为何不用淀粉酶鉴定PH对酶活性的影响

为何不用淀粉酶鉴定PH对酶活性的影响

[摘要]《影响酶活性条件》的探究实验是高中生物人教版必修中学生必修的探究实验，课本用括号注明：建议用淀粉酶探究温度对酶活性的影响，用过氧化氢酶探究PH对酶活性的影响。我想为什么不也用淀粉酶来探究PH对酶活性的影响呢?两个探究实验同时用一种溶液－H202溶液，准备起来简单方便，且经济。如果配置过氧化氢溶液的同时，再配置肝脏研磨液，不但增加了工作量，而且浪费。经过试验，我发现用淀粉酶探究PH对酶活性的影响试验过程中，出现了出人意料的实验现象，尽管能够解释PH对酶的活性有影响，但因为学生缺乏相应的化学知识，不容易解释明白。本人在试验的基础上找出了课本注明的原因，希望对同行老师们少走一点弯路。

[关键词]淀粉；淀粉酶；NaOH；HCI；碘一碘化钾溶液

《影响酶活性条件》的探究实验是高中生物人民教育出版社出版的必修《分子与细胞》中学生必修的探究实验，在课本第84页用括号注明：建议用淀粉酶探究温度对酶活性的影响，用过氧化氢酶探究PH对酶活性的影响。既然探究影响酶活性的条件，不管用哪一种酶作为实验材料，只要实验结果能说明问题就可以了，何必要建议呢?更何况如果按照课本建议去做，实验准备工作，实验完毕后的清理工作费时费力，因为选用过氧化氢酶作为实验材料，在购买新鲜的动物肝脏后，需要研磨、分装，特别是实验后的清理工作很是麻烦(因动物肝脏内含有大量脂肪，附着在试管、滴瓶、滴管壁上)，考虑到以上种种原因，我想全部用淀粉酶作为探究温度、PH对酶活性的影响的唯一实验材料不是更好吗?于是我决定先试验以下看看用淀粉酶作为实验材料探究PH对酶活性的影响效果如何。

由于本探究实验只要求作定性实验，我便设计实验步骤如下：

1取三只试管分别编号为1、2、3号。

2分别向三只试管中加入2毫升2％可溶性淀粉溶液。

3分别向三只试管中加入1毫升5％HCI、清水、5％Na0H溶液，摇匀，60℃的水浴加热2分钟。

4分别向三只试管中加入2滴I-KI溶液，观察试管内溶液的颜色变化。

如果实验结果如下：1号试管内溶液变蓝、2号试管内溶液呈橙黄色、3号试管内溶液为蓝色，则说明酸、碱性环境影响了淀粉酶的活性，也就达到了本探究实验目的——PH影响酶的活性。

但是我的试验结果又是如何呢?经实际操作，其实验结果如下：

1号试管内溶液为棕红色。

酶性质——最适pH选择

生物化学实验报告 题目：酶性质——最适pH选择 姓名：学号：班级：时间： 一、实验原理： 酶的催化活性与环境pH有密切关系，通常各种酶只在一定pH范围内才有活性，酶活性最高时的pH，称为酶的最适pH。高于或低于此pH时酶的活性逐渐降低。值得指出的是，不同的酶最适pH也不同，如胃蛋白酶的最适pH为1.5~2.5，胰蛋白酶的最适pH为8。 酶的最适pH不是一个特征性的物理常数，对于同一个酶，其最适pH因缓冲液和底物的性质不同而有差异。如唾液淀粉酶最适pH为6.8，但在磷酸缓冲液中，其最适pH为6.4~6.6，而在乙酸缓冲液中则为5.6。 二、实验试剂： 1.0.3%氯化钠0.5%淀粉溶液； 2.用0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液配制pH分别为5.4， 6.0，6.4，6.8， 7.2，7.6， 8.0的缓冲液。 表1 各pH值的缓冲液所需两种溶液配比 保温时间指从加入酶液开始到从水浴中取出试管加入碘液的一段时间。摸准保温时间是实验的关键步骤之一。 取一支试管，加入0.3%氯化钠0.5%淀粉溶液2ml，加入pH6.8磷酸氢二钠—柠檬酸钠缓冲液3ml，及稀释100~300倍的唾液2ml。充分摇匀后，放入37℃水浴中保温并记时，每隔1min用滴管取1滴混合液，至于点滴板上，加1滴碘液，检验淀粉水解程度，待呈橙黄色时，为进一步确定保温时间，应加1滴碘液至试管中，若为橙黄色表示反应完全，记录所需保温时间。 若2~3min内，取出的保温液与碘液作用呈橙黄色，则说明酶活力太高，应再稀释唾液淀粉酶，记录稀释倍数，若保温时间超过15min，说明酶活力太低，要提高酶的浓度。最佳保温时间8~12min以内，因此要掌握好唾液淀粉酶的稀释倍数，确定准确的保温时间才能进行下步实验。取7支试管按下表操作，保温时间参考以上操作：

[最新]测定唾液淀粉酶的最适ph值

[最新]测定唾液淀粉酶的最适ph值测定唾液淀粉酶的最适PH值 制作人:叶小晴学号:201140095 班组:15-4 学院:护理学院 摘要:酶催化活性最大时相应的环境PH称为酶促反应的最适PH值。虽然不同酶的最适PH值各不相同，但大多数酶的最适PH值接近中性，本论文主要在一定浓度、温度等条件下研究唾液淀粉酶的最适PH值，从而知道唾液淀粉酶的最适PH 值，进而了解影响酶的活性的因素。关键词:唾液淀粉酶、最适PH值、活性前言:生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质或核酸，酶是机体内最重要的生物催化剂。在不同PH条件下，酶分子的许多极性基团的解离状态不同，受到PH变化的影响，从而影响酶对它们的亲和力。PH还会影响酶的活性中心的空间构象，从而影响酶的活性，因而PH的改变对酶的催化作用影响很大。 材料与方法: 1、材料:唾液、磷酸二氢钠溶液、磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水、温水、 试管、试管架、洗耳球、烧杯、胶头滴管、水浴箱、分光光度计、吸量管、坐标纸 2、方法:(1)缓冲溶液的配置:根据各个PH值的缓冲溶液(用量:ml)表 1: PH5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 值 磷酸0.40 0.62 0.93 1.33 1.88 2.45 3.05 3.60 4.05 4.35 4.58 4.74 氢二 钠 磷酸4.60 4.39 4.08 3.68 3.13 2.55 1.95 1.40 0.95 0.65 0.43 0.27 二氢

钠 蒸馏5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 5 水 (2)唾液的获取:温的水漱口，将蒸馏水含于口中2min后吐于烧杯中，取5ml 唾液20ml水配成1/5的唾液，从中取5ml的1/5的唾液再加入10ml水配成1/10 的唾液。 (3)测量PH:取12支管，分别标上1~12，按下表操作: 管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1/50.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 唾液 淀粉0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 溶液 0.5ml5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 缓冲 溶液 PH 蒸馏3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 3.0 水 表2: 管号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 1/100.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 唾液 淀粉0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 0.4 溶液 0.5ml5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 7.6 7.8 8.0 缓冲 溶液

实验八_酶性质——最适PH选择

酶性质——最适PH选择 姓名：任建南 学号：201300140073 班级：13级生科四班 同组者：周光明 时间：2015年5月25日 【实验目的】 1、熟悉并掌握用酶最适PH选择的方法。 2、学会寻找酶最适反应时间的方法。 【实验原理】 酶的催化活性与环境PH有密切关系，通常各种酶只在一定PH范围内才有活性，酶活性最高时的PH，称为酶的最适PH。高于或者低于此PH时酶的活性逐渐降低。值得指出的是，不同的酶最适PH也不同，如胃蛋白酶的最适PH为1.5-2.5，胰蛋白酶的最适PH为8.0。 酶的最适PH不是一个特征性的物理常数，而对于同一个酶，其最适PH因缓冲液和底物的性质不同而有差异。如唾液淀粉酶的最适PH为6.8，但在磷酸缓冲液中，其最适PH为6.4-6.6，而在乙酸缓冲液中则为5.6。 【实验试剂】 1.0.3%NaCl‘ 2.0.5%的淀粉 3.用0.2M Na2HPO4和0.1M的柠檬酸溶液配制的PH为5.4、6.0、6.4、6.8、7.2、7.6、8.0的缓冲液 【实验步骤】 1、确定合适的保温时间 保温时间是指从加入酶液开始到从水浴中取出试管加入碘液的一般时间。 取一支试管，加入0.3%NaCl、0.5%淀粉各2ml，PH6.8的Na2HPO4-柠檬酸缓冲液3ml和稀释

100-300倍的唾液2ml，充分摇匀，放入37度水浴保温。 计时，每隔1min滴一滴混合液于点滴板上，加1滴碘液，检验淀粉水解程度，呈橙黄色时，加一滴碘液于试管中，若为橙黄色表示反应完全，记录保温时间。 若2-3min内，保温液与碘液作用呈橙黄色，则说明酶活力太高，应再稀释唾液淀粉酶，记录稀释倍数。若保温时间超过15min，说明酶活力太低，需要提高酶的浓度。最佳保温时间为8-15min内。 2、确定最适PH 取7支试管按下表操作，保温时间参考步骤1 从各管呈现的颜色，判断不同PH对淀粉水解和淀粉酶活性的影响，并确定其最适PH。 【实验结果】 实验用唾液淀粉酶稀释倍数为200倍，PH 6.8 37°C水浴的时间7min，各试管最终试剂颜色依次深→浅→深，且PH为6.8时颜色最浅，可见唾液淀粉酶最适PH在6.8左右且过高或者过低都会使其活力下降 【思考讨论】 结果分析： 由颜色梯度可以看出，在PH=6.8时，加入碘液后混合液的颜色最浅，因此，唾液淀粉酶的最适PH为6.8，PH值高于或者低于6.8，唾液淀粉酶的活力都会受到抑制。 注意事项： （1）本次实验成功的关键点之一就是缓冲溶液，一定要保证加入的Na2HPO4和柠檬酸的体积完全符合要求，并且充分混匀。 （2）实验操作过程中，一定要保证唾液淀粉酶酶液一直处于低温状态，这样有利于保证酶的活力，可以防止酶失活。

唾液淀粉酶最适pH值

唾液淀粉酶最适pH值的测定 陆绍龙 广西医科大学七年制临床医学10级4班 摘要：目的：1）掌握测定唾液淀粉酶最适pH值的测定方法以及原理；2）熟悉不同pH值缓冲溶液的配制和分光光度计的使用；方法：通过唾液淀粉酶在不同pH环境中水解淀粉，测出未被水解的淀粉与碘液结合成的蓝色复合物的分光光度值，根据实验数据判断酶的最适pH；结果:当pH=6.6时，唾液淀粉酶的活性最高。 关键词:唾液淀粉酶 pH 分光光度计 前言：酶学与医学的关系密切。人体的许多疾病和酶都密切相关。酶分子中的许多极性基团，在不同的pH条件下解离状态不同，其所带电荷的种类和数量也各不相同，酶活性中心的某些必需基团往往仅在某一解离状态时才容易同底物结合或具有最大的催化活性。此外，pH的改变还可以引起酶活性中心的构象改变,因此pH的改变对酶的催化作用影响很大。人的唾液中99%是水，有机物主要是唾液淀粉酶、粘多糖、粘蛋白及溶菌酶等，无机物有钠、钾、钙、氯和硫氰离子等。唾液中含有的一种有催化活性的蛋白质，可以催化淀粉水分解为麦芽糖。唾液淀粉酶发挥作用的最适pH值在中性范围内，唾液中的氯和硫氰酸盐对此酶有激活作用。食物进入胃后，唾液淀粉酶还可继续使用一段时间，直至胃内容物变为pH值约为4.3~4.8的酸性反应为止。 正文： 1.材料与方法： 仪器：吸量管（5mL，1mL），试管若干，试管架，小烧杯，洗耳球，721G-722G分光光度计，恒温箱（含温度计），一次性纸杯，pH试纸。 试剂：2.5g/L淀粉，0.2mol/L Na2HPO4溶液，0.2mol/L NaH2PO4 溶液,蒸馏水，唾液，碘液。 2.操作步骤 1）1. 不同pH缓冲液配制 按下表加样，最后加蒸馏水稀释至10ml。

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验设计

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 小组成员:刘倍材何标才揭春晓李芮 实验目的： 1.掌握设计性实验的基本思路，并完成设计报告。 2.掌握唾液淀粉酶最适PH的测定原理和方法。 3.熟悉影响酶促反应速度的因素。 实验原理： 1．酶促反应速度受到许多因素的影响，如温度、PH、激动剂和抑制剂等。上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响，可用定性或定量的反应来观察。利用碘与淀粉机器不同程度纾解产物反应的颜色，来衡量酶促反应的速度的快慢。蓝色—紫红色—黄色，颜色由蓝变黄，表示酶促反应速度由慢到快。此为定性观察。 2.进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。由于在被水解的程度也不一样。当唾液淀粉酶不能将完全水解时，淀粉遇碘呈蓝色，吸收波长位于660nm 处。不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同，吸光度值也不同。因此，通过测量660nm处的吸光度值，可以了解PH 对酶促反应的影响，吸光度最小的溶液其PH即为唾液淀粉酶的最适PH。

实验步骤： 1.缓冲溶液的配制。取12支试管进行编号1-12，分别按下表加入试剂。 2.唾液的采集。 先给备取者一杯纯净水让其漱口，将漱口液吐掉,让备取者下嘴唇抵住干净的杯子口，在备取者眼前放上一些话梅，这时，备取者的唾液会不停地流出来。 3.唾液的稀释。取10支试管，进行编号1＇-10＇,进行稀释。

4.唾液稀释倍数的选取。 另取10支试管，分别编上A-K号，各取上述稀释的唾液各1ml，分别加入相应编号的试管里，向10支试管内同时加入1ml的0.02％的淀粉溶液，振荡混匀后放入37 C恒温水浴5分钟后取出，滴加2～3碘液，振荡混匀，观察颜色，选取颜色变化适中的一支，记录稀释倍数。 5.最适PH的测定。 另取12支试管,进行编号,按下表加入试剂。进行测定。

唾液淀粉酶实验

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 实验目的 1．掌握设计性实验的基本思路，并完成设计报告。 2．掌握唾液淀粉酶最适PH的测定原理和方法。 3．熟悉影响酶促反应速度的因素。 实验原理 1．酶促反应速度受到许多因素的影响，如温度、PH、激动剂和抑制剂等。上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响，可用定性或定量的反应来观察。利用碘与淀粉机器不同程度纾解产物反应的颜色，来衡量酶促反应的速度的快慢。蓝色—紫红色—黄色，颜色由蓝变黄，表示酶促反应速度由慢到快。此为定性观察。 2.进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。由于在被水解的程度也不一样。当唾液淀粉酶不能将完全水解时，淀粉遇碘呈蓝色，吸收波长位于660nm处。不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同，吸光度值也不同。因此，通过测量660nm处的吸光度值，可以了解PH对酶促反应的影响，吸光度最小的溶液其PH即为唾液淀粉酶的最适PH。

实验器材 仪器材料：方盘，试管架，中试管，毛刷，吸耳球，玻璃铅笔，小烧杯，白瓷板，坐标纸，漱口杯。0.1ml、0.5ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml刻度吸管，胶头滴管，37 C恒温水浴箱，分光光度计，电磁炉。 试剂药品：0.02％淀粉溶液. 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液碘液；称取碘1g,碘酸钾2g，溶于300ml蒸馏水中。

实验步骤： 1、缓冲液的配置 pH 0.2mol/L 0.2mol/L NaH2PO4(ml) Na2HPO4(ml) 5.7 93.5 6.5 5.8 92.0 8.0 5.9 90.0 10.0 6.0 8 7.7 12.3 6.1 85.0 15.0 6.2 81.5 18.5 6.3 7 7.5 22.5 6.4 73.5 26.5 6.5 68.5 31.5 6.6 62.5 3 7.5 6.7 56.5 43.5 6.8 51.0 49.0

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 参考

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 实验目的： 1、掌握用碘-淀粉比色法的方法精测唾液淀粉酶最适pH值。 2、学会常用的缓冲溶液配制的方法。 3、进一步熟悉分光光度计的使用。 一、实验原理： 1、酶催化活性最高时反应体系的pH值称为酶的最适pH值。人体正常唾液pH值为6.6～7.1，吸光度值在6.0～8.0范围内并且随着pH的增大先减小后增大。 2、在不同pH条件下，淀粉经淀粉酶水解后不同程度的水解产物能与碘液反应呈现不同颜色，可用分光光度计测量出反应后各溶液在660nm 处的吸光度A，由朗伯－比尔定律可知，吸光度A值越大，其相应的酶活力越低，从而可间接得出唾液淀粉酶的最适pH值。 三、仪器材料和试剂： 仪器材料： 1. 白瓷板、中试管、试管架、毛刷、吸耳球、玻璃笔、烧杯、漱口水 2. 37 C恒温水浴箱、分光光度计、沸水浴 3.1ml吸量管、5ml吸量管，胶头滴管、100ul移液器 实验试剂： 0.02％淀粉溶液、 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L磷酸氢二钠溶液、碘液、蒸馏水

四、实验步骤： 1、试剂的配制： 0.02％淀粉溶液—取2.5g/L的淀粉溶液4ml，置于50ml容量瓶中，加蒸馏水稀释到50mL。 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液—准确称取14.200g，加入20ml蒸馏水溶解在烧杯，然后置于500ml容量瓶中稀释至刻度备用。 0.2mol/L磷酸氢二钠溶液—准确称取12.000g，加入20ml蒸馏水溶解在烧杯，然后置于500ml容量瓶中稀释至刻度备用。 根据下表，混合溶液至50.00ml后用蒸馏水稀释到100.00ml. pH 值 0.2mol/LNa2HPO4(ml)（丁） 0.2mol/LNaH2PO4 (ml)（霞） 5.8 4.00 4 6.00 6.0 6.15 43.85 6.2 9.25 40.75 6.4 13.25 36.75 6.6 18.75 31.25 6.8 24.50 25.50 7.0 30.50 19.50 7.2 36.00 14.50 7.4 40.50 9.50 7.6 43.50 6.50 7.8 45.75 4.25 8.0 47.35 2.65

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验设计

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验设计

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 小组成员: 刘倍材何标才揭春晓李 芮 实验目的： 1.掌握设计性实验的基本思路，并完成设计报告。 2.掌握唾液淀粉酶最适PH的测定原理和方法。 3.熟悉影响酶促反应速度的因素。 实验原理： 1．酶促反应速度受到许多因素的影响，如温度、PH、激动剂和抑制剂等。上述诸因素对唾液淀粉酶催化淀粉水解反应速度的影响，可用定性或定量的反应来观察。利用碘与淀粉机器不同程度纾解产物反应的颜色，来衡量酶促反应的速度的快慢。蓝色—紫红色—黄色，颜色由蓝变黄，表示酶促反应速度由慢到快。此为定性观察。 2.进一步利用郎伯—比尔定律来判定溶液的吸光度与溶液的浓度符合一定的比例关系。由于在被水解的程度也不一样。当唾液淀粉酶不能将完全水解时，淀粉遇碘呈蓝色，吸收波长位于660nm处。不同PH环境中唾液淀粉酶与淀粉的反应程度不同，吸光度值也不同。因此，通过测量660nm处的吸光度值，可以了解PH对酶促反应的影响，吸光度最小的溶液其PH即为唾液淀粉

酶的最适PH。 实验步骤： 1.缓冲溶液的配制。取12支试管进行编号1-12，分别按下表加入试剂。 2.唾液的采集。 先给备取者一杯纯净水让其漱口，将漱口液吐掉,让备取者下嘴唇抵住干净的杯子口，在备取者眼前放上一些话梅，这时，备取者的唾液会不停地流出来。

3.唾液的稀释。取10支试管，进行编号1＇-10＇,进行稀 释。 4.唾液稀释倍数的选取。 另取10支试管，分别编上A-K号，各取上述稀释的唾液各1ml，分别加入相应编号的试管里，向10支试管内同时加入1ml的0.02％的淀粉溶液，振荡混匀后放入37 C恒温水浴5分钟后取出，滴加2～3碘液，振荡混匀，观察颜色，选取颜色变化适中的一支，记录稀释倍数。 5.最适PH的测定。 另取12支试管,进行编号,按下表加入试剂。进行测定。

唾液淀粉酶最适pH值

陆绍龙 广西医科大学七年制临床医学10级4班 摘要：目的：1）掌握测定唾液淀粉酶最适pH值的测定方法以及原理；2）熟悉不同pH值缓冲溶液的配制和分光光度计的使用；方法：通过唾液淀粉酶在不同pH环境中水解淀粉，测出未被水解的淀粉与碘液结合成的蓝色复合物的分光光度值，根据实验数据判断酶的最适pH；结果:当pH=时，唾液淀粉酶的活性最高。 关键词:唾液淀粉酶 pH 分光光度计 前言：酶学与医学的关系密切。人体的许多疾病和酶都密切相关。酶分子中的许多极性基团，在不同的pH条件下解离状态不同，其所带电荷的种类和数量也各不相同，酶活性中心的某些必需基团往往仅在某一解离状态时才容易同底物结合或具有最大的催化活性。此外，pH的改变还可以引起酶活性中心的构象改变,因此pH的改变对酶的催化作用影响很大。人的唾液中99%是水，有机物主要是唾液淀粉酶、粘多糖、粘蛋白及溶菌酶等，无机物有钠、钾、钙、氯和硫氰离子等。唾液中含有的一种有催化活性的蛋白质，可以催化淀粉水分解为麦芽糖。唾液淀粉酶发挥作用的最适pH值在中性范围内，唾液中的氯和硫氰酸盐对此酶有激活作用。食物进入胃后，唾液淀粉酶还可继续使用一段时间，直至胃内容物变为pH值约为~的酸性反应为止。 正文： 1.材料与方法： 仪器：吸量管（5mL，1mL），试管若干，试管架，小烧杯，洗耳球，721G-722G 分光光度计，恒温箱（含温度计），一次性纸杯，pH试纸。 试剂：L淀粉，L Na2HPO4溶液，L NaH2PO4 溶液,蒸馏水，唾液，碘液。 2.操作步骤 1）1. 不同pH缓冲液配制 按下表加样，最后加蒸馏水稀释至10ml。 pH L Na2HPO4溶液(mL) L NaH2PO4 溶液(mL) 注：应用pH值试纸来确定所配溶液pH。 2）唾液的获取 先漱口1~2次，然后含一大口水约1min，期间做咀嚼运动，然后收集至杯子中。

唾液淀粉酶的性质和活力测定·

唾液淀粉酶的性质和活力测定 一．实验目的 （一）1通过唾液淀粉酶性质的测定，了解酶的专一性和多种因素对酶粗反应的影响，pH，底物浓度，温度，激活剂，抑制剂等2学习酶活力，酶活力单位，比活力的测定，加深对概念的理解； 3学会用考马斯亮蓝法测定蛋白质的含量，学会用3,5-二硝基水杨酸测定还原糖的含量，熟练操作分光光度计。 二．实验试剂和器材 器材：可见光分光光度计，试管，移液管，恒温水浴锅，pH试纸，1000ml容量瓶和100ml的容量瓶各一只； 药品：可溶性淀粉，考马斯亮蓝试剂G-250，3,5-二硝基水杨酸，NaoH,HCL，标准牛血清白蛋白溶液，醋酸，醋酸钠，蒸馏水，95%乙醇，85%磷,；0.15molNaCL/ml，0.15mol/L硫酸铜溶液，碘化钾–碘溶液：将碘化钾20克和碘10克溶解在100ml水中，使用前稀释10倍。 注：（1）考马斯亮蓝G-250试剂：考马斯亮蓝试剂G-250100mg 溶于95%乙醇中，加入100ml85%磷酸，加水稀释至1000ml，过滤即可。 （2）标准牛血清白蛋白溶液：结晶牛血清白蛋白用凯式定氮法测蛋白含量，根据其纯度用0.15mol/L Nacl配置成0.1mg/L的蛋白液； （3）配置0.01%g/ml,0.1%g/ml,，0.5%g/ml,1%g/ml,2%g/ml,3%g/ml 的的溶性淀粉溶液;

(4)配置一系列pH2的缓冲溶液 0.2Mol/L磷酸氢二钠溶液为28.40g/L,Mr=141.98,称取2.84g溶于100ml的水中 0.1Mol/L柠檬酸溶液21.01g/l,Mr=210.14,称取2.1溶于100ml水中； 锥形瓶号0.2Mol/L磷酸氢二钠 （毫升） 0.1Mol/L柠檬酸 （毫升） 缓冲液pH 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 0.4 4.11 7.71 10.30 11.15 12.09 13.22 14.55 16.47 18.17 19.15 19.45 19.60 15.89 12.29 9.70 8.85 7.91 6.78 5.45 3.53 1.83 0.85 0.55 2.2 3.0 4.0 5.0 5.4 5.8 6.2 6.6 7.0 7.4 7.8 8.0 5配置0.15mol/L的NaCL溶液和0.15mol/L硫酸铜溶液 三．实验步骤 （一） 1 pH的对酶的影响 1）葡萄糖标准曲线的制定 准确称取100mgAR纯的葡萄糖，溶于蒸馏水中，定容于100ml的容量瓶中，配成1.0mg/L的溶液，水浴加热5min，迅速取出冷却，在向每管加入21.5ml的蒸馏水于550nm处测吸光度； 试剂处理试管编号0 1 2 3 4 5 6 7 葡萄糖标准液/ml —0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 1.2 1.4 蒸馏水/ml 2.0 1.8 1.6 1.4 1.2 1.0 0.8 0.6 3,5-二硝基水杨酸/ml 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 1.5 λ=550nm的吸光值（A）

关于唾液淀粉酶的最适PH

关于唾液淀粉酶的最适PH 姓名邱远学号201150716 摘要：为了探究唾液淀粉酶的最适宜PH值，通过配置不同PH值的基质液作为酶与底物反应的环境，再加碘液与未反应的底物作用成色，用分光仪测定溶液吸光度来比较底物的剩余量，以此推断出唾液淀粉酶的最适宜PH的范围。 关键词：唾液淀粉酶最适PH值 前言：作为一名医学生，未来的医生，通过实验来学习获得科研的基础知识，熟悉一些基本原则和操作，更是为了完成老师布置的作业。此次实验具有重要意义。 实验原理：淀粉经样品中淀粉酶的水解，生成糊精和麦芽糖。在底物过量的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物。其颜色的深浅与空白管颜色的差值和淀粉酶的活力成正比。即颜色越浅，吸光度越低，淀粉酶的活力越高。 操作步骤： 一：基质液的配置： 1：取十一支规格相同的干净试管，分别编号1到10.置于试管架的第一排。 2：按下表加入试剂。

二：酶液的配置： 1：实验者用蒸馏水漱口，洗去残留食物，然后含一口蒸馏水在口中三分钟，时间到后将唾液吐在一个干净的纸杯。 2：取两个干净烧杯，分别标注为1:5和1:10. 三：反应进行。

1：去20支规格相同的试管，平均分成两组,分别编号1到20 其中1到10号试管加入1:5号烧杯的酶液置于试管架第三排11到20号试管加入1:10号烧杯的酶液置于试管架第二排。 2.按下表在各试管中加入试剂。

3:因为用肉眼感觉各试管区别不是很明显，故在每一只试管中注入2ml的蒸馏水。 4：混匀后用分光度法在660nm波长下用蒸馏水调零，测量各管的A660。测得的读数已并入上表。 绘制成图：

酶性质——最适pH选择

酶性质—最适pH选择 高熹 168615140001 一、实验原理： 酶的催化活性与环境pH有密切关系，通常各种酶只在一定pH范围内才有活性，酶活性最高时的pH，称为酶的最适pH。高于或低于此pH时酶的活性逐渐降低。值得指出的是，不同的酶最适pH也不同，如胃蛋白酶的最适pH为1.5~2.5，胰蛋白酶的最适pH为8。 酶的最适pH不是一个特征性的物理常数，对于同一个酶，其最适pH因缓冲液和底物的性质不同而有差异。如唾液淀粉酶最适pH为6.8，但在磷酸缓冲液中，其最适pH为6.4~6.6，而在乙酸缓冲液中则为5.6。 二、实验试剂： 1、0.3%氯化钠0.5%淀粉溶液； 2、用0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液配制pH分别为5.4，6.0，6.4，6.8，7.2，7.6，8.0的缓冲液。 各pH值的缓冲液所需两种溶液配比 三、实验仪器： 1、恒温水浴锅 2、试管若干 3、移液管 4、量筒 5、胶头滴管 6、烧杯 7、容量瓶 四、实验操作： 保温时间指从加入酶液开始到从水浴中取出试管加入碘液的一段时间。摸准保温时间是实验的关键步骤之一。 取一支试管，加入0.3%氯化钠0.5%淀粉溶液2ml，加入pH6.8磷酸氢二钠—柠檬酸钠缓冲液3ml，及稀释100~300倍的唾液2ml。充分摇匀后，放入37℃水浴中保温并记时，每隔1min用滴管取1滴混合液，至于点滴板上，加1滴碘液，检验淀粉水解程度，待呈橙黄色时，为进一步确定保温时间，应加1滴碘液至试管中，若为橙黄色表示反应完全，记录所需保温时间。 若2~3min内，取出的保温液与碘液作用呈橙黄色，则说明酶活力太高，应再稀

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 实验方案

唾液淀粉酶最适pH值的测定实验 组员：李艳高雅华毛秋丽 实验原理：酶催化活性最高时，反应体系的pH值称为酶的最适pH值[2].碘液与淀粉 及其不同程度的水解产物反应呈现不同颜色，即：淀粉（蓝色）紫色糊精（紫色）红色糊精（红色） 麦芽糖及少量葡萄糖（黄色）。[3] 利用朗伯－比尔定律[4],用分光光度计测量出各溶液在660nm处的吸光度A，从而间接测出唾液淀粉酶的最适pH值 仪器材料和试剂药品： 仪器材料：1. 白瓷板、中试管、试管架、毛刷、吸耳球、玻璃笔、小烧杯、坐标纸、漱口水 2. 37 C恒温水浴箱、分光光度计、沸水浴 3. 0.1ml、0.5 ml、1.0ml、2.0ml、5.0ml、10.0ml刻度吸管、胶头滴管 试剂药品：1. 0.02％淀粉溶液 2. 0.2mol/L磷酸二氢钠溶液、0.2mol/L磷酸氢二钠溶液 3. 碘液、水 实验步骤： 1、缓冲液的配置：根据下表，配置各个pH值的缓冲溶液各10ml pH 值 2、唾液的获取： 蒸馏水漱口,然后用舌尖抵住上额或下额齿根后,微低头.轻启双唇，将下嘴唇搁在烧杯边缘，让唾液自然流入试管中. 3、唾液的稀释：取10支试管，分别编上号00～09 ①用蒸馏水漱口，然后使蒸馏水停留在口腔30秒，同时不断地搅动，接着吐到干净的一次性杯中 ②取8只干净的试管，编号1~8，依次加入5ml蒸馏水 ③取5ml唾液，加入1号试管中，充分振荡，然后从1号取5ml稀释的唾液加到2号试管中，充分振荡，依次类推，仅保留8号试管加入蒸馏水作为空白管。37℃保温，备用。至此，1~7号试管分别被稀释了2倍、4倍、8倍、16倍、32倍、64倍。 4、唾液稀释倍数的选取

实验七、酶的特性(唾液淀粉酶性质的研究)

实验七、酶的特性（唾液淀粉酶性质的研究） ［目的要求］ 1、进一步学习和了解酶的性质。 2、学会检查酶的性质的原理和方法。 ［实验原理］ 酶与一般催化剂最主要的区别之一是酶具有高度特异（专一）性，即一种酶只能对一种底物或一类底物（此类底物在结构上通常具有相同的化学键）起催化作用，对其他底物无催化反应。例如，淀粉酶和蔗糖酶虽然都是催化糖苷键的水解，但是淀粉酶只对淀粉起作用，蔗糖酶只水解蔗糖。还原糖产物可用本乃狄试剂鉴定。 通过比较淀粉酶在不同pH、不同温度以及有无抑制剂或激活剂时水解淀粉的差异，说明这些环境因素与酶活性的关系。 温度、PH对淀粉活性影响酶的催化活性受到温度的影响，在一定温度范围内，酶才有活性，且在最适温度下，酶反应速度最大。大多数动物酶的最适温度为37℃-40℃，植物酶的最适温度为50℃-60℃。对温度的稳定性与其存在形式有关，有些的干燥制剂，虽加热到100℃，其活性并无明显变，但在100℃的溶液中很快地完成失去活性。低温能降低或抑制的活性，但不能使失活。 酶的激活和抑制作用酶是具有高效专一催化活性的蛋白质，其活性常受温度PH及些物质的影响。某些物质可以增加其活性，称为激活剂；某些物质能降低其活性，称为抑制剂。很少量的激活剂或抑制剂就会影响酶的活性，而且这种作用常常具有特异性。但要注意的是激活剂和抑制不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂时却为另一种酶的抑制剂，而在高浓度时则为该酶的激活剂（如NaCl）。 ［实验材料与设备］ 器材：试管和试管架、试管夹、恒温水浴箱、烧杯、冰浴（冰箱）、沸水浴（电磁炉）、移液管。 试剂：0.2%淀粉-0.3% NaCl液、0.1%淀粉、1%淀粉-0.3% NaCl液、1%CuSO4、1%NaCl、1%Na2SO4、2%蔗糖溶液，碘化钾-碘溶液，斑氏试剂。 ［实验步骤］ 一、酶液的提取。 （1）唾液淀粉酶的制备。 二、酶的活性检验 （1）温度对酶活性的影响。 摇匀，保持各自温度继续反应，5分钟后每隔1分钟从第2号管吸取1滴反应液于白瓷板上，用碘液检查反应进行情况，直至反应液不再变色（只有碘液的颜色），立即取出所有试管，流水冷却2min，各加1滴碘液，混匀。观察并记录各管反应现象，解释之。 注：*2号管冰浴10分钟后分成二半、一半加碘试剂一半37℃保温10min后加碘试剂。 （2）激活剂和抑制剂。

唾液淀粉酶的活性观察

唾液淀粉酶的活性观察 【实验目的】 1.了解环境因素对酶活性的影响及酶的高效性。 2.掌握酶定性分析和注意事项。 【基本原理】 酶是生物催化剂，具有极高的催化效率，具催化率比一般催化剂高106~1013。 在生物体内，过氧化氢酶能催化过氧化氢很快地分解成为H 2O和O 2 ，使H 2 O 2 不致 在体内大量积累。铁粉也是过氧化氢分解反应的催化剂，但其催化效率仅为过氧化氢的100亿分之一。 酶的催化作用受到温度的影响。在一定的温度范围内，随着温度的升高，酶促反应速度增加，直至最大值。由于酶是一种蛋白质，温度过高会导致酶的失活，因此，反应速度到达最高值以后，温度继续升高，酶促反应速度反而急剧下降，直至完全停止酶促反应。反应速度达到最大值时的温度称为酶作用的最适温度。 酶活性受环境pH值的影响。通常各种酶只有在一定的pH值范围才表现出活力。酶活性达到最高的pH值，称为最适pH值。低于或者高于最适pH值时，酶的活性均降低或者失去活性。唾液淀粉酶的最适pH值为6.8。 酶活性受环境中某些物质的影响，有些物质能使酶的活性增加，称为激活剂；有些物质能使酶的活性降低，称为抑制剂。值得注意的是，激活剂和抑制剂不是绝对的，有些物质在低浓度时为酶的激活剂，而在高浓度时则为该酶的抑制剂。例如，0.9%的氯化钠是唾液淀粉酶的激活剂，但氯化钠达到1/3饱和度时就可抑制唾液淀粉酶的活力。 本实验以唾液淀粉酶为材料来观察环境因素对酶活性的影响情况。唾液中含有α-淀粉酶，该酶属于内切酶。淀粉在该酶的催化作用下或随着时间的延长而出现不同程度的水解产物，从而得到各种糊精乃至麦芽糖、少量葡萄糖等产物。 而碘液能指示淀粉的水解程度，淀粉及淀粉不同程度的水解产物遇到碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色，而麦芽糖遇碘液则不呈颜色反应。如图所示： 淀粉酶淀粉酶 淀粉紫色糊精暗褐色糊精红色糊精麦芽糖+少量葡萄糖加碘后： 蓝色紫红色暗褐色红棕色黄色（碘本身颜色）

酶的最适pH测定

唾液淀粉酶最适pH值测定 作者：谭继欢学号：201140143 摘要：生物体内的酶是对其特异底物起高效催化作用的蛋白质和核酸，前者是机体内催化各种代谢反应最重要的催化剂。酶分子中的许多极性基团。在不同的pH条件下解离状态不同，其所带电荷的种类和数量也各不相同，酶活性中心的某些必需基团往往仅在某一解离状态时才最容易同底物结合或具有最大的催化活性。许多具有可解离基团的底物和辅酶的荷电状态也受pH改变的影响，从而影响酶对它们的亲和力。此外，PH还可以影响酶活性中心的空间构象，从而影响酶的活性。因此，pH的改变对酶的催化作用影响很大。酶催化活性最高时反应体系的pH称为酶促反应的最适PH。测定酶的最适pH值，是进一步了解酶生物学活性的基础。 关键词：淀粉酶最适ph 吸光度 前言：酶无论在生活中还是在医学领域都有很大的研究意义，研究酶可以很好应用酶的各种特性，在各种领域广泛应用。 影响酶反应活力的因素很多，影响胞外酶的因素主要包括PH值、温度和金属离子、抑制剂及其他小分子，以及酶浓度等因素。 PH值对酶反应活力的影响： 1、酸或碱可以使酶的空间结构破坏，引起酶的活力丧失，这种丧失活力可以是可逆的或者是不可逆的，对可逆的来说，改变PH值后可使活力恢复。 2、酸或碱影响酶的活性部位催化基团的离解状态，使得底物不能分解成产物。 3、酸或碱影响酶的活性部位结合基团的离解状态，使得底物不能和它结合。 4、酸或碱影响底物的离解状态，或使底物不能和酶结合。 由于上述种种原因，各种酶的作用都有一个最适合的PH值范围。 实验原理： 本实验用唾液淀粉酶为材料来观察酶活性受PH影响的情况。唾液中含有唾液淀粉酶。淀粉在该酶的催化作用下会随着时间的延长而出现不同程度的水解，从而得到各种糊精乃至麦芽糖、少量葡萄糖等水解产物。碘液与淀粉及其不同程度的水解产物反应呈现不同颜色，即：淀粉（蓝色）、紫色糊精（紫

唾液淀粉酶最适pH测定小论文

探究人唾液淀粉酶的最适PH （碘-淀粉比色法） 摘要：唾液淀粉酶是由唾液腺分泌的一种水解酶，可作用于可溶性淀粉、直链淀粉、糖原等α-1,4-葡聚糖等，属于α-淀粉酶的一种。酶学与医学联系紧密，测定酶的最适pH，有利于我们把酶学知识运用于临床诊断与应用治疗。本实验尝试用碘-淀粉比色法测定唾液淀粉酶最适pH，加深对酶学知识的理解。 关键词：缓冲液；唾液淀粉酶；分光光度计 前言：人体内各种代谢反应，都离不开酶的催化作用，酶量的改变以及酶活性的改变都会引起人体化学反应的异常或紊乱，因此酶在人体内是否能发挥正常活性关系着人体内环境的稳定。而pH是影响酶活性的一个重要因素，因此，通过探究实验探究人唾液淀粉酶的最适pH，不仅可以检测我们的生物化学实验操作能力和探究能力，也可以加深我们对酶学知识的理解。 正文: 【实验原理】 酶是具有高效催化能力的生物大分子物质，其化学结构上具有许多极性基团，在不同酸碱环境中，这些基团的解离状态不同，所带电荷也不同。只有当酶处于一定的解离状态，才能和作用物结合。因此，溶液的pH对酶活性影响很大。若其他条件不变，酶只有在一定的pH范围内才能表现出催化活性。在某pH时，酶催化活性最大，此pH称为酶作用的最适pH。当溶液的pH偏离最适pH时，酶活性降低，甚至失活。 淀粉经唾液中淀粉酶的水解，生成糊精和麦芽糖。在底物过量的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合成蓝色复合物，其颜色深浅与空白管颜色的差值和唾液淀粉酶的活力成正比。 在底物过量的条件下，相同时间内，在温度、酶浓度相同、pH不同的条件下，越接近

最适pH的反应体系中酶活性越高，消耗淀粉的量越大，剩余淀粉与过量碘液生成的颜色 越浅，吸光度越小。本实验利用分光光度计测出各管的吸光度后，取处于降低与升高趋势 之间的较小吸光度范围对应的pH值即为唾液淀粉酶的最适pH。 【仪器与试剂】 仪器材料：试管架，试管，烧杯，一次性纸杯，移液枪，刻度吸管，洗耳球，胶头滴管，pH试纸，恒温 水浴箱，分光光度计 试剂药品：2.5g/L淀粉溶液，碘液，0.2mol/L NaH2PO4、0.2mol/LNa2HPO4，唾液，纯净水 【实验步骤】 1、唾液的获取 纯净水先漱口1～2次，然后含一大口水约2分钟，其间做咀嚼运动，然后将水和唾液一同收集至烧杯中。【1】 2、不同pH缓冲液的配制【2】 取8支试管，编号，按表1-1操作，再加蒸馏水至10mL。用pH试纸检测各缓冲液pH。（pH7.0的缓冲液配制2次） 表1-1 不同pH缓冲液配制（用量：ml） 试管 1 2 3 4 5 6 7 8 9 pH 5.8 6.0 6.2 6.4 6.6 6.8 7.0 7.2 7.4 0.400 0.615 0.925 1.325 1.875 2.450 3.050 3.600 4.050 0.2mol/L Na2HPO4 4.600 4.385 4.075 3.675 3.125 2.550 1.950 1.400 0.950 0.2mol/L NaH2PO4 H2O 5.0 3、淀粉用量的确定 取5支试管，按表1-2淀粉用量进行配制，之后比较选出适当颜色深浅的那支试管。【3】 表1-2 淀粉用量的确定(用量：ml) 试管 1 2 3 4 5

唾液淀粉酶

一. 目的 掌握测定淀粉酶活力的原理和基本方法 二. 原理 酶活力也称酶活性，是以酶在最适温度、最适pH等条件下，催化一定的化学反应的初速度来表示。本实验是以一定量的唾液淀粉酶液，于37°C、pH6.8的条件下，在一定的初始作用时间里将淀粉转化为还原糖，然后通过与DNS试剂作用，比色测定，求得还原糖的生成量，从而计算出酶反应的初速度，即酶的活力。这里规定，一个淀粉酶活力单位定义为在37°C、pH6.8的条件下，每分钟水解淀粉生成1mg还原糖所需的酶量。 三. 实验材料及设备 1. 材料 唾液 2. 仪器 分光光度计恒温水浴沸水浴 3. 器材 刻度试管：25mL×10 容量瓶：100mL×1 移液管：1mL×4 2mL×2 烧杯：250mL×1 滴管：2 洗耳球：2 洗瓶、试管架、移液管架、玻棒：各1 四. 试剂的配制 1. 淀粉溶液（0.5%） 称取5g可溶性淀粉，溶于1000mL热水中。（临用前配制） 2. 蔗糖溶液（1%） 3. 3,5-二硝基水杨酸试剂（DNS试剂） 将5.0g 3,5-二硝基水杨酸溶于200mL 2N NaOH溶液中（不适宜用高温促溶），接着加入500mL含130g酒石酸钾钠的溶液，混匀。再加入5g结晶酚和5g亚硫酸钠，搅拌溶解后，定容至1000mL。暗处保存备用。 4. 磷酸缓冲液（0.2mol/L，pH6.8） 5. NaOH溶液（6mol/L） 6. NaCl溶液（0.3%） 五. 操作步骤 1. 唾液淀粉酶的制备 (1) 提取：实验者先用水漱口清洁口腔，然后含一小口（约5mL）蒸馏水于口中轻嗽一、二分钟。 (2) 过滤：将口腔中的酶提取液用一层脱脂棉过滤。 (3) 稀释：取滤液1mL，用水定容至100mL。作为淀粉酶的样品液。 （由于不同人或同一人不同时间收集到的唾液淀粉酶的活性并不相同，稀释倍数可以是50～300倍，甚至超过此范围。） 3. 唾液淀粉酶活力的测定 取25mL刻度试管5支，按表二编号并操作，记录实验结果。

实验五 唾液淀粉酶的最适PH测定

山东大学实验报告2011年4月6日 姓名张行润系年级2009级生科4班学号200900140177同组者于潜 科目生物化学实验题目唾液淀粉酶的最适PH测定仪器编号105 一．实验目的 1、了解pH对酶活力的影响 2、了解什么叫最适pH，掌握测量pH对酶活力影响的基本原理和方法 二．实验原理 影响酶反应活力的因素很多，影响胞外酶的因素主要包括PH值、温度和金属离子、抑制剂及其他小分子，以及酶浓度等因素。 PH值对酶反应活力的影响： 1、酸或碱可以使酶的空间结构破坏，引起酶的活力丧失，这种丧失活力可以是可逆的或者是不可逆的，对可逆的来说，改变PH值后可使活力恢复。 2、酸或碱影响酶的活性部位催化基团的离解状态，使得底物不能分解成产物。 3、酸或碱影响酶的活性部位结合基团的离解状态，使得底物不能和它结合。 4、酸或碱影响底物的离解状态，或使底物不能和酶结合。 由于上述种种原因，各种酶的作用都有一个最适合的PH值范围。 最适pH 酶的催化活性与pH环境有密切关系，通常各种酶只在一定pH范围内才具有活性，酶活力最高时的pH，称为酶的最适pH。高于或低于此pH时酶的活性逐渐降低。 用酶活力对PH值作图，往往是钟罩形曲线。最适合的PH值还随着底物浓度、温度和其他条件的变化而变化，因此确定最适合的PH值应在所实验的条件下测得。 需要注意的是： 1.酶的最适pH不是一个特征性常数。不同种类的酶其最适合的PH值范围不同； 2.同一种酶，来源不同，其最适合的PH值也有差异； 3.同一种酶由于作用底物不同，酶最适合的PH值也不同； 4.同一种酶作用于同一底物，随着温度等条件变化，最适合的PH值也有变化。如唾液淀粉 酶最适pH为6.8，但在磷酸缓冲溶液中，其最适pH为6.4—6.6，而在乙酸缓冲溶液中则为5.6。总之，不同的酶在不同的PH值范围不仅稳定性不同，而且活力也不同，在最适合的PH值内活力最强，这是酶的一个重要特征，要仔细控制。 三．实验器材 电热恒温水浴锅，旋涡混合仪，电炉，电子秤，试管10支，试管架，100mL容量瓶，小烧杯，移液管（1mL，2mL，5mL，10mL），三角瓶7个，胶头滴管，玻璃棒，白瓷板，洗耳球 四．实验材料 1.0.3%NaCl的0.5%淀粉溶液100ml（新鲜配制）：称取0.30gNaCl溶于80mL水中，电炉加热 煮沸，加入0.50g淀粉溶解至澄清透明，冷却，定容至100mL 2.0.2mol/L Na2HPO4溶液 200ml 3.0.1mol/L柠檬酸溶液 100ml 4.不同浓度的唾液淀粉酶（1：100，1：200，1：400···） 5.碘液

唾液淀粉酶最适pH的测定

唾液淀粉酶最适pH的测定 广西医科大学42班2组刘家林 摘要：酶是具有高效催化能力的生物大分子物质,底物浓度相同时,酶的催化活性主要受温度、p H值等因素影响。温度一定时,酶活力最高时的p H值为该酶在该温度的最适p H。在不同p H值下,通过测定淀粉酶水解底物的程度,测定唾液淀粉酶的最适p H值。在不同p H条件下,淀粉被唾液淀粉酶水解,与碘液反应呈现颜 色反应,通过对颜色的观察和分光光度计测量产物吸光值的大小,可知底物的反应程度,从而可以判断出唾液淀粉酶的最适p H。 关键词：唾液淀粉酶；最适pH；吸光值； 前言：酶是由生物体内活细胞产生的一种生物催化剂，细胞新陈代谢包括的所有化学反应几乎都是在酶的催化下进行的。酶催化化学反应的能力称为酶活性。酶的化学本质是蛋白质，它具有两性电解质的性质，在一定溶液中可以发生解离作用。酶无论在生活中还是在医学领域都具研究意义，酶的各种特性被 广泛应用于各个领域。影响酶反应活力的因素很多，主要包括pH、温度、酶浓度、金属离子浓度、抑制剂等。酶在水溶液环境中的解离状态和行为，都受到 H+的影响，酶活性中心功能基团解离状态将直接影响到酶的活化以及酶与底物 的亲和力，其会随着溶液pH的改变而改变。所以，溶液pH对酶催化反应的速 度有明显的影响。在某一pH值时，酶活性达到最大，这一数值称为酶的最适pH。不同的酶的最适pH不相同。淀粉经唾液中的淀粉酶水解，生成糊精和麦芽糖，在底物过量的条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合生成蓝 色复合物，其颜色的深浅与空白管颜色的差值和淀粉酶的活力成正比。用单位时间剩余淀粉量与碘反应产生的蓝色在660 nm处的吸光度值来表示淀粉酶的活性。在温度、酶浓度相同的情况下，酶活力在最适pH的情况下达到最大。 正文： 一、实验过程 （一）不同pH缓冲液的配制 按下表配置不同pH的缓冲液。 磷酸缓冲液配制表 先漱口1～2次，然后含一大口水约1 min，期间做咀嚼运动，然后收集至杯子中。（三）淀粉用量的确定