定量核磁共振波谱法同时测定中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量
DOI :10.11895/j.issn.0253_3820.140654
定量核磁共振波谱法同时测定
中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量
禹珊1 郭强胜1 王会琳2 高建平2 许旭*1,3
1(上海应用技术学院化学与环境工程学院,上海201418)2
(上海中医药大学中药学院,上海201203)
3(中国科学院天然产物有机合成化学重点实验室,上海200032)摘 要 建立了定量核磁共振波谱法同时测定虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的方法三样品用80%乙醇和丙酮两次超声提取净化,再用定量核磁共振波谱法测定三考察了样品预处理和核磁共振实验条件对测定结果的影响,选择氘代二甲亚砜_重水(10?1,V /V )为溶剂,用基准物质邻苯二甲酸氢钾标定的2,3,5_三碘苯甲酸为内
标,选择脉冲延迟时间为5s,采样次数为32次三定量峰为6.388~6.391(白藜芦醇:H_2,6,d,2H)和
6.322~6.330(虎杖苷:H_4,t,1H)三结果表明,NMR 测定的精密度均小于0.6%,线性相关系数(r )均大于0.999,白藜芦醇和虎杖苷的检出限分别为0.23和0.24g /L,定量限分别为0.69和1.57g /L,包括样品提取过程的回收率分别为9
7.7%~103.5%(RSD =2.4%)和94.5%~99.2%(RSD =1.6%),显示出定量核磁共振法在中药定量时的可靠性三实际测定4种虎杖饮片及配方颗粒样品中白藜芦醇和虎杖苷含量分别为3.57~5.69mg /g 和12.73~24.07mg /g三关键词 定量核磁共振;虎杖;白藜芦醇;虎杖苷
2014_08_20收稿;2014_10_05接受本文系中国科学院天然产物有机合成化学重点实验室研究基金资助项目(2013_2014)*E_mail:xuxu3426@https://www.sodocs.net/doc/cf13052881.html,
1 引 言
虎杖为蓼科植物虎杖(Poilgonum cuspidatum Sieb.et Zucc )的干燥根茎及根,主要功效为利湿退黄,
清热解毒,散瘀止痛,具有抗菌抗病毒二扩张血管二抗肿瘤二调节代谢等药理作用[1]三虎杖作为常用中药已收入中国药典[2],不久也会被收入欧洲药典[3]三虎杖含有大黄素和大黄素甲醚等蒽醌类化合物二白藜芦醇和虎杖苷(白藜芦醇苷)等二苯乙烯类化合物二鞣质和多糖等成分三其中,白藜芦醇和虎杖苷是虎杖中两种主要药效成分[1,2](化学结构见图1),这两种成分测定主要以高效液相色谱[2,4]和液相色谱_
图1 白藜芦醇和虎杖苷的结构式Fig.1 Chemical structure of resveratrol and polydatin
质谱联用[5]为主三定量核磁共振波谱(Quantitative nuclear magnetic resonance spectroscopy,qNMR)方法简单二快捷,实际样品测定时可以不使用待测
组分的对照品[6]三已先后被美国药典二英国药
典[7]二欧洲药典收录,中国药典2010版也已收录[8]三近几年来,qNMR 方法已被广泛用于化学药物[9~13]二中药与植物提取物[14~19]二体液样品[20,21]二异构体[22]二食品[23,24]等的定量分析三本研究在对虎杖样品进行有效提取的基础上,建立了qNMR 定量测定其中白藜芦醇和虎杖苷两种药效成分的方法,考察了实验条件的影响,对所建立的方法进行了验证,并用于实际样品分析三2 实验部分
2.1 仪器与试剂Bruker AVANCE III 500MHz 核磁共振谱仪(德国Bruker 公司);M2P 精密天平(精度0.001mg,德第43卷
2015年1月 分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第1期69~74
07分析化学第43卷
国Startorius公司);AB204_N天平(精度0.1mg,上海世义精密仪器有限公司);PS_20超声波清洗仪(东莞市洁康超声设备公司);RE_52AA旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)三
dDMSO(氘代二甲基亚砜,Dimethyl Sulphoxide_D6,99.9%D)和D2O(重水,Deuterium Oxide, 99.9%D)(Cambridge Isotope Laboratories Inc.);白藜芦醇(南京泽朗医药科技有限公司,批号ZL130705008YY);虎杖苷(南京泽朗医药科技有限公司,批号ZL20120907YY);2,3,5_三碘苯甲酸(Aladdin公司,批号23527);邻苯二甲酸氢钾(基准物质,99.05%~100.05%,国药集团上海化学试剂公司,批号20091218);无水乙醇和丙酮(分析纯,国药集团化学试剂公司)三实验用水为某品牌蒸馏水三样品1为虎杖中药超微饮片(湖南春光九汇现代中药有限公司,规格:1.2g/袋,批号130439);样品2为虎杖中药配方颗粒(华润三九医药股份有限公司,规格:1g/袋,批号1109001S);样品3为虎杖中药配方颗粒(江阴天江药业有限公司,规格:1g/袋,批号1109081);样品4为虎杖中药饮片(中药原产地:浙江,上海华浦中药饮片有限公司生产,批号:XD13032601)三
2.2 实验方法
2.2.1 样品制备虎杖样品研细,准确称取粉末1g,加入30mL乙醇_水(4?1,V/V)摇匀,室温超声30min,抽滤,滤液于55?水浴旋干三称重后称取部分产物与20mL丙酮混匀,超声30min,抽滤,残渣重复丙酮提取一次,合并滤液,于40?水浴上旋干得产物并称重三称取适量产物及内标2,3,5_三碘苯甲酸于塑料离心管中,加入0.55mL dDMSO_D2O(10?1,V/V),混合,超声2min,转移至5mm核磁管中待测三
2.2.2 核磁共振定量核磁共振(NMR)采集条件:脉冲序列zg30,脉冲宽度14.4μs三选择延迟时间5s,扫描次数32次,测定样品的NMR谱图三积分时,先将NMR谱图基线调平,选定峰积分区间,每个峰积分3~5次,相对标准偏差(RSD)<1%时取平均值三用中国药典2010版中的绝对定量公式计算待测组分的重量[9]:
W s=W r?(A s/A r)?(E s/E r)(1)其中W r为内标物的重量,A s和A r分别为供试品特征峰和内标峰的峰面积,E s和E r分别为供试品和内标物的质子当量重量(质量)(以分子量除以特征峰的质子数计算得到),然后根据称样量计算组分在样品中的含量三
3 结果与讨论
3.1 样品制备方法的选择
3.1.1 样品提取条件的优化虎杖中有效成分提取方法已有不少研究[25,26],相对传统的醇提法和水提法等,超声辅助提取法更适用于虎杖中热敏性物质白藜芦醇和虎杖苷的提取,提取时间短,提取率高三故采用超声提取法三
虎杖中的白藜芦醇和虎杖苷在70~80?时会发生部分分解,强光照射也会造成部分损失[26,27],常温下稳定性良好三故本实验的超声提取在室温进行,无强光照射,提取时间30min,旋蒸温度均在60?以内三根据文献[25,26],以样品2为研究对象,先用一种溶剂提取,比较了甲醇二80%甲醇二80%乙醇二丙酮二以及混合溶剂80%乙醇_丙酮(1?1,V/V)的提取效果三结果表明,甲醇二80%甲醇二80%乙醇以及80%乙醇_丙酮(1?1,V/V)一次提取即可达到提取完全的效果,但测试谱图杂峰较多,影响定量;而丙酮重复提取3次后仍可检测到较高残留,但谱图杂峰较少且不干扰待测组分的定量峰三因此考虑两步提取的方式三选择80%乙醇做第一步完全提取的溶剂;第二步提取选择丙酮为溶剂净化产物,结果表明,丙酮两次提取即可基本提取完全(第三次提取产物旋蒸后测组分定量峰信噪比仅为17,残留很少,基本不影响定量结果)三
实验确定样品提取的条件为:室温,无强光照射,80%乙醇一次超声提取,产物旋干后再经丙酮两次超声提取,时间均为30min三
3.1.2 氘代溶剂单独以dDMSO为溶剂时,待测样品图谱中白藜芦醇和虎杖苷的定量峰旁边存在干扰峰三尝试dDMSO_D2O混合溶剂,两定量峰可获得较好分离,且没有干扰三最终选定氘代溶剂为
dDMSO_D 2O(10?1,V /V )三
3.2 内标物的选择尝试了邻苯二甲酸氢钾二顺丁烯二酸二反丁烯二酸二对苯二甲醛二苯甲酸二3,5_二硝基苯甲酸二2,3,5_
三碘苯甲酸三仅有2,3,5_三碘苯甲酸不与样品峰互相干扰三故选择2,3,5_三碘苯甲酸为内标三3.3 NMR 峰归属及定量峰的确认
3.3.1 NMR 峰归属 用2.2节的方法,分别对白藜芦醇二虎杖苷二内标以及3者的混合物进行NMR
检测三对比图2中各图,归属混合物谱图(D)中的各信号峰三δ6.0~8.5区间段内为白藜芦醇峰:
δ6.097~6.105(t,1H),6.388~6.391(d,2H),6.743~6.760(d,2H),6.783~6.816(d,1H),
6.922~6.955(d,1H),
7.376_7.393(d,1H);虎杖苷峰:6.322~6.330(t,1H),6.573(s,1H),6.715(s,1H),6.747~6.764(d,2H),6.846~6.878(d,1H),7.010~7.043(d,1H),7.388~7.404(d,1H);2,3,5_三碘苯甲酸:7.727~7.730(d,1H),
8.329~8.332(d,1H)三图2 对照品和内标的NMR 测试结果在化学位移δ6.0~8.5区间段放大图
Fig.2 NMR spectra of chemical references and internal standard in δ6.0-8.5range
白藜芦醇(A);虎杖苷(B);2,3,5_三碘苯甲酸(C);A二B 和C 的混合物(D)三Resveratrol (A);Polydatin (B);2,3,5_triiodobenzoate (C);the mixture of A,B and C (D).3.3.2 定量峰确认 取样品1,用2.2节的方法测得NMR 谱图(图3A),与纯品混合图谱(图2D)比
较,选定H_2,6(6.388~6.391,d,2H)(图3B 中峰1)为白藜芦醇定量峰;虎杖苷定量峰为H_4(6.322~6.330,t,1H)(图3B 中峰2);内标峰为H_6(8.329~8.332,d,1H)(图3B 中IS)三3.4 对2,3,5_三碘苯甲酸,白藜芦醇和虎杖苷的含量校正
以dDMSO_D 2O(4?1,V /V )为溶剂,基准物质邻苯二甲酸氢钾的NMR 峰H_3,6(7.917~7.935,2H,dd)与3种纯品的NMR 定量峰互不干扰,故选其作为校准2,3,5_三碘苯甲酸(定量峰为H_6(8.189~8.193,1H,d)),白藜芦醇(定量峰H_4(6.097~6.105,1H,t))和虎杖苷(定量峰H_4(6.322~6.330,1H,t))含量的内标,采用qNMR 绝对定量模式对3种纯品进行含量校正三实验测得2,3,5_三碘苯甲酸含量为96.64%,RSD 为0.6%;白藜芦醇纯品含量为98.64%,RSD 为0.4%;虎杖苷
纯品含量为98.45%,RSD 为0.6%三下面的实验使用校正后的含量值进行三
3.5 方法验证3.5.1 精密度 称取样品4制备的旋干产物和内标,用2.2节的方法分别在日内和日间各做6组测试,结果白藜芦醇峰面积/内标峰面积(A 1/A r )日内RSD 为0.2%,日间RSD 为0.5%;虎杖苷峰面积/内标峰面积(A 2/A r )日内RSD 分别为0.4%,日间RSD 为0.5%,精密度好,也说明样品稳定性好三3.5.2 线性 精密称取6组白藜芦醇0.960~3.318mg,分别加入虎杖苷0.860~3.500mg 和2mg 内标,加入0.50mL 溶剂混匀,超声溶解后按2.2节的方法获得NMR 谱图三以(样品/内标)质量比为横坐标(x ),NMR 定量峰面积比为纵坐标(y ),用纯品对照品评价的零截距标准曲线分别为:白藜芦醇y =
4.4368x ,相关系数R =0.9994;虎杖苷y =1.2885x ,R =0.9995三理论计算线性曲线的斜率对白藜芦醇为
1
7第1期禹珊等:定量核磁共振波谱法同时测定中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量
图3 虎杖提取样品与混合对照品的NMR 谱图Fig.3 NMR spectra of Polygonum Cuspidatum sample and mixed chemical references
样品1处理后测定的NMR 谱图(A);(A)图中6.0_8.5化学位移区间段放大图(B);白藜芦醇,虎杖苷,内标物混合物NMR
谱图6.0~8.5化学位移区间段放大图(C)三(A)Polygonum Cuspidatum sample 1;(B)The enlarge part of δ6.0-8.5in Fig.A;(C)The enlarge part of δ6.0-8.5in NMR
of mixture of resveratrol,polydatin and 2,3,5_triiodobenzoate.
4.3797,对虎杖苷为1.2803三两者接近,可以直接用绝对定量模式测定三3.
5.3 检出限和定量限 qNMR 检出限(LOD)和定量限(LOQ)可由LOD =3.3σ/S,LOQ =10σ/S 得到,式中σ指非零截距线性回归曲线Y 轴截距的偏差,S 指非零截距线性回归曲线斜率[6,17]三由此算得白藜芦醇LOD =0.057,LOQ =0.173;虎杖苷LOD =0.059,LOQ =0.179三根据本实验中溶剂和内标的量计算白藜芦醇的LOD =0.23g /L,LOQ =0.69g /L;虎杖苷LOD =0.24g /L,LOQ =0.72g /L三英国药典[8]对核磁定量方法要求在S /N ?150?1,这也可以作为LOQ 的指标,以样品1的NMR 测定谱图,根据绝对定量公式[8]算得白藜芦醇和虎杖苷的LOQ 分别为0.47和1.57g /L三综上,本方法qNMR 对白藜芦醇
和虎杖苷的LOQ 分别为0.69和1.57g /L,LOD 分别为0.23和0.24g /L三表1 虎杖样品白藜芦醇和虎杖苷的含量测定(n =3)Table 1 Quantitative result of resveratrol and polydatin in polygonum cuspidatum samples(n =3)样品Sample 白藜芦醇Resveratrol 平均值Mean (mg /g)RSD (%)虎杖苷Polydatin 平均值Mean (mg /g)RSD (%)样品1Sample 1 5.00 2.816.43 1.4样品2Sample 2 5.690.6724.07 1.1样品3Sample 3 3.57 2.023.76 2.1样品4Sample 4 5.43 1.112.73 1.2
3.5.4样品分析 按2.2节的方法,对市售4种
虎杖样品中测定白藜芦醇和虎杖苷的结果见
表1三与相关文献[4]中HPLC 法测定饮片中白
藜芦醇(1.1~5.1mg /g )和虎杖苷(6.3~29.0mg /g)的含量对比,本实验药材饮片(样品4)中该两种成分含量基本相符三3.5.5 样品提取后qNMR 方法的回收率 取
样品1提取后产物,用2.2节的qNMR
法测定其中所含白藜芦醇和虎杖苷的含量;加
入白藜芦醇和虎杖苷后再测定含量,计算加标回收率三结果白藜芦醇回收率为99.6%~102.3%,RSD
为1.0%(n =6);虎杖苷回收率为98.7%~101.1%,RSD 为0.9%(n =6)三3.5.6 包括样品提取过程的白藜芦醇和虎杖苷回收率 分别准确称取6份0.5g 左右样品1,向其中每份均加入精密称取的白藜芦醇和虎杖苷,用2.2节的方法提取并测定含量,计算回收率三得到包括样品提取过程的白藜芦醇回收率为97.7%~103.5%,RSD =2.4%(n =6);虎杖苷回收率为94.5%~99.2%,RSD =1.6%(n =6)三考虑qNMR 回收率,显示组分提取较为完全且重现三
研究结果表明,本方法可同时定量分析中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷,方法精密度好,线性评价显示可以直接用绝对定量公式计算含量,定量分析结果准确三
致谢 感谢中科院上海有机化学研究所李光玉在定量NMR 方法方面提供的帮助三27 分析化学第43卷
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Simultaneous Determination of Resveratrol and Polydatin in
Polygonum Cuspidatum by Quantitative Nuclear Magnetic
Resonance Spectroscopy
YU Shan1,GUO Qiang_Sheng1,WANG Hui_Lin2,GAO Jian_Ping2,XU Xu*1,3 1(School of Chemical and Environmental Engineering,Shanghai Institute of Technology,Shanghai201418,China)
2(Department of Pharmacology,Shanghai University of Traditional Chinese Medicine,Shanghai201203,China)
3(Key Laboratory of Synthetic Chemistry of Natural Substances,Shanghai Institute of Organic Chemistry,
Chinese Academy of Sciences,Shanghai200032,China)
Abstract A quantitative nuclear magnetic resonance spectroscopic(qNMR)method was established for the simultaneous determination of resveratrol and polydatin in Polygonum Cuspidatum traditional Chinese herb cuts and granule.The2_step ultrasonic extraction method using80%alcohol and acetone was used for fully extracting these two components in samples before qNMR determination.The qNMR experimental conditions were investigated and deuterated dimethyl sulphoxide_deuterium oxide(10?1,V/V)was selected as solvent, the pulse delay time was5s,the scan number was32,2,3,5_triiodobenzoate was used as internal standard which was calibrated with primary standard substance of potassium hydrogen phthalate.The1H_NMR peaks at δ6.388-6.391(d,2H)of resveratrol andδ6.322-6.330(t,1H)of polydatin were chosen as the quantitative peaks.Method validation was performed in terms of precision(RSD<0.6%),linearity (correlative constants R2>0.999),limit of detection(0.23g/L for resveratrol and0.24g/L for polydatin) and limit of quantitation(resveratrol0.69g/L,polydatin1.57g/L),recovery(resveratrol97.7%-103.5%,RSD=2.4%,polydatin94.5%-99.2%,RSD=1.6%,including the sample extraction and preparaton process).The results showed the reliability of qNMR for traditional Chinese medicine assay.The resveratrol and polydatin in Polygonum Cuspidatum real cuts and granule samples were experimental determined as3.57-5.69mg/g and12.73-24.07mg/g,respectively.
Keywords Quantitative nuclear magnetic resonance;Polygonum cuspidatum;Resveratrol;Polydatin
(Received20August2014;accepted5October2014)
第三章_核磁共振波谱法习题集及答案
第三章、核磁共振波谱法 一、选择题 ( 共80题 ) 1. 2 分 萘不完全氢化时，混合产物中有萘、四氢化萘、十氢化萘。附图是混合产物的核磁共振谱图，A、B、C、D 四组峰面积分别为 46、70、35、168。则混合产物中，萘、四氢化萘，十氢化萘的质量分数分别如下： ( ) (1) %，%，% (2) %，%，% (3) %，%，% (4) %，%，% 2. 2 分 下图是某化合物的部分核磁共振谱。下列基团中，哪一个与该图相符( ) (1)CH3C CH2 O CH CH O CH 3 (2)CH (3)CH3CH 2 O (4)C H3O CH O CH H X：H M：H A=1：2：3
在下面四个结构式中 (1) C CH 3 H R H (2)H C CH 3H CH 3 (3)H C CH 3CH 3 CH 3 (4) H C H H H 哪个画有圈的质子有最大的屏蔽常数 （ ） 4. 1 分 一个化合物经元素分析，含碳 %，含氢 %，其氢谱只有一个单峰。它是 下列可能结构中的哪一个 ( ) 5. 1 分 下述原子核中，自旋量子数不为零的是 ( ) (1) F (2) C (3) O (4) He 6. 2 分 在 CH 3- CH 2- CH 3分子中，其亚甲基质子峰精细结构的强度比为哪一组数据 （ ） (1) 1 : 3 : 3 : 1 (2) 1 : 4 : 6 : 6 : 4 : 1 (3) 1 : 5 : 10 : 10 : 5 : 1 (4) 1 : 6 : 15 : 20 : 15 : 6 : 1 7. 2 分 ClCH 2- CH 2Cl 分子的核磁共振图在自旋－自旋分裂后，预计 ( ) (1) 质子有 6 个精细结构 (2) 有 2 个质子吸收峰 (3) 不存在裂分 (4) 有 5 个质子吸收峰 8. 2 分 在 O - H 体系中，质子受氧核自旋－自旋偶合产生多少个峰 ( ) (1) 2 (2) 1 (3) 4 (4) 3
第十四章 核磁共振波谱法
1、解释下列名词 （1）屏蔽效应和去屏蔽效应 屏蔽效应：绕核电子在外加磁场的诱导下，产生与外加磁场方向相反的感应磁场，使原子核实受磁场强度稍有降低，这种核外电子及其他因素对抗外加磁场的现象称为~。 去屏蔽效应：当次级磁场的磁力线与外磁场一致时，使得处于此空间的质子实受外磁场强度增加，这种效应为~。（不定） （2）自旋偶合和自旋分裂 自旋偶合是核自旋产生的核磁矩间的相互干扰，又称为自旋-自旋偶合。 自旋分裂是由自旋偶合引起共振峰分裂的现象，又称为自旋-自旋分裂。 （3）化学位移和偶合常数 由于屏蔽效应的存在，不同化学环境的氢核的共振频率（进动频率，吸收频率）不同，这种现象称为化学位移。 当自旋体系存在自旋-自旋偶合时，核磁共振谱线发生分裂。由分裂所产生的裂距反映了相互偶合作用的强弱，称为偶合常数。 （4）化学等价核和磁等价核 在核磁共振谱中，有相同化学环境的核具有相同的化学位移，这种有相同化学位移的核称为化学等价。 分子中一组化学等价核（化学位移相同）与分子中的其他任何一个核都有相同强弱的偶合，则这组核为磁等价核。 2、略 3、为什么强照射波照射样品，会使NMR信号消失，而UV与IR吸收光谱法则不消失？ 4、为什么用δ值表示峰位，而不用共振频率的绝对值表示？为什么核的共振频率与仪器的磁场强度有关，而偶合常数与磁场强度无关？ 由于屏蔽常数很小，不同化学环境的氢核的共振频率相差很小，要精确测量其绝对值较困难，并且屏蔽作用引起的化学位移的大小与外磁场强度成正比，在磁场强度不同的仪器中测量的数据也不同，因此，用共振频率的相差值来表示化学位移，符合为δ。有两种表达P286。 因为核磁矩在外磁场中产生能级分裂，高能级与低能级的能量差随着外磁场强度的增大而增大，跃迁时所吸收的能量增大。根据ν=γ·Ho/2π可知，核磁共振频率与外磁场强度成正比。由于原子核间的自旋偶合起源于磁核间的干扰，是通过成键电子传递的，所以偶合常数的大小只与偶合核间距离、角度、电子云密度有关，与外磁场强度无关。 5、什么是自旋偶合与自旋分裂？单取代苯的取代基为烷基时，苯环上的芳氢（5个）为单峰，为什么？两取代基为极性基团时（如卤素、—NH2、—OH等），苯环的芳氢变为多重峰，试说明原因，并推测是什么自旋系统。 自旋偶合是核自旋产生的核磁矩间的相互干扰，又称为自旋-自旋偶合。 自旋分裂是由自旋偶合引起共振峰分裂的现象，又称为自旋-自旋分裂。 P297下面。 6、峰裂距是否是偶合常数？偶合常数能提供什么结构信息？ 对简单偶合而言，峰裂距即偶合常数。 偶合常数是核磁共振谱的重要参数之一，可用它研究核间关系、构型、构象及取代位置等。 7、什么是狭义与广义的n+1律？ 狭义：某基团的氢与n个相邻氢偶合时，将被分裂为n+1重峰，而与该基团本身的氢
《分析化学》第十四章核磁共振波谱法
第十四章核磁共振波谱法- 经典习题1．试对照结构指出图14-1上各个峰的归属。 解：δ 三重峰 3H-CH2-CH3 δ 单峰 3H-CO-CH3 δ 四重峰 2H-O-CH2-CH3 δ～ 4H-C6H4- δ 单峰 1H-NH-
图14-1 例题1的1H-NMR谱 2．由下述1H-NMR图谱，进行波谱解析，给出未知物的分子结构及自旋系统。（1）已知化合物的分子式为C4H10O，1H-NMR谱如图14-2所示。 图14-2 C4H10O的 1H-NMR谱 解：u=(2+2×4-10)/2=0 δ 三重峰 6H -CH2-CH3（2个） δ 四重峰 4H -O-CH2-CH3（2个） 可能结构式为：CH3-CH2-O-CH2-CH3 自旋系统：2个A2X3 （2）已知化合物的分子式为C9H12，1H-NMR谱如图14-3所示。
图14-3 C9H12的1H-NMR谱解：u=(2+2×9-12)/2=4 δ 二重峰 3H -CH-CH3 δ 七重峰 1H -CH-(CH3)2δ 单峰 5H C6H5- 可能结构式为： 自旋系统：A6X，A5
（3）已知化合物的分子式为C10H10Br2O，1H-NMR谱如图14-4所示。 图14-4 C10H10Br2O的1H-NMR谱 解：u=(2+2×10-12)/2=5 δa 单峰 3H -CO-CH3 δb 双峰 1H δc 双峰 1H
δd 单峰 5H C6H5- 可能结构式为： 自旋系统：A5、AB、A3 3．某化合物分子式为C8H12O4，NMR图谱如图14-6所示，δa=（三重峰，）δb=（四重峰），δc=（单峰），Jab=7Hz，峰面积积分值比a:b:c=3:2:1，试推断其结构式。
(完整版)核磁共振氢谱练习题
核磁共振氢谱练习题 1.分子式为C2H6O的两种有机化合物的1H核磁共振谱，你能分辨出哪一幅是乙醇的核磁共振氢谱图吗? 2. 下图是某有机物的核磁共振谱图，则该有机物可能是( ) A. CH3CH2OH B. CH3CH2CH2OH C. CH3—O—CH3 D. CH3CHO 3.下列有机物在核磁共振谱图上只给出一组峰的是( ) A、HCHO B、CH3OH C、HCOOH D、CH3COOCH3 4.下列有机物中有几种H原子以及个数之比？ CH3-CH-CH3 CH3 CH3 CH3-C-CH3 CH3 CH3-CH2-OH CH3-CH2-CH-CH3 3 5.下列各物质中各有几种不同环境的氢（）
6.分子式为C3H6O2的二元混合物，分离后,在核磁共振氢谱上观察到氢原子给出的峰有两种情况。第一种情况峰给出的强度为1︰1；第二种情况峰给出的强度为3︰2︰1。由此推断混合物的组成可能是（写结构简式）。 3∶3 _____________ 3∶2∶1 _______________ ________________ __________________ 1：2:2:1 _________________ 7.某仅碳、氢、氧三种元素组成的有机化合物，经测定其相对分子质量为46。取该有机化合物样品 4.6g ，在纯氧中完全燃烧，将产物先后通过浓硫酸和碱石灰，两者分别增重8.8g和 5.4g。 （1）试求该有机化合物的分子式。 （2）若该有机化合物的核磁共振谱图只有一种峰，请写出该有机化合物的结构简式。 8.一个有机物的分子量为70,红外光谱表征到碳碳双键和C＝O的存在，核磁共振氢谱列如下图： ①写出该有机物的分子式 ②写出该有机物的可能的结构简式： 9.下列化合物中，核磁共振氢谱只出现两组峰且峰面积之比为3∶2的是(双选)()
HPLC法测定藜芦中虎杖苷和白藜芦醇的含量
a a b B 图３ ＨＰＬＣ色谱图 Ａ． 虎杖苷 Ｂ． 白藜芦醇 Ｃ．样品ａ－虎杖苷色谱峰 ｂ－白藜芦醇色谱峰 ＨＰＬＣ法测定藜芦中虎杖苷和白藜芦醇的含量 丛悦，王金辉，李铣 （沈阳药科大学中药学院，辽宁 沈阳 １１００１６） [摘要] 目的：建立HPLC 法测定由甲醇加热回流和甲醇超声两种方法提取的藜芦中虎杖苷和白藜芦醇的含量的方法。方法：采用Spherigel C 18 色谱柱（150mm ×4.6mm ，5μm ），流动相为四氢呋喃－乙腈－水（40∶40∶220），流速1.0 mL·min -1，检测波长303nm 。结果：虎杖苷在0~50mg·L -1内成良好线性关系，平均回收率甲醇加热回流提取102.4%，RSD1.1%；甲醇超声提取97.2%，RSD1.1%。白藜芦醇在0~100mg·L -1内成良好线性关系，平均回收率甲醇加热回流提取96.6%，RSD1.5%；甲醇超声提取96.6%，RSD1.2%。结论：本法可作为藜芦质量控制的手段之一。 [关键词] 藜芦；虎杖苷；白藜芦醇 藜芦为百合科藜芦属植物Veratrum nigrum L.的根及根茎部分，入药历史可追溯到《神农本草经》，通常认为藜芦有涌吐风痰、杀虫疗疮的功效，治疗中风痰壅、喉痹不通、癫痫等［１］。虎杖苷和白藜芦醇是其有效成分之一，具有保护心血管和保肝等作用。目前认为藜芦的有效成分是生物碱，所以质量控制主要集中在生物碱，对虎杖苷和白藜芦醇的含量测定少见报道，作者利用HPLC 法首次对由甲醇加热回流和甲醇超声两种制备方法提取的藜芦中虎杖苷和白藜芦醇进行了测定，为藜芦的质量控制提供了一种方法。１ 仪器与药品 色谱仪：HITACHI Pump L －7110，HITACHI UV －VIS Detector L －7420，Anastar 色谱工作站，FA1004N 型电子分析天平（上海精密科学仪器有限公司），乙腈（色谱纯，天津市康科德科技有限公司），四氢呋喃（色谱纯，天津市康科德科技有限公司），水（纯净水，杭州娃哈哈集团有限公司）。 藜芦购于河北安国药材市场，经沈阳药科大学孙启时教授鉴定，虎杖苷对照品（批号：0407056，含量：９８％）和白藜芦醇对照品（批号：0407057，含量：９８％）为西安宇源生物工程有限责任公司产品。虎杖苷和白藜芦醇的结构式分别见图1、2。２ 方法与结果 2.1 色谱条件 色谱柱：瑞士Spher igel C 18柱(150mm×4.6 mm ，5μm)，流动相：四氢呋喃－乙腈－水（40∶40∶220），检测波长：303n m ，流速：1.0 mL·min -1，柱温为室温。 2.2 系统适应性试验 在上述色谱条件下，虎杖苷和白藜芦醇达到基线分离(R>>1.0)，保留时间分别为14.78、54.64min ，理论塔板数均不低于2300。色谱图见图3。 HO CH CH OH O O HO CH 2OH OH OH HO CH CH OH OH 图１ 虎杖苷结构式 图２ 白藜芦醇结构式
最新核磁共振作业参考答案
核磁共振波谱作业参考答案 核磁谱图分析有点混乱，请参考谱图分析第8题。 一、判断题 1．核磁共振波谱法与红外吸收光谱法一样，都是基于吸收电磁辐射的分析法。（√） 2．质量数为奇数，荷电荷数为偶数的原子核，其自旋量子数为零。（×） 3．自旋量子数I =2的原子核在静磁场中，相对于外磁场，可能有两种取向。（×） 4．核磁共振波谱仪的磁场越强，其分辨率越高。（√） 5．在核磁共振波谱中，偶合质子的谱线裂分数目取决于邻近氢核的个数。（√） 6．化合物CH 3CH 2OCH(CH 3)2的1H-NMR 中，各质子信号的强度比为9：2：1。(×) 7．核磁共振波谱中出现的多重峰是由于邻近核的核自旋相互作用。（√） 8．苯环和双键氢质子的共振频率出现在低场是由于π电子的磁各向异性效应。（√） 9．碳谱的相对化学位移范围较宽（0~200），所以碳谱的灵敏度高于氢谱。（×） 10．氢键对质子的化学位移影响较大，所以活泼氢的化学位移在一定范围内变化。（√） 二、选择题 1．在N 147、O 168、H 11、C 136原子中没有核磁共振信号的是（B ） A ．N 147； B ．O 168； C ．H 11； D C 136 2．核磁共振的弛豫过程是（D ） A ．自旋核加热过程； B ．自旋核由低能态向高能态的跃迁过程； C ．自旋核由高能态返回低能态，多余能量以电磁辐射形式发射出去； D ．高能态自旋核将多余的能量以无辐射途径释放而返回低能态。 3．用频率表示的化学位移值与外加磁场强度的关系是（B ） A ．无关； B ．成比例； C ．不成比例 4．偶合常数2J HH 值，与外加磁场强度的关系是（A ） A ．无关； B ．成比例； C ．不成比例 5．化学全同质子（B ） A ．一定属磁全同； B ．不一定属磁全同； C ．视情况而定 6．磁全同质子（A ） A ．一定属化学全同； B ．不一定属化学全同； C ．视情况而定 7．TMS 的δ=0，从化合物的结构出发，它的正确含义是（B ） A ．不产生化学位移； B ．化学位移最大； C ．化学位移最小 8．在外加磁场中，H 2C=CH 2乙烯分子中四个质子位于（B ） A ．屏蔽区； B ．去屏蔽区； C ．屏蔽区和去屏蔽区 9．在外加磁场中HC=CH 乙炔分子的两个质子位于（A ） A ．屏蔽区； B ．去屏蔽区； C ．屏蔽区和去屏蔽区 10．在外加磁场中醛基质子位于（C ） A ．屏蔽区并受氧原子的电负性影响； B ．受氧原子的电负性影响； C ．去屏蔽区并受氧原子的电负性影响 11．在外加磁场中，苯环上的质子都位于（B ） A ．屏蔽区； B ．去屏蔽区； C ．屏蔽区和去屏蔽区 12．取决于原子核外电子屏蔽效应大小的参数是（A ）
核磁共振波谱法课后习题
核磁共振波谱法 思考题和习题 1．解释下列各词 （1）屏蔽效应和去屏蔽效应 （2）自旋偶合和自旋分裂 （3）化学位移和偶合常数 （4）化学等价核和磁等价核 （1）屏蔽效应：原子核外电子运动在外加磁场B 0作用下产生与外加磁场方向相反的次级磁场，造成核实际受 到的磁场强度减弱。 去屏蔽效应：烯烃、醛、芳环中，π电子在外加磁场作用下产生环流，使氢原子周围产生感应磁场，如果 感应磁场的方向与外加磁场相同，即增加了外加磁场，所以在外加磁场还没有达到Bo 时，就 发生能级的跃迁，称为去屏蔽效应，该区域称为去屏蔽区。 （2）自旋偶合：相邻核自旋产生核磁矩间的相互干扰，相互作用的现象。 自旋裂分：由自旋偶合引起的共振峰分裂现象。 （3）化学位移：在一定的辐射频率下，处于不同化学环境的有机化合物中的自旋核，产生核磁共振的磁场强 度或共振吸收频率不同的现象。 偶合常数：多重峰的峰间距；用来衡量偶合作用的大小。 （4）化学等价核：化学位移完全相同的核。 磁等价核：分子中的一组化学等价核，若它们对组外任何一个核都是以相同的大小偶合，则这一组核为磁 等价核。 2．下列哪一组原子核不产生核磁共振信号，为什么？ 2 1H 、14 7N 199F 、126C 126C 、11H 126C 、168O 并不是是所有原子核都能产生核磁共振信号，原子核能产生核磁共振现象是因为具有核自旋，其自旋量子数不等于0。质量数和质子数均为偶数的原子核，自旋量子数为0 ，质量数为奇数的原子 核，自旋量子数为半整数，质量数为偶数，质子数为奇数的原子核，自旋量子数为整数。由此，12 6C 、16 8O 这一组原子核都不产生核磁共振信号。 3．为什么强射频波照射样品，会使NMR 信号消失，而UV 与IR 吸收光谱法则不消失？ 自旋核在磁场作用下，能级发生分裂，处在低能态核和处于高能态核的分布服从波尔兹曼分布定律，当B 0 = 1.409 T ，温度为300K 时，高能态和低能态的1H 核数之比为处于低能级的核数比高能态核数多十万分之一，而NMR 信号就是靠这极弱过量的低能态核产生的。若以合适的射频照射处于磁场的核，核吸收能量后,由低能态跃迁到高能态，其净效应是吸收，产生共振信号。若用强射频波照射样品，高能态核不能通过有效途径释放能量回到低能态，低能态的核数越来越少，一定时间后高能态和低能态的核数相等，这时不再吸收，核磁共振信号消失。而UV 与IR 吸收光谱法是根据光线被吸收后的减弱程度来判断样品中待测元素的含量的,即使用较强辐射照射，吸收也不会消失。 4．为什么用δ值表示峰位，而不用共振频率的绝对值表示？为什么核的共振频率与仪器的磁场强度有关，而 偶合常数与磁场强度无关？ 屏蔽作用产生的共振条件差异很小，共振频率的绝对差值难以精确测定, 例：100 MHz 仪器，1H 因屏蔽作用引起的共振频率差约0-1500Hz ，仅为共振频率的百万分之十几；由于磁场强度不同，导致同种化学
第三章-核磁共振波谱法作业
第三章、核磁共振波谱法 1. 在核磁共振波谱法中，常用 TMS(四甲基硅烷) 作内标来确定化学位移，这样做有什么好处？ 2. 某有机化合物相对分子质量为88, 元素分析结果其质量组成为: C: 54.5%; O: 36;H: 9.1% NMR 谱图表明: a 组峰是三重峰, δ≈1.2, 相对面积=3; b 组峰是四重峰, δ≈2.3, 相对面积=2; c 组峰是单重峰, δ≈3.6, 相对面积=3; (1) 试求该化合物各元素组成比 (2) 确定该化合物的最可能结构及说明各组峰所对应基团 3. 当采用90MHz 频率照射时, TMS 和化合物中某质子之间的频率差为430Hz, 这个质子 吸收的化学位移是多少? 4. 在使用200MHz 的NMR 波谱仪中某试样中的质子化学位移值为6.8，试计算在300MHz 的NMR 仪中同一质子产生的信号所在位置为多少Hz ？ 5. C 4H 8Br 2 的核磁共振谱峰数如下： δ1 = 1.7 ，双峰 δ2 = 2.3 , 四重峰 δ3 = 3.5 ，三重峰 δ4 = 4.3 ，六重峰 这四种峰的面积比依次为 3 : 2 : 2 : 1 . 试写出该化合物的结构式，并用数字 1、2、3、4 标明相应的碳原子, 并作简明解释。 6. 判断下列化合物的核磁共振谱图（氢谱）。 C CH 2Br 2Br Br CH 3 7. 5 分 化合物C 3H 6O 21H-NMR 谱图如下 (1) 有3种类型质子 (2) a. δ=1.2 三重峰 b. δ=2.4 四重峰 c. δ=10.2 单峰 (3) 峰面积之比 a:b:c =3:2:1 请写出它的结构式, 并解释原因. 8. 分子式为C 5H 11Br 有下列NMR 谱数据 δ 质子数 信号类型 0.80 6 二重峰 1.02 3 二重峰 2.05 1 多重峰 3.53 1 多重峰 该化合物结构是什么? 9. 试推测分子式为C 8H 18O 在NMR 谱中只显示一个尖锐单峰的化合物结构. 10化合物(a), (b), (c)分子式均为C 3H 6Cl 2, 它们的NMR 数据如下, 试推测(a) (b), (c)的结构.
定量核磁共振波谱法同时测定中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量
DOI :10.11895/j.issn.0253_3820.140654 定量核磁共振波谱法同时测定 中药虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的含量 禹珊1 郭强胜1 王会琳2 高建平2 许旭*1,3 1(上海应用技术学院化学与环境工程学院,上海201418)2 (上海中医药大学中药学院,上海201203) 3(中国科学院天然产物有机合成化学重点实验室,上海200032)摘 要 建立了定量核磁共振波谱法同时测定虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的方法三样品用80%乙醇和丙酮两次超声提取净化,再用定量核磁共振波谱法测定三考察了样品预处理和核磁共振实验条件对测定结果的影响,选择氘代二甲亚砜_重水(10?1,V /V )为溶剂,用基准物质邻苯二甲酸氢钾标定的2,3,5_三碘苯甲酸为内 标,选择脉冲延迟时间为5s,采样次数为32次三定量峰为6.388~6.391(白藜芦醇:H_2,6,d,2H)和 6.322~6.330(虎杖苷:H_4,t,1H)三结果表明,NMR 测定的精密度均小于0.6%,线性相关系数(r )均大于0.999,白藜芦醇和虎杖苷的检出限分别为0.23和0.24g /L,定量限分别为0.69和1.57g /L,包括样品提取过程的回收率分别为9 7.7%~103.5%(RSD =2.4%)和94.5%~99.2%(RSD =1.6%),显示出定量核磁共振法在中药定量时的可靠性三实际测定4种虎杖饮片及配方颗粒样品中白藜芦醇和虎杖苷含量分别为3.57~5.69mg /g 和12.73~24.07mg /g三关键词 定量核磁共振;虎杖;白藜芦醇;虎杖苷 2014_08_20收稿;2014_10_05接受本文系中国科学院天然产物有机合成化学重点实验室研究基金资助项目(2013_2014)*E_mail:xuxu3426@https://www.sodocs.net/doc/cf13052881.html, 1 引 言 虎杖为蓼科植物虎杖(Poilgonum cuspidatum Sieb.et Zucc )的干燥根茎及根,主要功效为利湿退黄, 清热解毒,散瘀止痛,具有抗菌抗病毒二扩张血管二抗肿瘤二调节代谢等药理作用[1]三虎杖作为常用中药已收入中国药典[2],不久也会被收入欧洲药典[3]三虎杖含有大黄素和大黄素甲醚等蒽醌类化合物二白藜芦醇和虎杖苷(白藜芦醇苷)等二苯乙烯类化合物二鞣质和多糖等成分三其中,白藜芦醇和虎杖苷是虎杖中两种主要药效成分[1,2](化学结构见图1),这两种成分测定主要以高效液相色谱[2,4]和液相色谱_ 图1 白藜芦醇和虎杖苷的结构式Fig.1 Chemical structure of resveratrol and polydatin 质谱联用[5]为主三定量核磁共振波谱(Quantitative nuclear magnetic resonance spectroscopy,qNMR)方法简单二快捷,实际样品测定时可以不使用待测 组分的对照品[6]三已先后被美国药典二英国药 典[7]二欧洲药典收录,中国药典2010版也已收录[8]三近几年来,qNMR 方法已被广泛用于化学药物[9~13]二中药与植物提取物[14~19]二体液样品[20,21]二异构体[22]二食品[23,24]等的定量分析三本研究在对虎杖样品进行有效提取的基础上,建立了qNMR 定量测定其中白藜芦醇和虎杖苷两种药效成分的方法,考察了实验条件的影响,对所建立的方法进行了验证,并用于实际样品分析三2 实验部分 2.1 仪器与试剂Bruker AVANCE III 500MHz 核磁共振谱仪(德国Bruker 公司);M2P 精密天平(精度0.001mg,德第43卷 2015年1月 分析化学(FENXI HUAXUE) 研究报告Chinese Journal of Analytical Chemistry 第1期69~74
核磁共振波谱法习题集及答案
第三章、核磁共振波谱法 一、选择题 ( 共79题 ) 1. 2 分 萘不完全氢化时，混合产物中有萘、四氢化萘、十氢化萘。附图是混合产物的核磁共 振谱图，A 、B 、C 、D 四组峰面积分别为 46、70、35、168。则混合产物中，萘、四氢化萘，十氢化萘的质量分数分别如下： ( ) (1) 25.4%，39.4%，35.1% (2) 13.8%，43.3%，43.0% (3) 17.0%，53.3%，30.0% (4) 38.4%，29.1%，32.5% 2. 2 分 下图是某化合物的部分核磁共振谱。下列基团中，哪一个与该图相符？( ) (1)CH 3C CH 2O CH CH O CH 3(2)CH (3)CH 3CH 2O (4)C H 3O CH O CH H X ：H M ：H A =1：2：3 3. 2 分 在下面四个结构式中 (1) C 3H (2)H C CH 3CH 3(3)H C CH 3CH 33(4) H C H H 哪个画有圈的质子有最大的屏蔽常数 ？ （ ）
4. 1 分 一个化合物经元素分析，含碳 88.2%，含氢 11.8%，其氢谱只有一个单峰。它是 下列可能结构中的哪一个？ ( ) 5. 1 分 下述原子核中，自旋量子数不为零的是 ( ) (1) F (2) C (3) O (4) He 6. 2 分 在 CH 3- CH 2- CH 3分子中，其亚甲基质子峰精细结构的强度比为哪一组数据 ?（ ） (1) 1 : 3 : 3 : 1 (2) 1 : 4 : 6 : 6 : 4 : 1 (3) 1 : 5 : 10 : 10 : 5 : 1 (4) 1 : 6 : 15 : 20 : 15 : 6 : 1 7. 2 分 ClCH 2- CH 2Cl 分子的核磁共振图在自旋－自旋分裂后，预计 ( ) (1) 质子有 6 个精细结构 (2) 有 2 个质子吸收峰 (3) 不存在裂分 (4) 有 5 个质子吸收峰 8. 2 分 在 O - H 体系中，质子受氧核自旋－自旋偶合产生多少个峰 ? ( ) (1) 2 (2) 1 (3) 4 (4) 3 9. 2 分 在 CH 3CH 2Cl 分子中何种质子 σ 值大 ? ( ) (1) CH 3- 中的 (2) CH 2- 中的 (3) 所有的 (4) 离 Cl 原子最近的 10. 2 分 在 60 MHz 仪器上，TMS 和一物质分子的某质子的吸收频率差为 120Hz ，则该质 子的化学位移为 ( ) (1) 2 (2) 0.5 (3) 2.5 (4) 4 11. 2 分 下图四种分子中，带圈质子受的屏蔽作用最大的是 ( ) C H H H H R C R R H H C R H H R C R H H (b)(c)(d)(a) 12. 2 分 质子的γ（磁旋比）为 2.67×108/(T ?s)，在外场强度为 B 0 = 1.4092Ｔ时,发生核磁共 振的辐射频率应为 ( ) (1) 100MHz (2) 56.4MHz (3) 60MHz (4) 24.3MHz 13. 2 分 下述原子核没有自旋角动量的是 ( )
虎杖中虎杖苷的微生物发酵转化研究
虎杖中虎杖苷的微生物发酵转化研究 摘要:从中药材虎杖中筛选到一株具有转化虎杖苷能力的根霉菌株T-34,利用该菌株产生 的B-葡萄糖苷酶能将虎杖苷转化为白藜芦醇.虎杖的液体发酵动力学研究结果显示:根霉菌 T-34能够直接利用虎杖煮提液中的碳源、氮源等作为其生长所需的营养,并且产生的B-葡萄糖苷酶与底物虎杖苷的转化具有相对应的关系,用HPLC测得虎杖苷的转化率达98%. 关键词:微生物转化;虎杖;虎杖苷;白藜芦醇;B-葡萄糖苷酶 Biotransformation of polydatin fromPolygonum cuspidatum byRhizopussp. T-34 Abstract:, isolated by strain-screening test, could transform polydatin into resveratrol during fermentation ofPolygonum cuspidatumin this experiment. Kinetics of fermentation was studied to follow the transformation process, and the results suggested could utilize carbon re- source, nitrogen resource and etc directly as its nutrition, furthermore,B-glucosidase produced by the strain was correspondingly related to the transformation of polydatin, and the transformation rate of polydatin could reach 98%. Key words:microbial transformation,Polygonum cuspidatum,polydatin, resveratrol,B-glucosidase 1 引言 虎杖始载于5名医别录6,为蓼科植物虎杖的干 燥根茎,主要有效成分为二苯乙烯类和蒽醌类化合 物,前者包括白藜芦醇及其糖苷[1].据报道白藜芦 醇具有抑制肿瘤、抗氧化、抗自由基、抗血栓、抗过 敏、抗动脉粥样硬化和具有冠心病、缺血性心脏病、 高血脂症的防治作用,白藜芦醇已被列为抗心血 管、抗癌最有前途的药物之一[2].干燥虎杖根茎中 白藜芦醇含量仅为%~% ,而虎杖苷含量 约为2%左右[3],虎杖苷可在肠道中被糖苷酶分解 释放出白藜芦醇,发挥其药理作用[4].目前有研究 用酸水解法对虎杖苷进行分解[5],但是酸碱会造 成环境污染,降低产量,因此不宜用化学法进行水 解.也有用改性纤维素酶直接对虎杖苷进行分 解[6],但成本较高、工艺较为复杂,不利于推广应 用.本项研究采用微生物发酵法转化虎杖苷,即没 有强烈的酸碱反应发生,又无需粗提苷,有效的避 免了上述两种方法存在的缺陷.因此利用专一微 生物进行发酵是提高虎杖中白藜芦醇含量的有效 2008年4月
核磁共振波谱法习题集及答案
第三章、核磁共振波谱法 一、选择题( 共79题) 1. 2 分 萘不完全氢化时，混合产物中有萘、四氢化萘、十氢化萘。附图是混合产物的核磁共振谱图，A、B、C、D 四组峰面积分别为46、70、35、168。则混合产物中，萘、四氢化萘，十氢化萘的质量分数分别如下：( ) (1) 25.4%，39.4%，35.1% (2) 13.8%，43.3%，43.0% (3) 17.0%，53.3%，30.0% (4) 38.4%，29.1%，32.5% 2. 2 分 下图是某化合物的部分核磁共振谱。下列基团中，哪一个与该图相符？( ) (1)CH3C CH2 O CH CH O CH3 (2)CH (3)CH3CH 2 O (4)CH3O CH O CH H X：H M：H A=1：2：3 3. 2 分 在下面四个结构式中 (1) C3(2) C CH3 CH3 (3) C CH3 CH3 3 (4) C H H 哪个画有圈的质子有最大的屏蔽常数？（）
4. 1 分 一个化合物经元素分析，含碳 88.2%，含氢 11.8%，其氢谱只有一个单峰。它是 下列可能结构中的哪一个？ ( ) 5. 1 分 下述原子核中，自旋量子数不为零的是 ( ) (1) F (2) C (3) O (4) He 6. 2 分 在 CH 3- CH 2- CH 3分子中，其亚甲基质子峰精细结构的强度比为哪一组数据 ?（ ） (1) 1 : 3 : 3 : 1 (2) 1 : 4 : 6 : 6 : 4 : 1 (3) 1 : 5 : 10 : 10 : 5 : 1 (4) 1 : 6 : 15 : 20 : 15 : 6 : 1 7. 2 分 ClCH 2- CH 2Cl 分子的核磁共振图在自旋－自旋分裂后，预计 ( ) (1) 质子有 6 个精细结构 (2) 有 2 个质子吸收峰 (3) 不存在裂分 (4) 有 5 个质子吸收峰 8. 2 分 在 O - H 体系中，质子受氧核自旋－自旋偶合产生多少个峰 ? ( ) (1) 2 (2) 1 (3) 4 (4) 3 9. 2 分 在 CH 3CH 2Cl 分子中何种质子 σ 值大 ? ( ) (1) CH 3- 中的 (2) CH 2- 中的 (3) 所有的 (4) 离 Cl 原子最近的 10. 2 分 在 60 MHz 仪器上，TMS 和一物质分子的某质子的吸收频率差为 120Hz ，则该质 子的化学位移为 ( ) (1) 2 (2) 0.5 (3) 2.5 (4) 4 11. 2 分 下图四种分子中，带圈质子受的屏蔽作用最大的是 ( ) C H H H C R C R C H (b )(c )(d ) (a ) 12. 2 分 质子的γ（磁旋比）为 2.67×108/(T ?s)，在外场强度为 B 0 = 1.4092Ｔ时,发生核磁共 振的辐射频率应为 ( ) (1) 100MHz (2) 56.4MHz (3) 60MHz (4) 24.3MHz 13. 2 分 下述原子核没有自旋角动量的是 ( )
《分析化学》第十四章核磁共振波谱法
第十四章核磁共振波谱法 - 经典习题1．试对照结构指出图14-1上各个峰的归属。 解：δ1.2 三重峰 3H-CH2-CH3 δ2.0 单峰 3H-CO-CH3 δ4.0 四重峰 2H-O-CH2-CH3 δ6.8～7.6 4H-C6H4- δ9.8 单峰 1H-NH- 图14-1 例题1的1H-NMR谱 2．由下述1H-NMR图谱，进行波谱解析，给出未知物的分子结构及自旋系统。（1）已知化合物的分子式为C4H10O，1H-NMR谱如图14-2所示。
图14-2 C4H10O的 1H-NMR谱 解：u=(2+2×4-10)/2=0 δ1.13 三重峰 6H -CH2-CH3（2个） δ3.38 四重峰 4H -O-CH2-CH3（2个） 可能结构式为：CH3-CH2-O-CH2-CH3 自旋系统：2个A2X3 （2）已知化合物的分子式为C9H12，1H-NMR谱如图14-3所示。 图14-3 C9H12的1H-NMR谱 解：u=(2+2×9-12)/2=4 δ1.22 二重峰 3H -CH-CH3 δ2.83 七重峰 1H -CH-(CH3)2 δ7.09 单峰 5H C6H5- 可能结构式为：
自旋系统：A6X，A5 （3）已知化合物的分子式为C10H10Br2O，1H-NMR谱如图14-4所示。 图14-4 C10H10Br2O的1H-NMR谱 解：u=(2+2×10-12)/2=5 δa 2.42 单峰 3H -CO-CH3 δb 4.88 双峰 1H
δc 5.33 双峰 1H δd 7.35 单峰 5H C6H5- 可能结构式为：
【分析化学试题及答案】第十四章 核磁共振波谱法 经典习题
第十四章核磁共振波谱法- 经典习题 1．试对照结构指出图14-1上各个峰的归属。 解：δ1.2 三重峰 3H-CH2-CH3 δ2.0 单峰 3H-CO-CH3 δ4.0 四重峰 2H-O-CH2-CH3 δ6.8～7.6 4H-C6H4- δ9.8 单峰 1H-NH- 图14-1 例题1的1H-NMR谱 2．由下述1H-NMR图谱，进行波谱解析，给出未知物的分子结构及自旋系统。（1）已知化合物的分子式为C4H10O，1H-NMR谱如图14-2所示。
图14-2 C4H10O的 1H-NMR谱 解：u=(2+2×4-10)/2=0 δ1.13 三重峰 6H -CH2-CH3（2个） δ3.38 四重峰 4H -O-CH2-CH3（2个） 可能结构式为：CH3-CH2-O-CH2-CH3 自旋系统：2个A2X3 （2）已知化合物的分子式为C9H12，1H-NMR谱如图14-3所示。 图14-3 C9H12的1H-NMR谱 解：u=(2+2×9-12)/2=4 δ1.22 二重峰 3H -CH-CH3 δ2.83 七重峰 1H -CH-(CH3)2 δ7.09 单峰 5H C6H5- 可能结构式为：
自旋系统：A6X，A5 （3）已知化合物的分子式为C10H10Br2O，1H-NMR谱如图14-4所示。 图14-4 C10H10Br2O的1H-NMR谱 解：u=(2+2×10-12)/2=5 δa 2.42 单峰 3H -CO-CH3 δb 4.88 双峰 1H
δc 5.33 双峰 1H δd 7.35 单峰 5H C6H5- 可能结构式为：
核磁共振氢谱专项练习及答案
核磁共振氢谱专项练习及答案 (一)判断题(正确的在括号内填“√”号；错误的在括号内填“×”号。) 1．核磁共振波谱法与红外吸收光谱法一样，都是基于吸收电磁辐射的分析法。( ) 2．质量数为奇数，核电荷数为偶数的原子核，其自旋量子数为零。( ) 3．自旋量子数I=1的原子核在静磁场中，相对于外磁场，可能有两种取向。( ) 4．氢质子在二甲基亚砜中的化学位移比在氯仿中要小。( ) 5．核磁共振波谱仪的磁场越强，其分辨率越高。( ) 6．核磁共振波谱中对于OCH3、CCH3和NCH3，NCH3的质子的化学位移最大。( ) 7．在核磁共振波谱中，耦合质子的谱线裂分数目取决于邻近氢核的个数。( ) 8．化合物CH3CH2OCH(CH3)2的1H NMR中，各质子信号的面积比为9:2:1。( ) 9．核磁共振波谱中出现的多重峰是由于邻近核的核自旋相互作用。( ) 10．化合物Cl2CH—CH2Cl的核磁共振波谱中，H的精细结构为三重峰。( ) 11．苯环和双键氢质子的共振频率出现在低场是由于π电子的磁各向异性效应。( ) 12．氢键对质子的化学位移影响较大，所以活泼氢的化学位移在一定范围内变化。( ) 13．不同的原子核产生共振条件不同，发生共振所必需的磁场强度(B0)和射频频率(v)不同。( ) 14．(CH3)4Si分子中1H核共振频率处于高场，比所有有机化合物中的1H核都高。( ) 15．羟基的化学位移随氢键的强度变化而移动，氢键越强，δ值就越小。( ) 答案 (一)判断题 1．√ 2．× 3．× 4．× 5．√ 6．× 7．√ 8．× 9．√ l0．√ 11．√ l2．√ l3．√ l4．× l5．× (二)选择题(单项选择) 1．氢谱主要通过信号的特征提供分子结构的信息，以下选项中不是信号特征的是( )。 A．峰的位置； B．峰的裂分；C．峰高；D．积分线高度。 2．以下关于“核自旋弛豫”的表述中，错误的是( )。 A．没有弛豫，就不会产生核磁共振； B．谱线宽度与弛豫时间成反比； C．通过弛豫，维持高能态核的微弱多数；D．弛豫分为纵向弛豫和横向弛豫两种。 3．具有以下自旋量子数的原子核中，目前研究最多用途最广的是( )。 A．I=1／2；B．I=0；C．I=1；D．I＞1。 4．下列化合物中的质子，化学位移最小的是( )。 A．CH3Br；B．CH4；C．CH3I；D．CH3F。 5．进行已知成分的有机混合物的定量分析，宜采用( )。 A．极谱法；B．色谱法；C．红外光谱法；D．核磁共振法。 6．CH3CH2COOH在核磁共振波谱图上有几组峰最低场信号有几个氢( ) A．3(1H)；B．6(1H)；C．3(3H)；D．6(2H)。 7．下面化合物中在核磁共振谱中出现单峰的是( 九 A．CH3CH2C1；B．CH3CH20H；C．CH3CH3；D．CH3CH(CH3)2。 8．下列4种化合物中，哪个标有*号的质子有最大的化学位移( ) 9．核磁共振波谱解析分子结构的主要参数是( )。 A．质荷比；B．波数；C．化学位移；D．保留值。
仪器分析之核磁共振波谱法试题及答案
核磁共振波谱法 一、填空题 1. NMR法中影响质子化学位移值的因素有：__________，___________，__________、，，。 2. 1H 的核磁矩是2.7927核磁子, 11B的核磁矩是2.6880核磁子, 核自旋量子数为3/2，在1.000T 磁场中, 1H 的NMR吸收频率是________MHz, 11B的自旋能级分裂为_______个, 吸收频率是________MHz (1核磁子=5.051×10-27J/T, h=6.626×10-34J·s) 3. 化合物C 6H 12 O,其红外光谱在1720cm-1附近有1个强吸收峰，1HNMR谱图上, 有两组单峰d a=0.9, d b=2.1,峰面积之比a:b =3:1, a为_______基团, b为 _________基团,其结构式是__________________。 4. 苯、乙烯、乙炔、甲醛,其1H化学位移值d最大的是_______最小的是 _________,13C的d值最大的是_________最小的是____________。 二、选择题 1. 自旋核7Li、11B、75As, 它们有相同的自旋量子数Ι=3/2, 磁矩μ单位为核磁 子，m Li =3.2560, m B=2.6880, m As =1.4349 相同频率射频照射, 所需的磁场强 度H大小顺序为 ( ) (1) B Li>B B>B As (2) B As>B B>B Li (3) B B>B Li>B As (4) B Li>B As>B Li 2.在O - H 体系中，质子受氧核自旋－自旋偶合产生多少个峰? ( ) (1) 2 (2) 1 (3) 4 (4) 3 3. 下列化合物的1HNMR谱, 各组峰全是单峰的是 ( ) (1) CH 3-OOC-CH 2 CH 3 (2) (CH 3 ) 2 CH-O-CH(CH 3 ) 2 (3) CH 3-OOC-CH 2 -COO-CH 3 (4) CH 3 CH 2 -OOC-CH 2 CH 2 -COO-CH 2 CH 3 4.一种纯净的硝基甲苯的NMR图谱中出现了3组峰, 其中一个是单峰, 一组是二重峰，一组是三重峰. 该化合物是下列结构中的 ( )
核磁共振波谱法作业题
核磁共振波谱法 讲授内容 第一节.概述 第二节.基本原理 第三节.化学位移 第四节.自旋偶合和自旋系统 第五节.核磁共振仪和实验方法 第六节.氢谱的解析方法 第七节.碳谱简介 第一节.概述 第二节.基本原理 填空题 1.原子核是否有自旋现象是由其自旋量子数Ⅰ决定的，Ⅰ为的核才有自旋，为磁场 性核。 2.进行核磁共振实验时，样品要置于磁场中，是因为。 3.对质子（ =2.675×108 T-1·s-1）来说，仪器的磁场强度如为1.4092T，则激发用的射频 频率为。 选择题 1.下列原子核没有自旋角动量的是哪一种？ A．14N B．28Si C．31P D．33S E.1H 2.下述核中自旋量子数I=1/2的核是 A.16O B.19F C.2H D.14N E.12C 3.1H核在外磁场中自旋取向数为 A.0 B.1 C.2 D.3 E.4 4.若外加磁场的磁场强度H逐渐增大时，则使质子从低能级E跃迁至高能级E所需的能 量： A.不发生变化 B.逐渐变小 C.逐渐变大 D.不变或逐渐变小 E.不变或逐渐变大 简答题 1.试述产生核磁共振的条件是什么？ 2.一个自旋量子数为1/2的核在磁场中有多少种能态？各种能态的磁量子数取值为多 少？ 3.哪些类型的核具有核磁共振现象？目前的商品核磁共振仪主要测定是哪些类型核的核 磁共振？ 4.为什么强射频波照射样品会使NMR信号消失？而UV与IR吸收光谱法则不消失。 计算题 1.试计算在1.9406T的磁场中，1H、13C的共振频率。 2.试计算在25o C时，处在2.4T磁场中13C高能态核与低能态核数目的比例。
第三节.化学位移 填空题 1.有A，B，C三种质子，它们的共振磁场大小顺序为B A＞B B＞B C，则其化学位移δ的大 小顺序为。 2.有A，B，C三种质子，它们的屏蔽常数大小顺序为σA＞σB＞σC，试推测其共振磁场 B的大小顺序为。 3.在化合物CH3X中，随着卤原子X的电负性增加，质子共振信号将向磁场强度方向 位移。 选择题 1.不影响化学位移值的因素是： A.核磁共振仪的磁场强度 B.核外电子云密度 C.磁的各向异性 效应 D.所采用的内标试剂 E.使用的溶剂 2.在下列化合物中，质子化学位移（ppm）最大者为： A.CH 3Br B.CH 4 C.CH 3 OH D.CH 3 I E.CH 3 F 3.CH3X中随X电负性增大，H核信号： A.向高场位移，共振频率增加 B.向高场位移，共振频率降低 C.向低场位移，共振频率增加 D.向低场位移，共振频率降低 E.变化无规律 4.在磁场中质子周围电子云起屏蔽作用，以下几种说法正确的是： A.质子周围电子云密度越大，则屏蔽作用越小 B.屏蔽作用与质子周围的电子云密度无关 C.屏蔽越小，共振磁场越高 D.屏蔽越大，共振频率越高 E.屏蔽越大，化学位移δ越小 5.抗磁屏蔽效应和顺磁屏蔽效应对化学位移有重要贡献，结果是： A.抗磁屏蔽使质子去屏蔽，顺磁屏蔽使质子屏蔽 B.抗磁屏蔽使质子的共振信号向低场位移，顺磁屏蔽使质子的共振信号向高场位移 C.抗磁屏蔽使质子的δ值增大，顺磁屏蔽使质子的δ值减小 D.抗磁屏蔽使质子的δ值减小，即产生高场位移；顺磁屏蔽使质子的δ值增大，即产生 低场位移 E.抗磁屏蔽和顺磁场屏蔽均使质子去屏蔽 6.乙烯质子的化学位移值(δ)比乙炔质子的化学位移值大还是小？其原因是什么？ A．大，因为磁的各向异性效应，使乙烯质子处在屏蔽区，乙炔质子处在去屏蔽区； B．大，因为磁的各向异性效应，使乙烯质子处在去屏蔽区，乙炔质子处在屏蔽区； C．小，因为磁的各向异性效应，使乙烯质子处在去屏蔽区，乙炔质子处在屏蔽区；