动物球虫病实验室诊断技术

动物球虫病实验室诊断技术

一、实验目的及要求

1.熟悉球虫卵囊的形态特征。

2.掌握分离球虫卵囊的方法。

3.了解常见球虫的种类。

4.熟悉鸡球虫感染后的病变记分和粪便记分方法。

二、实验器材

1.仪器设备。上海XSP-2C生物显微镜（具备10倍目镜和低倍、高倍物镜及油镜）；目镜测微尺和物镜测微尺；盖玻片、载玻片、牙签、洗瓶、平皿；剪刀及手术刀；离心管；血细胞计数板。

2.实验材料。感染球虫的患鸡,常见的球虫卵囊,蔗糖、食盐、硫酸镁、铬硫酸、重铬酸钾等。

三、实验方法、步骤和操作要领

（一）球虫的形态观察

随宿主粪便排出的卵囊呈卵圆形、圆形或球形；无色、淡黄色或淡绿色，其形态大小随球虫种类而异。外被有两层囊壁，外壁较厚，轮廓清晰；内壁较薄。内含颗粒状的胞质(即原生质团)。卵囊内具有一至多个孢子囊，每个孢子囊内含有一至多个子孢子，因种类而异。艾美耳属的球虫种类经发育后，原生质团分裂为四个孢子囊，每个孢子囊内含有两个子孢子。有些种类的球虫在卵囊的极端具有明显的卵膜孔，有些球虫的卵囊内膜突出于卵膜孔之外，形成极帽。

畜禽常见球虫的种类：

1．牛球虫。文献报道的有10种，其中9种为艾美耳属（Eimeria）球虫，另外一种为阿沙卡等孢球虫（Isospora akscaica）。以邱氏艾美耳球虫(E. zurnii)致病力最强，牛艾美耳球虫(E.bovis)致病力较强，它们寄生于牛消化道的上皮细胞。

(1)邱氏艾美耳球虫(E. zurnii)。卵囊呈亚球形或球形，平均直径为18.6μｍ×14.6μｍ。淡黄色，无卵膜孔，胞质充满整个卵囊，无极体。卵囊孢子化时间为24～72小时。

(2)牛艾美耳球虫(E.bovis)。卵囊呈卵圆形，褐色，有卵膜孔，平均大小27.7μｍ×20.3μｍ，卵囊孢子化时间为48～72小时。

2. 兔球虫。种类很多，有16种，属艾美耳属。仅介绍两种如下。

(1)斯氏艾美耳球虫(E.stiedae)。寄生于肝、胆管上皮细胞内。致病力最强。卵囊甚大，长椭圆形，大小为26～40μｍ×16～25μｍ，略带淡红色，囊壁较厚，具卵膜孔。

(2)穿孔艾美耳球虫(E.perforans)。寄生于肠上皮细胞内。卵囊甚小，椭圆形，两端较钝，无色，大小为13.3～30.6μｍ×10.6～17.3μｍ，卵膜孔不明显。

3. 鸡球虫。报道的有9个种，属艾美耳属，世界公认的有7个种。

(1) 柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)。寄生于盲肠，多为宽卵圆形，少数为椭圆形，原生质呈淡褐色，卵囊壁为淡黄绿色（图17-1）。其卵囊平均大小为22μｍ×19μｍ，形状指数为1.16，裂殖体很大，直径可达54μｍ，第一代裂殖体包含的裂殖子可达900个，第二代为350个，最短孢子化时间为18ｈ，最短潜隐期为115ｈ。

图17-1柔嫩艾美耳球虫卵囊

(2) 毒害艾美耳球虫（E.necatrix）。其第一、二代裂殖生殖在鸡小肠，第三代裂殖生殖和配子生殖在盲肠。卵囊呈卵圆形，大小为13.2～22.7μｍ×11.3～18.3μｍ，囊壁无色、光滑。具极粒，孢子囊呈卵圆形，有斯氏体，无残体（见图17-2）。

图17-2毒害艾美耳球虫卵囊

(3) 堆型艾美耳球虫（E.acervulina）。寄生于十二指肠。卵囊呈卵圆形，大小为17.7～20.2μｍ×13.7～16.3μｍ。光滑，卵囊壁淡黄绿色。孢子囊呈卵圆形，有斯氏体，具极粒，无残体（图17-3）。

图17-3堆型艾美耳球虫卵囊

(4) 布氏艾美耳球虫（E.brunetti）。寄生于小肠后段、直肠和盲肠近端区。卵囊平均大小为18.8μｍ×24.6μｍ，是鸡球虫中仅次于巨型艾美耳球虫的第二大型卵囊。形状指数为 1.31。有一极粒，无残体和卵膜孔。裂殖体直径为30μｍ。孢子化时间为18ｈ，潜隐期为120ｈ。

(5) 巨型艾美耳球虫(E.maxima)。寄生于小肠中段。卵囊很大，是鸡球虫中最大型的卵囊，最大的卵囊达到42.5μｍ～29.8μｍ。卵囊呈卵圆形，一端钝圆，一端较窄，黄褐色，囊壁浅黄色。其形状指数为1.47。最大的裂殖体直径为9.4μｍ。（图17-4）。

图17-4 巨型艾美耳球虫卵囊

(6) 和缓艾美耳球虫(E.mitis )。 寄生于鸡小肠前段。卵囊较小，近球形，卵囊壁为淡黄绿色，有一极粒，无卵膜孔，也无残体。卵囊平均大小为15.6μｍ×14.2μｍ，最短孢子化时间为15h.（图17-5）。

(7) 早熟艾美耳球虫（E.praecox ）。 寄生于小肠上段1／3处。卵囊呈卵圆形或椭圆形，平均大小为21.3μｍ×17.1μｍ，形状指数为1.24，囊壁光滑，呈淡黄绿色，原生质无色，无卵膜孔和残体，具极粒。孢子囊无残体。（图17-6）。

4. 鸭球虫。 鸭球虫常见于北京鸭群中，对北京鸭具有致病力的球虫有两种。（图17-7）。

（1）毁灭泰泽球虫（Tyzzeria perniciosa ）。 寄生于小肠前段，致病力强。卵囊呈短椭圆形，较小，呈淡绿色，，大小为13.2～9.2μｍ×9.9～7.2μｍ，形状指数为1.2。无孢子囊，8个子孢子呈香蕉状，大小为7.2μｍ×2.7μｍ。

（2）菲莱氏温杨球虫（Wenyonella philiplevinei ）。 寄生于小肠，致病力弱。卵囊呈卵圆形，浅淡绿色，外层薄而透明，内层浅蓝，大小为22～13μｍ×12～10μｍ，有卵膜孔，形状指数为1.5。孢子囊呈瓜子形，大小为7.2μｍ×4.8μｍ，具斯氏体。

（二）卵囊的分离与孢子化

1．卵囊的分离。 卵囊存在于宿主粪便和组织中。分离粪便中的卵囊较多采用饱和食盐(或硫酸镁、蔗糖等)溶液漂浮法和离心法；分离组织中的卵囊一般采用铬硫酸分离法和蛋白酶消化法。单卵囊分离法是指从混合虫种的卵囊中分离出单个卵囊，以备进一步扩增所需的“克隆”卵囊。

尽管有许多分离卵囊的方法，但其基本原理是一样的，即根据卵囊与杂质比重的不同。对于组织中图17-5和缓艾美耳球虫卵囊

图17-6 早熟艾美耳球虫卵囊 图17-7 鸭球虫卵囊

1.毁灭泰泽球虫

2. 菲莱氏温杨球虫

的卵囊，尚需借助消化液或酸的作用，破坏组织中的细胞，以利卵囊的提纯。

（1）漂浮法。可用很多种溶液和很多种方法，其关键是溶液的比重要适当(一般 1.2左右)；再者，溶液对卵囊的活性没有不良影响。这里介绍几种常用方法：

①糖溶液漂浮法。

a. 糖溶液的制备。称500g糖和6.5g石碳酸(或6～7ml石碳酸溶液)溶于320ml蒸馏水中即可。此法配制的溶液也常称为Sheather氏糖溶液。

b.卵囊的分离。

(a) 在一容器里将粪便和2倍于粪便体积的自来水(或生理盐水，或食用专用洗剂如 0.5%莱喷液等)混成均匀的悬浮液。

(b) 将粪便混悬液经两层粗棉布(或先经50目后经100～200目网筛)滤到第二个容器中，再与等量Sheather氏糖溶液混合，而后将混合液注入离心管中。

(c) 离心(3000rpm，3min)。

(d) 用直径略小于离心管口径的捞网(20～50目)捞取表层浮液,抖落于另一盛水容器中。水的多少视卵囊的多少而定，卵囊多带进的糖溶液也多，应多加水稀释。

(e) 离心(3000rpm，3min)，沉淀物即为所需卵囊。

②饱和食盐溶液漂浮法。

a.饱和食盐溶液的配制。在1000m1开水中加食盐380g，充分搅拌，比重约为1.18。

b.卵囊的分离。

(a) 将粪便和5倍于粪便体积的生理盐水搅成混悬液。

(b) 将粪便混悬液经两层粗棉布(或先经50目后经100～200目网筛)滤过到第二个容器中，并将第二个容器中的滤过液倒入离心管中。

(c) 离心(3000rpm，3min)，弃去上清液。

(d) 向沉淀中加入10倍的饱和盐水(先加少许，充分混匀后再加其余的)充分混匀。

(e) 离心(3000rpm，3min)。

(f) 同糖溶液漂浮法，捞取表层浮液，离心取沉淀。

③饱和硫酸镁溶液漂浮法。

a.饱和硫酸镁溶液的配制。称64.4g硫酸镁于1000m1温水中充分搅拌溶解即成。

b.卵囊的分离。步骤同前法，只是悬浮液换为饱和硫酸镁溶液而已。鸭球虫的两个种：菲莱氏温扬球虫和毁灭泰泽球虫的卵囊在饱和食盐水中较易变形，以此法分离为佳。

④铬硫酸分离法。适用于从肠内容物、肠粘膜组织、肝组织、肾组织及其它组织中分离球虫卵囊。无菌条件下操作时所制备的卵囊为无菌卵囊。

a.铬硫酸溶液的制备。先配好20%的重铬酸钠溶液100ml于500ml锥形瓶中，然后在冰浴条件下逐渐加入浓硫酸100m1，边加边充分搅拌。用玻璃过滤器或离心方法除去其它结晶，即为所需铬硫酸液。

b.卵囊的分离。

(a)将组织或肠内容物放在乳钵中充分研碎，加水充分搅拌后离心(1500 rpm，5min)。

(b)向沉淀物中加入4～5倍铬硫酸溶液，冰浴条件下充分搅拌，然后立即离心(1500 rpm，5min)。

(c)将浮液中的卵囊用吸管吸出，加入20倍以上的冷却水(冰水)，离心(1500rpm，5min)，沉淀物即为卵囊。

(2)蛋白酶消化法。在分离组织中的卵囊时，常有许多组织碎块或细胞团块混杂于卵囊中或粘附卵囊壁上，致使纯化工作十分棘手。在捣碎的组织中加入0.5%～1%胰蛋白酶，将 pH调到8.0，39℃下消

化20min；或者加入0.2%胃蛋白酶(蒋建林、蒋金书，1996)，将pH调至2.0，在39℃下消化1h，使卵囊分散游离出来，再依次用200目、300目和400目网筛过滤，滤液经2000rpm，10min离心沉锭，弃掉上清液，在沉淀中加入1 M蔗糖溶液，2000rpm，10min离心，管上层漂浮的白色似“塞子状”的物质即为卵囊。将其移入装有0.5 M蔗糖溶液小离心管中，2000rpm离心10min沉淀，重复几次充分洗涤除去比重较小的杂质，然后加入5%次氯酸钠，在4℃下作用10min，最后在低浓度(0.5M)的蔗糖溶液中离心洗涤，除去小的杂质和次氯酸钠，即可得纯化的未孢子化卵囊。

(3) 糖溶液梯度离心法。适用于从少量溶液中分离卵囊。

①糖溶液的制备。将128g精制白糖溶解于100m1水中，以此作为总量，加入0.5%石碳酸，混匀作为A液。以A液为基础，再按下述混合比，制成B、C、D液。

B液：3份A液+1份水，充分混合

C液：3份B液+1份水，充分混合

D液：3份C液+1份水，充分混合

②梯度离心管的装备。用10～50 m1的离心管，从底部开始，轻轻将等量的A、B、C、D液分层次地依次加入管中。这几种液体不得相互掺混。

③卵囊的分离。

a.将粪便混匀在5倍体积的水中，离心(1000rpm，3min)，弃去上清液。

b.沉淀物加1/2体积的水，混匀后取少量放置在D液的上部，厚度约为1cm。离心(1 000 rpm，3 min)。

c.用吸管将液层上部的液体吸掉，只将D液层(含卵囊)移入另外的离心管中，用大约 10倍的水稀释后，离心(2000rpm，5min)。沉淀物即为卵囊。

(4) 单卵囊分离(扩增)法。

①稀释法。

a.将粪便或组织捣碎物混匀在20倍体积的2.5%重铬酸钾溶液中，置25～27℃下培养2～7天，至95%的卵囊孢子化。

b.培养物经3层纱布或50目网筛过滤。

c.用干净的滴管吸取滤过物一小滴于载玻片上，并加一滴生理盐水稀释，使在低倍显微镜下观察时，一个视野只有1～2个卵囊。

d.在显微镜下，右手持玻璃毛细吸管的尖端正对视野中的一个卵囊时，将吸管向卵囊直伸过去，卵囊随溶液吸入毛细吸管内。

e.把毛细吸管中的液体吹落到铺有薄层琼脂的载玻片上，在显微镜下观察，确证是一个卵囊时，单卵囊分离即告完毕。

分离单卵囊的目的是为了进一部扩增其“克隆”卵囊，操作步骤如下：

f.用细的解剖刀将玻片上含有单卵囊小滴液的琼脂周围划破，以小滴液为中心，将前后左右的琼脂薄膜摺叠覆盖起来。

g.将包有卵囊的琼脂团小心地喂给一日龄的雏鸡。

h.感染后，雏鸡需隔离饲养。于感染后第2天开始，每天检查粪便，观察有无卵囊排出。

i.收集粪便中的克隆卵囊。

②显微操作器分离法。高级显微镜都有显微操作器，可在显微视野下方便地吸取所需的单个卵囊或其它发育阶段的球虫(如孢子囊，子孢子，裂殖子，裂殖体，配子和配子体等)。

2.孢子化。卵囊孢子化需要合适的温度和湿度及充足的氧气。

可以在分离卵囊前也可在分离卵囊后进行。因为杂质的存在影响氧气的扩散，致使卵囊摄入氧不足，

发育不良；加上培养(孵化)卵囊时，细菌的生长常常竞争消耗氧气，所以，用水培养卵囊时应添加青霉素和链霉素 (1000IU／m1)，或者用具抑菌作用的液体来培养。最好的培养液是2.5%的重铬酸钾液。

向盛有分离卵囊的平皿中加入一定量的培养液，放在25～28℃的恒温箱中培养1～7天。此间每天应对培养液轻轻搅拌3～5次，并观察孢子发育情况，当有80%以上的卵囊完成孢子化时，停止培养。完成孢子化的卵囊(或称成熟卵囊、感染性卵囊、孢子化卵囊)内含有 4个孢子囊，孢子囊前端的斯氏体清晰可见，孢子囊内的2个子孢子的折光体也清楚。如果有加氧器，则可以用生理盐水瓶或其它容器培养。孢子化卵囊应放入10倍体积以上的2.5%的重铬酸钾液中，低温3～7℃下保存。在这种条件下，卵囊的感染性可保持一年以上。

（三）鸡球虫病的诊断技术

1.卵囊计数方法。主要用于计算克粪便和克垫料中球虫卵囊数值(OPG)或实验室内收集的卵囊悬液和球虫疫苗保存液中的卵囊数值。常用方法有以下几种：

(1)血球计数板计数。方法是称取1g鸡粪，溶于10m1水中制成10倍的稀释液，经充分搅拌均匀后，取其1滴置血球计数板中，在低倍镜下计算计数室四角4个大方格(每个大方格又分为16个中方格)中球虫卵囊总数，除以4求其平均值，乘104即为1ml液体的卵囊数。然后乘10即为OPG值。如果计数室四角没有大方格则用正中的一个大方格，连数几次，求其平均数，乘105即为OPG值。

计算公式：OPG =a×10×1/(0.1×0.1×0.01)=a×105

（2）载玻片计数。从上述的10倍稀释液中，取出0.05ml置于载玻片上，再覆加盖玻片，计数整个盖玻片内的卵囊。

计算公式：OPG =b×10×1/0.05=b×200

(3) 浮游生物计算板计数。从上述的10倍稀释液中，吸取0.04m1，滴于浮游生物计算板中，覆加32mm×28mm的盖玻片，然后数出64列中的10列所见到的卵囊数。

计算公式：OPG =c×10×1/0.04×64/10=c×1600

注：a、b、c为数到的卵囊数。

(4) 麦克马斯特法(McMaster's method)。计数时取粪便2g置研钵中，先加入10m1水，搅匀，再加饱和盐水溶液50m1，混匀后立即吸取粪液充满两个计数室，静置1～2min，镜检计数两个计数室的卵囊数。计数室容积为1×1×0.15＝0.15m1，0.15ml内含粪便2/（10+50）× 0.15 =0.005g，两个计数室则为0.01g。故所得卵囊数乘100即为OPG值。

计算公式：OPG =a×l00

(5) 铬硫酸卵囊计数法。先向2～5g鸡粪中加入20～30ml的水，经充分搅拌后，取出2m1放入带刻度的离心管中(10ml装)，进行离心(2000rpm，5min)。离心后除去上清液，测出粪的容量。用10倍的铬硫酸溶液(20%重铬酸钠溶液，加入等量的硫酸，再用玻璃滤器将析出的结晶除去后的滤液)稀释，用水管的流水不断冷却离心管的外壁，再向粪液中加入铬硫酸溶液，充分搅拌。因操作过程发生气泡，故静置5min使气泡释出后检查为宜。

此外，由于雏鸡个体的粪便状态不尽相同，例如从粪便排出到采样的间隔时间所致干燥程度上的差异及症状轻重不同所致水分含量的差异等条件，对通过称量鸡粪计算OPG值具有明显影响。为此，可以采用以下方法:先将鸡粪便溶于适量水中，再将粪液放入带有刻度的离心管中，通过离心(2000rpm，5min)，舍去上清液，通过离心管上的刻度测出沉渣的容量，再重新加水制成10倍的稀释液，然后计算卵囊的数量。

2.鸡球虫各发育阶段虫体的检查。在肠组织或粪便涂片上证实确有虫体(子孢子，滋养体，裂殖子，裂殖体，大、小配子体，大、小配子，合子，卵囊)存在，便可确诊为球虫感染；而根据鸡群的表现，

诸如生产性能、临床症状和病变记分等，以及每克粪便或垫料中的卵囊数，便可判断鸡群是仅仅有球虫感染，还是在流行亚临床型或临床型球虫病。

（1）具体操作。用小型外科刀从最显著的感染区域取材，并在所有病例中从每一处至少取两个样品，一个取自粘膜表层，另一个取自粘膜的深处。浅层刮取物的显微镜观察应该查到卵囊或其它阶段虫体，深层刮取物应该查到内生发育阶段的虫体。显微镜检查结果可用于确定引起感染的艾美耳球虫种。对虫体内生阶段形态不熟悉的诊断人员，最好先做涂片进行姬姆萨染色。

(2) 各阶段虫体形态简述。子孢子呈香蕉形，其最显著和最典型的结构是折光体。通常有2个折光体，一前一后。结构致密、匀质、无界膜。折光体大小可以变化，偶尔无前端的折光体。光学镜下观察，折光体发亮，不透明；染色后，折光体着色深而均匀。

滋养体呈圆球形，单个细胞核，姬姆萨染色时，核着色较深呈暗红色。

成熟裂殖体形状为圆球形，由许多香蕉形裂殖子紧凑地排列组成，类似于剥皮后的桔子外观。裂殖体成熟后，裂殖子成簇散开。裂殖子一端钝圆，一端稍尖，单个细胞核位于偏中部，胞质呈颗粒状结构，内有空泡。姬姆萨染色后核呈深红色，胞质呈淡红色。

姬姆萨染色涂片上见到的成熟配子体的胞浆内含紫色颗粒，大小不等，白色颗粒散在核的周围，核浅红色。大配子呈亚球形，细胞浆中含有一层或两层嗜酸性颗粒，由粘蛋白组成，镜下观察细胞浆呈大理石状外观。成熟小配子体近似球形，内含近千个深紫色眉毛状小配子，成熟后小配子向外散出，中央留有残体。

合子呈亚球形，大小与大配子相似，大、小配子结合后形成合子，此时大配子细胞浆中的嗜酸性颗粒即开始向周边膜下迁移，由于颗粒状物位于膜下即可与大配子区别。之后颗粒状物均匀散开，凝固形成卵囊壁。

卵囊呈圆形、椭圆形、卵圆形。囊壁两层，个别种较小端有卵膜孔。在组织中的卵囊内有颗粒状的孢子体；垫料及粪便中的卵囊，部分已孢子化，内含4个孢子囊；每个孢子囊中有2个子孢子。

3.卵囊鉴定方法。

(1)大小。虽然卵囊的大小可能有助于确定种，但也有其局限性；除巨型艾美耳球虫与和缓艾美耳球虫之外，单独用此特征鉴别虫种尚有困难。操作者不测算而试图判别卵囊大小是不现实的。用目镜测微尺测大量卵囊后，其大小才是有用的标准。卵囊长、宽的最大值、最小值和平均值均需列出。卵囊大小仅是球虫种鉴别中几个有用特征之一。任何确定种的卵囊大小总有不同，因此对虫种的任何判断必须依赖于测量至少50个卵囊的平均大小。

(2) 颜色。只有巨型艾美耳球虫凭其外形和颜色可与其它6个种区别开。该种最有用的特征是卵囊醒目的金黄色。其它种是浅绿色或无色。巨型艾美耳球虫卵囊壁外层有时局部呈波浪状，而其它种则光滑。这些特征有助于鉴定出该种。

(3) 形状。柔嫩艾美耳球虫、巨型艾美耳球虫、堆型艾美耳球虫、早熟艾美耳球虫和布氏艾美耳球虫是长椭圆形到卵圆形；和缓艾美耳球虫是亚球形到球形。对这些特征必须加以量化(形状指数)，方能更有助于种的鉴别；其量化的公式如下：形状指数=平均长度/平均宽度

(4) 孢子化时间。虫种之间的孢子化时间应该在标准温度下进行测定才有比较意义。虫种最适孢子化温度在28～30℃的范围内。粪便样品必须在排出lh内收集，卵囊必须经过滤和饱和盐水漂浮后迅速从粪便中分离出来。随后悬浮在2%～4%重铬酸钾溶液的平皿中，在30℃下孵育；按规定时间间隔在显微镜下检查样品，当发育完全的孢子囊出现于第一个卵囊时记录孢子化时间。

4.鸡球虫感染的病变记分。病变的严重性通常是和鸡摄入卵囊数量成比例的，并且是和其它指标如增重和记分相关的。最常用的记分方法是由Johnson和Reid(1970)设计的病变记分法。按照这种方法，

把肠道病变分为0～+4五个等级，0表示正常，+4表示最严重的病变。这一技术在实验感染中最为常用，虽然因测定人的不同而有主观影响，及时用药和疫苗接种的鸡只评分不准，但由于其快速、实用的特点，仍不失为较好的诊断技术。在试验条件下，卵囊和药物的剂量都是指定的，虫种也是已知的。在野外条件下，病变记分对于测量感染的严重性也往往是有用的。即使同时存在几种球虫，通常也只需将小肠分为4段来记分。包括：十二指肠袢的小肠上段；小肠中段，即卵黄蒂上端及下端各10cm的肠道；小肠下段和直肠；盲肠。

（1）混合感染情况下肠道病变记分。

0分，无肉眼可见病变；

+1分，有少量散在病变；

+2分，有较多稀疏的病变，如多处肠区被感染和由柔嫩艾美耳球虫感染引起的盲肠出血；

+3分，有融合性大面积病变，一些肠壁增厚；

+4分，病变广泛融合，肠壁增厚。柔嫩艾美耳球虫感染，可见大型盲肠芯，巨型艾美耳球虫感染，可见肠内容物带血。

（2）单个虫种感染情况下肠道病变记分。

①柔嫩艾美耳球虫(感染后5～7天) 两侧盲肠病变不一致时，以严重的一侧为准。

0分，无肉眼病变

+1分，盲肠壁有很少量散在的瘀点，肠壁不增厚，内容物正常。

+2分，病变数量较多，盲肠内容物明显带血，盲肠壁稍增厚，内容物正常。

+3分，盲肠内有多量血液或有盲肠芯(血凝块或灰白色干酪样的香蕉型块状物)，肠壁肥厚明显，盲肠中粪便含量少。

+4分，因充满大量血液或肠芯而盲肠肿大，肠芯中含有粪渣或不含，死亡鸡只也记+4分（图17-8）。

图17-8柔嫩艾美耳球虫病变记分

②毒害艾美耳球虫(感染后5～7天)

0分，无肉眼病变

+1分，从小肠中部浆膜面看有散在的针尖状出血点或白色斑点，粘膜损伤不明显。

+2分，从小肠中部浆膜面看有多量的出血点，也可见到中部肠管稍充气。

+3分，小肠腔有大量出血，浆膜面见有红色或白色斑点。粘膜面粗糙，增厚，有许多针尖状出血点。肠内容物含量少；充气达小肠下半段，小肠粗度明显加大但长度明显缩小。

+4分，小肠因严重出血而呈暗红色、褐色，大部分肠管气胀明显，粘膜增厚加剧，肠腔内充满血

液和粘膜组织的碎片，从浆膜面看，在感染部位组织见到白色或红色病状，在死亡鸡只病灶为白色和黑色，呈“白盐与黑胡椒”之外观，有些情况，可见到寄生性肉芽肿，肠管增粗一倍，长度缩短一倍。死亡鸡只也计+4分（图17-9）。

③布氏艾美耳球虫(第6～7天)

0分，无肉眼可见病变

+1分，仔细观察时疑有病变。

+2分，小肠下段增厚，肠壁呈灰色，从其上可剥下橙红色物质。

+3分，小肠壁增厚，有带血的卡他性渗出物，直肠段有横向的红色条纹，病变发生在盲肠扁桃体时，有软的粘液栓。

+4分，小肠下段可能出现广泛的凝固性坏死。病变可能扩展到小肠中段或上段。部分鸡小肠粘膜面的干性坏死膜可能使小肠出现皱痕以及干酪样盲肠芯。病死鸡也计4分（图17-10）。

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④巨型艾美耳球虫(第6～7天)

0分，无肉眼可见病变。

+1分，小肠中段浆膜面隐约可见出血点，肠腔中有少量桔黄色粘液，肠管形状不见异常。 +2分，小肠中段浆膜面有多量出血点，肠腔中见有多量桔黄色粘液，肠壁增厚。

+3分，小肠充气，壁增厚，粘膜面粗糙，小肠内容物含有小血凝块和粘液。

+4分，小肠充气明显，肠壁高度增厚，肠内容物含有大量血凝块和红褐色血液。病死鸡只也计4分（图17-11）。

图17-9 毒害艾美耳球虫病变记分

图17-10 布氏艾美耳球虫病变记

⑤堆型艾美耳球虫(第5～7天)

0分，无肉眼可见病变。

+1分，十二指肠浆膜面有散在的白色斑，每平方厘米不超过5处。

+2分，白色斑增多但不融合，形成白色梯形条纹状外观，3周龄以上的鸡，病变可扩展到十二指肠下20cm ，肠壁不增厚，内容物正常。

+3分，白色病灶增多且融合成片，小肠壁增厚。内容物呈水样，病变蔓延到卵黄囊憩室之后。 +4分，被感染的肠绒毛缩短融合，使十二指肠和小肠粘膜呈灰白色，肠壁高度肥厚，肠内容物呈奶油状。死亡鸡只也计为+4分（图17-12）。

5．鸡球虫感染的粪便记分。 在实验室感染中，粪便记分和病变记分的方法同样可用于对球虫感染程度的判断。

划分在0～+4内，0分表示粪便正常，+4分表示最严重的腹泻，带有粘液或血液。粪便记分尚未有完整的记分标准系统，索勋(1997)提出，粪便记分反映群体感染球虫后有多少个体表现出粪便性状不正常。

对于不具明显拉血的球虫感染，诸如堆型、巨型、布氏、早熟与和缓艾美耳球虫的感染，对给定12～24h 时间范围内，0分表示100%粪便正常，+1分表示25%的粪便不正常，+2分表示50%的粪便不正常，+3分表示75%的粪便不正常，+4分表示100%的粪便不正常；

对于有明显拉血的球虫感染，诸如柔嫩和毒害艾美耳球虫的感染，对给定12～24h 时间范围内，0图17-11 巨型艾美耳球虫病变记分 图17-12 堆型艾美耳球虫病变记分

分表示100%的粪便不带血，+1分表示25%的粪便带血，+2分表示50%的粪便带血，+3分表示75%的粪便带血，+4分表示100%的粪便带血。

四、实验注意事项

1.分离不同的卵囊时，实验过程中所用的离心管，洗管，烧杯等器皿需彻底洗净，以防污染。

2.卵囊孢子化需要合适的温度和湿度及充足的氧气，最好的培养液是2.5%的重铬酸钾液。培养时，卵囊的密度也不应超过106个/m1，培养液的深度不超过0.7cm。

3.在卵囊计数的几种方法中，载玻片的计算方法准确，但费时。血球计数板计算卵囊的方法，虽然简便易行，但在卵囊数量少的情况下，误差较大，可靠性差。而浮游生物计算板的方法，介于前两者之间，具有利用价值。麦克马斯特法方便准确，若所测卵囊数量很多，可酌情稀释后再计数。用铬硫酸卵囊计数时，如果鸡粪中的杂物碎片扰乱视野，可用铬硫酸溶液稀释粪便，溶解杂质。

4.鸡球虫感染的病变记分制用于阐述抗球虫药物的效果和球虫疫苗的保护效果时存在相当大的局限性，而且随检测人的不同而有所变化，尤其是重要的球虫种的不同，如巨型艾美耳球虫的感染程度并不总是与肠道眼观病变的严重性相关。

5.鸡球虫病是最常见的疾病，但许多诊断者很少注意到肠道寄生的球虫种的鉴别。柔嫩艾美耳球虫寄生于盲肠，比较容易鉴定。球虫种的鉴定需要眼观病理变化和肠粘膜刮取物镜检识别发育阶段虫体二者相结合，所发现的虫体形态需要与7种艾美耳球虫的特征相比较加以识别。

五、实验报告

1．绘制艾美耳属球虫的孢子化卵囊形态图，并标出其结构特征。

2．阐述一种分离卵囊的方法，并说明该方法的优、缺点。

结核病的实验室诊断方法及评价

耐多药结核病的实验室诊断条件：因耐多药结核分枝杆菌的生物危险性， 1）需P2及以上实验室，目前我院实验室条件基本具备即将投入运行， 2）日常培养及涂片用的生物安全柜滤膜已超出使用年限，工作人员生物安全得不到保障，应定期予以更换。 耐多药结核分枝杆菌主要以结核分枝杆菌体外药物敏感性测定作为其诊断依据。因此其基础是培养，只有培养出阳性结核分枝杆菌才能进一步通过结核分枝杆菌体外药物敏感性测定诊断是否为耐多药结核分枝杆菌。 1.已进人临床常规应用的测定方法:目前包括绝对浓度法、比例法及应用BACTEC460、BACTEC 960、BacT/ ALERT 3D、ESPII等仪器系统快速检测结核分枝杆菌的药物敏感性。其中:绝对浓度法以最低抑菌浓度或以无生长为终点作为判断标准，是我国目前普遍采用的方法;比例法以是否能够抑制99%的细菌生长作为判断标准，是世界卫生组织推荐使用的方法;后四种仪器方法则是比例法的特化，其特点是以细菌的代谢过程指示细菌生长状况。 2.处于研究探索阶段的测定方法:此类方法很多，抗性比例法、Etests法、噬菌体生物扩增法、液体变色培养基测定法、荧光素酶测定法、硝酸盐还原试验等。 3分子生物学方法对结核分枝杆菌耐药性检测已有一些进入临床检测。基因突变是引起抗结核药物耐药性的最主要的原因。多种以PCR为基础的分子生物学技术用于检测与耐药相关基因的突变，作为快速耐药性检测方法在实验室或临床得到开展。这些方法具体包括：主要是DNA序列分析法，聚合链反应-单链构象多态性分析（PCR-SSCP），另外还包括基因芯片技术、异质性双链构象分析、变性梯度凝胶电泳、线性探针杂交技术、RNA/RNA错配检测技术和分子灯塔技术等。由于结核分枝杆菌的耐药性与基因突变的确切关系未完全阐明，检测耐药相关基因的分子生物学方法虽然能快速准确地检测到耐药相关基因的突变，但由于判断药物敏感性时存在固有的缺陷，检测结核分枝杆菌耐药性的基因型鉴定法不能完全替代表型鉴定法。 结核病的实验室诊断方法及评价 (一)标本的采集 1．痰标本采集新发病人应在抗结核药物治疗前留取痰标本。治疗中的病人应停药2～3天后留取痰标本。病人于清晨漱口后，留取3～5ml合格的痰标本(深咳后吐出的黏液痰、脓样痰、干酪样痰、褐色血样痰或含少量新鲜血液的血痰)，遇到唾液或口永，应重新留取。至少采集3次。WHO推荐的采集容器为国际通用的螺旋盖痰瓶、可密封塑料盒或蜡纸盒。痰容器上应标明病人姓名、编号、检查项目和容器序号。 2.胃冲洗液幼儿不会吐痰，常将痰液咽下，故可用清晨空腹胃洗出液，直接涂片染色或进行结核杆菌培养，连续作三次可提高培养阳性率。胃液结核杆菌检出率以浸润性肺结核和干酪性肺炎为最高，其次为粟粒型肺结核。胃液、痰液或其他分泌物中结核杆菌检查，有时对诊断有决定性意义。 3.支气管肺泡灌洗和支气管冲洗支气管肺泡灌洗和支气管冲洗液至少5ml并以无菌容器盛装，以用于检验。 4.病灶组织或干酷块等先用组织研磨器磨碎后再行涂片。 5．尿液留全量夜尿，静置4或5小时后，弃上清液，取沉淀部分尿液10ml，3000rpm．离心30min，取沉渣涂片。 6.体液或脑脊液无菌操作收集体液或脑脊液，放置冰箱或室温24h，待薄膜形成后

动物粪便中球虫卵囊的检测方法

动物粪便中球虫卵囊的检测方法 1 目的（适用范围） 本方法适用于猪、禽、兔、犬、猫球虫病感染的检测。 2 依据（参考）标准 《动物球虫病诊断技术》（GB/T 18647-2002） 3 原理 卵囊通常存在于宿主粪便中，从粪便中分离球虫卵囊最常用的方法为饱和食盐溶液漂浮法。饱和食盐溶液密度高于卵囊密度，而低于粪便中大多数杂质，经离心或静置沉淀后，大部分杂质沉淀在容器底部，卵囊漂浮在悬浮溶液的表面，然后收集表层漂浮物；由于卵囊比重大于水的比重，所以表层漂浮物用自来水稀释离心后，卵囊沉淀富集于离心管底部即可得到大量球虫卵囊。 4 材料 4.1 被检样品 被检动物的新鲜粪便不少于30 g。 4.2 试剂耗材 饱和食盐水、60目筛网、50 mL和100 mL烧杯、玻璃棒、15 mL离心管、自制铁丝吊环（或细菌接种环）、载玻片、盖玻片、香柏油、麦克马氏计数板。 4.3 仪器设备 电子天平、托盘天平、低速离心机、1 mL移液器、显微镜、手动计数器。 5 检测方法 5.1 定性检查 5.1.1 取被检动物的新鲜粪便5 g，放入50 mL烧杯中，加入3倍体积的水，用玻璃棒搅拌均匀，经60目筛网过滤。 5.1.2 将滤液移入离心管中，在天平上平衡，于离心机上以3000 r/min离心3 min，弃上清液，在沉淀中再加入适量水，将沉淀吹起，平衡离心同上，弃上清液，如此重复2~3次至上清液清亮，弃上清液。 5.1.3 在沉淀中加入5倍体积的饱和食盐水，用玻璃棒将沉淀搅拌均匀，在天平上平衡，于离心机上以3000 r/min离心5 min，小心快速用铁丝吊环蘸取液膜，抖于载玻片上，盖上盖玻片，于100~400倍镜下检查。

《动物寄生虫病学》测试试题(A卷)

《动物寄生虫病学》试题(A卷)

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《动物寄生虫病学》试题（A卷） 一、名词解释（每小题2分，共10分） 1、中间宿主：寄生虫幼虫期或无性生殖阶段所寄生的宿主。 2、带虫免疫：寄生虫感染常常引起宿主对重复感染产生一定的免疫力，此时宿主体内的寄生虫并未完全被清除，而是维持在低水平。（非消除性免疫） 3、二宿主蜱：蜱的幼虫及若虫在同一个宿主体上吸血，而成蜱则寄生于另一个宿主，饱血后落地产卵。 4、孢子生殖：有性生殖后形成合子，合子再分裂形成许多子孢子的过程。 5、生物性传播：节肢动物传播病原体最重要的途径。在传播者体内要经历发育或/和繁殖的过程。（只有在传播者体内发育或/和繁殖后才具有感染力） 二、填空题（每空1分，共40分） 1、肝片形吸虫寄生于牛、羊的肝胆管，中间宿主是椎实螺科的淡水螺，治疗动物肝片形吸虫病时可选用三特、肝蛭净等药物。 2、日本血吸虫寄生于人、畜的肝门静脉和肠系膜静脉，中间宿主是湖北钉螺，治疗动物日本血吸虫病时可选用三特、肝蛭净等药物。 3、布氏姜片吸虫寄生的终末宿主是猪和人，寄生部位是小肠。 4、猪囊尾蚴寄生的宿主是猪和人，成虫名称是猪带绦虫；成虫寄生的终末宿主是人。 5、细粒棘球蚴主要寄生于牛、羊的肝和肺，治疗动物细粒棘球蚴病时可选用吡喹酮、丙硫咪唑等药物。 6、扩展莫尼茨绦虫寄生于牛、羊的小肠 ,中间宿主是甲螨或地螨类，治疗动物扩展莫尼茨绦虫病时可选用吡喹酮等药物。 7、疥螨寄生于人和动物的皮肤表皮层内；痒螨寄生于动物的皮肤表面；蠕形螨寄生于人和动物的毛囊和皮脂腺；治疗动物螨病时可选用伊维菌素等药物。 8、猪后圆线虫寄生于猪的支气管、细支气管，中间宿主是蚯蚓，

第二章 动物传染病的防疫措施

第二章动物传染病的防疫措施（3学时） 主要内容 1、防疫的基本原则和综合性防疫措施 2、动物传染病的诊断方法 3、动物检测的分类及检疫内容 4、隔离和封锁的方法 5、病畜的治疗方法 6、消毒、杀虫、灭鼠的方法 7、预防接种、紧急接种和药物预防 自学内容 1、中华人民共和国动物防疫法和中华人民共和国进了境动植物检疫法 2、常用畜禽生物制品简介 基本要求 l、掌握相应的基本概念 2、平时的预防措施 3、发病时的扑灭措施 4、各种措施执行的方法 重点 平时的预防措施、发病时的扑灭措施；疫情报告与疫病的诊断方法；检疫；隔离和封锁：免疫接种和药物预防；消毒、杀虫、灭鼠的方法。 难点 检疫；隔离和封锁；免疫接种的注意事项。 查明和消灭传染源，截断病原体的传播途径，提高家畜对传染病的抵抗力。 根据各种传染病的特点，对各个不同的流行环节，分清轻重缓急，找出重点措施，以达到在较短期间内，用最少的人力、物力控制传染病的流行。 –猪瘟 –牛恶性卡他热 –猪传染性萎缩性鼻炎 综合性防制措施：“养”、“防”、“检”、“治” 养：饲养管理，提高动物的非特异性抵抗力 防：预防接种 防止环境污染，成为病原体的传播媒介 检：检疫，畜禽检疫，畜产品检疫 治：治疗，特异性的生物制剂 抗菌素 一、平时的预防措施 疫病的预防（prevention）: 采取各种措施将疫病排除于一个未受感染的畜群之外。 疫病的防制（control）：采取各种措施，减少或消除疫病的病源，以降低已出现于畜群中疫病的发病数和死亡数，并将疾病限制在局部范围内。 疫病的消灭（eradication): 一定种类病原体的消灭。 ⑴要坚持“自繁自养”的原则 “自繁自养”是防止从异地带进疫病的一项重要措施。

鸡球虫病的发生原因

鸡球虫病的发生原因 一概念： 鸡球虫病是由一种或数种艾美尔球虫寄生于鸡小肠、盲肠黏膜上皮细胞内引起的一种寄生原虫病。 二特点概念： 1.球虫卵囊具有坚韧的外壳，对环境不利因素有较强的抵抗力消毒药对其作用较差，从而可使其在土壤和垫料中存活数月之久。 2.鸡群更换迅速，易感鸡群急剧增加。 3.卵囊易从一个鸡舍传到另一个鸡舍。 4.球虫生活史简单，不需要中间宿主。

5.球虫繁殖迅速，但又不会造成大规模感染，导致鸡只死亡加快传播速度。 三致病机理： 球虫的致病机理实质上是球虫与宿主相互作用的结果。一方面球虫的营养物质来源与鸡体，同时它的某些物质的代谢也用赖于鸡体内活性物质的参与。另一方面球虫在鸡体内进行生命活动的同时也对鸡产生不同程度的机械和化学损害，既对所寄生细胞的大量破坏以及虫体代谢产物的毒害作用。 而鸡体对球虫产生防御作用，产生不同程度的抗球虫作用，包括细胞免疫和体液免疫会出现局部和全身一系列的形态和机能的病理变化。 四影响球虫致病的因素 ⒈球虫的种类和致病力。 柔嫩艾美尔球虫是致病力最强的种类，但由于药物的使用，使它的重要性有所下降而毒害艾美尔球虫所引起的急性球虫病越来越普遍。其次是布氏艾美尔球虫，有明显的致病力，但感染不普遍。

⒉卵囊感染量： 卵囊感染量的增加会导致卵囊排除数量的增加，但感染量过多时所产生的卵囊数量却相应减少，既产生“拥挤效应”原因是： ①在球虫感染的应答中，产生干扰素或类干扰素。 ②宿主早期大量感染球虫，有效的刺激了生活史中后期对球虫的免疫。 ③“拥挤效应”造成大量的早期虫体破坏组织，导致裂殖子不能成功侵入新的宿主细胞。 ⒊卵囊的毒力和活力。 ⒋球虫寄生部位： 柔嫩艾美尔球虫在盲肠，堆型在十二指肠和小肠前段。

动物寄生虫病的防治及消毒

动物寄生虫病的防治及消毒 授课人孔德利 动物寄生虫病的防治 第一节概述 一、寄生虫的概念 寄生虫是暂时或永久地寄居于另一种生物(宿主)的体表或体内，夺取被寄居者(宿主)的营养物质并给被寄居者(宿主)造成不同程度危害的动物。 二、寄生虫病的危害 寄生虫侵入宿主或在宿主体内移行、寄生时，对宿主是一种“生物性刺激物”，是有害的，其影响也是多方面的，但由于各种寄生虫的生物学特性及其寄生部位等不问，因而对宿主的致病作用和危害程度也不同，主要表现在以下四个方面： （一）机械性损害 吸血昆虫叮咬，或寄生虫侵入宿主机体之后，在移行过程中和在特定寄生部位的机械性刺激，使宿主的器官、组织受到不同程度的损害，如创伤、发炎、出血、肿胀、 堵塞、挤压、萎缩、穿孔和破裂等。 （二）夺取宿主营养和血液 寄生虫常以经口吃人或由体表吸收的方式，把宿主的营养物质变为虫体自身的营养，有的则直接吸取宿主的血液或淋巴液作为营养，造成宿主的营养不良、消瘦、贫血、抗病力和生产性能降低等。 （三）毒素的毒害作用 寄生虫在生长、发育和繁殖过程中产生的分泌物、代谢物、脱鞘液和死亡崩解产物等，可对宿主产生轻重程度不同的局部性或全身性毒性作用，尤其对神经系统和血液循环系统的毒害作用较为严重。 （四）引入其他病原体，传播疾病寄生虫不仅本身对宿主有害，还可在侵害宿主时，将某些病原体如细菌、病毒和原虫等直接带入宿主体内，或为其他病原体的侵入创造条件，使宿主遭受感染而发病。 第二节畜禽常见寄生虫病及防治措施 一、猪常见寄生虫病及其防治 （一）猪常见寄生虫病 1、猪疥螨病 病猪患部发痒，经常在猪舍墙壁、围栏等处摩擦，经5～7d皮肤出现针头大小的红色血疹，并形成脓包，时间稍长，脓包破溃、结痂、干枯、龟裂，严重的可致死，但多数表现发育不良，生长受阻。 2、弓形体病 病猪精神沉郁，食欲减退、废绝，尿黄便干，体温呈稽留热（40.5～42℃），呼吸困难，呈腹式呼吸，到后期病猪耳部、腹下、四肢可见发绀。 3、猪蛔虫病 成虫寄生在小肠，幼虫在肠壁、肝、肺脏中发育形成一个移动过程，可引发肺炎和肝脏损伤，有的移行到胃内，造成呕吐，剖检时可见蛔虫堵塞肠道。 4、旋毛虫病 旋毛虫成虫寄生于肠管，幼虫寄生于横纹肌。本虫常呈人猪相互循环，人旋毛虫可致人死亡，感染来源于摄食了生的或未煮熟的含旋毛虫包囊的猪肉。 （二）主要防治措施 1、加强环境卫生。 2、定期进行驱虫一般猪场每年春秋二季对种猪群驱虫，断奶仔猪在转群时驱虫 一次。 （三）常用治疗药物 1、敌百虫先将敌百虫按1%浓度制成药液，清洗患部。每天1次，连续用3～4d。内服可按每公斤体重

动物球虫病实验室诊断技术

动物球虫病实验室诊断技术 一、实验目的及要求 1.熟悉球虫卵囊的形态特征。 2.掌握分离球虫卵囊的方法。 3.了解常见球虫的种类。 4.熟悉鸡球虫感染后的病变记分和粪便记分方法。 二、实验器材 1.仪器设备。上海XSP-2C生物显微镜（具备10倍目镜和低倍、高倍物镜及油镜）；目镜测微尺和物镜测微尺；盖玻片、载玻片、牙签、洗瓶、平皿；剪刀及手术刀；离心管；血细胞计数板。 2.实验材料。感染球虫的患鸡,常见的球虫卵囊,蔗糖、食盐、硫酸镁、铬硫酸、重铬酸钾等。 三、实验方法、步骤和操作要领 （一）球虫的形态观察 随宿主粪便排出的卵囊呈卵圆形、圆形或球形；无色、淡黄色或淡绿色，其形态大小随球虫种类而异。外被有两层囊壁，外壁较厚，轮廓清晰；内壁较薄。内含颗粒状的胞质(即原生质团)。卵囊内具有一至多个孢子囊，每个孢子囊内含有一至多个子孢子，因种类而异。艾美耳属的球虫种类经发育后，原生质团分裂为四个孢子囊，每个孢子囊内含有两个子孢子。有些种类的球虫在卵囊的极端具有明显的卵膜孔，有些球虫的卵囊内膜突出于卵膜孔之外，形成极帽。 畜禽常见球虫的种类： 1．牛球虫。文献报道的有10种，其中9种为艾美耳属（Eimeria）球虫，另外一种为阿沙卡等孢球虫（Isospora akscaica）。以邱氏艾美耳球虫(E. zurnii)致病力最强，牛艾美耳球虫(E.bovis)致病力较强，它们寄生于牛消化道的上皮细胞。 (1)邱氏艾美耳球虫(E. zurnii)。卵囊呈亚球形或球形，平均直径为18.6μｍ×14.6μｍ。淡黄色，无卵膜孔，胞质充满整个卵囊，无极体。卵囊孢子化时间为24～72小时。 (2)牛艾美耳球虫(E.bovis)。卵囊呈卵圆形，褐色，有卵膜孔，平均大小27.7μｍ×20.3μｍ，卵囊孢子化时间为48～72小时。 2. 兔球虫。种类很多，有16种，属艾美耳属。仅介绍两种如下。 (1)斯氏艾美耳球虫(E.stiedae)。寄生于肝、胆管上皮细胞内。致病力最强。卵囊甚大，长椭圆形，大小为26～40μｍ×16～25μｍ，略带淡红色，囊壁较厚，具卵膜孔。 (2)穿孔艾美耳球虫(E.perforans)。寄生于肠上皮细胞内。卵囊甚小，椭圆形，两端较钝，无色，大小为13.3～30.6μｍ×10.6～17.3μｍ，卵膜孔不明显。 3. 鸡球虫。报道的有9个种，属艾美耳属，世界公认的有7个种。 (1) 柔嫩艾美耳球虫(E.tenella)。寄生于盲肠，多为宽卵圆形，少数为椭圆形，原生质呈淡褐色，卵囊壁为淡黄绿色（图17-1）。其卵囊平均大小为22μｍ×19μｍ，形状指数为1.16，裂殖体很大，直径可达54μｍ，第一代裂殖体包含的裂殖子可达900个，第二代为350个，最短孢子化时间为18ｈ，最短潜隐期为115ｈ。

动物寄生虫病PCR诊断技术

动物寄生虫病PCR诊断技术 聚合酶链反应（Polymerase Chain Reaction, PCR）技术是一种既敏感又特异的DNA体外扩增方法，它可将一小段目的DNA扩增上百万倍，其扩增效率使得该方法可检测到单个虫体或仅部分虫体的微量DNA。通过设计种、株特异的引物，此法只扩增出种、株特异的PCR产物，具有很高的特异性。而且PCR 技术的操作过程也相对简便快捷，无需对病原进行分离纯化；同时可以克服抗原和抗体持续存在的干扰，直接检测到病原体的DNA，既可用于虫种、株的鉴别，动物寄生虫病的临床诊断，又可用于动物寄生虫病的分子流行病学调查。随着PCR技术的不断完善与发展，它已广泛应用于分子生物学、生物技术、临床医学等各个领域，具有广泛的应用前景。 一、实验目的要求 掌握PCR诊断技术所涉及实验的基本原理，全面熟悉PCR诊断技术的操作过程，其中包括寄生虫DNA 的提取、PCR引物的设计、PCR条件的优化、对目的片断的扩增、琼脂糖凝胶电泳及结果分析、PCR产物的纯化等等。 二、实验仪器和材料 （一）寄生虫基因组DNA的提取及纯化 1.虫体材料。单个虫体。 2.器具。超净工作台、恒温培养箱、TGL-16G高速台式离心机、旋涡振荡器、微量取液器及配套吸头、微量离心管、一次性注射器、微型眼科镊、微型眼科剪刀、玻璃平皿、滴管、有机架等。 3.试剂。 (1) 乙二胺四乙酸（Ethylene diaminetetra acetic acid，EDTA）、十二烷基磺酸钠（Sodium dodecyl sulfate，SDS）、三（羟甲基）氨基甲烷-盐酸（Tri (Hydroxymethyl) Aminomethane-HCl，Tris-HCl）、氯化钠、蛋白酶K（25μg/μl）、异丙醇（80%）、双蒸水、灭菌超纯水等。 (2) DNA裂解液：500 mM NaCl 70 μl 、100 mM Tris-HCl（pH 8.0）30 μl、50 mM EDTA（pH 8.0）150 μl、10%SDS 30 μl。 (3) Wizard TM DNA Clean-Up 试剂盒或类似的DNA提取试剂盒。 （二）PCR扩增及琼脂糖电泳 1．材料。提纯的虫体DNA。 2．器具。超净工作台、微型高速台式离心机、微量取液器（2/20/200/1000 μl）、PCR扩增仪、琼脂糖电泳系统、凝胶成像系统、微波炉、4℃/-20℃冰箱、紫外透射仪、微型离心管（200/500/1500 μl）、有机架、一次性手套、透明胶带、量筒（100 ml）、三角瓶（500 ml）等。 3．试剂。 (1) 10×PCR Buffer（无Mg2+）、dNTP（2.5 mM each）、ddH2O 、MgCl2（25 mM）、Primers、Ex Taq 酶（5 U/l）、琼脂糖、EB（10mg/ml）、Tris碱、硼酸（Boric acid）、去离子水、EDTA（0.5 mol/L，pH 8.0）、10×载样缓冲液。 (2) 0.5×TBE缓冲液：准确秤取Tris碱5.4g，硼酸2.75g，充分溶解于800 ml去离子水中，加10ml 0.5 mol/L EDTA（pH8.0），用去离子水定容至1000ml。 （三）PCR扩增产物的纯化 1．材料。PCR扩增产物。 2．器具。TGL-16G高速台式离心机；三用电热恒温水箱；微量取液器（2/20/200/1000 μl）、琼脂糖

动物传染病A卷(7)

(2005－2006学年第1学期) ____________学院____________班(年)级课程动物传染病学 (A)卷 题目一二三四五六七八总分得分 一、名词解释（每题2分，计20分） 1、蓝舌病 2、疫苗紧急接种 3、内源性感染 4、垂直传播 5、疯牛病 6、鸭瘟 7、内基氏小体(Negri’s bodies) 8、恶性卡他热 9、潜伏期 10、炭疽 二、填空题（每空格1分，计20分） 1、高致病性禽流感病毒的血凝素(HA)亚型主要为____和____。 2、小鹅瘟主要侵害________日龄的雏鹅，特征性病理变化是 ________________________。 3、仔猪大肠杆菌病的临诊类型为________、________和________，主要发病年龄分别为________、________和________。 4、羊梭菌病包括________、________、________和________。 5、在奶牛场进行结核病和布鲁氏菌病检疫的常用方法分别是____________和____________。 6、猪丹毒急性病例表现为败血症变化，亚急性病例的特征是 ________________，慢性病例表现为关节炎和心内膜炎。 7、猪传染性萎缩性鼻炎的病原体是________和________，该病特征是 ____________________。 三、选择题（每题1分，计10分） 1、传染性法氏囊病对养鸡业的危害可表现在________： A．该病可以侵害各种年龄的鸡，发病率和死亡率高。 B．该病可感染人，有重要的公共卫生意义。 C．该病可降低疫苗免疫接种的效果。 D．该病可引起鸡长期生长不良，饲料利用率降低。 2、下列关于EDS76 的描述，正确的是________

(完整版)动物寄生虫课程标准

徐州生物工程职业技术学院 《动物寄生虫病》课程标准 （课程代码：03011） 一、适用对象 适用于高职高专动物医学、畜牧兽医、兽医医药、动物防疫与检疫、兽医卫生检验、兽药生产与营销、特种经济养殖等专业及相关专业的三年制大专、五年制高职高专生。 二、课程性质 《动物寄生虫病》是包含一般生物学和兽医学内容的综合学科，是动物医学等专业的必修课，依据我院的办学定位、人才培养模式和生源等特点，本课程为动物医学等专业的专业课程之一，是预防兽医学的重要组成部分，也是一门重要的临床课程，在动物医学等专业目标培养中占有很重要的地位。 随着我国城郊型农业集约化畜禽养殖业蓬勃发展以及爱玩动物的不断增加，动物寄生虫的病防治显得尤为重要。 三、参考学时 施教总学时：54学时，其中理论讲授38学时，课堂实训16学时。 四、学分 3学分 五、课程目标 （一）情感与态度目标 通过多样化的教学形式和教学手段，激发学生的学习兴趣，使学生全面了解和掌握有关畜禽寄生虫病以及人畜共患寄生虫病的病原特征、疾病流行规律、致病机理、诊断方法以及防治措施，为从事相关的管理与技术监督工作、畜牧业养殖生产及专门的兽医师工作奠定基础。 （二）能力目标 培养学生具有分析问题和解决问题的能力，具有独立获取知识和追踪本学科科技发展的能力。既重视基础理论的教学，又要重视基本技能的训练，正确处理传授知识、培养能力和素质教育三者的关系，使培养能力和业务素质贯彻教学的始终。充分利用标本、模型、多媒体等教学手段进行直观教学和电化教学，并充分利用实验室、校内外实训基地进行技能训练，通过实际操作，掌握动物寄生虫病诊断的方法，培养学生的实践动手能力，满足岗位需要，为从事兽医、畜牧兽医工作奠定基础。。 （三）知识目标 通过本课程的教学，使学生熟悉掌握常见寄生虫病的病原体形态特征、病原生活史、疾病流行规律、致病机理、特征性临床症状、诊断技术、治疗和综合防制等方面的知识；同时，使学生了解动物寄生虫病的免疫机理、免疫诊断和免疫预防等的研究进展，了解寄生虫的分类、科学命名、地理分布等，了解我国动物寄生虫病的研究现状和取得的成就等。能够综合运用所学知识和技能，就某一局部地区进行一般的寄生虫病流行病学调查，能对其中主要寄生虫病的流行状况作出比较正确的分析，制订出在原则上比较正确、一般可行的防止措施，并能提出进一步解决问题的途径。 六、设计思路 本课程的总体设计思路是按照以职业岗位为课程目标、以职业标准为课程指导，以职业技能为课程内容，以最新技术为课程视野，以培养学生的职业技能为课程核心，以“双师型”教师为课程主导设计教学内容体系。在课程的建设和教学过程中，采用过程评价和效果评价相结合的方式，培养学生对动物寄生虫病的防制能力和考察学生对动物寄生虫病相关理论知识的掌握程度。 七、内容纲要 （一）理论教学标准 动物寄生虫病学包括总论和各论两个部分，总论部分阐述动物寄生虫学的基本知识、动物寄生虫病的流行病学和免疫、动物寄生虫病的诊断及防治的基本原则。各论按寄生虫的分类系统编排，包括动物蠕虫病学、动物蜘蛛昆虫病学、动物原虫病学等三个方面。在每个疾病中又分为通性、人畜共患寄生虫病和其它寄生虫病三个方面。大纲中所列疾病均为常发多见的动物寄生虫病。 第一章总论（8学时） 学习目的与要求 1、掌握寄生生活的概念、寄生虫及宿主的类型、相互关系以及寄生虫的分类原则。 2、掌握寄生虫病发生的条件和流行特点，基本掌握寄生虫病免疫的基本理论及其应用。 3、掌握寄生虫病诊断方法，对动物及其产品进行疫病检查，防止寄生虫病的发生和传播；掌握寄生虫病防制的基本原则，对动物寄生虫病进行预防、控制。 课程教学内容要点 第一节寄生虫与宿主 1、主要内容 ⑴寄生现象 ⑵寄生虫与宿主的类型

兽医传染病名词解释

一、名词解释 1、感染：病原微生物侵入动物机体，并在一定的部位定居，生长繁殖, 从而引起机体一系列病理反应，这个过程称为感染。 2、隐性感染：在感染后无任何临诊症状而呈隐蔽经过的感染称为隐性感染。隐性感染动物在抵抗力降低时也能转化为显性感染。 3、显性感染：将出现该病所特有的明显的临诊症状的感染。 4、继发感染：动物感染了一种病原微生物之后，在机体抵抗力减弱的情况下，又由新侵入的或原来存在于体内的另一种病原微生物引起感染称为继发感染。 5、混合感染：由两种以上的病原微生物同时参与的感染，称为混合感染。 6、持续性感染：是指动物长期持续的感染状态。 7、长程感染：又称慢性病毒感染，是指潜伏期长，发病呈进行性且最后常以死亡为转归的病毒感染。 8、顿挫型感染：开始时症状表现较重，与急性病例相似，但特征症状尚未出现即迅速消退、回复健康者，称为顿挫型感染。 9、潜伏期：从病原体侵入机体并进行繁殖时起，直到疾病的最初临诊症状开始出现为止，这段时间成为潜伏期。 10、传染源：传染源：亦称传染来源，是指某种病原体在其中寄居、生长、繁殖，并能排出体外的活的动物机体，也即传染源就是受感染的动物，包括患病动物和病原携带者 11、传播途径：病原体由传染源排除后，经一定的方式再侵入其他易感动物所经历的路径。 12、易感动物：易感性:动物对某种病原体缺乏免疫力而容易感染的特性叫做易感性，有易感性的动物叫做易感动物。 （畜群的易感性：指家畜对于某种传染病病抵抗力的大小，是抵抗力大、易感性小。） 13、垂直传播：即从亲代到子代的纵向传播方式。水平传播：是指传染病在群体之间或个体之间以水平形式横向平行传播。包括：经胎盘传、播经卵传播、经产道传播。 14、生物性传播：病原体在节肢动物体内经历发育或繁殖地阶段，是完成其生活史或传播中不可缺少的过程。 15、直接接触传播：病原体通过被感染的动物(传染源)与易感动物直接接触(交配、舐咬等)，不需要任何外界条件因素的参与而引起的传播方式。16、间接传播：（有外界环境因素参与）病原体通过传播媒介使易感动物发生传染的方式，称为间接接触传播。两种方式都能传播的传染病也可称为接触性传染病，多数传染病均属于接触性传染病。 17、传播媒介：从传染源将病原体传播给易感动物的各种外界环境因素称为传播媒介。 18、传染病：凡是由病原微生物引起，具有一定的潜伏期和临诊表现，并具有传染性的疾病，称为传染病。 19、自然疫源地：存在自然疫源性疾病的地方称为自然疫源地，即某些可引起人和动物传染病的病原体在自然界的野生动物中长期存在和循环的地区。 20、自然疫源性疾病：具有自然疫源性（人和动物疫病的感染和流行对其在自然界的保存来说不是必要的）的疾病称为自然疫源性疾病。一些疫病的病原体在自然条件下，即使没有人类或家畜的参与，也可以通过传播媒价（主要是节肢动物）感染宿主（野生动物）造成流行，并且借此在自然界长期存在。这些疫病称为自然疫源性疾病。它具有明显的地区性和季节性。注意：自然疫源性人畜共患病有：流行性出血热、森林脑炎、狂犬病、伪狂犬、流行性乙脑炎、黄热病、口蹄疫、鹦鹉热、Q热、鼠型斑疹伤寒、蜱传斑疹伤寒、鼠疫、土拉杆菌病、布鲁菌病、李氏杆菌病、蜱传回归热、钩端螺旋体病等 21、疫源地：传染源及其排出的病原体存在的地区,包括传染源及其排出的病原微生物所污染的物体、房舍、牧地、活动场所，以及怀疑有被传染的可疑动物群和储存宿主所在的地区。

动物寄生虫病学

《动物寄生虫病学》复习题 （一）名词解释 1、中间宿主：寄生虫的幼虫或无性生殖阶段所寄生的宿主。 2、二宿主蜱：蜱的幼虫及若虫在一个宿主体上吸血，而成蜱在另一个宿主体上吸血，饱血后落地产卵。 3、多宿主寄生虫：有些寄生虫能寄生于许多种宿主，我们称这些寄生虫为多宿主寄生虫，称这些宿主为非专性宿主。 4、免疫逃避：寄生虫能在具有免疫力的宿主体内生存，甚至可以繁殖，不为宿主所消灭的现象。 5、机械性传播：昆虫本身是病原发育、传播所不必需的，仅在其体表暂时存活。如虻传播伊氏锥虫。 （二）填空题 1、片形吸虫病的病原包括肝片吸虫、大片吸虫，动物生前的病原学诊断方法为循序沉淀法。 2、日本血吸虫的感染性阶段为尾蚴，该虫体寄生于人畜的肝门静脉和肠系膜静脉，其中间宿主为钉螺。 3、脑多头蚴寄生于牛、羊的脑和脊髓，其成虫名称是多头多头绦虫，该绦虫寄生的终末宿主是犬等肉食动物。 4、扩展莫尼茨绦虫寄生于羊的肠道；中间宿主是地螨；治疗动物扩展莫尼茨绦虫病时可选用丙硫咪唑（吡喹酮或甲苯咪唑）等药物。 5、疥螨寄生于人和多种动物的皮肤表皮层，痒螨寄生于动物的皮肤表面，蠕形螨寄生于动物的毛囊和皮脂腺。 6、棘钩瑞利绦虫的中间宿主是，终末宿主是，治疗棘钩瑞利绦虫病可选用等药物。 7、双芽巴贝斯虫寄生于牛的红细胞，传播媒介是微小牛蜱，治疗牛双芽巴贝斯虫病时可选用三氮脒等药物。 （三）单项选择题 1、前殖吸虫的第二中间宿主是（B ） A.蚂蚁 B.蜻蜓 C.草螽 D.淡水鱼

2、泡状带绦虫的中间宿主是（A ） A.猪 B.剑水蚤 C.甲螨 D.兔 3、羊仰口线虫寄生于羊的（C ） A.真胃 B.瘤胃 C.小肠 D.盲肠 4、毛首线虫的感染途径是（B ） A.经皮肤感染 B.经口感染 C.胎盘传播 D.接触传播 5. 环形泰勒虫寄生于牛的（B ） A．肝脏B．有核细胞和红细胞C．心脏D．肺脏 6、牛皮蝇蛆的宿主是（B ） A.猪 B.牛 C.羊 D.鸡 7. 细颈囊尾蚴寄生于猪的（B ） A. 小肠 B. 腹腔 C. 脑 D. 肌肉 8 引起鸡盲肠肝炎的病原体是( C ) A．住白细胞虫B．鸡盲肠球虫C．组织滴虫D．异刺线虫 9. 下列不属于内寄生虫的是（A ） A．微小牛蜱B．猪带绦虫C．姜片吸虫D．钩虫 10. 疥螨的主要传播途径是（D ） A．经皮肤感染B．经口感染C．自体感染D．接触感染 四、多项选择题 1. 下列寄生虫病中，可选用丙硫咪唑治疗的有（AC ） A．鸡蛔虫病B．弓形虫病C．肝片吸虫病D．鸡球虫病 2. 姜片吸虫在中间宿主体内要经过以下几个发育阶段( ABCD) A.胞蚴 B . 尾蚴 C.囊蚴 D.雷蚴 3. 寄生在犬小肠内的寄生虫有( AC ) A.犬蛔虫 B.犊新蛔虫 C.犬钩虫 D.犬恶丝虫 4. 寄生在牛、羊肝脏胆管的吸虫有( AC ) A.肝片吸虫 B.前后盘吸虫 C.双腔吸虫 D.阔盘吸虫 5. 属于鸡球虫病病原的有（ACD ） Ａ.堆形艾美耳球虫 B.斯氏艾美耳球虫 C. 柔嫩艾美耳球虫 D. 毒害艾美耳球虫（五）判断题，正确的打“√”，错误的打“×”。

动物寄生虫病试题

家畜寄生虫学试题 模拟试卷一 一、单项选择题 1．寄生虫的学名为()。 ①英文命名②瑞典文命名③由属名加种名④由种名加属名 2．患蠕虫病时，动物体内白细胞增数的是() ①嗜中性白细胞②淋巴细胞③嗜碱性白细胞④嗜酸性白细胞 3．猪鞭虫寄生于() ①胃②小肠③盲肠④结肠 4．马、羊脑脊髓丝虫病的传播媒介是() ①蚊②蚤③蠓④吸血蝇 5．鸡吞入蚯蚓感染异刺线虫病，蚯蚓是异刺线虫的() ①中间宿主②终宿主③贮藏宿主④补充宿主 6．前殖吸虫的第一中间宿主是() ①扁卷螺②钉螺③锥实螺④淡水螺 7．肝片吸虫的感染性阶段为() ①胞蚴②囊蚴③尾蚴④毛蚴 8．曼氏迭宫绦虫的第一中间宿主是( ) ①淡水螺②陆地螺③剑水蚕④蜻蜓幼虫 9．下列绦虫中那种绦虫有子宫孔() ①细粒棘球绦虫②曼氏迭宫绦虫③泡状带绦虫④豆状带绦虫 10．微小牛蜱是() ①一宿主蜱②二宿主蜱③三宿主蜱④多宿主蜱 11．蚋是() ①♀吸血②♂吸虫③♀♂都吸血④♀♂都不吸血 12．卡氏住白细胞虫的传播媒介是() ①库蠓②蚋③蚊④白蛉 13．包虫病的病原是（） ①棘球蚴②多头蚴③细颈囊尾蚴④牛囊尾蚴 14．兔艾美尔球虫寄生于（） ①小肠上皮②盲肠上皮③结肠上皮④胆管上皮 15．弓形虫特有的诊断方法是（） ①饱和盐水浮集法②水洗沉淀法③毛蚴孵化法④色素试验 16．日本血吸虫寄生于（） ①胆管②胰管③肠系膜静脉④前胃 17．克氏假裸头绦虫的中绦期幼虫是（） ①似囊尾蚴②实尾蚴③钩毛蚴④囊尾蚴 18．下列属于人兽共患寄生虫病的是（） ①猪蛔虫病②弓形虫病③猪肾虫病④猪肺虫病 19．可经皮肤感染的寄生虫是（） ①莫尼茨绦虫②捻转血矛线虫③猪蛔虫④反刍兽钩虫 20．我国牛双芽巴贝斯虫斯虫病的传播媒介是（）

《动物寄生虫病学》教学大纲

《动物寄生虫病学》课程（含实验内容）教学大纲 一、课程基本信息 课程编码：09281093 课程名称：动物寄生虫病学 英文名称：Veterinary Parasitology 开课学期：8 学时/学分：80/4 （其中实验学时：20） 课程类型：专业教育必修课 开课专业：动物医学专业 选用教材：张西臣李建华主编,动物寄生虫病学,科学出版社（第三版）,2010.01。 主要参考书： 1. 汪明主编,兽医寄生虫学（第三版，面向21世纪课程教材），中国农业出版社，2007.03 2. 孔繁瑶主编，家畜寄生虫学（第二版），中国农业大学出版社,1997.09。 3. 杨光友主编，动物寄生虫病学，四川科学技术出版社,2005.01 4. 李国清主编，兽医寄生虫学（双语版），中国农业大学出版社，2006.02 5. Edited by Richard J. Martin, Henk D. F. H. Schallig, Veterinary Parasitology , General editor L. H. Chappell ，Cambridge University Press,2000 执笔人：张西臣 二、课程性质、目的与任务 课程性质：动物寄生虫病学是动物医学专业的专业课，其与家畜传染病学、内科学、外科学、产科学等课程共同组成动物医学专业的专业课程。 课程目的：通过本课程学习使学生掌握和了解动物寄生虫病学的基本知识和理论，同时结合教学实践培养学生独立思考、独立工作的能力和严谨的科学作风。 课程任务：通过本门课程的学习使学生全面了解和掌握有关畜、禽的寄生虫病及重要人兽共患寄生虫病的病原特征、流行规律、致病机理、临床症状、剖检变化、诊断方法及防制措施等，为从事兽医临床工作、畜牧养殖业生产与管理及肉品卫生检验与技术监督等工作奠定基础。 三、教学基本要求 1. 掌握寄生虫与宿主及其类型、寄生虫对宿主的致病特点、寄生虫病的流行规律、免疫特点以及寄生虫病的诊断技术和综合防制措施。 2. 掌握重要寄生虫病的病原特征、传播规律、致病机理、临床症状、剖检变化、诊断方法和治疗、预防措施。

动物疾病常用诊断方法

动物疾病常用诊断方法 疾病是致病因素与动物机体相互斗争的过程。临床上主要诊断方法整体检查、器械检查、实验室检查、解剖等，从而查明疾病的发生过程，并得以确诊，并制定有效的防治措施。 一、整体检查: 整体检查主要是对动物的整体精神及健康情况进行检查，主要是用问诊、视诊、触诊、叩诊、听诊等方式对动物的精神状况、躯体生长情况进行整体的检查。 1、问诊:问诊主要是兽医与畜主进行交流，对患病动物进行调查的一种方法，并从中了解到患畜有哪些临床症状，饮食方面有何异常，当地有没有有流行病的发生，以前患畜有没有类似的临床症状，饲养管理方面有没有问题，通常饲养管理的好坏对于动物的健康影响甚大，易引起疾病的发生，比如饲料发霉变质，动物食用后易引起中毒，饲料中蛋白质缺乏，易导致动物毛色灰暗、粗糙、无光泽，动物抵抗力降低引起各类疾病的发生，公畜表现在精液品质差，受精率低等。通过以上交流使兽医从中拣出疾病发生的原因并措施。 2、视诊:主要是对动物的精神状态、躯体各部分及粪尿的变化情况观察，从而对动物的状况给予一定的评定，为疾病的诊断奠定基础。通常是绕动物躯体转一圈，看动物的精神状态如何，躯体各部分有无异常情况，阴道有无排泄异常的物质，粪便是否正常。 一般情况健康的动物精神状态表现在目光有神，两耳灵敏，人一接近就有反应，而有病的动物则表现在精神不正，倦怠乏力，反应迟钝，目光暗淡，头低耳耷。 健康动物肌肉丰满，皮毛色有光泽，肥瘦适当，骨骼结实，而饲养管理差，营养水平低的动物皮毛色泽淡，肥瘦不适当不均匀，蛋白质过低的动物皮毛色泽淡。有时动物寄生虫也可引起毛色暗淡。 往往有病的羊，鼻镜干燥，提示有肠道疾病，表现在廇胃积食、瘤胃迟缓等。 眼结膜正常粉红色，眼结膜苍白，提示有贫血、寄生虫病；潮红提示有酸中毒、炎症发生；眼胞浮肿，多见于水肿病；下陷多见于脱水表现下泻、大出血、大吐等; 一侧突起，可能是肿瘤；瞳孔缩小多见于胆碱类中毒，如有机磷中毒；瞳孔散大常见于垂危病者，是濒死前的一个征象，通常尿素中毒也能引

最新结核病实验室要求资料

一、各级各类实验室职责 （一）结防机构结核病实验室 1、国家结核病参比实验室 在卫生部和中国疾病预防控制中心的领导下，国家结核病参比实验室负责全国结核病实验室工作的规划、质量控制和生物安全等技术管理，为各级提供技术支持和技术服务。 根据国家结核病控制规划的要求，组织全国结核病实验室的工作，参与国家有关技术政策的制定和组织实施。 制定和推行结核病细菌学检查技术标准、操作规程及规章制度。 建立可行的全国结核病实验室质量控制标准和质量保证系统，并负责组织实施，协调、检查各省（市、自治区）结核病实验室工作。 除常规的分枝杆菌检查项目外，还应承担其它结核病诊断新技术，新方法的实施和基础研究，承担分枝杆菌最终的菌种鉴定工作。 开展有关的实施性研究。 培训结核病实验室技术人员。 接受跨国参比实验室的质量控制。 2、省级结核病参比实验室 在国家结核病参比实验室的技术指导下，负责全省结核病实验室工作计划的制定和实施、培训、督导和质量控制等技术管理。 按照国家和省结核病控制规划的要求，在国家参比实验室的统一部署下，规划本省结核病实验室工作，指导省内各级结核病实验室工作并提供技术支持。 根据国家结核病实验室质量保证体系的要求，组织全省各级实验室痰涂片镜检的质量保证工作，按要求对所辖的地市、县级实验室进行督导和评估，指导地市级实验室对各县级实验室的盲法复检和现场评估。 对本省各级结核病实验室所用耗材、试剂的质量进行评估和核准，为全省统一提供抗酸染色试剂，为省内开展分离培养的实验室统一提供培养基。 按国家统一的标准化操作程序开展涂片镜检、分离培养、药物敏感性测定和分离株的初步鉴定，有条件的省参比实验室，可建立完整的分枝杆菌菌种鉴定体系。

动物寄生虫病学试题

一.单项选择题（30分，每个1分） 1．对宿主来说寄生虫及其产物都是() ①异物②废物③营养物④处理后可利用之物 2．牛羊感染结节虫病是由于() ①吞食了感染性虫卵②吞食了感染性幼虫 ③吞食了中间宿主④感染性幼虫经皮肤钻入体内 3．在马胰腺内寄生的圆虫幼虫是() ①普通圆虫②无齿圆虫③马圆虫④小型圆虫 4．猪结节虫病的病原是( ) ①有齿冠尾线虫②后圆线虫③毛首线虫④食道口线虫 5．东毕血吸虫的中间宿主是() ①扁卷螺②钉螺③锥实螺④豆螺 6．日本血吸虫寄生于() ①胆管②胰管③肠系膜静脉④前胃 7．牛粪内发现一种大型、灰白色、椭圆形、含有卵黄细胞的虫卵，它是() ①肝片吸虫卵②前后盘吸虫卵③阔盘吸虫卵④双腔吸虫卵 8．节片戴文绦虫的中间宿主是() ①蚂蚁②家蝇③金龟子④蛞蝓 9．裂头蚴的成虫是（） ①贝氏莫尼茨绦虫②无卵黄腺绦虫③曼氏叠宫绦虫④阔节裂头绦虫10．马胃蝇是() ①♀吸血②♂吸虫③♀♂都吸血④♀♂都不吸血 11．驽巴贝斯虫的典型形状是() ①虫体长度大于红细胞半径，成对梨籽形锐角相联，每个虫体2团染色质②虫体长度小于红细胞半径，成对梨籽形钝角相联，每个虫体1团染色质③虫体长度小于红细胞半径，4个虫体尖端相联构成十字形④虫体很小，圆环形、椭圆形、圆点形，杆形、逗点形 12．马媾疫锥虫病的主要传播途径是() ①吸血昆虫机械性传播②吸血昆虫生物性传播③健畜病畜接触感染④经口感染13．需水生植物作为传播媒介的寄生虫是（） ①肝片吸虫②姜片吸虫③日本血吸虫④前后盘吸虫 14．马蛲虫病的病原是() ①尖尾线虫②类圆线虫③异刺线虫④异尖线虫 15．阔盘吸虫的第一中间宿主是( ) ①扁卷螺②钉螺③锥实螺④陆地螺 16．双腔吸虫寄生于() ①胆管②胰管③肠系膜静脉④前胃

动物传染病的防控技术

动物传染病的防控技术 1.动物传染病的概念动物传染病是由活的微生物引起的具有传染性与流行性，引起动物组织器官结构与功能异常的疾病。 2.动物传染病发生与流行的三个基本条件：⑴传染来源，⑵传播途径，⑶易感动物。这三个基本环节，一环扣一环，每一环都是疫病发生与流行的必要条件，缺少任何一个环节疫病都无法发生与流行。因此我们只要能够控制传染来源或切断传播途径或保护易感动物就能达到控制和消灭疫病的目的。 3．动物传染病的基本特征⑴由活得病原微生物引起的一类疾病⑵具有传染性与流行性，这给传染病的防控带来了不可估量的困难⑶病原微生物进入机体激活机体的免疫系统，浆细胞根据进入机体的特异性抗原产生抗体发生特异性免疫反应，或侵害机体的免疫器官产生免疫抑制降低机体的抵抗力由非易感动物变为易感动物，为病原微生物的变异提供了更有利的条件，这对动物疫病的预防极为不利。⑷耐过动物或治愈动物能够抵抗某一种特定的疫病这使控制与消灭动物疫病成为可能。⑸具有明显的临床症状和病理变化，经验丰富的兽医可根据自己多年的临床经验迅速作出判断果断采取措施，为传染病的扑灭与降低经济损失打下坚实的基础。⑹动物传染病具有一定流行规律，某些传染病的流行具有明显的季节性。比如禽流感一般在冬季多发而在夏季发病较少。 根据动物疫病发生与流行的规律与特点动物疫病的防空措施主

要有一下几个方面： （一）查明、控制和消除传染来源 1、查明传染来源 动物传染病发生或流行时，通过诊断查明传染来源是防疫工作的关键和首要环节，它关系到能否制定并采取行之有效的防疫措施。诊断（diagnosis）是通过一定的方法或手段对就诊动物或动物群进行检查，对疾病表象进行分析，从而对疾病性质、发展和预后作出判断。诊断动物传染病的方法很多，一般分为临床诊断、流行病学诊断、病理学诊断、病原学诊断（病原分离鉴定、病原基因检测）和免疫学诊断（血清学试验、动物变态反应）等方法。准确的诊断来自正确的思维、合理的方案、可靠的方法和先进的技术。特别是对重大疫情，应全面了解、系统掌握各方面的信息、材料、数据及检测结果，综合分析，作出判断。动物传染病的发生流行各有特点，疫病诊断方法多种多样，许多诊断技术在敏感性、特异性等方面并未达到尽善尽美。因此，实际工作中特别强调诊断方法的联合应用，诊断结果的综合分析，确保诊断结论准确无误。大型养殖场疫病的确定，应注重诊断的群体性。所谓诊断的群体性，是指在一个相对隔离的养殖场，在检出一例或少数几例某些疫病患病动物或 阳性动物时，要考虑全群染疫的可能性，如猪传染性萎缩性鼻炎、主支原体性肺炎等疫病。从事动物疫情监测、检疫检验、疾病研究、动物诊疗及饲养、屠宰、经营、运输等活动