恒温器上98℃5min变性；
b 配制电泳缓冲液；
c 配4％浓缩胶，TEMED临用时加。
浓缩胶（括号里为2板胶用量）
水 3.00ml (4.5ml)
0.5MTris/HCl(PH=6.8) 1.25ml (1.875ml)
丙/双丙烯酰胺（30%/0.8%）0.67ml (1.005ml)
10%SDS 50μl (75μl)
过硫酸胺（10％）50μl (75μl)
TEMED 5μl (15μl)
胶凝固后，迅速向上将梳子拔下，将玻璃板夹上电泳架，完整的玻璃板在外围。电泳槽中倒入电泳缓冲液（约300ml）。加足够的电泳液后开始准备上样。（电泳液至少要漫过内侧的小玻璃板）。
注意：
浓缩胶的加入很重要，由于其硬度比分离胶小，而且还要加入梳子，掌握其凝固的时机很重要。太迟胶要粘住梳子，太早胶凝固不好。用Bio-Rad的玻璃板用TEMED 15μl，在温度为22℃时凝固的时间为10分钟左右，温度再高一些可以达到8~9分钟，低一些可以延长一些。胶的凝固很快，主要是加入TEMED后的动作要迅速，以免在离心管中凝固了。加入的量要与玻璃板的最高线平行。灌胶时也要使胶沿玻璃板流下以免胶中有气泡产生。插梳子时要使梳子保持水平。由于胶凝固时体积会收缩减小，从而使加样孔的上样体积减小，所以在浓缩胶凝固的过程中要经
常在两边补胶（其实说经常有点过了，补1~2 次就行了，不补胶问题也不大）。待到浓缩胶凝固后，两手分别捏住梳子的两边竖直向上轻轻将其拔出。插梳子要用力均匀，一次成型，且要注意梳子插入时哪面朝内哪面朝外。
加样（加变性后的样品）：
用微量进样器或加样吸头吸入样品20μl，加入到加样孔中。用微量进样器贴壁吸取样品，将样品吸出时不要吸进气泡。将加样器针头插至加样孔中缓慢加入样品。（加样太快可使样品冲出加样孔，若有气泡也可能使样品溢出。）加入下一个样品时，进样器需在外槽电泳缓冲液中洗涤3次，以免交叉污染。
在第一孔和最后一孔加20μl上样缓冲液以避免边缘效应，第二孔加3μl marker，其他孔加20μl样品（样品加样20-30μl都可以，但不超过30μl,加样量取决于蛋白浓度），保证每个上样孔蛋白浓量为30-50μg。
电泳：
100V，电泳2小时，电泳时要注意电泳槽上的电泳缓冲液的量，较少时，要从下槽中吸取一部分转移到上槽。有时电泳的时间用不到2小时，要依据溴酚蓝的位置确定是否要停止电泳。通常电泳时溴酚蓝到达胶的底端处附近即可停止电泳。
转膜：
蛋白因结合SDS 而带电荷，在电场下从胶中转至膜上，转膜操作根椐电转仪制造商的说明书进行转膜方式分为半干和湿转两种，半干式转膜速度快，而湿式成功率高并特别适合用于分子量大于100 kDa的蛋白。要先将玻璃板撬掉才可剥胶，撬的时候动作要轻，要在两个边上轻轻的反复撬。撬一会儿玻璃板便开始松动，直到撬去玻板。（撬时一定要小心，胶很易裂，要用巧劲）除去小玻璃板后，将浓缩胶轻轻刮去（浓缩胶影响操作），要避免把分离胶刮破。小心剥下分离胶盖于滤纸上，用手调整使其与滤纸对齐，轻轻用玻棒擀去气泡。将膜盖于胶上，要盖满整个胶，
（膜盖下后不可再移动）并去除气泡。
准备：
1.电泳期间，剪好滤纸和膜，宽度由marker及目的蛋白分子量确定，长由加
样孔数决定；
2.配置转膜缓冲液并预冷；
3.PVDF膜用甲醇活化（目的是为了活化PVDF膜上面的正电基团，使它更容
易跟带负电的蛋白质结合，做小分子的蛋白转移时多加甲醇也是这个目
的）。
半干法转膜：
电泳完毕后，用卡片从一角的缝隙撬下一块玻璃板，注意用力适度，用刀将没用的胶切除：浓缩胶，加样孔以外的胶，和溴酚蓝下方的胶。先将PVDF膜和海绵泡在转移缓冲液中，将PVDF膜做好标记：剪刀剪下其一边的两角，一大，一小。将上述东西置于半干转膜仪器上，“三明治”从下往上的顺序依次是：（－）滤纸-胶-膜-滤纸（＋）。用电转缓冲液稍微润湿，转膜100mA 1.5h。注意防止转膜时电源插反。
湿法转膜：
“三明治”从下往上的顺序依次为：(－)海绵-滤纸-胶-膜-滤纸-海绵(＋)，三明治安放的方向确认正确，负极方为带负电的胶里的蛋白，向正极方（膜）的电迁移。100mA转膜一个半小时即可。夹的黑面对槽的黑面，夹的白面对槽的红面。电转移时会产热，在槽的一边放一块冰来降温。蛋白带负电，膜要靠近正极
注意：
1.避免用手直接接触膜，应使用镊子，手指上的油脂与蛋白会封闭转膜效率并易
产生背景污斑；
2.用卡片把玻板撬开时注意用力要轻以免损坏玻板；
3.把胶从玻板上剥离时要保持胶的完整性，以及胶和膜之间不能有气泡。若有气
泡则可用小玻棒轻轻滚下赶走气泡；
4.滤纸胶膜之间的大小，一般是滤纸≥膜≥胶。
5.转膜前要在转膜缓冲液里平衡一下防止胶变形，也有助于进一步去掉可能有碍
于转膜的杂质。还有人在这一步浸泡帮助蛋白复性，可以直接在胶上检测蛋白活性。
封闭：
转膜完成后，将膜从转膜夹中取下，将膜用TBS从下向上浸湿后，移至含有封闭液的平皿中，室温下脱色摇床上摇动封闭1h。注意要将贴胶的一面朝上（正面）的放在封闭盒子中，加入封闭液。4℃过夜。
注意：如果选用AP作为显色方法，封闭时就要选择Tris缓冲系统，不要用PBS，因为PBS滋扰AP。
洗脱（10mim/次，洗脱3次）：
第二天，将封闭液倒掉，加入洗脱缓冲液，室温下摇10分钟，倒掉；再加入洗脱缓冲液，室温下摇10分钟，倒掉；加入洗脱缓冲液，摇10分钟，倒掉。
一抗孵育：
准备：
●拿出配制抗体的新管子并标记（抗体名称，稀释比例，配制日期及所有人）；
●抗体的稀释：用洗脱缓冲液稀释eg.1:200，则10μl加2ml洗脱缓冲液；
●一抗原液用之前要12000rpm离心20s或者用手轻弹使蛋白混匀。
步骤：
加入一抗每小盒2ml（皿用5ml），室温下摇动孵育2小时。
2h后回收一抗。
洗脱：
步骤同前（10mim/次，洗脱3次）。
二抗孵育：
准备：
●拿出配制抗体的新管子并标记（抗体名称，稀释比例，配制日期及所有人）；
●二抗的稀释直接依照稀释倍数用洗脱液稀释；
●二抗原液用之前要12000rpm离心20s或者用手轻弹使蛋白混匀。
步骤：
加入二抗每小盒2ml（皿用5ml），室温下摇动孵育2小时。
1h后回收二抗。
洗脱：
步骤同前（10mim/次，洗脱3次），注意洗第三遍后，不要立即将洗脱缓冲液倒掉。
显影：
辣根过氧化物酶HRP-ECL发光法：
1)配置显影液：2张膜配A和B液各700μl并混匀。
2)准备U盘或者刻录盘，1000枪，枪头，篮子，方盖子，镊子，滤纸，1.5EP
管，显影液。
3)将膜从盒中夹出，滤纸贴角吸干，正面朝上平整的放在方盖子里，将显影剂
用枪打到膜上，尽量不要让膜在盒子里挪动，均匀的在膜上浇显影液3～
5min，倒掉显影液，并用滤纸拭干周围。
4)把膜放入机器（正面朝上），打开电脑，snap软件，此时再推进机器，按钮
变成蓝色，界面中间部分有2个图标，左边为单个拍照，时间在其下调试；
另一个为连续拍照，点击图标后输入曝光时间（推荐30s，可跟据试剂情况
延长到几分钟），3次即可，显影后，另存为As，再保存张export as TIFF
格式。
AP-NBT/BICP显色法：
原理：
本试剂盒采用BCIP和NBT为底物，可由标记于二抗上的AP催化，产生化学显色反应，在蛋白转印膜阳性蛋白条带处形成蓝紫色沉淀，适用于使用AP标记抗体的Western blot。与化学发光类试剂相比，本产品使用方便，可快速获得结果；但检测灵敏度不及化学发光类试剂。
使用方法：
用平头镊子将膜取出，膜的下缘轻轻接触吸水纸，去除膜上多余的漂洗液；正面朝上平整的放在干净的方盖子上，将显影剂用枪均匀浇到膜上，尽量不要让膜在
盒子里挪动，并用不透明物体（如报纸）遮挡光线，室温孵育5～15min，显色20s 后每10s观察一次，至条带明显或有本底出现时用蒸馏水洗涤1～2次即可终止显色反应，放滤纸上晾干即可观察与扫描。
WB过程中常见的问题及可能原因分析
第1章 第1节 化学实验基本方法 第1课时.doc
第一章从实验学化学 单元规划 化学是一门以实验为基础的科学，要让学生学好化学，首先要了解化学学科的这一特征，并引导学生通过实验去学习化学。实验是了解物质性质的最好方法，也是认识元素周期律的最佳途径；通过实验可以感受化学反应与能量的关系，认识并研究能量的利用问题；通过实验还能切实了解材料、环境、绿色化学等问题。教科书把化学实验列为第一章体现了课程标准所反映的教学思想。此外，教科书不仅把“化学实验”作为专题内容，还把它安排在第一章，突出了化学实验的基础性，既起到与初中化学实验以及化学知识的衔接，又为高中化学新知识的学习穿针引线，通过实验把学生引入化学世界，由此决定了本章教学内容的基础性和重要性。 第一节：化学实验基本方法。在强调化学实验安全性的基础上，通过“粗盐的提纯”实验，复习过滤和蒸发等操作。对于蒸馏，则是在初中简易操作的基础上，引入使用冷凝管这一较正规的操作。在复习拓宽的基础上又介绍了一种新的分离和提纯方法——萃取。本节还结合实际操作引入物质检验的知识。这样由已知到未知，由简单到复杂，逐步深入。 第二节：化学计量在实验中的应用。在化学基本概念的基础上，通过实验介绍一定物质的量浓度溶液的配制方法。溶液的配制方法是化学实验基本方法和技能，也是对化学知识的应用。而物质的量的有关知识，作为化学实验中的计量来呈现，从而突出实验主题。 教学重点 1.掌握溶解、过滤、蒸发等基本操作，掌握蒸馏、萃取等分离方法。 2.理解物质的量的概念，掌握一定物质的量浓度溶液的配制方法和应用。 教学难点 物质的量概念及一定物质的量浓度溶液的配制。 课时安排 第一节化学实验基本方法3课时 第二节化学计量在实验中的应用3课时 复习课1课时 第一节化学实验基本方法 整体设计 从容说课 本节从实验室安全注意事项入手，主要提醒学生从实验室规则、安全措施和正确的操作方法等方面重视安全问题。并通过让学生讨论一些实际问题而加深对实验安全的认识。 初中化学已经介绍了药品的取用、物质的加热、仪器的洗涤、天平的使用等基本操作，也介绍了过滤、蒸发等分离方法。本节选择“粗盐的提纯”实验，其目的是：（1）学生已经做过粗盐的提纯实验，在此，从学生的经验出发，既可起到复习的作用，又可降低实验的难度，逐步深入；（2）粗盐的提纯实验中包含着较多的分离操作，而且过滤是所有分离方法中最常用的，有必要让学生掌握；（3）粗盐经溶解、过滤后所得的滤液并不只是NaCl的溶液，仍然含有少量可溶性杂质，需要进一步检验并除去。这样就可以利用这一实验进一步介绍离子检验的方法。 蒸馏的操作在初中只介绍了简易的方法，在此进一步介绍实验室较正规的操作方法，比初中有所提高。而且本节最后介绍了萃取这一新的分离方法，让学生对分离和提纯的方法有更进一步的认识，同时使实验技能进一步提高。 教学重点
分子生物学实验室常用仪器及使用方法
实验指导 目录 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用方法实验二质粒DNA的提取－碱裂解法 实验三琼脂糖凝胶电泳 实验四限制性内切核酸酶的酶切与鉴定 实验五大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 实验六动物组织细胞基因组 DNA提取 实验七 DNA的定量 实验八 PCR基因扩增 实验九琼脂糖凝胶电泳分离与纯化目的DNA 实验十 DNA重组 实验十一动物组织细胞总RNA的提取 实验一分子生物学实验室常用仪器及使用
事实证明，在科学飞速发展的今天，无论从事哪个领域的研究，要想突破，除了有良好的理论基础外，更重要的是依赖于先进的技术和优良的仪器设备以及良好的研究环境。一个标准的分子生物学实验室除了具有一般生物学实验室的常规仪器设备外，还具有一些特殊用途的仪器，这些仪器一般较精密，价格昂贵。下面介绍这些仪器的使用方法和注意事项。 一、冷冻离心机 低温分离技术是分子生物学研究中必不可少的手段。基因片段的分离、酶蛋白的沉淀和回收以及其它生物样品的分离制备实验中都离不开低温离心技术，因此低温冷冻离心机成为分子生物学研究中必备的重要仪器。在国内，有多个厂家生产冷冻离心机，本实验室的高速冷冻离心机为GL-20G-Ⅱ型（上海安亭），落地式。配有角式转头：6×50ml、12×10ml和12×1.5ml。极限转速20000rpm。 1. 安装与调试 离心机应放置在水平坚固的地面上，应至少距离10cm以上且具有良好的通风环境中，周围空气应呈中性，且无导电性灰尘、易燃气体和腐蚀性气体，环境温度应在0～30℃之间，相对湿度小于80%。试转前应先打开盖门，用手盘动转轴，轻巧灵活，无异常现象方可上所用的转头。转子准确到位后打开电源开关，然后用手按住门开关，再按运转键，转动后立即停止，并观察转轴的转向，若逆时针旋转即为正确，机器可投入使用。 2. 操作程序 （1）插上电源，待机指示灯亮；打开电源开关，调速与定时系统的数码管显示的闪烁数字为机器工作转速的出厂设定，温控系统的数码管显示此时离心腔的温度。 （2）设定机器的工作参数，如工作温度，运转时间，工作转速等。 （3）将预先平衡好的样品放置于转头样品架上，关闭机盖。 （4）按控制面板的运转键，离心机开始运转。在预先设定的加速时间内，其运速升至预先设定的值。 （5）在预先设定的运转时间内（不包括减速时间），离心机开始减速，其转速在预先设定的减速时间内降至零。 （6）按控制面板上的停止键，数码管显示dedT，数秒钟后即显示闪烁的转速值，这时机器已准备好下一次工作。 3. 注意事项 （1）离心机应始终处于水平位置，外接电源系统的电压要匹配，并要求有良好的接地线，机器不使用，要拔掉电源插头。
《化学实验基本操作训练》考题及要求(有答案)
《化学实验基本操作训练》考题及要求 答案仅供参考 、说出下列化学实验仪器的名称 6试剂瓶 11量筒12 1000 ml容量瓶13量杯14分液漏斗 1 干燥器2电热套3蒸发皿4洗瓶 5称量瓶7锥形瓶8抽滤瓶9滴瓶10漏斗
、判断题 1、洗净的玻璃仪器如烧杯、试剂瓶等不能倒扣在实验台上。 2、洗瓶尖嘴不能接触容器内壁。 （V ） 3、铬酸洗液不能重复使用。 （X ） 4、量筒洗净后应放在烘箱中烘干。 （X ） 6、化学实验操作过程中，头不可伸入到通风厨中。 7、分析纯、化学纯试剂的标签颜色分别为红色、蓝色。 8、固体试齐煤入广口试剂瓶，液体试齐U 装入细口试剂瓶。 9、可以将鼻孔靠近试剂瓶口去感觉试剂的气味。 5、用烘箱烘干玻璃仪器时，烘箱的温度可设定为 105~110C 。 (V) 15移液管16酸式滴定管17碱式滴定管18刺形分馏柱19直形冷凝柱20球形冷凝柱 25滴管 21布氏漏斗 22烧瓶 23蒸馏头 24接引管
10、在使用容量瓶、分液漏斗前，磨口玻璃塞要用橡皮筋系在瓶口。 11、取用化学试剂时，若没有说明用量则应按照最少量取用：液体取 管底部。（V ） 12、实验过程中，未用完的化学药品不能放回原来的试剂瓶中，要将其丢弃。13、用胶头滴管往容器中加入较少量液体时，胶头滴管要垂直悬空。( V ) 14、采用倾倒法取用液体试剂时，试剂瓶的标签要靠在手心，试剂瓶口不能与承接试剂的容器 口接 触。(X ) 15、为将粉末状固体试剂送入容器的底部，可以使用纸片折成的 V 型槽。( V ) 16、用托盘天平称量固体试剂时，砝码应放在右盘。 ( V ) 17、 称量 0.1200~0.1300g 药品时，要用加重法在分析天平上进行。 (X ) 18、 带有刻度的烧杯可以作用量器使用。 ( X ) 19、 称量瓶不能用手直接接触，而要用纸带套住称量瓶。( V ) 20、 要待分析天平的零点显示稳定后方可进行称量操作。 ( V ) 21、 用移液管移取一定量的液体时，留在移液管尖嘴的少量液体要用洗耳球吹出。 ( X 22、 碱式滴定管通过玻璃珠和橡皮管间的缝隙大小来控制滴定速度。 ( V ) 23、 酸碱滴定管除可用于酸碱滴定外，也可用于量取一定体积的溶液。( V ) 24 、滴定用的锥形瓶在洗净后一定要烘干方可使用。 ( X ) 25、 量筒的刻度值为 上小下大”，滴定管的刻度值为 上大下小”。(X ) 26、 用移液管移取试剂瓶中的液体时，移液管要插入到试剂瓶的底部。 ( X ) 27、 从移液管中放出液体到容器中时，移液管的尖嘴口要接触容器内壁。( V ) 28、 在滴定开始前，滴定管尖嘴部分的气泡可以不予排出。 ( X ) 29、 滴定管使用完后，要洗净并倒置夹在滴定台的蝴蝶夹上。( V ) 30、 如果酸式滴定管的玻璃旋塞处漏液，可以采用在旋塞上涂抹凡士林来处理。( V ) 31、 分液漏斗的旋塞操作方法和酸式滴定管相同。( V ) 32 、从分液漏斗中放出液体时，上下层液体均应从下口放出。 (X ) 33、 普通常压过滤时，漏斗流出口的尖嘴端不能靠在烧杯的内壁。 (X ) 34、 过滤时，要将待过滤液直接倒入漏斗中。 ( X ) 35、 布氏漏斗中不用放入滤纸。 ( X ) 36、 为了维持过滤时滤液较高的温度，应采用热过滤，热过滤又称保温过滤。( V ) 37、 分液漏斗使用前不用检查是否漏液。 ( X ) 38、 减压过滤时，吸滤瓶的支管口要通过橡皮管与真空泵相连。( X ) 39 、抽滤完成后，应先关闭真空泵再拨开抽滤瓶上的橡皮管。 ( X ) 40、 减压过滤简称为抽滤或吸滤，比常压过滤的速度更快。 ( V ) 41、 蒸馏时，圆底烧瓶中装入的液体不能超过烧瓶容积的 2/3。( V ) 42、 蒸馏装置的安装应遵循 “从下往上，从左往右 ”的顺序，拆卸顺序与安装顺利相同。 43、 蒸馏完成后，要先关闭冷凝水，再停止加热。 ( X ) 44、 蒸馏时，温度计从蒸馏头上口插入的深度没有明确要求。 ( X ) 45、 当液体的沸点差距小于 30C 时，要使用分馏方法来进行分离，而不能使用蒸馏。( I ?2mL ，固体只需盖满试 X )
§13化学实验基本操作
§1.3化学实验基本操作 [学习目标：] 1、知识与技能： （1）知道化学实验是进行科学探究的重要手段，正确的实验原理和操作方法是实验成功的关键； （2）能进行药品的取用、加热、洗涤仪器等基本实验操作。 2、过程与方法： （1）学会运用观察、实验等方法获取信息； （2）能用化学语言表述有关的信息，并用比较、观察等方法对获取信息进行加工。[学习重点：]各项实验基本操作。（内容如下） [学习内容：]（主要知识点） 一、常用仪器及使用方法 （一）用于加热的仪器－－试管、烧杯、烧瓶、蒸发皿、锥形瓶 可以直接加热的仪器是－－试管、蒸发皿、燃烧匙 只能间接加热的仪器是－－烧杯、烧瓶、锥形瓶（垫石棉网，目的：使仪器受热均匀） 不可加热的仪器——量筒、集气瓶、漏斗。 （二）测容器－－量筒 量取液体体积时，量筒必须平放。视线与液体凹液面的最低点保持水平。 仰视时读出的数偏小(即：实际的>读数)；俯视读出的数偏大（即：实际的<读数） 量筒不能用来加热，不能用作反应容器。 （三）称量器－－托盘天平（用于粗略的称量，一般能精确到0.1克。） 注意点：称量物和砝码的位置为“左物右码”。 正确放物时读数是：物质质量=砝码质量+游码质量 物码放反时的读数：物质质量=砝码质量-游码质量（即：整数-小数部分） （四）加热器皿－－酒精灯 （1）酒精灯的使用要注意“三不”：①不可向燃着的酒精灯内添加酒精；②不可用燃着的酒精灯直接点燃另一盏酒精灯；③熄灭酒精灯应用灯帽盖熄，不可吹熄。 （2）酒精灯内的酒精量不可超过酒精灯容积的2/3也不应少于1/4。 （3）酒精灯的火焰分为三层，外焰、内焰、焰心。用酒精灯的外焰加热物体。 二、药品的取用 1、药品的存放： 一般固体药品放在广口瓶中，液体放在细口瓶中（少量的液体药品可放在滴瓶中）。 2、药品取用量： 如没有说明用量，应取最少量：固体以盖满试管底部为宜，液体以1～2mL为宜。（多取的试剂不可放回原瓶，也不可乱丢，更不能带出实验室，应放在指定的容器内。） 3、固体药品的取用 （1）粉末状及小粒状药品：用药匙或纸槽②块状及条状药品：用镊子夹取 取块状固体药品操作：一横(先把容器横放)；二平(把药品或金属颗粒放入试管口)；三慢滑（把容器慢慢竖立起来，使其缓缓滑到试管底部，以免打破容器） （2）取块状粉末状药品操作：一倾（先使试管倾斜）二送(小心送至试管底部)三直立（然
微生物实验操作步骤
微生物试验操作步骤 1.前期准备工作（红色字体需要购买） 10ml离心管（80管）、培养皿（预实验36板，正式试验648板，共计684板）、EP管（预实验36管，正式试验108管，144管）、枪头（5ml、1ml、200ul）、生理盐水现配现用（0.85）2.，灭菌处理 将离心管、枪头、生理盐水、培养基放入高压灭菌锅中灭菌处理后待用。 3.制备不同梯度的样品溶液 预实验 a.梯度稀释试验前一天晚上取置于-80℃盲肠食糜样品于4℃冰箱融化，将需要用到的离心管和EP管分别编号待用。试验期间取盲肠食糜0.5~1g于灭菌后的10ml离心管中，按1：10比例加入生理盐水，制成10-1浓度的样品溶液。然后取0.5ml10-1浓度的样品溶液于下一离心管，按1：10比例加入生理盐水，制成10-2浓度的样品溶液。然后然后取0.1ml10-2浓度的样品溶液于EP管中，按1：1010-3比例加入生理盐水，制成10-3浓度的样品溶液。然后依次如上分别配制10-4、10-5、10-6、10-7、10-8样品溶液。每一次取样前离心管和EP管都要在微型振荡器上震荡混匀。 b.接种和培养：按照平板涂布法进行。分别取各稀释管溶液100μl接种到选择性培养基，大肠杆菌选择性培养基置普通培养箱，37℃培养24h。乳酸菌选择性培养基置5%CO2培养箱，37℃培养48h。双歧杆菌选择性培养基置厌氧发酵罐内，37℃培养48h。沙门氏菌选择性培养基置普通培养箱，37℃培养24h。 c. 微生物计数与鉴定：采用常规微生物平板菌落计数法，选择长有30-300个菌落的平板较为合适，用每克肠道内容物中细菌个数的对数表示( 1gCFU /g) 正式试验 按照预实验操作步骤及适宜梯度进行试验。 4.培养基 总需氧菌营养琼脂（NA）34567 乳酸菌MRS琼脂碱性厌氧234567 双歧杆菌BL琼脂厌氧234567产气袋 大肠杆菌麦康凯需氧234567 沙门氏菌XLD 需氧2345
有机化学实验操作规范
有机化学实验 操作规范
目录 《有机化学实验》操作规范 (1) 一、有机化学实验教学目的和要求 (1) 二、使用标准磨口玻璃仪器注意事项 (1) 三、仪器的装配 (1) 四、加热 (2) 五、回流 (2) 六、分液漏斗 (3) 七、搅拌装置 (4) 八、干燥 (4) 九、蒸馏 (5) 十、减压蒸馏 (7) 十^一、水蒸气蒸馏 (9) 十二、分馏 (10) 十三、重结晶 (11) 十四、有机化合物的合成 (13)
有机化学实验》操作规范 一、有机化学实验教学目的和要求 通过有机化学实验，加深学生对有机化学基本理论与概念的理解；增强运用有机化学理论解决实验问题的能力。要求掌握： 1、本规范内所拟订的各项有机化学实验的基本技能； 2、正确选择有机化合物的合成、分离和提纯的方法； 3、养成实事求是的科学态度，良好的科学素养和工作习惯。 二、使用标准磨口玻璃仪器注意事项 1、标准口塞应保持清洁 2、使用前在磨砂口塞表面涂以少量真空油脂或凡士林，以增强磨砂接 口的密合性，同时也便于接口的装拆。 3、用后应立即拆卸洗净。否则，对接处常会粘牢，以至拆卸困难。 4、能正确说出各仪器的名称 三、仪器的装配 1、在装配仪器时，所选用的玻璃仪器和配件都要干净。否则会影响产 物的产量和质量 2、一般根据热源的高低来确定待加热仪器和其他仪器的高度。 3、仪器安装应先选好主要仪器的位置，按先下后上，从左到右顺序安 装，做到正确、整齐、稳妥、端正，其轴线应与实验台边沿平行。 在拆卸时应先移走热源，后停冷凝水，再拆装置，拆卸顺序与安装相反，其顺序是由右至左，先上后下。 4、其他注意事项 (a)铁夹夹玻璃器皿：铁夹的双钳应贴有软性物质如橡皮、布条
高中化学实验基本操作知识点
高中化学实验基本操作知识点 1. 仪器的洗涤 玻璃仪器洗净的标准是：内壁上附着的水膜均匀，既不聚成水滴，也不成股流下。 2.试纸的使用 常用的有红色石蕊试纸、蓝色石蕊试纸、ph试纸、淀粉碘化钾试纸和品红试纸等。 (1)在使用试纸检验溶液的性质时，一般先把一小块试纸放在表面皿或玻璃片上，用蘸有待测溶液的玻璃棒点试纸的中部，观察试纸颜色的变化，判断溶液的性质。 (2)在使用试纸检验气体的性质时，一般先用蒸馏水把试纸润湿，粘在玻璃棒的一端，用玻璃棒把试纸放到盛有待测气体的导管口或集气瓶口(注意不要接触)，观察试纸颜色的变化情况来判断气体的性质。 注意：使用ph试纸不能用蒸馏水润湿。 3. 药品的取用和保存 (1)实验室里所用的药品，很多是易燃、易爆、有腐蚀性或有毒的。因此在使用时一定要严格遵照有关规定，保证安全。不能用手接触药品，不要把鼻孔凑到容器口去闻药品(特别是气体)的气味，不得尝任何药品的味道。注意节约药品，严格按照实验规定的用量取用药品。如果没有说明用量，
一般应按最少量取用：液体1～2ml，固体只需要盖满试管底部。实验剩余的药品既不能放回原瓶，也不要随意丢弃，更不要拿出实验室，要放入指定的容器内或交由老师处理。 (2)固体药品的取用 取用固体药品一般用药匙。往试管里装入固体粉末时，为避免药品沾在管口和管壁上，先使试管倾斜，用盛有药品的药匙(或用小纸条折叠成的纸槽)小心地送入试管底部，然后使试管直立起来，让药品全部落到底部。有些块状的药品可用镊子夹取。 (3)液体药品的取用 取用很少量液体时可用胶头滴管吸取;取用较多量液体时可用直接倾注法。取用细口瓶里的药液时，先拿下瓶塞，倒放在桌上，然后拿起瓶子(标签对着手心)，瓶口要紧挨着试管口，使液体缓缓地倒入试管。注意防止残留在瓶口的药液流下来，腐蚀标签。一般往大口容器或容量瓶、漏斗里倾注液体时，应用玻璃棒引流。 (4)几种特殊试剂的存放 (a)钾、钙、钠在空气中极易氧化，遇水发生剧烈反应，应放在盛有煤油的广口瓶中以隔绝空气。 (b)白磷着火点低(40℃)，在空气中能缓慢氧化而自燃，通常保存在冷水中。 (c)液溴有毒且易挥发，需盛放在磨口的细口瓶里，并
中考化学实验操作步骤
中考化学实验操作能力测试实验操作步骤 实验一：用酒精灯给试管里的液体加热 操作步骤： 1、左手（抓试管的方法：三握两蜷）取一支干燥的试管，右手持盛有水的试剂瓶，将瓶塞倒放在实验台上，标签对着手心握住试剂瓶，往试管里缓缓倒入液体（试管口与试剂瓶口紧靠在一起，试管呈倾斜状态）大约3~5ml，取完液体将瓶塞盖回试剂瓶，将盛水的试管放置在试管架上。 2、拿一个酒精灯，将灯帽倒扣在酒精灯的旁边，用火柴点燃（点燃时火柴必须是平移过去的，不能从上而下直接去点）酒精灯，将火柴梗放在指定的地方。 3、左手取下试管架上的试管，右手握持试管夹，用大拇指按住短柄，四指抓住长柄，从试管底部套入使试管夹在距试管口1/3处试管的中上部。拇指离开短柄，全部抓在长柄，保持短柄在上长柄在下，且试管与桌面约为45°。 4、先上下移动试管（试管与桌面约为45°）用酒精灯给试管均匀加热。 5、固定试管（试管与桌面约为45°）用酒精灯外焰加热，试管口不能对着自己和别人。 6、待液体沸腾后，停止加热，从试管底部去掉试管夹，将试管内的液体倒入水槽中，并将试管与试管夹依次放在试管架上。 7、洗涤试管并将试管倒扣在试管架的小桩上。 8、整理仪器，用抹布擦净桌面。 实验二：使用过滤方法对混合物进行分离 操作步骤： 1、制作过滤器：取一张圆形滤纸，对折两次后，分成一层与三层，用左手食指顶住滤纸三层，放入漏斗中，使滤纸边缘略低于漏斗口。 2、用塑料吸管吸取少量的水挤入漏斗与滤纸的缝隙内，使滤纸润湿，边湿润边用手压滤纸，使滤纸与漏斗之间不要有气泡。 3、过滤，将做好的过滤器放在铁架台的铁圈上使漏斗下端尖嘴紧靠烧杯内壁。
4、用右手取试验台上盛有浑浊液体的烧杯，将烧杯尖嘴靠在玻璃榜上，玻璃棒一端靠在三层滤纸一边，沿玻璃棒慢慢向漏斗中倾倒少量液体，倒入的液体不能高出滤纸边缘。待过滤完之后，取下过滤器，将漏斗中的废物和烧杯中的滤液都倒入废液缸中，并洗涤烧杯、漏斗、玻璃棒，将洗干净的漏斗倒扣在试验台上。 5、整理仪器，用抹布擦净桌面。 实验三：二氧化碳的制取和检验 操作步骤： 制取二氧化碳： 1、取一支大试管，塞上带有导气管的橡皮塞，组装成一套制取装置。 2、将导气管的另一端浸入水槽中的水里，然后左手在上右手在下双手紧握试管的外壁，观察导气管口是否有气泡逸出，若有均匀气泡说明气密性良好，若无气泡，需要重新检查气密性。 3、另取一只小试管，加入约2ml澄清石灰水，放在试管架上，以备用来检验二氧化碳气体。 4、取下导气管，将试管水平放置，用镊子夹取适量大理石放在试管口，将试管慢慢竖立起来，使大理石滑落至试管底，将试管竖直固定在铁架台上，往试管中倒入约5ml稀盐酸，迅速塞上带有导气管的橡皮塞，将导气管另一端插入正放在实验台上的集气瓶内，导管要接近集气瓶底。过一会儿，将然着的火柴平放在集气瓶口，观察，直至木条熄灭，将导气管从集气瓶中取出来，用玻璃片粗糙的一面盖住，正放在试验台上。 检验二氧化碳： 5、将导气管伸入盛有澄清石灰水的试管中，待石灰水变浑浊后，取出导气管。 6、将废酸液倒入回收酸液的废液缸中，将剩余的大理石倒入回收大理石的烧杯中，洗涤大试管和小试管，将试管倒立在试管架上。 7、整理仪器，用抹布擦净桌面。
生物实验操作步骤
生物实验操作步骤 一、安装显微镜和对光： A 、操作步骤： 1.一手握住镜臂，一手托住镜座，把显微镜轻轻地放在实验台上，镜臂靠近身体略偏左，镜座距实验台边缘约5厘米。安装好目镜和物镜。 2.转动转换器，使低倍物镜对准通光孔。转动遮光器，使最大的光圈对准通光孔。 3、左眼注视目镜内，同时双手转动反光镜（光强用使用平面镜、光弱使用凹面镜），使光线反射到镜筒里，直到整个视野呈雪白色为止。 4.整理复位：把显微镜的外表擦拭干净。取下镜头放入镜盒内，并将镜筒缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，放回原处。 B 、去年考卷： C 、评分标准： （1）安装好物镜和目镜（1分） （2）能将显微镜对好光观察（2分） 记录：雪白色或亮白色（1分） （3）整理器材（1分） 二、制作并观察洋葱鳞片叶临时玻片标本： A 、操作步骤： 1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦干净。 2、用滴管在载玻片中央滴一滴清水。 3、用刀片在洋葱内表面划一个“井”字，用镊子撕下表皮，然后把它放在载玻片中央的水滴中，用解剖针轻轻地将其展平； 4、用镊子夹起盖玻片，使其一边接触载玻片上面的液滴，然后缓缓地盖在液滴上，盖片时要防止装片上出现气泡； 5、在载玻片的一侧滴一滴碘液，在另一侧用吸水纸吸引，重复几次，使染液浸润到整个标本； 6、安装显微镜和对光； 7、将制作的装片安放在显微镜的载物台上，然后将镜筒缓缓下降直到物镜接近玻片； 8、用左眼注视目镜，调节粗准焦螺旋使镜筒缓缓上升，直到在视野中看到细胞图像，然后旋转细准焦螺旋，使物像更清晰； 9、移动装片，在视野中找到一个完整的细胞进行仔细观察； 10、整理复位：取下玻片标本，平移方式（防止折断盖玻片）取下盖玻片并连同载玻片一起放回原处。取下镜头放入镜盒内，将镜筒下降到最低处，然后把显微镜放进镜箱里。把其他废弃物放入垃圾桶并把实验桌抹干净。 B 、去年考卷： C 、评分标准： （1）用纱布将载玻片、盖玻片擦拭干净（1分） （2）在载玻片中央滴一滴清水（1分） （3）用刀片切取一块洋葱鳞片叶，用镊子撕取鳞片叶的内表皮置于载玻片上清水中并用解剖针将表皮展平，盖上盖玻片（1分） （4）将一滴碘液滴在盖玻片的一侧，用吸水纸从对侧引流使碘液扩散到整个标本（1分） （5）将制作好的临时装片放在显微镜下观察（1分） 记录：气泡（1分） 细胞核（1分） 细准焦螺旋（1分） 左上方（1分） （6）整理器材（1分） 三、制作并观察口腔上皮细胞临时玻片标本： A 、操作步骤： 1、用干净的纱布把载玻片和盖玻片擦干净； 2、用滴管在载玻片中央滴一滴生理盐水； 3、用清水漱口，清除口腔中食物碎屑，用消毒牙签粗的一端在口腔侧壁上轻轻刮几下； 4、将牙签上附着的碎屑放在载玻片的生理盐水中涂抹几下； 用镊子夹起盖玻片让一侧先接触生理盐水在轻轻放平，避免出现 。 你观察到的细胞内染色最深的结构是 如果想让物像更清晰，应转动 。如果物像在视野的左上方，应将玻片标本向 移动，才能使物像移到视野中间。
有机化学实验操作要求规范
实用标准文案 有机化学实验 操作规范
实用标准文案 目录 《有机化学实验》操作规范 (1) 一、有机化学实验教学目的和要求 (1) 二、使用标准磨口玻璃仪器注意事项 (1) 三、仪器的装配 (1) 四、加热 (2) 五、回流 (2) 六、分液漏斗 (3) 七、搅拌装置 (4) 八、干燥 (4) 九、蒸馏 (5) 十、减压蒸馏 (7) 十一、水蒸气蒸馏 (9) 十二、分馏 (10) 十三、重结晶 (11) 十四、有机化合物的合成 (13)
实用标准文案 《有机化学实验》操作规范 一、有机化学实验教学目的和要求 通过有机化学实验，加深学生对有机化学基本理论与概念的理解；增强运用有机化学理论解决实验问题的能力。要求掌握： 1、本规范内所拟订的各项有机化学实验的基本技能； 2、正确选择有机化合物的合成、分离和提纯的方法； 3、养成实事求是的科学态度，良好的科学素养和工作习惯。 二、使用标准磨口玻璃仪器注意事项 1、标准口塞应保持清洁 2、使用前在磨砂口塞表面涂以少量真空油脂或凡士林，以增强磨 砂接口的密合性，同时也便于接口的装拆。 3、用后应立即拆卸洗净。否则，对接处常会粘牢，以至拆卸困难。 4、能正确说出各仪器的名称 三、仪器的装配 1、在装配仪器时，所选用的玻璃仪器和配件都要干净。否则会影 响产物的产量和质量 2、一般根据热源的高低来确定待加热仪器和其他仪器的高度。 3、仪器安装应先选好主要仪器的位置，按先下后上，从左到右顺 序安装，做到正确、整齐、稳妥、端正，其轴线应与实验台边沿平行。在拆卸时应先移走热源，后停冷凝水，再拆装置，拆卸顺序与安装相反，其顺序是由右至左，先上后下。 4、其他注意事项
高中化学实验所有知识点整理
高中化学实验所有知识点整理 一、中学化学实验操作中的七原则 掌握下列七个有关操作顺序的原则，就可以正确解答"实验程序判断题"。 1."从下往上"原则。以Cl2实验室制法为例，装配发生装置顺序是：放好铁架台→摆好酒精灯→根据酒精 灯位置固定好铁圈→石棉网→固定好圆底烧瓶。 2."从左到右"原则。装配复杂装置应遵循从左到右顺序。如上装置装配顺序为：发生装置→集气瓶→烧杯。 3.先"塞"后"定"原则。带导管的塞子在烧瓶固定前塞好，以免烧瓶固定后因不宜用力而塞不紧或因用力过 猛而损坏仪器。 4."固体先放"原则。上例中，烧瓶内试剂MnO2应在烧瓶固定前装入，以免固体放入时损坏烧瓶。总之 固体试剂应在固定前加入相应容器中。 5."液体后加"原则。液体药品在烧瓶固定后加入。如上例中浓盐酸应在烧瓶固定后在分液漏斗中缓慢加入。 6.先验气密性(装入药口前进行)原则。 7.后点酒精灯(所有装置装完后再点酒精灯)原则。 二、中学化学实验中温度计的使用分哪三种情况以及哪些实验需要温度计 1.测反应混合物的温度：这种类型的实验需要测出反应混合物的准确温度，因此，应将温度计插入混合 物中间。 ①测物质溶解度。②实验室制乙烯。 2.测蒸气的温度：这种类型的实验，多用于测量物质的沸点，由于液体在沸腾时，液体和蒸气的温度相 同，所以只要测蒸气的温度。①实验室蒸馏石油。②测定乙醇的沸点。 3.测水浴温度：这种类型的实验，往往只要使反应物的温度保持相对稳定，所以利用水浴加热，温度计 则插入水浴中。①温度对反应速率影响的反应。②苯的硝化反应。 三、常见的需要塞入棉花的实验有哪些 需要塞入少量棉花的实验： 热KMnO4制氧气 制乙炔和收集NH3 其作用分别是：防止KMnO4粉末进入导管；防止实验中产生的泡沫涌入导管；防止氨气与空气对流， 以缩短收集NH3的时间。 四、常见物质分离提纯的10种方法 1.结晶和重结晶：利用物质在溶液中溶解度随温度变化较大，如NaCl，KNO3。
最新中考化学实验操作步骤知识点归纳
最新中考化学实验操作步骤知识点归纳 1.实验时要严格按照实验规定的用量取用药品。如果没有说明用量，应按最少量取用： 液体取(1～2)毫升，固体只需盖满试管底部。实验剩余的药品不能放回原瓶，要放入指定的容器内。 2.固体药品用药匙取用，块状药品可用镊子夹取，块状药品或密度大的金属不能竖直放入容器。 3.取用细口瓶里的液体药品，要先拿下瓶塞，倒放在桌面上，标签对准手心，瓶口与试管口挨紧。用完立即盖紧瓶塞，把瓶子放回原处。 4.试管：可用作反应器，可收集少量气体，可直接加热。盛放液体不超过容积的1/3，试管与桌面成45°角;加热固体时管口略向下倾斜。 5.烧杯：溶解物质配制溶液用，可用作反应器，可加热，加热时要下垫石棉网。 6.平底烧瓶：用作固体和液体之间的反应器，可加热，要下垫石棉网。 7.酒精灯：熄灭时要用盖灭，不可用嘴吹灭，不可用燃着的酒精灯去点另一只酒精灯。 酒精灯的火焰分为：外焰、内焰和焰心。外焰温度最高，加热时用外焰。 可直接加热的仪器：试管、蒸发皿、坩埚、燃烧匙 可用于加热但必须在下面垫石棉网的仪器：烧杯，烧瓶。不能加热的仪器：水槽、量筒、集气瓶
8.量筒：量取一定量体积的液体，使用时应尽量选取一次量取全部液体的最小规格的量筒。不能作反应器，不能溶解物质，不能加热读数时，量筒平放，视线与液体的凹液面的最低处保持水平。仰视读数比实际值小，俯视读数比实际值大 9.托盘天平：用于粗略称量，可准确到0.1克。称量时“左物右码”。砝码要用镊子夹取。药品不能直接放在托盘上，易潮解的药品(氢氧化钠)必须放在玻璃器皿(烧杯、表面皿)里。 10.胶头滴管：滴液时应竖直放在试管口上方，不能伸入试管里。吸满液体的滴管不能倒置。 11.检查装置的气密性方法：连接装置把导管的一端浸没水里，双手紧贴容器外壁，若导管口有气泡冒出，则装置不漏气。 12.过滤：分离没溶于液体的固体和液体的混合物的操作。要点是“一贴二低三靠”： 一贴：滤纸紧贴漏斗的内壁。 二低：过滤时滤纸的边缘应低于漏斗的边缘，漏斗内液体的液面低于滤纸的边缘。 三靠：倾倒液体的烧杯嘴紧靠引流的玻璃棒，玻璃棒的末端轻轻靠在三层滤纸的一边，漏斗的下端紧靠接收的烧杯。 13.粗盐提纯实验仪器：药匙、烧杯、玻璃棒、蒸发皿、漏斗、量筒、酒精灯、铁架台、托盘天平实验步骤：1.溶解2.过滤3.蒸发4.称量并计算粗盐的产率 14.浓酸、浓碱有腐蚀性，必须小心。不慎将酸沾在皮肤或衣物上，
2018年六安市中考化学实验操作考试试题及实验报告评分标准(含步骤)
实验A：量取3毫升的蒸馏水并加热 实验用品：量筒（10ml，25ml），胶头滴管（放在小烧杯中），酒精灯，蒸馏水，火柴，试管（15*150），试管夹，试管架，抹布，废液缸
实验用品： 1、仪器：大试管、橡皮塞、玻璃导管、胶皮管、铁架台、集气瓶、玻片. 2、药品：锌粒、稀硫酸 实验过程： 1、连接装置并检验气密性 2、加入药品 （1）先向试管中加入锌粒 （2）再向试管中加入稀硫酸 （3）现象为化学方程式为： 3、塞上橡皮塞，将装置固定在铁架台上 4、收集氢气 5、拆除实验装置、将废弃物放入指定容器，清洗并整理器材
实验C 过滤10ml粗食盐水 实验目的： 1、掌握量筒的使用； 2、掌握取用液体、过滤等基本操作。 实验用品: 1、仪器：漏斗、小烧杯2个、量筒(10mL、50mL)、胶头滴管、铁架台(带铁圈)、滤纸、玻璃棒、剪刀 2、药品:粗盐水(瓶装)。 操作步骤： 1、选择实验器材； 2、制备过滤器： 3、量取液体： 4、过滤： 5、实验习惯。
评分细则： 实验D 配制溶质质量分数一定的氯化钠溶液 （配制溶质质量分数为5%的NaCl溶液50g） 实验用品： 1、仪器：天平、量筒、滴管、玻璃棒、烧杯、药匙 2、药品：氯化钠固体、蒸馏水 实验过程
1、计算：需NaCl的质量为，需水的质量为，体积为 2、称量： （1）称取2.5g NaCl固体，将药品倒入烧杯中； （2）准确量取的蒸馏水 3、溶解：将量好的水倒入烧杯中，并用玻璃棒（无声）搅拌； 4、将配好的溶液倒入讲台前的指定容器中； 5、清冼仪器，整理实验台。 评分细则：
实验E 探究小石块中是否含有碳酸盐 实验用品: 1、仪器：试管、橡皮塞、导管（胶皮管）、镊子、铁架台（或试管架）、烧杯 2、药品：小石块、稀盐酸、澄清石灰水。 实验过程： 1.按照装置图连接好装置 2、检查装置的气密性； 3、向一支试管中加入2-3ml澄清石灰水； 4、在大试管中加入几小块小石块，然后加入10-15ml稀盐酸，立即用带有导管的橡皮塞塞住管口，观察试管里发生的现象：，发生反应的化学方程式为，将导管的另一端通入澄清石灰水中，观察现象：，发生反应的化学方程式为：。 评分要点 序号考查评分点分值 1检查仪器和药品1 2按要求组装实验装置2 3检验装置气密性2 4向试管中加入几小块小石块2 5加入稀盐酸，立即塞上橡皮塞2
化学实验基本操作专项练习题
化学实验基本操作专项练习题 一、选择题（下列每小题只有一个选项符合题意，把符合题意的选项填入题后括号中） 1．下列实验操作中，正确的是（） 2．量取8mL水稀释浓硫酸的下列操作错误的是（） 3．下列实验操作中，正确的是（） 4.下列各图是初中化学的几个实验操作，其中正确的是（） 5．化学实验必须规范，否则容易发生安全事故。你认为下列实验操作正确的是（） 6．下列图示实验操作错误的是（） 7．学习化学，我们对商品的标签和标志有了更深层次的认识，以下四枚标志使用不恰当的是 （）
8.徐浩同学准备了下列仪器和用具：烧杯、铁架台、铁圈、石棉网、酒精灯、玻璃棒、蒸发皿、坩埚钳、火柴。从缺乏仪器或用具的角度看，他不能进行的实验操作是（） A．溶解B．过滤C．蒸发D．给溶液加热 9．在实验室中有下列实验用品：①酒精灯、②铁架台、铁圈、石棉网、酒精灯、玻璃棒、蒸发皿、坩埚钳、火柴。从缺乏仪器或用具的角度看，他不能进行的实验操作项目是（） A．溶解B．过滤C．蒸发D．给溶液加热 10．下列实验操作正确的是（） 11．下列实验操作能达到预期目的的是（） A．用10mL的量筒量取9.0mL的水 B．用托盘天平称取10.58克的碳酸钠粉末 C．用向下排空气法收集纯净的氢气 D．用150mL酒精和50mL水精确配制200m L医用消毒酒精 12．做溶解、过滤、蒸发实验均要用到的一种仪器是（）A．试管B．烧杯C．酒精灯Ｄ．玻璃棒 13．配制10%的氯化钠溶液时，不会引起溶液中氯化钠的质量分数偏小的是（） A．用量筒量取水时仰视读数B．配制溶液的烧杯用少量的蒸馏水润洗 C．氯化钠晶体不纯D．转移已配好的溶液时，有少量溶液溅出 14．“神舟7号”载人航天飞船发射成功，极大地增强了我们的民族自豪感。在航天飞船的失重环境中，下列实验操作最难完成的是（）A．结晶B．蒸发C．溶解D．过滤 15．某学生用量筒量取液体，视线与液体凹液面的最低处保持相平，读数为30mL，将液体倒出一部分后，俯视读数为20mL，则该同学实际倒出的液体体积为（） A．大于10m L B．小于10m L D．等于10m L D．无法确定 16．郝颖同学在化学课上提出，可用澄清石灰水检验人呼出的气体是否是二氧化碳气体，就这一过程而言，属于科学探究环节中的（）A．建立假设B．收集证据C．设计实验D．作出结论 17．实验结束后，下列仪器的放置方法正确的是（） 二、填空与简答题 18．在实验室中有下列实验用品：①酒精灯、②试管夹、③10mL量筒、④100mL量筒⑤烧杯、⑥漏斗、⑦蒸发皿、⑧玻璃棒、⑨铁架台（带铁圈）⑩滤纸，请按要求选择相应实验用品填空（填序号） （1）加热试管里的药品应使用； （2）量取5mL液体应使用； （3）过滤操作中应使用； （4）蒸发、结晶操作中应使用。
沈阳中考化学实验操作
中考化学实验操作评分标准 1：粗盐提纯 实验要求：1、正确取用液体药品 2、正确使用酒精灯加热 3、正确地进行过滤操作 4、正确进行蒸发操作 5、整理器材 实验时间：10分钟 实验器材：铁架台（带铁圈）、漏斗、滤纸、酒精灯、坩埚、坩埚钳、胶头滴管、小烧杯、玻璃棒、石棉网、试管刷、抹布 实验药品：粗盐水(实验时尽量少取些盐水，能满足实验演示即可。)
2：二氧化碳的制取和检验 实验要求：1、正确组装实验装置并检查气密性 2、用正确方法取用固体、液体药品 3、用向上排空气法收集二氧化碳并验满 4、用澄清的石灰水检验二氧化碳 5、规范操作，确保安全，实验后整理器材 实验时间：10分钟 实验器材：铁架台、试管、带导管的单孔橡胶塞、集气瓶、毛玻璃片、镊子、火柴、烧杯、水槽、试管刷 实验药品：石灰石、稀盐酸、澄清石灰水 3：：配制一定溶质质量分数的溶液
实验要求：1、配制50克质量分数为5%的氯化钠溶液 2、计算出氯化钠和水的用量 3、正确使用天平、量筒和滴管 4、规范操作，确保安全，实验后整理器材 实验时间：10分钟 实验器材：托盘天平、烧杯、量筒、药匙、玻璃棒、滴管、相同质量白纸2张、水槽、试管刷 实验药品：氯化钠、蒸馏水（或以纯净水替代） 4：探究氢氧化钠溶液的性质
实验要求：1、正确地倾倒和滴加液体药品 2、正确地使用pH试纸 3、能正确使用胶头滴管 4、能正确地观察和记录现象 5、清洗仪器，整理台面 实验时间：10分钟 实验器材：试管、玻璃棒、胶头滴管、试管架、试管刷、废液缸、表面皿、抹布实验药品：氢氧化钠溶液、稀盐酸、硫酸铜溶液、pH试纸及比色卡 5 .实验名称：金属镁的性质探究 实验要求：1．正确探究．观察金属的色泽、导电性
化学实验操作要求
化学实验操作要求 一、常用仪器及使用方法 用于加热的仪器－－试管、烧杯、烧瓶、蒸发皿、锥形瓶 1.可以直接加热的仪器是－－试管、蒸发皿、燃烧匙 2.只能间接加热的仪器是－－烧杯、烧瓶、锥形瓶（垫石棉网—受热均匀） 3.可用于固体加热的仪器是－－试管、蒸发皿 4.可用于液体加热的仪器是－－试管、烧杯、蒸发皿、烧瓶、锥形瓶 5.不可加热的仪器——量筒、漏斗、集气瓶 测容器－－量筒 量取液体体积时，量筒必须放平稳。视线与刻度线及量筒内液体凹液面的最低点保持水平。量筒不能用来加热，不能用作反应容器。量程为10毫升的量筒，一般只能读到0.1毫升。 加热器皿－－酒精灯 （1）酒精灯的使用要注意“三不”：①不可向燃着的酒精灯内添加酒精；②用火柴从侧面点燃酒精灯，不可用燃着的酒精灯直接点燃另一盏酒精灯；③熄灭酒精灯应用灯帽盖熄，不可吹熄。 （2）酒精灯内的酒精量不可超过酒精灯容积的2/3也不应少于1/4。 （3）酒精灯的火焰分为三层，外焰、内焰、焰心。用酒精灯的外焰加热物体。 （4）如果酒精灯在燃烧时不慎翻倒，酒精在实验台上燃烧时，应及时用沙子盖灭或用湿抹布扑灭火焰，不能用水冲。 夹持器－－铁夹、试管夹 铁夹夹持试管的位置应在试管口近1/3处。 试管夹的长柄，不要把拇指按在短柄上。 试管夹夹持试管时，应将试管夹从试管底部往上套；夹持部位在距试管口近1/3处；用手拿住 分离物质及加液的仪器－－漏斗、长颈漏斗 过滤时，应使漏斗下端管口与承接烧杯内壁紧靠，以免滤液飞溅。长颈漏斗的下端管口要插入液面以下，以防止生成的气体从长颈漏斗口逸出。 二、化学实验基本操作 药品的存放：一般固体药品放在广口瓶中，液体药品放在细口瓶中（少量的液体药品可 放在滴瓶中），金属钠存放在煤油中，白磷存放在水中 药品取用的总原则 ①取用量：按实验所需取用药品。如没有说明用量，应取最少量，固体以盖满试管底部为宜，
化学实验基本操作实验报告
化学实验基本操作实验报告 [实验目的] 1、掌握常用量器的洗涤、使用及加热、溶解等操作。 2、掌握台秤、煤气灯、酒精喷灯的使用。 3、学会液体剂、固体试剂的取用。 [实验用品] 仪器：仪器、烧杯、量筒、酒精灯、玻璃棒、胶头滴管、表面皿、蒸发皿、试管刷、 试管夹、药匙、石棉网、托盘天平、酒精喷灯、煤气灯。 药品：硫酸铜晶体。 其他：火柴、去污粉、洗衣粉 [实验步骤] （一）玻璃仪器的洗涤和干燥 1、洗涤方法一般先用自来水冲洗，再用试管刷刷洗。若洗不干净，可用毛刷蘸少量去污粉或洗衣粉刷洗，若仍洗不干净可用重络酸加洗液浸泡处理（浸泡后将洗液小心倒回原瓶中供重复使用），然后依次用自来水和蒸馏水淋洗。 2、干燥方法洗净后不急用的玻璃仪器倒置在实验柜内或仪器架上晾干。急用仪器，可放在电烘箱内烘干，放进去之前应尽量把水倒尽。烧杯和蒸发皿可放在石棉网上用小火烘干。操作时，试管口向下，来回移动，烤到不见水珠时，使管口向上，以便赶尽水气。也可用电吹风把仪器吹干。带有刻度的计量仪器不能用加热的方法进行干燥，以免影响仪器的精密度。 （二）试剂的取用 1、液体试剂的取用 （1）取少量液体时，可用滴管吸取。 （2）粗略量取一定体积的液体时可用量筒（或量杯）。读取量筒液体体积数据时，量筒必须放在平稳，且使视线与量筒内液体的凹液面最低保持水平。 （3）准确量取一定体积的液体时，应使用移液管。使用前，依次用洗液、自来水、蒸馏水洗涤至内壁不挂水珠为止，再用少量被量取的液体洗涤2-3次。 2、固体试剂的取用 （1）取粉末状或小颗粒的药品，要用洁净的药匙。往试管里粉末状药品时，为了避免药粉沾到试管口和试管壁上，可将装有试剂的药匙或纸槽平放入试管底部，然后竖直，取出药匙或纸槽。 （2）取块状药品或金属颗粒，要用洁净的镊子夹取。装入试管时，应先把试管平放，把颗粒放进试管口内后，再把试管慢慢竖立，使颗粒缓慢地滑到试管底部。 （三）物质的称量 托盘天平常用精确度不高的称量，一般能称准到0.1g。 1、调零点称量前，先将游码泼到游码标尺的“0”处，检查天平的指针是否停在标尺的中间位置，若不到中间位置，可调节托盘下侧的调节螺丝，使指针指到零点。 2、称量称量完毕，将砝码放回砝码盒中，游码移至刻度“0”处，天平的
中考化学实验操作步骤演示教学
中考化学实验操作步 骤
实验一探究燃烧的条件之可燃物 实验要求：1.会使用坩埚钳、燃烧匙等。 2.保证实验安全，防范意外发生。 3.具备一定的分析推理能力。 实验器材：木条若干，酒精灯，试纸，火柴，胶头滴管，小烧杯（2个），坩埚钳，燃烧匙，酒精，自来水，废物桶。
实验二：探究化学反应前后物质的总质量有无 改变 实验器材：托盘天平，烧杯，橡皮塞，试管（2支），硫酸铜溶液，氢氧化钠溶液，试管刷，废物桶。 1、调节天平平衡。 2、向一支试管中倾倒约2mL氢氧化钠溶 液，向另一支试管中倾倒约2mL硫酸铜溶 液，把两支试管都放入烧杯里，把烧杯放 在天平的左盘里。 3、向右盘里添加砝码，先加质量大的，再 加质量小的，最后移动游码，直到天平平 衡。记录数据。 4、取下烧杯，把氢氧化钠和硫酸铜溶液倒 入烧杯中，观察现象。把两支试管都放入 烧杯中，把烧杯放在左盘，再称量，记录 数据。得出结论。 5、填写实验报告。（产生蓝色沉淀， 2NaOH+CuSO4=Na2SO4+Cu(OH)2↓化学反应前后物质的总质量没有改变) 6、刷洗仪器，整理实验台。
实验三：探究铜、铁、锌三种金属的活动 性顺序（暂定） 实验器材：试管（6支），烧杯，稀盐酸，硫酸锌溶液，硫酸铜溶液，铜片，铁钉，锌片，砂纸，试管刷，废 物桶。 1.向3支试管中分别加入铜片，铁丝，锌粒，要求试管横放，加入锌粒慢慢竖起，再向3支试管中倒入2-3 毫升盐酸，要求瓶塞倒放，标签向手心。 另取两支试管，分别向其中加入约2mL的硫酸锌溶液、硫酸铜溶液，把两条铁丝分别加入两支试管中，观察现象，得出结论。 3.填写实验报告：（活泼性强弱顺序：Zn>Fe>Cu）