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GST测定方法总结

GST测定方法总结

一、需要准备的试剂

1、提取GST的缓冲液:0.2mol/L Tris-HCl,pH7.8,含1mmol/L EDTA,5mmol/L DTT

2、KOH(1mol/L)——用于调节pH

3、0.1mol/L磷酸钾(KH2PO4)缓冲液,含1mmol/L EDTA,pH6.5(底物为CDNB和

β-4-Nitrophenyl-ethylbromid时用pH6.5的缓冲液)或7.0(底物为cumene hydroperoxide 用pH7.0的缓冲液)——测活性时的反应体系

测酶活时反应体系是3mL,4-7这几个底物必须现配现用,一百个样品只需对应的底物各20ml,所以根据用量来配以节约样品

4、底物1——CDNB(分子量202.55g/mol),CDNB必须用95%的乙醇溶解

需要的终浓度是1.0mmol/L,因此需要配的母液浓度是30mmol/L

5、底物2——cumene hydroperoxide(152.20 g/mol),用95%的乙醇溶解

需要的终浓度是1.5mmol/L,则需要配的母液浓度是45mmol/L

cumene hydroperoxide是液体,密度是1.03g/mL,用时取相应的体积定容即可

6、底物3——β-(4-Nitrophenyl)-ethylbromid(分子量230.07g/mol),用95%的乙醇溶解

终浓度是0.1mmol/L,则需要的母液是3mmol/L

7、底物GSH——用“3”磷酸钾缓冲液来溶解(用对应pH值的缓冲液来配)

CDNB需要的GSH终浓度是1.0mmol/L,需要的母液是30mmol/L;

cumene hydroperoxide和β-(4-Nitrophenyl)-ethylbromid 需要的GSH终浓度是

5.0mmol/L,需要的母液是150mmol/L

二、测定

按照下表加入各试剂

Test(ml)Blank(ml)

磷酸钾缓冲液 2.7 2.8

GSH 0.1 0.1

CDNB或其他0.1 0.1

平衡至25℃,监测吸光度直至恒定

加酶液0.1mL /

立即混合均匀,记录A340的增量,每隔30s或20s读书,约读3-5分钟

计算公式

Units/ml enzyme=(△A340/min Test-△A340/min Blank)(3.0)(df)/(9.6)(0.10)

其中

3.0——Total Volume of assay;df——Dilution factor

9.6——消光系数

0.10——Volume of enzyme used

蛋白质的测定方法

蛋白质的测定方法 测定食物中的蛋白质含量有二种方法,一是凯氏微量法,二是自动定氮分析法。 一.凯氏微量法 有手工滴定定氮和自动定氮仪定氮,实验者可根据经济条件设备而定。 1.原理 蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用过量硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。 2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4 (NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O (NH4)2SO4+2NaOH 2NH3+2H2O+Na2SO4 2.方法 本法参照GB 5009.5 -85 适用于各类食品及饲料中蛋白质的测定 3.试剂 所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。试剂均为分析纯。 3.1硫酸铜 3.2硫酸钾 3.3浓硫酸 3.4 2%硼酸溶液(或1%的硼酸) 3.5 混合指示剂:1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2份0.1%甲基红乙醇溶与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 3.6饱和氢氧化钠:500g氢氧化钠加入500ml水中,搅拌溶解,冷却后放置数日,澄清后使用。 3.7 0.01mol/L或0.05mol/L盐酸标准溶液:需标定后使用(配制及标定方法见附录) 4.仪器 消化炉凯氏定氮蒸馏装置万分之一电子天平 凯氏定氮蒸馏装置:如图所示 5. 操作步骤 5.1样品处理:精密称取0.1~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取液体样品5~20ml,放入100ml或500ml凯氏烧瓶中,加入0.2g硫酸铜,0.3g硫酸钾及3~20ml浓硫酸,放置过夜后小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,取下放冷后用约2~10ml蒸馏水冲洗瓶壁,混匀后继续加热至液体呈蓝绿透明,取下放冷,小心加10~20ml水混匀,放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白实验。 5.2按图装好定氮装置,于水蒸气发生瓶内装水至约2/3处,加甲基红指示液数滴及数毫升硫酸,以保持水呈酸性,加入数粒玻璃珠以防暴沸,加热煮沸水蒸气发生瓶内的水。 5.3向接收瓶内加入10ml ,1~2%硼酸溶液及混合指示液1滴,并使冷凝管的下端插入液面下,吸取10ml样品消化稀释液由小玻璃杯流入反应室,并以10ml水洗涤小烧杯使之流入反应室内,塞紧小玻璃杯的棒状玻璃塞。将3~10ml饱和氢氧化钠溶液倒入小玻璃杯中,提起玻璃塞使其缓缓流入反应室,立即将玻璃塞盖紧,并加水于小玻璃杯中以防漏气。加紧螺旋夹,开始蒸馏。蒸气通入反应室使氨通过冷凝管而进入接收瓶内,蒸馏2min,移动接收瓶,使冷凝管下端离开液面,然后用少量中性水冲洗冷凝管下端外部,再蒸馏1min取下接收瓶,以0.01或0.05mol/L盐酸标准溶液滴定至灰色或蓝紫色为终点。 同时吸取10ml试剂空白消化液按5.3操作。 6. 计算

图书管理系统用户手册

目录 1引言 (2) 1.1编写目的 (2) 1.2背景 (2) 1.3定义 (2) 1.4参考资料 (2) 2用途 (2) 2.1功能 (2) 2.2性能 (3) 2.2.1精度 (3) 2.2.2时间特性 (3) 2.2.3灵活性 (3) 2.3安全保密 (3) 3运行环境 (3) 3.1硬设备 (3) 3.2支持软件 (3) 3.3数据结构 (4) 4使用过程 (5) 4.1安装与初始化 (5) 4.2输入 (6) 4.2.1输入数据的现实背景 (6) 4.2.2输入格式 (6) 4.2.3输入举例 (6) 4.3输出对每项输出作出说明 (6) 4.3.1输出数据的现实背景 (6) 4.3.2输出格式 (7) 4.3.3输出举例 (7) 4.4文卷查询 (7) 4.5出错处理和恢复 (7) 4.6终端操作 (7)

用户手册 1引言 1.1编写目的 编写用户手册的主要目的是为了给使用者提供一个使用指南,以便为首次使用该系统的用户说明使用方法,以及给已经使用过或者正在使用的用户在使用过程中遇到问题时提供解决问题的方法。 1.2背景 a.本项目的名称:中小学图书管理系统 b.本项目的提出者:河北省任丘市教育体育局电教站 c.本项目的开发者:由张德轩本人独立设计、开发 d.本项目的使用者:中小学图书室、图书管理员 1.3定义 图书模板:为了能使用户批量导入图书信息,系统内置的储存有部分图书信息的Excel文档。超级用户:系统内置的管理员帐号,初始密码为admin。 1.4参考资料 《Visual C++开发技术大全》(第二版),刘锐宁梁水宋坤编著,人民邮电出版社,2009年10月第2版 《实战突击Visual C++项目开发案例整合》(第四版),孙秀梅李鑫等著,电子工业出版社,2011年9月第1版 2用途 2.1功能 该系统主要有三个大的模块:图书借阅管理、读者信息管理、图书信息查询,其中每个模块的主要功能如下: 图书借阅管理:根据读者提供的借书证号或借书卡号进行图书的借阅、图书归还操作。 读者信息管理:对读者进行注册登记、注销读者、查阅借阅记录等操作。

水分测定方法有许多种分析

水分测定方法有许多种,常采用的水份测定方法如下: 1、热干燥法: ①常压干燥法(此法用的广泛); ②真空干燥法(有的样品加热分解时用); ③红外线干燥法; ④真空器干燥法(干燥剂法); 2、蒸馏法 3、卡尔费休法 4、水分活度AW的测定 下面我们分别讲述测定水分的方法。 一、常压干燥法 1、特点与原理 ⑴特点:此法应用最广泛,操作以及设备都简单,而且有相当高的精确度。 ⑵原理:食品中水分一般指在大气压下,100℃左右加热所失去的物质。但实际上在此温度下所失去的是挥发性物质的总量,而不完全是水。 2、干燥法必须符合下列条件(对食品而言): ⑴水分是唯一挥发成分 这就是说在加热时只有水分挥发。例如,样品中含酒精、香精油、芳香脂都不能用干燥法,这些都有挥发成分。 ⑵水分挥发要完全 对于一些糖和果胶、明胶所形成冻胶中的结合水。它们结合的很牢固,不宜排除,有时样品被烘焦以后,样品中结合水都不能除掉。因此,采用常压干燥的水分,并不是食品中总的水分含量。 ⑶食品中其它成分由于受热而引起的化学变化可以忽略不计。

例:还原糖+氨基化合物△→ 变色(美拉德反应)+H2O↑ 还有H2C4H4O6(酒石酸)+ 2NaHCO3 → NaC4H4O6(酒石酸钠)+2H2O+2CO2 发酵糖(NaHCO3+KHC4H4O6) △→H2O+CO2+ NaKC4H4O6 高糖高脂肪食品不适应 只看符合上面三点就可采用烘箱干燥法。烘箱干燥法一般是在100~105℃下进行干燥。 我们讲的上面三点,应该是具体的具体分析,对于一个分析工作人员,或者是一个技术员,虽然干燥法必须符合三点要求,那么我们在只有烘箱的情况下,而且蓑红样品不见得符合以上讲的三点,难道就不测水分吗? 例如,啤酒厂要经常测啤酒花的水分,啤酒花中含有一部分易挥发的芳香油。这一点不符合我们的第一点要求,如果用烘箱法烘,挥发物与水分同时失去,造成分析误差。此外,啤酒花中的α—酸在烘干过程中,部分发生氧化等化学反应,这又造成分析上的误差,但是一般工厂还是用烘干法测定,他们一般采取低温长时间(80~85℃烘4小时),或者高温短时(105℃烘1小时) 所以应根据我们所在的环境和条件选择合适的操作条件,当然我们应该首先明白有没有挥发物和化学反应等所造成的误差。 3、烘箱干燥法的测定要点 ⑴取样(称样) 在采样时要特别注意防止水分的变化,对有些食品例如奶粉、咖啡等很容易吸水,在称量时要迅速,否则越称越重。 ⑵干燥条件的选择 三个因素:①温度;②压力(常压、真空)干燥;③时间。 一般是温度对热不稳定的食品可采用70~105℃;温度对热稳定的食品采用120~135℃。 4、操作方法 清洗称量皿→烘至恒重→称取样品→放入调好温度的烘箱(100~105℃)→烘 1.5小时→于干燥器冷却→称重→再烘0.5小时→称至恒重(两次重量差不超过0.002g即为恒重) *油脂或高脂肪样品,由于脂肪氧化,而后面一次重量反而增加,应以前一次重量计算。

6种方法测定蛋白质含量

6种方法测定蛋白质含量 [ 文章来源: | 文章作者: | 发布时间:2006-12-25| 字体: [大 中 小] 一、微量凯氏(kjeldahl )定氮法 样品与浓硫酸共热。含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与硫酸作用,变成硫酸氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下: nh 2ch 2cooh+3h 2so 4——2co 2+3so 2+4h 2o+nh 3 (1) 2nh 3+h 2so 4——(nh 4)2so 4 (2) (nh 4)2so 4+2naoh ——2h 2o+na 2so 4+2nh 3 (3) 反应(1)、(2)在凯氏瓶内完成,反应(3)在凯氏蒸馏装置中进行。 为了加速消化,可以加入cuso4作催化剂,k2so4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液,滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。 计算所得结果为样品总氮量,如欲求得 样品中蛋白含量,应将总氮量减去非蛋白 氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量,即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。 二、双缩脲法(biuret 法) (一)实验原理 双缩脲(nh3conhconh3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与cuso4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。 紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg 蛋白质。干扰这一测定的物质主要有:硫酸铵、tris 缓冲液和某些氨基酸等。 此法的优点是较快速 ,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。 (二)试剂与器材

gb5009.3水分检测方法

标准介绍 GB 5009.3-2016 食品安全国家标准食品中水分的测定 本标准规定了食品中水分的测定方法。 本标准第一法(直接干燥法)适用于在101℃~105℃下,蔬菜、谷物及其制品、水产品、豆制品、乳制品、肉制品、卤菜制品、粮食(水分含量低于18%)、油料(水分含量低于13%)、淀粉及茶叶类等食品中水分的测定,不适用于水分含量小于0.5g/100g的样品。第二法(减压干燥法)适用于高温易分解的样品及水分较多的样品(如糖、味精等食品)中水分的测定,不适用于添加了其他原料的糖果(如奶糖、软糖等食品)中水分的测定,不适用于水分含量小于0.5g/100g 的样品(糖和味精除外)。第三法(蒸馏法)适用于含水较多又有较多挥发性成分的水果、香辛料及调味品、肉与肉制品等食品中水分的测定,不适用于水分含量小于1g/100g的样品。第四法(卡尔?费休法)适用于食品中含微量水分的测定,不适用于含有氧化剂、还原剂、碱性氧化物、氢氧化物、碳酸盐、硼酸等食品中水分的测定。卡尔?费休容量法适用于水分含量大于1.0×10-3g/100g的样品。 本标准于2017年3月1日代替GB 5009.3-2010《食品安全国家标准食品中水分的测定》、GB/T 12087-2008《淀粉水分测定烘箱法》、GB/T 18798.3-2008《固态速溶茶第3部分:水分测定》、GB/T 21305-2007《谷物及谷物制品水分的测定常规法》、GB/T 5497-1985《粮食、油料检验水分测定法》第一法105℃恒重法、GB/T 8304-2013《茶水分测定》、GB/T 12729.6-2008《香辛料

和调味品水分含量的测定(蒸馏法)》、GB/T 9695.15-2008《肉与肉制品水分含量测定》、GB/T 8858-1988《水果、蔬菜产品中干物质和水分含量的测定方法》、SN/T 0919-2000《进出口茶叶水分测定方法》。 相关公告:关于发布《食品安全国家标准食品添加剂磷酸氢钙》(GB 1886.3-2016)等243项食品安全国家标准和2项标准修改单的公告 该标准文本已根据国家食品安全风险评估中心网站发布的标准勘误进行更正。点击查看勘误具体内容 标准变化 新版标准代替了GB5 0 0 9.3—2 0 1 0 《食品安全国家标准食品中水分的测定》、GB /T1 2 0 8 7—2 0 0 8《淀粉水分测定烘箱法》、GB /T1 8 7 9 8.3—2 0 0 8《固态速溶茶第3部分:水分测定》、GB /T2 1 3 0 5—2 0 0 7《谷物及谷物制品水分的测定常规法》、GB /T 5 4 9 7—1 9 8 5 《粮食、油料检验水分测定法》、GB /T8 3 0 4—2 0 1 3《茶水分测定》、GB /T1 2 7 2 9.6—2 0 0 8 《香辛料和调味品水分含量的测定(蒸馏法)》、GB /T9 6 9 5.1 5—2 0 0 8《肉与肉制品水分含量测定》、GB /T8 8 5 8—1 9 8 8《水果、蔬菜产品中干物质和水分含量的测定方法》、SN/T0 9 1 9—2 0 0 0《进出口茶叶水分测定方法》。

食品中蛋白质的含量测定

蛋白质的测定方法 测定食品中的蛋白质含量有二种方法,一是凯氏微量法,二是自动定氮分析法。 一.凯氏微量法 有手工滴定定氮和自动定氮仪定氮,实验者可根据经济条件设备而定。 1.原理 蛋白质是含氮的有机化合物。食品与硫酸和催化剂一同加热消化,使蛋白质分解,分解的氨与硫酸结合生成硫酸铵。然后碱化蒸馏使氨游离,用过量硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。 2NH2(CH2)2COOH+13H2SO4 (NH4)2SO4+6CO2+12SO2+16H2O (NH4)2SO4+2NaOH 2NH3+2H2O+Na2SO4 2.方法 本法参照GB 5009.5 -85 适用于各类食品及饲料中蛋白质的测定 3.试剂 所有试剂均用不含氨的蒸馏水配制。试剂均为分析纯。 3.1硫酸铜 3.2硫酸钾 3.3浓硫酸 3.4 2%硼酸溶液(或1%的硼酸) 3.5 混合指示剂:1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。也可用2 份0.1%甲基红乙醇溶与1份0.1%次甲基蓝乙醇溶液临用时混合。 3.6饱和氢氧化钠:500g氢氧化钠加入500ml水中,搅拌溶解,冷却后放置数日,澄清后使用。 3.7 0.01mol/L或0.05mol/L盐酸标准溶液:需标定后使用(配制及标定方法见附录) 4.仪器 消化炉凯氏定氮蒸馏装置万分之一电子天平 凯氏定氮蒸馏装置:如图所示 5. 操作步骤 5.1样品处理:精密称取0.1~2.0g固体样品或2~5g半固体样品或吸取液体样品5~20ml,放入100ml 或500ml凯氏烧瓶中,加入0.2g硫酸铜,0.3g硫酸钾及3~20ml浓硫酸,放置过夜后小心加热,待内容物全部炭化,泡沫完全停止后,加强火力,并保持瓶内液体微沸,至液体呈蓝绿色澄清透明后,取下放冷后用约2~10ml蒸馏水冲洗瓶壁,混匀后继续加热至液体呈蓝绿透明,取下放冷,小心加10~20ml水混匀,放冷后,移入100ml容量瓶中,并用少量水洗定氮瓶,洗液并入容量瓶中,再加水至刻度,混匀备用。取与处理样品相同量的硫酸铜、硫酸钾、硫酸按同一方法做试剂空白实验。

网站管理系统使用手册

网站管理系统使用 手册

前言: 本手册适用于师友网站群管理系统V3.0版本,根据客户需求,各模块的功能略有不同,所提供的界面图片仅供参考。 第一部分:常见操作 一、系统登录 从网站前台点击“管理登录”进入后台登录页面或直接从前台登录窗口,输入帐号和密码,点击“登录”进入系统。后台登录界面如下图示(图片仅供参考): Web方式登录窗口 二、系统界面

三、修改密码和个人资料 从系统操作主界面顶部右侧导航区点击“修改密码”和“个人资料”,打开修改密码窗口和修改个人资料的窗口。修改密码必须提供正确的原始密码。 修改登录密码界面 五、退出登录 从系统操作主界面顶部右侧的导航区点击“退出”,即可注销用户的登录信息并返回登录界面。 第二部分网站管理 一、站点管理

站点管理主要包括站点的创立、修改、删除、审核和站点的栏目管理。站点管理的主界面如下图所示: 1、创立新站点 从“站点管理”模块,点击“创立新网站”,打开创立新站点的编辑窗口。如下图所示: 站点包括“主站”和“班级”网站两种类型,创立“班级”网站前,必须事先在系统管理的“班级设置”模块设置好学校的班级。 创立新站点需要指定网站的名称、网址、网站目录,选择该网站的管理员。各项目指定的内容及说明详见窗口的“使用说明”。

“本站是系统门户”只有系统管理员能够指定,而且整个系统中只能指定一个网站为“门户”,被指定为门户的网站能够接受其它网站的投稿。 “管理员”能够管理本站点下的所有栏目内容,而且能够进行站点栏目的管理。 2、修改站点信息 参见“创立新站点”功能。 3、发布与取消发布 只有发布的站点才能够接受投稿和管理。管理员能够根据需要对网站进行开通与关闭。 4、站点的删除 删除某一个站点,该站点下面的所有栏目及所有内容都将同时被删除,而且不能够恢复。请慎用此功能。对于已经有内容的站点,在不需要的时候能够先设置为“不发布”。 二、栏目管理 普通用户能够从导航菜单“网站管理”—“栏目管理”进入栏目管理主界面,在该界面会列出当前用户有管理权限的所有站点(在“站点管理”模块被指定为“管理员”的站点)。栏目管理主界面如下图所示:

水分测定方法总结

水分测定方法有许多种,我们在选择时要根据食品的性质来选择。常采用的水份测定方法如下: 1、热干燥法:①常压干燥法(此法用的广泛); ②真空干燥法(有的样品加热分解时用); ③红外线干燥法; ④真空器干燥法(干燥剂法); 2、蒸馏法 3、卡尔费休法 4、水分活度AW的测定 下面我们分别讲述测定水分的方法。 一、常压干燥法 1、特点与原理 ⑴特点:此法应用最广泛,操作以及设备都简单,而且有相当高的精确度。 ⑵原理:食品中水分一般指在大气压下,100℃左右加热所失去的物质。但实际上在此温度下所失去的是挥发性物质的总量,而不完全是水。 2、干燥法必须符合下列条件(对食品而言): ⑴水分是唯一挥发成分 这就是说在加热时只有水分挥发。例如,样品中含酒精、香精油、芳香脂都不能用干燥法,这些都有挥发成分。 ⑵水分挥发要完全 对于一些糖和果胶、明胶所形成冻胶中的结合水。它们结合的很牢固,不宜排除,有时样品被烘焦以后,样品中结合水都不能除掉。因此,采用常压干燥的水分,并不是食品中总的水分含量。 ⑶食品中其它成分由于受热而引起的化学变化可以忽略不计。 例:还原糖+氨基化合物△→ 变色(美拉德反应)+H2O↑ 还有 H2C4H4O6(酒石酸)+ 2NaHCO3 → NaC4H4O6(酒石酸钠)+2H2O+2CO2

发酵糖(NaHCO3+KHC4H4O6)△→H2O+CO2+ NaKC4H4O6 高糖高脂肪食品不适应 只看符合上面三点就可采用烘箱干燥法。烘箱干燥法一般是在100~105℃下进行干燥。 我们讲的上面三点,应该是具体的具体分析,对于一个分析工作人员,或者是一个技术员,虽然干燥法必须符合三点要求,那么我们在只有烘箱的情况下,而且蓑红样品不见得符合以上讲的三点,难道就不测水分吗? 例如,啤酒厂要经常测啤酒花的水分,啤酒花中含有一部分易挥发的芳香油。这一点不符合我们的第一点要求,如果用烘箱法烘,挥发物与水分同时失去,造成分析误差。此外,啤酒花中的α—酸在烘干过程中,部分发生氧化等化学反应,这又造成分析上的误差,但是一般工厂还是用烘干法测定,他们一般采取低温长时间(80~85℃烘4小时),或者高温短时(105℃烘1小时) 所以应根据我们所在的环境和条件选择合适的操作条件,当然我们应该首先明白有没有挥发物和化学反应等所造成的误差。 3、烘箱干燥法的测定要点 ⑴取样(称样) 在采样时要特别注意防止水分的变化,对有些食品例如奶粉、咖啡等很容易吸水,在称量时要迅速,否则越称越重。 ⑵干燥条件的选择 三个因素:①温度;②压力(常压、真空)干燥;③时间。 一般是温度对热不稳定的食品可采用70~105℃;温度对热稳定的食品采用120~135℃。 4、操作方法 清洗称量皿→烘至恒重→称取样品→放入调好温度的烘箱(100~105℃)→烘1.5小时→于干燥器冷却→称重→ 再烘0.5小时→称至恒重(两次重量差不超过0.002g即为恒重) *油脂或高脂肪样品,由于脂肪氧化,而后面一次重量反而增加,应以前一次重量计算。 *对于易焦化和容易分解的食品,可以选用比较低的温度或缩短干燥时间。

蛋白质定量检测方法

Bradford法蛋白定量(Bradford Protein Assay ) Bradford Assay is a rapid and accurate method commonly used to determine the total protein concentration of a sample. The assay is based on the observation that the absorbance maximum for an acidic solution of Coomassie Brilliant Blue G-250 shifts from 465 nm to 595 nm when binding to protein occurs. Both hydrophobic and ionic interactions stabilize the anionic form of the dye, causing a visible color change. Within the linear range of the assay (~5-25 mcg/mL), the more protein present, the more Coomassie binds. Reference Bradford, M. A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem. (1976) 72, 248-254. 考马斯亮蓝染色法(Bradford法)测定蛋白质含量 原理 1976年Bradford建立了用考马斯亮蓝G250与蛋白质结合的原理,迅速、敏感的定量测定蛋白质的方法。染料与蛋白质结合后引起染料最大吸收的改变,从465nm变为595nm,光吸收增加。蛋白质-染料复合物具有高的消光系数,因此大大提高了蛋白质测定的灵敏度,最低检出量为1μg蛋白。染料与蛋白质的结合是很迅速的过程,大约需2min,结合物的颜色在1h内是稳定的。一些阳离子,如K+,Na+,Mg2+,(NH4)2SO4,乙醇等物质不干扰测定,而大量的去污剂如TritonX100,SDS等严重干扰测定,少量的去污剂可通过用适当的对照而消除。由于染色法简单迅速,干扰物质少,灵敏度高,现已广泛应用于蛋白质含量的测定。 操作 一、标准方法 取含10~100μg蛋白质溶液于小试管中,用双蒸水或缓冲液调体积到0.1mL,然后加入5mL蛋白试剂,充分振荡混合,2min后于595nm测定光吸收值。以0.1mL 双蒸水或缓冲液及5mL蛋白试剂作为空白对照。 二、微量蛋白分析法 取含1~10μg蛋白质溶液,用双蒸水调体积到0.8mL,加0.2mL蛋白试剂,充分振荡混合,2min后于595nm测定光吸收值,以0.8mL双蒸水及0.2mL蛋白试剂作为空白对照。用不同浓度的蛋白质溶液作标准曲线,以蛋白质浓度为横坐

后台管理系统使用手册

新疆勇成信息科技有限公司 易缴通办公系统使用手册 易缴通后台管理系统 1、系统组成:交易查询、交易管理、财务管理、商户系 统、系统维护、系统管理 1.1操作方法:输入网址 http://192.168.102.5:9527/EasyToPayServ/client/loginAction_showmain. action进入程序,输入工号、密码、点击登录。 输入工号 输入密码

1.2易缴通后台管理系统——交易查询模块:分为成功交易、商品成功交易两个子模块 1.2.1成功交易:查询用户的成功缴费明细,输入用户号码,查询用户缴费金额,缴费时间及其缴费终端号码。 例如:在付费号处输入“182*****268”点击查询,即可显示此用户的缴费时间,地点,及交易金额。

1.2.2商品成功交易:查询用户购买商品的成功记录。输入付费手机号、订单号码、或是终端机号码,查询用户购买业务、交易金额、及其交易时间。 例如:输入终端号码“B9910179001 ”点击查询,就会显示在此终端机上成 功交易的商品信息记录。 终端号码输入

1.3易缴通后台管理系统——交易管理模块:分为失败交易、交易监控两个子模块 1.3.1失败交易:是对系统中由于各种原因未能成功的交易记录。 输入号码即可查询用户缴费类型,缴费失败时间、缴费地点及其缴费失败原因。

1.3.2交易监控:显示当前系统中的待发和正在发送的联通、移动、腾讯业务交易信息 1.4易缴通后台管理系统——财务管理模块:终端结账模块 1.4.1终端结账:分为四种状态: 未结账:对终端内资金的反映。在未收取状态下均显示未结账。在此查看结账信息 由此查看正在交易的数据

灰分及全水分的测定方法

灰分及全水分的测定方法 灰分的测定GB/T212-2008 慢灰测试 1.1方法提要 称取一定量的一般分析实验煤样,放入马弗炉中,以一定的速度加热到(815±10)℃,灰化并灼烧到质量很定。以残留物的质量占煤样质量分数作为煤样的灰分。 1.2仪器设备 马弗炉、灰皿、干燥器、分析天平、耐热瓷板或石棉板。 1.3实验步骤 1.3.1 在预先灼烧至质量很定的灰皿中,称取粒度小于0.2mm的一般分析试验煤样(1±0.1)g,称准至0.0002g,均匀地摊平在灰皿中,使每平方厘米的质量不超过0.15g。 1.3.2 将灰皿送入炉温不超过100℃的马弗炉恒温区中,关上炉门留有15mm左右的缝隙。在不少于30min的时间内将炉内温度缓慢升至500℃,并在此温度下保持30分钟。继续升温至(815±10)℃,并在此温度下灼烧1h。 1.3.3 从炉中取出灰皿,放在耐热瓷板或者石棉板上,在空中冷却5分钟左右,移入干燥中冷却至室温(越20min)后称重。 1.3.4 进行检查性灼烧,温度为(815±10)℃,每次20min,直接到连续两次灼烧后的质量变化不超过0.0010g为止。以最后一次灼烧后的质量为计算依据。灰分小于15.00%时,不必进行检查性灼烧。 快速灰化法 将装有煤样的灰皿由炉外逐渐送入预先加热至(815±10)℃的马弗炉中灰化并灼烧至质量恒定。以残留物的质量占煤样质量分数作为煤样的灰分。 2.1 仪器:马弗炉、灰皿、干燥器、分析天平、耐热瓷板或石棉板。 2.2 实验步骤 2.2.1 在预先灼烧至恒定的灰皿中,称取粒度小于0.2mm的一般分析试验煤样(1±0.1)g,称准至0.0002g,均匀地摊平在灰皿中,使每平方厘米的质量不超过0.15g,将盛有煤样的灰皿预先分排放在耐热瓷板或者石棉板上。 2.2.2 将马弗炉加热到850℃,打开炉门,将方有灰皿的耐热瓷板或者石棉板缓慢地推入马弗炉中,先使第一排灰皿中的煤样灰化。待(5~10)min后煤样不再冒烟时,以每分钟不大于2cm的速度把其余各排灰皿顺序推入炉炽热部分(若煤样着火发生爆炸,试验应作废)。 2.2.3 关上炉门,并使炉门留有15mm左右的缝隙,在(815±10)℃温度下灼烧40min。 2.2.4 从炉中取出灰皿,放在空气中冷却5min左右,移入干燥器中冷却至室温(约20min)后,称重。 2.2.5 进行检查性灼烧,温度为(815±10)℃,每次20min,知道连续两次灼烧后的质量变化不超过0.0010g为止。以最后一次灼烧后的质量为计算依据。如遇检查性灼烧时结果不稳定,应改用缓慢灰化重新测定。灰分小于15%时,不必进行检查性灼烧。 2.3 结果的计算 按下式计算煤样的空气干燥机基灰分: 式中:Aad—空气干燥基灰分的质量百分数%; m—称取的一般分析试验煤样的重量,单位为克(g); m1—灼烧后残留物的质量,单位为克(g)。

(完整版)CRM会员管理系统用户手册定稿

CRM会员管理系统用户手册 一、系统简介 CRM会员管理系统用于客户关系管理,利用相应的信息技术以及互联网技术来协调企业与顾客间在销售、营销和服务上的交互,从而提升其管理方式,向客户提供创新式的个性化的客户交互和服务的过程。系统完整记录客户历史信息,随时可以进行调用、查询;通过短信群发、邮件群发等功能,大幅度提升工作效率。 二、开发背景 随着市场的开放,各个企业之间的竞争逐渐加剧,并且也从独立的企业与企业之间的竞争发展成为了一个个群集之间的竞争。企业的客户资源才会是最重要的资源。在21世纪,会员管理得到了网络技术的充分支持。此时客户也有条件要求企业尊重他们,并对服务的质量和及时性等方面提出更高要求。网络时代到来,使得顾客可以有更大的选择权,市场由原来的供方主导转变为顾客主导。企业在处理与客户的关系时,被动地处理顾客的抱怨、解答顾客的问题,顾客服务并未成为整体服务产品的核心。在这种情况下,企业越来越感觉到没有信息技术支持的会员关系管理系统(CRM)力不从心。于是CRM 系统便应运而生。并将成为21世纪企业竞争获胜的通行证。何谓会员关系管理,会员关系管理是企业赢得顾客的高度满意,建立起与客户的长期良好关系所开展的工作。

三、系统概述 在全球一体化、企业互动和以INTERNET为核心的时代,企业面临着如何发展潜在客户,如何将社会关系资源变为企业的销售和发展资源的一系列方法策略。在上述背景下,客户关系管理系统应运而生,系统以客户为中心,实现市场、销售、服务协同工作的管理平台。系统旨在改善企业与客户之间关系的新型运作机制,服务于企业的市场、销售、服务与技术支持等与客户有关的环节。本系统符合中小企业客户管理的实际需求,能快速有效管理公司客户,巩固客户关系,监督管理营销进程,推动企业的快速成长。系统使用了全新的客户关系管理理念,系统从完善的基础信息到客户信息维护,强大的数据查询,基本能够满足中小型企业的需要。提高客户忠诚度和保有率,实现缩短销售周期、降低销售成本、增加收入、扩展市场,从而全面提升企业的赢利能力和竞争力。 四、基本操作部分 1、系统的登录及主界面 如下图:

食品中蛋白质的测定方法

食品中蛋白质的测定方法 蛋白质的测定方法分为两大类:一类是利用蛋白质的共性,即含氮量,肽链和折射率测定蛋白质含量,另一类是利用蛋白质中特定氨基酸残基、酸、碱性基团和芳香基团测定蛋白质含量。但是食品种类很多,食品中蛋白质含量又不同,特别是其他成分,如碳水化合物,脂肪和维生素的干扰成分很多,因此蛋白质的测定通常利用经典的剀氏定氮法是由样品消化成铵盐蒸馏,用标准酸液吸收,用标准酸或碱液滴定,由样品中含氮量计算出蛋白质的含量。由于食品中蛋白质含量不同又分为凯氏定氮常量法、半微量法和微量法,但它们的基本原理都是一样的。 一凯氏定氮法 我们在检验食品中蛋白质时,往往只限于测定总氮量,然后乘以蛋白质核算系数,得到蛋白质含量,实际上包括核酸、生物碱、含氮类脂、叶啉和含氮色素等非蛋白质氮化合物,故称为粗蛋白质。 (一)、常量凯氏定氮法 衡量食品的营养成分时,要测定蛋白质含量,但由于蛋白质组成及其性质的复杂性,在食品分析中,通常用食品的总氮量表示,蛋白质是食品含氮物质的主要形式,每一蛋白质都有其恒定的含氮量,用实验方法求得某样品中的含氮量后,通过一定的换算系数。即可计算该样品的蛋白质含量。 一般食品蛋白质含氮量为l6%,即1份氮素相当于6.25分蛋白质,以此为换算系数6.25,不同类的食物其蛋白质的换算系数不同.如玉米、高梁、荞麦,肉与肉制品取6.25,大米取5.95、小麦粉取5.7,乳制品取6.38、大豆及其制品取5.17,动物胶5.55。 测定原理: 食品经加硫酸消化使蛋白质分解,其中氮素以氨的形式与硫酸化合成硫酸铵。然后加碱蒸馏使氨游离,用硼酸液吸收形成硼酸铵,再用盐酸标准溶液或硫酸标准溶液滴定,根据盐酸消耗量计算出总氮量,再乘以一定的数值即为蛋白质含量,其化学反应式如下。 (1) 消化反应:有机物(含C、N、H、O、P、S等元素)+H2S04 -→(NH4)2S04+C02↑+S02↑+S03+H3PO4+CO2↑ (2) 蒸馏反应:(NH4)2SO4+2NAOH-→2NH3↑+2H2O+NA2SO4 2NH3+4H3BO3-→(NH4)2B4O7+5H2O (3) 滴定反应:(NH4)2B4O7+2HCH+5H2O-→2NH4CH+4H3BO3 或 (NH4)2B407+H2S04+5H20-(NH4)9SO4+4H2BO2 试剂与仪器: 1、硫酸钾;

水电表管理系统用户手册教学内容

水电表管理系统 用 户 手 册

目录 第一章运行环境 (2) 第二章水电表管理系统安装、卸载及登陆 (2) 一、安装前的准备工作 (2) 二、安装 (2) 三、卸载 (2) 四、登陆 (3) 第三章各模块功能详解 (4) 一、系统维护 (4) 1.部门设置 (5) 2.用户组定义 (5) 3.用户定义 (6) 二、房间信息管理 (10) 2. 房间管理 (13) 3.购水电管理 (14) 4.现金购水电管理 (14) 5.补水电管理 (15) 6.退水电管理 (15) 7.信息修正 (16) 8.换表管理 (17) 三、制作功能卡 (17) 1.制作授权卡 (17) 2.制作功能卡 (18) 3.读授权卡信息 (19) 4.读功能卡信息 (19) 5.读写卡模式设置 (20) 四、综合查询 (20)

第一章运行环境 运行平台:Windows 2000 第二章水电表管理系统安装、卸载及登陆 一、安装前的准备工作 (1)SQL SERVER 2000光盘、水电表管理软件、读卡器。 (2)将读卡器连接到PC机上。 (3)本系统可以配合[综合收费系统]、[两层一卡通系统]、[三层一卡通系统]使用,也可脱离以上环境运行。根据系统环境的不同,系统会自动在原有系统上创建本系统所需的数据库结构。与[综合收费系统]和[两层一卡通系统]配合时,直接连接主数据库“Accdb”;与[三层一卡通系统]配合时,连接到第三方本地库“LocalCost”(注意:必须先创建第三方本地库LocalCost,然后再运行电控系统)。 二、安装 安装盘为自解压文件,双击后如下图,点击“接受”进行下一步,选择某磁盘根目录后,点击“安装”,即可安装电控软件。安装完成后将在桌面和开始菜单建立“水电表管理系统”的快捷方式。 三、卸载 本系统为绿色软件,将安装目录和快捷方式删除即可完全卸载。

水份检测方法

水分检测方法 1.目的 使检验人员能够正确对样品规格中需要水分检测的样品进行水分检测。 2.范围 适用于样品规格中需要水分检验的样品。 3.参考文件 3.1 《中国药典2010年版2部》 3.2 GB_50093-2010食品中水分的测定 4.定义 4.1 恒重:取洁净铝制或玻璃制的扁形称量瓶,置于101℃~105℃干燥箱中,瓶盖斜 支于瓶边,加热1h,取出盖好,置干燥器内冷却0.5h称量,并重复干燥至前后 两次质量差不超过2mg,即为恒重。 5.职责 QC负责按照本方法执行对样品的检测 6.程序 6.1 费休氏法 卡尔·费休水分测定法又分为库仑法和容量法。库仑法测定的碘是通过化学反应 产生的,只要电解液中存在水,所产生的碘就会和水以1:1的关系按照化学反应 式进行反应。当所有的水都参与了化学反应,过量的碘就会在电极的阳极区域形 成,反应终止。容量法测定的碘是作为滴定剂加入的,滴定剂中碘的浓度是已知 的,根据消耗滴定剂的体积,计算消耗碘的量,从而计量出被测物质水的含量。 6.1.1 试剂与材料 试剂:碘、无水吡啶、无水甲醇或者市售卡尔-费休氏试液。 6.1.2 仪器和设备 卡尔-费休水分仪、分析天平:感量为0.1mg 6.1.3 容量法 1)费休氏试液的制备与标定 a)制备:称取碘(置硫酸干燥器内48小时以上)110g,置干燥的具塞 锥形瓶中,加无水吡啶160ml,注意摇允至碘全部溶解后,加无水甲 醇300ml。称定重量,将锥形瓶至冰浴中冷却,在避免空气进入的情 况下,通入干燥的二氧化硫至重量增加72g,再加甲醇使成1000ml, 密塞,摇允,在暗处放置24小时。(也可以使用稳定的市售卡尔- 费休氏试液。市售的试液可以是不含吡啶的其他碱化剂,不含甲醇的 其他醇类等;也可以是单一的溶液或者由两种溶液混合而成。)试液 应遮光,密封,置阴凉干燥处保存。临用前应标定浓度。 b)标定:精密称取10~30mg费休氏试液用卡费休仪器直接标定。或取 干燥的具塞玻瓶,精密称入蒸馏水约30mg,除另有规定外加无水甲 醇2~5ml,在避免空气侵入的条件下,用本液滴定至溶液由浅黄色变 为红棕色,或用永停滴定法指示终点;另作空白试验,标定应取3 份

蛋白质检测方法

蛋白质的检测(参考GB/T6432-94) 一、原理 凯氏定氮法测定试样中的含氮量,即在催化剂作用下,用浓硫酸破坏有机物,使含氮物转化为硫酸铵。加入强碱进行蒸馏使氮溢出,再用酸滴定,测出氮含量,将结果乘以换算系数 6.25,计算出粗蛋白含量。 二、试剂 (1)硫酸化学纯,含量为98%,无氮; (2)混合催化剂 0.4g硫酸铜,含5个结晶水,6g硫酸钾或硫酸钠,均为化学纯,磨碎混匀; (3)氢氧化钠化学纯,40%水溶液(m/V); (4)硼酸化学纯,2%水溶液(m/V); (5)混合指示剂甲基红0.1%乙醇溶液,溴甲酚绿0.5%乙醇溶液,两溶液等体积混合,在阴凉处保存期为3个月; (6)盐酸标准溶液基准无水碳酸钠法标定; a)0.1mol/l盐酸标准溶液:8.3mL盐酸注入1000mL蒸馏水中。 b)0.02mol/l盐酸标准溶液:1.67mL盐酸注入1000mL蒸馏水中。(7)蔗糖分析纯; (8)硫酸铵分析纯,干燥; (9)硼酸吸收液 1%硼酸水溶液1000mL,加入0.1%溴甲酚绿乙醇溶液10mL,0.1%甲基红乙醇溶液7mL,4%氢氧化钠水溶液,混合,置阴凉处保存期为1个月(全自动程序用)。

三、仪器设备 (1)实验室用样品粉碎机或研钵; (2)分样筛孔径0.45mm(40目); (3)分析天平感重0.0001g; (4)消煮炉或电炉; (5)滴定管酸式,10、25mL; (6)凯氏烧瓶 250mL; (7)凯氏蒸馏装置常量直接蒸馏式或半微量水蒸气蒸馏式; (8)锥形瓶 150、250mL; (9)容量瓶 100mL; (10)消煮管 250mL; (11)定氮仪以凯氏原理制造的各类型半自动、全自动蛋白质测定仪。 四、分析步骤 (一)仲裁法 1.试样的消煮称取试样0.5-1g(含氮量5-80mg)(精确至0.0002g), 放入凯式烧瓶中,加入6.4g混合催化剂,与试样混合均匀,再加入12mL硫酸和2粒玻璃珠,将凯式烧瓶置于电炉上加热,开始小火,待样品焦化、泡沫消失后,再加强活力(360-410℃)直至呈透明的蓝绿色,然后再继续加热,消化全过程至少2h。 2.氨的蒸馏 (1)常量蒸馏法将试样消煮液冷却,加入60-100mL蒸馏水,摇匀,

水分测定法第一法烘干法

水分测定法第一法烘干 法 The manuscript was revised on the evening of 2021

水分测定法 目的: 制定水分测定标准规程,使检验人员的操作规范,确保检验结果的准确、可靠。 范围: 适用于进行水分测定的原辅料、中间体(半成品)、成品等。 内容: 测定用的供试品: ①一般先破碎成直径不超过3mm的颗粒或碎片。 ②直径和长度在3mm以下的花类、种子和果实类药材,可不破碎。 ③减压干燥法需先经二号筛。 烘干法适用范围:不含或少含挥发性成分的药品。 仪器与试剂:扁形称量瓶、干燥器(普通)、电子天平(0.0001g)、 烘箱(100~105℃,控温精度±0.1℃)、 干燥剂(硅胶、五氧化二磷,硫酸) 烘箱干燥法的测定要点 ⑴取样(称样) ⑵干燥条件的选择: 三个因素:①温度;②压力(常压、真空)干燥;③时间(一般是温度对热不稳定的食品可采用70~105℃;温度对热稳定的食品采用120~135℃)操作方法 1操作步骤 清洗称量皿→烘至恒重→称取样品→放入调好温度的烘箱(100~105℃)→烘小时→于干燥器冷却→称重→再烘小时→称至恒重(两次重量差不超过0.003g即为恒重)

(1)称量瓶恒重 清洗称量瓶→烘至恒重(烘箱、105℃、烘2小时以上,取出--干燥器中放置室温(约30分钟)---精称—于烘箱中,烘1小时,干燥器中放置室温(约30分钟)精称G1--如此重复,至连续两次干燥后称重△m≤0.003g) (2)称取试样 ①精密称定供试品2~5g(±0.5g)(或该品种下规定的重量W) ②平铺于干燥至恒重的扁形称瓶中,厚度不超过5mm,疏松供试品不超过10mm, (3)烘样 ①在100~105℃干燥5小时(打开瓶盖,半斜于称量瓶上),将瓶盖盖好,移置干燥器中,冷却30分钟,精密称定重量, ②再在上述温度干燥1小时,冷却,称重G2,至连续两次称量的差异不超过5mg (0.005g)为止。 ③计算:根据减失的重量,计算供试品中含水量(%) 计算 恒重后称量皿和样品重量(g)--恒重后称量皿重量(g) 水分=---------------------------------------------------------------------------- 样品重量(g) (即水分= G2 - G1 / W) 固形物(%)=100 -水分% G1 ——恒重后称量皿重量(g) G2 ——恒重后称量皿和样品重量(g) W ——样品重量(g)

蛋白质含量测定方法汇总

实验七蛋白质含量测定 测定蛋白质的定量方法有很多,目前常用的有染料法,双缩脲(Biuret)法,酚试剂法(Lowry)法及紫外吸收法。 [目的要求] 1.掌握测定蛋白质的含量基本方法。 2.了解染料法、双缩脲法、Lowry法和紫外吸收法测定原理。 一、染料法 [实验原理] 在酸性溶液中染料考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合,此时考马斯亮蓝G-250颜色从红色变为蓝色,吸收高峰从460nm移至595nm。利用这个原理可以测定蛋白质含量。 该法近年在某些方面有取代经典的Lowry法趋势,因为它操作简单,反应时间短,染料-蛋白质颜色稳定,抗干扰性强。本法的缺点是:对于那些与标准蛋白氨基酸组成有较大差异的蛋白质,有一定误差,因为不同的蛋白质与染料的结合是不同的,故该法适合测定与标准蛋白质氨基酸组成相近的蛋白质。 [器材] 吸量管;试管;721型分光光度计 [试剂] 1.标准牛血清白蛋白溶液:配成0.1mg/ml的溶液。 2.待测蛋白质溶液。 3.染料溶液:称取考马斯亮蓝G-250 0.1g溶于95%的酒精50ml,再加入85%的浓磷酸100ml,用水稀释至1000ml,混匀备用。 [操作步骤] 按上表分别向各支试管内加入各种试剂,充分混匀,5min后在595nm波长处以0号管调零,测定各管吸光度值(A)。以吸光度值为纵坐标,蛋白质浓度为横坐标绘制标准曲线。 2.样品测定:

取1ml样品溶液(约含25~250微克蛋白质),加入染料溶液5ml混匀,5min后测定其595nm吸光度值,对照标准曲线求得蛋白质浓度。 二、双缩脲(Biuret)法测定蛋白质含量 [实验原理] 在碱性溶液中,双缩脲(H2N-CO-NH-CO-NH2)与二价铜离子作用形成紫红色的络合物,这一反应称双缩脲反应。凡分子中含二个或二个以上酰胺基(—CO-NH2),或与此相似的基团[如—CH2-NH2,—CS-NH2,—C(NH)NH2]的任何化合物,无论这类基团直接相连还是通过一个碳或氮原子间接相连,均可发生上述反应。蛋白质分子含有众多肽键(—CO-NH—),可发生双缩脲反应,且呈色强度在一定浓度范围内与肽键数量即与蛋白质含量成正比,可用比色法测定蛋白含量。测定范围为1~10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有:硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。 此法的优点是较快速,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于快速,但并不需要十分精确的蛋白质测定。 [试剂] 1.双缩脲试剂:取CuSO4·5H20(c.P.)1.5g和酒石酸钾钠(c.P.)6.0g以少量蒸馏水溶解,再加2.5mol/L NaOH溶液300ml,KI 1.0g,然后加水至1000ml。棕色瓶中避光保存。长期放置后若有暗红色沉淀出现,即不能使用。 2.标准蛋白质溶液:用标准的结晶牛血清清蛋白(BSA)或标准酪蛋白,配制成10g/L的标准蛋白溶液,可用BSA浓度1g/L的A280为0.66来校正其纯度。如有需要,标准蛋白质还可预先用微量凯氏定氮法测定蛋白氮含量,计算出其纯度,再根据其纯度,称量配制成标准蛋白质溶液。牛血清清蛋白用H2O 或0.9%NaCl配制,酪蛋白用0.05mol/L NaOH配制。 [器材] 1.试管:15×150mm 试管7只; 2.1ml,5ml移液管; 3.坐标纸; 4.721分光光度计。 [操作步骤]

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