快速检测HIV抗体诊断实验的系统评价

收稿日期：2011-12-26

目前全球艾滋病感染人数并没有一个确切的统计数字，但据美国研究人员分析2003年全美国估计有1039000~1185000例HIV 病毒携带者，其中25%的病毒携带者并不知道自己已经感染艾滋病病

毒[1]。目前的研究显示很多新近感染病例是被那些不

知道自己已经感染艾滋病病毒的感染者所传染的[2]，因此艾滋病快速准确的检测显得尤为重要，目前国内外检测艾滋病病毒（HIV ）抗体最常用的方法为免

文章编号：1005-8982（2012）12-0028

·临床论著·

快速检测HIV 抗体诊断实验的系统评价

贾学慧1，刘玉艳2，周文婕1，李玉芬1

（1.天津市第五中心医院检验科，天津300450；2.天津市塘沽区大沽社区服务中心检验科，天津300450）

摘要：目的系统评价快速检测（R T ）试验诊断HIV 感染的临床应用价值。方法计算机检索PubMed （1966～2010.12）、EMBASE （1974～2010.12）、中国生物医学文献数据库CBM （1978～2010.12）、中国期刊全文数据库CNKI （1994～2010.12）等，全面收集快速检测HIV 抗体的临床诊断试验。按QUADAS 条目对纳入研究文献进行质量评价，应用统计软件Meta-DiSc1.4和STATA11.0进行数据分析。结果最终纳入14个研究，结果显示：快速检测诊断试验敏感度、特异度、阳性似然比（+LR ）、阴性似然比（-LR ）、诊断优势比（DOR ）及SR OC 曲线下面积分别为：100％（95%CI 99%-100%），99％（95%CI 99%-99%），118.40（95%CI 60.27-232.57），0.01（95%CI 0.00-0.04），16398.26（95%CI 6617.73-40633.71）和0.9991。结论快速检测诊断HIV 感染的敏感性和特异性均很高，是临床上快速筛查HIV 感染者的有效方法。

关键词：人类免疫缺陷病毒；快速检测；系统评价中图分类号：R 446文献标识码：A

The diagnostic value of anti-human immunodeficiency virus

rapid tests:a systematic review

JIA Xue-hui 1,LIU Yu-yan 2,ZHOU Wen-jie 1,LI Yu-fen 1

(1.Department of Cinical Laboratory,Tianjin 5th Center Hospital,Tianjin 300450,P.R.China;2.Department of Cinical Laboratory,Tianjin Tanggu District Dagu Community Health Service Center,

Tianjin 300450,P.R.China)

Abstract:【Objective 】To evaluate the diagnostic value of anti-human immunodeficiency virus Ab rapid tests.【Methods 】By searching PubMed,EMBSE,CBM,CNKI et al,we collect all diagnostic tests about anti-human im －munodeficiency virus Ab rapid tests.QUADAS items were used to evaluate the quality of the included studies.The sensitivity,specificity,diagnostic odds ratio (DOR),and systematic receiver operating characteristic curves (SROC)were calculated to assess the diagnostic value of individual diagnostic tests.The data was analyzed by using statistic software Meta-DiSc1.4and STATA11.0.【Results 】14trials that included a total of 11137patients were analyzed in the systematic review.The summary values of sensitivity,specificity,positive likelihood ratio,negative likelihood ra －tio ,DOR and SROC curve of anti-human immunodeficiency virus Ab rapid tests were 100％(95%CI 99%-100%),99％(95%CI 99%-99%),118.40(95%CI 60.27-232.57),0.01(95%CI 0.00-0.04),16398.26(95%CI 6617.73-40633.71)and 0.9991,respectively.【Conclusion 】The sensitivity and specificity of anti-human immunodeficiency virus Ab rapid tests was fairly high,which can be regarded as an effective and feasible method for detection the HIV virus infection.

Key words:HIV;rapid test;systematic review

第22卷第12期中国现代医学杂志

Vol.22No.122012年4月

China Journal of Modern Medicine

Apr.2012

表1

纳入研究的基本特征

注：WB ：Western blot assay ；EIA:enzyme immunoassay

疫层析法，该方法最大优点是操作简便，可单份检

测，报告结果快（可在滴加血清样品后3~30min 观察到结果）

。该检测方法是以胶体金或硒为标记物，硝酸纤维素膜为载体，采用层析形式进行固相免疫测定的技术为原理制备的。目前以该原理制备的HIV 快速检测试剂的敏感性和特异性研究结果存在一定的差异，因此笔者采用寻证医学的方法对快速检测试验进行定量评价，以期为临床诊疗工作提供一定的参考价值。

1资料与方法

1.1纳入标准

1.1.1研究类型快速检测HIV 抗体诊断性试验，原文献可提取四个表资料。1.1.2

研究对象

献血者、服刑人员、高危人群（吸

毒或男性同性恋者）、临床上怀疑HIV 感染者，无年龄、性别、种族的限制。

1.1.3诊断试验方法酶免法、Western 印记。1.1.4测量指标合并敏感度（SEN ）、合并特异度（SPE ）、合并阳性似然比（+LR ）、合并阴性似然比（-LR ）、诊断优势比（DOR ）及合并SROC 曲线下面积。

1.2文献检索

以human immunodeficiency virus ；HIV Ab;

rapid

test ；immunochromatography ；sensitivity ；speci-ficity ；diagnosis ，et al 检索Medline （1966～2010.12）、

EM BASE （1974～2010.12）。以“HIV 、艾滋病、敏感度异度、特异度、快速检测、诊断等”检索中国生物医学文献数据库（1978～2010.12）、中国期刊全文数据库（1994～2012.12）。检索策略参考《The Bayes Li-brary of Diagnostic Studies and Reviews 》制定的标准，检索词分目标疾病和诊断准确性指标两大部分，并根据具体数据库调整，采用主题词与自由词相结合的方式，所有检索策略通过多次预检索后确定。1.3文献筛选和资料提取

由两名评价者独立按照预先制定的纳入、排除标准筛选文献、提取数据并交叉核对，如有不一致，与第三者讨论解决。提取资料包括：作者、年代、试验方法、确诊标准、纳入样本数、诊断的敏感度、特异度、四个表资料等。1.4质量评价

根据QUADASA [3]条目进行质量评价，对纳入的每个研究逐条按“是”、“否”、“不清楚”评价并采取双人平行评价的方法，并据此绘制质量评价百分条图。1.5统计学分析

阅读文献、整理数据，对数据进行定量合成。统计学异质性采用Q 统计量的I 2检验来分析，双侧I 2<50%认为各研究间不存在明显的统计学异质性，数据合成采用固定效应模型；若I 2>50%，认为各研究间存在异质性，同时进一步分析其异质性的来源，如果异质性来源于统计学，此时数据合成采用随机效应模型；如果异质性来源于临床或方法学，此时对

作者

病例诊断金诊断方法快速检测发表时间

四个表资料数

标准敏感性特异性（年）真阳性假阳性假阴性真阴性Arai 620WB ，EIA Determine 1.00 1.00199925200368Aidoo 200PA ，WB Determine 1.00 1.0020011250075Urassa 1390WB ，EIA Determine 1.000.9820023832201007M enard 972WB ，EIA Determine 1.000.99200311310166赵东岩291EIA Determine 1.000.992003220289Van den Berk 1155EIA Determine 0.99 1.00200316141994Foglia 482HIV RNA Determine 1.000.9920046240420Rouet 596WB ，EIA Determine 1.000.9820044990547Ferreira 1099WB ，EIA Determine 1.00 1.00200522110878梁仲城475EIA 免疫胶体金0.83 1.002006501470Eller 905WB ，EIA Determine 1.000.96200710350895张帅清51WB 免疫胶体金 1.00 1.002008170034张洪琼1883EIA 免疫胶体硒

1.000.992008341601849徐晓琴

1018

WB

免疫乳胶层析

0.96

1.00

2009

64

3

954

第12期贾学慧，等：快速检测HIV 抗体诊断实验的系统评价

图2快速检测HIV

抗体诊断试验敏感性的森林图

可能导致异质性的因素进行亚组分析及敏感性分析。用M eta-DiSc 软件绘制SROC 曲线，并分别计算各诊断方法的敏感性、特异性、阳性似然比、阴性似然比、诊断试验比值比及SROC 曲线下面积。

2

结果

2.1

文献检索结果

初检出文献6137篇。阅读文题及摘要6100

篇，初步纳入文献37篇。进一步阅读全文排除未达到纳入标准的文献23篇。最终纳入14个研究[4-14]，共11137例受试者（附表）。发表时间为1999~2009年。2.2

各独立研究结果的异质性检验

纳入研究的14篇文献采用I 2统计量进行异质性检验，分别以快速检测试验的敏感度、特异度、阳

性似然比（+LR

）、阴性似然比（-LR ）、以及诊断优势比（DOR ）为效应指标，I 2统计量分别为：47.9%，88.1%，86.6%，69.1%，30.6%。特异度、阳性似然比和阴性似然比I 2>50%，认为各独立研究结果之间存在统计学异质性，合并分析采用随机效应模型；其余各项指标I 2<50%，认为各项独立研究结果之间不存在统计学异质性，合并分析采用随机效应模型。2.3纳入研究的质量评价结果

对于QUADASA 中的标准如果入选文献中明确满足（是）为2分，

不清楚为1分，未提及或不满足者（否）为0分，并以百分数计算（0~100%）。QUADASA 中的11条标准，入选的14篇文献的平均得分为62.6%（图1）。对每一篇文献的质量评价采取双人平

行评价的方法。

A ：Respresentat ；

B ：Acceptable r ；

C ：Acceptable d ；

D ：Partial veri ；

E ：Differential ；

F ：Incorporatio ；

G ：Reference st ；

H ：Index test r ；

I ：Unin-terpreta ；

J ：Withdrawals ；K ：Sponsoring p 图1QUADASA 评价纳入研究质量的百分条图

2.4

数据定量合成

根据统计学异质性分别采用随机效应模型或固定效应模型进行数据分析，结果显示：快速检测试验的敏感度、特异度、阳性似然比（+LR ）、阴性似然比

（-LR ）、诊断优势比（DOR ）以及SROC 曲线下面积分别：100％（95%CI 99%~100%）（图2），99％（95%

CI 99%~99%）（图3），118.40（95%CI 60.27~232.57），0.01（95%CI 0.00~0.04），16398.26（95%CI 6617.73-40633.71）和0.9991（图4）。2.5发表性偏倚的识别

Begg 法检测发表偏倚，分别以诊断试验的敏感性和特异性的对数（logSE ；logSP ）为纵坐标，以logSE ；logSP 的标准误SelogSE ；SelogSP 为横作标绘制漏斗图，图中各点沿中间水平线均匀分布，且均位于预计95%置信区间内，结果提示不存在发表偏倚。

A B C D E

F

G

H I

J

K 100%80%60%40%20%0%

Yes （high quality ）

Unclear

No （low quality ）

中国现代医学杂志第22卷

图4快速检测HIV 抗体诊断试验的SROC 曲线图

图3

快速检测HIV

抗体诊断试验特异性的森林图

3讨论

获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodefi-ciency syndrome ）简称艾滋病（AIDS ），是由人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus ，HIV ）感染所引起的一种严重的传染性疾病。我国AIDS 也呈加速流行的趋势[18]。当前对HIV 感染还没有安全有效的治疗方法，HIV 极高的突变率等原因又使研制HIV 有效疫苗极为困难，所以目前防治的主要手段还是以预防为主，普及HIV 抗原抗体检测，以尽早发现HIV 感染者，控制其传播。因此HIV 快速而准确的检测技术在艾滋病的防治工作中就显得尤为重要[19]，目前已有PA （明胶颗粒凝集试验）、Determine 、斑点印迹（dot immunoassy ）等简便快速方法，但关于

上述快速检测技术的研究结果在敏感性和特异性等

方面存在一定的差异。

本系统评价共纳入14个关于HIV 快速检测诊

断试验的研究，共纳入11137例受试者。根据QUADASA 提出的11条标准对入选的文献进行方法学质量评价，14篇文献的平均得分为62.6%。研究结果显示，HIV 快速检测诊断试验的敏感度为100%，其漏诊率0；特异度为99％，误诊率为1％，即100个快速检测法诊断为HIV 感染者中可能有1个患者没有感染而是被误诊的。合并阳性似然比为118.04，快速法检测HIV 抗体阳性时，其疑似病例为

感染者的可能性很大，合并阴性似然比为0.01，提示快速法检测HIV 抗体阴性时，基本可以排除疑似病例为HIV 感染者的可能性；诊断试验优势比为16398.26及SROC 曲线下面积为0.98，表明其诊断效能非常高。

该系统评价结果提HIV 快速诊断试验在敏感性和特异性方面都非常高，是一种快速、便捷、准确的检测方法。但该系统评价也存在一定的局限性：首先，只纳入了发表语言为英语和汉语的研究文献，因此难免会出现检索偏倚；其次，特异性、阳性似然比和阴性似然比存在较为明显的统计学异质性，尽管这种统计学可以通过随机效应模型进行调整，但其对结论的稳定性会产生一定的影响；第三，该项系统评价纳入的研究所采用的快速诊断试剂盒由不同的公司所生产可能存在一定的差异，这种差异可能是临床异质性的一个潜在来源；第四，笔者在文献检索和筛选过程中发现：①未纳入的文献大多数是综

述、病例报告、非诊断性临床试验、未设对照、金标准

1.00.90.80.70.60.50.40.30.20.10.0

0.0

0.2

0.40.60.8

1.0

1-specificity

Symmetric SROC AUC=0.9991SE(AUC)=0.0003Q *=0.9918SE （Q *）=0.0021

第12期贾学慧，等：快速检测HIV 抗体诊断实验的系统评价

（或参考试验）选取不恰当或无法获取诊断试验评价指标或基本数据的文献；②绝大多数试验未对所需样本量进行统计学估计；③大多数研究未对诊断方法进行成本-效益进行性评价；④有些研究原始资料不详细而无法纳入；⑤纳入的诊断研究缺乏统一的报告标准；⑥根据QUADASA标准，中文文献的研究质量普遍偏低。虽然该项系统评价存在一定局限性，但其研究结果令人满意，HIV快速诊断试验具有较高的敏感性和特异性，可作为临床上诊断HIV感染有效可行的方法，但是鉴于其特异性不是100%存在一定的误诊可能性，而且一旦误诊会给受检者及家人造成极大的心里负担，因此有必要进一步提高快速诊断试验的特异性。同时也应该对快速诊断试验诊断为阳性的受检者进行及时的确诊试验，避免给受试者带来不必要的心里负担，同时也避免医疗纠纷[20]。

参考文献：

[1]KAPIG A S,HAYES R,BUVE A.HIV prevention-where now.

Background and introduction[J].AIDS,2010,24(4):S1-3.

[2]VALLEROY LA,M ACKELLAR DA,KARON JM,et al:HIV

prevalence and associated risks in young men who have sex with men [J].Young Men’s Survey Study Group.JAM A,2000,284(2): 198-204.

[3]WHITING P,RUTJES AW,REITSM A JB,et al.The development of

QUADAS:a tool for the quality assessment of studies of diagnostic accuracy included in systematic reviews[J].BM C Med Res Methodol, 2003,3:25.

[4]ARAI H,PETCHCLAI B,KHUPULSUP K,et al.Evaluation of a rapid

immunochromatographic test for detection of antibodies to human immunodeficiency virus[J].J Clin Microbiol,1999,37(2):367-370. [5]AIDOO S,AM POFO WK,BRANDFUL JA,et al.Suitability of a rapid

immunochromatographic test for detection of antibodies to human immunodeficiency virus in Ghana,WestAfrica[J].J Clin M icrobiol, 2001,39(7):2572-2575.

[6]MENARD D,MAVOLOMADE EE,M ANDENG M J,et al.Advantages

of an alternative strategy based on consecutive HIV serological tests for detection of HIV antibodies in central african republic[J].J Virol M ethods,2003,111(2):129-134.

[7]ZHAO DY,LI H,WEI AH,et al.Immunochromatographic method for

rapid detection of HIV-1/2in the clinical application of emergency[J].

JOURNAL OF M ODERN LABORATORY M EDICINE,2003,111(2): 24-25.Chinese

[8]VANDENBERK GE,FRISSEN PH,REGEZ RM,et al.Evaluation of

the rapid immunoassay determine HIV1/2for detection of antibodies to human immunodeficiency virus types1and2[J].J Clin Microbiol2003, 41(8):3868-3869.

[9]URASSA W,NOZOHOOR S,JAFFER S,et al.Evaluation of an

alternative confirmatory strategy for the diagnosis of HIV infection in Dar Es Salaam,Tanzania,based on simple rapid assays[J].J Virol Methods2002,100(1-2):115-120.

[10]FOGLIA G,ROYSTER GD,WASUNNA KM,et https://www.sodocs.net/doc/0011917640.html,e of rapid and

conventional testing technologies for human immunodeficiency virus type1serologic screening in a rural Kenyan reference laboratory[J].J Clin Microbiol2004,42(8):3850-3852.

[11]ROUET F,EKOUEVI DK,INWOLEY A,et al.Field evaluation of a

rapid human immunodeficiency virus(HIV)serial serologic testing algorithm for diagnosis and differentiation of HIV type1(HIV-1), HIV-2,and dual HIV-1-HIV-2infections in West African pregnant women[J].J Clin Microbiol2004,42(9):4147-4153.

[12]FERREIRA OC,FERREIRA C,RIEDEL M,et al.Evaluation of rapid

tests for anti-HIV detection in Brazil[J].AIDS2005,19(S4):S70-75.

[13]梁仲城.急诊术前HIV抗体金标法快速检测的临床意义[J].右江

民族医学院报,2006,28(6):1057-1058.

[13]LIANG ZC.Clinical significance of HIV antibody rapid detection for

emergency operation[J].Journal of Youjiang Medical University for Nationalities,2006,28(6):1057-1058.Chinese

[14]ELLER LA,ELLER MA,OUMA BJ,et https://www.sodocs.net/doc/0011917640.html,rge-scale human

immunodeficiency virus rapid test evaluation in a low-prevalence ugandan blood bank population[J].J Clin Microbiol2007,45(10): 3281-3285.

[15]ZHANG SQ.Effect of colloidal gold rapid test of HIV antibody

detection kit[J].Chinese Journal of Health Laboratory Technology, 2008,18(5):935,940.Chinese

[16]ZHANG HQ,YANG MY,ZHAO N,et al.The diagnosis value of rapid

HIV antibody detection in the preoperative and rural health care units [J].Chinese Journal of AIDS&STD,2008,14(2):178.Chinese [17]XU XQ,HU HY,GUO HX,et al.A rapid HIV antibody detection

method evaluation[J].Jiangsu Journal of Preventive Medcine,2009, 20(2):12-14.Chinese

[18]HUANG CH,OUYANG L,HUANG JG.Detection of HIV infection

and analysis of molecular epidemiology in population of blood donors [J].China Journal of Modern Medicine,2006,16(21):3301-3304.

Chinese

[19]ZHANG P,XI D,NING Q,et al.Gold nanoparticle probes application

in detection for HIV RNA[J].China Journal of Modern Medicine, 2007,17(13):1552-1555.Chinese

[20]M A XJ,CHU ZH,LI W,et al.Aanlyis of15648recipients anti-HIV

antibody before transfusion[J].Chinese Journal of Clinical Laboratory Science,2004,22(6):472.Chinese

中国现代医学杂志第22卷

(工作规范)湖北省艾滋病检测实验室管理及资质认定工作规范

1 目的 为规范我省艾滋病检测实验室资质认定评审工作，明确资质认定的范围和形式；保证资质认定工作规范及评审结果客观、公正和准确，提高省艾滋病检测实验室管理工作质量，特制定本规程。 2 范围 本规程适用于湖北省艾滋病检测实验室资质认定工作，可供全省各级验收工作组相关工作人员和评审员使用。也可供各类艾滋病检测实验室在申请资质认定准备工作和日常管理中参考。 3引用文件及技术资料 1)《全国艾滋病检测工作管理办法》 2)《湖北省艾滋病检测工作管理实施办法》 3)《全国艾滋病检测技术规范》（2004年版） 4)《实验室生物安全通用要求（GB 19489－2004）》 5)《实验室资质认定评审准则》 6)《医学实验室质量和能力认可准则（CNAS-CL02:2006/ISO 15189:2007）》 7)《省疾病预防控制中心关于下发<湖北省艾滋病检测实验室相关操 作规程及检测工作记录（试行）>的通知》 4 艾滋病检测实验室的类型：分为艾滋病检测确证实验室和艾滋病检测筛查实验室两类，后者包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点三种。

5 组织管理 5.1湖北省卫生厅是全省艾滋病检测实验室管理资质认定的主管部门，负责全省艾滋病检测实验室的监督管理和发证工作。 5.2各级验收工作组 5.2.1省艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“省验收工作组”）设在省疾病预防控制中心质量技术管理办公室，负责受理全省艾滋病确证实验室、市州级疾病预防控制机构筛查中心实验室的申请、资料审核和安排初审，对已完成初审的初筛实验室安排现场评审。 5.2.2市、州卫生行政部门应成立市级艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“市级验收工作组”）负责受理本辖区艾滋病筛查实验室的申请、资料审核和安排初审，对已完成初审的艾滋病检测点安排现场评审。 5.2.3 县(市、区)卫生行政部门应成立县级艾滋病检测实验室验收工作组（以下简称“县级验收工作组”），负责受理辖区内艾滋病检测点的申请、资料审核和安排初审。 5.3 评审组 5.3.1 评审员管理 5.3.1 评审员的基本条件：从事艾滋病相关管理人员；从事与艾滋病检测相关的技术人员；大专以上学历或中级以上技术职称；热爱艾滋病检测实验室管理工作；卫生行政主管部门审核并经培训考核合格者。 5.3.2 评审员的基本素质要求 5.3.2.1 熟悉《全国艾滋病检测工作管理办法》、《省艾滋病检测工作管理实施办法》、《全国艾滋病检测技术规范》（2004年版）、《实验室生物安

HIV实验室ELISA检测方法

人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒（酶联免疫法） 1 试剂信息 试剂厂家：北京万泰生物药业股份有限公司 2 样本要求 2.1 本试剂使用样品为人血清或血浆，含有EDTA、柠檬酸钠或肝素等抗凝剂的样品可用于本实验。 2.2 不能检测含悬浮纤维蛋白或聚集物，重度溶血的样品。 2.3 样品中应无微生物，可在2-8℃储存1周，长期储存应低温冻存，避免反复冻融。 2.4 使用前请将样品室温平衡30分钟以上，冷冻样品实验前需混匀。 3 检测步骤 3.1 配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水20倍稀释。 3.2 编号：将样品对应微孔板按序编号，每板应设阴性对照3孔，阳性对照1型、2型各1孔、空白对照1孔。 3.3 加样：分别在相应孔中加入待测样品或阴、阳性对照100μL。 3.4 温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。 3.5 洗板：小心揭掉封板膜，用洗板机洗涤5遍，最后一次尽量扣干。 3.6 加酶：每孔加入酶标试剂100μL，空白孔除外。 3.7 温育：用封板膜封板后，置37±1℃温育60±2分钟。 3.8 洗板：操作同步骤5。 3.9 显色：每孔加入显色剂A、B液各50μL，轻轻震荡混匀，37±1℃避光显色30±1分钟。 3.10 测定：每孔加入终止液50μL，轻轻振荡混匀，10分钟内测定结果。 4 参考值 临界值（CUTOFF）计算：临界值=阴性对照A均值+0.12. 5 检验结果的解释 5.1 阴性对照孔A值≦0.10，阳性对照A值≧0.80，否则试验无效。 5.2 若有1孔阴性对照A值大于0.1应舍弃，若两孔或两孔以上阴性对照A值大于0.1，应重复试验。

5.3 阴性判定：样品A值<临界值（CUTOFF）者为HIV抗体阴性。 5.4 阳性判定：样品A值≧临界值（CUTOFF）者为HIV抗体阳性。（注意：初试阳性应重新取样双孔复试。复试阳性者应按《全国艾滋病检测技术规范》送HIV确证实验室进行确证实验。）

全国艾滋病检测技术规范(2015年修订版)

附件1 全国艾滋病检测技术规范 National Guideline for Detection of HIV/AIDS （2015年修订版） 中国疾病预防控制中心 二○一五年十二月

全国艾滋病检测技术规范National Guideline for Detection of HIV/AIDS （2015年修订版） 中国疾病预防控制中心 二○一五年十二月

前言 艾滋病在我国的流行已数十年，随着感染者和临床病人的不断增加、感染人群的变化，艾滋病检测工作量逐渐加大，对监测和检测的需求也不断增加，承担艾滋病检测的实验室已遍及全国各级医疗、疾病预防控制、采供血、妇幼保健机构，出入境检验检疫、军队等各个系统。为了尽早发现HIV感染者和艾滋病病人，及早提供咨询、治疗，同时为适应基层艾滋病检测工作需求，在新的形势下，根据《关于艾滋病抗病毒治疗管理工作的意见》、《中国预防与控制艾滋病中长期规划（1998—2010年）》、《中国遏制与防治艾滋病十二五行动计划的通知（国办发[2012]4号）》、“四免一关怀”等国家艾滋病防治重要方针政策和十三五防治工作重点，在广泛征求各省、市疾病预防控制机构和医疗机构意见的基础上，在中华人民共和国卫生和计划生育委员会艾滋病专家及省级专家的参与下，中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心对《全国艾滋病检测技术规范（2009年版）》进行修改、增补和完善，制定出《全国艾滋病检测技术规范（2015年版）》（以下简称《规范》），使其既能满足目前艾滋病检测工作的实际需求，又能体现检测技术的发展。 本次《规范》修订工作立足于我国目前检测状况，结合发达国家使用的指南，主要对以下几个方面内容进行了修改、增补和完善：（1）完善了不同的检测策略，并将其整合为独立的一章；（2）增加了HIV-1新

HIV抗体检测

第二章 HIV抗体检测 1 范围 本章规定了HIV抗体的检测方法、检测程序、检测报告及检测策略，适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生保健机构。可作为对HIV感染者/AIDS 病人的诊断、报告和处理的实验室依据。 2 规范性引用文件 Revised recommendations for the selection and use of HIV antibody tests. WHO/UNAIDS Revised version 2001. 实验室生物安全通用要求（GB 19489-2004）。 3 HIV抗体检测实验室 应符合《全国艾滋病检测工作规范（1997年版）》中对检测实验室人员、建筑设施和设备等条件的要求。 应符合《实验室生物安全通用要求》（GB 19489-2004）对II级生物安全实验室（BSL-2）的各项要求。 实验室的质量保证按本规范第八章规定执行。 实验室安全防护按本规范第七章规定执行。 4 HIV抗体检测的目的和要点 4.1 HIV抗体检测的目的 4.1.1 HIV抗体检测可用于监测、诊断、血液筛查。 4.1.2 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。 4.1.3 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。 4.1.4 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV而进行的检测，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 4.2 HIV抗体检测的要点 4.2.1 筛查试验阳性不能出阳性报告。 4.2.2 严格遵守实验室标准操作程序（SOP）。 4.2.3 严格按照试剂盒说明书操作。 4.2.4 注意防止样品间交叉污染。

艾滋病检测实验室的安全防护措施和要求(一)

艾滋病检测实验室的安全防护措施和要求(一) 艾滋病检测实验室人员安全防护工作对预防及减少意外事故的发生，提供意外事故发生时的处理方法，明确制定“艾滋病实验室安全防护和要求”是十分必要的。 1艾滋病检测实验室的安全操作和防护措施除做好对临床实验室10条要求外，还应做到以下8点： 1.1具有高度的实验室全安防护意识： 1.1.1实验室审评专家验收考核时，应对设备和实验室安全时行评估，对提出的意见和指出的隐患要及时改进。 1.1.2建立本实验室的安全－标准操作程序，这些程序适用于现有实验条件，并与其他规则和操作过程相一致。 1.1.3无论是否有意外发生和新的危险出现，每年均要对安全－标准操作程序及实施情况进行检查。 1.2接受严格的培训和复训：所有工作人员都必须经过培训，并要接受实验管理人员的监督， 所有工作人员均有责任保证自己和他人的工作安全。 1.3注意个人保健： 1.3.1注意个人保健对于减少感染的危险性很重要。皮肤受损、患病都会增加感染的危险性。很小的伤口和擦伤都应以防水的敷料覆盖。 1.3.2进实验室前要摘除首饰，修剪长的、带刺的手指甲，以免刺破手套。 1.3.3进入实验室应穿隔离衣、戴手套，必要时戴两层手套和防护眼镜。 1.3.4切忌用嘴吸液，避免用锐利的器材和玻璃器皿，以减少刺伤机会。 1.3.5在脱去隔离衣，离开实验室前必须洗手。 1.4人员： 1.4.1实验室工作人员只限于被批准的、按艾滋病检测工作规范培训合格的人员。实验室工 作人员要有安全防护意识，熟悉生物安全知识和消毒技术。 1.4.2在安排工作人员的实验室区域时，要根据其工作的各类和所涉及的生物试剂，对实验室环境做好安全检查。 1.4.3严格执行实验室工作人员年度采血检测HIV抗体和备案制度。 1.5血清及其他体液样品：所有的样品均应严格按要求妥善保存，HIV抗体阳性样品应做好标记单独保存。 1.6带入及带出实验室的物品： 1.6.1所有带入实验室的包裹都应经过检查。 1.6.2装有样品、细菌或病毒株及有毒物的包裹应在安全柜或其他适当的消毒装置内打开。 1.6.3在将HIV/AIDS样品转到其他实验室时，实验室负责人和指定人员应确定样品送达哪个实验室。 1.6.4向实验室运送样品时，应防止对工作人员、患者或环境造成污染。 1.6.5应将样品放入可靠、安全防漏的容器中运输。所有样品应装入密封塑料管内，样品管外面套上塑料袋，一并装入有缓冲垫的冷藏瓶内，做好标记。 1.6.6护送者应了解接受者，并保证这些材料被转入安全位置，得到安全的处理。

艾滋病检测筛查实验室基本标准

艾滋病检测筛查实验室基本标准 （一）艾滋病筛查中心实验室及艾滋病筛查实验室。 1、人员条件 至少由3名医技人员组成，其中具有中级卫生技术职称人员至少1名。负责筛查试验的技术人员需具有2年以上从事病毒性疾病血清学检测工作经验，接受过省级以上艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。 2、建筑条件：实验室或检测区域应分为清洁区、半污染区和污染区，应符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。 3、仪器设备条件 配备艾滋病病毒抗体筛查试验所需设备，至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、水浴箱（或温箱）、离心机、加样器（仪）、消毒与污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜。 （二）艾滋病检测点。 1、人员条件：至少由2名经过艾滋病检测技术培训并获得培训证书的专业人员组成。 2、建筑条件：需有艾滋病检测区域或专用实验台，能开展简便、快速检测。 3、设备条件：需配备快速试验所必须的物品，包括普通冰箱、消毒与污物处理设备、一次性消耗品、安全防护用品。

艾滋病检测筛查实验室职能 包括艾滋病筛查中心实验室、艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点。艾滋病筛查中心实验室设在市（地）级疾病预防控制中心；艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点可设在疾病预防控制机构、医疗机构、采供血机构、计划生育技术服务机构等。 1、艾滋病筛查中心实验室职能。 （1）负责职责范围内艾滋病病毒抗体筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报艾滋病检测确证实验室。配合艾滋病检测确证实验室做好个案调查、登记等随访工作。 （4）负责对职责范围内艾滋病检测筛查实验室的技术指导；协助艾滋病筛查实验室和艾滋病检测点开展自愿咨询检测工作，给予技术支持和指导。 2、艾滋病筛查实验室职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验，根据需要可开展其他艾滋病检测工作。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查中心实验室或艾滋病检测确证实验室。 （4）对自愿咨询检测工作提供技术支持。 3、艾滋病检测点职能。 （1）开展艾滋病病毒抗体的筛查试验。 （2）负责将艾滋病病毒抗体筛查呈阳性反应的样品送当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （3）定期汇总艾滋病检测资料，并上报当地艾滋病筛查实验室或艾滋病筛查中心实验室。 （4）开展艾滋病自愿咨询检测工作。

HIV抗体检测技术规范

HIV抗体检测技术规范 1 范围 本章规定了HIV抗体的检测方法、程序、结果报告、检测策略及质量控制。适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生保健机构。可作为对HIV感染者诊断和监测的实验室依据。 2 规范性引用文件 《艾滋病和艾滋病病毒感染诊断标准》（中华人民共和国卫生行业标准，WS293-2008） Guidance for HIV testing in the Western Pacific Region. WHO Draft 19 July 2008. Statement from the Surveillance and Survey Working Group and the Laboratory Working Group to the Office of the Global AIDS Coordinator.26 Nov.2006. Guidelines for the use of the BED assay for incidence estimation and surveillance in resource-limited countries. Atlanta, 5 June 2006. Revised Guidelines for HIV Counseling, Testing, and Referral. U.S. CDC 2001. Current HIV-2 diagnostic strategy overestimates HIV-2 prevalence in China. Journal of Medical Virology,

常用的HIV诊断方法

HIV/AIDS艾滋病诊断是一个十分严肃的问题，任何诊断的错误结果无论是假阴性还是假阳性，对家庭和社会都会造成十分严重的后果。HIV检测是诊断HIV感染及艾滋病的重要实验室依据之一，要知道是否感染了HIV可以通过检测病毒的抗体、抗原、核酸或通过病毒培养来确定。常用于诊断HIV/AIDS的方法是HIV抗体检测，它是诊断HIV/AIDS的主要指标，也是世界卫生组织和我国卫生部推荐使用的HIV感染诊断方法。为了最大限度地保证诊断结果准确，HIV诊断采用特殊的检测策略，即先用敏感性高的初筛试剂进行初筛，如果阳性再用特异性强的确认试剂进行确认。检测HIV抗体常用的初筛方法有酶联免疫吸附试验(ELISA)、凝集试验和各种快速诊断方法，确认的方法有蛋白印迹法(WB)、放射免疫沉淀试验(RIP)、间接免疫荧光试验(IFA)等。一般先用ELISA做初筛试验;如果阳性，再用蛋白印迹法来确认。以下介绍一下较常用的HIV抗体测定的方法。 一．初筛试验方法 1．酶联免疫吸附试验（ELISA） 酶联免疫吸附试验简称酶标法，是最常用初筛检测方法，在HIV抗体的测定中有四种模式：间接法、双抗原夹心法、捕获法和竞争法，其中以间接法用的最多。 1）间接法：将HIV抗原纯化后固定于微孔板上，然后加入待测标本，清洗后加酶标记抗人免疫球蛋白（IgG），清洗后加入底物，产生有色反应即为阳性。（见图1） 2）双抗原夹心法：将HIV抗原固定于微孔板上,然后加入待测标本，清洗后加入酶标记的HIV抗原，清洗后加入底物，产生有色反应即为阳性。（见图2）

3）捕获法：将非特异性的兔抗人免疫球蛋白抗体固定于微孔板上，然后加入待测标本,清洗后加入酶标记的HIV抗原，清洗后加入底物，产生有色反应即为阳性。（见图3） 4）竞争法：：将HIV抗原固定于微孔板上,然后同时加入待测标本和一定数量的酶标HIV抗体，如果标本中有HIV抗体,即与加入的酶标HIV抗体竞争结合固定在微孔板上的抗原，标本中HIV抗体量越多，结合在固相上的酶标抗体就愈少，清洗后加入底物。结果判断与间接法相反，产生有色反应即为阴性，无色反应的为阳性（见图4）

HIV抗体检测

HIV抗体检测

第二章 HIV抗体检测 1 范围 本章规定了HIV抗体的检测方法、检测程序、检测报告及检测策略，适用于各级各类医疗机构、疾病预防控制机构、检验检疫机构、采供血机构及卫生保健机构。可作为对HIV感染者/AIDS病人的诊断、报告和处理的实验室依据。 2 规范性引用文件 Revised recommendations for the selection and use of HIV antibody tests. WHO/UNAIDS Revised version 2001. 实验室生物安全通用要求（GB 19489-2004）。 3 HIV抗体检测实验室 应符合《全国艾滋病检测工作规范（1997年版）》中对检测实验室人员、建筑设施和设备等条件的要求。 应符合《实验室生物安全通用要求》（GB 19489-2004）对II级生物安全实验室（BSL-2）的

各项要求。 实验室的质量保证按本规范第八章规定执行。 实验室安全防护按本规范第七章规定执行。 4 HIV抗体检测的目的和要点 4.1 HIV抗体检测的目的 4.1.1 HIV抗体检测可用于监测、诊断、血液筛查。 4.1.2 以监测为目的的检测是为了解不同人群HIV感染率及其变化趋势而进行的检测，检测的人群包括各类高危人群和一般人群。 4.1.3 以诊断为目的的检测是为了确定个体HIV 感染状况而进行的检测，包括临床检测和自愿咨询检测、术前检测、根据特殊需要进行的体检等。4.1.4 以血液筛查为目的的检测是为了防止输血传播HIV而进行的检测，包括献血员筛查和原料血浆筛查。 4.2 HIV抗体检测的要点 4.2.1 筛查试验阳性不能出阳性报告。 4.2.2 严格遵守实验室标准操作程序（SOP）。 4.2.3 严格按照试剂盒说明书操作。 4.2.4 注意防止样品间交叉污染。

艾滋病检测实验室基本标准

艾滋病检测实验室基本标准 一、艾滋病参比实验室 (一)人员条件。 由10名以上医技或科研人员组成,其中具有高级卫生技术职称人员至少5名,中级卫生技术职称人员至少3名。高级技术负责人需具有5年以上艾滋病病毒检测和研究经验,接受过国际或国家级艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。 (二)建筑条件。 需有独立的符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求的以下建筑区域,包括血清学检测、质量控制、核酸检测、基因序列测定及分析、免疫学检测、血清库和冷库等,并将建筑区域分为清洁区、半污染区和污染区。具有满足艾滋病病毒分离、培养与扩增、浓缩与纯化、中和试验等需要的三级生物安全实验室(BSL-3)。 (三)仪器设备条件。 配备血清学检测、病原学检测、核酸检测、基因序列测定、免疫学检测设备和三级生物安全实验室(BSL-3)所需仪器设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、病毒载量测定仪、

基因序列测定仪和流式细胞仪、普通冰箱、低温冰箱、超低温冰箱、水浴箱、温箱、离心机、旋转震荡器、摇床、加样器(仪)、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、实验室恒温设备、安全防护用品和生物安全柜等。具有建立国家艾滋病病毒毒种库、检测样品库、质控品库、基因库、细胞库和数据库的设备条件。 二、艾滋病检测确证实验室 (一)人员条件。 至少由5名医技人员组成,其中专职人员至少2名,具有副高级卫生技术职称人员至少1名。负责确证试验的技术人员需具有3年以上从事艾滋病病毒抗体检测工作经验、接受过省级以上艾滋病检测技术培训,并获得培训证书。 (二)建筑条件。 需有独立的血清学检测实验室,分为清洁区、半污染区和污染区,符合二级生物安全实验室(BSL-2)要求。根据需要可设置核酸检测、免疫学检测等建筑区域。 (三)仪器设备条件。 配备血清学检测和二级生物安全实验室(BSL-2)所需仪器设备,至少包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、低温

艾滋病的实验室检测流程

艾滋病的实验室检测流程 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心继发布《全国艾滋病检测技术规范(xx 年版)》后，近日即将发布 xx 年版《全国艾滋病检测技术规范》，此规范堪称艾滋病检测实验室的「红宝书」，适用于疾病控制中心艾滋病确认实验室和医疗机构的艾滋病初筛实 验室的 HIV 检测技术操作。下面是为大家带来的艾滋病的实验室检测流程的知识，欢迎阅读。 检测项目的样品种类 1 HIV 抗体检测：全血、血清、血浆、口腔黏膜渗出液、尿液以及干血斑样品。 2 HIV 抗原检测：全血、血清、血浆、病毒培养上清液。 3 T 淋巴细胞亚群测定：EDTA 或肝素抗凝全血。 4 HIV-1 病毒载量、基因型、耐药检测：血浆、滤纸干血斑(DBS)。 5 HIV 核酸定性与定量、基因型检测和 HIV-1 分离培养：淋巴细胞富集液、外周血单核淋巴细胞(PBMC)及全血。 当然，实验室最常用的仍然是血液标本，其他只作为补充样本。 HIV 抗体检测 HIV 抗体检测是艾滋病实验室检测的优先选择项目，在国内绝大多数初筛实验室应用最广泛。 1 初筛方法 (1)酶联免疫吸附试验(ELISA)

ELISA 法检测 HIV 抗体是 HIV 初筛实验室最常用最普遍的方法，目前检测试剂已经发展到 * ，即同时检测血液中 HIV-1P24 抗 原和 HIV-1/2 抗体，秉承「宁可错杀一千，不可漏网一个」的革命 精神，其灵敏度远高于特异性，直叫 HIV 抗体无处遁形。 (2)化学发光或免疫荧光试验(CIA/IFA) 这个试验方法是近 10 年迅猛发展的一种新型检测方法，其采 用发光或荧光底物，既可检测抗体，也可联合检测抗原抗体，用发光或荧光仪测定结果，其灵敏度较 ELISA 有了进一步的提高，同时带 来的是检测成本的增加和假阳性率的增高。 (3)快速检测(RT)方法 此类方法操作简便快速，适用于应急检测、门诊急诊检测，但 灵敏度和特异性远不如 ELISA 和发光法，但是经济实惠，也有一定 的市场影响力。主要包括以下几种方法：明胶颗粒凝集试验(PA)、免疫渗滤试验、免疫层析试验。 2 确认实验 (1)免疫印迹试验(WB) WB 采用间接法检测样品中的抗 HIV-1/HIV-2 特异性抗体。采 用聚丙烯酰胺凝胶电泳把分子量大小不等的 HIV-1 蛋白分离开来， 经过一系列处理后，硝酸纤维素膜显示与特异抗原的结合的抗体条带，从而确诊抗体的存在。 (2)条带/线性免疫试验(RIBA/LIA) 实验原理基本同 WB 法，不再赘述。

两种HIV抗体检测方法与确证方法比较

两种HIV抗体检测方法与确证方法比较 发表时间：2012-07-24T16:04:40.597Z 来源：《中外健康文摘》2012年第13期供稿作者：马金旗 [导读] 两种HIV抗体检测方法与确证方法比较，选择适合输血前筛查HIV感染患者的方法。 马金旗 (中南大学湘雅三医院湖南长沙410013) 【中图分类号】R575【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2012）13-0280-02 【摘要】目的两种HIV抗体检测方法与确证方法比较，选择适合输血前筛查HIV感染患者的方法。方法用酶联免疫吸附试验(抗- HIV ELISA)对48621例输血前标本进行HIV抗体筛查，对阳性标本进行金标法测定，同时随机抽取的20例阴性标本也进行金标法测定，作为对照。对任一试剂检测阳性的标本和对照标本都按规定送检HIV确诊实验室进行确证［1］。结果抗-HIV ELISA法特异性较高，达92.0%，HIV金标法特异性高，达98.7%，与确证方法接近。结论抗-HIV ELISA法特异性较高，特别适合批量标本的检测，可以作为临床HIV初筛试验。用金标特异性高操作简便，快速，对ELISA法检测出的阳性标本进行复检，能较快确认标本HIV阳性可能性，评估感染的风险程度。两种方法可相互结合，及时对患者做出诊断，及早采取措施保护职业暴露人员［2］。 【关键词】HIV AIDS ELISA人类免疫缺陷病毒获得性免疫缺陷综合征酶联免疫吸附试验 HIV抗体检测职业暴露 ADIS是一种严重危害人类健康的疾病，当前我国HIV流行呈逐年上升的趋势［3,4］，在一些高危人群中尤为严重。人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）是获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）的病原体，以侵犯CD4细胞为主，造成细胞免疫功能缺损，并继发体液免疫功能缺损为基本特征的传染病。其传播途径有三条：性接触传播、血液传播和母婴传播。血液传播途径与临床输血和接受血液制品相关，为了区分患者是否是由于接受血液和血液制品而感染HIV，我们对患者输血前血清样本进行HIV抗体检测。 对输血前标进行HIV抗体筛查，对阳性标本进行金标法测定，同时随机抽取的20例阴性对照标本也进行金标法测定。对阳性标本和对照标本送检HIV确诊实验室进行确证实验，现报道如下。 1 材料和方法 1.1 标本 2009年9 月至1日至2012年2月我科输血患者输血前的标本48621例分离血清后用ELISA法检测HIV抗体，初筛阳性55例，另随机抽取20例阴性结果的标本。 1.2 试剂 HIV ELISA试剂盒（珠海丽珠试剂股份有限公司提供）；胶体金试剂（天津中新科炬生物制药有限公司提供）。 1.3 仪器 RT-6100酶标工作站 (深圳雷杜生命科学股份有限公司)、RT-3000洗板机(深圳雷杜生命科学股份有限公司)。 1.4 试验方法用抗-HIV ELISA法检测全部标本,对阳性标本进行双孔复检，一孔或两孔阳性均视为阳性，获初筛阳性血清55份。对55份阳性标本和随机抽取20例阴性结果的标本用金标法检测，并送检此75份血清至湖南省疾病预防控制中心的 HIV确证实验室进行确证实验。以上各项试验操作及结果判读均严格按操作规程和试剂说明书进行,所有试剂均在有效期内。 2 结果 确认结果阳性即认为感染HIV病毒，阴性即认为未感染，在此基础上得出ELISA法和金标法的真实性指标（见表3）。金标法与确证方法的符合率很高可达到98.7%，漏检率低0.4%（见表3），ELISA法无漏检作为初筛方法是一种较好的方法，其特异性不是很高92.0%，用金标法对其阳性标本进行复查，可以得出与确证方法相近的结果。 表1 59例ELISA法、金标法和确证法检测结果分布情况（例数） 表2 两组患者术中、术后情况比较 表3 ELISA 、金标法与确证方法的符合率 3 讨论 抗HIV检测是一项较为特殊的检测，会涉及病人隐私、工作人员的职业防护、国家传染病防治等许多方面。出现假阳性会给病人造成巨大的精神压力，甚至会引起医疗纠纷，假阴性会漏检感染者，不利于早发现，早诊断，早治疗，早控制病情。 HIV无症状感染期可长达6个月至10年，最后发展为艾滋病，出现中枢神经系统等多器官多系统损害，合并各种条件致病菌、寄生虫、其它病毒感染，或并发肿瘤。5年死亡率约为90%，死亡多发生在出现临床症状的2年之内[5]。 血液传播途径与临床输血和接受血液制品相关，如果输入被HIV感染献血员的血液可能会感染HIV,即输血感染HIV，为了区分是输血前还是输血后感染，输血患者输血前应做抗－HIV的检测，这样既可以保护相关工作人员，也可以减少医疗纠纷，维护医院利益，还可以早发现感染患者，以便治疗及控制疫情。选择敏感性、特异性都高的检测方法有助HIV感染的诊断，HIV抗体的检测是最主要的检查方法，也是疾病预防控制中心规定的初筛实验室的检测方法［1］。 抗-HIV ELISA法特异性较高，特别适合批量标本的检测，可以作为临床HIV初筛试验。用金标特异性高,操作简便、快速，对ELISA法检测出的阳性标本进行复检，能较快确认标本HIV阳性可能性，评估感染的风险程度。两种方法可相互结合[1]，及时对患者做出诊断，及

艾滋病实验室的基本标准

艾滋病实验室的基本标准 一. 艾滋病参比实验室 1. 人员条件 至少由9名医技或科研人员组成, 具有高级卫生技术职称人员至少4名, 中级卫生技术职称人员至少3名。高级技术负责人需具有5 年以上艾滋病病毒检测和研究经验, 接受过国际或国家级HI V检测技术培训，并获得培训证书。 2. 建筑条件 需有独立的符合II级生物安全实验室（BSL-2）要求的以 下建筑区域和条件: 血清学检测、质量控制、核酸检测、基因序列测定及分析、免疫学检测、血清库和冷库等, 并将其分为清洁区、半污染区和污染区。HIV 病毒分离、细胞培养、HIV病毒研究需要有BSL-3级生物安全实验室。 3. 仪器设各条件配备血清学、病原学、核酸检测、基因序 列测定、免疫 学检测和BSL-3级生物安全实验室所需仪器设备。血清学和 病原学检测设各至少包括酶标读数仪、洗板机、基因序列测定仪和流式细胞仪、普通冰箱、低温冰箱、超低温冰箱、水浴箱、温箱、离心机、旋转震荡器、摇床、移液器、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、安全防护用品和实验室恒温设各等。核酸检测按照国务院卫生行政主管部门制定的有关规定执

行。BSL-3 级生物安全实验室按照《微生物和生物医学实验室生物安全通用准则》及《实验室生物安全通用要求（GB 19489-2004）》的有关规定执行。需要建立国家的艾滋病病毒毒种库、检测样品库、质控血清库、基因、细胞库和数据库。 二. 省艾滋病确认中心实验室 1. 人员条件 至少由5名医技（或科技）人员组成,具有高级卫生技术职称人员至少2名、中级卫生技术职称人员至少2 名。负责确认试验的技术人员需具有3年以上从事HI V抗体筛查工作 经验、接受过国家级或国际HI V检测确认试验技术培训，并 获得培训证书。 2. 建筑条件 需有独立的符合II级生物安全实验室（BsL2）要求的以下建筑区域和条件: 血清学检测、质量控制、血清库和冷库等并将其分为清洁区、半污染区和污染区。建立省内的艾滋病检测样品库、质控血清库和数据库。根据需要可设置核酸检测、免疫学检测室等。开展HI V病毒分离等研究工作者，需 要有BSL-3 级生物安全实验室。 3. 仪器设备条件 配备筛查试验和确认试验所需设备, 包括酶标读数仪、洗板机、普通冰箱、低温冰箱、超低温冰箱、水浴箱、温箱、离心机、旋转震荡器、摇床、移液器、专用计算机和必要的摄像器材、消毒和污物处理设备、安全防护用品和实验室恒温设备。要

两种HIV抗体检测方法与确证方法比较

两种HIV抗体检测方法与确证方法比较 摘要】目的两种HIV抗体检测方法与确证方法比较，选择适合输血前筛查HIV 感染患者的方法。方法用酶联免疫吸附试验(抗-HIV ELISA)对48621例输血前标本进行HIV抗体筛查，对阳性标本进行金标法测定，同时随机抽取的20例阴性标本也进行金标法测定，作为对照。对任一试剂检测阳性的标本和对照标本都按规定送检HIV确诊实验室进行确证［1］。结果抗-HIV ELISA法特异性较高，达92.0%，HIV金标法特异性高，达98.7%，与确证方法接近。结论抗-HIV ELISA法特异性较高，特别适合批量标本的检测，可以作为临床HIV初筛试验。用金标特异性高操作简便，快速，对ELISA法检测出的阳性标本进行复检，能较快确认标本HIV阳性可能性，评估感染的风险程度。两种方法可相互结合，及时对患者做出诊断，及早采取措施保护职业暴露人员［2］。 【关键词】HIV AIDS ELISA人类免疫缺陷病毒获得性免疫缺陷综合征酶联免疫吸附试验 HIV抗体检测职业暴露 ADIS是一种严重危害人类健康的疾病，当前我国HIV流行呈逐年上升的趋势［3,4］，在一些高危人群中尤为严重。人类免疫缺陷病毒（human immunodeficiency virus，HIV）是获得性免疫缺陷综合征（acquired immunodeficiency syndrome，AIDS）的病原体，以侵犯CD4细胞为主，造成细胞免疫功能缺损，并继发体液免疫功能缺损为基本特征的传染病。其传播途径有三条：性接触传播、血液传播和母婴传播。血液传播途径与临床输血和接受血液制品相关，为了区分患者是否是由于接受血液和血液制品而感染HIV，我们对患者输血前血清样本进行HIV抗体检测。 对输血前标进行HIV抗体筛查，对阳性标本进行金标法测定，同时随机抽取的20例阴性对照标本也进行金标法测定。对阳性标本和对照标本送检HIV确诊实验室进行确证实验，现报道如下。 1 材料和方法 1.1 标本 2009年9 月至1日至2012年2月我科输血患者输血前的标本48621例分离血清后用ELISA法检测HIV抗体，初筛阳性55例，另随机抽取20例阴性结果的标本。 1.2 试剂 HIV ELISA试剂盒（珠海丽珠试剂股份有限公司提供）；胶体金试剂（天津中新科炬生物制药有限公司提供）。 1.3 仪器 RT-6100酶标工作站 (深圳雷杜生命科学股份有限公司)、RT-3000洗板机(深圳雷杜生命科学股份有限公司)。 1.4 试验方法用抗-HIV ELISA法检测全部标本,对阳性标本进行双孔复检，一孔或两孔阳性均视为阳性，获初筛阳性血清55份。对55份阳性标本和随机抽取20例阴性结果的标本用金标法检测，并送检此75份血清至湖南省疾病预防控制中心的 HIV确证实验室进行确证实验。以上各项试验操作及结果判读均严格按操作规程和试剂说明书进行,所有试剂均在有效期内。 2 结果 确认结果阳性即认为感染HIV病毒，阴性即认为未感染，在此基础上得出ELISA法和金标法的真实性指标（见表3）。金标法与确证方法的符合率很高可达到98.7%，漏检率低0.4%（见表3），ELISA法无漏检作为初筛方法是一种较好的方法，其特异性不是很高92.0%，用金标法对其阳性标本进行复查，可以得出与确证方法相近的结果。

艾滋病检测点标准操作规程(参考范本)

HIV抗体检测标准操作规程（SOP文件） 1、目的： 为了规范本卫生院艾滋病检测点的正常运行，保证艾滋病抗体检测的准确，确保实验室生物安全，特制定本操作规程。 2、适用范围： 适用于本卫生院艾滋病抗体检测从标本的采集、处理、检测到报告的全过程。 3、职责： 各检测工作人员按标准操作规程进行艾滋病抗体检测，本院艾滋病检测工作领导小组负责对检测活动全过程及各项生物安全措施执行情况进行监督。 4、标准操作程序： 4.1样品的采集和处理 4.1.1样品的采集： 4.1.1.1血清样品采集：用真空采血管抽取5mL静脉血，室温下自然放置1-2小时，待血清凝固和血块收缩后在用4000rmp离心15min，吸出血清备用。 4.1.1.2抗凝血样品采集：用加有抗凝剂的真空管或用消毒注射器抽取静脉血，转移至加有抗凝剂的试管，反复轻摇，分离血浆和血细胞备用。 4.1.1.3采样注意事项： 4.1.1.3.1采集样品应按临床采血技术规范及试剂盒说明书要求进行。 4.1.1.3.2采集标本时应注意安全，直接接触HIV感染者或艾滋病病人血液和体液的操作应戴双层手套。 4.1.2样品的保存： 用于抗体检测的血清或血浆样品应存放与-20℃以下，短期（1周）内进行检测的样品可存放于2-8℃。 4.1.3样品的运送： 4.1.3.1实验室间传递的样品应为血清或血浆，除特殊情况外一般不运送全血。样品应置于带盖的试管内，试管上应有明显的标记，标明样品的编号或受检者姓名、种类、采样时间。

4.1.3.2将试管放入专用带盖的容器内，容器的材料要易于消毒。在试管的周围垫有缓冲吸水材料，以免碰碎。 4.1.4样品的接收： 4.1.4.1含有感染性样品的包裹必须在具有处理感染源设备的实验室内由经过培训的工作人员打开，用后的包裹应进行消毒。 4.1.4.2核对标本与送检单，检查样品管有无破损及遗漏。如发现遗漏应立即将尚存留的样品移出、对样品管和盛器消毒，同时还要报告有关领导和专家。 4.2检验方法和步骤 4.2.2快速检测法（胶体金法） 4.2.2.1原理 采用胶体金免疫技术和层析原理，定性测定血清样本中的HIV1+2抗体。 4.2.2.2操作步骤 4.2.2.2.1将标本平衡至室温。 4.2.2.2.2将所需数量的测试卡从包装盒中拿出平衡至室温，打开铝箔包装袋，平置于台面上并编号（与样本编号相对应）。 4.2.2.2.3用微量加样器取试剂说明书规定的样本血清或血浆，加到测试卡的加样处。 4.2.2.2.4在试剂说明书规定的时间内观察结果。 4.2.2.3结果判定： 4.2.2.3.1阳性：在检测区和对照区位置出现两条紫红色条带。如果检测区的条带隐约可见，建议对该样本重复试验，并使用其他厂家的试剂确认。 4.2.2.3.2阴性：只在对照区出现一条紫红色条带。 4.2.2.3.3无效：对照区未出现紫红色条带。 4.2.2.3.4注意：在规定的时间内不论测试区内的色带颜色深浅与否均应判为阳性。 4.3仪器的使用和维护 4.3.1设立常用仪器的维护制度，以保证正常运转；根据使用情况更换必要的部件： 4.3.2冰箱 定期检查温度并作好记录，必须每天检查和记录冷冻和冷藏室的温度。 4.3.3定期检查其他仪器设备。 4.4 HIV抗体筛查结果的记录、解释与报告 4.4.1筛查试验呈阴性反应出具HIV抗体阴性报告。 4.4.2筛查试验呈阳性反应，可出具“HIV抗体待复检”报告，不能出阳性报告。同时应尽快进行以下处理： 4.4.2.1填写HIV抗体筛查报告，经检测者、复核者和签发者审核签字。 4.4.2.2尽可能重新采集受检者的血样。

HIV抗体检测实验室结果解释、报告工作规程

1目的 规范HIV抗体检测的结果解释、报告、追踪和处理的工作。 2适用范围 HIV抗体筛查、复检、确认检测工作 3 职责 3.1 检测人员负责检测原始记录的记录，检测报告的编制、审核，检测样品的登记等工作。 3.2 质量监督员负责监督，并做好相关的记录。 3.3 授权签字人负责检测报告的签发。 4 工作规程 4.1结果解释: 4.1.1 HIV抗体筛查试验阴性: 报告“HIV抗体阴性”，表示受检者未受HIV病毒感染。但由于HIV感染到能在血液中查到HIV抗体有一个“窗口期”，因此建议3个月后复查以排除感染“窗口期”。 4.1.2“窗口期”: 是指从被感染到身体产生足够多的特定抗体的这段时间，“足够多”是指能被我们当前的测试手段检测出来。人被感染后身体会制造抗体来对抗病毒，当身体产生足够多的抗体后，抗体测试将呈阳性。 4.1.3 HIV抗体筛查试验阳性: 不能出具阳性报告，需进行HIV抗体确证试验。如HIV抗体确证试验为阳性（确证试验结果判定参见《HIV抗体确证检测操作规程》），则报告“HIV 抗体阳性”，表示受检者已受到HIV病毒感染。 4.1.4 HIV抗体确证试验结果不能肯定则报告“HIV抗体不确定”。不确定结果是指在进行HIV抗体检测的确认试验时，试验条带上出现了蛋白带型，但按照《全国艾滋病检测工作规范》的要求，这些带型不足以诊断为HIV抗体

阳性。出现不确定结果应随访复检，每3个月随访复检1次，连续2次，共6个月。如果检测时暴露时间已超过3个月，则在3个月后随访1次即可。将前后2份样品同时检测，仍呈不确定或阴性则报告HIV抗体阴性，表明受检者没有感染；如果在随访期间发生带型进展，符合HIV抗体阳性判定标准则报告HIV-1或HIV-2抗体阳性。表明受检者已经感染HIV。

艾滋病实验室检测【最新】

艾滋病实验室检测 HIV/AIDS 的实验室检测主要包括HIV抗体检测、HIV核酸定性和定量检测、CD4+ T淋巴细胞计数、HIV耐药检测等。HIV?1/2抗体检测是HIV感染诊断的金标准，HIV核酸检测(定性和定量)也用于HIV 感染诊断;HIV 核酸定量(病毒载量)和CD4+ T 淋巴细胞计数是判断疾病进展、临床用药、疗效和预后的两项重要指标;HIV 耐药检测可为HAART方案的选择和更换提供指导。 1.HIV?1/2 抗体检测:包括筛查试验和补充试验。HIV?1/2抗体筛查方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光或免疫荧光试验、快速试验(斑点ELISA和斑点免疫胶体金或胶体硒、免疫层析等)、简单试验(明胶颗粒凝集试验)等。补充试验方法包括抗体确证试验(免疫印迹法，条带/线性免疫试验和快速试验)和核酸试验(定性和定量)。筛查试验呈阴性反应可出具HIV?1/2抗体阴性报告, 见于未被HIV感染的个体，但窗口期感染者筛查试验也可呈阴性反应。若呈阳性反应，用原有试剂双份(快速试验)/双孔(化学发光试验或ELISA)或两种试剂进行重复检测，如均呈阴性反应，则报告为HIV抗体阴性;如一阴一阳或均呈阳性反应，需进行补充试验。 补充试验:抗体确证试验无HIV特异性条带产生，报告HIV?1/2

抗体阴性;出现条带但不满足诊断条件的报告不确定，可进行核酸试验或2~4周后随访，根据核酸试验或随访结果进行判断。补充试验HIV?1/2 抗体阳性者，出具HIV?1/2抗体阳性确证报告。核酸试验:核酸定性检测结果阳性报告HIV?1核酸阳性，结果阴性报告HIV?1核酸阴性。病毒载量检测结果低于检测线报告低于检测线;>5 000拷贝/ml 报告检测值;检测线以上但≤5 000拷贝/ml建议重新采样检测，临床医生可结合流行病学史、CD4+、CD8+T淋巴细胞计数或HIV抗体随访检测结果等进行诊断或排除诊断。 2.CD4+T淋巴细胞检测 CD4+T淋巴细胞是HIV感染最主要的靶细胞，HIV感染人体后，出现CD4+T淋巴细胞进行性减少，CD4+/CD8+T淋巴细胞比值倒置，细胞免疫功能受损。目前常用的CD4+ T淋巴细胞亚群检测方法为流式细胞术，可以直接获得CD4+T淋巴细胞数绝对值，或通过白细胞分类计数后换算为CD4+T淋巴细胞绝对数。 CD4+T淋巴细胞计数的临床意义:了解机体免疫状态和病程进展、确定疾病分期、判断治疗效果和HIV感染者的临床并发症。 CD4+T淋巴细胞检测频率:需根据患者的具体情况由临床医师决定。一般建议:对于CD4+T淋巴细胞计数>350个/μl的(无症状)HIV感

艾滋病检测实验室基本标准

艾滋病检测实验室基本标准 一、艾滋病确证中心实验室 （一）人员条件。 由8名以上专职技术人员组成，其中具有高级卫生技术职称人员4名，中、初级卫生技术职称人员各2名。高级技术负责人需具有5年以上艾滋病病毒检测和研究经验，接受过国际或国家级艾滋病检测技术培训，并获得培训证书。 （二）实验室条件。 需有独立的符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求的以下实验区域，包括血清学检测、质量控制、核酸检测、基因序列测定及分析、免疫学检测、血清库和冷库等，并将实验区域分为清洁区、半污染区、污染区、确证区、消毒间。具有满足艾滋病病毒分离、培养与扩增、浓缩与纯化、中和试验等需要的三级生物安全实验室（BSL-3）。 （三）仪器设备条件。 1. 血清学检测： 检测设备至少包括全自动酶标仪、生物安全柜（生物安全II级）、加样器（10、20、100、200、1000μl）、连续加样器、普通冰箱、低温冰箱、超低温冰箱、水浴箱、普通离心机、高速离心机、旋转震荡器、全自动免疫印迹仪、高压蒸气灭菌器、干燥箱，恒温培养箱。 2. 病原学检测： 加样器（10、20、100、200、1000μl），生物安全柜（生物安全II级），旋涡震荡器，小型自动酶标仪，二氧化碳培养箱、倒置荧光显微镜（配备专用计算机和必要的摄像器材）、干烤消毒箱、液氮贮存箱、超声波清洗器、安全防护用品和实验室恒温设备等。

附注：实验需要在生物安三级全实验室中开展。 3. 核酸定性和定量检测： 试剂准备区：冰箱、超纯水机、真空干燥机、洁净工作台、高速离心机、加样器、振荡器、废弃物容器、紫外灯。 样品处理区：冰箱、生物安全柜、高速离心机、加样器、旋涡振荡器、恒温水浴箱、紫外灯。 扩增区：PCR仪、冰箱、小型高速离心机、加样器、废弃物容器、紫外灯。 扩增产物分析区：冰箱、小型高速离心机、加样器、电泳仪、恒温水浴、凝胶成像系统、上下水设备、基因序列测定仪、洁净工作台，紫外灯等。 测定HIV RNA应配备-80℃冰箱，上述其它冰箱为2-8℃和-20℃。 二、艾滋病检测确证实验室 （一）人员条件。 至少由5名医技人员组成，其中专职人员至少2名，具有副高级卫生技术职称人员至少1名。负责确证试验的技术人员需具有3年以上从事艾滋病病毒抗体检测工作经验、接受过艾滋病检测确证中心实验室的培训，并获得培训证书。 （二）实验室条件。 需有独立的血清学检测实验室，分为清洁区、半污染区、污染区、确证区、消毒间，符合二级生物安全实验室（BSL-2）要求。根据需要可设置核酸检测。 （三）仪器设备条件。 配备血清学检测和二级生物安全实验室（BSL-2）所需仪器设备，至少包括全自动酶标仪、全自动蛋白印迹仪、普通冰箱3至4台、低温冰箱、超低温冰箱、水浴箱（或温箱）、恒温培养箱、离心机、旋转震荡器、摇床、加样器（仪）、纯