如何选择酶标仪
近年来,随着多功能酶标仪在国内各高校实验室逐渐推广开来,多功能酶标仪品牌和型号也逐渐多了起来,乱花渐欲迷人眼。除了三大传统优势品牌PE、MD和TECAN,还出现了众多后来者插足此市场,如收购了芬兰雷勃的Thermo、从发光起家的Berthold、针对药筛领域的BMG以及新兴的BioTek等品牌。各品牌都有各自的一个甚至多个系列产品线,特性各不相同,选购时各种技术参数、技术指标令人眼花缭乱
本文尝试从用户实际使用的角度,探讨应该如何看待花样繁多的参数特性,希望能帮助大家找到真正合适自己的多功能酶标仪。
一、滤片Vs光栅
多功能酶标仪的分类方法众多,但最简单的莫过于用他们的滤光方式来作分界线。一般来说,可以分为滤光片型和光栅型两大类。当然也有一些型号,例如Synergy4和EnVision 等,一台机器里面同时装上了滤光片和光栅。但是滤片和光栅并不能同时完成同一个检测,还是想用光栅的时候用光栅,该用滤片的时候用滤片;还有一些实验非用其中一个不可,另一模块实现不了的。所以这类仪器本质上还只是把滤片和光栅放在了一起,并没有使两者糅合而产生新的技术突破。
总体来说,滤片技术由于发展已久,配合二向色镜(其实也就是另一模式的滤光反光滤镜)等光路系统,可以实现大部分实验的需要。目前常规多功能酶标仪中最高的检测灵敏度就是用滤光片型做出来的,例如TECAN Infinite F500的荧光检测的灵敏度可以达到0.04 fmol/孔(荧光素,384孔/80ul)。
但是滤光片型仪器由于受限于滤片的波长和数量限制,不可能满足日益增加的实验类型的检测需要,而且有时需要对物质的吸收、激发和发射光谱进行研究,所以后来就诞生了光栅型的仪器。
最先推出光栅的是MD公司,其光栅习惯上称为单光栅。由于光纯度的不足,在光栅的后面又加入了一组带阻滤片,再把杂光过滤一遍,达到了5×10-4的杂光率,基本与纯粹的滤光片系统一致。后来TECAN又发展出了双光栅技术,通过两次光栅滤光,杂光率降到了10-6。后来,Thermo、BioTek和PE的部分新款仪器等都使用了类似双光栅技术。由于激发和发射各用了一组双光栅,此类机器又被称为四光栅型多功能酶标仪。并且很多用户反应PE的多功能酶标仪特别好用,不过就是价格有点贵,不过货有所值。
光栅型酶标仪的推陈出新,使得用户在波长选择上不再受限,而且在杂光率、带宽控制等性能上还超越了滤光片系统。例如,TECAN公司在2008年底推出使用了第三代四光栅系统的M1000酶标仪,杂光率降到了2×10-7的新低,还实现了带宽2.5~20nm连续可调。这些都是目前滤光片型酶标仪所不能或者较难实现的。
二、杂光率&波长准确性
光栅型滤光系统俨然已经成为了目前通用性多功能酶标仪的主流,多家厂家共同努力,已经把光栅技术推到了历史新高。在光栅的众多技术参数之中,最关键的无疑就是光栅的杂光率和波长选择的准确性了。
杂光率指得就是光源通过光栅后,得到的光线中,“不需要”的波长的光占所标称波长的光的比例,表征了滤光的纯度。由于光线干涉、衍射等的复杂性,无论使用滤光片还是光栅,杂光都是不可避免的。各种滤光技术的本质就是要想办法把杂光尽可能地去掉。一般来说,滤光片型的杂光率在10-4~10-5之间,光栅型的可以做到10-6~10-7。由于此类杂光是非特异的,而且会直接进入最后的检测器,所以有多少的杂光就会引入多少的随机误差。在荧光等检测过程中,由于检测器存在放大效应,杂光率的干扰也会被指数级放大。因此,杂光率就是一个滤光系统的首要性能指标。
光栅的另一个重要指标就是波长选择的准确性。因为很多检测是依赖于物质在某个波长的特征图谱。就像DNA/RNA的OD260浓度测定,实际检测波长偏离260nm几个nm以上的话,OD值与最终浓度之间的数学关系就会发生改变。因此,一组性能优良的光栅系统,他的波长选择准确性应该是在±0.5~1nm之间。波长偏离过大有时就会影响到最终结果的准确性。
这两个可谓是光栅甚至滤光片滤光系统最关键的技术参数,直接影响到的是得到数据是否是真正所要测量的结果,是实验结果可靠性的最基本要求。
三、认证>参数
在保证检测可靠的基础上,不同仪器的下一个差异就体现在检测的灵敏度上面,这时人们关心的就是仪器能够检测到多弱的信号。
灵敏度涉及了整个光路系统的设计和选料,很难说某一个部件会起决定性作用。但是有一点,在各种单功能检测项目中,光吸收检测用非放大型的光电二极管、荧光检测用光电倍增管、发光检测用专门设计的单光子计数光电倍增管,这三种不同的检测器是各自检测领域的优先选择。
各单项检测的最优结果都是用相应检测器完成的。当然也有的仪器出于成本等考虑,用一个检测器兼容多种检测模式,这在一定程度上也能完成实验需求,但是在性能上也会有所牺牲折中,无法实现各项检测都达到最优化。
关于灵敏度的定义和检测标准,每个厂家都有各自的描述,都会说自己是怎样怎样好,很难有一个直观的客观比较。因此,某些试剂厂家就站了出来,对某些仪器的检测性能提供一个第三方的认证。
比较常见的是发光检测领域里面的Promega公司DLReady认证,荧光检测领域的Invitrogen公司的LanthaScreen系列认证、Cisbio公司的HTRF认证、BellBrook实验室的Transcreener认证等等。这些认证主要是针对公司提供的某一类型的要求较高的试剂盒,涵盖了对检测仪器的各种性能要求,包括:检测方法是否能用,灵敏度、线性范围、孔间干扰
等是否满足要求等等。
如果需要做相关的实验,例如做Luciferase发光检测的就看看仪器是否有DLReady认证、做TR-FRET的就看看HTRF认证、做FP就看看Transcreener认证,如果机器拥有相关的认证,就可以说明该机器在一定程度上能够较好地满足类似检测的各种需求,远比单单比较一个灵敏度参数更能说明问题。因为一个实验能否做好并不是单单一个灵敏度就能表征的。
需要特别注意的是,LanthaScreen是一个系列的认证,涵盖了FI、FRET、TRF、FP等多个子项目,不同仪器所通过的子项目是不一样的,需要上Invitrogen网站仔细查询核对。
光栅型的仪器由于新技术近几年才逐渐兴起,受限于技术研发和仪器成本,同一个价格范围内的灵敏度等指标会略差于发展成熟的滤光片机器。所以,在中档多功能酶标仪领域,拿到了各种认证的光栅型仪器并不多见。而作为新一代光栅型酶标仪的代表作,TECAN
M1000已经拿到了全部上述四种认证,而且在灵敏度等单项性能上也已经超越了不少的中高端滤片型酶标仪。
这说明了光栅型酶标仪的研发又进入了一个新的高度,除了在灵活性上取得了无可替代的作用外,还在检测灵敏度等方面也逐渐替代传统的滤光片型酶标仪。光栅型是科研领域多功能酶标仪的未来主要发展趋势;而滤光片型仪器也正在往单项性能更优的方面改进。
四、比色杯+微量检测
除了常规的6~384/1536孔酶标板检测之外,有些仪器还附带了比色杯、微量检测板等的兼容功能。无论是使用立式比色杯、卧式比色杯还是各种微量检测板,其目的都是给光程不固定的酶标板检测引入一个标准光程的概念。虽然酶标板检测也能通过光程校正等方式实现10mm光程OD值的换算,但这只是一个数学转换过程,检测误差累积较多,实际使用效果不佳。引入比色杯和微量检测板后,光吸收的检测光程就被固定在10mm或者0.5mm等的标准长度,OD值换算更加简单和准确。附带了此类检测功能的酶标仪,相当于除了本身的多功能酶标检测之外,还能替代部分分光光度计的功能,使其功能更加全面,仪器的性价比更高。
五、品牌与售后
不同品牌的仪器往往性能侧重点有所不用。例如,PE公司由于在试剂领域有较深底蕴,他们的酶标仪在配合使用他们的TRF系列检测试剂盒上作了多项优化,因此PE的酶标仪普遍来说在TRF领域会有较多的特色功能和相对较高的性能指标。而像TECAN,就把研发的重点放在了四光栅的研究方面,近年来相继推出了第二和第三代光栅型多功能酶标仪
(M200、M1000),成为四光栅酶标仪领域的领头羊。而像多功能酶标仪上加入比色杯、微量检测板等功能也是TECAN从用户角度考虑作出的技术创新,后来此类技术都成为了Thermo、BioTek等品牌纷纷仿效的对象。
最后,无论是一台多好的酶标仪,脱离了良好的售后服务体系也是难以正常运作的。今年,各家厂商都在中国国内设立了办事处甚至亚太区总部,有些产品还专门研发了中文版的
软件和说明书。这都说明了厂家对中国市场的重视。而正因为这种重视,无论是厂家直销还是选择代理分销,都会对国内的售后服务提出各自的要求和期望,最基本的就是普及仪器的应用工程师和维修工程师网络体系。
可以说,国内的各大城市里面,基本已经做到了部分品牌总有一个工程师在你身边。选购之前多与工程师交流,充分了解各家的性能特长和售后情况,反复对比,总能找到最适合自己需要的一款多功能酶标仪。
还是根据自己的实际需求来选择,进口的PE,MD,TECAN,等等,特别是PE走的是尖端路线,用过的用户反应都很好,MD、TECAN用户也很多,大家都可以选。
医疗废物处理记录表20年 收集日期废物种类数量或 重量 收集人处理日期处理方法处理人 月日月日焚烧深埋月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日 月日月日
检验科物品灭菌记录表 20年实验室: 灭菌物品及数量 日期废弃标本 数量(份)存放时间其它 灭菌方法及时间灭菌效果指示使用人清洁灭菌器清洁人备注 月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁
月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁 月日⑴灭菌⑵消毒⑴已清洁⑵未清洁 注1、在相应项目打‘√’2、其它:署名名称 HIV初筛实验室、免疫室设备消毒清洁维护记录 20年 日期消毒清洁对象消毒清洁维护时间操作者监督者 月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分月日⑴冰箱⑵洗板机⑶酶标仪⑷水浴箱⑸电脑桌面⑹生物安全柜⑺高压灭菌器⑻震荡器时分-时分
Multiskan Ascent酶标仪英文软件操作手册 1.安装 将随机附送的软件光盘插入光驱,确认默认的安装路径及选择正确的仪器类型(图1),(图2)Multiskan MK3可选择第三项Multiskan 选项,按提示输入单位名及任意的序列号(图3),一路按”next”进行安装。完成后在桌面上自动生成快捷图标。如图(1),(2),(3)所示。 图1
图2 图3 2.操作 软件安装完成后,双击软件图标,打开软件,首先设定滤光片,点击Setup,在下拉菜单中选中Filtes,即可设定滤光片,如果机器没有增加过其他的滤光片,那设定顺序是1.405 2.450 3.492 4.630 其他位置为空,与机器的
滤光片设定顺序要保持一致。如图3 图3 3设定程序 然后可根据实验的实际情况,按次序设置实验步骤,这些步骤包括“measure1(测量步骤),如想要振板功能,点击Steps,在下拉菜单中选中shake(振荡步骤),如图4。 控制进板 控制出板
图4 A.测量步骤设定见图5。如果实验要用单波长测量,Measuerment type 中选择Single (单波长),如是双波长检测则选择double (双波长),然后再Filter 位置选择需要的滤光片图5。 图 5 设定好滤光片后,即可以放酶标板开始测量。点击START (开始),仪器开始测量。图 6 选择测量模式,一般为continuous 选择测量类型,single(单波长)或double(双波长) 选择滤光片 设置测量前等待时间
图6 B.振荡步骤, 如果想增加振荡功能,点击Steps ,在下拉菜单中选中shake(振荡步骤)如图7 设定时,总振荡时间为0,振荡关闭时间也为0,只把开启时间设定为要震荡的时间即可。 图 7 设置总振荡时间 振荡开启时间 振荡关闭时间 设置振荡速度
PHOMO酶标仪的标准操作程序(SOP) 【目的】 规范仪器设备的操作程序,保证酶标仪的正常使用。 【适用范围】 本实验室酶联免疫试验的操作。 【操作人员】:本实验室实验人员。 【操作步骤】: 1.插上电源,打开酶标仪电源开关(按仪器后面的开关键),打开连接计算机的开关; 2.双击计算机上“安图仪器2.6”的图标,此时软件打开,先注册相应的软件信息,然后 选择相应的操作人员输入通行密码,进入软件的主操作界面; 3.单击“单项设置”,根据试剂说明编写对应的计算公式; 4.单击“布局”,根据试剂盒说明设置相应项目的板子布局; 5.单击“程序测量”,选择开始测量并选择相应的测量项目和使用的板子布局; 6.单击“设定本次测量样品编号”输入起始号码和样品数量。 7.单击“自动生成结果”然后点击确定。再点击开始按钮。 8.此时仪器处于测量状态,操作人员不能进行其它操作。 9.测量结束,测试结构显示在显示器上。此时点击“测量”按钮,选择保存测量数据项并 输入板子编号(如果有多块酶标板进行测量应加以区别如“-1”)试剂名称、生产日期以及试剂批号并点击确认按钮。 10.单击“测量”选择送检样品录入项,录入相应的标本信息并保存录入内容。 11.单击“查询及打印”按钮,选择样本管理或微板查询,选择需要打印的标本结果并打印。 12.关闭酶标仪电源。 【酶标仪的维护保养】 1.平常不用时,拔掉电源插头,盖好防尘罩。 2.使用完毕,一定要拿下测试完的反应板,千万不要将控制板留在载物台上。 3.若有液体溅到载物台或酶标仪外壁,应用湿抹布及时擦去。 4.每次使用完毕用湿抹布擦拭酶标仪,以保持其洁净。 【编制测试程序】 具体的程序编制方法请参阅autosoft PHOMO酶标仪操作手册。(下附操作流程表) 此文件只供参考,用户可根据自己的情况进行修改。 酶标仪测量、保存及打印步骤
酶标仪操作步骤精编 W O R D版 IBM system office room 【A0816H-A0912AAAHH-GX8Q8-GNTHHJ8】
酶标仪操作步骤: 一.打开酶标仪开关,仪器开始自检,; 二.打开电脑,点击桌面上的KCjunior软件,出现带This product is licensed to huashida gene 三.界面有5个选项-Read Plate, Open Results, New Protocol, Open Protocol, Modify Protocol; 5270201字幕的对话框,单击OK,进入软件界面; 四.如果初次检测,单击New Protocol建立方法;如果有建好的方法,单击Modify Protocol; 五.建立方法 1.单击New Protocol后进入Protocol Definition对话框,在General Information菜 单下输入Protocol Name, Protocol Description中输入对此方法的描述,不需要此项可空; 2.在Read Method菜单下设置读板方法(有End Point, Multiwavelength, Dynamtic 等); 3.在Primary Wavelength中输入主波长,如有参比波长(Reference Wavelenth)也输入; 4.在Template菜单下的Well Type Selection中,根据多孔板的位置选择所设定的 Blank和待测的Sample; 5.在Shake Mode处,还可以选择震动模式和强度;建好方法后,点击确定。
SPARK 10M酶标仪操作流程和使用注意 操作流程 1、先打开电脑电源,再打开仪器的电源(在仪器的后方黑色开关); 2、打开电脑桌面的SPARKCONTROL软件(软件会自动寻找机器联机); 3、按仪器上方右下角按钮弹出板架,将酶标板放在板架上,点击“plate in”图标将酶标板入机内; 4、在软件控制接面依次选择使用的酶标板型号,要测量的酶标孔,然后选择光吸收的具体波长(可 在230-1000 nm 之间选择),选择读数的次数(flashes, 一般选择5次),最后点击软件左上角start 键开始测量。(见下图) 5、在测量时软件会自动弹出Excel表格,测量完毕点击“SAVE”保存测量结果; 6、将板取出,关闭仪器电源。 操作环境要求 温度:15℃-30℃ 湿度:<90%(无冷凝) 通风:仪器后侧至少有10cm的通风空间 避光:避免直射阳光 酶标板注意事项 不推荐使用小于1/3最大体积的样品体积来测量(96孔100微升,384孔50微升) 确保酶标板平稳地放在酶标板架上(孔A1在左上角的位置) 不要强行将酶标板架推入到仪器中
结束测量后,先取出酶标板,再退出软件和关闭仪器 确保酶标板架不会被身体或物品碰撞 清洁 定期护养:每周用温和的去污剂清洁机身和酶标板托架 液体溅出时的处理:立刻用吸水布擦去溅出的液体, 用温和的去污剂清洁仪器表面(对于有生物毒性的污染,将5-10%的漂白粉溶于去离子水中,擦拭仪器) 消毒处理 仪器移出实验室或接受维修前必须进行彻底的消毒。 选择消毒液:70%乙醇溶液 消毒步骤:使用浸过消毒液的棉布擦拭仪器外表面和酶标板托架,清洁任何附件。
多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程Standard Operation of SpectraMax i3 部门Department 签名/日期Signature/Date 起草人:Prepared by 樊小川,Xiaochuan Fan QC 审核人:Reviewed by 黄思佳,Sijia Huang QC 审核人:Reviewed by 褚夫兰,Fulan Chu QA 批准人:Approved by 张伯彦,Boyan Zhang 质量负责人 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序,规范SpectraMax i3 多功能酶标仪检测时的操作。 2 适用范围
本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪:指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧光强度(FL)、时间分辨荧光(TRF)、化学发光(Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护,出现故障时负责联系厂家维修,保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行,保证仪器正常使用,每次用完后填写仪器使用 记录,且使用后及时清理台面,保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后,按仪器背面的按钮可以直接启动仪器,经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下,保持24小时开机,不要罩防尘罩以保持透气,隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标,打开SoftMax Pro 软件,出现"Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。 6.2.2 连接仪器 点击‘Choose a diffecient instrument’,打开‘Instrument Connection’对话框,在“Availible Instruments”菜单中选择仪器连接线与电脑所接的串口号(COM)。 选择所购买的酶标仪型号SpectraMax i3或添加模块卡盒型号。最后点击“OK”键连接。 6.2.3 仪器检测参数设定 点击图标后出现“Settings”对话框,对话框最上方出现Read Mode(读板模式)和Read Type(读板类型)两个选项,读板模式有ABS(光吸收)、FL(荧光强度)、LUM(化学发光)和TRF(时间分辨荧光),读板类型有终点检测(Endpoint)、动力学(Kinetic)、单孔扫描(Well Scan)和光谱扫描(Spectrum)四种。使用者根据实验
酶标仪软件操作步骤 一、软件运行前得连接 酶标仪插上电源,与电脑连接好后,打开电脑与酶标仪开关,酶标仪至少稳定15min后开始读数,效果比较好。注意,当酶标仪处于poweron 得状态时,不要手动打开酶标板室与比色皿室得门,以免紫外辐射得伤害或者仪器得损伤。二、软件得运行 1、打开桌面快捷方式SkanItREfor MSS 2.4.2运行软件,出现L og on To SkanIt software得界面。 2、use name默认为“admin”,password为空 3、点OK进入SkanItsoftware 2.4.2界面,New session-新建任务程序,Open session-打开已有程序。 4、在界面上方得setting中选择Instrument,出现Instrument setting 得界面,在Instrument中选中Multiskan spectrum on Ⅰ,ThemoElectron。点击右侧得setup,在serialnumber中输入1500-850,然后点击OK。再点击Default instrument右边得connect,即可设定好连接。然后点击close关闭窗口。 三.New session操作 1.新建任务程序: →点击new session进入protocoloptions界面,在session nam e中输入新得程序名称 →点击next进入plate layout options界面,在select plate templat e中选择所需模板类型(一般96孔板选择usedefault,比色皿选择cuvette,其她得可以选择相应得类型) →输入plate layoutname(系统默认得与session name相同) →点击next进入Definition done界面,在select location中选择任务程序所要保存得目得文件夹(该界面可进行新建,重命名及删除文件夹操作) →点击finish完成新建,进入SkanItsoftware 2.4.2程序操作主界面(主要有三大块: platelayout用于模板区域选择,protocol用于程序编辑,results用于数据处理)。
ELISA操作流程 (一)、基本操作流程 方法一双抗体夹心法(用于检测未知抗原的) 1. 包被:用包被液将抗体稀释至蛋白质含量为0.5~20μg/ml,按100ul/孔加入酶标板,4℃包被过夜。 2. 洗板:次日弃去孔内液体,在纸巾上轻轻扣打以吸去残留液体,加入洗涤液(约280-300ul/孔),漂洗2-3次,每次3-5min; 3. 封闭:按200-250ul/孔加入封闭液,室温2-3小时或37℃1-2小时,也可4℃封闭过夜,然后弃去孔内封闭液; 4. 样品处理:用洗涤液或样品稀释液将待检样品(含未知抗原)稀释至所需浓度; 5. 标准液:用洗涤液或样品稀释液将标准液稀释至所需浓度(定性分析可省略本步骤); 6. 加样:按排列顺序依次加入50-100ul/孔稀释好的标准液、处理过的待检样品、阴性对照及阳性对照,室温或37℃孵育30-60min; 7. 洗板:同步骤2; 8. 加酶标抗体:酶标抗体的稀释按产品说明书,按50-100ul/孔加入新鲜配制的酶标抗体,室温或37℃孵育1小时; 9. 洗板:同步骤2; 10. 加底物液显色:按100-150ul/孔加入新配制的TMB底物溶液,室温避光反应15~30分钟。 11. 终止反应:于各反应孔中加入50ul的终止液。 12. 结果判定:可于白色背景上,直接用裸眼观察结果,反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可在酶标仪上于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处测OD值。检测时以空白对照孔调零后测各孔OD 值,若样品孔中的OD值大于阴性对照孔的2.1倍,即为阳性。 方法二间接法(用于检测未知抗体) 1. 包被:用包被缓冲液将已知抗原稀释至0.5~20μg/ml,按100ul/孔加入酶标板,4℃包被过夜,次日洗涤2-3次; 2. 洗板:次日弃去孔内液体,在纸巾上轻轻扣打以吸去残留液体,加入洗涤液(约280-300ul/孔),漂洗2-3次,每次3-5min; 3. 封闭:按200-250ul/孔加入封闭液,室温2-3小时或37℃1-2小时,也可4℃封闭过夜,然后弃去孔内封闭液; 4. 样品处理:用洗涤液或样品稀释液将待检样品稀释致所需浓度; 5. 标准液:用洗涤液或样品稀释液将标准液稀释至所需浓度(定性分析可省略本步骤); 6. 加样:按排列顺序依次加入50-100ul/孔稀释好的标准液、处理过的待检样品(含未知抗体),阴性对照及阳性对照,室温或37℃孵育30-60min; 7. 洗板:同步骤2; 8. 加酶标抗体:按50-100ul/孔加入新配制的酶标抗体(抗抗体),室温或37℃孵育1小时;酶标抗体的稀释按产品说明书; 9. 洗板:同步骤2;
Multiscan MK3酶标仪说明书 Multiscan MK3 装机手册 一.装机 1.打开包装箱,取出仪器,去掉泡沫架,塑料封套,干燥剂。将仪器后部白色外盖左右二个固定螺丝打开。 2.安装滤光片轮(注意:滤光片轮有齿缘朝向仪器后部)。 3.安装灯泡(注意:灯泡边缘突起部向上)。 4.关上机盖,将盖左右二个固定螺丝固定好,连接仪器电源接口和打印机接口,将仪器和打印机电源打开.注意勿动仪器后部的二排(共16针)针式按钮. 二.MULTISCAN MK3 技术性能 1.卓越的光学系统: 八通道光路检测系统,检测速度非常快,检测96孔酶标板仅需2秒准确性好(?2%或0.007Abs),结果更可靠. 测量范围宽:0-3.5Abs,线性范围大:0-2.5Abs. 2.可线性振板,振板速度/时间可选. 3.内部软件有四种测量程序模块: 基础酶联(包括简单的定性和定量),临界值(可输临界值公式),曲线定量(可作标准曲线),凝集检测(供选装). 4. 内部软件功能强大,人机对话,便于操作,机器内存可储存64个测试程序,可满足常规应用. 5.提供中文电脑软件,可满足临床检验科室打印综合报告和质控图 三.使用培训: (一)编制测量程序: 步骤:先进入测量程序模块(“转换+输入”)?设置“测量模式和测量参数”?设置“计算模式和计算参数”?储存所编程序?使用时再调出程序。 1.定性测量: 1).简单的定性测量(如固定单/双限值):可在“基础酶联”模式下设。 2).定性测量(需输入临界值公式):可在“临界值”模式下设定。 ?编程:按上述“步骤”(先进入测量程序模块?“测量模式和测量参数”?“计算模式和计算参数”)依次设定参数。 ?储存:先按“储存”,再设置程序号。 ?调出:先按调出,再输入程序号。(注意:在哪个程序块下储存的程序,调出时必须先进入该程序模块才能调出。
多功能酶标仪基本操作规程 一、可见与紫外光原始吸光值的直接测定方法 1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。 2、再打开电脑开关。(注意,一定要先开仪器,后开电脑,以免仪器连接出现问题。) 3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。 4、仪器自检后,酶标板托架自动伸出(注意仪器前部不要放置物品,以免档住托架的伸出)。将酶 标板按数字正确的方向(A1位于左上角)放在托架上。 5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标,酶标板将自动进入仪器中。(注意:千万不要用手 将酶标板推入仪器,造成仪器损坏)。 6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。 7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。 8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中,对板的类型进行选择。酶标的吸光度测定,一般情况 下选xxxxx xx Flat Transparent (x孔,平底,透明板)。(注意测定紫外吸收时要使用可以透过紫外光的透明板)如果板要加盖子,就要再选中Plate with cover。 9、在Measurements 栏内双击Absorbance ,出现Absorbance的对话框。 10、在Absorbance的对话框中: ⑴在Wavelength栏中Measurement项输入测定波长值;Reference项,在需要扣除背景波长时选中并 输入背景波长值。一般情况不选. ⑵在Multiple read per well栏中对于吸光值的测定可不选 ⑶在Read 栏中: Number of flashes 项一般选10;Settle time(使平静时间)项对于96或384孔 板一般选0;对于其他孔数的板可考虑输入适当的值;孔数越少的板,Settle time 设置时间要较长,以防止在测定过程中板移动距离大,对液面平稳的影响。 ⑷在Label栏中Name后输入你为此块板自定义的英文名;也可不设置。 11、在Part of plate 栏中,用鼠标左键拉框,选择要测定的样品孔(使待测定的样品孔变为黄色), (注意:待测孔只可横向或纵向连续选择,不可以被间断)。如果选择错误需要更改,不要做任何删除,只要再直接重新选择即可。点击本栏中的Detail 对所选的样品孔进行确认后,点击OK,(如果选孔有错误,选择Cancel 返回上页再重复以上操作。) 12、点击OK后,箭头变绿,点击绿色箭头,在Measurement 的workspace处输入(日、月、年- 自定义文件名wsp)再点击Start,仪器开始自动测定。 13、测定结束后,点击File 选择print,直接打印测定参数与结果,或在最上方Edit选择Copy to Excel, 然后打开下方出现的Excel表(显示为板式数据)并打印结果。 14、关机,退出当前界面,点击左下角Exit Megellan 回到主屏幕。关电脑,关仪器电源和插板电 源。 二、荧光值的直接测定方法 1、首先打开连接酶标仪的电插板上的全部开关。打开酶标仪主机背面电源线上端的开关。 2、再打开电脑开关。(注意,一定要先开仪器,后开电脑,以免仪器连接出现问题。) 3、在电脑主屏幕上选择[Magellan6]。 4、仪器自检后,酶标板托架自动伸出(注意仪器前部不要放置物品,以免档住托架的伸出)。将酶 标板按数字正确的方向(A1位于左上角)放在托架上。 5、点击仪器下部最右侧的[move plate in] 图标,酶标板将自动进入仪器中。(注意:千万不要用手 将酶标板推入仪器,造成仪器损坏)。 6、在屏幕上选Start measurement。点击绿色箭头。 7、在Select a File窗口左上角选Obtain Raw Date 然后点击绿色箭头。 8、在plate 栏中的plate definition 下拉条中,对板的类型进行选择。荧光酶标的测定,一般情况下 选xxxxx xx Flat black (x孔,平底,黑板。6孔板测定时没有黑板可选,可选择6孔,平底,透明板)。
细胞实验的基本操作 【细胞培养】 一、细胞的复苏: 非原代培养的细胞一般冻存于液氮之中,需要培养时要先从液氮中取出使 之复苏。细胞复苏的原则——快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快 速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细 胞形成再结晶,对细胞造成损害。 具体操作如下: 1、实验前准备: 1.1、将水浴锅预热至37℃,并将含10%FBS的培养液置于其中预热;。 1.2、用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。 1.3、在超净工作台中按次序摆放好消过毒的离心管、吸管、培养瓶等等。 2、取出冻存管及迅速解冻: 2.1、根据细胞冻存记录按标签找到所需细胞的编号。 2.2、从液氮罐中取出细胞盒,取出所需的细胞,同时核对管外的编号。 2.3、迅速将冻存管投入到已经预热的水浴锅中迅速解冻,并要不断的摇动,使 管中的液体迅速融化,约1-2min后冻存管内液体完全溶解,取出用酒精棉球擦 拭冻存管的外壁,再拿入超净台内。 3、平衡离心将细胞悬液吸到离心管中,1000~1500rpm离心3分钟; 4、制备细胞悬液吸去上清液,加入10 ml培养液,用吸管轻轻吹打均匀,使 细胞悬浮; 5、细胞计数细胞浓度以5×105/ml为宜。 6、培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液吸到培养瓶中,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内培养(略微拧松培养瓶盖),换液的时间由细胞情况而定。通常,除少数特别注明对DMSO 敏感的细胞外,绝大部分细胞株(包括悬浮性 细胞),在解冻之后,可直接放入含有10-15ml(5-10倍)新鲜培养基的培
养角瓶中,待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可,如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附的问题。 二、细胞的传代: 培养的细胞生长至一定密度之后,由于培养液中营养逐渐消耗、代谢物逐步积累(可见到培养液变黄),而且细胞的生长空间也受到限制,就会影响到细胞的继续生存。这时就需要分离出一部分细胞和更新培养液,这一过程就叫做传代。 1、贴壁细胞的传代 具体操作如下: 1.1、传代前准备: 1.1.1、预热培养用液:把装有培养液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。 1.1.2、用75%酒精擦拭双手和经过紫外线照射的超净工作台 1.1.3、正确摆放使用的器械:保证足够的操作空间,不仅便于操作而且可减少污染。 1.1.4、点燃酒精灯:注意火焰不能太小。 1.1.5、准备好将要使用的已灭菌的空培养瓶。 1.1.6、取出已经预热好的培养用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。 1.1.7、从培养箱内取出细胞,注意取出细胞时要旋紧瓶盖,用酒精棉球擦拭显微镜的台面,再在镜下观察 细胞,并做好记录。 1.1.8、细胞培养瓶经用75%酒精擦拭后,再放入超净台。 1.2、胰蛋白酶消化:
酶标仪使用方法 一、仪器准备 1.将MK3酶标仪后部的电源开关打开,仪器将显示自检,基础酶联,软件版本号。2.等待数秒后,荧屏显示“基础酶联,准备和时间”。表示仪器正常,处于等待状态。操作规程 1.工作人员心须详细阅读仪器操作使用说明书。 2.将被测样品板放入酶标盘中,同时打开与酶标仪相连的打印机开关。 3.按“测量模式”键:进入选择波长程序 荧屏显示:“基础酶联” “1.单波长检测” 按“↑”“↓”选择单波长.双波长检测. 4.按“输入”键:进入选择好的文件名状态。 若选择单波长检测, 荧屏显示:“1.单波长检测” “滤光片405” 再用数字键选择需要的波长. 若选择双波长检测, 荧屏显示:“2.双波长检测” “1.滤光片450” 再用数字键选择需要的第一检测波长.按”输入”键, 荧屏显示: “2双波长检测” “2.滤光片630” 再用数字键选择需要的第二检测波长.按”输入”键, 荧屏显示:“2双波长检测” “无试剂空白” 5.继续按”输入”键, 荧屏显示:“2双波长检测” “最终结果”(单波长无此步骤) 6.按”输入”键,返回到荧屏显示“基础酶联,准备和时间” 7.按”开始”键, 启动阅读功能,酶标仪对样品板开始进行测试。 8.读数完毕,被测孔子板复位,荧屏显示“正在传送数据”,等待数秒后,打印机开始打印测试结果。当打印完毕后,关闭打印机开关,荧屏回到主菜单状态。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。
二、计算机控制 1.将MK3酶标仪后部的电源开关打开,仪器将显示自检,基础酶联,软件版本号2.等待数秒后,荧屏显示“基础酶联,准备和时间”。表示仪器正常,处于等待状态。3.在lab-35计算机的桌面上打开“思桥检验科管理系统”,输入用户名“system”及密码“system”. 4.进入系统后,选择“酶标仪”菜单。在下拉框中选择“酶标项目设置” (1)在面板当中进行单,双波长的设置,点击“仪器通迅设置”。 (2)在“仪器通迅设置”面板上,默认为单波长的方式,如要选择双波长,勾选双波长的选框。 (3)在主滤光片及副滤光片上选择相应的所需波长大小。 (4)选择完成后,点击“确认”键,系统显示“设置成功”,按“确定”退回。(5)点击“退出”键,系统显示“酶标仪器设置成功”,按“确定”键返回到“酶标项目设置”的面板上。 (6)在“酶标仪”的下拉框中选择“酶标仪操作”,在此面板中完成读板,数据存储及打印的工作。 5. (1)点击“连机”,在状态栏显示“连机成功”,表明计算机已与酶标仪连接成功。(2)点击“启动”,在状态栏显示“计算机远程控制成功”,表明计算机已远程控制酶标仪。如未显示此项,则读板功能不能完成,数据传输异常。 (3)顺利完成上面两项后,继续点击“读板”键,启动酶标仪读板功能。数秒后,酶标仪开始读板,完成读板后,在“状态”栏显示“结果数据分离成功”,并在面板的样品栏显示读板后的数据。(在此“酶标仪操作”面板未关闭之前,可连续读板,如关闭面板需重复“连机”,“启动“) (4)点击“入库”键,系统显示“入库完毕”,按“确定”返回。此项完成了数据的存储。 (5)点出“计算“键,系统显示“计算完毕”, 按“确定”返回。此项完成后才可以打印。 (6)点出“打印”键,完成打印到此波长选择设置成功,点击“关闭”键,退出“酶标项目设置” (7)当打印完毕后,关闭打印机开关。此时将酶标仪右侧开关打至“O”即可。
酶标仪基本知识及其检测原理 酶标仪基本知识及其检测原理,文章简要介绍了酶标仪的原理和及应用。 光是电磁波,波长100nm-400nm称为紫外光,400nm-780nm 之间的光可被人眼观察到,大子780nm称为红外光。人们只所以能够看到色彩,是因为光照射到物体上被物体反射回来。绿色植物之所以是绿色,是因为植物吸收了光中的红色光谱。酶标仪测定的原理是在特定波长下,检测被测物的吸光值。 检测单位: 光通过被检测物,前后的能量差异即是被检测物吸收掉的能量,特定波长下,同一种被检测物的浓度与被吸收的能量成定量关系。 检测单位用OD值表示,OD是opticaldelnsity(光密度)的缩写,表示被检测物吸收掉的光密度,OD=10g(1/trans),其中trans为检测物的透光值。根据Bouger-amberT-beer法则,O D值与光强度成下述关系: E=OD=logⅠ0/Ⅰ其中E表被吸收的光密度,Ⅰ0为在检测物之前的光强度,Ⅰ为从被检测物出来的光强度。 OD值由下述公式计算: E=OD=C×D×E 其中:C为检测物的浓度;D为检测物的厚度;E为摩尔子。
在特定波长下测定每一种物质都有其特定的波长,在此波长下,此物质能够吸收最多的光能量。如果选择其它的波长段,就会造成检测结果的不准确。因此,在测定检测物时,我们选择特定的波长进行检测,称为测量波长。 但是每一种物质对光能量还存在一定的非特异性吸收,为了消除这种非特异性吸收,我们再选取一个参照波长,以消除这个不准确性。在参照波长下,检测物光的吸收最小。检测波长和参照波长的吸光值之差可以消除非特异性吸收。 酶标仪检测值计算 仪器中的检测器接收透过被检测物的光能量,转换成二进位数字信号,最大为4095.仪器定义没有光源下的透光值为0%,没有检测物的透光值为100%。则实际检测中,检测物的透光值均在0%-100%之间。 透光值的计算如下: T=(Meas-Min)/(Max-Min) 其中T为透光值,Meas为检测的二进位数值,Min为在0%的情况下检测的二进位数值,Max为在100%的情况下检测的二进位数值,举例如下: 酶标仪的中心定位 仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标
酶标仪操作步骤 集团标准化工作小组 #Q8QGGQT-GX8G08Q8-GNQGJ8-MHHGN#
酶标仪操作步骤: 一.打开酶标仪开关,仪器开始自检,; 二.打开电脑,点击桌面上的KCjunior软件,出现带This product is licensed to huashida gene 三.界面有5个选项-Read Plate, Open Results, New Protocol, Open Protocol, Modify Protocol; 5270201字幕的对话框,单击OK,进入软件界面; 四.如果初次检测,单击New Protocol建立方法;如果有建好的方法,单击Modify Protocol; 五.建立方法 1.单击New Protocol后进入Protocol Definition对话框,在General Information菜单下输入Protocol Name, Protocol Description中输入对此方法的描述,不需要此项可空; 2.在Read Method菜单下设置读板方法(有End Point, Multiwavelength, Dynamtic等); 3.在Primary Wavelength中输入主波长,如有参比波长(Reference Wavelenth)也输入; 4.在Template菜单下的Well Type Selection中,根据多孔板的位置选择所设定的Blank 和待测的Sample; 5.在Shake Mode处,还可以选择震动模式和强度;建好方法后,点击确定。 六.读取数据 将多孔板放入酶标仪,其缺角与托架上的对应;单击Read Plate,在Result ID中随便输入信息或缺省,在Plate Number中输入板号后,多孔板进入仪器开始读取数据。 七.数据输出待酶标仪读取完数据后,多孔板托架自动弹出,选择Results菜单下的Exoport Date,即将所测数据导入至Excel表格;保存所测数据,关闭KCjunior软件,
酶标仪操作步骤: 一.打开酶标仪开关,仪器开始自检,; 二.打开电脑,点击桌面上的KCjunior软件,出现带This product is licensed to huashida gene 三.界面有5个选项-Read Plate, Open Results, New Protocol, Open Protocol, Modify Protocol;5270201字幕的对话框,单击OK,进入软件界面; 四.如果初次检测,单击New Protocol建立方法;如果有建好的方法,单击Modify Protocol; 五.建立方法 1.单击New Protocol后进入Protocol Definition对话框,在General Information菜单下输入Protocol Name, Protocol Description中输入对此方法的描述,不需要此项可空; 2.在Read Method菜单下设置读板方法(有End Point, Multiwavelength, Dynamtic等); 3.在Primary Wavelength中输入主波长,如有参比波长(Reference Wavelenth)也输入; 4.在Template菜单下的Well Type Selection中,根据多孔板的位置选择所设定的Blank和待测的Sample; 5.在Shake Mode处,还可以选择震动模式和强度;建好方法后,点击确定。 六.读取数据 将多孔板放入酶标仪,其缺角与托架上的对应;单击Read Plate,在Result ID中随便输入信息或缺省,在Plate Number中输入板号后,多孔板进入仪器开始读取数据。 七.数据输出待酶标仪读取完数据后,多孔板托架自动弹出,选择Results菜单下的Exoport Date,即将所测数据导入至Excel表格;保存所测数据,关闭KCjunior软件,此时也可将建立的方法进行保存。八.关闭仪器
取下多孔板,轻按酶标仪开关上方的小按钮,托架滑入仪器,这时关闭仪器开关,最后关闭电脑及显示器开关。
Mk3酶标仪操作流程 1.打开仪器后部电源开关,等待自检。预热5分钟。 2.打开打印机开关。 3.接通仪器后部打印机转接头电源,确定指示灯亮。 4.先点“转换”键再点“输入”键,进入“程序模块”通过按“↑”“↓” 键选择“临界值”(定性)或者“曲线定量”(定量)。 5.点“输入”键确定,然后继续等待自检。 6.点“调出”键选择已编辑的程序,点“输入”键确定。 7.放入酶标板点“开始”键即可。 8.不用时,最好关闭电源,以延长酶标仪灯泡的使用寿命。 Mk3酶标仪定性程序编辑 9.打开仪器后部电源开关,等待自检。 10.先点“转换”键再点“输入”键,进入“程序模块”通过按“↑”“↓” 键选择“临界值”。 11.点“输入”键确定,然后继续等待自检。 酶标板设置: 12.点“测量模式”键后按“↑”“↓”键选择试剂所要求的检测方法(如; 单波长检测/双波长检测)点“输入”键确定。 13.通过点数字键输入试剂所要求的滤光片波长(如450)点“输入”键确定(酶标仪内共有四种滤光片可供选择:405、450、492、630,如不能满足使用需另外订购添加)。 14.按“↑”“↓”键选择“单孔空白”点“输入”键。 15.根据个人习惯点数字键设置空白孔的位置,再点“输入”键。 16.按“↑”“↓”键选择“每板都带空白”点“输入”键确定。 Cut-off(临界值)计算设置: 17.点“计算模式”键,按“↑”“↓”键选择“临界值”点“输入”键确定。18.再点“输入”键,然后按试剂cut-off值计算要求点数字键输入方程(如试剂说明书写“临界值=阴性对照孔OD均值X2.1”,则在屏幕上输入“N*2.1+0*P”),最后点“输入”键确定。注意:输入字母时先按“转换” 键然后在数字键上找相对应的字母输入。 19.按试剂要求输入阳性对照孔数目,点“输入”键确定。 20.按个人习惯按数字键设置阳性对照孔位置,点“输入”键确定。 21.按试剂要求输入阴性对照孔数目,点“输入”键确定。 22.按个人习惯按数字键设置阴性对照孔位置,点“输入”键确定。 23.再点“输入”跳过“灰色区域”。 24.根据试剂说明在“结果判断”中按“↑”“↓”键选择判断方向。(夹心法表面抗原等选择“+>-”,竞争法核心抗体等选择“->+”)
多功能酶标仪SpectraMax-i3的操作规程编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 Standard Operation of SpectraMax i3 部门签名/日期 Department Signature/Date 起草人: XX, Xiaochuan X Prepared by QC 审核人: XX, Sijia XX Reviewed by QC 审核人: XX, Fulan X Reviewed by QA 批准人: XX, Boyan XX Approved by 质量负责人 颁发部门执行日期质量保证部-QA Issued by Effective Date 替换文件复审日期 Version 00 Replaced For Review Date 分发部门 QA,QC Distributed to 1 of 7 编号 M-SOP-2-0083 No. 标准操作规程版本号 Standard Operating Procedure 01 Version 多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作规程 1 目的 建立多功能酶标仪SpectraMax i3的标准操作程序,规范SpectraMax i3 多功能酶标仪 检测时的操作。 2 适用范围
本规程适用于所有对多功能酶标仪SpectraMax i3的操作 3 术语或定义 多功能酶标仪:指功能较强、精度较高的单体台式酶标仪,可检测吸光度(Abs)、荧 光强度(FL)、时间分辨荧光(TRF)、化学发光(Lum)等。 4 责任 4.1 仪器负责人负责多功能酶标仪的日常及定期维护,出现故障时负责联系厂家维修,保 证运行正常。 4.2 实验操作人员需严格按照本规程执行,保证仪器正常使用,每次用完后填写仪器使用 记录,且使用后及时清理台面,保持仪器洁净。 5 EHS要求 N/A 6 程序 6.1 仪器安装 仪器与电脑连接完毕并连接电源以后,按仪器背面的按钮可以直接启动仪器,经过几分钟后的仪器自检后就可以开始用于检测。在连有电源的情况下,保持24小时开机,不要罩防尘罩以保持透气,隔1-2月关机重启一次。 6.2 SoftMax Pro软件操作基本步骤 6.2.1 打开软件 点击“SoftMax Pro 6.3”图标,打开SoftMax Pro 软件,出现 "Plate Setup Helper"对话框。若无则点击图标。
1.目的 规范酶标仪的使用、维护与保养。 2.范围 适用于以下型号的酶标仪。 3.职责 使用人员对本规程的实施负责,部门负责人监督实施。 4.使用规程 4.1开关机 4.1.1打开电源开关,电源开关位于仪器右后方的电源接口的正上方。 4.1.2当操作者按下电源开关时,仪器正面左侧的绿色三角形电源指示灯会闪烁十数秒,这 是仪器正在进行自检,闪烁停止后,电源指示灯呈绿色发光状态时,仪器处于待机状态。 4.2启动软件 4.2.1双击桌面上“Magellan”图标,选择检测到的仪器—“Infinite 200”,点击“OK”; 4.2.2在桌面中央对话框的下侧点击“取消”,即进入Magellan主界面 4.2.3在界面下侧点击温度控制图标,设定目标温度—设置—开;点击当前温度,选择自动, 可以实时观察仪器内温度,(注:实验开始前需将仪器提前预热到目标温度) 4.2.4将样品板放到托架上,A1孔处于左上方;然后按右下角绿色三角形按钮继续,选择获 得原始数据—继续,进入测量流程编辑窗口 4.2.5在Plate下拉菜单中选择测量使用的板的类型,在Part of Plate中框选样品区域; 在指令栏左侧选择需要检测的指令,如:1)双击“摇动”,设置持续时间3 s,波幅 1.5 mm;2)双击“温度设置”,设置37 ℃,点开“等温度达到”,范围设置36.5 ℃ —37 ℃;3)双击“多点测定循环”,设置持续时间1-2 h,勾选使用多点测定间隔,时间1-2 min;4)双击“荧光强度”,设置为490 nm—520 nm,点击Star,开始检测 4.3注意事项 4.3.1仪器使用完关机后到下一次开机中间至少间隔0.5 h 4.3.2检测完成后及时取出微孔板、比色杯