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电泳拖带的原因

电泳拖带的原因
电泳拖带的原因

电泳出现拖尾现象

电泳出现拖尾现象,英文成为smear,就是弥散。

琼脂糖凝胶电泳拖尾是怎么回事?

1:样品浓度过高。这种情况稀释一下就行了。提质粒的时候常出现这种情况。2:蛋白杂质阻碍DNA的泳动。提基因组DNA时常出现这种情况。

以上两种情况,拖尾都是在电泳条带的后面。

3:样品破碎或是被降解

4:存在RNA

这两种情况,拖尾都是在电泳条带的前面。

PCR产物电泳拖尾,主要从以下两个方面考虑:

1、PCR产物自身原因:

往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物过多。

对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低Mg2+浓度。④增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度。

2、电泳体系的问题:

(1)电泳缓冲液TAE或者TBE的污染,建议更换缓冲液。(2)上样时样品漂了,建议增加上样缓冲液的用量,以及小心加样。(3)电压太高。(4)适当把你的胶的浓度加大。(根据你的片断大小而定)(5)观察你的marker是否也存在拖尾现象,作为对照。

PCR拖尾及假阳性的原因及对策

拖尾

现象:产物在凝胶上呈Smear状态。

原因:

1.模板不纯

2.Buffer不合适

3.退火温度偏低

4.酶量过多

5.dNTP、Mg2+浓度偏高

6.循环次数过多

对策:

1.纯化模板

2.更换Buffer

3.适当提高退火温度

4.适量用酶

5.适当降低dNTP和镁离子的浓度

6.减少循环次数

假阳性

现象:空白对照出现目的扩增产物

原因:

靶序列或扩增产物

的交*污染

对策:

1.操作时应小心轻柔,防止将靶序列吸入加样枪内或溅出离心管外;

2.除酶及不能耐高温的物质外,所有试剂或器材均应高压消毒。所用离心管及加样枪头等均应一次性使用。

3.各种试剂最好先进行分装,然后低温贮存

武钢 钢包粘渣的原因及对策

钢包粘渣的原因及对策 米源,杨新泉,卢凯 (武汉钢铁(集团)公司第三炼钢厂湖北武汉 430083) 许丽 (武汉钢铁(集团)公司计控厂湖北武汉 430083) 摘要介绍了武钢250t钢包在使用中粘渣的情况。通过对粘渣物、钢包渣、工艺因素、保温剂和钢包残样等的分析,指出钢包粘渣是冶炼钢种、钢包热状态和包衬耐火材料共同作用的结果。提出了相应的对策。 关键词钢包,耐火材料,粘渣;钢种 The reason and measure for slag building-up of ladle MI Yuan, Yang xin-quan ,LU Kai (No.3 Steel-making Plant of WISCO,Wuhan 430083,China) Xu Li Calibration and Testing Laboratories of WISCO, Wuhan 430081,China Abstract:The circumstances for slag building-up of 250t ladle in WISCO have been introduced.The investigation on matters of slag building-up, ladle slag, technology factors, heat preservation reagent and ladle refractory remainders indicates that steel types, ladle heat-condition and ladle refractory are responsible for ladle slag building-up. The measures for slag-adhesion of 250t ladle in WISCO have been given。 Key words: ladle;refractories;slag building-up;ladle slag;steel types 近年来, 武钢250t钢包钢包普遍出现包壁包底粘渣现象。钢包粘渣后,会引起以下问题:(1)钢包包底粘渣后,钢包透气砖表面被渣粘附,造成热修清理透气砖困难,严重影响了钢包透气砖底吹效果,对生产造成威胁。(2)造成钢包容积减小,钢液面上升,并且精炼时钢渣会上浮至包口,使包口结渣、结冷钢,严重影响钢包铸余渣的翻净;(3)造成钢包重量增加,直接影响起吊行车的运行安全;(4) 由于粘渣物非常坚硬且与钢包衬结合牢固,去除十分困难,拆除时间长,造成钢包修理周期长,造成钢包周转紧张;为此, 因此,有必要对钢包粘渣的原因和机理进行研究,以便采取对策减轻粘渣;武钢通过钢包粘渣机理的分析,通过优化钢包热周转制度,加强钢包保温,提高耐火材料质量,较好的解决了钢包的粘渣问题,为生产的顺行打下坚实的基础。 1钢包粘渣的现状和机理分析 武钢250t钢包钢包壁工作层采用两种材质的砖铝镁碳砖和刚玉尖晶石质无碳预制块砖。钢包主要参数见表1。

钢包工安全操作规程

仅供参考[整理] 安全管理文书 钢包工安全操作规程 日期:__________________ 单位:__________________ 第1 页共4 页

钢包工安全操作规程 1.上岗前,劳动保护用品穿戴齐全。进入车间注意各种车辆。班中不许打架、看书报。玩手机、脱岗、串岗、睡岗、干私活,要精力集中,安全操作。 2.岗前岗中随时确认四周安全,检查使用的各种吊具,检查钢包、渣盆耳轴磨损情况,吊渣盆要确认两侧耳轴吊链挂牢。渣盆要摆正、摆平。 3.吊运钢水包必须确认包两侧耳轴包钩已挂牢靠,方能起吊。向车上摆包要正、稳。禁止在氧气、煤气阀门及区域吸烟。 4.向包上挂链时,等天车停止下落后再挂,注意钢包上的粘渣,防止坠落砸伤,另一钢包工要做好监护,注意链子勒手、挤手。严禁从钢包下钻过。必须勤钩包沿,不能影响转炉出钢和加引流剂,钩下的包沿倒入专用盆,散落地下的必须及时清理干净。监管作业浇钢跨区域四周禁止有易燃易爆物品和无关人员进入。 5.指挥天车用对讲机,讲话要清楚,倒钢包内渣水时要躲避安全位置。上钢、下包、摆包必须及时;给转炉上黑包、凉包或新包,必须通知转炉和调度。 6.钩钢包沿粘渣时禁止在钢包车上。小心东侧煤气烤包器,禁止到烤包区域休息。在岗时刻提高安全防范警惕。为保证钢包的正常运转和正常生产,必须备有装好水口和滑板的被用包。天车吊运钢包时,钢包工必须处在安全区域或位置。 7.加引流沙时站位安全,所加引流剂不能潮湿。出钢时禁止呆在炉口前,防止喷 溅烫伤。开钢车前,先安全确认,安全无误后再开。加沙小心把包 第 2 页共 4 页

沿废钢渣碰到包水口内。 第 3 页共 4 页

钢包自动开浇原理及影响因素分析

钢包自动开浇原理及影响因素 一、钢包自开的基本原理 引流沙在钢包水口内呈二层结构。靠近钢水一层为烧结层,下面一层为原始层即未变化的原有引流沙,打开滑板后,未发生变化的引流沙在重力作用下自然落下,烧结层则在钢水静压力作用下破碎,钢水则冲出水口达到自然开浇的目的。 引流沙烧结层的厚度及其烧结状态对钢包自然开浇具有决定性影响。而烧结层的厚度及状态与引流沙的化学成分和颗粒配比有重要关系。 碱性氧化物含量过高或过低,影响烧结,钢包自开率显然困难。当引流沙中小粒度沙粒比例较大时,引流沙易于烧结成块状,即烧结层增厚,因此,减少或排除引流沙中的细沙有利于改善烧结性,提高自开率。 引流沙本身的物化性能对自然开浇显然是决定性因素;理想的引流沙因具有良好的烧结性和流动性;而烧结层的厚度直接关系到钢包自开的效果;钢水在钢包内的镇静时间越短,自开率越高。在安装滑板,清洗水口,灌沙过程中,操作必须规范化;向钢包内投入脱氧剂,脱S渣等时应避开水口处。 二、大包的影响 1、保证透气砖畅通,使其出完钢后吹氩时对大包内钢水温度均匀,防止大包底部钢水温度低造成割眼。 2、对于大包的座砖孔径符合流动力学要求,要将座砖孔上方(与罐底打结料结合部)做成喇叭形状,并每炉清理干净,钢水流动顺畅。 3、钢包吹氩砖断层时要及时下线,以免和钢包水口座砖同时断层造成吹氩时串气,致使引流沙吹走或风冷凝块造成割眼。 三、热修操作的影响 铸完钢后水口内通常会留有残钢及残渣,烧氧时一定要将上水口以及座砖孔内的残钢以及残渣清理干净,更换滑板时,上下滑板要同心(不同心误差小于2毫米)。滑板安装完毕后,滑板与水口之间残余的耐火泥要清理干净,包括更换上水口时,一定要将残余的耐火泥和在高温作用下上水口渗出的沥青清除掉,以确保在滑板打开时,钢水经上水口、上滑板、下滑板和下水口自动流出。 四、钢包渣盖对自开率的影响

(安全生产)毛细管电泳分析方法在食品安全监控中的应用

毛细管电泳分析方法在食品安全监控中的应用 (华东师大化学系叶建农) 食品安全是指食品中不应含有可能损害或威胁人体健康的有毒、有害物质或因素,从而导致消费者急性或慢性毒害或感染疾病、或产生危及消费者及其后代健康的隐患。近年来,世界范围内食品安全方面的恶性和突发事件不断发生。据美国疾控中心研究报告估计,美国每年因食品中毒而死亡的人数约5000人左右。日本也先后发生出血性大肠埃希菌O157食品中毒事件,以及导致上万人中毒的雪印牛奶事件。目前我国食品安全形势不容乐观,食品中毒事件时有所闻。据不完全统计,我国每年实际发生的食物中毒例数在200万人次以上,其中有相当比例是由违禁食品添加剂引起,如2005年“苏丹红”事件,2006年“瘦肉精”事件,2008年“三聚氰氨”事件等。这类事件不仅严重危害人们身体健康,而且也对经济发展和国家形象产生及其负面的影响。客观而言,目前我国食品安全仍处于风险高发期和矛盾凸显期,有必要进行全方位的整治。其中的一个环节,就是要切实做好食品安全监控工作。 食品分析大致可分为两大类,即食品中营养成分分析,以及食品中化学添加剂、化学污染物的分析。由此可见,食品安全监控的主要内容,本质上是指能够准确分析和严格控制食品中化学添加剂及化学污染物的种类和含量。其中食品添加剂属限用品。根据我国卫生部2008年新修订的“食品添加剂使用卫生标准”

(GB2760-2007)规定,在一定前提下可合法使用的食品添加剂总数为1812种,共分为22大类。这一千多种食品添加剂虽然已经卫生部认可,但对其允许的添加范围及添加量却有严格的规定和限制。至于化学污染物则属违禁品,有时又叫禁用品,即在任何条件下均不得人为添加,如苏丹红、瘦肉精、孔雀石绿、三聚氰氨等。 从理论上讲,现有的化学分析方法都有可能在某种程度上应用于食品安全监控。如比色法、滴定法、水解法、蔡氏砷斑法、凯氏定氮法、薄层色谱法、气相色谱法、高效液相色谱法、色谱-质谱联用法、毛细管电泳法等。 毛细管电泳(Capillary Electrophoresis, CE)是近二十来发展最快的一种分离分析技术,具有分离效率高、所需样品量少、分析成本低等优点。毛细管电泳分析法是以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力,根据样品中各组分之间迁移速度的差异而实现分离的一种液相分离技术。由于食品组成的复杂性,检测前的各组分之间的分离是必不可少的。食品中各组分经毛细管分离后,即可选用合适的检测器进行检测,如紫外吸收检测(UV)、激光诱导荧光检测(LIF)、电化学检测(EC)等。 近年来,国内外化学工作者开展了大量的研究工作,探索和开发毛细管电泳分析方法在食品安全监控中的具体应用。众所周知,有机磷农药是目前使用量最大的杀虫剂,占全部农药用量的80%以上,广泛用于谷物、棉花、果树等农作物。有机磷农药

毛细管电泳出现问题分析

无样品峰出现 A、检查电流是否稳定: ①没有电流。 可能原因——毛细管堵塞或断裂。解决方法——用水冲洗毛细管,并观察是否有水流出,若无水流出请拆下卡盒检查毛细管两端和窗口是否断裂;毛细管没有断裂的话可以用水反向高压冲洗以试图解决此问题。缓冲溶液需要过滤,将样品过滤或者离心去除其中的颗粒。 ②电流波动很大,直至几乎消失。 可能原因——缓冲溶液中有气泡产生或者区带中样品析出。解决方法——将缓冲溶液超声脱气,如果还有此现象发生,则可能是样品区带有析出,可以通过降低样品浓度/ 延长ramp time 来试图解决这一问题;对于在缓冲溶液中溶解度不高的样品则需要在缓冲溶液中加入添加剂以解决此问题。 ③电流初始值较小,后逐渐增大。可能原因——样品进样量过大。解决方法——减少进样量,通常进样参数设置在0.5psi,5sec 左右。 ④电流正常。 可能原因:a 样品浓度过低:使用高浓度样品测试,如果无法解决则有可能是以下其他原因。b 检测波长设置不正确:请确认被分析物的特征吸收,检查方法中的检测波长设置。c 分离 极性错误:对于蛋白样品,请注意蛋白在分离条件下其PI及所带

电荷;对于核酸样品,通常条件下会带负电荷。d样品在 毛细管内壁吸附:对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分 离,或采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。e光学检测器或光纤损坏:进行标准样品的测试,如果没有对应的结果出现,则有可能存在硬件问题,请联系工程师。 B、检查毛细管窗口,是否有透明窗口: 可能原因一一忘记开毛细管窗口或窗口位置不正。 解决方法一一重新开毛细管检测窗口,或将窗口调整到正确位置。 二、样品峰出现拖尾 可能原因一一样品在毛细管内壁吸附。 解决方法一一对于蛋白及核酸样品应尽量采用涂层毛细管分离,或 采用极端pH条件或动态涂层防止样品吸附。 三、样品峰形不对称 A、检查毛细管入口: 可能原因一一毛细管入口切口不平齐。 解决方法一一重新切割毛细管入口,注意毛细管切割方法,不可以 用力过猛或反复刮擦。

钢包常见事故处理方法

钢包常见事故处理方法 钢包出钢时不透气 1、接到通知后,马上查看钢包记录,了解双透气砖的使用情况(正在使用透气砖的使用次数,透气性能,另一块透气砖的使用次数,透气性能)。 2、迅速到现场,查看转炉出钢后是否插吹氩管、底吹管接头选择是否正确。查看钢包快速接头,底吹管及各接口处是否漏气,漏气时及时更换漏气部件或拧紧漏气部位。 3检查管路阀门是否打开并开到最大。检查底吹管气源压力工作压力是否符合要求。 4换用第二块透气砖,观察底吹情况。 5、跟踪查看钢包进精炼吹氩加热后,是否透气。 钢包在精炼不透气 1、马上查看记录,了解双透气砖的使用情况(正在使用透气砖的使用次数,透气性能,另一块透气砖的使用次数,透气性能)。在转炉工序底吹情况。 2、迅速到精炼现场,查看底吹管接头选择是否正确。精炼钢包车吹氩管管路、各接口是否漏气,漏气时及时更换漏气部件或拧紧漏气部位。 3、检查管路阀门是否打开并开到最大。检查底吹管气源压力工作压力是否符合要求。查看钢水出钢温度、进精炼温度是否正常,查看钢包包况、类别。 4 、钢包在精炼加热后查看是否透气,否则换用第二块透气砖。 5、若还不透气,准备好装好滑板、下水口,加好引流剂的钢包倒包。 6、倒包完毕,将钢包放平,使钢包包口朝南处于水平位。 7、接通氩气,检查快速接头、对丝、弯头、吹氩弯管、软管、各接口是 否漏气,漏气时及时更换漏气部件或拧紧漏气部位。 8、吹扫透气砖表面覆盖的钢渣,确认透气性。 9、透气性正常时,正常使用,否则甩包更换透气砖。 所有底吹不透钢包下线后都要进行详细检查,用氧管对透气砖进行吹扫作业,并确认压降符合要求。

钢包水口在连铸烧不开 1、班长查清钢包号,了解清楚钢包水口在连铸开浇时是否下引流砂。 2、查看加引流砂记录(加砂时间、炉次号、水口洁净度、包内粘钢、渣情况)。 3、钢水倒包后,指挥天车将钢包放平,使钢包包口朝南处于水平位。 4、挂上液压缸,打开机构。 5、查看滑板流钢孔、上水口流钢孔内有无钢渣、残泥等异物,查看连铸烧眼情况(滑板、上水口是否烧偏),同技术人员、调度一起分析事故原因。 6、用氧管烧水口内的残物。 7、若水口烧不干净,用风镐拆除上水口,安装新上水口,安装上、下滑板,下水口后,继续投用。 钻钢 1、滑板间钻钢、上水口钻钢,烧毁滑动水口机构时,甩包并同技术人员、调度一起分析事故原因。 2、滑板间钻钢、下水口钻钢,机构粘钢较严重时,冷却后由专业人员清理废机构、卸下滑板(同技术人员、调度一起分析事故原因),更换新机构。 3、滑板间钻钢、下水口钻钢,机构轻微粘钢时: ①烧干净水口内的残钢残渣。 ②用钢钎撬、割枪割,清理干净下水口套、小车上的粘钢。 ③短时间清理不干净时,更换小车及下水口套。 ④小车拆不下来时,卸下滑条再进行拆卸。 ⑤检查底座、固定支架、托座无变形、无裂纹、无粘钢等正常时,正常投 用,否则更换相应机构。 透气砖漏钢 1 在转炉、精炼位发现透气砖漏钢时,立即将钢包开至吊包位,同时喊开周围危险区人员;在连铸发现透气砖漏钢时,立即停浇关住钢包滑动水口,将回转台旋转180°,使钢包位于事故包上方,同时喊开周围危险区人员。 2 班长若在第一时间发现,则立即指挥天车以最快速度将钢包吊离钢包车、连铸机(防止铸钢包车、铸轨道、铸连铸机)。 3 指挥天车将钢包吊至事故包上方或渣盘上方漏完钢。 4 甩包。

毛细管电泳的基本原理及应用剖析

毛细管电泳的基本原理及应用 摘要:毛细管电泳法是以弹性石英毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的电泳分离分析方法。该技术可分析的成分小至有机离子、大至生物大分子如蛋白质、核酸等。可用于分析多种体液样本如血清或血浆、尿、脑脊液及唾液等,比HPLC 分析高效、快速、微量。 关键词:毛细管电泳原理分离模式应用 1概述 毛细管电泳(Caillary Electrophoresis)简称CE,是一类以毛细管为分离通道,以高压直流场为驱动力的新型液相分离分析技术。CE的历史可以追溯到1967年瑞典Hjerten最先提出在直径为3mm的毛细管中做自由溶液的区带电泳(Capillary Zone Electro-phoresis,CZE)。但他没有完全克服传统电泳的弊端[1]。现在所说的毛细管电泳(CE)是由Jorgenson和Lukacs在1981年首先提出,他们使用了75mm的毛细管柱,用荧光检测器对多种组分实现了分离。1984年Terabe将胶束引入毛细管电泳,开创了毛细管电泳的重要分支: 胶束电动毛细管色谱(MEKC)。1987年Hjerten等把传统的等电聚焦过程转移到毛细管内进行。同年,Cohen 发表了毛细管凝胶电泳的工作。近年来,将液相色谱的固定相引入毛细管电泳中,又发展了电色谱,扩大了电泳的应用范围。 毛细管电泳和高效液相色谱(HPLC)一样,同是液相分离技术,因此在很大程度上HPCE与HPLC可以互为补充,但是无论从效率、速度、样品用量和成本来说,毛细管电泳都显示了一定的优势毛细管电泳(C E)除了比其它色谱分离分析方法具有效率更高、速度更快、样品和试剂耗量更少、应用面同样广泛等优点外,其仪器结构也比高效液相色谱(HPLC)简单。C E只需高压直流电源、进样装置、毛细管和检测器。 毛细管电泳具有分析速度快、分离效率高、试验成本低、消耗少、操作简便等特点,因此广泛应用于分子生物学、医学、药学、材料学以及与化学有关的化工、环保、食品、饮料等各个领域[2]。

高效毛细管电泳分析法

高效毛细管电泳分析法 1.1 高效毛细管电泳概述 高效毛细管电泳(High Performance Capillary Electrophoresis, HPCE)是20 世纪80年代发展起来的一种新型的液相分析技术,其分离原理可以追溯到1937 年Tiselius[1]所做的研究,Tiselius 制成了第一台电泳仪并进行了第一次自由溶液电泳。而现代毛细管电泳(Capillary Electrophoresis, CE)得以普及归因于1981 年Jorgenson 和Lukacs所取得的标志性成果[2],之后电泳技术迅速发展。CE 是经典电泳技术和现代微柱技术的结合产物,它克服了高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)实验成本高、气相色谱(Gas Chromatography, GC)应用面窄、薄层色谱(Thin-Layer Chromatography, TLC)柱效低和重现性差的缺点。短短的几十年间已被广泛用于分子生物学、医学、药学、材料学以及与化学有关的化工、环保、食品、饮料等各个领域[3]。 1.1.1 高效毛细管电泳的基本原理 毛细管电泳是以高压电场为驱动力,以毛细管为分离通道,依据样品中各组分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的一类液相分离技术。毛细管电泳仪的基本结构包括一个高压电源,一根石英毛细管,一个检测器及两个供毛细管两端插入而又可和电源相连的缓冲液贮瓶. 毛细管电泳的基本原理如下:毛细管电泳所用石英毛细管柱内存在两种电迁移现象:电泳现象和电渗现象。电泳现象是指带电粒子在电场作用下的迁移;在pH>3的情况下,毛细管柱内表面带负电,与溶液接触时形成双电层,在高电压作用下,双电层中的水合阳离子引起流体整体朝负极方向移动的现象叫做电渗现象[4]。粒子在毛细管内电解质中的迁移速度等于电泳和电渗两种速度的矢量和。正离子的运动方向和电渗流一致,故从负极最先流出;中性粒子的电泳速度为“零”,故以电渗流速度在正离子之后流出;负离子的运动方向与电渗流方向相反,但因电渗流速度一般都大于电泳流速度,故在中性粒子之后流出,因此各种粒子迁移速度不同而实现分离。 1.2 高效毛细管电泳在食品药品分析中的应用 食品和药品种类的多样性及其成分的复杂性对应用于其分析的方法提出了很高的要求。由于CE 具有多种不同的分离体系,可以满足许多复杂基质所含的复杂成分的分析要求,其分析的对象可以从饮用水到复杂的肉制品,分析的成分可以从简单的金属离子到蛋白质等大分子,而且CE 对被分析成分的提取、纯化及衍生等预处理没有严格的要求。因此,CE 在食品药品分析方面的应用日趋广泛。 食品和药品是由各种不同化学性质的分子组成的,在其分析中最常用的两种方法是HPLC 和GC。迄今为止HPLC 是食品药品分析中最适当的检测方法[11],但是也会出现分离效能低的情况;HPLC 中分离度的改善不如在CE 中实施起来容易,而且操作成本也相对较高。另外,GC 不能直接用于测定难挥发不稳定的物质。而毛细管电泳的灵活性使其在食品药品分析中完全可以成为以上两者的有效补充,已用于许多食品和药品组分(成分、添加剂、残留物等)的检测。 1.2.1 成分分析 1.2.1.1 碳水化合物分析 碳水化合物分为单糖、低聚糖和多聚糖三类,是食品中的主要组分,对人体具有重要的功能性和生理性机能,因此对其分析具有极大的重要性。用于碳水化合物分析的CE 方法应用已有许多报道。CZE 和MEKC 方法均已应用于碳水化合物的分析中。通常采用间接紫外检测或柱前衍生方法解决大多数碳水化合物中不含发色团的问题。常用的衍生试剂有2-氨基吡

毛细管电泳中常用的检测方法

毛细管电泳中常用的检测方法 毛细管电泳(C E ) 以其高效、快速的分离, 成为一种令人瞩目的分析手段。为了便于热量散失和进行柱上检$lJ , 采用了极小内径的毛细管(≤50 umi.d.) , 这样允许进样量就很小(10 一9 g )。如此小的进样量要求有高灵敏的检测方法, 才能进行定性、定量分析。 紫外吸收法: 一般, 常用于C E 的检测器是市售的紫外和荧光检测器。当采用紫外一可见吸收法时, 石英毛细管壁的内涂层常常用有机溶剂溶解或灼烧而刮去, 使出现一个“小窗口” , 作为柱上检测的流通池。内径很小的毛细管使得流通池的长度也相应很小, 检测灵敏度相当有限, 尤其在生物样品分析中常常需要先行样品预富集然后再检测, 以提高灵敏度。在使用长方形徽面的毛细管进行电泳分离分析时,柱上检测的光学流通池长度明显增大, 使检测灵敏度提高7 1 5 倍。采用高能量的光源, 如氨灯、激光等, 可较大地提高检测灵敏度, 但费用较高, 又因可供选择使用的人射光波长范围较窄, 限制了它的应用。 荧光检测法: 荧光检测的灵敏度比紫外吸收法高几个数量级。对于有适当的激发荧光和发射荧光的供试品, 采用激光诱导荧光检测法和光电倍增管, 可使检测灵敏度大大提高, 而对于绝大多数无自然荧光的化合物, 则必须进行柱前或柱后衍生化, 才能进行荧光检测。 间接检测法: 对供试品进行衍生化的操作繁琐, 且易引入误差, 对于被测浓度极低的生物样品更是如此。于是, 间接检测法应运而生。间接检测就是在电泳缓冲液中加入具有检测响应的检测剂, 如发色团、荧光物质等, 作为本底响应,以产生基线信号。供试品进样后, 供试品离子与反电荷的检测剂离子形成离子对, 或置换了检测剂的同电荷离子, 分别产生正峰和负峰,使基线信号发生改变而被检测。在间接荧光法中, 被分析物能吸收荧光辐射或使本底荧光淬灭, 本底信号因此降低或消失而进行检测。这种方法要求供试品必须能吸收荧光或淬灭荧光。 在间接检测法中, 即或存在着相对大量的本底检测剂, 痕量的供试物也能与之从容地充分反应, 产生检测信号, 从而获得较为理想的灵敏度。应该指出的是, 毛细管直径、光源、检测剂的固有性质等, 都将对间接检测结果产生影响 电化学检测法: 电化学检测器的灵敏度高、选择性好, 但由于超微电极的制做和柱后检测单元的设计较困难, 使其应用受到了限制。W al lin g fo rd 等巧妙地设计了一个毛细管区带电泳(c a p illar yZ o n e ele c tr o ph o r e sis , C z E ) 的在线电化学检测系统, 把C Z E 的高效分离和电化学检测的高灵敏度结合起来, 实现了在单个神经细胞水平上的测定。 化学发光法: C as p e rs o n 用化学发光法检测电泳凝胶中的 D N A 段, 检测量可低至1.1 x 10-12 g。以结合了辣根过氧化酶的亲合素对生物素化的D N A 进行亲合性标记, 当此D N A 通过浸泡在过氧化氢和苯巴比妥混合溶液中的电泳凝胶时, 辣根过氧化酶催化过氧化氢还原成水, 释放出的能量转移给化学发光剂苯巴比妥, 激发态的苯巴比妥返回基态时发射出的光信号可被照相底片所记录, 进行检测。化学发光法具有灵敏度高、线性范围宽、反应速度快、选择性好等特点, 因检测器不

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