细胞工程学复习题

细胞工程学习题

1．诱导试管苗生根时，培养基的调整应

A．加大盐的浓度B．加活性炭

C．加大分裂素的浓度D．加大生长素的浓度

2．下列实验中可能获得三倍体植株的是

A．小麦的茎尖培养B．番茄花药培养

C．玉米胚乳培养D．玉米花粉培养

3．动物体内各种类型的细胞中，具有最高全能性的细胞是

A．体细胞B．生殖细胞C．受精卵D．干细胞

4．下列哪个是植物离体培养常用的主要糖类

A．葡萄糖B．果糖C．麦芽糖D．蔗糖

5．农杆菌介导的转化方法主要适用于

A．草本植物B．木本植物C．单子叶植物D．双子叶植物

6．原生质体纯化步骤大致有如下几步：

①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r／min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。

②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。

③将原生质体混合液经筛孔大小为40～100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。

④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104～106／ml。

正确的操作步骤是：（）

A ①②③④B②③①④C③①②④D③②①④

7．常用的细胞融合剂是

A．刀豆球蛋白B．聚乙二醇（PEG）C．细胞松弛素B D．脂质体

8．利用细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中，HAT培养基用来进行

A．细胞融合B．杂交瘤选择C．检测抗体D．动物免疫

9．下列过程中，没有发生膜融合的是

A．植物体细胞杂交B．受精过程

C．氧进入细胞中的线粒体D．单克隆抗体的产生

10．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生

大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是

A．经过免疫的B细胞B．没经过免疫的T细胞

C．经过免疫的T淋巴细胞D．没经过免疫的B淋巴细胞

二填空题

1、在植物组织培养基中，添加_____细胞分裂素_____ 能促进合成细胞分裂素，有利于细胞的分裂与分化，促进芽的形成

2、在植物组织培养基中，添加_____肌醇_____ 能促进糖类物质的转化，也能促进愈伤组织的生长以及胚状体的形成

3、生长素是由__色氨酸_____通过一系列中间产物形成，在植物组织培养中生长素主要是用来刺激细胞的分裂和诱导根的分化，吲哚乙酸（IAA）、2、4-二氯苯养乙酸（2、4-D）、吲哚乙酸（IAA）、萘乙酸(NAA)、吲哚丁酸（IBA）等为类生长素。

4、细胞分裂素大多是__嘌呤_____的衍生物，在植物组织培养中细胞分裂素主要是用来______

5、生长素与细胞分裂素配比低有利于_芽_______的形成

6人工种子的结构: ______体细胞胚、人工种皮、人工胚乳__，在人工种子制作中，细胞培养初期加入细胞分裂抑制剂5-氨基尿嘧啶是为了满足_胚状体同步发育_______的要求

7植物次级代谢产物在培养系统中的积累会目标产物的合成具有反馈抑制，可以采用流加培养________和两相培养_________工艺技术克服

8 1923年法国科学家卡雷儿设计培养动物细胞的__卡式瓶_____，培养鸡心组织获得成功

三、名词解释

1．细胞工程

细胞工程是指主要以细胞为对象，应用生命科学理论，借助工程学原理与技术，有目的

地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞、组织产品或新型物种的一门综合性科学技术

2．细胞工程包含哪几方面的内容

① 植物快速繁殖②新物种培育③细胞工程生物制品④细胞疗法与组织修复

3．什么是植物组织培养，什么是植物细胞培养，为什么植物组织培养能够实现植物的大规模繁殖

植物组织培养是将植物器官、组织、细胞或原生质体等外植体材料无菌条件下培养在人工培养基上，在适当条件下诱发长成完整植株的一种技术。

植物细胞培养是在离体条件下，将分离的植物细胞通过继代培养增殖，获得大量细胞群体的一种技术。（植物组织培养目的，就是获得新的个体；植物细胞培养目的，就是获得大量的细胞。）

①不受季节、地域、气候和有害生物影响，培养条件可控②遗传性状相对稳定，具有较稳定的次级代谢产物的合成能力

③分化程度高，可产生高度分化的细胞合成的次级代谢产物，例如根、叶中合成的代谢产物

④激素自养型，成本低；生长速度快。注：外植体切割可以形成很多植株

4外植体

外植体主要指用于离体培养的植物或组织切段。一般来说，来源于生长活跃或生长潜力大的植物组织或器官的外植体更有利于诱导分化形成再生植株

5、器官发生途径与体细胞胚途径

器官发生途径：外植体诱导愈伤组织的形成，在激素的调控作用下，愈伤组织分化形成形态与功能不同的细胞，继而形成不同的器官，发育成完整的植株。(成熟细胞→愈伤组织→出根出芽→完整植株。植物的器官发生指在离体培养的组织或细胞团（愈伤组织）分化形成不定根、不定芽等器官的过程。)

体细胞胚发生途径：外植体诱导愈伤组织的形成，愈伤组织分散成单个细胞，单个细胞培养形成体细胞胚，体细胞胚促进胚胎发育形成再生植株。(成熟细胞→分生细胞→胚状体→完整植株。指体细胞在离体培养过程中经过了胚胎发育过程。)

6．玻璃化现象

植物组织培养中，常会出现一些半透明状的畸形试管植物，这类植物体被称为“玻璃苗”，这种现象称为玻璃化现象，又称过度水化现象。

7、采用体外受精技术获得试管动物时，为什么要对精子进行体外获能技术处理

精子获能是指精子获得穿透卵子透明带能力的过程。雄性精液中含有“去能因子”（多是：糖蛋白），附在精子表面，是顶体酶的抑制剂，抑制了精子的受精能力。去能因子的清除，使精子顶体酶活性恢复，具有受精能力。主要依靠宫颈、子宫及输卵管液中的β淀粉酶、胰蛋白酶、β葡糖苷酶及唾液酸酶，水解糖蛋白等“去能因子”。

※增强精子活力，使精子具有在体外与卵子结合的能力（精子获能）并能发生顶体反应。精子获能在生育上具有重要意义，通过获能不仅增强了精子活力，而且关键是去除了精子表面的覆盖物，暴露出精子膜和卵子的结合位点，使精子具有发生顶体反应的能力。当精子遇上卵子时，精子头部的“顶体”脱落，顶体酶释放，使卵子的放射冠和透明带溶解，精子进入卵细胞达到受精的目的。

8、超排卵技术

超数排卵：雌性动物用促卵泡素和促黄体素处理后，从输卵管中冲取成熟卵子，可直接与获能精子受精。（人工地使动物的激素水平达到阀值，诱发卵的成熟与排放）

※为了获得足够的卵母细胞需要采用超数排卵技术。诱导家畜超数排卵需注射外源激素，其目的就是人工地使动物的激素水平达到阈值，从而诱发卵的成熟与排放。

9、在动物细胞核移植实验中为什么要对供核细胞进行饥饿培养

供核细胞可以是动物原代细胞或传代细胞。分离制备单个动物细胞，体外培养得到正常二倍体体细胞系，然后进行1～5 天的缺血饥饿培养，诱使细胞处于“静止”状态（一般进入G0 期）。GO期细胞从生长方面看处于静止状态，在适宜刺激下，能被触发，从静止状态进入增殖状态。为核移植效率提供保证。

※因为体外培养得到正常二倍体体细胞系，通常采用处于G0期细胞作为核移植的供体细胞。在5～10d内将培养液中的血清浓度从10％逐渐减少到0.5％（即血清饥饿法），造成营养缺乏，才能诱导细胞脱离正常周期而进入G0期，所以需对供核细胞进行饥饿培养。G0期细胞处于静止状态，在适宜的刺激下，细胞能被触发，从静止状态进入到增殖状态。

10、聚乙二醇诱导细胞融合的原理，为什么要对融合细胞筛选

(PEG的促融合机制尚不完全清楚，它可能引起细胞膜中磷脂的酰键及极性基团发生结构重排。)

聚乙二醇诱导细胞融合的原理：

①PEG分子具有轻微的负极性，可以与具有正极性基团的水分子、蛋白质、碳水化合物形成氢键，在相邻的原生质体间起到分子桥的作用，使原生质体接触。当PEG分子被洗脱时，膜电荷发生紊乱而重新分配。此时，一种原生质体上带正电的基团可能与另外一个原生质体中带负电的基团相连，导致原生质体融合。②除了PEG的这种分子桥作用外，它可以改变膜的物理和化学性质，增加类脂膜的流动性，使原生质体的核、细胞器发生融合成为可能，从而促进细胞融合。

对融合细胞筛选的原因：细胞融合是一个随机的物理过程，经融合后细胞将以多种形式出现，需要通过培养和筛选，除去不需要的细胞，分离出需要的杂种细胞，从而解决融合细胞的选择问题。

11．为什么动物的多倍体比植物的多倍体少

植物：（1）大多数植物是雌雄同体或雌雄同花的，它们的精原细胞和卵原细胞可能同时发生不正常的减数分裂，使配子中染色体数目不减半，这种配子通过自体受精而自然形成了多倍体。

（2）植物的繁殖比较容易，如果多倍体植物不能形成种子，它还能依靠营养器官的无性繁殖来产生后代，因此在生物进化过程中，植物多倍体有可能被保存下来。

动物：（1）高等动物的远源杂交能力很弱，这样难以形成杂种个体。

（2）多倍体动物高度不育，染色体异常通常会造成胚胎死亡，因此很难得到多倍体的子代个体。

7．为什么在植物细胞培养中，要采取看护培养技术处理单个细胞

因为初步得到的植物单细胞体外培养时增殖比较困难，需要设计特殊的培养方式提高培养效率。看护培养是用一块活跃生长的愈伤组织来看护单个细胞，使其持续分裂和增殖。这块愈伤组织被称为看护组织。目的使单细胞恢复活力。具体方法：将单个细胞接种于滤纸上，再置于愈伤组织之上培养。优点是：简便、成功率高。（缺点是不能在显微镜下直接观察。）

8、植物细胞悬浮培养有哪些优点，通过植物细胞培养获取植物次级代谢产物，可以采用哪些方法提高次级代谢产物产量

①可以增加细胞与培养液的接触，促进营养的吸收。②保证良好的混合状态，从而获得良好的气体传递效果。③可以达到较高的细胞浓度，容易放大培养。提高次级代谢产物产量的方法：

为了提高次级代谢产物产量，首先要选育优良的细胞株，培养时保证培养基和培养条件符合细胞生长和代谢的需要。通过添加次级代谢产物的前体物质、诱导子等物质进行调控。还可以通过添加表面活性剂增加细胞膜的通透性。

9动物细胞贴附生长的过程？什么是微载体培养动物细胞，有什么优点，在此过程中如何接种

动物细胞贴附生长的过程：

①游离期：接种的细胞在培养液中呈悬浮态。由于细胞质的回缩，各种形状的细胞开始变圆。

②吸附期：多数细胞可在24h内贴壁，血清中有促进细胞贴壁的糖蛋白，这些带正电荷糖蛋白的促贴壁因子先吸附于载体表面，悬浮细胞再在吸附有促贴壁因子的载体上附

着。③繁殖期：悬浮细胞贴壁后经过一段停滞后开始分裂。随着细胞数量的增多，细胞间开始接触并连接成片。出现接触性抑制。

④退化期：细胞长满培养瓶壁，随着营养物的消耗和代谢物的积累，密度抑制现象出现，细胞开始退化。如不及时传代培养，细胞会从瓶壁上脱落死亡。微载体培养动物细胞

微载体培养动物细胞的优点：贴壁，悬浮

①模拟了体内三维生长环境，减轻了接触抑制，可以多层生长。

②很好地解决了生物反应器的空间分布问题，单位体积培养液的细胞产率高；培养系统占地面积和空间小；劳动强度小；放大容易，使大规模培养动物细胞成为可能。

③把悬浮培养和贴壁培养融合在一起，兼有两者的优点；可以稍加改造利用传统生物反应器。

④接种与收获方便；可循环、连续收获与培养，培养基利用率较高。接种方法：

球传球接种技术：将贴满细胞的微载体与新鲜微载体混合，实现细胞因随机碰撞而实现转移贴附在新载体表面的技术。（保证培养基和微载体处于稳定的pH与温度水平，

接种对数生长期细胞。不同的微载体所用浓度是不同的，常使用2～3g/L的微载体含量。搅动速度以50～70r/min为好。）

10单克隆抗体技术中为什么要采用HA T培养基，如何获取人源化的单克隆抗体

①：因为HAT培养基中的氨基蝶呤可阻断细胞正常途径合成DNA，融合使用的瘤细胞一般是HGPRT和TK缺陷型，也不能采用补救途径合成DNA。两条途径被阻断后，瘤细胞（未融合的与自身融合的）因不能正常合成DNA而死亡。融合细胞具有亲代双方的遗传性能，具有来自于淋巴细胞的HGPRT与TK，可采用补救途径合成DNA，因此可在HA T培养中存活于繁殖，继而可筛选出杂交瘤细胞，获得单克隆抗体。②制备人源单克隆抗体的方法如下： A人-鼠杂交瘤单克隆抗体：用小鼠骨髓瘤细胞和来源于人外周血淋巴细胞、淋巴结细胞、脾细胞进行融合。

B人-人杂交瘤单克隆抗体：可通过建立人骨髓瘤或其他人细胞系与人淋巴细胞融合来制备人单克隆抗体

C严重联合免疫缺陷小鼠制备人单克隆抗体：SCID小鼠是由CB-17纯系小鼠16号染色体突变，使动物T、B淋巴细胞功能障碍导致联合免疫缺陷。免疫缺陷使动物可接受人体组织或器官移植，形成人-鼠嵌合体小鼠。将人免疫干细胞移植到SCID小鼠体内，SCID 小鼠实际上获得了人的免疫系统。这种小鼠可用任何抗原免疫，从激活的淋巴细胞中富集抗原特异性人源性B淋巴细胞，通过细胞融合制备抗体。 D基因工程单克隆抗体：基因工程抗体是通过PCR技术获得抗体基因或抗体基因片段，与适当载体重组后引入不同表达系统所产生的抗体。基因工程技术可以获得完全人源化抗体。

四．简答题

1．简述毛状根培养获取次级代谢产物？

①毛状根是由发根农杆菌含有的Ri质粒引起的。将发根农杆菌含有的Ri质粒中的T-DNA 片段整合到植物细胞的DNA上诱导出毛状根，从而建立起毛状根培养系统，从毛状根中提取次生代谢产物。

②Ri质粒上vir区具有很高的保守性。在通常状态下vir区的基因处于抑制状态，当发根农杆菌感染寄主植物时，受损伤的植物细胞合成的低分子苯酚化合物乙酰丁香酮使vir 区处于抑制状态的基因被激活，产生一系列限制性核酸内切酶，在酶的切割作用下产生 T-DNA链，T-DNA进入植物细胞核内，整合进植物细胞的基因组。T-DNA上有生长素合成基因tms1和tms2，指导IAA(吲哚乙酸）的合成，在不需要添加外源生长激素的条件下， T-DNA在植物细胞中得到转录与翻译，刺激植物细胞形成毛状根，然后从毛状根中提取次生代谢产物。

2在转基因生物反应器构建中，请分析一种目标蛋白高效表达的策略

外源基因在宿主内的大量扩增是目的蛋白高效表达的保证。氨甲蝶呤（MTX）是动物细胞关键代谢酶二氢叶酸还原酶（ＤＨＦＲ）的抑制剂，经过氨甲蝶呤处理后大多数细胞死亡，存活下来的细胞中dhrf基因得以扩增，提高二氢叶酸还原酶的表达水平，抵消氨甲蝶呤的抑制作用，与该基因相邻的染色体片段同样扩增。

①外源基因与dhrf基因拼接构建重组分子，转化内源ＤＨＦＲ缺陷型的细胞系。

②dhrf缺陷型细胞一部分会接纳dhrf，另一部分不会接纳dhfr，接纳dhrf的细胞外源基因表达水平低。

③在不含核苷的培养基上进行筛选，只有含dhrf基因的细胞才能增殖，进而筛选得到接纳了dhrf的细胞。

④筛选得到的细胞，进而培养成一个克隆株。

⑤将其接种到含有0.05μmol/L氨甲蝶呤的培养基上进行筛选，大部分细胞死亡，少数细胞存活。

⑥培养一段时间后进行扩增，转移至0.25μmol/LMTX培养基中，MTX浓度提高，使得dhrf大量扩增，外源基因也大量扩增，再转移至含0.25μmol/LMTX培养基中，培养一段时间后，细胞扩增。外源基因在细胞中高效表达。

根据成体干细胞表面标记物设计特异性结合物，荧光标记后利用流式细胞仪就可以分离获得干细胞。

①获得细胞表面标记物的抗体，与荧光标记物相结合。

②根据抗体抗原特异性相结合原理，带有表面标记物的细胞能与结合有荧光标记物的抗体结合，没有表面标记物的细胞不能与荧光物质相结合。

③荧光活化细胞进行分选：标记的细胞经小孔通过电场，经过激光的照射，荧光标记细

胞带负电，未标记细胞带正电，根据在电场中的偏移不一样，分离出所需的细胞

3．一个成功的悬浮细胞培养体系应满足什么样的条件？

生物反应器的设计原则是尽量模拟培养物在生物体内的生长环境。①采用对细胞无害和耐蚀材料制作，能耐受蒸汽灭菌。

②结构严密，内壁光滑无死角，内部附件尽量减少，严格保证无菌环境。③能提供均匀、理想的混合状态，保证良好的传质、传热效果。

④能精确地控制温度、酸碱度、溶氧度和CO2浓度等条件，有消泡装置，有可靠的参数检测和控制表仪并能与计算机联机。

⑤能够方便、快捷地实现培养液的连续添加、样品的采样和观察。⑥尽量节省能源消耗。

新课标高中生物选修三2.1植物细胞工程导学案

2.1 植物细胞工程 一、知识与技能目标 1、简述植物组织培养和体细胞杂交技术，掌握它们的原理、过程及关键环节。 2、了解植物繁殖的新途径及作物新品种的培育的具体方法。 二、过程与方法目标 1、尝试进行植物组织培养，运用细胞的基础知识，分析植物细胞工程的理论基础；收集植物细胞工程的相关资料并进行整理、分析、交流。 2、以植物细胞工程的基本技术为基础，弄清楚其在生产实践中的实际应用。 三、情感与价值观目标 1、体验植物组织培养技术，讨论植物细胞工程的社会意义及细胞学基础理论与技术开发之间的关系。 2、搜集相关的实际技术应用，积极参加各种技术应用的讨论，体验现代生物科技的新进展带来的社会效益，激发学习生物学的兴趣。 四、教学过程 1、植物细胞的基本结构包括、、。 2、植物细胞主要的增殖方式是，细胞分化是指，_______________________________________________________________________________ _________________________________________________________________________。原因是。 3、全能性是指，已分化的细胞表现为全能性的原因是。 4、织物组织培养就是在和条件下，将培养在上，给予条件，诱导其产生形成完整的植株。 5、植物体细胞杂交就是将细胞在一定条件下融合成，并把它培养成的技术，优点是。 6、生物体可遗传变异类型包括、、。

根据变异类型育种的方法有、、、等。 7、植物的微型繁殖技术指，_____________举例_________________________________________________________。 8、获得脱病毒的植株的方法 。 9、神奇的人工种子指。 10、生物育种技术比较 技术原理优点缺点 诱变育 种基因突变 提高生物变异的频率，使后代变异频率 较快稳定；可大幅度改良某些性状，缩 短育种进程 盲目性大，需大 量处理供试材料 杂交育 种基因重组 使位于不同个体的优良性状，集中于一 个个体 周期长，难以克 服远缘杂交的障 碍 单倍体 育种染色体变异获得个体均为纯种，明显缩短育种年限 技术复杂，须与 杂交育种配合 多倍体 育种染色体变异器官大，提高产量和营养成分 适用于植物，动 物方面难以开展 基因工 程育种分子遗传学原理 打破物种界限，定向地改造生物遗传性 状 细胞工程育种细胞生物学和分 子生物学原理 克服远缘杂交不亲和的障碍；扩大了用 于杂交的亲本组合范围；定向改变生物 遗传性状 不能按人们的需 要表现出亲代的 优良性状

细胞生物学试题整理

细胞生物学与细胞工程试题 一：填空题（共40小题，每小题分，共20分） 1：现在生物学“三大基石”是：＿，＿＿。 2：细胞的物质组成中，＿，＿，＿，＿四种。 3：膜脂主要包括：＿，＿，＿三种类型。 4：膜蛋白的分子流动主要有＿扩散和＿扩散两种运动方式。 5：细菌视紫红质蛋白结构的中部有几个能够吸光的＿基因，又称发色基因。6：受体是位于膜上的能够石碑和选择性结合某种配体的＿。 7：信号肽一般位于新合成肽链的＿端，有的可位于中部。 8：次级溶酶体是正在进行或完成消化作用的溶酶体，可分为＿，＿，及＿。 9狭义的细胞骨架（指细胞质骨架）包括＿，＿，＿，＿及＿。 10：高等动物中，根据等电点分为3类：α肌动蛋白分布于＿；β和γ肌动蛋白分布于所有的＿和＿。 11：染色质的化学组成＿，＿，＿，少量＿。 12：随体是指位于染色体末端的球形染色体节段，通过＿与＿相连。 13：弹性蛋白的结构肽链可分为两个区域：富含＿，＿，＿区段。 14：细胞周期可分为G1期，S期，G2期，G2期主要合成＿，＿，＿等。 二：名词解释（每个1分，共20小题） 1：支原体 2：组成型胞吐作用 3：多肽核糖体 4：信号斑 5：溶酶体 6：微管 7：染色单体 8：细胞表面 9：锚定连接 10：信号分子 11：荧光漂白技术

12：离子载体 13：受体 14：细胞凋亡 15：全能性 16：常染色质 17：联会复合体 18组织干细胞 19：分子伴侣 20：E位点 三：选择题（每题一分，共20小题） 1：细胞中含有DNA的细胞器有（） A：线粒体B叶绿体C细胞核D质粒 2：细细胞核主要由（）组成 A：核纤层与核骨架B：核小体C：染色质和核仁 3：在内质网上合成的蛋白质主要有（） A：需要与其他细胞组分严格分开的蛋白B：膜蛋白C：分泌性蛋白 D：需要进行修饰的pro 4:细胞内进行蛋白修饰和分选的细胞器有（） A：线粒体 B：叶绿体 C：内质网 D：高尔基体5微体中含有（） A：氧化酶 B：酸性磷酸酶 C：琥珀酸脱氢酶 D：过氧化氢酶6：各种水解酶之所以能够选择性的进入溶酶体是因为它们具有（）A：M6P标志 B：导肽 C：信号肽 D：特殊氨基序列7：溶酶体的功能有（） A：细胞内消化 B：细胞自溶 C：细胞防御 D：自体吞噬8：线粒体内膜的标志酶是（） A：苹果酸脱氢酶 B：细胞色素 C：氧化酶 D：单胺氧化酶9：染色质由以下成分构成（） A：组蛋白 B：非组蛋白 C：DNA D：少量RNA

细胞工程学教学大纲

《细胞工程学》教学大纲 课程名称：细胞工程学 课程类别：专业必修课 学时：32 学时 学分：2学分 考核方式：考试 适用专业：生物技术 开课学期：第5学期 一、课程性质、目的任务 《细胞工程》是通过对细胞及其组分的人工操作，研究生命活动规律；实现对动植物的遗传改造,用于农业、林业、园艺等生产实践；结合非生物材料等手段，生产用于治疗人类疾病或缺陷的人工器官，组织, 细胞及其代谢产物或用于深入研究的材料等为主要研究内容的一门新兴学科。 通过本课程的学习，使学生系统掌握该门学科形成与发展，理论与原理，技术与方法等基础知识，结合科研实际以及最新研究动态，使学生对本课程有一个全面的了解；以适应后基因组学时代在教学、科研和生产开发各方面对当代生命科学人才知识结构的需求。 二、课程基本要求 通过对细胞工程学的特性和内容，细胞工程的主要类型和技术操作，细胞工程学研究的基本方法等进行阐述，使学生能够掌握如何将细胞工程学知识应用于生产实践。 三、学时分配

四、教学方法与考核 1．教学方法：讲授法、案例分析法 2．课程考核方法：考试 1）平时成绩占20%，期末考试成绩占80% 2）平时成绩评分标准 平时成绩（100分），包括学生课堂出勤情况（20分）、课堂发言及积极参与情况（20分）、课后作业完成情况及质量（60分）。此项成绩需由教师提供评分依据及记录。 3）期末成绩评分标准 以评分标准为依据，所得卷面成绩为准，以考试试卷形式考查，考试形式为笔试，满分100分，试题包括基本知识概念，知识的理解和应用，综合应用等能力等教学内容的考查。全面涵盖本课程知识重点和难点，渗透学科前沿及进展，能够真实反映学生对本课程的知识和能力的学习情况。 五、大纲正文 绪论（2学时） 【目的要求】 1. 了解细胞工程的发展历史。 2. 了解生物工程学的组成内容 3. 了解细胞工程的应用。 4. 理解生物工程学与其它学科之间的学科交叉。 5. 理解细胞工程学与生物工程的其他技术之间的联系。 6. 掌握细胞工程学的主要组成。 7. 培养严谨、认真的科学观。

医用细胞工程学课程班复习题

研究生课程班细胞工程复习题姓名： 名词解释： 1、组织培养：人和动物，昆虫及植物的某组织在试管中培养成活的生物技术。特点：细胞不从组织中失散，保持与组织原来的关系。 2、细胞培养：是从活体中取出小块组织分离出的细胞，在一定条件下进行培养，使之能继续生存、生长、增殖的一种方法。 3、器官培养技术：将器官切成几立方毫米大小，保持器官原有的结构和功能的培养方式。 4、细胞系：是原代培养经传代成功后生成的细胞群体，群体内细胞生长稳定并逐渐趋向于一致，由原先存在于原代培养物中的细胞所组成。 5、细胞株：系通过选择法或克隆形成法，从原代培养物或细胞系中获得的具有特定性质或标志的细胞群。 6、克隆：系指由同一个祖先细胞通过有丝分裂所产生的遗传性状相同的细胞群体。 7、原代培养期：亦称初代培养期，为新鲜组织自体内取出接种培养至第一次传代的阶段，一般持续1~4周。 8、次代培养：用胰酶等将原代细胞消化分散后，传代再培养的一代，此操作过程叫传代。 9、贴壁型生长细胞：需贴附于底物表面生长者称为贴壁性或锚着依存性细胞，培养时需消化分散，利于观察细胞形态、结构。 10、悬浮型生长细胞：无需附着物的支持表面，呈悬浮状态生长，呈圆形，易形成团块。 11、接触抑制：当细胞过少，培养液与细胞的容积太大，均会影响细胞增殖。若培养液中的PH值变碱，则细胞生长受到抑制，甚至会脱落死亡。 12、限定性细胞系：细胞系一旦作出了一些实验指标者为限定性细胞系。 13、核质体：细胞经离心15～20分钟，可使99%的细胞发生脱核，形成无核的细胞质体 14、胞质体：细胞经脱核后无胞质称为核质体 15、细胞周期：是指指分裂的细胞，从前一次有丝分裂结束，到完成下一次有丝分裂所经历的整个序列过程。可分为两个时期——间期和有丝分裂期。 16、杂交瘤；将分泌特异抗体的B细胞和某一个永生化的骨髓瘤细胞系进行融合，杂交后代称之为杂交瘤。 17、基因导入：将外源性基因(或基因组DNA) 导入细胞中的技术称为基因转导或称基因转移，也简称为导入，是研究基因表达、结构和功能的重要研究手段。 18、诱导分化：诱导分化因素的作用，可使高度分化的细胞通过重新分裂，回复到胚胎细胞状态，这种现象称为去分化或诱导分化，又称“逆转” （肿瘤细胞） 19、细胞凋亡：又称程序性细胞死亡，是由基因编程控制的细胞主动参与的自杀过程，是细胞衰老自然死亡的主要方式之一，是一种生理性调节机制，在机体中承担着重要的调控作用。 20、细胞转化：是细胞发生遗传性改变而导致细胞永生化的转变方式，由限定性细胞系转变成连续性传代细胞系，获得了永生化。 21、细胞生长曲线：是细胞培养实验中最基本的指标，是测定细胞绝对增长数值和生长繁殖基本规律常用的简便方法。 22、基础培养基：人工合成培养基的主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机离子及其他一些辅助物质。 23、完全培养基：将合成基础培养基再添加小牛血清，就称为完全培养基 24、免疫荧光染色法:此法基本原理是将已知抗体或抗原标记荧光素，用此特异性试剂，浸染含有相应抗原或抗体的组织细胞标本，借助抗原抗体的特异性结合，于抗原或抗体的存在部位呈现荧光，从而可以定位标本内的抗原或抗体。 25、台盼蓝染色法：用0.5%浓度的台盼蓝，用PBS配制，室温保存，该染料只对死细胞着色，测定活细胞数和计算成活百分率。 26、细胞融合:两个或两个以上细胞合并成一个细胞的过程,即将两个离体细胞在特殊融合剂的作用下使细胞膜发生一定变化，使两个或多个细胞发生融合，形成体细胞杂交，产生一个新的杂种细胞。 27、克隆形成率：生成克隆数/每皿接种细胞数*100%，克隆形成率反映细胞群体依赖性和增殖能力两个重要性状。 28、转基因技术：是将人工分离和修饰过的基因导入到生物体基因组中，由于导入基因的表达，引起生物体性状的可遗传的修饰，这一技术称为转基因技术。 29、细胞分裂指数：示细胞增殖的旺盛程度，即细胞群的分裂相数/100个细胞，一般细胞分裂指数介于0.2%-0.5%，肿瘤细胞可达3-5%. 30、 3H-TdR掺入法：H-胸腺嘧啶核苷掺入法，原理：T细胞受PHA或特异性抗原刺激后，发生有丝分裂，细胞进入S期，此时在细胞培养液中加入氚标记的胸腺嘧啶核苷，可被细胞摄入而掺入DHA，测定3H-TDR的掺入量，可判定细胞的增殖程度。 问答： 1、细胞培养的生长方式和特点如何？ 方式有：贴壁型生长细胞和悬浮型生长细胞

细胞生物学期末复习附带答案及作业题目

细胞生物学期末复习附带答案及作业题目 一选择 1 最早发现细胞的是：胡克 2 观察无色透明细胞：相差显微镜；观察运动细胞：暗视野显微镜。 3 信号传递中，重要的脂类是：磷酸酰基醇。 4 多药性蛋白属于ABC转运器。 5 植物细胞与细菌的协助运输借助于质子浓度梯度。动物则借助钠离子浓度梯度。 6 鞭毛基体和中心粒属于三联微管。 7 叶绿体质子动力势产生是因为类囊体腔的PH值低于叶绿体基质的PH值。 8 Hela细胞属于宫颈癌上皮细胞。 9 电子显微镜的分辨力：0.2nm。光镜：0.2um。人眼： 0.2mm。 10 鞭毛轴丝由9+2微管组成。 11 矽肺与溶酶体有关。 12 纺锤体的微管包括：星体微管，动粒微管，极微管。 13 具有细胞内消化作用的细胞器是：溶酶体。 14 细胞生命活动所需能量均来自线粒体。 15 信号识别颗粒是一种核糖核蛋白，包括RNA和蛋白质。 16 抑制脂质分裂的是：松弛素。 17 钙离子浓度上升时，PKC转移到质膜内表面。 18 类囊体膜上电子传递方向：PSII---PSI---NADP+。 19 由膜围成的细胞器是胞内体。 20 氚标记的尿嘧啶核苷用于检测细胞中RNA转录。

21 膜脂不具有的分子运动是跳跃运动。 （具有的是：侧向，旋转，翻转） 22 膜流的正确方向：内质网——高尔基体——质膜。 23 初级溶酶体来自粗面内质网和高尔基体。 24 线粒体合成ATP。 25 微丝重要的化学成分是肌动蛋白。 26 不消耗能量的运输方式是：电位门通道。 27 肌质网可贮存钙离子。 28 高尔基体功能功能：分泌颗粒形成。 29 微丝在非肌细胞中功能：变形运动，支架作用，吞噬运动。 30 中心粒：9组3联。 31 胞内信使有：C,CGMP,DG。生长因子：EGFR。、 32 流式细胞术可快速测定细胞中DNA含量。 33 完成细胞膜特定功能的组分为膜蛋白。 34 细胞质外层的一个复合结构体系和多功能体系成为：细胞膜。 35 酪氨酸蛋白激酶受体是血小板衍生生长因子受体。 36 肝细胞解毒作用发生在滑面内质网。 37 衰老细胞器被膜包裹形成自噬体。 38 线粒体中ADP---ATP在基粒中。 39 组成微丝的主要化学成分是：纤维状肌动蛋白。 40含不溶性脂蛋白颗粒的细胞内小体为脂褐质。 41 微管形态一般是中空圆柱状。 42 细胞氧化过程中，乙酰辅酶A生成在线粒体基质中。 43 粗面内质网作为核糖体附着支架。

遗传学教学大纲

教学大纲 《遗传学》教学大纲 学时数：101 学分：4 适用专业：生命科学 一、课程的性质、目的和任务 课程性质：遗传学是生物科学专业的一门重要的专业基础课程，是研究遗传物质的结构、功能与变异，遗传信息的传递、表达与调控的科学，是当今自然科学领域中发展最为迅猛、最活跃的学科之一，是生命科学各门学科的核心。 教学目的：掌握遗传学的基本原理和系统的遗传学知识，了解其发展历程和最新进展；理解遗传学的基本技术、研究方法和手段，并了解遗传学在工、农业等生产领域中的应用；学会利用遗传学的基本原理、基本技术、研究方法和手段分析、阐述有关遗传现象，为今后进一步深造和工作打下必要的基础。 主要任务：全面系统地讲授遗传学的基本原理和遗传学分析的基本方法，同时介绍现代遗传学发展的最新成就，使学生对遗传物质的本质、遗传物质的传递、遗传物质的变异等基本规律有比较全面的、系统的认识，并能应用其基本原理分析遗传学数据，解释遗传学现象，同时对遗传信息的表达与调控、遗传工程有一个较为全面的了解。 二、课程教学的基本要求 通过本课程学习，要求学生掌握遗传学的基本原理，掌握对动、植物和微生物进行遗传分析的一般方法，掌握基本的实验操作技术，为进一步学习有关专业课程和遗传学的分支学科奠定较好的遗传学基础知识。 三、课程教学内容 第一章绪论 ㈠教学基本要求： 1. 掌握遗传、变异的概念和遗传学的概念； 2. 理解遗传学研究内容和任务； 3. 了解遗传学发展的主要阶段，以及有哪些重要的科学家做出了重大贡献； 4. 了解遗传学在国民经济中的地位，从工、农、医、环境保护等方面介绍遗传学的应用。 重点：遗传学发展里程碑 ㈡讲授内容： 第一节遗传学的研究对象和任务 遗传和变异；遗传、变异与环境的关系；遗传、变异与选择在生物进化与新品种选育中的作用；遗传学的任务。 第二节遗传学的发展简史 古代遗传学知识的积累；近代遗传学的奠基；遗传学的建立和发展：遗传学的建立及各分支学科的发展。 第三节遗传学在科学研究和生产实践中的作用 遗传学在生命科学，生物进化领域，动植物、微生物遗传改良及人类医药卫生中的应用。 第二章孟德尔定律 ㈠教学基本要求： 1. 掌握分离规律、自由组合规律的遗传实验、解释和验证方法； 2. 掌握分离规律、自由组合规律的实质； 3. 掌握单位性状、相对性状、分离线项、基因型和表现型的概念； 4. 掌握单位性状、相对性状、基因型和表现型的概念；

《细胞工程》复习导学案

《细胞工程》复习导学案 【基础知识交流】 1．细胞工程的操作水平为_______________，其目的是按照人们的意愿来 ________________________________________________________________。 2．植物细胞工程通常采用的技术手段是：____________ 和 _______________ 3.植物组织培养的理论基础是： _______________________ 4.理论上每一个活细胞都应该具有___________ 因为 ___________________ 5.受精卵的全能性最高，受精卵_____ 生殖细胞____ 体细胞 6.为什么体内细胞没有表现出全能性，而是分化成为不同的组织、器官？ __________________________________________________________________ 7.用箭头和文字写出植物组织培养的过程： _____________________________________________________________________ ___________________________________________________ 8．植物组织培养所用细胞为___________的细胞，必须形成________________才算 完成，该过程包括__________________两阶段，其中一定不需要光照的_________阶 段，一定需要光照的为_________阶段。 9.植物组织培养所需条件____________________________________________(三 个)，所用培养基为____________培养基(物理状态)，其成分包含 ____________________ ______________________ (四大类)；培养基中加入激素的种类有__________，激素 的作用______________________________________。 10．用箭头和文字写出植物体细胞杂交的过程： 植物体细胞杂交的原理是：_______________和_______________ ，植物体细胞杂交 过程包括：_______________ 和 _______________。该过程中去掉细胞壁的方法用 _________________酶；诱导融合的方法有物理法(离心、振动、电激)、化学法(聚乙 二醇) ，融合完成的标志是：____________；终点是杂种细胞吗?应该是 ___________。该育种方法的最大优点是 ____________________________ (与基因 工程育种优点相同，一定记准了)。 11．植物繁殖的新途径有________________、________________、_____________ (三条)；获取细胞产品如蛋白质、药物、香料等从__________________提取，制作 人工种子则需培养到_____________阶段。 12．动物细胞工程常用的技术手段：________________(基础)、______________、 __________________________、______________________。

大学细胞工程试题及答案

细胞模拟试题及答案 一、填空（每空一分，共25分） 1.实验室的物理防护是由隔离的设备、实验室的设计、实验实施等三个方面组成，根据其密 封程度的不同，分为P1、P2、P3、P4四个生物安全等级。典型的P4实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2.细胞系是原代培养经初步纯化获得的以一种细胞为主的、能在体外长期生存的不均一细胞 群体。 3.细胞株是指从一个经过生物学鉴定的细胞系用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细 胞增殖形成的细胞群。 4.干细胞是一类具有自我更新和分化潜能的细胞。干细胞的增殖特性为缓慢性和自稳性。 5.培养细胞的生长特点为贴附、接触抑制和密度抑制。 6.植物细胞培养的原理是基于动物细胞的全能性。 7.植物细胞悬浮培养的方法为分批培养法、连续培养法和半连续培养。 8.植物组织培养中培养材料的消毒过程中，消毒的基本原则是既要杀死附着其上的微生物又 不损伤材料。 9.细胞生长测定的一般方法为：细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10.体外培养的细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞和非贴附型细胞。 11.人工种子的组分包括胚状体、人工胚乳和人工种皮。 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几 个步骤。其中细胞桥形成是最关键的一步。 13.花粉单倍体植株的鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14.胚胎工程主要是对哺乳类动物的胚胎进行某种人为的工程技术操作，然后让它继续发育， 获得人们所需要的成体动物。 15.人工诱导单倍体形成的方法包括：远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等。 二、单项选择题（每题1分，共10分） 1.人参皂甙粉是人参中重要的药用成分，以前只能从人参中提取产量极低，因而价格昂贵。 目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取（B） A．基因工程 B．植物组织培养 C．植物体细胞杂交 D．发酵工程

(完整版)生物工程概论教学大纲

《生物工程概论》教学大纲 课程名称：生物工程概论 英文名称：Introduction to Bioengineering 课程编码： 学分：2 总学时：36 理论学时：36 学时 实验学时：0 学时 适用专业：非生物类本科专业 执笔人： 审核人: 一、课程的性质、地位与任务生物工程概论是生物类院校一些非生物学专业的必修课程之一。 20 世纪以来生命科学的研究迅速发展，从而推动了农业、林业、工业、医药卫生等多个领域的发展。本课程介绍各项生物工程技术的基本原理和基本知识，使非生物专业的学生能够了解生物工程的基本知识框架，促进其他学科的学生对生命科学的关注，为他们了解生物工程相关的基础知识提供平台，对促进学科交叉、拓宽学生知识面，提高学生的高科技意识和创新思维方式，增强学生适应社会能力及择业机遇，都有着重要的现实意义。 二、教学目的与要求本课程为全校非生物专业学生的必修课。通过本课程的学习，了解生物技术和生物工程的概念、研究对象、研究内容及与日常生产、生活的关系。掌握五大生物工程技术的原理与方法， 并对生物工程的学科发展情况有初步的认识。 三、教学学时分配表

第一章 绪论 本章教学目的和要求： 通过本章的教学，让学生了解生物工程的概念、学科发展情况的基本内容，激发学生的学 习兴趣，了解本学科学习的大致内容。 重点： 1. 生物技术的概念； 2. 生物技术的种类及其相互关系； 3. 传统生物技术与现代生 物技术的区别。 难点：生物技术的概念及其包含的内容 教学目的和要求： 学习基因工程的概念、主要步骤和相关的分子生物学基础知识（基因工程诞生的三大理论 和三大技术） 。了解常用工具酶的催化反应机制及主要用途，三种常用基因克隆载体（质粒、λ 噬菌体和粘粒）的一般生物学特性、结构及其应用，目的基因的制备方法，重组体的构建及导 入受体细胞的方法，重组子的筛选与鉴定方法。通过学习为进一步掌握生物技术相关知识和从 事基因工程工作打下基础，并对基因工程的发展动态有初步的了解。 重点：基因工程的主要操作步骤，主要工具酶的催化机理和用途，三类常用载体的特点和 主要用途，目的基因克隆的主要方法，重组 DNA 的导入受体细胞的途径，重组克隆的筛选与鉴 定方法。 难点：目的基因的克隆策略，基因表达载体构建的策略和方法，重组克隆筛选鉴定方法。 教学内容： 、 DNA 的化学组成和分子结构 2 学时） 教学内容： 第一节 生物工程与生物技术的含义 第二节 生物技术的产生 一、传统生物技术 二、近代生物技术 三、现代生物技术 第三节 生物工程的基本内容 一、基因工程 二、细胞工程 三、酶工程 四、发酵工程 五、蛋白质工程 六、五大生物工程技术之间的联系 第 四节 生物技术涉及的学科及其技术 第 五节 现代生物技术的应用与产业化 一、 生物技术在各个领域的应用 二、应用生物技术的产业化及其基本特 征 第六节 现代生物技术的发展现状 0.25 学时 0.25 学时 0.5 学时 0.25 学时 0.25 学时 0.25 学时 第七节 现代生物技术对于人类生活、社会生存的重要影响 第二章 基因工程 第一节 基因工程的概念 第二节 DNA 的结构与功0.5 0.5 学时 学时 0.25 学时 4 学

细胞工程复习题

第二章 2、简要说明MS培养基的基本组成。 1）大量元素母液配制 MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾（KH2PO4）、硫酸镁（MgSO4?7H2O）和氯化钾（CaCl2,CaCl2?2H2O）五种化合物。 2）微量元素母液配制 MS培养基的微量元素由7种化合物（除Fe外）组成MnSO4?4H2O、ZnSO4?7H2O、H3BO3、KI、NaMoO4?2H2O、CuSO4?5H2O、CoCl2?6H2O。 3）铁盐母液配制 MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁（FeSO4?4H2O）和乙二胺四乙酸二钠（Na2?EDTA）的螯合物，必须单独配成母液。 4）有机母液的配制 MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。 5）激素母液配制 MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素 6、初代培养时，接种的一般程序是什么？ 1）在接种前打开超净工作台紫外灯照射20~30min，关闭紫外灯后，打开超净工作台的风机10min以上，开始无菌操作。 2）接种人员先洗净，在缓冲室内换好经过消毒的工作服，带上口罩，并换上拖鞋等。 3）上超净工作台后，用酒精棉球认真擦拭双手，特别是指甲处，然后擦拭工作台面及四周，装有培养基的培养器皿和盛外植体的烧杯也要用酒精擦拭消毒后，再放进工作台。 4）先用酒精棉球擦拭接种工具，然后在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌或放在接种器械灭菌器中灭菌，灭菌后放在器械架上使其自然冷却。 5）把植物材料放在75%乙醇中浸泡约30s，再用0.1%的升汞中浸泡5~10min，浸泡时刻进行搅动，使植物材料与消毒剂有良好的接触，然后用无菌水冲洗3~5次。 6）接种时培养瓶瓶口要在酒精灯火焰附近，并在接种前后灼烧瓶口。 7）接种结束后，清理和关闭超净工作台。 第三章 1.基本概念 细胞的全能性：是指细胞具有发育成完整个体的遗传潜能。 细胞分化：是指发育起始状态的合子沿个体发育方向不断分化出形态结构、生理功能不同的细胞、组织、器官而最终形成完整植株的过程。即由于细胞的分工而导致其结构和功能改变或发育方式改变的过程。 去分化：已有特定结构和功能的植物组织，在一定的条件下，其细胞被诱导改变原有的发育途径，逐步失去原有的分化状态，转变为具有分生能力的胚性细胞的过程叫脱分化或去分化。体细胞胚： (somatic embry)又称胚状体，是指离体培养条件下没有经过受精过程而形成的胚胎类似物。 人工种子：（artificial seeds）又称合成种子（synthetic seeds）或体细胞种子（somatic seeds）。就是将离体培养中产生的胚状体或芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中形成的类似种子的颗粒。 7、离体培养条件下，茎、芽和根的再生方式有几种？ 答:在组织培养中，通过茎芽和根而再生植株的方式大致有3种：

细胞工程学复习题

细胞工程学习题 1．诱导试管苗生根时，培养基的调整应 A．加大盐的浓度B．加活性炭 C．加大分裂素的浓度D．加大生长素的浓度 2．下列实验中可能获得三倍体植株的是 A．小麦的茎尖培养B．番茄花药培养 C．玉米胚乳培养D．玉米花粉培养 3．动物体内各种类型的细胞中，具有最高全能性的细胞是 A．体细胞B．生殖细胞C．受精卵D．干细胞 4．下列哪个是植物离体培养常用的主要糖类 A．葡萄糖B．果糖C．麦芽糖D．蔗糖 5．农杆菌介导的转化方法主要适用于 A．草本植物B．木本植物C．单子叶植物D．双子叶植物 6．原生质体纯化步骤大致有如下几步： ①将收集到的滤液离心，转速以将原生质体沉淀而碎片等仍悬浮在上清液中为准，一般以500r／min离心15min。用吸管谨慎地吸去上清液。

②将离心下来的原生质体重新悬浮在洗液中(除不含酶外，其他成分和酶液相同)，再次离心，去上清液，如此重复三次。 ③将原生质体混合液经筛孔大小为40～100um的滤网过滤，以除去未消化的细胞团块和筛管、导管等杂质，收集滤液。 ④用培养基清洗一次，最后用培养基将原生质调到一定密度进行培养。一般原生质体的培养密度为104～106／ml。 正确的操作步骤是：（） A ①②③④B②③①④C③①②④D③②①④ 7．常用的细胞融合剂是 A．刀豆球蛋白B．聚乙二醇（PEG）C．细胞松弛素B D．脂质体 8．利用细胞杂交瘤技术制备单克隆抗体过程中，HAT培养基用来进行 A．细胞融合B．杂交瘤选择C．检测抗体D．动物免疫 9．下列过程中，没有发生膜融合的是 A．植物体细胞杂交B．受精过程 C．氧进入细胞中的线粒体D．单克隆抗体的产生 10．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生 大量的单克隆抗体。与骨髓瘤细胞融合的是 A．经过免疫的B细胞B．没经过免疫的T细胞

1340064《植物细胞工程》课程教学大纲

GDOU-B-11-213 《植物细胞工程》课程教学大纲 课程简介 课程简介： 本课程以植物细胞工程有关的概念、基本原理、操作程序和关键技术为主线，系统传授植物细胞的全能性、植物细胞脱分化和再分化、植物快速微繁殖、人工诱发单倍体、植物胚胎培养、植物单细胞培养与突变体筛选、原生质体培养、细胞融合、人工种子、超低温冷冻贮藏种质、细胞遗传转化体系等内容。 课程大纲 一、课程的性质与任务： 本课程为作物遗传专业研究生的专业课，其涉及当今生物科技领域的许多高新技术。本课程在专业性上起着承上启下的作用：植物学、植物生理生化和作物遗传学作为本课程的基础课程；基因工程和作物育种学则是本课程的延伸和提高课程。它将理论教学和技能性教学融为一体，是开展科学研究和生产开发的重要工具。 二．课程的目的与要求： 学生学完本课程后，应掌握植物细胞工程有关的概念、基本原理、操作程序和关键技术。 三．面向专业： 本课程适宜作物遗传育种专业研究生选修。 四．先修课程： 学习本课程前，应先修《植物学》《植物生理生化》、《作物遗传学》、《作物栽培学》等有关课程。五．本课程与其它课程的联系： 先修课《植物学》为本课程打下植物发育的基础知识；《植物生理生化》为本课程打下植物生理生化的专业基础知识；《作物遗传学》为本课程打下植物遗传变异的专业基础知识；《作物栽培学》为本课程打下作物对光、温、水、肥环境条件要求的专业知识。本课程为后续课程《作物育种学》提供细胞水平的育种手段；为后续课程《基因工程》提供组织培养手段。 六．教学内容安排、要求、学时分配及作业： （教学要求按从高到低分掌握-A、理解-B、了解-C三种） 0 绪论（1学时） 0.1 植物细胞工程的概念和任务 植物细胞工程概念（A）。 植物细胞工程的内容（C）：器官培养、胚胎培养、组织培养、细胞培养、原生质体培养、培养技术的延伸。 植物细胞工程的任务（B）：研究剌激因子和营养条件（无机和有机营养、激素）；环境条件（光、温、湿）；形态发生规律、遗传的稳定性和变异性。

大学 细胞工程试题及答案

细胞模拟试题及答案 一、填空(每空一分,共25分) 1.实验室得物理防护就是由隔离得设备、实验室得设计、实验实施等三个方面组成,根据其密 封程度得不同,分为P1、P2、P３、P4四个生物安全等级、典型得P４实验室由更衣区、过滤区、缓冲区、消毒区、核心区组成。 2、细胞系就是原代培养经初步纯化获得得以一种细胞为主得、能在体外长期生存得不均一细 胞群体。 ３.细胞株就是指从一个经过生物学鉴定得细胞系用单细胞分离培养或通过筛选得方法,由单细胞增殖形成得细胞群。 ４。干细胞就是一类具有自我更新与分化潜能得细胞。干细胞得增殖特性为缓慢性与自稳性。 5.培养细胞得生长特点为贴附、接触抑制与密度抑制。 6、植物细胞培养得原理就是基于动物细胞得全能性。 7、植物细胞悬浮培养得方法为分批培养法、连续培养法与半连续培养。 8。植物组织培养中培养材料得消毒过程中,消毒得基本原则就是既要杀死附着其上得微生物又不损伤材料、 9.细胞生长测定得一般方法为:细胞计数、测定细胞密实体积、细胞鲜重或干重。 10、体外培养得细胞根据其生长方式主要分为贴附型细胞与非贴附型细胞。 1１.人工种子得组分包括胚状体、人工胚乳与人工种皮、 12.细胞融合主要经过了两原生质体或细胞互相靠近、细胞桥形成、胞质渗透、细胞核融合几 个步骤。其中细胞桥形成就是最关键得一步、 13。花粉单倍体植株得鉴定方法有形态鉴定、细胞学鉴定、杂交鉴定、分子标记鉴定。 14。胚胎工程主要就是对哺乳类动物得胚胎进行某种人为得工程技术操作,然后让它继续发育,获得人们所需要得成体动物。 １５.人工诱导单倍体形成得方法包括:远缘杂交、延迟授粉、核置换、射线照射、花药培养等、二、单项选择题(每题1分,共10分) 1。人参皂甙粉就是人参中重要得药用成分,以前只能从人参中提取产量极低,因而价格昂贵、目前人参皂甙粉可以通过下列哪项技术迅速大量获取(B) A.基因工程 B.植物组织培养

17版教学大纲《细胞生物学》

《细胞生物学》教学大纲 课程编号：08300063 学时： 32 学分： 2 一、课程的性质和任务 细胞生物学是为生物技术、生命科学和生态学专业学生开设的专业必修课。该课程是是从细胞的显微、亚显微和分子三个水平研究细胞结构与功能，细胞增殖、分化、代谢、运动、衰老、死亡，以及细胞信号传导，细胞基因表达与调控，细胞起源与进化等生命活动的专业基础学科。通过本课程的学习，使学生正确认识细胞结构、功能及各种生命活动和生命现象；掌握细胞的形态结构及细胞生命活动规律，了解细胞生物学研究领域的重点和热点，提高学生对细胞生物学知识的应用能力。 二、相关课程的衔接 先修课程：生物化学。 后续课程：遗传学、细胞工程。 三、教学的基本要求 1.重点掌握细胞结构与功能，理解并掌握各个亚细胞结构功能及各结构的装配。 2.理解并掌握细胞重要生命活动（增殖、分化、衰老及调亡等）过程的规律及调控，各细胞 组分的互动与网络架构及细胞调控的基本规律。 3.掌握细胞生物学的学科历史，了解该领域研究重点及热点。 四、教学方法与重点、难点 教学方法：本课程采用课堂讲授、讨论及多媒体教学相结合开展教学。 重点：重点讲授各个亚细胞结构、各结构的装配及功能，细胞生命活动（增殖、分化、衰老及调亡等）过程的规律及调控，个细胞组分的互动与网络架构及细胞调控的基本规律。 难点：细胞结构的功能中涉及的作用机制（包括假说、模型等）以及细胞生命活动的调控机制（如蛋白质的分选、膜泡运输等）。 本课程力求做到突出重点内容，讲清难点内容，并着重做好以下两点： 1.重视基础性和系统性：细胞结构、功能是课程的重点讲解内容，也是了解生命活动和生命 现象的基础，更是学好本课程的基石。图文结合从细胞的显微、亚显微和分子三个水平来 系统的认识细胞的结构及功能，使学生更全面系统的掌握细胞的形态结构及细胞生命活动 规律。 2.了解相关的学科历史及当前研究热点：在传授传统的基础理论的同时，适当加入相关内容 的学科历史，以及研究进展。熟知历史可以更好的理解该领域的研究发展方向。

细胞工程学相关考试题及答案

细胞工程学名词解释及问答题 一、名词解释 1、细胞工程（cytotechnology或cell engineering）：它是以生物细胞、组织或器官为研究对象，运用工程学原理，按照预定目标，改变生物性状，生产生物产品，为人类生产或生活服务的科学。 或应用细胞生物学和分子生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种或品系。 2、看护培养（nursing culture）：用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞持续分裂增殖的方法。 3、细胞杂交（cell hybridization）：指用人工方法把不同类型的两个或两个以上细胞合并成一个细胞的技术。 4、外植体〔explant〕：从植物体上分离下来的用于离体培养的植物组织、器官等材料。 5、人工种子：是指植物离体培养中产生的胚状体或不定芽包裹在含有养分和保护功能的人工胚乳和人工种皮中所形成的能发芽出苗的颗粒体。 6、花药培养（anther culture）：将成熟或未成熟的花药从母体植株上取下，放在无菌的条件下，使其进一步生长、发育成单倍体细胞或植株的技术。（指离体培养花粉和花药，使小孢子改变原有的配子体发育途径，转向孢子体发育途径，形成花粉胚或花粉愈伤组织，最后形成花粉植株，并从中鉴定出单倍体植株，使之二倍化的细胞工程技术。 7、条件培养基(conditioned medium)：培养过程中，有些细胞可能会分泌活性物质到培养液中，这种培养过某种细胞以后，含有细胞分泌物的培养液称为条件培养基。 8、植物脱毒：由人工用物理、化学和生物方法将植物体组织器官病原体消除，以使这些组织器官生成完整植株。 9、原代细胞系：指从机体中取出而直接培养的细胞，从一代到十代的细胞培养是原代培养，形成的整个系统叫原代细胞系。 10、体细胞杂交：指在人工控制条件下，不经过有性过程，两种体细胞原生质体相互融合产生杂种的方法。 11、胚胎培养：是指胚或具胚器官（如子房、胚珠等）在离体无菌条件下发育成幼苗的技术。 12、互补选择：是指利用两个亲本具有不同的遗传和生理特征，在特定培养条件下，具有发生互补作用的杂种细胞才能生长的选择方法。 13、悬浮培养(suspension culture):是细胞培养的基本方法，是将单个游离细胞或小细胞团在液体培养基中进行培养增殖的技术。 14、植板率:植板率是能长出细胞团的单细胞在接种单细胞中所占的比例。 15、玻璃化冻存：是指液体转变为非晶态（玻璃态）的固化过程。 16、接触抑制(contact inhibition)：当细胞在基质上分裂增殖，逐渐汇合成片即每个细胞与其周围的细胞相互接触时，细胞就停止增殖，即细胞密度不再增加，这一现象称之为接触抑制或密度依赖抑制现象。 17、非对称融合（aymmetric fusion）：利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再进行融合。 18、对称融合（symmetric fusion）：两个完整的细胞原生质体融合。 19、胞质体：不含细胞核而仅含有部分细胞质的原生质体。 20、体细胞胚：离体培养下没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程所形成的胚的类似物（不管培养的细胞是体细胞还是生殖细胞）。 21、永久细胞系：大多数细胞系在有限的代数内以不变的形式增殖，当超过有限世代后，在体外永久存活下来发育成永久细胞系或称连续细胞系。

《细胞工程》课程教学大纲

《细胞工程》课程教学大纲 课程编号： 课程名称：细胞工程 总学时数：48 先修课及后续课：先修主要课程有生物化学、细胞生物学、微生物学、现代生物技术导论、基因工程；后续课程有酶工程、生物制药工艺学、免疫学。 一、说明部分 1．课程性质 本课程属于生物技术专业必修专业课，授课对象为该专业本科学生。 细胞工程是应用细胞生物学和分子生物学原理与方法，在细胞水平上研究改造生物遗传特性，以获得具有目标性状的细胞系或生物体的有关理论和技术的学科。它是一门现代生物科学理论和工程技术相结合的综合性学科。 2．教学目标及意义 细胞工程是现代生物技术的重要组成部分，同时也是现代生物学研究的重要技术工具。生物工程专业学生通过本课程的学习，掌握生物组织、器官及其细胞离体培养的原理与技术，以及细胞融合与杂交瘤技术、单倍体与多倍体育种技术、细胞重组与克隆技术、胚胎工程技术、基因导入等的基本原理、技术路线和方法，为从事生物学领域的相关研究及其与细胞工程有关的生物技术产业奠定良好的理论和技术基础。 3．教学内容及教学要求 重点掌握本学科的基本原理和基本技术即：细胞全能性学说在细胞工程中的指导作用；培养条件下的细胞分化和器官发生的调控；不同组织、器官的培养特点和控制方法；以及细胞融合与杂交瘤技术、单倍体与多倍体育种技术、细胞重组与克隆技术、胚胎工程技术、基因导入等。了解细胞工程的各类技术在现代生物学与生物技术领域的应用途径、最新进展与发展潜力。在掌握基本知识的前提下，能针对具体课题对重要技术的技术路线进行初步设计。 4．教学重点、难点 教学重点是本门学科的基本理论和重要技术的操作方法和程序，如细胞全能性、脱分化、再分化、细胞融合，以及动植物组织培养技术、原生质体培养技术、细胞融合与杂交瘤技术、单倍体与多倍体育种技术、细胞重组与克隆技术等。难点是一些概念的区别与重要技术的应用范围、发展前景和存在的问题，如转基因动物的克隆与转基因克隆动物技术的区别、干细胞技术与克隆技术的应用等，以及针对具体课题如真菌原生质体融合，应用所学知识尝试技术路线和程序的设计。 5．教学方法及手段 多媒体课堂讲授为主，结合实验教学

细胞工程 期末考试复习题目

细胞工程期末考试复习题目 细胞工程填空：20个ⅹ分=10分选择：10个ⅹ2分=20分名词：10个ⅹ6分=30分简答：5个ⅹ6分=30分论述: 1个ⅹ10分=10分第一章绪论1、细胞工程的定义及特点？细胞工程：是指主要以细胞为对象，应用生命科学的理论，借助工程学原理与技术，有目的地利用或改造生物遗传性状，以获得特定的细胞，组织产品或新型物种的一门综合性科学技术。细胞工程的特点：前沿性：现代生物技术的热点争议性：新技术给伦理道德带来的冲击综合性：多学科交叉应用性：工程类课程，重在产品与技术第二章细胞培养的设施与基本条件：1、什么是细胞及组织培养？组织工程：习惯上繁殖所有的体外培养，即器官培养，组织培养和细胞培养的总称。其本

意是指从活的机体中去取出器官、组织或细胞，模拟机体内生理条件，在体外建立无菌、室温和一定营养条件等，使之生长和生存，并维持其结构和功能能的技术称为组织培养。细胞培养：将组织块用机械方法或酶解法分离成单个细胞，做成细胞悬液，再培养于固体基质上，成单层细胞生长，活在培养液中呈悬浮转肽培养的技术称为细胞培养。2、了解细胞培养实验室的基本规划及相关注意事项？实验室规划：⑴准备室：培养用具清洗、消毒和做实验准备的场所，一般建在通风和光线充足的地方。⑵缓冲间：保护操作室的无菌环境，避免空气对流。 ⑶操作间：要求无菌。最好设在阴面，防止室温过高；天花板高度不超过2米，保证紫外线有效杀菌效应；门用拉门，避免空气流动。室内天花板、地板和四周墙壁要光滑无死角，要镶瓷砖或涂油漆，便于清洗与消毒，不易在墙角推挤灰尘。3、细胞培养的设备有

哪些？有何基本作用⑴超净工作台①最好安装在无尘室内，最好在无菌间，避免过多灰尘使滤器阻塞，降低净化效果，缩短使用寿命。②新安装的或长期未使用的工作台，工作前必须对工作台和其周围环境用真空吸尘器或不产生纤维的工具进行清洁工作，在采用药物灭菌法或紫外线灭菌法进行灭菌处理。③每次使用时，应先用75%酒精擦洗台面，并进行30~50min紫外线灭菌灯处理净化工作区内累积的微生物，在关闭紫外灯后，应启动送风机使之转运2min后在进行培养操作。④净化工作区内不应存放不必要的物品，以保持洁净气流不受干扰⑤高效过滤器3年更换一次。请专业人员操作，以保持密封良好。定期将粗过滤器中的过布拆下清洗。⑥每次使用净化台要即使清楚工作台面上的物品，并用酒精擦洗台面使之始终保持洁净。⑵CO2培养箱：①一定浓度的CO2生长，尤其是原代培养和单