浙科版选修1第三部分《实验八 果酒及果醋的制作》word教案4

实验8：果酒及果醋的制作教案

1．果酒及果醋的制作

（1）果酒制作的原理：

①果酒发酵的菌种：酵母菌。酵母菌是兼性厌氧微生物，有氧时进行有氧呼吸将葡萄糖转化为CO2和H2O（反应式：C6H12O6＋6O2→6CO2＋6H2O），并大量繁殖；缺氧时能进行酒精发酵将葡萄糖转化为C2H5OH和CO2（反应式：C6H12O6→2CO2＋2C2H5OH）。

②果酒制作的原料：葡萄或其他果汁。酵母菌喜欢葡萄汁等含糖量高的果汁，培养酵母菌一般用麦芽汁。

③生长和发酵的环境条件：温度为20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在25～30℃条件下；生活在偏酸环境中；当培养液中的乙醇浓度超过16%时，酵母菌就会死亡。

（2）果醋制作的原理：

①果醋发酵的菌种：醋杆菌。醋杆菌是一种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动。因为醋杆菌将乙醇转变成乙酸（反应式：C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O），这一过程是需氧气过程。

②果醋制作的原料：果酒（本实验中是“用果酒制果醋”）。

③发酵条件：最适宜生长温度为30～35℃，充足的氧气和原料。

（3）制作果酒和果醋流程示意图：

挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→醋酸发酵

↓↓

果酒果醋

2．疑难问题点拨

（1）葡萄酒和果酒：葡萄酒是用葡萄酿制的，不同的葡萄酿造的酒口感、味道、香味、颜色也有区别。红葡萄酒和白葡萄酒都是由红色葡萄制作的，在用葡萄榨汁制白葡萄酒时，不让皮和子中的色素出来，因此生产出白葡萄酒。果酒是用其他水果为原料，经过一轮发酵、酿造出来的酒，如苹果酒、桃子、梨、青梅酒等。用葡萄制作的葡萄酒不含糖，酒精含量也低。用苹果等其他水果制作的果酒酒精含量较高，糖含量也较高。

（2）葡萄或其他果实上常有天然的野生酵母存在，而在葡萄酒和果酒制作这两个实验都要接种酵母的原因是：使用高锰酸钾溶液浸泡是为了防止杂菌污染，但同时也消灭了野生酵母（至少是消灭了许多酵母），接种酵母是为了提高反应速度。

（3）制酒时必须保证所有用具都是清洁的，其原因是：不论是葡萄或是其他水果，对微生物来讲都是良好的培养基，特别是霉菌。空气中有许多霉菌孢子，也有细菌，如果用具不清洁，就等于向果汁接种了许多杂菌，它们都可以利用糖繁殖菌体。这样，我们饮用的就不会是果酒，而是杂菌的培养液了，轻则会影响我们饮用的口感，重则会影响我们的健康。

3．巩固练习

例1．回答酵母菌和酵母发酵的有关问题：

（1）酵母菌生长繁殖的适宜温度是，酒精发酵时一般把温度控制在。

（2）利用酵母菌醇酒时，从开始便持续向发酵罐内通入氧气，结果是。

（3）在适宜的温度条件下，在下列装置中都放入干酵母（内有活酵母菌），其中适于产生酒精的装置是。

（4）为什么发酵瓶中的液体不能装满？

答案：（1）20℃左右25～30℃左右（2）酵母菌数量增多，不产生酒精（3）①（4）从以葡萄糖为底物发生乙醇发酵的反应式看，1个葡萄糖分子经乙醇发酵后要产生2个CO2分子，因此，发酵过程中有气体产生，如果发酵液装满容器，则液体将外溢，一则发酵液会损失，二则瓶口等处会被许多杂菌污染，特别是被霉菌污染，影响产物品质，所以发酵液不能装满

例2．某一酒厂以大米为主原料用酵母菌发酵生产酒精度数不低于12度的米酒，其工艺流程：糖化→发酵→后加工。发酵阶段主要在5m3的发酵罐中进行，主要工艺为：原料→接种菌种→通气培养→密封发酵

（1）糖化阶段主要包括蒸煮大米及加入“糖化酶”等。“糖化酶”应该包括的主要酶类有，“糖化酶”使（大米中）淀粉发生的主要变化是。

（2）接种后通气培养的主要目的是。

（3）密封的目的是_______________________________________。

（4）酵母菌的代谢类型是_______________________________________。

答案：（1）淀粉酶和麦芽糖酶淀粉→麦芽糖→葡萄糖（2）酵母菌进行有氧呼吸，有利于酵母菌的繁殖（3）供给无氧的环境，有利于酵母菌的发酵（4）兼性厌氧型

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选修1《生物技术实践》知识点归纳 实验1 大肠杆菌的培养和分离? 1.微生物是指结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生 物，包括病毒、原核生物、原生生物和某些真菌。细菌是单细胞的原核生物， 有细胞壁（肽聚糖）、细胞膜、细胞质，无成型的细胞核,只有一环状DMA 分子 (拟核)。以分裂(二分裂)的方式繁殖,分裂速度很快。用革兰氏染色法将细菌分 为革兰氏阳性菌(革兰氏染液染色后,再脱色处理,细菌仍保留染色液的颜色)和 革兰氏阴性菌两大类,区别在细胞壁的成分不同。大肠杆菌是革兰氏阴性(细胞 壁薄,有荚膜)、兼性厌氧的肠道杆菌。 2.细菌的分离方法有两种:划线分离法和涂布分离法。是消除污染杂菌的通 用方法,也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。划线分离就是用接种环 蘸菌液后在含有固体培养基的培养皿平板上划线,在划线的过程中菌液逐渐减少,细 菌也逐渐减少,。划线最后,可使细菌间的距离加大。将接种后的固体培养基培 养10~20小时后,一个细菌细胞就会繁殖成许多细菌细胞,形成菌落,不会重叠。 在斜面上划线,则每个斜面的菌群就是有一个细菌产生的后代。用于基因工程的 大肠杆菌的工程菌,可以用划线分离法获得产物表达能力高的菌株。由于工程菌 的质粒中通常有抗性基因(如抗氨苄青霉素基因),如在培养基中加入一定量的氨 苄青霉素,由于非工程菌的其他杂菌都没有抗性基因,所以在划线后只有存在抗 性基因的工程菌能生存下来。 涂布分离时,需要先将培养的菌液稀释,通常稀释10-5~10-7倍之间,然后取 0.1mL 不同稀释度的稀释菌液放在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在 培养基平面上进行培养,在适当的稀释度下,可产生相互分开的菌落，每个培养 基里有20个以内的单菌落为最合适。 优点：划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂 。 在培养微生物时,必须进行无菌操作。其首要条件是各种器皿必须是无菌的,各 种培养基也必须是无菌的,转移培养基、倒平板、接种、平板划线、平板稀释涂 布等操作中的每一步都要做到无菌(防止杂菌污染)。进行恒温培养时,要将培养 皿倒置,是因为培养基中的水分会以水蒸气的形式蒸发,倒放培养皿会使水蒸气 凝结成水滴后,落入培养基的表面并且扩散,菌落中的细菌也会随水扩散,菌落相 互影响,很难再分成单菌落,达不到分离的目的。 4.细菌扩大培养要用LB 液体培养基(通用培养基、常用于做生理学研究和 发酵工业),划线分离要用LB 固体培养基(常用于微生物分离、鉴定、计数和菌 种保存)。我们在利用微生物时,常常要求所利用的微生物不被其他微生物污染。 因此,在培养微生物时必须进行无菌操作 无菌操作的首要条件是各种器皿必须是无菌的,如各种大小的培养皿、试管、 三角瓶、取样器的头(或称“枪头”、“tip”)、移液管、三角刮刀、接种环、 镊子等等。这些用具通常用高压蒸汽灭菌法前各种用品均需用牛皮纸或报纸包 好。培养皿可几个包在一起;试管加棉花塞或塑料盖后也是几个包在一起;三角 瓶可用封口膜(市售产品,既通气又不使菌进入)或6层纱布封口,再用牛皮纸或 报纸封口;移液管上端用镊子放入少量棉花,再用牛皮纸包上(现在多不用移液管 而用取样器);取样器的“枪头”放在可灭菌的专用塑料盒中,也可放在上口用牛 皮纸包好的烧杯中……在121℃(1kg/cm 2压力)下灭菌15min 。值得注意的是,实 验中所需的棉花不能用脱脂棉,因脱脂棉易吸水,吸水后容易引起污染。灭菌后,建议收藏下载本文，以便随时学习！我去人也就有人！为UR扼腕入站内信不存在向你偶同意调剖沙

生物选修一果酒果醋制作

课题1果酒和果醋的制作 一、果酒的制作（酒精发酵） 1、酵母菌的基础知识 （1）真核或原核？代谢类型（营养方式+呼吸方式） （2）呼吸场所及反应式？ （3）繁殖方式？ （4）葡萄酒的自然发酵过程中，酵母菌的来源？ C6H12O6+6O2+6H2O 酶6CO2+12H2O+能量（有氧） C6H12O6 酶2C2H5OH+2CO2+能量（无氧） 思考：从果酒制作的原理上分析，有哪两大因素会导致最终酒精的含量低？ (1)发酵前期，若氧气供应不足，则酵母菌数量少，产生的酒精少。 (2)发酵后期，若发酵罐密封不严，则影响酵母菌的无氧呼吸，产生的酒精少。 1、为何在酒精发酵过程中往往“先通气后密封”？ “先通气”的目的是让酵母菌有氧呼吸，大量繁殖；“后密封”的目的是让酵母菌无氧呼吸，产生酒精2、解释酒精发酵过程中的“先来水后来酒”现象？ “先来水”指发酵初期酵母菌有氧呼吸的产物中有水；“后来酒”指氧气耗尽后酵母菌无氧呼吸产生酒

特别提醒： 1）葡萄皮上除酵母菌外，还有其他杂菌，但它们一般不引起污染，为什么？ 在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌能生长繁殖，绝大多数其他微生物受到抑制。2）红色葡萄酒的颜色为何呈深红色？ 在发酵过程中，随着酒精度的提高，红葡萄皮的色素进入发酵液。 3）酒精的检测方法？ 在酸性条件下，与重铬酸钾反应呈灰绿色 二、果醋的制作（醋酸发酵） 1、醋酸（杆）菌的基础知识 （1）真核还是原核生物？代谢类型？ （2）呼吸方式、场所？ （3）繁殖方式？ （4）菌种来源？ 3.发酵条件的控制： 思考：变酸酒表面的菌膜是什么？溶液内部能形成菌膜吗？

气体需要充足的氧气 菌膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的。不能 三、果酒果醋制作过程 四、发酵装置 (1)各部位的名称及作用。 ①为__充气口_，用来充入无菌空气②为排气口，用来排出CO2 ②用曲颈管的 作用：防止空气中微生物污染。③为_出料口_，便于取样检测。 (2)该装置的使用方法。 ①制果酒时，应：关闭充气口②制果醋时，应：将充气口连接气泵(3)注意充气 管、排气管插入位置(4)葡萄汁装入量为何留1/3？①让酵母菌有氧呼吸，大量繁殖，耗尽氧气后酒精发酵②防止发酵过程中产生的CO2 造成发酵液溢出。 1、你认为是先冲洗葡萄还是先除去枝梗？ 先冲洗葡萄，再除去枝梗，防止葡萄汁流失及污染 2、冲洗葡萄时勿反复冲洗，原因？ 冲洗过多，会使酵母菌数量减少，发酵周期延长，产品酒精含量下降 课题二腐乳的制作 一、腐乳制作的原理 1.菌种 (1)主要菌种：毛霉白色丝状真菌,真核生物代谢类型：异养需氧型。 (2)其他菌种：青霉、酵母、曲霉等。 (3)自然条件下毛霉来自空气中毛霉孢子，现代的腐乳生产呢？看视频《舌尖上的北京》北京人也好重口味2.原理： 二、腐乳制作流程： 三、防止杂菌污染的措施： 1、用来腌制腐乳的玻璃瓶，洗涮干净后要用沸水__消毒___。 2、装瓶时，操作要_迅速小心_。加卤汤后，要用_胶条____

完整版浙科版高中生物必修一整理归纳

第一章：细胞的分子组成 1. 生物以细胞为基本结构单位和功能单位， 如果要进行生命活动， 前提条件是保证细 胞的完整性。病毒无细胞结构，但也要在细胞内才能表现出生命活性。 2. C 、H 、O N 在生物体内含量达 96.3%，其中C 是生物体核心元素， 0是活细胞中含 量最多的元素。 3. 水是活细胞中含量最多的化合物，蛋白质是干细胞中含量最多的化合物。 4. 无机盐对维持血浆正常浓度、 酸碱平衡和神经肌肉兴奋性非常重要。 哺乳动物血液 中CaT 含量过低会导致抽搐。Mg + 是叶绿素的必需成分。卩￡+ 是血红蛋白的主要成分 a.主要能源物质：葡萄糖 b.动物细胞储能物质是糖元；植物细胞则是淀粉 c.直接能源物质：ATP e.最终能源物质：光能 7. 植物细胞特有糖类：果糖、纤维素、麦芽糖、淀粉 动物细胞特有糖类：乳糖、糖元 动物细胞和植物细胞都有的糖类：核糖、脱氧核糖、葡萄糖 8. 磷脂是细胞内各种膜结构的重要成分。 9. 蛋白质的基本单位是氨基酸。每种 氨基酸分子至少含有一个氨基 和一个羧基，并且一个氨基和一个羧基连接在同一碳原子上 。R 基的不同决定了氨基酸的种类不同。 10. 两个氨基酸发生脱水缩合形成二肽，形成肽键，见下图： H I H^—（f —COOH

11. 氨基：-NH2；羧基：-COOH 肽键：-CO-NH- 12. 不同的蛋白质差别在于组成它们的氨基酸的种类、数量和排列顺序、多肽链的空间结构不同。 13. 假设有m个氨基酸脱水缩合形成n条链，则： ①肽键数=失去的水分子数=氨基酸总数-肽链条数=m-n ； ②至少有n个氨基，n个羧基游离； ③蛋白质分子量=氨基酸平均分子量x总数-18 x（m-n） 14.核酸分两种，核糖核酸（RNA和脱氧核糖核酸（DNA。单体为核苷酸，脱氧核糖核苷酸（DNA的单 体）以及核糖核苷酸（RNA勺单体）。 第二章：细胞概述 1. 胡克第一次看到了细胞，但他看到的只是死细胞的细胞壁，主要化学成分是纤维素。 2. 生物体的增大，不是由于细胞体积的增大，而是由于细胞细胞数目的增多。细胞为 什么那么小的原因在于：a.细胞核能够控制的范围有限； b.细胞体积越小，则表 面积与体积之比就相对较大，有利于细胞与外界发生物质交换。 3. 根据细胞核有无核膜包被，可分为真核细胞和原核细胞。原核细胞主要是细菌，如 蓝细菌（蓝藻）、放线菌、乳酸菌、大肠杆菌等。真核细胞包括植物、动物和真菌（霉菌、食用 菌、酵母菌）等。 4. 质膜在结构上具有流动性，在功能上具有选择透性。 5. 质膜最基本的结构是脂双层，也称为单位膜，主要是磷脂分子。质膜中还有膜蛋白, 也具有流动性。细胞识别、免疫等功能主要由糖蛋白完成。 6. 细胞壁主要化学成分是纤维素，细胞壁是全透性的，物质可以随意进出细胞壁。 7. 叶绿体：双层膜，含少量DNA。光合作用的细胞器，只存在于能进行光合作用的 细胞中，如洋葱根细胞中一般没有叶绿体。 &线粒体：需氧呼吸主要场所；含少量DNA。双层膜，内膜向内折叠形成嵴。 9. 核糖体：合成蛋白质的细胞器，无膜，由RNA和蛋白质组成，来源于核仁。 10. 中心体：无膜，与动物细胞有丝分裂有关。 11. 液泡：单层膜。含有色素，使植物的花和果实有颜色。液泡中的细胞液含有无机盐类、糖类、氨基酸

课后知能检测-浙科版高中生物选修3

课后知能检测10 一、选择题 1．生态农业比一般农业( ) A．投入多，产出多，污染少，可持续发展能力强 B．投入少，产出多，污染少，可持续发展能力强 C．投入一样，产出相当，污染少，可持续发展能力强 D．投入和产出都较少，污染相同，可持续发展能力强 【解析】在生态农业中，实现了废弃物资源化，利用物质循环再生原理，因此投入少，污染少，同时产出多，可持续发展能力强。 【答案】B 2．某地通过新建沼气池和植树造林，构建了新型农业生态系统(如图所示) 。关于该农 业生态系统的叙述，错误的是( ) A．该生态系统的维持，人的作用非常关键B．该生态系统利用了物质循环再生原理，实现了农业生产的可持续发展C．该生态系统采用分布式结构，提高了能量传递效率 D．该生态系统充分利用了废弃物中的能量，实现了能量的多级利用 【解析】该生态系统采用分布式结构，提高了能量的利用率，但不能提高能量的传递效率。 【答案】C 3．世博会伦敦馆又名“零碳馆”。它除了利用太阳能、风能之外，还将剩饭菜中的生物质能用于发电。另外，水源也是位于房顶的花盆接收并过滤的雨水，供生活用水。“零碳馆”的设计与哪种生态工程更相似( ) A．物质循环利用的生态工程B．节水和废水处理与应用的生态工程 C．小流域综合治理的生态工程D．清洁和可再生能源系统组合利用的生态工程 解析】“零碳馆”强调零排放，因此应属于能源方面的生态工程。 答案】D 4．设计生态工程的常用方法之一是给食物链( 网) “加环”，下图就是一种“加环”示 意图。据图判断下列说法不正确的是( )

A．用玉米的副产品玉米芯生产木糖醇，可增加经济效益 B．用残渣来培育食用菌和蛆蛹，实现了物质的多级利用 C．用蛆蛹粪便作为有机肥还田，运用了能量循环再生的原理 D．该生态工程的运转离不开人的管理 【解析】A 项提高了副产品的经济价值，减少了环境污染；B项使残渣中的能量流向 生物，提高了能量利用率，减少了环境污染；C 项用蛆蛹粪便作为有机肥还田，其中的能量不能直接被植物利用，且能量也不能循环再生，有机肥中的有机物在田里会被微生物分解为无机物而被植物利用，这体现了物质循环再生；D项这种农田生态系统，离不开人的管理， 人的作用占主导。 【答案】C 5．某生物小组考查一农田生态系统中水稻从播种到稻秆还田的全过程。在稻田分蘖期间，农民拔草、治虫；然后排水进行搁田(亦称“烤田” ) ；稻谷收获之后，有不少农民在田 里焚烧稻秆。下列叙述中不正确的是( ) A．农民拔草、治虫目的是使能量较多地流向水稻 B．搁田时排出的水可能对水体造成污染 C．搁田有利于水稻根系生长，提高水稻抗倒伏能力 D．焚烧稻秆可促进物质循环，实现能量高效利用 【解析】焚烧稻秆虽然可以促进物质循环，但是浪费了大量能量，从而使能量的利用效率大大降低。拔草、治虫使能量较多地流向水稻；搁田时排出的水中含有大量氮、磷等无机盐，可能对水体造成污染，但土壤暴露在空气中，有利于水稻根系的呼吸，促进水稻的生长发育。 【答案】D 6．下列叙述违背生态工程中生态学原理的是( ) A．充分考虑环境因子对生物的影响 B．尽可能减少种间竞争所产生的损耗 C．实现生态系统的良性循环 D．以单一种群获得经济效益的最大化 【解析】设计生态工程的目的是在促进自然界良性循环的前提下，充分发挥资源的生产能力，防治

2017-2018学年浙科版生物选修一习题：学业达标测评6Word版含答案.doc

学业达标测评( 六 )泡菜的腌制和亚硝酸盐的测定 1. 制作泡菜所利用的乳酸菌最初来自于() A．人工加入到泡菜水中的 B．所选蔬菜自身原有的 C．腌制过程中自生的 D．水中的乳酸菌 【解析】制作泡菜时所利用的乳酸菌最初来自于所选蔬菜自身原有的。 【答案】 B 2．制泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化是() A．先减少后增加B．先增加后减少 C．逐渐增加D．逐渐减少 【解析】泡菜腌制过程中，由于坛内环境中硝酸还原菌的繁殖，促进硝酸盐还原为亚硝酸盐，但随 腌制时间延长，乳酸菌大量繁殖，产生乳酸，抑制硝酸盐还原菌繁殖，产生的亚硝酸盐被分解，使亚硝酸 盐含量逐渐下降。b5E2RGbCAP 【答案】 B 3．亚硝酸盐溶液与对氨基苯磺酸反应后与N-1- 萘基乙二胺偶联出现的颜色是() A．橙黄色B．紫红色 C．黄绿色D．橘红色 【解析】亚硝酸盐溶液与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1- 萘基乙二胺偶联会形成紫红色产物。 【答案】 B 4．在泡菜的腌制过程中容易造成亚硝酸盐含量增加的因素主要是() A．食盐用量过多B．细菌大量繁殖 C．腌制时间过长D．加水过少 【解析】泡菜坛中硝酸盐还原菌大量繁殖可导致坛内亚硝酸盐含量增多。 【答案】 B 5．下列与泡菜制作及亚硝酸盐含量测定相关叙述不正确的是() A．泡菜和酸菜都是利用天然微生物进行发酵制成的 B．泡菜腌制过程中发挥作用的主要是假丝酵母和乳酸菌 C．泡菜发酵过程中的无氧环境主要依赖于容器凹槽加水再加盖密封 D．亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸偶联，形成紫红色产物，之后可用光电比色法定量

色产物，然后可用光电比色法定量。p1EanqFDPw 【答案】 D 6．有关膳食中的亚硝酸盐对人体健康的影响，下列说法不正确的是() A．膳食中的亚硝酸盐在人体内会随尿液全部排出 B．亚硝酸盐可作为食品添加剂 C．亚硝酸盐在特定条件下可转变成致癌物质 D．蔬菜放置过久，亚硝酸盐含量将上升 【解析】研究表明膳食中的亚硝酸盐一般不会危害人体健康，可作为食品添加剂，但当人体一次摄 入的亚硝酸盐总量达到某一数值时将会致病。亚硝酸盐本身无致癌作用，在特定条件下转变成的亚硝胺有 致癌作用。蔬菜放置过久，其亚硝酸盐含量会上升。少量的亚硝酸盐可随尿排出，过量时将危害健康。 DXDiTa9E3d 【答案】 A 7．关于亚硝酸盐定量计算公式的叙述正确的是() A．式中X1为样品中亚硝酸盐含量，单位为g/kg B．式中m1为样品质量，m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，m1、 m2单位应相同 C．式中V1为测定用样品液体积，V2为样品处理液总体积 D．式中m1为样品质量，单位为g，m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，单位为μg 【解析】亚硝酸盐定量计算公式中，X1为样品中亚硝酸盐含量，单位mg/kg；m1为样品质量，单位g；m2为通过标准曲线得到的亚硝酸盐质量，单位μg；V1为样品处理液总体积；V2为测定用样品液体积。RTCrpUDGiT 【答案】 D 8．如图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答： (1)制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是 ____________________________________________________________ 。5PCzVD7HxA (2) 盐水需煮沸并冷却后才可使用，原因是_________________________ ______________________________________________________________ ；jLBHrnAILg 试说明盐在泡菜制作中的作用：__________________________________ ____________________________________________________________ 。xHAQX74J0X (3)泡菜风味形成的关键在于 ________的加入。 (4)泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至发霉变味，试分析可能的原因： _________________________________________________________ LDAYtRyKfE

高中生物选修3(浙科版)知识点总结

第一章基因工程 一、工具酶的发现和基因工程的诞生 1、基因工程的概念： （1）广义的遗传工程：泛指把一种生物的遗传物质（细胞核、染色体脱氧核糖核酸等）移到另一种生物的细胞中去，并使这种遗传物质所带的遗传信息在受体细胞中表达。（2）基因工程： 就是把一种生物的基因转入另一种生物体中，使其产生我们需要的基因产物，或者让它获得新的遗传性状。基因工程的核心是构建重组DNA分子。由于基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的，因此又叫做DNA重组技术。 （3）基因工程诞生的理论基础： DNA是遗传物质的发现过程、DNA双螺旋结构的确立、遗传信息传递方式的认定。 2、基因工程的基本工具 （1）“分子手术刀”——限制性核酸内切酶（限制酶） ①来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。 ②功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并能切割（使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开），因此具有专一性。 例如：某种限制性核酸内切酶能识别的序列是GAATTC,能在G和A之间切割DNA，如下图所示。 黏性末端 黏性末端 ③结果：能将DNA分子切割成许多不同的片段。 备注：不同DNA分子用同一种限制性核酸内切酶切割形成的黏性末端都相同；同一个DNA分子用不同限制性核酸内切酶切割，产生的黏性末端一般不相同。 （2）“分子缝合针”——DNA连接酶 ①作用：将具有末端碱基互补的2个DNA片段连接在一起（缝合磷酸二酯键）形成的D NA分子称为重组DNA分子。 因此，DNA连接酶具有缝合DNA片段的作用，可以将外源基因和载体DNA连接在一起。 （3）“分子运输车”——载体——质粒

浙科版生物选修一知识点填空,推荐文档(20201121164110)

选修一知识点填空 实验 1 大肠杆菌的培养和分离 1、微生物指的是 ______________________ 的单细胞、多细胞或______________ 的低等生物。如： 等。绝大多数微生物与传染病（有关/ 无关），90%以上的微生物是对人类（有利/ 有害）。 2、大肠杆菌是革兰氏 ______ 性菌，新陈代谢类型是_________________ 。从细胞结构上看，它属于 _________ 生物。在肠道 中一般对人体无害，也有少数菌株对人体_________ ，可以侵袭_______ 并产生_____ 。但是，任何大肠杆菌如果进入人的，都会对人体产生危害。大肠杆菌是工程中被广泛采用的工具。如重组的人粒细胞- 巨噬细胞（rhGM-CSF就是用大肠杆菌工程菌生产的。这种刺激因子是一种，只要用级的量即可提高人的白细胞的数量，目前是放疗和化疗过程中的必用辅助药物。大肠杆菌细胞壁的主要成分是，细 胞质中含有的细胞器是 __________ ，控制细菌遗传性状的DNA主要分布在__________ ，此外，细胞质中也有小型的 环状DNA称为_____________ 。 3、革兰氏染色法是一种用于 ____________的染色法。此法将细菌分为两大类，即革兰氏阳性菌和____________________ 。 4、各类生物细胞壁的成分：植物 ___________________ 细菌 ___________________ 真菌___________________ 5、细菌通常以 ________ 方式繁殖， _________________ 在固体培养基上大量繁殖形成的____________________ 的细胞群统 称为单菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。单菌落的分离是________________________________ 的通用方法，也是用于 6、细菌培养的通用培养基是 _________ ,其液体培养基的配方（以1升为例）：_______________________________________ ， 若要配制固体培养基则需加入 ________________ ；培养基的分类：按物理性状_________________________________________ ， 按化学成分 _______________________________________ ；按用途 _________________________________________ 7、细菌喜 _________ ，霉菌喜_________；细菌通常要求在__________________________ 的环境中生长，霉菌要求在 _____________________ 的环境中生长。 8、常用的细菌分离方法：划线分离法和 _____________________ ，前者的具体操作是：用已经在 _________________ 烧红后冷 却的 ____________ 蘸取带菌的培养物，在_______________ （固体/ 液体）培养基的平板上划线。其中烧红的目的 _______________________ ，冷却的目的_______________________ 。接种环部分深入到菌液中，然后，在固体培养基的平板上 _______________________ 划线。注意：接种环只在菌液中蘸菌液次。每次划完线，接种环都要 ______________________ （原因是_________________________ 并冷却（原因是__________________________ 后从___________________________ 开 始再重新划线（原因是 ________________________________ ，最后，在划线的末端出现______________________________ ， 表明菌已被分离。如果再将单个菌落接种至固体培养基的试管斜面上，即在斜面上划线，则斜面上的菌群就是单个细胞产生的后代。制成斜面培养基是为了 ___________________________________________ ，且斜面密闭效果比平面的好很多, 不容易进入杂 菌, 同时能用来做纯细菌的 _____________________ 。但斜面过长就会使棉塞沾上培养基而造成污染，所以使培养基形成 的斜面的长度不超过试管总长的___________________ 。后者的具体操作是：将培养的菌液稀释成10-5 —10-7 倍。（举例 说明如何稀释10 倍？___________________________________________________ 取 _________ 稀释倍数不同的菌液，加在 培养皿的固体培养基上，用 ____________ （该器具的灭菌方法_____________________________________________________ 涂布在培养基的平面上，然后进行培养。在某个稀释度下，可培养得到不连续的菌落，通常以每个培养皿中有 ___________ 个以内的单菌落最为合适。这两种细菌的分离方法的优缺点是？____________________________________________ 9、写出消毒和灭菌的区别__________________________________________________________________________ 10、灭菌或消毒的常用方法有: ___________________________________________________________________________ ， 不同的器具应选择合适的方法灭菌。接种环等金属应选用的灭菌方法是： _________________________ ，操作者的手应选用的消毒方法是：__________________ ，培养基应选用的灭菌方法是： ________________________ ，若培养基中有葡萄糖，则

(浙江专版)高中生物课时跟踪检测(五)果酒及果醋的制作(含解析)浙科版选修1

（浙江专版）高中生物课时跟踪检测（五）果酒及果醋的制作（含 解析）浙科版选修1 1．某同学尝试制作果酒，他将葡萄汁放入已灭菌的发酵装置中进行实验(见下图)，有关做法不恰当的是( ) A．在果酒传统发酵中，不需人工添加酵母菌菌种 B．把发酵装置放到4 ℃冰箱中进行实验 C．发酵一段时间后关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟 D．制作果酒的过程中，25～30 ℃将时间控制在2～3 d左右 解析：选B 在果酒传统发酵中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌，不需人工添加酵母菌菌种；酒精发酵时一般将温度控制在25～30 ℃；在实际酿酒过程中，一般先让酵母菌在有氧条件下进行需氧呼吸，从而大量繁殖，然后关紧阀a让酵母菌厌氧呼吸充分发酵产生酒精，偶尔打开阀b几秒钟，以排出呼吸作用产生的二氧化碳；制作果酒的过程中，将时间控制在2～3 d左右。 2．在制作果酒、果醋的发酵过程中所利用的微生物及对氧气的需求分别是( ) A．酵母菌、无氧，醋杆菌、有氧 B．酵母菌、有氧，醋杆菌、无氧 C．酵母菌、无氧，醋杆菌、无氧 D．酵母菌、兼氧，醋杆菌、有氧 解析：选A 果酒制作利用了酵母菌的厌氧呼吸；果醋制作利用了醋杆菌的需氧呼吸。 3．图甲是果醋发酵装置。发酵初期不通气，溶液中有气泡产生；中期可以闻到酒香；后期接种醋杆菌，适当升高温度并通气，酒香逐渐变成醋香。图乙中能表示整个发酵过程培养液pH 变化的曲线是( ) A．①B．② C．③D．④

解析：选B 在果醋的发酵过程中，首先瓶中进行的是需氧呼吸产生CO 2，会使pH 下降；一段时间后由于O 2消耗殆尽，开始进行厌氧呼吸，也可产生CO 2，会使pH 继续下降；最后进行醋酸发酵生成醋酸，会使pH 迅速下降。 4．某研究小组用梨酿制醋酸，具体流程如图所示，请回答： 梨――→甲 浑浊的梨汁――→乙 澄清的梨汁――→丙 酒精发酵―→醋酸发酵 (1)图中乙过程可加入________酶。分别取等量浑浊的梨汁和澄清的梨汁，各加入等量的____________，预计后者出现的沉淀物比较少。 (2)适宜条件下进行酒精发酵，发酵完毕的标志是______________，待沉淀后，可用________(方法)将上清液(即果酒)取出。若培养液酒精浓度超过________时，酵母菌会死亡。 (3)若用于醋酸发酵的醋杆菌被杂菌污染，欲消除污染的杂菌，常用方法是____________。 (4)用适宜方法获得优质醋杆菌的菌种，若要扩大培养，适宜的培养基是( ) A ．MS 培养基 B ．添加蔗糖的豆芽汁 C ．含蛋白胨、酵母提取物、NaCl 及其他适宜添加物的培养液 D ．尿素、葡萄糖，K 2HPO 4，NaCl ，酚红，琼脂糖配制的培养基 (5)右图表示不同醋杆菌接种量(5%、10%、15%)与醋酸发酵的关 系，据图判断，下列叙述错误的是( ) A ．发酵液中的醋杆菌进行需氧呼吸 B ．培养时间越长，培养液的pH 越低 C ．接种后20 h ，接种量为5%的醋酸产量最少，主要是因为发酵 速度较慢 D ．接种后70 h ，接种量为15%的醋酸产量最少，与菌体生长繁殖消耗较多营养物质有关 解析：(1)图中乙过程可以用果胶酶分解果胶，有利于生产果汁。果胶不溶于乙醇，会出现沉淀。(2)酒精发酵，可以产生二氧化碳和酒精，因此发酵完毕的标志是停止产生气泡。待沉淀后，可用虹吸法将果酒取出，培养液酒精浓度超过16%时，酒精浓度太高，酵母菌会死亡。(3)消除污染的杂菌，常用方法是单菌落的分离、划线分离法和涂布分离法。(4)醋杆菌属于异养好氧菌，因此培养基中需要有机物碳源、有机物氮源和无机盐，要用液体培养基来培养该微生物。 (5)醋杆菌属于需氧型细菌；随着培养时间的延长，醋酸含量越来越高，会抑制醋杆菌的活性最终醋酸含量保持不变，培养液的pH 保持不变；接种量为5%的醋杆菌，繁殖速度慢，因此发酵速度较慢；接种量为15%的醋杆菌，其发酵速度快，营养物质消耗快，因此接种后70 h ，接种量为15%的醋酸产量最少。 答案：(1)果胶 95%乙醇 (2)停止产生气泡 虹吸法 16%

【人教版】生物选修一：1.1《果酒和果醋的制作》教案设计

专题1 传统发酵技术的应用 课题1.1 果酒和果醋的制作 一、【课题目标】 （一）知识与技能 1．了解传统发酵技术在日常生活中的应用。 2．掌握发酵作用的基本原理和方法。 3．学习制作果酒、果醋的实际操作技能。 4．设计并安装简单的生产果酒及果醋的装置 （二）过程与方法 1．引导学生主动参与探究过程，培养学生搜集和处理科学信息的能力，获取新知识的能力以及用简约科学术语表达问题的能力。 2．培养学生综合分析能力。 3．培养学生利用已建立的知识解决实际问题的能力。 （三）情感、态度与价值观 1．对学生进行科学方法和科学态度的教育。 2．体验和感受生物技术给人类生活带来的变化。 3．培养学生合作精神。。 二、【课题重点】 说明果酒和果醋的制作原理，设计制作装置，制作出果酒和果醋 三、【课题难点】 制作过程中发酵条件的控制 四、【教学方法】 启发式教学 五、【教学工具】 多媒体课件 六、【教学过程】 （一）引入新课 俗语“无酒不成席”、“开门五件事、油盐酱醋茶”。酒和醋是人们日常生活离不开的传统发酵产品。从这节课开始，我们以果酒、果醋等为例学习一些传统发酵技术。 （二）进行新课 （阅读“果酒制作的原理”，引导考学生自学基础知识。） 1．基础知识 1．1 果酒制作原理 （1）利用的微生物是酵母菌，其异化作用类型是兼性厌氧型，明确酵母菌发酵的反应式：①有氧条件： ②无氧条件： （2）影响酒精发酵的主要环境条件有温度、氧气和pH。 ①酒精发酵是一般将温度控制在18～25℃范围内，在20℃时最适宜。 ②酒精发酵过程中，要保持缺氧、酸性环境。 （阅读教材资料，师生讨论并完成思考1～4。） 〖思考1〗为什么在酒精发酵过程中往往“先通气后密封”？

浙科版生物选修3模块同步测试题二

《现代生物科技专题》模块测试 班级 _____________ 姓名______________ 一、选择题 1.利用外源基因在受体细胞中表达，可生产人类所需要的产品。下列各项中能说明目的基 因完成了在受体细胞中表达的是（） A.棉花细胞中检测到细菌的抗虫基因 B.大肠杆菌中检测到人胰岛素基因及英mRNA C.山羊乳腺细胞中检测到人生长激素D7A序列 D.酵母菌细胞中提取到人F扰素蛋白 2.在离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织的过程中，下列哪一项条件是不需 要的（） A.消毒灭菌 B.适宜的温度 C.充足的光照 D.适宜的养料和激素 3.小流域综合治理生态工程运用的原理包括 ①物质循环再生原理②协调与平衡原理③整体性原理④工程学原理⑤物种多样性原理 扎①②??⑤ B.②③?@ C. ③④ D.②?④ 4.下列有关生物技术安全性的叙述，错误的是（） A.生物技术既可造福人类，又能威胁社会 B.在严格控制和检验下培育的转基因生物绝对不会危害英他生物体的生存和环境 C.转基因生物带来的安全性问题主要包括食物安全、环境安全、生物安全 D.人们对转基因食品的担心，从某些实例来看并非是多余的 5.下列不属于克隆的是（） A、植物体通过体细胞进行的无性繁殖 B、将某种瘤细胞在体外大呈:培养繁殖 C、扑插和嫁接 D、将鸡的某个D\A片段导入小鼠的细胞中，并得以表达 6.动物细胞体外培养时，通常要在培养基中补充一左浓度的某些物 质。右图是血清对正常细胞和癌细胞培养影响的实验结果。从该图提 供的信息可以获得的正确结论有 ①有无血消对正常细胞培养的影响不同 ②正常细胞与癌细胞的增殖速率相同 ③培养基中补充血淸有助于正常细胞的培养 ④培养基中是否补充血清对癌细胞的培养影响不大 A.?@? B.①③④ C. ?@? D.①?? 7.农业的发展已山传统农业向现代农业转变，现代农业虽然产量大大提高，但乂造成了严重的环境污染，因此我国现在农村大力推广生态农业，下列关于生态农业的叙述不正确的是（） A.生态农业中食物链和营养级越多越好 B.生态农业的抵抗力稳泄性比现代农业高 C.生态农业设计的指导原则是能量的多级利用和物质的循环再生 D.生态农业属于人工生态系统，人的作用非常突出 &碱基互补配对发生在下列哪些生理过程或生物技术中： ①受精作用②病毒的增殖过程③细菌的二分裂过程④目的基因与运载体的结合 ⑤DNA探针的使用⑥细胞的融合 A.④⑤ B.①??⑤ C.②④⑤ D. @?@? 9.现有一长度为1000碱基对（by）的DNA分子，用限制性核酸内切酶EcoRI酶切后得到的

高中生物选修一课时作业7：1.1 果酒和果醋的制作

专题1 传统发酵技术的应用 课题1 果酒和果醋的制作 基础巩固 1．下列关于果酒和果醋的制作原理、发酵过程的叙述，错误的是() A．果酒和果醋的发酵菌种不同，但代谢类型相同 B．制作果酒和果醋时都应用体积分数为70%的酒精对发酵瓶消毒 C．变酸果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌的菌落 D．果酒和果醋的制作可用同一装置，但需控制不同发酵条件 2．如图装置可用于生物技术实践的相关实验，下列有关叙述不正确的是() A．两种装置都可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作 B．利用装置乙制作葡萄酒时，葡萄汁装入发酵瓶要留有大约1/3的空间 C．用装置乙制作果酒时温度应控制在30 ℃左右，制作果醋时应适当降温 D．装置乙的排气口通过一个长而弯曲的胶管，可防止空气中微生物的污染 3．在利用葡萄自然发酵产生果酒的过程中，未经杀菌，但其他杂菌不能生长的原因是() A．经冲洗后的葡萄上只有野生型酵母菌无其他杂菌 B．其他杂菌不能利用葡萄汁中的糖作碳源 C．在缺氧和呈酸性的发酵液中，酵母菌能生存，其他杂菌不适应环境而被抑制 D．酵母菌发酵产生大量酒精，杀死了其他杂菌 4．酵母菌培养液常含有一定浓度的葡萄糖，但当葡萄糖浓度过高时，反而抑制微生物的生长，其主要原因是() A．碳源供应太充足 B．细胞会发生质壁分离 C．酵母菌代谢旺盛，导致培养基严重缺O2，影响菌体生长 D．葡萄糖不是酵母菌的原料 5．果汁发酵后，检验是否有酒精产生，下列叙述不正确的是() A．可以用重铬酸钾检验

B．需要设计对照实验 C．用重铬酸钾检验酒精能出现灰绿色 D．以上的操作需要加热 6．下图中甲是果酒和果醋发酵的装置图，乙是果酒和果醋制作发生的物质变化。 下列相关叙述中，错误的是() A．用甲装置制作果酒时，要加入适量的酵母菌，且一直关紧阀a，偶尔打开阀b几秒钟B．用甲装置制作果醋时，发酵后期阀门a要关闭 C．乙图中过程②只能发生在缺氧条件下 D．过程③和④都需要氧气的参与 7．酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧和无氧条件下均能生长。如果向培养酵母菌的葡萄糖悬浊液中通入空气。在短时间内发生的变化是() ①乙醇的产量增加②乙醇的产量降低③葡萄糖消耗下降④葡萄糖消耗明显增加A．②③B．②④C．①③D．①④ 8．乙醇等绿色能源的开发备受世界关注。利用玉米秸秆生产酒精，首先要把秸秆用相应的酶进行预处理，然后用特定的微生物在特定的条件下，进行发酵生产酒精。以下关于处理秸秆的酶、微生物种类和特定的条件的选择正确的是() A．淀粉酶、乳酸菌、充足氧气 B．纤维素酶、酵母菌、密封 C．纤维素酶、甲烷杆菌、密封 D．脂肪酶、酵母菌、充足氧气 9．下列关于用塑料瓶制作果酒和果醋的叙述，正确的是() A．为了提高果酒的产出量，果汁应尽量装满发酵瓶 B．醋酸发酵阶段应封闭瓶口，防止杂菌污染 C．制作果酒过程中每天需适时打开瓶盖 D．果酒制成后，可将装置转移至温度较高的环境中制作果醋 10．下列防止发酵液被污染的操作中不正确的是() A．榨汁机要清洗干净，并晾干 B．发酵瓶要清洗干净，用无水酒精消毒 C．葡萄汁装入发酵瓶后，要密封充气口 D．发酵装置的排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身相连

(完整)浙科版生物选修一知识点填空,推荐文档

选修一知识点填空 实验1 大肠杆菌的培养和分离 1、微生物指的是_______________________的单细胞、多细胞或______________的低等生物。如：__________________________等。绝大多数微生物与传染病________（有关/无关），90%以上的微生物是对人类___________（有利/有害）。 2、大肠杆菌是革兰氏______性菌，新陈代谢类型是______________。从细胞结构上看，它属于_______生物。在肠道中一般对人体无害，也有少数菌株对人体_____，可以侵袭_______并产生______。但是，任何大肠杆菌如果进入人的___________，都会对人体产生危害。大肠杆菌是_____工程中被广泛采用的工具。如重组的人粒细胞-巨噬细胞___________（rhGM-CSF）就是用大肠杆菌工程菌生产的。这种刺激因子是一种________，只要用_____级的量即可提高人的白细胞的数量，目前是放疗和化疗过程中的必用辅助药物。大肠杆菌细胞壁的主要成分是_____________，细胞质中含有的细胞器是_________，控制细菌遗传性状的DNA主要分布在___________，此外，细胞质中也有小型的 环状DNA称为____________。 3、革兰氏染色法是一种用于__________的染色法。此法将细菌分为两大类，即革兰氏阳性菌和_______________。 4、各类生物细胞壁的成分：植物_________________ 细菌_______________ 真菌_______________ 5、细菌通常以_________方式繁殖，________________在固体培养基上大量繁殖形成的________________的细胞群统称为单菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。单菌落的分离是_______________的通用方法，也是用于_________________________________________________。 6、细菌培养的通用培养基是__________,其液体培养基的配方（以1升为例）：___________________________________，若要配制固体培养基则需加入_____________；培养基的分类：按物理性状____________________________________，按化学成分____________________________________；按用途_______________________________________ 7、细菌喜________，霉菌喜________；细菌通常要求在____________________的环境中生长，霉菌要求在____________________的环境中生长。 8、常用的细菌分离方法：划线分离法和__________________，前者的具体操作是：用已经在_____________烧红后冷却的____________蘸取带菌的培养物，在____________（固体/液体）培养基的平板上划线。其中烧红的目的______________________，冷却的目的_____________________。接种环部分深入到菌液中，然后，在固体培养基的平板上___________划线。注意：接种环只在菌液中蘸菌液____________次。每次划完线，接种环都要______________（原因是________________________）并冷却（原因是______________________）后从_______________________开始再重新划线（原因是_______________________________），最后，在划线的末端出现___________________________，表明菌已被分离。如果再将单个菌落接种至固体培养基的试管斜面上，即在斜面上划线，则斜面上的菌群就是单个细胞产生的后代。制成斜面培养基是为了_______________________，且斜面密闭效果比平面的好很多,不容易进入杂菌,同时能用来做纯细菌的___________________。但斜面过长就会使棉塞沾上培养基而造成污染，所以使培养基形成的斜面的长度不超过试管总长的________________。后者的具体操作是：将培养的菌液稀释成10-5—10-7倍。（举例说明如何稀释10倍？_____________________________________________）取_________稀释倍数不同的菌液，加在培养皿的固体培养基上，用_____________（该器具的灭菌方法_______________________________________________）涂布在培养基的平面上，然后进行培养。在某个稀释度下，可培养得到不连续的菌落，通常以每个培养皿中有__________个以内的单菌落最为合适。这两种细菌的分离方法的优缺点是？____________________________________ 9、写出消毒和灭菌的区别____________________________________________________________________

2018年浙科版生物选修1 第1部分-实验1 大肠杆菌的培养和分离

实验 1大肠杆菌的培养和分离 一、大肠杆菌 1．大肠杆菌是革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。 2．在肠道中，大肠杆菌一般对人无害，但也有一些菌株可以侵袭肠黏膜并产生毒素，任何大肠杆菌如果进入人的泌尿系统，都会对人体产生危害。 3．大肠杆菌是基因工程技术中被广泛采用的工具。 二、实验内容 1．本实验的内容是将大肠杆菌扩大培养和划线分离。分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选高表达量菌株的最简便方法之一。 2．本实验用LB 液体培养基(通用的细菌培养基)扩大培养大肠杆菌。培养后再在LB 固体平面培养基上划线进行分离，随后培养基上便会形成一个个单独的菌落。

三、细菌的培养和分离 1．细菌以分裂的方式繁殖，分裂速度很快，约20分钟分裂一次。人们在培养细菌时，一般用接种环转移带菌的培养物。接种时，先将接种环在明火上烧红后冷却，再操作。 2．细菌的分离 (1)划线分离法：在液体培养基中，只要接种后培养8 h，每毫升培养基中就有几亿个细菌。可用接种环蘸菌液在含有固体培养基的培养皿平板上划线，在划线过程中接种环上的菌液逐渐减少，因此，划线到最后，可使细菌间的距离加大。在固体培养基培养10～20 h后，可由一个细菌产生单菌落，菌落不会重叠。如果再将每个菌落分别接种至含有固体培养基的试管斜面上，在斜面上划线，则每个斜面的菌群就是由一个细菌产生的后代。这种方法也可用于分离细菌，将污染的杂菌除去。 接种环在取菌种前和划线前都要灼烧、而后都要冷却、操作完毕后又要灼烧的原因是什么？ 【提示】取菌种前灼烧接种环的目的是消灭接种环上的微生物；除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环的目的是消灭接种环上残留菌种；取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，目的是防止高温杀死菌种；最后灼烧接种环的目的是防止细菌污染环境和操作者。 (2)涂布分离法：先将培养的菌液稀释，通常稀释10－5～10－7倍，然后取0.1 mL不同稀释度的稀释菌液加在培养皿的固体培养基上，用玻璃刮刀涂布在培养基平面上进行培养，在适当的稀释度下，可产生相互分开的菌落。通常每个培养皿有20个以内的单菌落最为适合。将每个菌落分别接种在斜面上扩增培养后，再做功能性实验。 细菌的两种分离法各有优点，都可采用。划线分离法，方法简单；涂布分离法，单菌落更易分开，但操作复杂些。 四、灭菌操作 1．各种器皿必须是无菌的：实验用具用牛皮纸或报纸包好，所有容器都先封口，然后进行高压蒸汽灭菌(1 kg/cm2压力、121 ℃、15 min)处理，并在超净台上使用。