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纳豆激酶活性测定相关说明

纳豆激酶活性测定相关说明
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細胞抗氧化能力檢測相關說明

1.測定方式:

(1) 細胞株抗氧化能力之指標物質

a. 酵素(如SOD, catalase等)

b. 抗氧化物質(如GSH等自由基)

(2) 細胞株存活能力分析

a. 細胞存活測試(MTT 法)

b. 細胞增生/凋亡分析(染色體套數變化, 相關指標蛋白活性等)

c. 其他(可依委託需求另行分析)

2.委託方式:

請見附件-細胞抗氧化能力檢測委託書 (下頁)

3.收件方式:

請將「細胞抗氧化能力檢測委託書」連同樣品,郵寄至600嘉義市鹿寮里學府路300號國立嘉義大學微生物免疫與生物藥學系謝佳雯老師實驗室A25-203 收。

4.檢驗工作天數:

以申請回覆函為依據,預估自收件日後,一個月內檢測完成。

每月15日前收件,15日後收件一律以隔月樣品計算。

5.收費標準:

101年1月1日起,每一樣品檢測費用

(1) 細胞株抗氧化能力之指標物質,新台幣20000元整。

(2) 細胞株存活能力分析,新台幣30000元(起)整。

6.付費方式:

檢驗費用請以郵局匯票、即期支票(抬頭請寫全銜”國立嘉義大學”) 或現金寄至600嘉義市鹿寮里學府路300號,收件單位為『國立嘉義大學生命科學院附設檢驗分析及技術推廣服務中心微生物與分子檢驗組收』,待收到款項後,會立即將檢驗報告及收據正本寄至貴公司。

7.聯絡方式:

國立嘉義大學生命科學院檢驗分析暨技術推廣服務中心微生物與分子檢驗組Tel: (05)2717802

Fax: (05)2717831

附註:

*樣品按申請順序處理,其完成日期視物品性質需要訂定之。原則上,在收到樣品30日內(不包括收樣日)完成檢驗。

*委託者如有特殊需要,得於委託檢驗時,提出申請速件處理,惟需加收檢驗費用(普通件價錢之1.5倍)。

*工作天不包括週六、週日及國定例假日。

*出具中文報告一式兩份,若有其他要求請另外告知。

附件-細胞抗氧化能力檢測委託書

一、

公司名稱:

公司地址:□□□□□

聯絡人:

電話: Fax: E-mail:

使用細胞(一張委託單限測試一種細胞株):

檢測項目:

□細胞株抗氧化能力之指標物質,每一樣品新台幣20000元整。

測試樣品/數量:

□細胞株存活能力分析,每一樣品新台幣30000元整。

測試樣品/數量:

蓋章(公司章):

二、

報告領取方式:

□自取

□郵寄

□同公司地址

□其他

2016执业药师继续教育考试试题全

2016执业药师继续教育考试试题全

2016 年执业药师继续药学教育试题 执业药师应当遵守的基本准则不包括( ) A.遵纪守法 B.自觉学习 C. 提升能力 D.管理能力 制订执业药师业务规范的意义不包括() A.明确执业药师承担的职责 B.提升执业药师执业水平 C.保障执业药师的执业权利 D.增加执业药师福利 处方用药适宜性审核中可能发现的问题不包括() A.药品剂量过高 B.药品之间有配伍禁忌 C.药品不属于医保报销范围 D.处方用药与临床诊断不相符 以下情况中,执业药师应当主动提供用药指导的是() A.用药依从性差的患者 B.用药接近极量的患者 C.用药不频繁的患者 D.仅“必要时”用药的患者 属于 COMT抑制剂的药物是()A. 卡比多巴 B.司来吉兰 C. 恩他卡朋 D.普拉克索 属于乙酰胆碱酯酶和丁酰胆碱酯酶双重抑制剂的药物是 ( ) A.多奈哌齐 B.卡巴拉汀 C.加兰他敏 D.石杉碱甲 属于 NMDA受体拮抗剂的药物是() A.卡巴拉汀 B.美金刚 C. 奥拉西坦 D.苯海索 可使胆碱能神经作用增强,胃肠蠕动增加、胃酸分泌增多的 药物是() A.卡巴拉汀 B.美金刚 C. 奥拉西坦 D.苯海索 下列关于牵张反射的描述,错误的是() A.指骨骼肌受牵拉时同一肌肉收缩 B.包括腱反射和肌紧张 C.腱反射是多突触反射 D.肌紧张是维持躯体姿势最基本的反射 E.如果某一腱反射减弱或消失,则说明相应节段的脊髓功能受损 反射中枢兴奋传布的特征,下列哪项是错误的() A.单向传递 B.中枢延搁 C.兴奋节律不变 D.兴奋总和 E.易疲劳 神经系统对机体功能调节的基本方式是() A.反射 B.反应 C.适应 D.正反馈 E.负反馈 老年人主动脉弹性降低时,血压的变化是() A.收缩压升高,脉压减小 B.收缩压升高,脉压加大 C.收缩压降低,脉压减小 D.收缩压变化不大,脉压显著加大 E.收缩压与脉压均无变化 流行性感冒病毒是()科的代表种,简称流感病毒。 A.正粘病毒 B.小RNA病毒 C.疱疹病毒 D.呼肠病毒 呼肠孤病毒的遗传物质为()。 A.单链DNA B.双链DNA C.单链RNA D.双链RNA 体外实验发现,黄芩根煎剂对()具有一定的对抗作用。 A.甲型流感病毒 B.乙型流感病毒

抗氧化酶活性等测定方法

叶绿体得提取 一、试剂配置 1、PBS提取液:每L水依次加入MES(195.2×0。05=9、76g)、山梨糖醇(0。33×182。2=60。126g)、NaCl(0、010×58.5=0、585g)、MgCl(0.002×95=0、19g)、EDTA(292、25×0.002=0、5845g)、KH2PO4(200×0.0005=0、1g);使用时加入ASA—Na(198。1×0、002=0、3962g); 2、悬浮液:将PBS提取液中得MES换为238。3×0.05=11、915g得HEPES(238、3×0。05=11。915g); 3、80%Percol:80ml原液+20ml水;40%Percol:40ml原液+60ml水; 实际配制: PBS提取液2000ml(3个处理*2个品种*3个重复*20ml*3次=1080ml), 悬浮液100ml(3个处理*2个品种*3个重复*1ml*3次=54ml); 80%Percol 200ml;40%Percol 200ml。(3个处理*2个品种*3个重复*3ml*3次=162ml) 二、提取步骤 1、10g鲜样加20ml提取PBS(50mM MES PH6、1,含0、33M山梨糖醇,10mM NaCl,2mMMgCl2,2mM EDTA,0.5 mMKH2PO4,2mM ASA—Na,ASA—Na使用前现配现加) 2、快速研磨,使叶片碎成绿豆粒大小,4层纱布过滤,去除残渣(注意过滤时不可用力挤压,以免叶绿体膜破碎) 3、滤液2000g 3min,小心倒出上清液,将离心管放入离心机后,使离心机得加速很快上升到预定值(水平转头,加速度调到9),约经30s后很快使其下降停止,整个离心持续大约2—3min左右完成; 4、沉淀用1ml提取液漂洗表面悬浮物; 5、用1ml悬浮液(50mM HEPES pH7。6,含0、33mM山梨糖醇,10mM NaCl,2mM MgCl2,2mM EDTA,0。5mMKH2PO4,2mM ASA-Na,ASA-Na使用前现配现加)将沉淀悬浮,在分散叶绿体时宜用毛笔轻轻刷,或者用手握住离心管在冰块之间搅动,使叶绿体由于震动分散开来,不要用棉球吸滤,以防被膜压破。叶绿体悬浮时要浓点,含叶绿素2mg、ml-1以上,这样有利于保持活性。 6、2000g 1min; 7、沉淀再用悬浮液悬浮;(悬浮液同5,可以不做) 8、用Percol试剂进行梯度离心(将3ml含有80%Percol(原液按100%算)铺在10ml离心管下层,再把3ml 40%Percol铺在离心管中层,然后将1ml叶绿体悬浮液轻轻铺在离心管上层)1500g2-3min(用

纳豆激酶生产工艺

纳豆激酶生产工艺 纳豆知识1、纳豆和纳豆激酶的生产工艺 (1)、纳豆的生产过程:精选小粒黄豆→浸泡→清洗→蒸煮→沥干→降温至70度→无菌接种(纳豆菌)→35-52度培养24-36小时→分装→冷冻保存→纳豆 纳豆是日本的传统食品,是选用优质黄豆经纳豆菌生物发酵而成。纳豆的外表 带有一层白霜,用筷子搅拌时,会拉出粘丝,拉丝越多越好。纳豆常配入海鲜 酱油、芥末等调味料直接食用,也可烹制各类菜肴。纳豆需要冷藏保鲜,保质 期一般在7~10天。近几十年来,随着纳豆的有益健康的功能不断被发现,纳豆在日本风靡全国,不断掀起"纳豆热潮"。目前,日本纳豆产业的年销售额已达2000亿日元(折合150亿人民币)。 (2)、纳豆激酶的生产工艺: 1:生产纳豆激酶有两种做法。一是考虑到纳豆激酶属于高分子物质,所以只要将高分子物质抽取出来即可。但是用这种方法纳豆中的维他命和纳豆菌也 会一起被舍弃掉。另一种方法是有选择地抽取纳豆菌和纳豆菌的副产物。用这 种方法的话,纳豆菌中所包含的全部的物质都有可能抽取出来。两种抽取方法 谁优谁劣可谓一目了然。生产的纳豆激酶粉末含有纳豆菌所能生成的全部物质。正因为如此,能够生产自然的、稳定性高的纳豆激酶粉末。详细请登陆 https://www.sodocs.net/doc/0d4432633.html, 2、纳豆激酶纳豆中的纳豆激酶是直接分解血栓的纤维蛋白酶。具有强大的溶栓作用,比尿激酶的能力还要强,每克湿纳豆溶栓效果相当于尿 激酶1600FU,在胃肠中不失活。纳豆激酶对血栓的作用时间长,与尿激酶3~5 分钟作用时间相比,纳豆激酶作用长达8小时,而且安全、无副作用。食用纳 豆后,测定血液中形成血栓的物质会慢慢减少,溶解血栓的物质会越来越多, 达到动态平衡。常吃纳豆还会将毛细血管中的血栓溶解掉,有效改善微循环障碍。A、人体实验结果发现纳豆激酶有以下作用:(1)缩短血栓溶解时间(2)增加血栓溶解面积 (3)增加血栓溶解产物上图(https://www.sodocs.net/doc/0d4432633.html,)是:纳豆消除体内血栓的临床实验(西村《视膜中心静脉闭塞症的治疗效果》)。实验用量为每日纳豆的服用

SOD酶活性测定方法

SOD酶活性测定 所需药品: (1)0.1mol/l pH7.8的磷酸钠缓冲液: A液:0.1mol/l磷酸氢二钠液 B液:0.1mol/l磷酸二氢钠液 1毫升B+10.76毫升A (2)0.026mol/l蛋氨酸液(Met):现用现配 称取0.3879克蛋氨酸,用1号液定容至100毫升。 (3)75*10-5mol/l氯化硝基四氮唑蓝(NBT)液:现用现配 称取0.1533克NBT,先用少量蒸馏水溶解,然后定容至250毫升。 (4)1umol/lEDTA-2钠和2*10-5mol/l核黄素混合液 (5)0.05mol/l pH7.8的磷酸钠缓冲液 (6)石英砂 实验步骤: 1.酶液制备:称取0.5克鲜叶,放入研钵中,加入3毫升5号液和少量石英砂,于冰浴中研成匀浆。然后用5号液定容至8毫升,于0~4℃、13000g时离心15分钟,上清液即为酶提取液。酶液可在低于0℃下的环境中保存。 2.按下表加入试剂: 试剂摇匀后,迅速遮光处理1号杯,其余杯在25℃、光强为4000勒克司的条件下照光处理15分钟,然后立即遮光。接着在560nm下,以1号杯作为空白测定其余杯中溶液的光密度。假定2、3号杯中溶液抑制NBT光还原的相对百分率为100%,然后按下式分别计算其余杯中溶液抑制NBT光还原的相对百分率。 M/N=100/X M——2、3号杯中溶液的光密度的平均值 N——其余杯中溶液的光密度值 X——其余杯中溶液抑制NBT光还原的相对百分率 然后以酶液量为横坐标,以其余杯中溶液抑制NBT光还原的相对百分率(X)为纵坐标制作曲线,根据线性好的曲线所得出的函数关系计算抑制NBT光还原的相对百分率为50%时所加入的酶液量,以该酶液量作为1个酶活单位。 结果计算:SOD活力按下式计算: A=V*1000*60/(B*W*T)

荣事达纳豆机基础知识

荣事达纳豆机基础知识 1、你们这是在哪? “荣事达纳豆机”全国客服中心—吉林,我们的地址是吉林省、吉林市、吉林大街177号。工厂地址;广东省中山市黄圃镇新柳西路荣事达小家电生产基地。 2、你们总部在广东,客服中心怎么在吉林啊? 荣事达纳豆机的生产工厂在广东中山(荣事达的总部在安徽合肥,生产工厂在全国各地都有),而且荣事达在全国各个省份都有客服中心,但是每个客服中心负责的项目不同,有的负责空调,洗衣机,电冰箱等等,荣事达纳豆机这个项目是由我们吉林这个客服中心来负责的。 3、荣事达公司简介 荣事达公司全称“合肥荣事达三洋电器股份有限公司”,年销售额200亿,上海A股上市,股票代码;600983,荣事达旗下品牌:荣事达、小天鹅、三洋电器。荣事达在全国有56家分公司、200多个办事处,1800多家售后服务中心、20000个销售网点。国家主席江泽民、胡锦涛,李鹏总理都曾到咱们荣事达亲自考察过。(安徽合肥市双凤工业区荣事达第六工业园) 4、你们荣事达纳豆机不会是假货吧? 荣事达纳豆机的送货模式是以快递的形式,货到付款,您收到的时候确认产品是正宗的“荣事达品牌”您在付款! 能否开包验货;我要帮您核实一下您家里的地址,因为我们委托的快递公司有顺丰快递、中国邮政速递,我们是允许拆包验货的,而且快递单上也有标识,您收到快递的时候,只需要确认是不是荣事达的品牌,您就可以签收了。因为荣事达是上市公司,不会欺骗消费者的。而且荣事达纳豆机执行国家三包政策,如果有任何质量问题,都可以免费给您调换。 消费者要求验机器; 开内箱验货我们是允许的,但是有的时候快递公司没有时间,他们是不允许的,这个您不用担心,您收到的时候只要看到外包装上有荣事达的品牌就可以了,荣事达是上市公司,完全执行国家三包政策,有任何问题我们可以免费为您调换。 5、能不能开发票? 答:请问您开发票是为了保修还是报销? 保修:您邮寄的货物里面有盖有公章、正规、电子、机打票据。您收到之后一定要保存好,凭借着票据就可以到我们的售后服务中心进行售后了。 报销:给您邮寄的货物里面,有盖有公章的、正规、电子机打票据,可以作为报销凭证。这个请您放心。 必须要开发票,否则就不买:可以给您开发票这个是没有问题的,但是咱们这个货物是货到付款,如果说货到了您拒收,而我们又开了发票,我们的税款100多块钱就浪费掉了!打个比方,您去商场买衣服,也都是先付款然后在给您开发票,对把,所以按照正规的税务流程,您一定要先签收,签收之后,我们再给您补开,然后再以快递的方式给您送到家里,这个请您放心。 6、荣事达纳豆机在市场上有销售么? 有,荣事达纳豆机在2010年之前,在市场上销售了4年多,国美、苏宁都能买得到,但是很多消费者因为买不到纳豆菌无法发酵出纳豆,所以,我们取消了国美、苏宁的传统销售渠道,目前只通过“荣事达纳豆机客服中心”直接销售,并由客服中心上的健康顾问,一对一的全程指导您如何做纳豆,怎么吃纳豆。

纳豆激酶活性测定

纳豆激酶检测方法 目前行业内流行的纳豆激酶检测大致有三种方法,其原理、利弊简介如下: 一、 IU纤维蛋白平板法: 以尿激酶为对照,与纳豆激酶样品同时在纤维蛋白平板特定条件下所形成水解圈,测量各自水解圈直径,通过计算取得相应纳豆激酶活力。由于对水解圈直径的认定的认定存在经验人员视觉差异,导致测定粗放,数据波动性强,重复性差,不具权威依据。 二、 FU紫外分光法: 纳豆激酶与纤维蛋白在一定条件下作用会产生可溶性低分子物质,通过紫外分光技术检测其浓度,通过计算取得相应纳豆激酶活力,数据稳定,重复性强。测定硬件条件苛刻,测定成本高,不具权威性依据。 三、 U中性蛋白酶法: 纳豆激酶与酪蛋白在一定条件下作用会产生可溶性低分子物质,通过普通比色计检测其浓度,计算取得相应纳豆激酶活力,数据稳定,重复性强。测定简单,检测成本低,有国家标准为依据。 1)琼脂糖一纤维蛋白平板法是,是目前最常用的纤溶酶溶栓活力测定方法,此法的原理是用琼脂糖作为固体支持,以凝血酶和纤维蛋白

原制做人工血栓平板,注入NK,用溶解圈垂直直径的乘积(mm2)表示纤溶活力,以标准UK或纤溶酶为标准品作标准曲线,计算出NK的活性相当于标准品的单位数。此法简便易行,并可同时测定多个样品,但由于溶解圈面积受恒温反应时间的影响很大,所以对恒温时间的控制十分重要,且恒温时间对粗制酶活性测定的影响比对NK精制产品活性测定的影响大。 2)在直径15mm的硅化试管中依次加入pH值为7.7的咪唑缓冲液、纳豆激酶收集液、凝血酶和纤维蛋白原,立即振摇数秒,使之产生絮状物,置38℃水浴30 min,置冰水中终止反应。用100目尼龙网过滤试管中未溶解的纤维蛋白,滤纸吸干,用蒸馏水漂洗,再用滤纸吸干,放入小试管中,再加3mL浓度为O.2 mol/L的NaOH溶液,在沸水中煮15min,冷却。用分光光度计测定溶液在280nm处的吸光值,并根据活力计算公式计算纤溶活力。 纳豆激酶活力= A对照?A样 0.5ml×30min ×3×1000ug

各种酶活性测定方法

抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定 过氧化氢酶(CAT)活性测定 过氧化物酶(POD)测定方法 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定 小组第一次讨论结果: 一、抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性的测定 1.原理 APX 是植物体内重要的抗氧化酶, 主要功能是分解H2O2, 此过程通过抗坏血酸- 谷胱甘肽循环来完成。此外, 它还直接参与抗坏血酸的氧化还原代谢, 而抗坏血酸能有效地清除多种活性氧自由基。因此,APX被认为与果实的抗热性直接相关。 2.所用方法 (1)采用碘液滴定法: 称取新鲜材料1 g,剪碎置研钵中,加少量石英砂及pH值6.0 的磷酸盐缓冲液,迅速研磨成浆,20 ℃下浸提30 min,中间摇动数次,3000 r /min 离心后保留上清液即为酶液。反应底物为抗坏血酸,加入酶液2 mL,20 ℃下反应10 min 后,立即加入偏磷酸1 mL,终止酶的活动,抗坏血酸被消耗的量,可用碘液滴定剩余的抗坏血酸来进行测定,加淀粉溶液几滴作指示剂,以碘液滴定出现浅蓝色为止,记录滴定值,用底物被消耗的量来表示APX 的活性。每个处理设3 个重复。(2)紫外吸收法: 称取1g芥蓝叶片组织,加入1.6 mL预冷的磷酸缓冲液(PBS-K)(pH 7.8)提取液(含1 mmol·L-1 AsA,3 mmol·L-1β-巯基乙醇,0.5 mmol·L-1PMSF,

2% PVP,1 mM EDTA)。用液氮研磨,提取液于4℃,12000×g离心20 min,上清液用于酶活性的测定。取0.10 ml 酶液(可视情况调整),加入1.70 ml 含0.1 mM EDTA-Na

纳豆与纳豆激酶如何溶解血栓——福达平安

纳豆对人体的作用 纳豆是由黄豆经豆菌发酵而成的一种微生态、有机健康食品。发酵成熟后的纳豆,表面附着一层透明的纳豆菌膜,具有很强的粘性,用筷子挑起,可拉出长长的丝,丝中含有其他任何食品都不能替代的传统的特殊营养成分,并形成特有的风味纳豆。 纳豆是纳豆菌将黄豆分解后的产物,它和黄豆有本质的区别。纳豆中富含纳豆菌、优质蛋白质(肽)纳豆激酶、超氧化物歧化酶、皂甙、卵磷脂、纳豆多糖等上百种对人有益的生理活性物质,很多都是黄豆中没有的。虽然黄豆中也有蛋白质、异黄酮、皂甙、卵磷脂等物质,但没有经过纳豆菌的分解,由于没有活性,其吸收、功效都和纳豆中的活性物质有天壤之别。由于其营养成分的特殊和多种功能,被誉为“跨营养科学和医药科学的营养食品”,具有提高人体分解排除血栓能力和调整肠道的功能。 日本食用纳豆已有1000年的时间,纳豆在日本创造了四个奇迹: 1、世界第一长寿国的奇迹。1996年日本掀起了全民食纳豆的热潮,一个一亿多人的国家,在不到十年的时间内,使百岁以上的老人占了世界的三分之一。 2、人均长高15厘米的奇迹。由于日本幼儿园的儿童、学校的学生,每天坚持食用纳豆,营养均衡,身体发育正常,人均长高了15厘米。 3、成功抑制0-157病毒流行的奇迹。由于纳豆优异的抗菌、抗病毒功效,日本政府号召全民吃纳豆,有效抑制了0-157大肠杆菌病毒流行。现在日本已经用纳豆来预防、抑制各种病毒的流行。 4、日本大约90%的人食用纳豆的奇迹。1.35亿人的国家有90%的人食用纳豆,大大超过食用牛奶的人,这在世界上也是一个奇迹。 纳豆的营养成分: 1、种类齐全的氨基酸 纳豆中的蛋白质几乎占到35%。蛋白质是由20种不同的氨基酸组成的,其中12种可以由人体自行合成,称为“非必需氨基酸”;另外8种人体则无法合成,只能从每天的饮食中加以补充,这部分氨基酸称为“必需氨基酸”。纳豆蛋白质几乎包含了所有的必需氨基酸,这在其它植物类食物中是十分罕见的。 2、保健功效突出的B族维生素 纳豆中含有大量的维生素,尤其是B族维生素,其品种之全、功效之多是其它植物性食物不可相比的。如能够营养神经中枢、神经系统的维生素B1,燃烧脂肪的维生素B2,防止动脉粥样硬化的维生素B6,以及维生素PP、叶酸维生素等。 3、机体不可缺少的活性矿物质 纳豆的营养结构十分完美,不仅拥有保健功能突出的维生素B族,而且还拥有大量人体健康不可缺少的矿物质,其中钙、磷、钠、钾、铁的含量尤为丰富,为人体提供了丰富而有益的矿物质来源。 4、纳豆含有的活性物质 〃纳豆激酶——溶解血栓、抗凝血、抗血小板凝聚、改善微循环 〃纳豆菌——调整肠道、抗菌消毒、提高消化吸收率 〃优质小分子蛋白质(多肽)——抗衰老、扩张血管、促进血液循环,修复受损细胞 〃超氧化物歧化酶——防御和消除氧代谢毒害;分解、清除自由基沉着斑块

纳豆激酶活性测定方法和膳食用量

Hans Journal of Food and Nutrition Science 食品与营养科学, 2020, 9(2), 132-136 Published Online May 2020 in Hans. https://www.sodocs.net/doc/0d4432633.html,/journal/hjfns https://https://www.sodocs.net/doc/0d4432633.html,/10.12677/hjfns.2020.92017 Methods for Assay of Nattokinase Activity and the Dosage of Dietary Yanchun Liu, Lingyun Cai, Xiuling Wang, Shijuan Dou* College of Life Sciences, Hebei Agricultural University, Baoding Hebei Received: Mar. 17th, 2020; accepted: Apr. 2nd, 2020; published: Apr. 9th, 2020 Abstract Natto, which is a must-have food in Japan, has a long history and a unique flavor. Natto has various functions, among which the thrombolytic effect of nattokinase has attracted much attention. A lot of methods have been used to assay the activity of nattokinase. The article summarizes five main methods, including fibrin plate method, fibrin degradation method, casein degradation method, synthetic substrate method and enzyme-linked immunoassay. At present, fibrin plate method and fibrin degradation method are being used commonly. By comparing different methods for assay-ing nattokinase activity, we hope that the assay method can be unified and a uniform standard for dietary dosage of natto produced by different companies can be put forward. Keywords Natto, Nattokinase, Methods of Nattokinase Activity, Dosage of Dietary 纳豆激酶活性测定方法和膳食用量 刘艳春,蔡凌云,王秀伶,窦世娟* 河北农业大学,生命科学学院,河北保定 收稿日期:2020年3月17日;录用日期:2020年4月2日;发布日期:2020年4月9日 摘要 纳豆历史悠久,风味独特,在日本已成餐桌必备食品。纳豆有多种功能,其中人们关注最多的是纳豆激酶的溶栓效果。纳豆激酶活性测定方法多样,本文总结了主要的五种测定方法:纤维蛋白平板法、纤维*通讯作者。

各种酶活力测定方法及注意事项

碱性蛋白酶及各种蛋白酶活力测定方法及测定有感 因长期测定碱性蛋白酶酶活力与角蛋白酶活力与胶原酶活力和弹性蛋白酶活力,碱性蛋白酶活力测定还好,因有国家标准,测定按照国标来便可大大减少误差。其余酶活力测定过程中因无统一标准且底物差异大,导致长期酶活力测定的混乱,各种酶活力测定方法与各种试剂添加,最后实际测定的酶活力只能仅作参考。 以下是各种蛋白酶活力测定方法及标曲绘制: 碱性蛋白酶测定方法 根据国标GB/T 23527-2009 附录B 蛋白酶活力测定福林法 以下是方法

碱性蛋白酶的测定方法参考 GB/T 23527-2009 附录 B 中福林酚法进行,即 1 个酶活力单位(U/mL)定义为 1 mL 酶液在 40℃、pH= 10.5 条件下反应 1 min 水解酪蛋白产生 1 μg 酪氨酸所需要的酶量,主要步骤如下。 2.2.6.1 标准曲线的绘制 (1)L-酪氨酸标准溶液:按表 2-6 配制。 表 2-6 L-酪氨酸标准溶液配置表 Table 2-6 L-Tyrosine standard solution form 管号酪氨酸标准溶液的浓度/ (μg/mL) 取 100 μg/mL 酪氨酸标准 溶液的体积/(mL) 取水的体积/ (mL)

0 0 0 10 1 10 1 9 2 20 2 8 3 30 3 7 4 40 4 6 5 50 5 5 (2)分别取上述溶液各 1.00 mL,各加 0.4 mol/L 碳酸钠溶液 5.0 mL,福林试剂使用 液 1.00 mL,置于 40 ℃±0.2 ℃水浴锅中显色 20 min,用分光光度计于波长 680 nm,10 mm 比色皿,以不含酪氨酸的反应管作为空白,分别测定其吸光度值,以吸光度值 A 为纵坐标,酪氨酸浓度 C 为横坐标,绘制 L-酪氨酸标准曲线。 图 2-1 L-酪氨酸标准曲线 Fig. 2-1 L-tyrosine standard curve 根据作图或用回归方程计算出当吸光度为 1 时的酪氨酸的量(μg),既为吸光度常数 K 值。其 K 值应在 95-100 范围内。上图所示标准曲线符合要求,可用于下一步实验。 2.2.6.2 测定方法 (1)计算方法 X = A × K × 4 / 10 × n = 2 / 5 × A × K × n 式(2-1) 式中,X —样品的酶活力,μ/g; A —样品平行实验的平均吸光度; K —吸光常数; 4 —反应试剂的总体积,mL; 10—反应时间 10 min,以 1 min 计; n —稀释倍数。 (2)测定方法 ①先将干酪素溶液放入 40 ℃±0.2 ℃恒温水浴中,预热 5 min。 ②按下列程序操作,进行测定。 于 680 nm 波长,用 10 mm 比色皿测其吸光度。

纳豆激酶的功能与作用及服用纳豆激酶的好处

纳豆激酶的功能与作用及服用纳豆激酶的好处 纳豆激酶是人类至今发现的最具溶栓能力的食物酵素,其溶栓能力可能超过当今世界已经发现的所有的溶血栓药物,而且安全、无毒副作用。曾有医学研究表明,其溶栓能力是尿激酶的19倍。 纳豆激酶的发现开辟了食物溶栓的新途径,开启了抗击血栓防治心脑血管疾病的新纪元。英国科学家诺贝尔医学奖获得者约翰·文教授说:“谁掌握了溶解血栓的方法,谁就找到了慢性病防治的金钥匙。”所以说,纳豆激酶的发现是带给人类福音,堪比诺贝尔医学奖的伟大发现。 纳豆激酶作用机理 简单的说纳豆激酶除了可以直接溶解血栓外,还能激活人体自身的溶栓功能,即让没有活性的酶原变成能够溶解纤维蛋白的有活性的酶,没有活性的酶包括纤溶酶原和尿激酶原。 这个“原”相当于套在钢笔上的笔帽,只有将笔帽取下,钢笔才能写出字来。 科学的讲,如下: 1)刺激血管内皮细胞产生组织型纤溶酶原激活剂(t-PA),将纤溶酶原激活为纤溶酶,溶解纤维蛋白,降解血栓; 2)将体内的尿激酶原激活为尿激酶,尿激酶与t-PA一同激活纤溶酶原,溶解血栓; 3)纳豆激酶本身是一种激活纤溶系统的丝氨酸蛋白酶,具有直接水解交联纤维蛋白的作用;

纳豆激酶的作用过程不仅直接溶栓,而且还能提高人体自身的溶栓能力,因而是恢复血液系统凝固与抗凝两种体系重归平衡的过程。 血液凝固系统强势于血液抗凝系统血栓形成,血流不畅血液抗凝系统强势于血液凝固系统身体内外呈出血倾向。 服用纳豆有哪些好处? 曾对坚持服用清血纳豆激酶的患者进行为期一年的跟踪回访。发现:心脑血管疾病患者如能坚持服用6个月以上,病情会大为减轻,避免发生中风和心梗,提高生命质量,延长寿命。 1、纳豆激酶改善中风、脑梗 血栓是在血管中形成的血块,会使血流缓慢,甚至会使血管堵塞引发中风等脑血管疾病。纳豆独含的纳豆激酶,具有双向溶解血栓的作用,溶栓力强劲、快速、作用持久。根据日本人常年吃纳豆的研究显示:脑血栓的治疗和预防可使用纳豆激酶。坚持吃纳豆激酶,可以改善血液环境,清理血管内多余的垃圾,各种血栓引起的不适症状会渐渐减轻,从而使病情好转。 2、纳豆激酶预防冠心病 冠心病包括缺血性心脏病,常伴有心悸、气短、头晕、眼花等不适症状,同时会有血压高、高血脂、高血糖等。纳豆激酶等长寿因子能保护血管内皮细胞,促使血液中的多余脂肪排出体外,避免发生动脉硬化,从而保证心脏足够的供血供氧。 3、吃了纳豆激酶后,血压平稳了! 研究发现,纳豆激酶可以从血管内壁开始调节,显著降低全身血管阻力,阻止心肌及血管壁肥厚,致使血压下降。

纳豆激酶酶活测定方法

纳豆激酶酶活测定方法 琼脂糖—纤维素平板法: (1)原理: 在血液中纤维蛋白溶酶原和纤维蛋白原往往处于结合状态,因此本试验所用纤维蛋白原制剂均包含纤维蛋白溶酶原。用凝血酶将纤维蛋白原凝结成蛋白平板后,将样品定量滴在平板上,如果有纤维蛋白溶酶原激活剂活性存在,将纤维蛋白溶酶原激活成纤维蛋白溶酶,从而溶解纤维蛋白,出现溶圈。在纤维蛋白溶酶原过量的情况下,溶圈的大小反映了激活剂的量。 (2)仪器:玻璃平皿(直径12cm)10ul微量进样器变温电炉(1000W)恒温培养箱(±0.5℃)超净工作台游标卡尺电脑扫描仪 (3)试剂药品: 1、0.1M磷酸盐缓冲液: 0.1M磷酸氢二钠:取无水磷酸氢二钠14.2克用蒸馏水稀释到1000毫升。 0.1M磷酸二氢钠:取无水磷酸二氢钠2.4克用蒸馏水稀释到200毫升。 两种溶液按一定比例混合,用PH计测定PH至7.4。 2、尿激酶溶液:尿激酶标准品用磷酸盐缓冲液分别配成每毫升磷酸盐缓冲液含10、20、40、60国际单位溶液(中国药品生物检定所尿激酶标准品)。 3、纤维蛋白原溶液:取一只纤维蛋白原加磷酸盐缓冲液32毫升(中国药品生物检定所牛血纤维蛋白原,每支可凝蛋白77毫克)。 4、凝血酶溶液:配成每毫升磷酸盐缓冲液含25单位凝血酶溶液(中国药品生物检定所凝血酶)。 5、琼脂糖溶液:0.1克琼脂糖(电泳级)加磷酸盐缓冲液40毫升,煮沸加炭素墨水1至2滴,至体积约30毫升,取20毫升。 6、样品溶液:样品提取液用水配成每毫升含相当于10—60单位尿激酶的溶液。 (4)测定方法: 在超净工作台上将20毫升琼脂糖溶液加15毫升纤维蛋白原溶液,在40℃左右混合,立即加凝血酶0.5毫升混匀,倒入平皿(表面不得有气泡)。盖盖静

纤维素酶活力测定方法_张瑞萍

测试与标准 纤维素酶活力测定方法 张瑞萍 南通工学院(226007) 摘 要 用DN S 为显色剂,分别以滤纸和CM C 为底物,以滤纸糖酶活性(FP A )和羧甲基纤维素酶活性(CM C a se )表征纤维素酶活力。确定酶活测定用波长为530nm,参比溶液应为失活酶、底物和DN S 等共热的反应物;比较了两种底物的酶活力测定方法。结果表明,CM C a se 比FP A 高,说明酶对水溶性底物有较高的活力,也表明吸附对酶的活性部位与纤维素分子链段的结合及催化均有很大影响;对于不同牌号的纤维素酶,织物的酶减量率与CM C 酶活力关系密切。 叙 词: 测试 纤维素酶 活度中图分类号: TS197 纤维素酶是多组分复合物,各组分的底物专一性不同。纤维素酶作用的底物比较复杂,反应产物不同,致使纤维素酶活力测定方法很多,各国的方法亦不统一。我们选择滤纸、CM C 为底物,原理系利用纤维素酶催化水解纤维素,产生纤维多糖、二糖及葡萄糖等还原糖,与显色剂反应,求出还原糖的浓度,间接求出酶的活力。由不同底物测得的酶活力分别称作FPA (滤纸糖酶活力)和CM C ase (羧甲基纤维素酶酶活力)。本文分析确定酶活力测定的主要条件,比较两种底物的酶活力测定方法的结果,探讨纤维素酶活力与织物减量率的关系,为酶在生产中的利用提供依据。 1 实验方法 1.1 化学药品、材料 纤维素酶(工业品),DNS 试剂(自配),冰醋酸,醋酸钠,葡萄糖(均为分析纯),滤纸(定性),羧甲基纤维素酶CM C (试剂级),纯棉针织物半制品(南通针织厂)。 1.2 FPA 滤纸酶活力和CMC 酶活力的测定 取适当稀释的酶液,分别以滤纸或1%的CM C 溶液为底物,于50℃恒温水解反应1h ;然后加入显色剂DNS,沸水浴中煮沸5min;再加入蒸馏水,于530nm 测定吸光度OD 值。 酶活可定义为:每毫升酶液1min 产生1mg 葡萄糖为一个单位( )。 1.3 针织物酶减量率的测定 将酶处理前后的试样在烘箱中105℃烘至恒重。减量率= 处理前织物干重-处理后织物干重 处理前织物干重 ×100% 2 结果与讨论 2.1 显色剂的选择 选用DNS ,在碱性条件下与还原糖反应,生成有色化合物,用分光光度计比色,确定低分子糖含量。 碱性条件下DNS 与还原糖共热反应如下: O 2N OH O 2N CO OH +还原糖  H 2N OH CO OH O 2N DN S(黄色) 3-氨基-5-硝基水杨酸(棕红色) 生成的棕红色氨基化合物系比色法测定基础。2.2 最大吸收波长的确定 选取490~580nm 波长对显色液进行比色。由图1可知,不同浓度的葡萄糖溶液在490~500nm 处有最大吸收,DNS 在此波长下也有较明显的吸收。为了排除DNS 的干扰,选择在波长 530nm 处进行测定,此波长下的葡萄糖吸收虽有所降低,然而符合“吸收最大、干扰最小”的原则。 图1 D NS 与葡萄糖的吸收曲线 2.3 底物及酶本身含糖量的影响 在实验过程中发现,底物特别是滤纸,也含有一定的还原糖,在碱性的DNS 试剂中也会发色。而且,试验所用的纤维素酶是一种工业级的复合酶,品种不同,其本身含糖量也不同。为了排除这类还原糖的干扰,参比溶液取失活后的酶、底物、DNS 等共热的反应物。2.4 葡萄糖标准曲线 用不同浓度的葡萄糖溶液作为标准溶液,与DNS 共热反应显色后,测出其吸光度OD 值(见图2)。标准曲线的线性相关系数R 2为0.9991(见图2),线性相当好,可以用于酶活力的测定。 38 印 染(2002No .8) www .cdfn .com .cn

纳豆激酶介绍

纳豆激酶 纳豆激酶(nattokinase简称NK)是一种枯草杆菌蛋白激酶,是在纳豆发酵过程中由纳豆枯草杆菌(Bacillus subtilisl natto)产生的一种丝氨酸蛋白酶。具有溶解血栓,降低血粘度,改善血液循环,软化和增加血管弹性等作用。 1980年在纳豆中被发现,由275个氨基酸按照固定排列方式组成,分子量是27724,有分解血栓的独特功能,活性效果用固有单位FU表示。 发现历程 纳豆激酶的发现来自著名的"两点半实验" 须见洋行博士 须见洋行博士 1980年的一天,从事溶解血栓药物研究工作的日本心脑血管专家须见洋行博士,他突然想起纳豆不是纤维蛋白发酵的吗?而血栓最顽固的部分就是纤维蛋白,于是,下午两点半时,须见洋行博士把纳豆中提取的物质加入到人工血栓中。 原本准备第二天看结果的,但5点半的时候,一次偶然的察看,奇迹发生了,血栓居然溶解了2厘米,而平常用尿激酶做溶血栓的实验溶解2厘米需要近两天的时间,也就是说纳豆发酵物溶解血栓的速度是尿激酶的19倍之多。于是,就将纳豆的这种强力溶栓物命名为纳豆激酶Nattokinase,简称NK,这就是震惊世界的溶血栓药物研究史上有名的“下午两点半”实验。 医学实验 株式会社日本生物科学研究所与韩国首尔延世大学研究院心脑血管疾病中心共同研究关于纳 “总之,纳豆激酶会导致收缩压和舒张压下降。豆激酶对高血压的效果。该研究报告的结论是: 这个结果表明增加纳豆激酶的摄入,可能对于预防和治疗高血压起着重要的作用。”该研究报告被国际权威学刊SCI收录(《Japanese society of hypertension》 VOL.31NO.8.August,2008ISSN0916_9636)。 株式会社日本生物科学研究所与印度孟买市TNMC&BYLNair医院共同进行的急性脑中风患者应用纳豆激酶+低分子肝素+抗凝药物治疗的综合临床研究。试验结论表明:纳豆激酶经口服摄取+低分子量肝素+抗血小板凝集药对于急性缺血脑中风的治疗效果显著。该研究报告也被国际权威学刊SCI收录(Jpn pharmacol ther vol.32 No 7 2004 TNMC&BYLNair 医院脑神经外科)。 株式会社日本生物科学研究所和日本圣玛丽安娜医科大学疑难疾病治疗研究中心共同进行关于纳豆激酶抑制血小板凝固和预防血栓形成的研究。该项研究的结论是:证实了纳豆激酶不但能溶解血栓,还能抑制血小板凝固,起到防范血栓形成的作用。这项试验结果于2003年3月在日本药学会发表。 此外,株式会社日本生物科学研究所还进行过纳豆激酶摄取后血液形态学的研究,手指血液流动变化试验对视网膜静脉塞栓试验、以及纳豆中维生素K2对华法令拮抗作用

纳豆激酶活性物质大作用

纳豆激酶活性物质大作用 纳豆激酶活性物质1 3 大作用 作用一:溶血栓功能 通过人体实验发现纳豆激酶能使纤维蛋白溶酶原、尿激酶原激活成纤维蛋白溶酶和尿激酶而促进溶血栓效果,同时发现纳豆激酶可激活血浆中组织溶纤酶原激活剂的产生,它会将包括微细血管中的小血栓都溶解,使血液恢复健康和正常、微循环通畅;将血管壁上的附着血栓溶解,逐步恢复血管的弹性,改善动脉硬化;减轻血管的周外阻力,缓解高血压、减轻心脏的负荷。纳豆激酶是世界上最优秀的溶栓药,迄今为止溶栓药物中的上品。已经在日本、美国、中国上市销售。 作用二:防止血管老化 纳豆中最被关注的成分:富含蛋白质、赖氨酸、色氨酸、缬氨酸白氨酸、异白氨酸、苯丙氨酸等必需的氨基酸,还有,胆固醇在血管流淌使血管老化,纳豆菌含有亚油酸和卵磷脂可以防止血管老化,含有维生素E和大豆皂角甙,有抗酸作用。纳豆中的优质小分子蛋白质,是人体细胞的丰富营养,可修复受损的细胞,从而有效预防血管老化。 作用三:化解血栓粘稠 纳豆菌富含卵磷脂可以强化血管,化解血液粘稠。大豆中含有皂角甙,可以冲洗附着在血管上的胆固醇,保持血液清澈,维持血管韧性,防止动脉硬化。纳豆中多种生理活性物质的综合功效使血脉畅通。 作用四:控制糖尿病 纳豆中的多种生理活性物质,有上百种之多,是抗氧化的完美组合;抗病毒、抗感染的完美结合;修复胰岛细胞的完美结合;富含合成胰岛素的多肽物质,改善糖尿病并发症的完美组合。通过众多糖尿病患者服用纳豆的临床效果分析,只要坚持按时、按量或加量服用的患者,综合有效率可达90% 以上,非常显著者可达90%以上。这是非常可喜和意想不到的成果,可以说已经改写了糖尿病“终身疾病”的历史。 (一)纳豆防止糖尿病的综合功效分析 1.抗氧化的完美结合 2.合成胰岛素,修复胰岛细胞 3.高弹性蛋白酶 4.活性维生素、矿物质 5.膳食纤维 (二)纳豆中的生理活性物质防止糖尿病及并发症功效分析 1.纳豆激酶 2.消除活性氧、自由基 3.降血脂、血糖 4.优质小分子蛋白质 5.二道免疫屏障 6.维生素B1、B12 7.辅酶和辅基 作用五:消除脂肪肝 1.合成酒精分解酶 有利于酒精分解酶的合成和发挥分解酒精的作用,增强肝功能。聚会前两小时吃上一两粒软胶囊,可防醉酒。

酶活性测定方法

一、过氧化物酶(POD)活性的测定 POD测定参照李合生等(2003)的愈创木酚法方法进行测定,略加改动。 测定:称取样品0.5g,加入5mL 1/15mol/L PH=7.0的磷酸缓冲溶液,冰浴研磨成匀浆,4℃条件下12000r/min离心15min,上清液为粗酶液。然后在试管中加pH 7.0的磷酸缓冲液2 ml,愈创木酚(0.2%)0.5ml,浓度为0.15%的H2O2 0.5ml,取0.3ml的酶提取液加入到试管中,空白以缓冲液代替。在470nm下测定其吸光度,加入酶液时开始计时,每隔30s读数一次,连续记录5分钟。以每分钟每克鲜重增加0.1的酶量作为一个酶活性单位。 △470 ×V T POD活性= 0.01×t×Vs×W 式中:△470----反应时间内吸光度值的变化; V T ----提取酶液的总体积(ml) t----反应的时间(min) Vs ----测定时取用酶液体积(ml) W----样品鲜重(g) 二、多酚氧化酶(PPO)活性的测定 多酚氧化酶活性测定参照朱广廉等(1990)的方法,略加改动。 酶液制备:称取样品0.5g,加入5mL 0.1mol/L PH=6.0的磷酸缓冲溶液,冰浴研磨成浆,4℃条件下12000r/min离心15min后上清液即为粗酶液。 PPO活性测定:反应试管中分别加入0.1 mL酶液+3.9 mL磷酸缓冲液+ 1 mL 1m mol/L的邻苯二酚。混匀后于30℃保温10 min,迅速加入2 mL质量分数为20%的三氯乙酸终止反应,立即于525nm下测定其吸光度值,计算酶活。 PPO活性= O D×V T 0.01×t×0.5g×V s = O D×V T 0.005 OD——反应时间内吸光值的变化; V T ----提取酶液的总体积(ml) Vs ----测定时取用酶液体积(ml) T———反应时间(min);

两种纳豆激酶活性测定方法对比及相关性分析

作者简介:杨明俊(1979-),男(汉),硕士研究生,研究方向:微生物药物学。 *通讯作者 杨明俊1,杨晓彤1,*,冯慧琴1,糜可1,杨庆尧2 (1.上海师范大学微生物与免疫学研究所,上海200234;2.上海杨杨百草研究所,上海200234) 两种纳豆激酶活性测定方法对比及相关性分析 摘 要:从线性和精密度两个方面对纤维蛋白平板法和四肽底物法测定纳豆激酶活性的两种方法进行了比较研 究,并验证了两种方法测定值之间的直线相关性。结果表明:纤维蛋白平板法和四肽底物法分别在10.77IU/mL ̄80.73IU/mL和0.03U/mL ̄0.09U/mL浓度范围内呈线性,且日间和日内变异系数均小于10%。 两者结果具有直线相关性,其关系为纤维蛋白平板法测定值(IU)=264.87×四肽底物法测定值(U)-19.633,(R2=0.9942)。结论:纤维蛋白平板法与四肽底物法均能用于纳豆激酶活性测定,前者测定结果直接,但四肽底物法更灵敏,还可应用于高通量筛选。关键词:纳豆激酶;纤维蛋白平板法;四肽底物法 ACOMPARISONANDCORRELATIONSTUDYOFTWOMETHODSFORNATTOKINASEACTIVITYDETECTION YANGMing-jun1,YANGXiao-tong1,*,FENGHui-qin1,MIKe1,YANGQing-yao2 (1.Instituteofmicrobiology&Immunology,ShanghaiNormalUniversity,Shanghai200234,China; 2.ShanghaiYang’sHerbInstitute,Shanghai200234,China) Abstract:Thisstudycomparedthelinearityandprecisionoffibrinplate(FP)methodwithtetra-peptide(Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA)substrate(SS)method,andtheirresults’correspondencywasalsoinvestigated.Re-sultsshowedthat:Theactivitylinearrangeswere10.77IU/mL ̄80.73IU/mLforFPmethodand0.03U/mL ̄0.09U/mLforSSmethodrespectively,whilebothCVswerelessthan10%inwithin-dayandday-to-daytests.Thetworesultsshowedagoodlinearcorrelationandcouldbeconvertedas:FPvalues(IU)=264.87×SSvalues(U)-19.633,(R2=0.9942).Therefore:fibrinplatemethodandtetra-peptidesubstrate(SS)methodarebothap-plicablefordetectingNattokinaseactivity.TheresultfromFPmethodcandirectlyreflectnattokinase’sthrom-bolyticactivityandthetetra-peptidesubstratemethodhastheadvantageforfast,sensitiveandhigh-throughputscreening. Keywords:nattokinase;fibrinplatemethod;tetra-peptidesubstratemethod纳豆(Natto)是日本的传统发酵食品,以大豆为原料由纳豆芽孢杆菌(Bacillussubtilisvar.natto)发酵而成,其风味独特、营养丰富。纳豆激酶(Nattokinase,NK)是纳豆中的一种丝氨酸蛋白酶,具有较强纤溶活性,因此常食纳豆可减少血管栓塞的危险,有益于老年性心血管疾病的预防[1]。 纳豆激酶的活性反映了纳豆的保健功效,因此活性测定是纳豆研究和质量控制中必需也是关键的技术之一。纳豆激酶活性测定方法常见的有纤维蛋白平板法[2]、 纤维蛋白块溶解时间法[3]、四肽底物法[4]、酶联免疫吸附法[5]和血清板法[6]等,其中使用得较多的是纤维蛋 白平板法,即根据纳豆激酶将纤维蛋白平板内纤维蛋白(Fibrin)水解而形成透明圈的原理,利用透明圈面积计算纳豆激酶纤溶活性。该测定法的优点是结果比较直观,但由于所用试剂为生物制品,批次差异大,实验操作复杂,实验过程耗时,难以进行大批量样品高通量筛选。已知纳豆激酶对Suc-Ala-Ala-Pro-Phe-pNA最为敏感[7],可以将该底物水解生成对硝基苯胺(p-NA)而使溶液呈黄色,根据单位时间内对硝基苯胺的释放量计算酶的活性。此法底物为人工合成的小肽,品质容易控制,操作便捷,特别是可以进行大批样品的高通量筛选。但其测定的纳豆激酶活性与纤溶活性的相关性一直未经验证,用于纳豆激酶测定的具体条件也未见报道。 本研究分别用纤维蛋白平板法和四肽底物法测

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