荚果蕨胚胎发育的研究_张笛

动物解剖学及组织胚胎学

动物解剖学及组织胚胎学 一、课程的性质、地位和任务 动物解剖学及组织胚胎学是动物医学、食品卫生检疫、动物科学、草业科学、野生动物资源等专业必修的重要专业基础课。本课程是研究正常动物机体的宏观和微观形态结构、生理机能及其发生、发展规律的科学，并为揭示正常机体的生命活动、物质代谢的机制打下牢固的形态学基础。因此，它与生理学、生化学、免疫学、内科学、外科学、产科学、繁殖学、饲养学、动物生产学等课程有着密切的联系。随着科学技术的进步，动物解剖学及组织胚胎学得到了迅速发展，出现了组织化学、细胞培养、分子生物学、神经内分泌学、发育生物学等许多边缘学科，从而使本学科专业基础课之间的相互渗透和联系更为密切。所以，动物解剖学及组织胚胎学既是有关专业基础课和专业课的先导，还应为学生拓宽知识面和提高其适应能力奠定坚实的理论基础。旨在通过本课程的学习，让学生系统地掌握动物有机体各系统、器官、组织的正常形态结构，了解各器官、系统的生理功能，从而为后期相关课程的学习，打下雄厚的理论基础和直观的形态学基础。 二、教学目标要求 ( 一) 理论知识方面 本课程是一门形态学，其直观性和实践性极强是本课程的主要特点之一。因此，教师在教学活动中，必须以辩证唯物主义思想与实践的观点为指导，引导学生用发生发展的观点、局部和整体统一的观点、形态与功能相结合的观点、理论联系实际的观点观察研究动物有机体，并结合动物科学、草业科学、食品卫生检疫等专业的学科特点，运用直观性强的大体解剖标本、组织切片标本、模型、挂图、幻灯片、电视片、多媒体课件和现代教学手段，以及教学实习等教学过程，将肉眼无法看到或看清的细胞、组织、胚胎的微细结构真实、形象、直观的展现出来，从而使学生理解和掌握教学内容。将本课程的重点章节( 运动系统、被皮系统、消化系统、呼吸系统、泌尿系统、生殖系统、内分泌系统、神经系统和动物早期胚胎发育) 用通俗易懂和生动形象的语言讲述清楚，突出重点，讲透难点；同时将动物解剖学与组织胚胎学的内容与学生感兴趣的相关人体结构知识及常见疾病结合起来，使学生能够扩大知识面并联系实际建立起完整的理论知识体系。达到专业教学计划所要求的理论知识水平。 ( 二) 实验技能方面

硫酸铜对斑马鱼胚胎发育的影响

中国海洋大学实验报告 年月日姓名：专业年级：同组者： 课程：发育生物学实验题目：硫酸铜对斑马鱼胚胎发育的影响 一．【实验目的】 1、锻炼独立开展科学实验、分析和解决实际问题的能力； 2、加深环境对动物受精及早期发育影响的理解 二.【实验原理】 重金属污染是近年渔业环境污染的公害之一。随着工农业的发展，浓度严重超标的一些重金属离子被排入水体而造成污染，对鱼类有毒害作用。目前水体中的重金属主要有Cd、Cu、Pb、Zn等。其中Cu离子就具有较强的毒性，可以和蛋白质中游离的羧基形成不溶性的盐，使蛋白质变性，因此常被用作杀菌剂。 斑马鱼（Danio rerio）是常见的暖水性（21~32℃）观赏鱼，鲤科,个体小（4~5㎝），常年产卵，鱼卵易收集，性成熟周期短且胚胎透明，便于观察药物对其体内器官的影响。雌性斑马鱼可产卵200枚，胚胎在24小时内就可发育成形，繁殖水温24℃时，受精卵经2~3天孵出仔鱼；水温28℃时，受精卵经36小时孵出仔鱼，这使得生物学家可以在同一代鱼身上进行不同的实验，进而研究病理演化过程并找到病因。由于斑马鱼基因与人类基因的相似度达到87%，这意味着在其身上做药物实验所得到的结果在多数情况下也适用于人体，因此它受到生物学家的重视。 在斑马鱼的整个生活周期中，胚胎期和仔稚幼鱼早期发育阶段对重金属污染最为敏感。据报道，波罗的海春天产卵的鲱鱼，在10 ppb 的Cu2+，水的盐度为5.7条件下即对它的受精和发育有影响。30 ppb的Cu2+引起大西洋鲱鱼（Clupea harengus）卵的死亡，而35 ppb 的Cu2+也使太平洋鲱鱼（C.pallasi）的胚胎发生大量死亡[1]。吴玉霖等1990年依据不同金属对褐牙鲆胚胎的滞育、致畸、成活率及孵化率的综合影响指际，得出5种金属对褐牙鲆胚胎的毒性大小顺序为：Cu2+>Zn2+>Cd2+>Pb2+>Cr3+,对仔鱼的毒性大小顺序为Cu2+>Cd2+>Zn2+>Pb2+>Cr3+ [2]。 三.【实验步骤】 1、实验材料 斑马鱼囊胚、CuSO4为分析纯，充分曝气的去离子水、24孔细胞培养板、恒温培养箱、用充分曝气的蒸馏水配置成浓度为5 mg/L 的CuSO4母液，用时稀释。. 2、实验方法 1）硫酸铜浓度梯度的设定 经查阅文献，确定斑马鱼胚胎发育从受精到孵化出幼鱼过程中的CuSO4半致死浓度和安全浓度范围，设定5个浓度梯度和和1个对照组。 研究表明，Cu2+对大银鱼受精卵的安全浓度为0.00112 mg/L[3]，对鮸状黄姑鱼仔鱼的安全浓度为0.006mg/L[4]，所以设定对照组CuSO4的浓度梯度分别为0（空白对照），0.001 mg/L，0.01 mg/L，0.1 mg/L，1.0 mg/L，2.0 mg/L。每个浓度组设定4个平行组。使用暴晒后的

斑马鱼动物模型的应用介绍

斑马鱼动物模型的应用 斑马鱼（Danio rerio）属于辐鳍亚纲（Actinopterygii）鲤科（Cyprinidae）短担尼鱼属（Danio）的一种硬骨鱼，原产于南亚，是一种常见的热带观赏鱼，因其体侧具有斑马一样暗蓝与银色相间的纹条而得名。 斑马鱼个体小，易于饲养，成体长4-5cm，雄鱼体修长，雌鱼体肥大。可在有限空间里养殖相当大的群体，可满足样本需求量大的研究。斑马鱼发育迅速，在28.5℃培养条件下受精后约40min完成第一次有丝分裂，之后大约每隔15min分裂一次，24h后主要器官原基形成，相当于28d的人类胚胎，幼鱼孵出后约3个月达到性成熟。雌雄鱼通过调控光周期控制14:10（光照:黑暗）产卵时间，成熟鱼每周可产卵一次，一尾雌鱼每次可产卵100-300枚。胚胎体外受精，体外发育，胚体透明，易于观察。受精卵直径约1mm，易于进行显微注射和细胞移植等操作。 一、斑马鱼的品系 经过30多年的研究应用和系统发展，已有约20个斑马鱼品系，斑马鱼基因数据库-ZFIN （http://zfin/org）里有相关的资料可供查询和下载。目前研究中常用的斑马鱼野生型品系主要为AB 品系、Tuebingen（Tu）品系、WIK 品系，斑马鱼基因组计划所用品系是Tu。AB 品系是实验室常用的斑马鱼品系，由单倍体细胞经早期加压法获得。Tu品系斑马鱼具有胚胎致死突变基因，用于基因组测序前敲除该致死突变基因。WIK品系较Tu品系具有更多的形态多样性。此外，还保存有3000多个突变品系和100多个转基因品系。这些品系资源对于利用斑马鱼开展各种科学研究起着很大的推动作用。 二、斑马鱼突变品系的筛选 斑马鱼突变的方法主要有三种：已基亚硝脲（ENU）化学诱导、γ或χ射线照射和插入诱变。ENU是一种DNA烃基化试剂，在生殖细胞减数分裂前诱导碱基对的替换，诱导产生的突变率为0.1%-0.2%，涉及单个基因的突变。射线照射导致染色体大片段的缺失或染色体重排，产生突变率达1%。插入诱变是以逆转录病毒为载体，用显微注射法将目的基因片段导入斑马鱼受精卵，整合到基因组中，干扰正常基因表达。射线照射产生的突变率是ENU 化学诱导的10倍，但由于突变涉及多个基因，突变的表型是受若干基因调控的结果，不利于基因功能的分析，因此，ENU化学诱导法是斑马鱼突变的主要方法。研究含有纯合致死

goosecoid在斑马鱼早期发育中的作用.doc

goosecoid在斑马鱼早期发育中的作用 Wnt/β catenin信号通路在早期胚胎发育中起到非常重要作用,它调控胚胎背腹图式发生。goosecoid(gsc)基因是经典Wnt信号通路的下游靶基因之一,同时对Wnt信号起负反馈抑制作用。之前报道中,gsc在小鼠和人中突变之后都会产生骨骼发育不全等症状,而目前关于gsc在斑马鱼中的具体生理功能还不是很清楚。 之前研究表明,用吗啡基-吗啉基技术(Morpholino,MO)敲低斑马鱼gsc,无明显缺陷。MO由于其作用时间短的限制,不能很好的研究基因在后期发育中的功能。而近年来的出现的基因编辑技术如TALENs,有着靶向高,操作方便的优点,成为可以用于基因功能的研究的新工具。 为了研究gsc在斑马鱼中的具体功能,我们利用TALENs技术,构建了斑马鱼gsc突变体模型,用于研究gsc在斑马鱼中的早期发育中的作用。得到的结果如下:(1)利用TLANEs技术敲除斑马鱼gsc,筛选得到移码缺失7bp的突变体。(2)gsc杂合突变体自交结果显示,突变体早期无明显背腹缺陷,但发育至受精后第五天(5 dpf)时,鱼鳔发育缺陷。 测序表明鱼鳔缺失个体为纯合突变体,经统计其占全部胚胎的21%。表明gsc 突变与鱼鳔缺陷是相关的。(3)对gsc突变体进行石蜡切片及苏木精伊红(HE)染色,结果显示,突变体鱼鳔结构存在。 (4)gsc突变体中,鱼鳔标记基因hb9原位杂交结果显示,鱼鳔发生未受到影响。表明突变体鱼鳔结构正常,但未充气。(5)充气由口、咽、鳔管等多个器官协调完成,而gsc后期特异表达在咽部。 gsc突变体咽部软骨阿尔新蓝染色,及石蜡切片,苏木精伊红染色,结果均表

斑马鱼-全胚胎免疫组织化学染色

斑马鱼-全胚胎免疫组织化学染色 斑马鱼胚胎的全组织免疫化学染色被广泛应用，这一技术需要额外的步骤来固定和通透以确保卵膜能够完全被溶液渗透。固定、封闭、抗体孵育、洗脱、通透以及底物显色过程都需要比正常的免疫细胞化学/免疫组化更长的时间，以使得溶液可以渗透到达样品的中心。 实验步骤： 1. 将胚胎置于5ml的器皿中固定1h。固定液的选择要谨慎，取决于两点：一是对于同一 种抗体，在冰冻切片中成功使用的固定液，可用来做全胚胎染色实验，二是根据目的蛋白。可用4%的多聚甲醛或者预混合的固定液来固定，预混合的固定液十分适合于神经蛋白。 使用Pasteur移液管来移动胚胎、吸取溶液，这有利于防止来自于移液管窄末端对胚胎的损坏。 2. 用含1%Triton的PBS清洗胚胎至少四次，每次5分钟。 3. 将胚胎置于冰丙酮/PBS混合液中8分钟。 丙酮可用帮助通透坚固的卵膜，对于其他样品如鸡和鼠这一步可省略。 4. 用含1%Triton的PBS清洗胚胎至少四次，每次5分钟。 5. 用封闭液（含1%Triton、10%胎牛血清的PBS）室温孵育胚胎1h。 6. 阻断过氧化物酶：将胚胎置于含0.1%H2O2的封闭液中4°C过夜。 7. 用封闭液清洗胚胎2次。 8. 将Pasteur移液管末端剪掉形成2ml的管子，用其转移胚胎。加入合适浓度的一抗。 一般在全胚胎染色中抗体孵育的时间比较久，为了防止微生物的生长，在稀释一抗的封闭液中会加入0.02%的叠氮化钠。 9. 样品在混合器上4°C缓慢旋转孵育1-4天。 根据不同的抗体以及胚胎的大小，孵育的时间需要进行一些优化。 10. 用含1%Triton、10%胎牛血清的PBS清洗胚胎3次，每次1h。 11. 用含1%Triton的PBS清洗3次，每次10分钟。 12. 用DAB底物室温孵育胚胎2-3h。 13. 将胚胎转移到一个碟子中，加入新鲜的配制的显示底物（每1mlDAB加5ul的过氧化氢）。 14. 用PBS清洗3次，使得样品达到理想的染色强度。 15. 爬片观察胚胎：观察分析前样品于4°C避光储存。 爬片：用融化的含1%琼脂糖的PBS爬片。一旦加入琼脂糖后，用含70%甘油的PBS 覆盖琼脂糖，再在样品上放置一个盖玻片。

动物解剖及组织胚胎学_复习题_FXT222301_1206

《家畜解剖组织学》复习题及参考答案 （本套复习思考题总分300分） 一、名词解释题（每小题3分，共45分） 1.胸廓：指由背侧的胸椎、两侧的肋和腹侧的胸骨组成一个前口小、后口大的截顶、平卧 的圆锥形腔体，称为胸廓。 2.骨盆：指由左右髋骨、背侧的荐骨、前3～4个尾椎及两侧的荐结节阔韧带围成的前口大、 后口小的腔体。 3.鼻旁窦：指头骨内外骨板之间含气腔体的总称，它们直接或间接与鼻腔相通，故称为鼻 旁窦，又称副鼻窦。 4.乳镜：指家畜乳房的皮肤薄而柔软，毛稀而细，与阴门裂之间有线性聚合毛流的皮肤纵 褶，称为乳镜。 5.内脏：指大部分位于胸腔、腹腔和骨盆腔内的管道系统，在神经体液的调节下直接参与 动物的新陈代谢，个体生存，种族繁衍的器官系统，包括消化、呼吸、泌尿和生殖系统等。 6.胸膜腔：指胸膜壁层和胸膜脏层在肺根处互相移行共同围成的腔隙。 7.神经核：指在中枢神经系内，由功能和形态相似的神经细胞胞体和树突集聚而成的灰质 团块称为神经核。 8.内脏神经：指分布于内脏器官、心脏、血管、腺体、皮肤立毛肌等的神经总称。 9.细胞器：指分布于细胞质内，具有一定形态结构和执行一定功能的微小器官，如线粒体、 内质网、高尔基体、溶酶体等。 10.血浆：指为血液的细胞间质成分呈淡黄色，其中水分约占91％，其余9％为各种溶解状 态的有机物和无机物，如纤维蛋白原、血清蛋白、球蛋白、糖类、脂质、激素、无机盐及代谢产物等。 11.肌节：指骨骼肌和心肌肌原纤维上相邻两条Z线间的部分。 12.气血屏障：指肺泡与肺泡隔内毛细血管之间进行气体交换所通过的结构。 13.卵泡：指卵巢皮质中由一个卵母细胞和包在其周围的卵泡细胞构成，包括原始、生长、 成熟和闭锁卵泡。 14.精子获能：指进入母畜生殖道内的精子，需要在子宫、输卵管内渡过一段时间进行受精 的准备，最后获得受精能力的过程。 15.受精：指精子穿过卵子的放射冠、透明带后进入卵子后形成合子的过程。或：精、卵细 胞结合成合子的过程。 二、选择题（每小题有1个或多个答案，多选或少选均不给分。每小题2分，共120分） 1.光镜下切片的厚度一般为（）。 A、5~8微米 B、20~30微米 C、50~80纳米 D、20~30埃 E、5~8毫米 2.具有吞噬功能的细胞有（）。 A、嗜中性粒细胞 B、淋巴细胞 C、尘细胞 D、成纤维细胞 E、组织细胞

斑马鱼的胚胎发育与影响因素

鲁东大学生命科学学院学院20 10 －20 11 学年第二学期学院______________ 专业_____________ 年级________ 班________ 学号 _____________姓名______________ 密封线 学生须将文字写在此线以下 《发育生物学》课程论文 课程号：2522080

.关键词：斑马鱼；发育；葡萄糖；溶液浓度；温度；TCDD 一、斑马鱼简介 斑马鱼(zebra fish)，又名蓝条鱼、花条鱼、斑马担尼鱼。 斑马鱼是一种常见的热带鱼。斑马鱼体型纤细，成体长3-4cm，对水质要求不高。孵出后约3个月达到性成熟，成熟鱼每隔几天可产卵一次。卵子体外受精，体外发育，胚胎发育同步且速度快，胚体透明。发育温度要求在25-31℃之间。斑马鱼由于个体小，养殖花费少，能大规模繁育，且具许多优点，吸引了众多研究者的注意。经过30多年的研究应用和系统发展，已有约20个斑马鱼品系，斑马鱼基因数据库里有相关 斑马鱼的资料可供查询和下载，方便了研究。斑马鱼的细胞标记技术、组织移植技术、突变技术、单倍体育种技术、转基因技术、基因活性抑制技术等已经成熟，且有数以千计的斑马鱼胚胎突变体，是研究胚胎发育分子机制的优良资源，有的还可做为人类疾病模型。斑马鱼已经成为最受重视的脊椎动物发育生物学模式之一，在其它学科上的利用也显示很大的潜力. 二、斑马鱼的发育过程 1〕卵子的发生 斑马鱼卵子发生过程中乱母细胞的发育是不同步的。在卵子发生早期，核内许多小核仁开始富集，其数目在接下来的时期中可以达到1500个，他们分布在和的外围和靠近内部核膜。 斑马鱼卵子发生过程一般分为5个时期，即StageⅠ-Ⅴ;有时也将StageⅡ和Ⅲ作为一个时期将卵子发生分为4个时期。各个时期的基本特征是： StageⅠ是原始滤泡生长阶段，乱母细胞没有卵黄，是一个有细胞质包围着升值滤泡的圆形球体。其染色体去浓缩并出现灯刷装 状表型，此时DNA高度延伸，形成一个具有典型形态学上的包含RNA和蛋白质的恻环。染色体的这一构型被认为有利于母源性基因的转录激活，其出现与斑马鱼卵母细胞中RNA合成的高速率是一致的。在这时期，卵母细胞和滤泡细胞的微小突起（microvilli）开始伸展并延伸到彼此的区域。一旦形成，这些连接包含粘附连接、细胞桥粒和间隙连接，它们可能与滤泡细胞和卵母细胞间的交流和卵母细胞附近小分子的吸收有关。同时，卵黄膜组分开始在滤泡细胞和卵母细胞之间富集；其他结构，如线粒体、高尔基体和内质网等富集，反映了产生大量产物的需要。 StageⅡ卵母细胞的特点是富集了大量蛋白质和油脂，对于卵子激

动物解剖与组织胚胎学1

第1套 1、在下列骨中哪个骨不是后肢骨（） A、股骨 B、膝盖骨 C、胫骨 D、尺骨 参考答案：D 2、在下列关警卫员哪个关节不是前肢关节（） A、肩关节 B、肘关节 C、指关节 D、膝关节 参考答案：D 3、在下列关节中哪个关节是后肢关节（） A、荐髂关节 B、髋关节 C、肘关节 D、跗关节 参考答案：C 4、在下列骨中哪个骨不是前肢骨（） A、肩胛骨 B、股骨 C、桡骨 D、尺骨 参考答案：B 5、下列器官哪个不是实质性器官（） A、肝 B、肾 C、胰 D、胃 参考答案：D 6、在下列舌粘膜表面的乳头中，哪一种舌乳头是牛所缺少的（） A、叶状乳头 B、豆状乳头 C、菌状乳头 D、轮廓乳头

参考答案：A 7、在下列软骨中哪一种软骨不是喉软骨（） A、会厌软骨 B、甲状软骨 C、环状软骨 D、气管软骨参考答案：D 8、下列哪种家畜的肾属于平滑多乳头肾（） A、马 B、牛 C、羊 D、猪 参考答案：D 9、下列哪种家畜的盲肠最发达（） A、马 B、牛 C、羊 D、猪 参考答案：A 10、下列哪种家畜的肝较发达，并且分叶分常明显（） A、猪、 B、牛 C、羊 D、马 参考答案：A 11、下列哪种家畜的尿道突最发达（） A、马 B、牛 C、羊 D、猪 参考答案：C 12、下列哪种家畜的卵巢有排卵窝（） A、马 B、牛 C、羊 D、猪

参考答案：A 13、下列哪种家畜的结肠旋袢呈螺旋状（） A、马 B、牛 C、羊 D、猪 参考答案：D 14、下列哪种家畜的肝无胆囊（） A、马 B、牛 C、羊 D、猪 参考答案：A 15、下列哪种家畜的胃有胃憩室（） A、猪 B、牛 C、羊 D、马 参考答案：A 16、下列哪种家畜的大结肠（升结肠）盘曲成双层马蹄铁形（） A、马 B、牛 C、羊 D、猪 参考答案：A 17、下列哪种家畜的肾属于有沟多乳头肾（） A、马 B、羊 C、牛 D、猪 参考答案：C 18、下列哪种家畜的子宫解特别长（）

斑马鱼胚胎发育过程中Mef2c的表达

万方数据

复旦学报（医学版）２００６年１月，３３（１） 脏的发生与发育过程中的作用提供依据。 材料和方法 斑马鱼胚胎固定收集不同发育时期的ＡＢ野 生型斑马鱼（购自俄勒冈大学，斑马鱼养殖系统从美国ＡｑｕａｔｉｃＨａｂｉｔａｔｓ公司引进）胚胎：６ｈｐｆ（ｈｏｕｒｓｐｏｓｔ—ｆｅｒｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ，受精后６ｈ）、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１５、１７、２０、２４、３６、４８ｈｐｆ，用４％多聚甲醛溶液固定过夜（至少固定１２ｈ），保存于甲醇溶液中，置一２０℃备用。 引物设计与合成首先根据Ｇｅｎｂａｎｋ数据库查得斑马鱼Ｍｅｆ２ｃｃＤＮＡ序列（Ｇｅｎｂａｎｋ：３０５７５），以包含密码子１３１９～２３８５位的基因序列为ＲＮＡ探针序列，探针序列总长１０６６ｂｐ。ＲＮＡ探针的引物序列（由上海赛百盛生物有限公司合成）为：Ｆｏｒ—ｗａｒｄ：５＇－ＣＴＣＡＡＡＴＡＣＧＧＡＡＡＡＧＣＴＡＣ一３ ７Ｒｅｖｅｒｓｅ：５＇－ＣＧＣＣＣＧＴＧＧＧＡＣＴＧＡＴＧＡ ＧＡＧ一３ ７。 ＰＣＲ扩增以斑马鱼基因组总ＤＮＡ为模板，用以上两条引物特异扩增ＲＮＡ探针序列。扩增条件为：９５℃预变性２ｍｉｎ，９５℃变性４５Ｓ，５７℃复性４５Ｓ，７２℃延伸２ｍｉｎ，重复３０个循环，最后７２℃延伸７ｍｉｎ。１％琼脂糖凝胶电泳检测扩增产物。 合成反义ＲＮＡ探针将纯化的扩增产物连接到ｐＧＥＭ—Ｔ载体（Ｐｒｏｍｅｇａ）中，然后转化到ＤＨ５ａ感受态菌株（博大泰克）中进行克隆。根据Ｈａｒｌａｎｄ的方法［４３抽提转染后的连接载体质粒（测序验证质粒中插入序列是否正确），ＮｏｔＩ内切酶（ＮＥＢ）酶切完全，以其为模板转录合成反义ＲＮＡ探针。 整体原位杂交取不同发育时期的胚胎，用１×ＰＢＳＴ溶液洗去多余的甲醇溶液，将胚胎置于６５℃水浴进行预杂交３ｈ，然后加入所合成的反义ＲＮＡ探针６５℃水浴杂交过夜。多余的探针用０．２×ＳＳＣ溶液洗去，加入ａｎｔｉ—Ｄｉｇ—ＡＰ（Ｒｏｃｈｅ）与反义ＲＮＡ探针结合过夜。未结合的抗体用１ＸＰＢＳＴ溶液洗去，再加入ＢＣＩＰ／ＮＢＴ／ＮＴＭＴ溶液显色３０ｍｉｎ，迅速用１ＸＰＢＳＴ溶液洗去多余的显色液，在显微镜下观察并记录结果。 结果 探针合成效果琼脂糖凝胶电泳检测结果表明，本实验中设计的引物能够特异性地扩增目标基因片段。图１Ａ为特异扩增的ＲＮＡ探针序列电泳检测结果，扩增的ＲＮＡ探针序列大小约１０６６ｂｐ。图１Ｂ为酶切后电泳迁移率的改变，２、３泳道是未被酶切的质粒序列，４、５泳道是酶切后的质粒序列。酶切后质粒电泳速率要比未酶切质粒的速率要快。同时，我们将该序列测序后进一步验证（由上海赛百盛生物有限公司测序），连接至ｐＧＥＭ—Ｔ载体中的ＲＮＡ探针的序列是正确的。 图ｌ凝胶分析ＰＣＲ结果（Ａ）和质粒酶切结果（Ｂ）Ｆｉｇ１ＧｅｌａｎａｌｙｓｉｓＰＣＲ（Ａ）ａｎｄｐｌａｓｍｉｄ（Ｂ） Ａ：１：ｍａｒｋｅｒ；２－５；ＲＮＡｐｒｏｂｅ．Ｂ：１：ｍａｒｋｅｒ；２－３：Ｍｅｆ２ｃＲＮＡ—ｐＧＥＭＴ； ４－５：Ｍｅｆ２ｃＲＮＡ－ｐＧＥＭＴｃｕｔｂｙＮｏｔ－１ 斑马鱼整体原位杂交在斑马鱼胚胎发育早期，Ｍｅｆ２ｃ在胚体中没有自身的转录产物，仅少许从母体自带的Ｍｅｆ２ｃｍＲＮＡ存在，胚体染色呈现为弥散均染状态（图２：ａ，ｂ见封二）。当胚胎逐步发育到１３ｈｐｆ，Ｍｅｆ２ｃ在体节中开始表达，此时约已形成８个体节，表现为在背侧出现两条条带状的深染部位；同时，在心脏中的表达也开始出现，在靠近头侧部出现有深染的片状区域，代表早期的生心区的细胞中有Ｍｅｆ２ｃ表达（图２：ｃｌ，ｃ２见封二）。当胚胎发育至１５ｈｐｆ时，体节以及心脏中Ｍｅｆ２ｃ的表达更加明显，Ｍｅｆ２ｃ在体节的表达表现为各个体节之间能清晰区分，并表现为典型的Ｖ型结构；同时，心脏中的表达表现为生心区细胞开始集中，逐步靠近体轴开始形成心管结构，体现出染色更为集中，由片状染色转变成为线状（图２：ｄｌ，ｄ２见封二）。随着胚胎进一步发育，体节逐步完善，心管逐步形成，Ｍｅｆ２ｃ仍然保持较高的转录水平，体节中表现为随着体节的增多，Ｖ型染色的体节也随之增多；在心脏的表达呈现出明显的线管状结构（图２：ｅ，ｆ见封 －－）。斑马鱼的胚胎发育随着时间的进展而逐步完　万方数据

《动物解剖及组织胚胎学》试题

《家畜解剖组织学》复习题 适用专业：网络教育畜牧兽医专业 一、名词解释题 1.血清：指血浆中纤维蛋白原凝固后与血细胞一起形成血块，剩下的淡黄色清亮液体。 2.肌节：指骨骼肌和心肌肌原纤维上相邻两条Z线间的部分，称为肌节。 3.真肋：指肋软骨与胸骨直接相连的肋，称为真肋或胸骨肋。 4.关节盘：指位于两关节面之间的纤维软骨板，使两关节面更加吻合，扩大关节运动和缓 冲震动作用，称之为关节盘。 5.伸肌：指分布在关节的伸面，通过关节角顶，肌肉收缩使关节角增大的肌肉。 6.神经节：指在周围神经系统中，神经元胞体聚集在一起形成的结构，称为神经节。 7.汇管区：指靠近肝门处，相邻几个肝小叶之间，小叶间动脉、小叶间静脉和小叶间胆管 汇合部位，被结缔组织填充，这个三角形或椭圆形区域，称为汇管区或门管区。 8.受精：指精子和卵子结合，形成一个合子或受精卵的过程，称为受精。 9.精子获能：指进入母畜生殖道内的精子，需要在子宫、输卵管内渡过一段时间进行受精 的准备，最后获得受精能力的过程。 二、选择题 1.属于细胞内含物的是（ BC ）。 A、线粒体 B、糖原 C、脂类 D、溶酶体 E、高尔基体 2.变移上皮分布于（ CD ）。 A、气管 B、肠 C、膀胱 D、输尿管 E、食管 3.神经元中的尼氏体是由（ C ）密集排列组成。 A、微管 B、微丝 C、粗面内质网 D、滑面内质网 E、线粒体 4.牛、羊的腓骨骨体退化消失，远端形成一小骨，称为（D ）。 A、跟骨 B、距骨 C、腓跗骨 D、踝骨 E、膑骨 5.构成胸廓的骨有（ ACD ）。 A、胸椎 B、腰椎 C、肋 D、胸骨 E、肩胛骨 6.在下列头骨中，具有眶下孔和面结节的骨是（ D ）。 A、额骨 B、颧骨 C、下颌骨 D、上颌骨 E、泪骨 7.家畜的前脚骨包括（ BCDE ）。 A、肱（臂）骨 B、腕骨 C、掌骨 D、指骨 E、籽骨 8.家畜的后脚骨包括（ BCDE ）。 A、胫骨 B、跗骨 C、跖骨 D、趾骨 E、籽骨 9.关节的基本结构包括（ABC ）。 A、关节面及软骨 B、关节囊 C、关节腔 D、关节盘 E、关节唇

斑马鱼性腺促熟及早期发育模式

斑马鱼性腺促熟和早期发育模式 XXX,YYY,ZZZ 一、目的与要求： 1、掌握斑马鱼性腺促熟和产卵调控技术。 2、加深硬骨鱼早期形态发育模式的理解。 二、实验内容： （一）斑马鱼性腺促熟和产卵调控。 1、斑马鱼特性： 斑马鱼一般4月龄性成熟，5月龄鱼繁殖较好；繁殖周期短，一般7天左右。 雌雄分辨：雌性（偏银灰色，体形丰满，腹部膨大、松软，仰腹可见有明显的卵巢轮廓，手摸富有弹性）；雄性（偏柠檬色，腹部扁平，身材显得修长）。【如图一、图二】 图一：雄鱼图二：雌鱼 精、卵体外受精，体外发育，且速度快。发育速度与温度密切相关：在25℃的培养条件下，从受精卵到孵化约需36h；在28℃的培养条件下，从受精卵到孵化约需24h，即胚胎发育成熟。 2、斑马鱼繁殖准备： 将亲鱼雌、雄分开饲喂2～3天（要在饲养箱中加一玻璃隔板，将雌、雄分开，但同时相互之间又要能够看到），繁殖时将雌、雄按1：1或2∶1比例放入产卵池中进行产卵受精。在此过程中一般采用10h光照，14h黑暗的光周期。斑马鱼一般在混合的次日凌晨产卵，为防止亲鱼吞噬鱼卵，可用网孔2～3mm的网将亲鱼限制在产卵池的上半部活动，以防止亲鱼吞吃鱼卵。每条雌鱼可产卵300～1000粒。 （二）斑马鱼早期发育观察： 斑马鱼早期胚胎发育主要有以下七个时期（附有相应的时间）： （1）合子期Zygote Period(0-0.75h) （2）卵裂期Cleavage Period(0.75-2.2h) （3）囊胚期Blastula Period(2.25-5.25h) （4）原肠胚期Gastrula Period(5.3-10h) （5）体节期Segmentation Period(10-24h) （6）咽期Pharyngula Period(24-48h) （7）孵化期Hatching Period(48-72h)

动物解剖与组织胚胎学滕可导复习思考题

解剖部分复习思考题一 一、判断题： 1.肺门位于肺的内侧面，为主支气管、血管和神经等出入肺的地方。（） 2.副性腺包括精囊腺、前列腺和尿道球腺，其中牛的精囊腺发达，尿道球腺小。（） 3.膈为一成对的圆形板状肌，构成胸腔和腹腔之间的横隔。（） 4.骨的基本结构由骨膜、骨质、骨髓及血管神经构成。（） 5.关节由关节面和关节软骨、关节囊、关节腔及血管神经等基本结构所构成。（） 6.脊神经由背侧支和腹侧支汇合而成。（） 7.结肠可分为升结肠、横结肠和降结肠三部分，其中牛的升结肠特别长，横结肠很短。（） 8.母牛子宫角和子宫体的粘膜有许多特殊的卵圆形隆起，称子宫阜。（） 9.牛的上唇中部和两鼻孔之间的无毛区，称鼻唇镜。（） 10.牛肝分叶不明显而猪肝分叶非常明显。（） 11.牛舌粘膜表面具有圆锥状乳头，豆状乳头，菌状乳头和轮廓乳头等四种舌乳头。（） 12.体腔包括胸腔、腹腔和骨盆腔，其中腹腔最大，骨盆腔最小。（） 13.心包为包在心脏周围的锥形囊，其囊壁由纤维膜和浆模构成。（） 14.心脏位于胸腔纵隔内，略偏左侧，为中空的肌质器官，外包有心包，心脏上部 为心底，下部为心尖。（ 答: 1.√ 2.√ 3.× 4.√ 5.√ 6.× 7.√ 8.√ 9.√10.√11.√12.√13.√ 14.√ 二、名词解释（每题2分，共10分） 1.白质 答:在中构内各神经元的突起聚集形成神经纤维束，称白质 2.鼻旁窦

3.肺门 答:位于肺内侧面，有主支气管，血管和神经出入的地方，称肺门。 4.肝门 答:在肝的脏面中央有门静脉，肝动脉，肝管和神经等出入肝的地方，称肝门。 5.脊神经 答: 由感觉神经元胞体集结而成，位于脊根的外侧。 6.脊柱 答:由一系列椎骨、借软骨、关节与韧带紧密连接而成。 7.乳腺 答:是哺乳动物特有的皮肤腺，为复管泡状腺，公、母畜均有乳腺，但只有母畜的乳腺能充分发育，具有分泌乳汁的能力，并形成发达的乳房。 8.舌圆枕 答:牛舌背后部有一椭圆形隆起，称舌圆枕。 9.神经节 答:神经元胞体在周围神经系集合在一起，形成神经节。 三、填空题： 1.副性腺由：_______、________和_______构成。 2.喉的软骨包括：_____、______、______、______、_______组成。 3.脊髓由______和______构成。 4.泌尿系统包括：______、______、_____、和_______。 5.母畜生殖系统由：______、______、_____、_______、_______、_______ 组成。 答: 1.精束腺、前列腺和尿道球腺 2.会厌软骨、构状软骨、甲状软骨和环状软骨 3.灰质、白质 4.肾、输尿管、膀胱和尿道 5.卵巢、输卵管、子宫、阴道、阴道前庭和阴门 解剖部分复习思考题二 一、判断题：

斑马鱼胚胎整体原位杂交_6.22

斑马鱼胚胎整体原位杂交 (Whole-mount in situ hybridizations in zebrafish embryos) 北京大学遗传与发育生物学实验室 整理者：肖安版本：V6.22 Build 2006-8-17 说明：小号宋体文字为操作提示，其中下划线标记者为以下数步均需注意的内容；小号楷体文字为影响结果的重要步骤提示，注意控制记录其操作处理的条件和时间，以在重复实验探索最适条件时进行适当调整。 在整个实验中应当注意： (1) 由于环境中存在大量RNA酶，RNA在常温下极易降解。因此，涉及RNA的操作，在探针去除之前，以及探针的合成与纯化过程，必须严格防止污染。操作需要要戴乳胶手套进行，使用专用枪头、离心管、电泳槽等，尽量缩短RNA 在常温或37℃放置时间，电泳使用高电压短时间的程序，每次必须更换新电泳液。实验间隙中RNA放置在-20℃，过夜或更长时间保存在-80℃。 (2)如同时对多管进行吸去溶液和加入溶液工作，应当按照同样的顺序依次操作，以保证其处理时间基本一致。避免漏加溶液。 (3)注意所加溶液与胚胎温度的差异，应当先预热再使用。一般溶液加入量为1mL左右，管平放以使胚胎分散与溶液充分接触，但探针杂交一步溶液过少可竖直放置。 (4)吸取胚胎的枪头应剪去尖端以扩大开口。吸时动作要轻。任何时候都要防止丢失胚胎，可在换前一管溶液时将后一管竖直放置让胚胎沉降一会以免吸走。 (5)注意保护标签，并且易混淆标签必须设法分辨(如6和9)。 第一天 以下操作需戴乳胶手套。 1 水溶液体系重新处理 (Rehydration)。 1.1吸去恢复到室温的胚胎中的甲醇(MeOH)，用70%, 50%, 30%的 MeOH的PBST溶液依次处理5分钟。 梯度稀释的目的是防止胚胎收缩，可适当多添加几个浓度梯度。稀释时间宁长勿短。 特别注意保护标签，MeOH为有机溶剂，易腐蚀油性笔书写的标签。 1.2 PBST处理5分钟，两次。 2 蛋白酶消化和随后的固定(Proteinase digestion and post fixation)。 2.1用蛋白酶K的PBST溶液(在管中原有的约1mLPBST中加入1uL10mg/mL的蛋白酶K，终浓度 消化的目的是使探针更容易进入组织中。应根据胚胎质量、以前原位杂交结果适当增减时间。注意双氧水脱色的胚胎受损害较大，蛋白酶K处理时间应大大短于培育时加入PTU阻止色素生长的胚胎。 理论上换新的酶和新胚胎都应该重试处理时间。 以下操作室温进行，注意溶液预热。 2.2消化时间到后，先尽快用PBST暂时漂洗，然后PBST洗5分钟，一到两次。 在PBST洗后或下一步多聚甲醛固定后可以按照探针将胚胎分管和混合，注意同一管中的胚胎发育时期不宜相隔过近，以免最后观察结果时难以分辨。但若相隔过远，后面的染色时间可能会有很大差异，并且处于发育较早期的胚胎破裂时卵黄可能污染发育较晚期的胚胎。 每一时期每一探针需15枚左右(发育早期的胚胎在实验中容易损坏，宜多取一些)。 若做正负对照，正对照用已明确的Marker基因探针(反义RNA链)，或者对胚胎进行双染。负对照使用正义RNA链，或者不加探针(如粗略筛选时)。注意及时写上新的标签编号并记录下每个编号对应的各胚胎时期。 2.3 4%多聚甲醛(paraformaldehyde, para)固定20分钟。 提前解冻，每次实验都尽量用一管新的多聚甲醛，避免RNase污染。未使用完部分可用于固定胚胎。 用于原位杂交的胚胎都使用多聚甲醛固定。甲醛苦味酸混合液固定胚胎虽然能更好的保持形态，但将破坏胚胎抗原性，导致零结果。 2.4 PBST洗5分钟，两次。

2《动物解剖与组织胚胎学》模拟试题 (一) (二)

《动物解剖与组织胚胎学》模拟试题(一) 1、前肢骨包括肩胛骨、肱骨、前臂骨、腕骨、掌骨、指骨和籽骨。 2、消化系统包括口腔、咽、食管、胃、小肠、大肠和肛门。 3、泌尿系统包括肾、输尿管、膀胱和尿道。 4、副性腺由精束腺、前列腺和尿道球腺构成。 5、脊髓由灰质和白质构成。 6、在细胞分裂间期，DNA分子螺旋化程度不同，螺旋紧密的部分呈颗粒、团块状，镜下观察着色深称异染色质。 7、在骨组织中，骨原细胞是骨组织的干细胞；成骨细胞具有分泌骨质有机成分的功能；破骨细胞具有很强的重吸收骨基质的能力。 8、淋巴细胞约为白细胞总数的50%，幼龄动物较多。根据淋巴细胞的发生部位、表面特征、寿命和免疫功能的不同，至少又可分为T细胞，B细胞，K细胞和NK细胞等4类。 9、小脑皮质分分子层、蒲肯野细胞层和颗粒层3层。 10、在光镜下，毛细血管结构基本相似，在电镜下，毛细血管可分为连续毛细血管，有孔毛细血管和血窦3种类型。 11、皮肤覆盖身体表面，由表皮，和_真皮组成，借皮下组织与

深部组织相连。 12、淋巴组织是以网状组织构成支架，网孔中分布着大量淋巴细胞和一些其他免疫细胞的组织，可分为弥散淋巴组织和淋巴小结两种类型。 13、淋巴窦的主要结构特点是在其窦腔内有网状细胞作支架，网眼中有淋巴细胞和巨噬细胞。 14、肾上腺皮质是肾上腺的主要部分，位于腺的外周。其又分为多形带，束状带和网状带三部分。 15、垂体分腺垂体和神经垂体两大部分。 16、组成胃底腺的细胞主要有主细胞，壁细胞，颈黏液细胞和_内分泌细胞。 17、电镜下，壁细胞游离面的胞膜向细胞内凹陷，形成内分泌小管。该细胞具有合成和分泌__盐酸_的功能。 18、胰岛素是胰岛内_B_细胞的分泌物，它的生理功能是降低血糖。 19、肺的导气部从支气管至终末细支气管，无呼吸功能，肺的呼吸部从呼吸性细支气管至肺泡囊，具有呼吸功能。 20、肺小叶是肺的结构单位，由每个细支气管及其所属的分支和肺泡构成，小叶之间为小叶间结缔组织。

动物解剖及组织胚胎学 复习题

家畜解剖组织学》本科复习题及参考答案 一、名词解释题（每小题3 分，共45 分） 1. 胸廓：指由背侧的胸椎、两侧的肋和腹侧的胸骨组成一个前口小、后口大的截顶、平卧的圆锥形腔体，称为胸廓。 2. 骨盆：指由左右髋骨、背侧的荐骨、前3?4个尾椎及两侧的荐结节阔韧带围成的前口大、后口小的 腔体。 3. 鼻旁窦：指头骨内外骨板之间含气腔体的总称，它们直接或间接与鼻腔相通，故称为鼻旁窦，又称副 鼻窦。 4. 乳镜：指家畜乳房的皮肤薄而柔软，毛稀而细，与阴门裂之间有线性聚合毛流的皮肤纵褶，称为乳镜。 5. 内脏：指大部分位于胸腔、腹腔和骨盆腔内的管道系统，在神经体液的调节下直接参与动物的新陈代 谢，个体生存，种族繁衍的器官系统，包括消化、呼吸、泌尿和生殖系统等。 6 .胸膜腔：指胸膜壁层和胸膜脏层在肺根处互相移行共同围成的腔隙。 7. 神经核：指在中枢神经系内，由功能和形态相似的神经细胞胞体和树突集聚而成的灰质团块称为神经 核。 8. 内脏神经：指分布于内脏器官、心脏、血管、腺体、皮肤立毛肌等的神经总称。 9. 细胞器：指分布于细胞质内，具有一定形态结构和执行一定功能的微小器官，如线粒体、内质网、高 尔基体、溶酶体等。 10. 血浆：指为血液的细胞间质成分呈淡黄色，其中水分约占91％，其余9％为各种溶解状态的有机物 和无机物，如纤维蛋白原、血清蛋白、球蛋白、糖类、脂质、激素、无机盐及代谢产物等。 11. 肌节：指骨骼肌和心肌肌原纤维上相邻两条Z 线间的部分。 12. 气血屏障：指肺泡与肺泡隔内毛细血管之间进行气体交换所通过的结构。 13. 卵泡：指卵巢皮质中由一个卵母细胞和包在其周围的卵泡细胞构成，包括原始、生长、成熟和闭锁 卵泡。 14. 精子获能：指进入母畜生殖道内的精子，需要在子宫、输卵管内渡过一段时间进行受精的准备，最 后获得受精能力的过程。 15. 受精：指精子穿过卵子的放射冠、透明带后进入卵子后形成合子的过程。或：精、卵细胞结合成合 子的过程。 二、选择题（每小题有1个或多个答案，多选或少选均不给分。每小题2分，共120分）答案： 1. 光镜下切片的厚度一般为（ A ）。 A、5~8 微米 B、20~30 微米 C、50~80 纳米 D、20~30 埃 E、5~8 毫米 2 .具有吞噬功能的细胞有（ACE ）。 A、嗜中性粒细胞 B、淋巴细胞 C、尘细胞 D、成纤维细胞 E、组织细胞 3. 为细胞提供所需能量，被称为细胞内“能量工厂”的细胞器是（ E ）。 A.内质网 B.高尔基复合体 C.溶酶体 D.中心体 E.线粒体 4. 单层扁平细胞位于哪些器官的内表面（ACE ）。 A、淋巴管B 、膀胱C 、心脏D 、小肠E 、动脉 5. 变移上皮分布于（CE ）。 A、气管 B、肠 C、膀胱 D、食管 E、输尿管

动物解剖与组织胚胎学试题

《动物解剖学》课程考试试卷(A卷) 一、名词解释 1.鼻旁窦： 2.矢状面： 3.消化： 4.门脉循环: 5.反射弧: 6.肺静脉： 7.呼吸: 8.肾乳头: 9.隐睾: 10.脉络丛: 二、填空 1. 家畜的运动系统由骨、骨连接、和肌肉三部分组成。 2.每块骨都是一个复杂的器官，由骨膜, 骨质，骨髓，血管和神经五部分组成。 3. 腹壁肌由外向内分为四层，依次为腹外斜肌，腹内斜肌,腹直肌和腹横机 4. 内脏各器官根据其基本结构分实质器官，管状器官两大类。 5. 泌尿系统包括肾、输尿管、膀胱和尿道四部分。 6. 请写出三种浅层淋巴结：腘淋巴结，颌下和颈浅。 7. 脑神经共12 对，其中作用于生命活动的是迷走神经。 8. 家禽食管在胸前口处膨大称为嗉囊。 9. 硬脊膜和椎管之间的较宽腔隙称为硬膜外腔，腰荐部该部位为常见的麻醉部位。 10. 脊髓白质被灰质柱分为左右对称的三对索，分别为：背侧索，和外测索 ,腹侧索。 11. 马的结肠分为四段三曲，其中三曲为、胸骨曲、盆曲和隔曲。 12. 神经原按功能分为：感觉，运动和联络三种。 13.脑干包括间脑、延脑、脑桥和中脑。 14. 禽类消化、泌尿、生殖三大系统末端的共同通道叫泄殖腔。 15. 进入肝的血管有营养性和功能性之分，其中肝动脉是其营养血管。 三、单项选择填空 1.前肢的后面称（）。 A背侧B指侧C掌侧D跖侧 2.下面那块骨为单骨（）。 A 枕骨B顶骨C鼻骨D额骨 3.位于前臂内侧的骨为（）。 A尺骨 B 桡骨C胫骨D腓骨 4.下面那块肌肉收缩可以伸肩关节（）。 A 三角肌 B 大圆肌C臂三头肌 D 臂二头肌 5.牛四个胃中，分布有消化腺具有真正消化功能的是（）。 A 网胃 B 皱胃 C 瘤胃 D 瓣胃 6.下面那个为管状器官（）。 A 肺 B 肝 C 胰 D 胃

动物胚胎发育的基本过程

《动物胚胎发育的基本过程》教学案例 济南市长清第一中学张晓燕 一、教材分析 本节内容隶属中图版选修3“现代生物技术专题”模块的第3个专题“胚胎工程”。本专题共包括三节内容，分别是动物胚胎发育的基本过程、良种化胚胎工程、胚胎工程的新进展。其中，动物胚胎发育的基本过程一节是胚胎工程的理论基础，同时也是学习本专题的基础，而且本部分知识与必修二“减数分裂与受精作用”的知识紧密联系，学习本节可以温故而知新。 根据普通高中《生物课程标准》的内容标准要求，本节课的教学目标为： 知识目标：简述动物胚胎发育的基本过程，包括哺乳动物的精子和卵细胞的发生、受精作用、早期胚胎发育的阶段等内容。 能力目标：能够解说体内受精和胚胎发育是胚胎工程的理论基础。 情感目标：关注哺乳动物胚胎学知识在胚胎工程上的应用。 二、学情分析 关于精子和卵细胞的发生以及受精作用的知识，学生通过必修二的学习，已有了一定基础，学习起来基本无障碍，而胚胎发育的几个阶段比较抽象，特别是由囊胚发育为原肠胚，依据学生现有认知水平接受起来有一定难度。 三、教学重、难点 结合教学目标及学情分析，本节课的教学重点为：早期胚胎发育的几个阶段，这也是本节课的教学难点。 四、教学策略 1、运用多媒体辅助教学，化抽象为直观，通过相关图片和视频资料，为学生提供丰富的感性材料，充分调动学生学习的主动性 2、利用直观教具，激发学生兴趣，引领学生进行思维上的探究。

3、精心设计讨论题，让学生分组讨论，实现小组合作学习。 五、教学过程 1、导入激趣 利用多媒体展示人的精卵结合、受精后8天、六周、10周、8个月的一系列图片，一方面引入“胚胎发育”的概念，导入新课，另一方面，让学生对“胚胎发育”形成大体的认识，并激起学生浓厚的学习兴趣。 2、问题引领，主动探究 2．1精子、卵细胞的发生和融合 以四个讨论题引领学生回忆精子和卵细胞的发生过程，精卵的结合等有关知识，小组内部生生合作，在各小组回答问题的基础上，教师利用多媒体课件系统、深化本部分知识。将精子、卵细胞发生经历的阶段加以概括，重点阐述精细胞变形过程中细胞结构的动态变化，以及卵子成熟的时间及场所、呈现精卵细胞的形态等。 关于哺乳动物的受精作用，教师要引导学生知道精子的获能和卵子的准备，然后利用课件展示受精过程中的顶体反应、卵子透明带反应、卵黄膜的封闭作用及雌雄原核的形成等生殖生理变化。为了让学生更形象的了解此过程，播放精、卵结合的一段视频。最后，启发学生思考受精作用的意义及受精卵中遗传物质的来源，加深对受精作用的理解。 2．2胚胎发育的过程 早期胚胎发育包括：卵裂、桑葚胚、囊胚和原肠胚发育4个阶段，教学时通过蛙的胚胎发育模型向学生展示整个过程，当学生获得一定的感性认识后，给他们一定时间，让他们结合教材插图回味并复述胚胎发育的大体过程。然后，教师结合相关教学媒体重点讲述桑葚胚和囊胚细胞特征，从而为继续学习胚胎移植和胚胎分割等技术奠定必要的理论基础。 3、小组合作，问题升华

环境对斑马鱼胚胎发育的影响

环境对斑马鱼胚胎发育的干扰 XXX,YYY,ZZZ 一、实验目的及原理： 1、通过斑马鱼早期发育过程的观察，巩固对硬骨鱼胚胎发生的认识。 2、通过设置环境因子（锌离子）来研究其对斑马鱼胚胎发育的影响程度。 3、通过对比对照组和实验组，进一步巩固对硬骨鱼胚胎发育模式的认识。 4、锻炼独立开展科学实验、分析和解决实际问题的能力。 5、加深环境对动物受精及早期发育影响的理解。 二、实验材料与方法： 1、实验材料： 所需胚胎：发育良好的、健康的斑马鱼胚胎（原肠胚早期）36枚。 试剂：硫酸锌（分析纯）， 器材：培养容器12孔板，恒温培养箱，显微镜，解剖镜，载玻片，塑料滴管，手表，移液枪100uL、1000uL，量筒100mL*2。

2、实验方法： （1）在本实验中，使用硫酸锌作为实验用环境因子，共设三个梯度，分别为：0，0.1mg/L，1mg/L。每个梯度设4个平行组，每个平行组3个胚胎，共需36个胚胎。 （2）实验处理起始时间：原肠胚早期： 实验处理终止时间：孵化期。 （3）实验操作： A.挑选胚胎： 由于斑马鱼卵受精及发育的不均匀性，要对斑马鱼卵进行挑选。挑选时要挑透明、无白色斑点、卵膜完整的。之后的实验中还要不断将败育卵挑出。 用滴管（塑料滴管口部要剪短且一定要圆滑，并且直径要大于卵径）将选择好的卵依次吸出，然后放入12孔板中进行孵化。 【注意剔除异物眼观有白色小斑点、畸形异常卵。】

B.实验体系： 12孔板培养胚胎，每孔放入3个胚胎，共使用12个孔，36个胚胎。12个孔分别标上A1~A4,B1~B4,C1~C4。A1~A4组作为对照组的三个平行组，B1~B4作为0.1mg/L组的三个平行组，C1~C4作为1mg/L组的三个平行组。 C.实验期间的培养管理： 1．孵化用水： 孵化水温一般要25~28℃，在这个温度范围内，温度越低，孵化所需时间相应越长。水温25℃时，受精卵经48~72h孵出仔鱼，水温28℃时，经36h孵出仔鱼。水温太高或太低，会造成受精卵死亡。[2] 【实验中设定的培养温度为25℃，由于恒温培养箱的示数与实际温度有较大差异，而且在实验后期（80h）提高培养箱温度以加速孵化，所以本次实验实际中的温度并不恒定，暂以25℃为准。】 2.孵卵卫生： （1）定期观察，每12h换一次水，水温要相近，而且每次换水量在原水量的1/3-1/2,以尽量使胚胎缩短适应期，使发育流畅。定期将死卵挑出，以确保不影响其他卵的正常发育。 3、观察记录： （1）前3h实时观察、拍照并记录，之后每天早上(7:00-9:00)、中午(12:30-14:30)、晚上(18:00-21:00)三段时间对斑马鱼胚胎发育不同时期以及畸变进行观察、拍照并记录。 （2）实验指标:实验前，根据文献查询[3]，Zn2+可能导致的畸变有：