抗氧化性测定方法
3. 2. 3 冬枣多酚含量的测定
（1）福林-肖卡试剂（Folin-ciocalteu）的配制
称取100克钨酸钠和25克钼酸钠，将两者溶于700mL水中，倒入2L的圆底烧瓶中，再加入50mL85%的磷酸和100mL浓盐酸，放入几粒玻璃珠，给烧瓶连上回流冷凝器，用文火回流10h（可不连续）;回
流后用50mL蒸馏水冲洗冷凝管上的附着物，然后取下，加150克硫酸锂和几滴溴水（边加边摇直至溶
液变黄），加热煮沸15min，（注：最后的颜色应是黄色，不带丝毫的蓝色绿色，发绿即不得使用）。
冷却后转移到1L的容量瓶中，用水定容至刻度，过滤贮存于棕色瓶中备用
（2）多酚标准曲线的绘制
取洁净干燥试管7支，分别标号0-6，分别加入预先配制的0.4mg/mL的没食子酸0，0.05，0.1，
0.15，0.2，0.25，0.35mL，再分别加入双蒸水，2，1.95，.1.9，1.85，1.8，1.75，1.7，1.65mL。将储
存备用的福林肖卡试剂稀释3倍，于7支试管中分别加入1mL，将7支试管振荡摇匀，静置3-4min，再于7支
试管中分别加入10%的碳酸钠各1mL，放入25℃恒温水浴中2h。进行全波长扫描，在765 nm处有最大吸收波
长，在此波长下测定不同浓度标准溶液的吸光值，绘制多酚浓度与吸光度的标准曲线。
（3）测定
将上述八种原液稀释相应倍数之后，各取0.1mL于试管中，在各加入1.99mL双蒸水，其余操作同标准曲
线绘制，于765nm波长处测定吸光值。
2.3.2多酚含量测定
2.3.2.1多酚标准曲线的制作[5]
准确称取没食子酸标准品200mg，加少量70%乙醇将样品溶化，用70%乙醇定容至100mL，摇匀，静置。再用移液器吸取20mL，用70%乙醇定容至100mL，摇匀，配成浓度为400μg/mL 的没食子酸标准溶液，待用。
准确吸取浓度为的没食子酸标准溶液0,0.05,0.1,0.15,0.2,0.25,0.35ml
于试管中。分别加入蒸馏水2.0,1.95,1.9,1.85,1.8,1.75,1.65ml，再各加入福林试剂1ml,充分振荡后静置3-4min:，分别加入10%碳酸钠1ml于25℃，摇匀置于恒温水浴中反应2h,同时做试剂空白，于765nm下测定吸光度，以含量对吸光度进行直线回归，计算回归方程。
2.3.2.2试样多酚含量的测定
将提取液离心，取上清液，按标准曲线绘制的测定方法，依次加入试剂，以试剂空白作参比，用1cm比色皿在765nm处测定吸光度，计算多酚含量。
2.2.
3.1总还原能力测定(铁氰化钾还原法)[19][20]
还原力法的原理为：K3Fe(CN)6+ 样品→ K4Fe(CN)6+ 样品氧化物
K4Fe(CN)6 + Fe3+ → Fe4[Fe(CN)6]3
在波长7 0 0 n m 条件下测定吸光度A ，A 越大，则样品的还原力越大。
在2.5ml pH=6.6 磷酸缓冲溶液中加分别入芦丁标准溶液（0.6mg/ml）：0、0.05、0.1、0.15、0.2、0.25、0.3ml，双蒸水1、0.95、 0.9、0.85、0.8、0.75、0.7ml，再加入1% 铁氰化钾1ml，混合物在50℃恒温条件下，加热20min。急速冷却，加2.5ml 10% 三氯乙酸，3500转/分离心分离10min。取上层清液2、5ml、双蒸水2、5ml ，再加0、5ml 0.1%FeCl3，混合均匀，静置10min 后在波长700nm 下测吸光度A 值,绘制标准曲线。
样品测定：分别取720mg/ml的提取液、维生素C、TBHQ、BHT溶液0.5ml代替芦丁标准溶液，其他操作同标准溶液的绘制，测定吸光度。结果如图12、13所示。
2.2.
3.2清除DPPH自由基的能力测定[20]
DPPH·在有机溶剂中是一种稳定的自由基，其结构中含有3 个苯环，1 个氮原子上有1 个孤
对电子，呈紫色，在517nm 有强吸收。有自由基清除剂存在时，DPPH·的单电子被配对而使其颜
色变浅，在最大吸收波长处的吸光度变小，而且这种颜色变浅的程度与配对电子数是成化学剂量
关系的,因此可用于检测自由基的清除情况，从而评价实验样品的抗氧化能力。
取0.04mg/ml的DPPH-乙醇溶液1.5ml，加入适量提取液用95%乙醇补足3ml。静置30min，在
517nm处测定吸光度。同时测定维生素C、合成抗氧化剂TBHQ 对DPPH 自由基的清除率，作为对比。
清除率 = [1-(A1- A2)/A0]×100
其中：A1为加提取液后DPPH 溶液的吸光度；
A2为提取液的吸光度；
A0为未加提取液时DPPH 溶液的吸光度。
结果如图14所示。
2.2.
3.3 清除羟自由基作用的测定[20][21]
通过Fenton反应产生·OH，水杨酸捕获·OH产生有色物质，该物质在510nm有特征吸收，通
过测定水杨酸捕获·OH所得到的产物，确定·OH的清除率。
在10ml试管中加入一定浓度的待测液，然后加入0.3ml6mmol/LFeSO4，1.5ml6mmol/L水杨酸
用双蒸水补齐4.8ml摇匀，最后加入0.3ml 6mmol/LH2O2启动反应，静置10min后于510nm处测定吸
光度。考虑到提取液本身的吸光值，做试样空白，测出扣除试样空白的吸光度，同时测定空白对照液的吸光度。
清除率（%）= (A0– A1+ A2)/ A0
其中：A0为未加提取液时溶液的吸光度。
A1为加提取液后溶液的吸光度；
A2为提取液的吸光度。
结果如图15所示。
2.2.
3.4 超氧阴离子清除率的测定
超氧阴离子自由基是生物体内和食品体系中起主要作用的自由基，因此，测定提取液对超氧阴离子的清除率具有重要意义。
待测液清除超氧阴离子能力测定采用邻苯三酚自氧化法具体操作参照文献[22]，稍作修改。取3ml 0.05mol/L Tris-HCL 缓冲溶液(pH = 8.2) ,置于25 ℃水浴中预热20min ,分别加入同体积不同浓度的待测液溶液和0.6ml 30mmol/L的邻苯三酚溶液,混匀后于25 ℃水浴中预热5min ,加入0.5ml 1mol/LHCL 终止反应,于420nm 处测定吸光度A1 。A0 空白对照以同体积的双蒸水代替样品,吸光度记为A。考虑到待测液本身可能在420nm 处有吸收,用同体积的双蒸水代替邻苯三酚溶液,得A2 。按下式计算抗氧化剂清除率。
清除率=（A0-A1+A2）/A0×100 %
式中: A0 为不加样品的对照值,
A1 为加样品后的测定值,
A2 为样品在体系中的吸光值。
测定结果见图16.
2.2.
3.5 提取物对亚硝基清除作用的测定[23]
NO2-在酸性条件下与对氨基苯磺酸重氮反应后，再与N-1苯基乙二胺盐酸盐偶合生成紫红色络合物，在540nm 处有最大吸收，可用比色法测定NO2-的量。
分别吸取同浓度的黄酮提取液、维生素C溶液、合成抗氧化剂TBHQ、BHT溶液于25ml容量瓶中，加入5mg/ml的亚硝酸钠溶液0.5ml，各加入0.4%对氨基苯磺酸1ml，再加入0.2%盐酸萘乙二胺显色
剂0.5ml，摇匀加水至刻度，静置15分钟，测定吸光度。结果如图17、18所示。
3. 2. 4 提取液抗氧化活性的测定（铁氰化钾还原法）
（1）原理
在波长700nm条件下测定吸光度A，A越大，则样品的还原力越大。
（2）以没食子酸为样品绘制标准曲线
取十支洁净试管，编号0至9，每支试管中加入2.5mLph=6.6的磷酸缓冲溶液，由0至9分别加入没食
子酸0，40，80，120，160，200，240，280，320，360mg，再分别加入10%铁氰化钾1mL。放置于50℃水浴
中加热20min,然后急速冷却。再分别加入10%三氯乙酸2.5mL，4000转/分离心10min。各取上清液2.5mL，
再加2.5mL双蒸水，于700nm波长处测定吸光度，绘制标准曲线。
（3）以芦丁为样品绘制标准曲线
取五支洁净试管，编号0至4，每支试管中加入2.5mLph=6.6的磷酸缓冲溶液，由0至4分别加入芦丁0，120，160，180，240mg，其余操作同上，绘制标准曲线。
（4）测定
将上述八种原液稀释相应倍数之后，各取0.5mL，操作同标准曲线，测定700nm吸光度。
2.3.3总抗氧化性的测定方法
2.3.3.1抗氧化性标准曲线绘制(铁氰化钾还原法) [8] [9]
以400ug/ml的没食子酸标准溶液为标准绘制抗氧化性标准曲线。方法如下：
在2.5ml pH=6.6 磷酸缓冲溶液中加入没食子酸标准溶液0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 0.6, 0.7, 0.9ml，用双馏水补齐到1ml,加入1ml 1% 铁氰化钾，混合物在50℃恒温条件下，加热20min。急
速冷却，加2.5ml 10% 三氯乙酸，3500转离心分离10min。取上层清液2.5ml，加2.5ml双馏水，
再加0.5ml 0.1%FeCl3，混合均匀，静置10min 后在波长700nm 下测吸光度A 值。A 越大，则样
品的还原力越强。
2.3.3.2试样抗氧化性的测定
将提取液离心，取上清液，按标准曲线绘制的测定方法，依次加入试剂，以试剂空白作参比，用1cm比色皿在700nm处测定吸光度,比较其抗氧化活性。
十种具有抗氧化功效的绝佳食物
具有抗氧化功效的绝佳食物 具有抗氧化功效的食物，可以有效抗击肌肤衰老。美国《时代杂志》选出了最具抗氧化能力的10种食物，在日常饮食中，注意多摄取这些食物，能帮助你减掉肌肤年龄。 1、番茄 在10种食物中，番茄的抗老化能力最强。这是因为番茄中含有丰富的茄红素，而茄红素的抗氧化能力是维他命C的20倍。而在多个番茄品种中，小番茄的维他命C含量最高。 如何食用，才能更有效的抗氧化呢？那便是熟吃。虽然经烹调或加工过的番茄(番茄酱、番茄汁、罐装番茄)所含的维他命C会遭到破坏，但是茄红素的含量可增加数倍，抗氧化功能也更超强。 2、葡萄 葡萄籽中的花青配糖体，其抗氧化能力是维他命C的20倍、维他命E的50倍。但作为水果的葡萄或饮料的葡萄汁因其少了发酵的过程，抗氧化的成分就少了许多。而用葡萄酿成的红酒因经过发酵，其抗氧化能力则得以提高。因此，在吃葡萄的同时，适量饮用些红酒，可以减缓肌肤老化。 3、绿茶 在抗氧化的同时，绿茶还具有去油解腻、清新口气的功能，所以坚持饮用绿茶，既抗老化，又有助于减肥。 4、鲑鱼 味美好吃的鲑鱼中，因含有超强的omega-3多元不饱和脂肪酸，所以有很强的抗氧化功效。因人体内的omega-6多元不饱和脂肪酸会影响抗氧化功能，而多摄取omega-3多元不饱和脂肪酸，便可以平衡身体里两种不饱和脂肪酸的比例，相应地起到抗氧化功效。 5、坚果 富含维他命E的坚果类食物(腰果、核桃、榛子、花生等)除了具有抗氧化功能之外，还能修护皮肤组织。不过，又因为坚果类食物含有高油脂，如果摄取过量，不但有致胖的危险，由高油脂所造成的氧化反应还会损害维他命E的抗氧化作用。因此，这类食物的摄取要适量。 6、花椰菜 花椰菜，除了含有丰富的维他命A、C之外，还含有一种特有的抗氧化物质，它几乎集所有抗氧化物于一身，因此，抗氧化性能比其他食物更优良，而且还是抗癌明星。 7、蓝莓 莓类水果富含β胡萝卜素以及维他命C，而这两种成分是抗氧化物里为医学界所肯定的物质，所以外形小巧、美观的草莓、蓝莓、小红莓都是抗氧化的“高手”。另外莓类水果所含有的钾及水溶性纤维，还能降低血胆固醇浓度及减少患高血压的几率。
抗氧化实验方法
1还原力的测定 样品2ml加到2ml 0.2mol/L磷酸盐缓冲液（pH6.6）和2ml 1%的铁氰化钾溶液的混合液中。混合物在50℃保温20min，然后在反应混合物中加入2ml 10%的TCA，混合后以3000rpm 离心10min，取上清液2ml与2ml蒸馏水以及0.4ml 0.1%氯化铁在反应试管中反应，10min 后测定其在700nm处的吸光值。吸光值越大表明还原力越强。 注意：建议蛋白浓度以5mg/ml左右变化，例如2.5，5之类变化。但具体情况应根据吸光值大小而定。 0.2mol/L pH6.6的磷酸盐缓冲液的配制见附表。 铁氰化钾溶液应盛装在棕色瓶中。 比色皿的用法：可见光(>400nm)用玻璃比色皿（即没有标字母或者标G的比色皿），紫外光时（<400nm）用石英比色皿（即标Q字比色皿）。 2 DPPH自由基清除活性的测定 将1.5ml样品液添加到1.5ml含0.1 mmol/L DPPH的95％乙醇中，混合，振荡，在 室温下放置30min，然后在波长517nm处检测（Ai）。清除率计算公式为： 空白为1.5 ml 95%的乙醇加入1.5 ml蒸馏水调零。 式中：Ac——对照为1.5 ml DPPH溶液加上1.5 ml蒸馏水在517nm处的吸光值；Aj——1.5ml样品液加上1.5 ml 95%的乙醇在517nm处的吸光值； Ai——1.5ml样品液加上1.5 ml DPPH溶液在517nm处的吸光值； 注意：建议酶解液蛋白浓度以2mg/ml 左右变化，如0.5,1,2,2.5之类变化，但是具体情况应视清除率而定，最终结果应有清除率大于50%和小于50%的情况。 DPPH样品有毒，需戴口罩和手套进行操作。而且DPPH试剂很昂贵，用时注意节约。0.1m mol/L DPPH 乙醇溶液的配制：准确称取0.00395gDPPH，用95%的乙醇溶液溶解并定容到100ml。 3 在卵黄磷脂体系中抗氧化能力的测定 以卵黄脂蛋白为底物的LPO模型反应体系包括:体积比为1:25稀释的卵黄悬液(卵黄用等体积的pH7.45，0.lmol/LPBS配成，使用前磁力搅拌10min)0.2 mL、一定浓度的样品溶液0.lmL、25m moll/LFeSO4溶液0.2mL，用PBS缓冲液补足至2.0mL。对照管除不加样液外其他试剂同前。将上述2种试管同时置37℃恒温水浴锅中保温培养1h。取出后，加入20%TCA0.5mL，静置10 min后，与对照管于3500r/min离心10min，取2.0mL上清液，分别加入质量分数为0.8%硫代巴比妥酸(TBA)溶液1.0mL，加塞于100℃水浴15min，取出冷却。空白管以2.0mLPBS溶液代替，在532nm下测定吸光度，样品对卵黄脂蛋白LPO的抑制率表示为: SA(%)=(Ac一AS)/A C×100 式中:Ac一不加样品的吸光度 As一加入样品的吸光度 注意：卵黄溶液不用时应放置冰箱保存。 酶解液蛋白浓度以5mg/ml左右调整，但具体应视清除率大小而定，对酶解液蛋白浓度
抗氧化酶活性等测定方法
叶绿体得提取 一、试剂配置 １、PＢS提取液:每L水依次加入MES(１9５.2×0。05=９、7６g)、山梨糖醇(0。33×182。2＝60。1２6g)、ＮaCｌ(０、０10×58.5=0、５85g)、MgCｌ(０.002×95=0、19g)、EDＴA(292、２5×０.0０２=０、５84５g)、KH2PO４(２00×0.0005=０、１g);使用时加入ASＡ—Nａ(１98。1×0、00２=0、３962g); 2、悬浮液:将ＰBS提取液中得MES换为238。３×0.05＝１１、９15g得HEＰＥS(238、3×０。05=11。915ｇ); ３、8０%Pｅrｃoｌ:8０ml原液+２0ml水;40％Perｃol:４0ｍl原液＋60ml水; 实际配制: PBS提取液2000ｍl(3个处理*2个品种＊３个重复＊20ml＊３次=1０80mｌ), 悬浮液100ml(３个处理＊2个品种＊3个重复*1mｌ＊3次＝5４ml); 8０％Percol ２０0ml;40%Percｏl 200ml。(3个处理*2个品种*3个重复*3mｌ＊3次=162ｍl) 二、提取步骤 1、10g鲜样加20ｍl提取ＰＢS(50mM MES PH６、1,含0、３3M山梨糖醇,10mM NaＣl,2mMＭgCｌ２,２ｍM EＤTA,０.5 mMKH2PＯ４,2mM ASA—Ｎa,ASＡ—Na使用前现配现加) 2、快速研磨,使叶片碎成绿豆粒大小,４层纱布过滤,去除残渣(注意过滤时不可用力挤压,以免叶绿体膜破碎) 3、滤液20００g ３ｍin,小心倒出上清液,将离心管放入离心机后,使离心机得加速很快上升到预定值(水平转头,加速度调到9),约经30s后很快使其下降停止,整个离心持续大约2—3ｍｉｎ左右完成; 4、沉淀用１ml提取液漂洗表面悬浮物; 5、用1ml悬浮液(５０mM HＥPＥS pＨ7。6,含０、３３mM山梨糖醇,１０mM NaＣl,2mM MgＣl2,2mM EDTA,0。5mMKH2PＯ４,2mM ASA－Ｎａ,ASＡ-Na使用前现配现加)将沉淀悬浮,在分散叶绿体时宜用毛笔轻轻刷,或者用手握住离心管在冰块之间搅动,使叶绿体由于震动分散开来,不要用棉球吸滤,以防被膜压破。叶绿体悬浮时要浓点,含叶绿素２ｍg、ml-1以上,这样有利于保持活性。 6、２000g 1min; 7、沉淀再用悬浮液悬浮;(悬浮液同5,可以不做) 8、用Ｐｅrcol试剂进行梯度离心(将3ml含有80％Peｒcｏl(原液按100％算)铺在１0mｌ离心管下层,再把３ｍl 40％Perｃol铺在离心管中层,然后将1mｌ叶绿体悬浮液轻轻铺在离心管上层)１500ｇ2-3mｉn(用
功能性食品行业行动计划
功能性食品行业行动计划 行业发展实施规划 功能性食品的起源可追溯到中国，因为中国人利用野菜提供营养、预防和治疗疾病的历史已有数千年之久。功能性食品的概念首先由日 本人于20世纪70年代提出，并于80年代传人欧洲。日本将功能性食 品定义为“具有与生物防御、生物节律调整、防治疾病和恢复健康等 有关的功能因素，经设计加工，对生物体有明显调整功能的食品”。1998年，欧洲成立了功能性食品科学协会。2009年，美国营养协会发 布了一份声明，将功能性食品描述为“作为消费者日常饮食的一部分，对健康具有潜在益处的食品，包括全食品和含有强化、富集或增强生 物活性成分的食品。 牢固树立创新、协调、绿色、开放、共享的发展理念，发挥区域 示范引领作用，加快产业领域体制机制创新，促进城市建设发展转型，实现产业发展进一步提升。 为了加快区域产业结构调整和优化升级，推进未来几年产业健康 快速发展，按照“领先发展、科学发展、又好又快发展”和“产业倍增”的战略部署，结合区域产业发展情况，制定本规划。 第一章指导思路
牢固树立创新、协调、绿色、开放、共享的发展理念，以产业发 展和应用为导向，明确目标任务，开展专项行动，实现产业稳增长、 调结构、转方式和可持续发展，大力推动区域产业发展应用。 第二章指导原则 1、坚持创新发展。加快自主创新，创新管理模式，发展新业态， 延伸产业链，提高产品附加值。 2、协同发展，实现互利共赢。加强区域产业集中谋划，统筹产业 协同发展。创新产业合作模式，打破市场壁垒，推动要素自由流动， 构建多层次、宽领域的产业融合发展机制，实现优势互补、互利共赢。 3、坚持融合发展。推进业态和模式创新，促进信息技术与产业深 度融合，强化产业与上下游产业跨界互动，加快产业跨越式发展。 4、因地制宜，科学发展。充分结合各区域经济社会发展水平、资 源条件，分地区、分类型制定科学合理的工作路线，指导推动产业现 代化发展。 5、组织引导，市场推动。坚持组织引导，以政策、规划、标准等 手段规范市场主体行为，综合运用价格、财税、金融等经济手段，发 挥市场配置资源的决定性作用，营造有利于产业发展的市场环境，实 现市场由被动向主动的转化。
功能性食品(全全)
第一章 功能性食品-----------被誉为21世纪的食品 功能性食品研究------国际食品科学与工程领域的前沿阵地 功能性食品开发------时代对传统食品的深层次要求 功能性食品开发的目的-----是要满足人类自身的健康需要 健康----指一个人在身体、心理和社会适应等各方面都处于 完满的状态,而不仅仅是无疾病或不虚弱。 Health---haeth（古代词）值得庆贺即安全完好状况。 一）健康的标志：（全世界公认的13方面） 1、生气勃勃富有进取心； 2、性格开朗、充满活力； 3、正常身高与体重 4、保持正常的体温、脉搏和呼吸（37℃；72次/min；婴儿45次/min、6岁25次/min、15-25岁18次/min、年纪稍大又有增加） 5、食欲旺盛； 6、明亮的眼睛和粉红的眼膜； 7、不易得病，对流行病有足够的耐受力； 8、正常的大小便； 9、淡红色舌头无厚的舌苔； 10、健康的牙龈和口腔粘膜； 11、光滑的皮肤、柔韧而富有弹性肤色健康； 12、光滑带光泽的头发； 13、指甲坚固而带微红色； 亚健康----是一种健康的透支状态，身体存在种种不适但无身体器质性病变状态。 疾病的起因：1、不正常的生长物； 2、组织的衰老与变性； 3、免疫变态反应与其它紊乱； 4、先天性和遗传疾病； 5、内分泌和代谢紊乱； 6、传染性疾病和寄生虫侵染； 7、物理因素损伤； 8、营养不良； 9、应激反应； 10、毒性物质； 一、功能食品的定义： 功能性食品（Functional Food）： 1987年，日本文部省在《食品功能的系统性解释与展开》最先使用该词。 1989年4月厚生省进一步明确定义为：对人体能充分显示身体的防御功能、调节生理节奏、预防疾病和促进康复等方面的工业化食品。 1990年11月又提出“特殊保健用途食品”（Food for Specified Health use）。 必须符合下面条件： ①无毒、无害，符合应有的营养要求。 ②其功能必须是明确的、具体的，而且经过科学验证是肯定的。同时，其功能不能取代人体正常的膳食摄入和对各类必需营养素的需要。
抗氧化剂的研究和应用
抗氧化剂的研究和应用 摘要：食品在加工和贮藏过程中，将会一系列化学生物变化，其中氧化反应尤为突出，它将造成油脂及富脂食品色、香、味与营养价值等方面的劣化。因此，防止食品的氧化一直是食品工业中的关键性问题。在食品抗氧化剂的发展中有数百计的天然活合成化合物进行过抗氧化功能和安全性评价，然而目前符合安全和抗氧化功能要求，主要有以下几个品种：BHA（丁基羟基茴香醚）、BHT（二丁基羟基甲苯）、PG（没食子酸炳酯）、TBHQ（叔丁基对苯二酚）、生育酚、抗坏血酸等，其中前五种为国际广泛使用，可满足大部分食品的需要。防止和减缓食品的氧化，添加食品抗氧化剂是一种简单，经济而又理想的方法。 关键词：抗氧化剂、油脂、酸败、复合使用 一、前言 抗氧化剂（oxidation inhibitor）是能减缓或防止氧化作用的物质。氧化是一种使电子自物质转移至氧化剂的化学反应，过程中可生成自由基，进而启动链反应、摧毁细胞。抗氧化剂则能去除自由基，终止连锁反应，氧化其本身、抑制其他氧化反应。食品抗氧化剂是能阻止或延缓食品氧化变质、提高食品稳定性和延长贮存期的食品添加剂。氧化不仅会使食品中的油脂变质，而且还会使食品退色、变色和破坏维生素等，从而降低食品的感官质量和营养价值，甚至产生有害物质，引起食物中毒。在酶和某些金属的催化作用下，食品中所含易于氧化的成分与空气中的氧反应，将发生反应生成一系列能引起食品酸败的物质，如醛、酮、醛酸、酮酸等。氧化可导致食品中的脂酸败，还会导致食品褪色、褐变、维生素受到破坏食品等，从而降低质量和营养价值，人或动物误食这类食品有时甚至发生中毒。油脂和富脂食品中加入适量的抗氧化剂，可有效抑制微生物的生长繁殖，从而有效防止油脂因空气中的氧化作用而引起的变质。 二、抗氧化剂的分类 1.脂溶性抗氧化剂
抗氧化活性测定方法的比较
抗氧化活性测定方法的比较 人体衰老和多种疾病均与自由基有关，寻找天然抗氧化剂具有重要意义。黄酮、多糖、多肽、酚类等生物活性成分均具有抗氧化活性，抗氧化活性的筛选方法可分为体外和体内2种测试体系。 体外：抗氧化活性可以用在特定条件下，样品对检测体系中自由基的清除能力、抗油脂过氧化能力及样品的还原能力、总抗氧化能力等来衡量和表征。常用的方法有羟基自由基（·OH）清除能力法、1,1-二苯基苦基苯肼（DPPH法）、2,2-联氮基-双-(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二氨盐（ABTS 法）、超氧阴离子自由基法（O2-·）、邻苯三酚自氧化法、β-胡萝卜素漂白法、硫代巴比妥酸法、铁离子还原能力测定（FRAP法）、总酚测定法、ORAC法等方法。体内：主要有DNA氧化损伤法、蛋白质氧化损伤法、线粒体氧化损伤法。 其中DPPH法和ABTS法操作较简单便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外分光光度测量值后计算其自由基清除率，缺点是不同物质具有组成和结构的差异，与DPPH·、ABTS+·的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断，且DPPH自由基会和其他自由基发生反应。邻苯三酚自氧化法缺点是检测波长、缓冲液的组成及ｐＨ值、邻苯三酚浓度等关键测定条件存在
着较大差异。β-胡萝卜素漂白法的缺点是β-胡萝卜素本身有抗氧化活性，对样品活性的测定结果有影响。FRAP法主要用于食品业，优点是简单易操作、可以重复，缺点是无法测定硫醇化合物的还原能力。ORAC法是国际上通用的评价食品氧化的标准方法，缺点是仪器成分较复杂，检测成本较高。 目前普遍使用的体外抗氧化活性指标一般都采用分光光度法，使用分光光度计测量各种颜色成分含量的变化。分光光度法操作较简单、便捷，不需要特殊的检测设备，只在需固定时间下记下其紫外-可见分光光度测量值后计算其活性大小，具有成本低、效率高、样品量少等优点。分光光度法缺点是会受到样本自身颜色和浑浊度的影响和限制，颜色深的样品测得的数据误差大，甚至得到错误的结果；不同物质组成和结构存在差异，与各种自由基的反应速率不同，反应到达平衡的时间不同，将反应时间固定在某一值时，可能对抗氧化剂的抗氧化性评价带来错误的判断。外界环境因素对实验结果也存在一定程度的影响，有些抗氧化活性实验在冬天低温时不易成功，测得的数据往往没有规律。 我觉得在测定样品的抗氧化活性时，各种方法都有自己的优缺点，要根据需测物质来决定用什么方法，比如DPPH 法的自由基选择性强，不和只有一个羟基的芳香酸、无羟基的类黄酮反应，这类物质需用其他方法测定。若对检测结果
功能性食品考试题[1]
功能性食品考试题 一简答题 1 功能性食品的定义？功能性食品在促进健康方面有哪些作用？ ?我国对保健食品的定义，是指具有特定功能的食品，适宜于特定人群食用，可调节机体的功能，又不以治疗为目的。增强免疫力、抗衰老、调节血脂、调节血糖、调节血压、改善胃肠道功能（促进消化吸收，调节肠道菌群，润肠通便，保护胃黏膜）、改善骨质疏松、促进排铅、抗突变、抗肿瘤、抗疲劳、提高应激能力、清咽润喉、保护化学性肝 损伤、减肥、美容、促进乳汁分泌、改善营养性贫血、改善睡眠、改 善性功能、提高学习记忆力、增进智力、促进生长发育、改善视力、耐缺氧作用、抗辐射等 2 什么是生理活性肽，生理活性肽的生理功能有哪些？ 它在人的生长发育，新陈代谢，疾病以及衰老，死亡的过程中起着关键作用。生理活性肽是人体中最重要的活性物质。正是因为它在体内分泌量的增多或减少，才使人类有了幼年，童年，成年，老年直到死亡的周期。生理活性肽的的生理功能如下： 1.调节体内的水分、电解质平衡； 2.为免疫系统制造对抗细菌和感染的抗体，提高免疫功能； 3.促进伤口愈合； 4.在体内制造酵素，有助于将食物转化为能量； 5.修复细胞，改善细胞代谢，防止细胞变性，能起到防癌的作用； 6.促进蛋白质、酶、酵素的合成与调控； 7.沟通细胞间、器官间信息的重要化学信使； 8.预防心脑血管疾病； 9.调节内分泌与神经系统； 10.改善消化系统、治疗慢性胃肠道疾病； 11.改善糖尿病、风湿、类风湿等疾病； 12.抗病毒感染、抗衰老，消除体内多余的自由基； 13.促进造血功能，治疗贫血，防止血小板聚集，能提高血红细胞的载氧能力。 14，直接对抗DNA病毒，对病毒细菌有靶向性。 3 膳食纤维的生理功能与缺点？ 1)膳食纤维的吸水溶胀性能有利于增加食糜的体积,刺激胃肠道的蠕动,并软化粪便,防止便秘,促进排便和增加便次,起到一种导泄的作用,减少粪便在肠道中的停滞时间及粪便中有害物质与肠道的接触,保持肠道清洁,从而减少和预防胃肠道疾病。 2)膳食纤维能够抑制胆固醇的吸收,预防高血脂症和高血压。
抗氧剂
抗氧剂是一类化学物质，当其在聚合物体系中仅少量存在时，就可延缓或抑制聚合物氧化过程的进行，从而阻止聚合物的老化并延长其使用寿命，又被称为"防老剂"。 对工程塑料加工来说，抗氧剂可以防止某些聚合物(如ABS等)加工过程中的热氧化降解，使其成型加工能顺利进行。抗氧剂的添加量-般只有0.1-0.5份。 理想抗氧剂应具备以下条件: ①应具有高的抗氧化能力; ②与树脂的相容性好，不析出; ③加工性能良好.在高聚物的加工温度下不挥发、不分解; ④耐抽出性好，不溶于水和油中; ⑤本身颜色最好为无色或浅色.以不污染制品; ⑥无毒或低毒; ⑦价格低廉。 事实上，任何一种抗氧剂都不能完全满足这些条件，因此，实际使用中常根据工程塑料的种类、用途和加工方法，利用各种助剂之长，配合使用，以生产协同效应。 广义上说，多数弱还原剂都是抗氧化剂，只是根据不同的工业用途选取合适的。有较高化学、物理稳定性的，或是低毒性的弱还原剂，都可以巧妙的运用于配方中作为抗氧化剂。例如:柠檬酸是有弱还原性的有机酸，我们可以将其运用于饮料配方中起着抗氧化剂的作用;食品摆放时间长了容易氧化变质，可以加入少量抗氧剂来延长它们的储存时间;塑料、合成纤维和橡胶等高分子材料容易发生热氧降解反应，加入抗氧剂可以保持高分子材料的优良性能，延长使用寿命…… 有机化合物的热氧化过程是一系列的自由基链式反应，在热、光或氧的作用下，有机分子的化学键发生断裂，生成活泼的自由基和氢过氧化物。氢过氧化物发生分解反应，也生成烃氧自由基和羟基自由基。这些自由基可以引发一系列的自由基链式反应，导致有机化合物的结构和性质发生根本变化。抗氧剂的作用是消除刚刚产生的自由基，或者促使氢过氧化物的分解，阻止链式反应的进行。能消除自由基的抗氧剂有芳香胺和受阻酚等化合物及其衍生物，称为主抗氧剂;能分解氢过氧化物的抗氧剂有含磷和含硫的有机化合物，称为辅助抗氧剂。 1、芳香胺类抗氧剂 芳香胺类抗氧剂，又称为橡胶防老剂，是生产数量最多的一类，这类抗氧剂价格低廉，抗氧效果显著，但由于使制品变色，限制了它们在浅色和白色制品方面的应用，主要用在塑料、合成纤维、乳胶、石油制品、食品、药物和化妆品中。重要的芳香胺类抗氧剂有:二苯胺、对苯二胺和二氢喹啉等化合物及其衍生物或聚合物，可用在天然橡胶、丁苯橡胶、氯丁橡胶和异戊橡胶等制品中。 2、受阻酚类抗氧剂 受阻酚类抗氧剂是一些具有空间阻碍的酚类化合物，它们的抗热氧化效果显著,不会污染制品,发展很快。这类抗氧剂的品种很多,重要的产品有:2，6-三级丁基-4-甲基苯酚、双(3，5-三级丁基-4-羟基苯基)硫醚、四〔β-(3，5-三级丁基-4-羟基苯基)丙酸〕季戊四醇酯等。这类抗氧剂主要用在塑料、合成纤维、乳胶、石油制品、食品、药物和化妆品中。(右图为受阻酚类抗氧剂的结构) 3、辅助抗氧剂 硫代二丙酸双酯是一类辅助抗氧剂，常与受阻酚类抗氧剂并用，效果显著，如:硫代二丙酸双酯，常与受阻酚类抗氧剂并用，效果显著，主要产品有:双十二碳醇酯、双十四碳醇酯和双十八碳醇酯。
抗氧化性方法
取0.2mL 甲醇，加入0.3 mL样品溶液（浓度50-800ug/mL ,甲醇配制），混匀，加入2.5mL 75uM DPPH（甲醇溶解）溶液，室温放置30min ,于517nm处测吸光值。 清除率=[A0-（A-A b）/A0]×100% A0：不加入样品，DPPH吸光值（对照） A：样品和DPPH吸光值 A b：样品，不加DPPH吸光值 2 O2-· PMS吩嗪硫酸甲酯 NADH 烟酰胺腺嘌呤二核苷酸 NBT氯化硝基四氮唑蓝 0.1mL 样品溶液，加入1mL 16 mM Tris-HCl (pH 8.0)---78uM NADH, 1mL 16 mM Tris-HCl (pH 8.0)- --10uM PMS ，1mL 16 mM Tris-HCl (pH 8.0)- --50uM NBT, 25min保温5 min后于560 nm 处吸 光值。清除率=（1-A 样品/A 对照 ）×100%。 3 邻苯三酚自氧化 0.1mL 样品溶液，加入2.8mL 0.05M Tris-HCl (pH 8.0)---1mM EDTA,加入0.2mL 6mM 邻苯三酚。室温迅速振摇，于325nm处每30s 测吸光值至4min。 清除率=（1-样品斜率/对照斜率）×100% 4 FRAP reagent： 10体积300 mmol/L pH3.6醋酸缓冲液,1体积10 mmol/L TPTZ---40 mmol/L HCl 溶液，1体积20mmol/L FeCl3. 1.5mL 新配制FRAP reagent加热至37℃,于593 nm处测空白吸光值。然后加入50uL 样品溶液和150uL去离子水。8min后测吸光值。 FRAP值=A样品-A空白 2.1 清除羟基自由基（HPLC法） 2.1.1色谱条件 色谱柱：Angilent HC-C18柱（(4.6×250mm，5um); 流动相：甲醇：0.1% H3PO4=30:70;流速： 1ml/min;柱温：35℃；紫外检测波长：254nm;进样量：20ul。
白藜芦醇抗氧化功效
抗氧化产品是目前女性群体保养过程中最不可缺少的东西，抗氧化不仅存在于护肤品中，也存在于口服的保养品中。 人体在进入25岁以后就将面临着衰老的过程，其实这个过程也是人体被氧化的过程，在这个过程中我们人体代谢所需的氧气，有一部分开始转化成带负电的活性氧（O2），这种形态的氧就叫做自由基，自由基会破坏身体的组织，造成身体各项组织老化，以至慢慢丧失功能，这就是人体逐渐老化的过程。 随着生活水平的提高，爱美成了一个潮流，当你面对镜子看着逐渐衰老的肌肤时，你是不是会产生恐惧；当美丽的容颜随着岁月的侵蚀而不在时，是不是会感到绝望。正是由于人们对衰老的一种恐惧造就了抗氧化产品的应运而生那么，现在什么产品具有抗氧化性呢？在所有的护肤品种，白藜芦醇有着很重要的位置。 白藜芦醇（Resveratrol）是多酚类抗氧化素的一种，主要存在于葡萄、莓果、花生等果实中，是植物所分泌的抗病毒素，用于对抗外伤、细菌、感染、紫外线等外界压力，可说
是植物的守护神。特别的是，白藜芦醇之所以闻名于世，是因为1990年代的一则FrenchParadox（法国悖论）探讨，当时认为嗜吃高脂食物的法国人之所以不容易罹患心血管疾病，是因为常喝的红酒中含有白藜芦醇。 “法国悖论”（French Paradox）发现，尽管法国人有高脂、高卡路里的饮食习惯，奇怪的是他们的心血管类疾病的发病率却低于其他欧美国家，这让人们推测法国人经常饮用红酒的习惯可以降低心血管疾病的风险。而红酒富含的白藜芦醇也引起了科学界的强烈兴趣，有关其抗氧化、抗发炎和抗癌等特性的研究也是接踵而至。 皮肤老化的最大威胁就是自由基的形成，自由基可以进攻和损伤皮肤细胞结构，使真皮层的胶原纤维和弹力纤维突变或断裂，皮肤组织逐渐退化萎缩，从而引起皮肤干燥、松弛、皱纹、皮脂腺新陈代谢功能衰退等问题。而紫外线照射是增加氧自由基、加速皮肤老化、皮肤细胞凋亡的首要外部原因。强烈的紫外线照射导致雀斑和黄褐斑，严重的甚至会导致皮肤癌。 所以，白藜芦醇针对以下皮肤问题，有着很好的改善作用。 皮肤危机：长期面对电脑辐射，皮肤粗糙，容易干燥、长痘、肤色发黄等问题。 敏感肤质：容易出现暗疮、粉刺、黄褐斑、黑斑等问题。
功能性食品调查报告
现如今，我们已迈入一个高度发达的时代。随着经济的不断发展，人们的生活水平也在逐渐提高着。而物质生活充裕了以后，健康自然便成了大家最为关注的问题。而健康长远意义上讲并不是说你病了然后予以治疗，而是从平时就开始防病，可是通过药物来达到这一目的在现代人看来显然是极其不可行的，常言说“是药三分毒”嘛。我们最容易实施和控制的，我想应该莫过于食疗了。只有平时注意营养的科学合理搭配，才能吃出健康、吃出漂亮、吃出长寿。食品业和医学在不断进步着，于是功能性食品便应运而生了。 功能性食品誉为“21世纪的食品”，是当今世界研究的热点。为了解人们对功能性食品的了解程度，并在社会上普及功能性食品，我精心设计了一份调查问卷，随机调查各种年龄层次、各消费水平的消费者，收到了较为满意的结果。 一、社会调查 1、调查结果及分析 通过对随机人群的调查发现，约15%的人根本就不知道什么是功能性食品，更不清楚功能性食品有什么功效；约62%的人对功能性食品不是很了解，对其功效不认可，觉得效果不明显，同时对功能性食品的鉴别也缺乏相应的知识；只有23%的人了解功能性食品，了解其功效，并且知晓很多种类的功能性食品和国内外大品牌。以下为部分被调查者的问卷分析结果。 大学生：对于功能性食品不了解；其效果不明显，开始有作用，后来就没感觉；对于功能性食品不信赖；从广告等媒体知道某些品牌的功能性食品。 20-30岁的男士：多少了解一点，不是很明白；其功能应是抗疲劳；用过脑白金，效果不错；价格有点偏高，应有适当下调，仍需改进，要适合长期服用。 30-40岁的阿姨：不太了解，也不用；孩子用过清华同方的产品，家人用过海藻类的产品，使用过对肠胃有帮助的产品；看过产品说明书和广告，但是仍然觉得对功能性食品的常识不了解。 30岁左右的知识分子：了解一点；功能性食品应补充微量元素，力量蛋白元素，蛋白质；用过如安利、完美等产品；觉得是无聊的消费；鉴定要有国家体系认证、说明、用法。 六七十岁的老人：了解；认为功能性食品纯属吵作；用过如深海鱼油、螺旋藻、天然维E；不看宣传；广告要务实，可信度要提高。不能看广告，要看疗效。 目前人们知晓的市场上销售的品牌主要有：钙尔奇、虫草乌鸡精、脑轻松、血尔、血乐、太太口服液、氨基酸口服液、口服免疫球蛋白、成长快乐等。 同时，被调查者普遍认为，目前社会上对于功能性食品普遍常识的介绍几乎没有，消费者对起其处于零概念，也导致了虚假广告活动猖獗。中国的功能性食品仍处在不成熟的阶段，存在标识不规范，没有统一的标准，功能性食品市场也缺乏完善的管理制度和规则，虚假、夸大广告问题严重，造成消费群体视听混乱，判断失误等。另外，保健食品的价格普遍偏高，对于其普及有很重要的影响。 2、调查建议 （1）尽快出台完善的法律法规，完善和规范功能性食品生产企业和产品市场。 （2）普及功能性食品的普遍常识，让消费者增强自身保护能力。 （3）提高功能性食品成分的稳定性，提高其功效，争取消费者的信任。 （4）降低其成本，使价格降低，让越来越多的人体会到功能性食品的优势。 二、功能性食品
添加剂ppt题目带答案)
1 生物膨松剂较化学膨松剂最大优点是：B A发面快B安全性高 C膨松度高 D风味好 2可作为快速膨松剂调速的成分是：A A 酒石酸氢钠 B明矾 C葡萄糖酸内酯D磷酸氢钙 1 以下哪种不是磷酸盐类水分保持剂的使用范围? A A蛋白凝固剂BPh调节剂C清花机D金属螯合剂 2以下哪个添加剂一般不用于肉制品加工？A A亚硫酸盐B磷酸盐C名叫D亚硝酸盐 1 对酸、碱、盐耐受性最好的增稠剂是？C A 海藻酸钠B卡拉胶C黄原胶DCMC 2一种应用最广泛的合成增稠剂，一般不作凝固剂使用的是？D A 海藻酸钠B卡拉胶C黄原胶DCMC 3常用于仿生食品的增稠剂是：A A 海藻酸钠B卡拉胶C黄原胶DCMC 4下面哪种增稠剂可形成热不可逆凝固剂：A A 海藻酸钠B卡拉胶C琼脂D明胶 1下面关于尼泊金酯类防腐剂的说法哪个不正确？B A广谱抗菌剂对大多数细菌、霉菌和酵母菌都有作用。 B同一种腐败菌，乙酯的防腐效果比丙酯好 C在中性和碱性食品中也有较好的防腐效果 D溶解性、抗菌效果及毒性大小都与酯基团的大小有关 2为什么在果汁类饮料中常常在使用山梨酸（钾）复合使用二氧化硫？ 防止及抗氧化作用，防止由于氧化、霉菌、细菌所引起的变质 1以下甜味剂甜度最强的是：D A阿斯巴甜B甜蜜素C糖精钠D纽甜 2下面关于糖醇的说法哪个不正确？D A大多数糖醇的甜度和热值比蔗糖低 B我表示看不到呢C大多数有吸湿性 D和蔗糖一样会影响血糖水平，不适合糖尿病人食用。 1下列哪个不是合成色素的优点？B A着色力强B色泽自然C稳定性好D无臭味 2下列哪个不是我国允许使用的合成色素？D A胭脂红B柠檬黄C靛蓝D亮绿3下面哪个着色剂不是水溶性？C A胭脂红B柠檬黄C焦糖色素D被人挡住了 1下面哪种食品不适合采用酚型抗氧化防止氧化？C A食用油脂B花生C果汁D速食面 2下面哪种物质不属于自由基终止剂？D A BHA B PG C TBHQ D DLTP 1下面哪种物质适合作果汁的抗氧化剂？C ABHA BTBHQ C抗坏血酸 D DLTP 2下面哪种抗氧化剂主要通过螯合金属离子起作用？A A植酸B TBHQ C异抗坏血酸 D维生素e 3下面哪种物质一般不作为酚型抗氧化剂的增效剂？D A抗坏血酸 B柠檬酸 C磷酸D 亚硫酸 1在中性食品中防腐效果仍较好的防腐剂是：B A苯甲酸钠B尼泊金酯C山梨酸钾D乳酸链球菌素 2根据ADI值，下列哪种防腐剂的安全性最高D A苯甲酸钠B尼泊金酯C山梨酸钾D乳酸链球菌素 1根据GB2760-2011，下面哪种食品不能加入亚硫酸盐类漂白剂？A A面粉BC果酱D果酒 2在饼干中添加亚硫酸盐的主要作用是？A A降低面筋强度，提高其脆性B漂白作用C增加面筋强度，增加体积D防褐变 3下面关于亚硫酸盐类漂白作用的说法哪个不正确？C A它们都是通过二氧化硫起作用的 B他们具有漂白、抗氧化、防腐多种功能 C它们主要用于动物性食品中 1下面什么物质不属于增味剂？A A延胡索酸B丙氨酸C琥珀酸二钠D5，-x苷酸二钠 2下面关于调味剂的说法不正确的是？D A IMP是呈鲜鱼味，MSG呈肉味鲜味，GMP呈香菇鲜味 B味精和呈味核苷酸类具有很强的鲜味协同作用 D呈味核苷酸去除分子中的磷酸基团仍具有很强的鲜味。 C看不见
抗氧化功能评价方法
附件1： 抗氧化功能评价方法 试验项目、试验原则及结果判定 Items, Principles and Result Assessment 1 试验项目 1.1 动物实验 1.1.1 体重 1.1.2 脂质氧化产物：丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素（8-Isoprostane） 1.1.3 蛋白质氧化产物：蛋白质羰基 1.1.4 抗氧化酶：超氧化物歧化酶或谷胱甘肽过氧化物酶 1.1.5 抗氧化物质：还原性谷胱甘肽 1.2 人体试食试验 1.2.1 脂质氧化产物：丙二醛或血清8-表氢氧异前列腺素（8-Isoprostane） 1.2.2 超氧化物歧化酶 1.2.3 谷胱甘肽过氧化物酶 2 试验原则 2.1 动物实验和人体试食试验所列的指标均为必测项目。 2.2 脂质氧化产物指标中丙二醛和血清8-表氢氧异前列腺素任选其一进行指标测定，动物实验抗氧化酶指标中超氧化物歧化酶和谷胱甘肽过氧化物酶任选其一进行指标测定。 2.3 氧化损伤模型动物和老龄动物任选其一进行生化指标测定。 2.4 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。 3 结果判定 3.1 动物实验：脂质氧化产物、蛋白质氧化产物、抗氧化酶、抗氧化物质四项指标中三项阳性，可判定该受试样品抗氧化功能动物实验结果阳性。 3.2 人体试食试验：脂质氧化产物、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽过氧化物酶三项指标中二项阳性，且对机体健康无影响，可判定该受试样品具有抗氧化功能的作用。
抗氧化功能检验方法 Method for the Assessment of Antioxidative Function 1 动物实验 1.1 实验动物 选用10月龄以上老龄大鼠或8月龄以上老龄小鼠，也可用氧化损伤模型鼠。单一性别，小鼠每组10－15只，大鼠8－12只。 1.2 剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组和一个溶剂对照组，以人体推荐量的10倍（小鼠）或5倍（大鼠）为其中的一个剂量组，另设两个剂量组，高剂量一般不超过30倍，必要时设阳性对照组、空白对照组。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。 1.3 实验方法 1.3.1 老龄动物 选用10月龄以上大鼠或8月龄以上小鼠，按血中MDA水平分组，随机分为1个溶剂对照组和3个受试样品剂量组。3个剂量组给予不同浓度受试样品，对照组给予同体积溶剂，实验结束时处死动物测脂质氧化产物含量、蛋白质羰基含量、还原性谷胱甘肽含量、抗氧化酶活力。 1.3.2 D－半乳糖氧化损伤模型 1.3. 2.1原理 D-半乳糖供给过量，超常产生活性氧，打破了受控于遗传模式的活性氧产生与消除的平衡状态，引起过氧化效应。 1.3. 2.2造模方法 选25-30g健康成年小鼠，除空白对照组外，其余动物用D-半乳糖40mg－1.2g/kg BW 颈背部皮下注射或腹腔注射造模，注射量为0.1mL/10g，每日1次，连续造模6周，取血测MDA，按MDA水平分组。随机分为1个模型对照组和3个受试样品剂量组，3个剂量组经口给予不同浓度受试样品，模型对照组给予同体积溶剂，在给受试样品的同时，模型对照组和各剂量组继续给予相同剂量D-半乳糖颈背部皮下或腹腔注射，实验结束处死动物测脂质氧化产物含量、蛋白质羰基含量、还原性谷胱甘肽含量、抗氧化酶活力。 1.3.3 乙醇氧化损伤模型 1.3.3.1原理
抗氧化剂抗氧化活性的测定方法
1.抗氧化剂是指在低浓度下能有效延缓或阻止底物氧化的物质。被氧化的底物包括蛋白质、脂质、糖和DNA。 2.初始型抗氧化剂(AH)可通过与脂质自由基L.、过氧自由基LOO.或烷氧自由基LO.反应抑制脂质氧化链反应。 L.+ AH--- LH + A. LOO.+ AH--- LOOH + A. LO.+ AH--- LOH + A. 抗氧化剂自由基A.也能与过氧自由基、烷氧自由基反应从而终止脂质氧化反应。 LOO.+ A.---LOOA LO.+ A.---LOA 次级型抗氧化剂可通过各种机理延缓脂质氧化,如螯合过渡金属、给初始型抗氧化剂补充氢、清除氧以及使活性物质失活等。 抗氧化剂的活性分为在生物体外(如食品中)的活性和在生物体内的活性。本文综述了体外测定抗氧化剂抗氧化活性的方法,不包括在生物体中测定生物活性的方法。 3.评价或表征抗氧化活性的方法为了说明在特定条件下被测物抑制底物氧化的效力或清除自由基的能力 实际测定时至少要说明在测试条件下被测物是抗氧化剂还是促氧化剂;在指定浓度下比较不同测试材料(如被测物与标准抗氧化剂或添加有被测物的测试体系与空白体系)对底物的作用。 评价或表征抗氧化活性的方法有: (1)在指定的时间测量氧化产物或官能团的浓度或吸光度值;( 2)测量反应的速率;
( 3)测量诱导期(延滞期)或氧化达到一定程度所需的时间;( 4)测量速度的积分(即动力学曲线下的面积) ; ( 5)测量被测物产生与标准抗氧化剂相当作用的浓度。4.参数 4.1诱导期( induction period) 诱导期tIND(也叫延滞期, lag period)常定义为化学反应的速度。诱导期是一个相当不确定的值,受检测方法、使用仪器的灵敏性以及一些其他因素的影响。对于脂质氧化,诱导期通常是指链增长阶段动力学曲线的切线和时间轴的交点。 4.2抑制率( percentag e of inhibition)和IC50 抑制率和IC50 (抗氧化剂提供50%抑制作用时的浓度,也可用EC50表示的)常用来表征抗氧化能力。它们不仅与被测抗氧化剂的反应性能和氧化的底物有关,而且受其他因素的影响,如脂质氧化链反应的长度和抑制速率等。此外,用IC50表征抗氧化剂 的活性与比较活性的时间点有关。只有在其他参数相同的情况下,在某一研究中测得的抑制率和IC50才可以与另一研究中测得的值进行直接比较。TEC50是指抗氧化剂提供50%抑制作用所需的时间,也常用来表征抗氧化活性 5.对测定方法的要求 测定抗氧化剂抗氧化活性的方法应满足如下要 求: ( 1)能说明测试体系中发生的反应,并能用明确的动力学图解描述;( 2)测试要有再现性; ( 3)测试效率要足够高; ( 4)方法要相对简单; ( 5)能连续检测; ( 6)应使用与体内或食品有关的活性自由基;
白藜芦醇抗氧化作用在神经保护中的研究进展_李燕玲
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