体外受精技术的研究进展
体外受精技术的研究进展
摘要：哺乳动物体外受精技术主要包括卵母细胞的采集和体外成熟、精子获能、体外受精及早期胚胎培养。本文阐述了动物体外受精技术的研究进展,存在问题及应用前景。
关键词：体外受精；卵母细胞；体外成熟；精子获能；体外受精；胚胎培养
Abstract: The technology of the IVF on mammals mainly comprised picking up ovum and maturation culture in vitro, sperm capacitation, in vitro fertilization and early embryonic development.This article briefly reviewed the technology of the IVF and proposed the presence and prospects of mammals in vitro fertilization technology.
Key words: IVF; oocyte; in vitro maturation; sperm capacitation; in vitro fertilization; early embryonic development
体外受精（In Vitro Fertilization,IVF）是指哺乳动物的精子和卵子在体外人工控制的环境中完成受精过程的技术[1]。1982年，美国学者Brackett等培养出世界第一胎体外受精牛，此后，多种动物的体外受精都在不断研究并相继取得一定的成果[2]。近年来，研究者在不断改良培养液、培养条件等，尽量模拟体内受精和发育环境, 以提高胚胎体外生产效率。但到目前为止，体外受精技术还存在一定的局限性，在完全体外化的条件下生产胚胎还有很多问题尚待解决。体外受精技术的完善可以实现胚胎移植技术在生产上的广泛应用；加快良种进化；为胚胎工程技术提供研究材料和技术支持，具有广阔的发展和应用前景。
1动物体外受精技术研究方法
1.1 卵母细胞的采集和成熟培养
1.1.1 卵母细胞的采集方法
不同季节母畜的卵巢机能活动不同。卵母细胞的采集应在母畜的繁殖季节，此时卵巢机能活动最活跃，卵泡生长发育较好，卵母细胞质量好，体外成活率高[3]。卵母细胞的采集方法通常有三种。
1.1.1.1 从屠宰后母畜卵巢上采集卵母细胞
该方法是从刚屠宰的母畜体内摘取卵巢，洗涤后经30-37℃保温快速运回实验室，在无菌条件下用真空泵或注射器吸取卵巢表面一定直径卵泡中的卵母细胞，或卵巢切片收集卵母细胞[3]。此方法获得的卵母细胞多处于生发泡期，需经成熟培养后才能与精子受精。这种方
法的优点是材料来源丰富，成本低廉，但确定母畜系谱困难，卵巢质量难以保证，且受季节影响较大。
1.1.1.2 从活体卵巢中采集母畜卵母细胞[4]
该方法是借助超声波探测仪、内窥镜或腹腔镜直接从活体动物的卵巢中吸取卵母细胞。此方法在间隔一定时间后重复取卵，不影响母畜的繁殖性能，为充分利用良种母畜和珍惜动物提供了新途径。但是，活体采集的卵母细胞一般要经成熟培养后才能与精子受精。
1.1.1.3超数排卵
该方法用促卵泡素和促黄体素处理母畜后，从输卵管中冲取成熟卵子并可以与获能精子受精。该方法关键是要掌握卵子进入输卵管和卵子在输卵管维持受精能力的时间，在其具有旺盛受精能力前进行；优点是可以提高家畜的利用率，并可控制体外受精的卵子发育阶段，进而提高体外受精效率[5]。
1.1.2 卵母细胞质量评定[6]
根据卵丘的完整程度及形态将卵子分为4种类型：A类：有致密卵丘细胞层完全包裹着的卵子；B类：卵丘细胞层不完全包裹的卵子；C类：完全裸露的卵子；D类：卵丘细胞层呈现蜘蛛网状地附着在卵子上的卵子。D类卵母细胞不能培养成熟，C类卵子的成熟率非常低，而A、B类卵子的体外成熟率则较高，因此通常选A、B类卵子做体外受精用卵子。1.1.3卵母细胞的成熟培养
1.1.3.1 培养基条件
未成熟的卵母细胞需在体外进行成熟培养方可与精子受精。卵母细胞成熟培养液为基础成熟液+血清+激素。目前常用的培养液有TCM 199、Ham’sF10和Ham’sF12，其中TCM 199应用比较广泛。资料显示，用TCM 199对牛、绵羊、山羊和猪的卵母细胞进行体外培养，成熟率达80%以上。有研究证明，培养条件与受精率和囊胚发生率有较强相关性，因此，家畜卵母细胞成熟培养液的研制是胚胎体外生产的重要内容之一。近期卵子培养液主要进行了以下改进：（1）在培养液中加入母畜生殖道液或细胞成分等人工试剂无法完全模拟的成分；（2）在培养液中加入激素如FSH、HCG、LH等促进卵子体外成熟；（3）成熟培养液中血清用发情牛血清（ECS）取代胎牛血清（FCS）[7]。添加成分对卵母细胞体外成熟的影响[8]:
(1)血清：在成熟培养液中添加血清能强烈地改变细胞功能，使颗粒膜和膜细胞对卵母细胞减数分裂恢复的抑制失去效果，同时也能为卵母细胞成熟提供所需蛋白质，从而促进卵丘细胞层扩散和卵母细胞发育成熟。现已证实，血清是卵母细胞体外成熟与受精所必需的。绝大多数情况下，培养液中添加胎牛血清(FCS)与FSH、LH、雌二醇(E2)结合使用。培养液
中加入发情牛血清(ECS)比FCS更能提高成熟卵母细胞的受精力和卵裂率，添加浓度10%比较适宜。
(2)颗粒/卵丘细胞：在培养液中加入细胞成分, 如卵丘细胞、颗粒细胞, 现普遍采用制备颗粒细胞单层添加到卵母细胞成熟培养液中, 以期获得较高的卵母细胞成熟率、受精率及发育率。许多学者研究表明：卵泡内细胞, 特别是颗粒细胞、卵丘细胞对羊和牛卵子的细胞核成熟和细胞质成熟是非常重要的。
(3)激素：激素在体内对卵母细胞成熟和排出的重要影响基本为众多学者所证实，但是它在卵母细胞体外成熟过程中的作用机制还不清楚。在培养液中加入激素，如FSH、LH、HCG对卵子的体外成熟有促进作用。徐照学等在成熟培养液中添加15g/L的重组牛生长因子(rbGH)，得到了67.9%的好成绩，明显高于不含(rbGH)培养组(51.3%)。
(4)卵泡液：在培养液中加入卵泡液，卵泡液作为卵母细胞发育的微环境，在决定卵母细胞未来命运中起主要调节作用。根据Fukui报道，体内卵母细胞的成熟与卵泡液中所含雌激素的量有极大的关系，特别是由雌激素代谢而来的某种有效物质可促进细胞质的成熟。多数研究证实：用直径2-6mm的未成熟的卵泡制备的10%(v/v)的卵泡液(pFF)，能促进猪卵母细胞的体外成熟，增强精子穿入卵母细胞的能力，提高单精受精率，减少多精受精等异常受精，并能刺激和调节雄原核的形成。
1.1.3.2 培养外部条件[9]
卵母细胞成熟培养的外部条件包括：气态、温度、湿度、空气和覆盖油等。气态条件一般分为两种：5%CO2的空气和5%CO2、5%O2和90%的N2。温度根据动物种类的不同而不同。卵母细胞成熟培养时要求饱和湿度以维持培养液的渗透压恒定。在使用5%CO2的空气为成熟培养气态条件时，空气的质量比较重要。紫外线消毒时空气中的O3含量升高会影响培养效果。进行微滴培养时，覆盖油通常有矿物油和石蜡油，效果无明显差异，且使用前都需要脱毒和孵育处理。
1.1.3.3卵母细胞的成熟培养方法
动物的种类不同，其卵母细胞体外成熟时间、所需温度及培养基条件也不相同，成熟能力也有差异[10]。
1.1.3.4卵母细胞成熟特征及判定
卵母细胞体外成熟需要经历GVBD、染色体凝集、极体排出、透明带软化和卵丘细胞的扩展等一系列变化。卵母细胞成熟后外围包绕的卵丘细胞间分泌粘稠的基质，细胞层显著膨大，卵丘细胞以卵母细胞为核心，呈放射状排列[11]。卵母细胞的成熟包括核成熟与胞质成熟，二者成熟的同步性对卵母细胞发育能力很重要。成熟期卵母细胞核经过第一次减数分裂的浓缩期、中期、后期、末期和第二次减数分裂的间期而到达中期。此时在光学显微镜下，可以看到GVBD和第一极体的排出，标志卵母细胞己达到核成熟。卵丘细胞的扩展程度常用作判断卵母细胞质体外成熟的特征之一。但是也有学者认为卵母细胞体外成熟和卵丘细胞的扩展是两种无关的生理现象，即使卵母细胞成熟，卵丘细胞未必扩展。另外透明带软化，也是卵母细胞成熟的标志之一。
未成熟卵母细胞卵母细胞排出第一极体成熟卵母细胞卵母细胞成熟是涉及核、质、膜，以及卵丘细胞和透明带等成熟的一个复杂的生物学过程，在形态上表现为纺锤体形成、核仁致密化、染色体凝集、第一极体排出、细胞器重组、卵丘颗粒细胞扩展和透明带软化等。近年来，研究者借助光镜、电镜及一些分子生物学技术逐渐揭示出这一生理生化过程的形态结构变化。由于仅有核成熟和卵丘细胞扩展能在光镜下进行判定，考虑到卵丘细胞对IVF的促进作用，在受精前一般不将其脱除，这样第一极体排出也无法用于IVF前卵母细胞的成熟判定，因而对卵母细胞的综合成熟过程在受精前很难做一整体的具有生理学意义的评价，而只能通过受精率及之后的胚胎发育能力来判定。现
在用于体外受精的主要是卵丘扩展较好的卵母细胞[12]。
1.2精子获能和体外受精
1.2.1精子获能
精子体外获能是体外受精技术中的关键环节之一。体外获能包括两个步骤：1、精子的洗涤；2、使用某些特定成分诱导精子获能和顶体反应。
1.2.1.1 精子的洗涤[13-15]
（1）悬浮法（swim up）该方法根据精子运动浮游的特性将高活力的精子与死的精子和其他精浆成分分开。精液放到含有1-1.5mL获能液或受精液的试管中，在培养箱中孵育10-30min后，吸取上层液体，而后离心洗涤1-2次，即可获得高活力的洁净精子。悬浮法是筛选高活力精子最有效的一种方法,适用于精子活力较差的精液。
（2）玻璃棉（glasswool）过滤法20世纪50年代，许多实验室采用小玻璃珠柱层过滤法来滤除已稀释牛精液中的死精子。虽然玻璃棉的分离效果很好，但由于其材料来源和成本等原因，目前在家畜的体外受精研究和应用过程中并未广泛使用。
（3）Percoll密度梯度离心法Percoll密度梯度离心法收集高活力的精子，是根据形态正常精子密度要高于异常的精子，经平衡离心后形态正常的活精子将聚集在高密度的Percoll 区，从而分离得到高受精力的正常精子。由于Percoll分离精子收集率和可利用率高，因此在体外受精研究和应用中得到广泛使用。
（4）直接离心洗涤法对于精子活力较好的精液可采取直接离心洗涤法制备用于体外受精的精子。该法优点是简单、精子利用率高，缺点是对精子没有分选作用，不宜用于精子活力差和受精力较低的精液。不过，随着精液冷冻保存技术的改进，该方法已经越来越多的用于体外受精的精子制备。
1.2.1.2 精子获能
成熟的卵母细胞是体外受精能否成功的首要条件，精子获能是体外受精技术的核心环节，它同样影响着卵母细胞的受精、卵裂和受精卵的进一步发育。
精子获能的意义在于使精子准备发生顶体反应和超激化，促使精子穿透卵子。为了与卵子受精，精子必须要有很强的活力，还要具备顶体反应（acrosomal reaction,AR）的能力以及穿过卵子卵丘细胞和透明带、最后与卵膜融合的能力。精子不经获能是不会发生AR的。精子获能结果直接影响到体外受精的成功与否[16]。
精子体外获能的主要方法有[17]：（1）高离子强度溶液处理法；（2）钙离子载体法；（3）使用氨基多搪（GAGs）诱导获能；（4）与含血清蛋白的溶液长时间孵育。
（1）高渗液处理法(HIS) HIS液可置换精子表面抗原物质或去能因子从而诱发获能反应。用这种高渗液处理精子，可以获能，但用于体外受精率不高，这是由于溶液的高渗对精子产生不良影响，致使精子活动力降低的缘故。
（2）Ca2＋载体精子顶体反应是Ca2＋依赖过程，它能刺激糖酵解过程，为精子活动提供所需能量，从而加强精子运动。IA可与Ca2＋形成复合物，携带Ca2+内流进入精子内，从而诱发精子的顶体反应。咖啡因可加强IA的作用。
（3）氨基多糖(glycosaminoglycans,GAG) 氨基多糖类化合物与精子浆膜上的一种抑制获能的精浆蛋白结合，并促使该蛋白脱离精子浆膜，实现其促进获能的作用。GAG可促进精子对Ca2＋的吸收，从而诱发顶体反应。肝素是高度硫酸化的GAG。有学者认为，肝素剂量和精子获能的孵育时间是IVF及胚胎发育的重要影响因素。此外，加大肝素剂量可获得更高效率的获能，肝素最适剂量可达100μg/mL。一般认为以10-100μg/mL肝素诱导精子体外获能，对卵母细胞受精率和胚胎发育率不产生显著差异。但常用的肝素浓度为10μg/mL。咖啡因也能增强肝素的作用。
（4）血清白蛋白在哺乳动物精子获能液中，BSA主要功能是置换精子质膜中的胆固醇，改变精子顶体质膜中胆固醇/磷脂的比率，降低了精子质膜的稳定性，导致精子顶体膜通透性改变。另外BSA具有螯合锌离子作用。通过改变膜的通透性，导致Ca2+的内流，从而提高精子活力、促进精子获能和顶体反应。因此，BSA是受精液中的关键成分。通常使用无游离脂肪酸的BSA，用量一般是0.6%。BSA作为辅助成分，被广泛地应用于牛、猪、绵羊、山羊等家畜的体外获能中，但在使家畜精子获能方面，只添加BSA是不够的。
1.2.1.3精子获能的判定
精子获能的标志主要包括运动方式的改变和代谢增强[18]。
（1）运动方式的改变精子运动质量与获能密切相关。精子一旦获能，其运动类型发生显著改变，精子头部侧摆幅度和频率明显增加，而尾部振幅加大，频率加快，呈现一种特殊的超激活运动(hyperactivatedmotility,HAM)或鞭打样运动(whiplashmotility)。HAM系受精
前精子为了适应受精需要而发生的一类特殊的运动类型。精子运动的特点是头部运行轨迹呈不规律的“8”字形，并显著地偏离直线。它对于精子穿越输卵管克服输卵管上皮细胞的阻力，最后穿过卵丘细胞及其细胞外基质和透明带起着重要的作用。
（2）代谢增强未获能和获能精子相比其代谢量特别是呼吸能明显增强。家兔精子在子宫内孵育后其氧吸收量及糖酵解显著增加。在山羊、绵羊和牛的体外受精试验中，获能后精子的运动明显加强，但保持活力的时间相应缩短。这说明，精子在获能过程中代谢活动非常旺盛。
目前常用HAM、AR和受精能力或穿卵试验(SPA)来评价精子的获能状况。获能的结局是发生AR，故可通过检测精子AR来判断获能状况。早期认为AR是由精子质膜和顶体外膜相互融合，形成囊泡化，使顶体内含物逸出顶体。金霉素荧光染色法(CTC)为客观而定量地研究精子获能提供了一项可靠的新技术。该方法是根据精子不同获能状态进行染色，并可将精子分为3种CTC荧光染色类型，即F、B和AR型。“F”型为未获能精子，其顶体帽完整。整个顶体布满黄绿色荧光；“B”型精子为已获能精子，其特点是顶体帽仍然存在，但在顶体后区出现一条暗淡的荧光区带。“AR”型精子，顶体帽缺少，整个精子头部显示淡绿色或无荧光，此即为完成AR的精子。精子受精能力或穿卵试验，是目前国内外临床上应用最广泛的评价精子受精能力的重要方法。它不仅可提供精子获能和AR的状况，而且还可了解精子与卵膜的融合和精核的解聚能力。
1.2.2体外受精
卵子和精子相遇，精子进入卵子内部，激活卵子，精原核与卵原核融合而形成合子，这种生物学现象称为受精。体外受精, 即获能精子与成熟卵子的共培养, 除钙离子载体诱导获能外, 精子和卵子一般在获能液中完成受精过程[19]。
1.2.2.1精/卵比例与精子密度[20]
精子的浓度过高易引起多精受精，过低又影响受精率。通常体外受精的精子浓度为（1-5）×105个/mL，精卵比率为2000-5000：1。体内受精时，受精部位的精卵比一般为1-15：1。在IVF中精子密度通常为0.5×106-5.0×106/mL。如转换为精卵比，则为10 000-20 000：1，而有时可降低到500：1。受精过程一般在石蜡油或硅酮油覆盖下的微滴中进行，微滴以50-100μL为宜，也有报道以200μL较好。一般每个微滴中移入5-15个卵母细胞，但数量达50个也不影响体外受精结果。精子的最终浓度以0.64-1.0×106个/mL为宜，密度过低，则受精率下降；密度超过1.6×106个/mL则多精受精现象增加，同时囊胚的发育率下降。
1.2.2.2精卵作用时间[21]
精卵作用时间因精子处理方法的不同而异，在BO受精液中仅需6-8h。而在TALP受精液中一般需要18-24h，精卵共同孵育不足16h则会降低受精率。但也有人用TALP液作为受精液，精卵共同孵育5-6h即将卵母细胞从受精液中移出，转入早期培养液中培养，这样做的原因一方面是可将卵母细胞尽快地从已死亡或濒临死亡的精子悬浮液中移出，以消除水解酶等对受精卵发育的不利影响；另一方面，与受精时间太长，易导致多精子受精数增加有关。
1.3 受精卵的体外培养
早期胚胎的体外培养是体外受精技术的最后一个环节，也是卵母细胞体外成熟和体外受精两个技术环节最终效果的体现和检验。对于一些用非手术法将胚胎移植到子宫的家畜来说，体外受精后的早期胚胎必须在体外培养至桑堪胚或囊胚阶段才能移植；而对于那些采用手术法移植胚胎的动物，因为体外受精的早期胚胎并不是都能发育到囊胚阶段，所以将受精卵培养成囊胚再移植，亦有可能提高移植妊娠率。IVF后，受精卵在向囊胚发育过程中将要经历一系列的变化，包括合子的形成、第一次卵裂、胚胎基因组的激活、致密化以及形成囊胚。这一过程中，外界环境的变化会导致基因表达发生改变，从而影响胚胎的正常发育及质量[22]。目前，哺乳动物早期胚胎的体外培养研究主要集中在改善培养液成分以满足不同发育阶段的胚胎的营养需求，以及克服体外培养引起的体外发育阻滞。
受精卵桑葚胚早期囊胚
1.3.1 中间受体法
哺乳动物最初的一些体外受精后代均是移植采用中间受体法培养的胚胎得到的，这种方法先将早期卵裂胚胎用琼脂糖包埋后移入中间受体输卵管或子宫中培养一段时间后再行移植后。由于这种方法不仅需要准备中间受体、且容易造成胚胎丢失，费时费力，目前在IVF 研究中已很少采用。但是，这种方法培养得到的胚胎质量明显好于共培养或用成分明确培养基培养得到的胚胎，在抗冻性等方面与体内胚胎质量相当，在意大利等国家的商业化胚胎体外生产中得到应用。
1.3.2 共培养
多种细胞，包括：牛输卵管上皮细胞、颗粒细胞、子宫上皮细胞、Vero、BRL及Vero 与BRL的混合细胞，均曾被广泛用来与牛卵母细胞进行共培养。共培养时体细胞促进胚胎发育的准确原因尚不清楚，但有些研究者认为，其与共培养的细胞可以分泌一些促进胚胎发育的因子，和降低培养液中的胚胎毒性物质有关。
1.3.3序贯培养
序贯培养是根据体外培养的胚胎在不同生长时间里对不同物质需求和代谢的不同，采取针对不同发育时期的胚胎用不同的培养基的一种方法。哺乳动物胚胎在移植前从母型调控向合子型调控的过渡过程中，尤其是胚胎从输卵管进入子宫的过程中，经历了重要的生理、环境变化，同时对营养物吸收的方式也发生了改变，对养分的需求亦各不相同。因而，可以根据胚胎发育的特点，适时、适量地调整培养基的成分，使其更适合胚胎的发育。在早期胚胎的发育过程中，可以使用两个或更多的培养基以适应胚胎发育的需要[22]。
1.3.4 简单培养液培养
简单培养液成分组要由一些盐组成，再根据需要添加血清、及其他生长因子等物质。CR1aa、合成输卵管液和KSOM培养液三种培养液在目前牛胚胎体外培养时比较常用。有研究者比较了SOF和KSOM两种培养液培养效果，结果表明SOF培养效果优于KSOM。且研究结果显示CR1aa培养液较SOF培养液可以显著提高囊胚发育率。也有人认为SOFaa 比KSOM和CR1aa更有利于胚胎向囊胚发育。
1.3.5胚胎培养密度
许多研究表明，胚胎培养密度对胚胎发育有重要影响。提高胚胎培养密度可以显著促进胚胎的体外发育。可能是由于胚胎培养密度的提高可以提高胚胎处分泌或旁分泌因子的浓度，起到类似添加生长因子的作用。
2存在问题及前景展望
2.1体外受精存在的问题
2.1.1 卵母细胞的采集
许多研究者发现取自屠宰场卵巢的卵母细胞可用于IVF的比例高于90%，活体采集卵母细胞可用率约为73%；前者囊胚率为28%，而后者仅为19.6%。然而多数情况下，为了充分利用良种或珍稀物种，活体采卵是生产良种胚胎的主要途径。但是活体采卵也存在一定的问题：（1）操作技术较难掌握；（2）体外受精的囊胚率仍较低；（3）供体母畜每次采集的卵母细胞数有限；（4）长期采卵对卵巢有无损伤尚需实验观察。
2.1.2卵母细胞的成熟培养
在卵母细胞成熟这一环节，还存在着体外成熟培养后的卵母细胞成熟质量较差，特别是胞质成熟不完善的问题，这严重制约了体外受精胚胎的发育率。
2.1.3 胚胎的体外培养
早期胚胎的体外培养过程中，有50%-60%的卵裂卵在2-16细胞期退化，原因尚不清楚。另外，胚胎体外培养导致胚胎质量降低的问题仍制约这IVF技术在生产上的应用。
2.2 发展前景
近年来对哺乳动物体外受精的研究已经取得了巨大的成绩，但是卵母细胞体外成熟、体外受精、体外发育的机制还存在很多问题没有搞清，需要经过进一步的研究使体外生产胚胎技术日臻完善。
卵母细胞体外成熟、体外受精和胚胎体外培养时胚胎移植、性别鉴定、核移植和转基因等高新生技术研究的基础。通过IVP技术可为这些高新技术及畜牧业生产提供数量更多、成本更低的胚胎。胚胎的体外生产是对优良公、母畜的综合充分利用，对家畜育种学有着重大的意义。
若采用活体取卵技术，只要母畜卵巢功能正常，就可以得到比超排多得多的卵母细胞，供体外生产胚胎用。这不受母畜因年老生殖机能衰退的影响, 尤其是一些高产母畜在淘汰屠宰后，还可提供大量的卵子，这对于提高终生生产性能的育种方案是十分有利的。此项技术在育种的其他领域应用也很有价值。如珍稀动物的挽救和优良基因库的冷冻保存，遗传病的诊断，公畜精液受精力的测定等。
可以预测，随着生物科学技术的不断进步，利用体外受精技术生产体外胚胎的应用前景将十分广阔。
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肉牛养殖技术要点
肉牛养殖技术要点 一、育肥肉牛的选择 品种：在同等条件下，改良杂种牛增重速度、肉的品质和饲料报酬都明显高于本地牛。因此，多选择用西门塔尔牛冻精与本地黄牛杂交的杂种牛等，育肥时日增重平均都在1100～1300克左右。 年龄和体重：牛的年龄越大，饲料利用率越低，增重速度越慢，牛肉品质就越差。采用架子牛育肥，应选择12-18月龄入栏为最佳，体重250-350公斤左右。 性别：性别对增重速度、饲料报酬影响较大，一般公牛最佳，阉牛次之，母牛较差，但从肉的综合品质来看，以阉牛为最好，是生产高档牛肉的首选。 体型外貌：不论侧望、上望、还是前望、后望，肉牛体躯部分呈明显的矩形或长方形，也称为砖块形，四肢及胴体较长，十字部略高于体高，后肢飞节部位高的牛发育能力强；另外，牛背、腰肌肉要充盈、肩胛与四肢必须强健有力。 健康状况：应选择精神饱满，体质健壮，无疾病的公牛或阉牛最佳。 二、肉牛育肥方式
1、犊牛持续育肥就是指犊牛断奶后，直接进行育肥（育肥期为10--12个月）。根据肉牛肌肉生长和脂肪沉积的特点，持续育肥牛应分成两个阶段饲养。第一阶段为生长肥育阶段（6--16月龄）;重点是促进牛的骨骼、内脏、肌肉的生长。此时应饲喂富含蛋白质、矿物质和维生素的优质粗料、青贮饲料和糟渣类饲料，日粮中的蛋白质含量应占干物质的13%--14%，尽量多喂粗料，少用精料。第二阶段为成熟育肥阶段，重点是促进肌肉的生长和脂肪的沉积。日粮中粗饲料的比例一般不超过饲料总量的45%，日采食精料量为肉牛体重的2%左右。 2、架子牛（18月龄以上的牛）短期育肥（育肥期为3--6个月）。根据饲养过程，可分为育肥前期，育肥中期和育肥后期三个阶段，育肥前期（大约15d），主要是让刚购进的架子牛适应新的环境条件，让牛自由采食粗饲料，每头牛日补饲精料500g，与粗饲料拌匀后饲喂。精料应由少到多，逐渐增加到1.5kg，并在此阶段对牛只驱虫，健胃。育肥中期（45--75d）;牛的干物质采食量应达到体重的2.2%--2.5%，日粮蛋白质水平为12%，精粗料比例为45--50∶55--50。若是采用酒糟作粗饲料，可适当减少精饲料的用量。育肥后期（30--80d），牛的干物质采食量为体重的2.2%--2.4%，日粮蛋白质水平为11%。
历届通用技术选考草图设计题201711(含答案)(最新整理)
技术设计草图练习 班级：姓名：学号：选考 学考 检查结果：优秀 合格 不合格 其它： 注：草图不合格作品一律重新绘制
2017年11月浙江省技术选考试题 小明参考网上的杯托产品图片，用1.5mm厚的钢板制作了如图所示的简易杯托，安装在书桌侧面的木板上，用来放置水杯。为了观察水杯在杯托中是否稳定，他找来各种不同直径的水杯和饮料瓶分别放到杯托中，发现当水杯或饮料瓶直径小到一定程度时，受到触碰后容易晃动，甚至会从杯托中翻出来。请帮助小明在原有杯托的基础上进行改进设计，设计要求如下： (1)在原有杯托上增加调节件，用于防止水杯或饮料瓶晃动，使用时方便可靠； (2)调节件能适用于直径在Φ35mm～Φ80mm之间的水杯或饮料瓶； (3)改进后的杯托仍保持足够的承载能力； (4)主要材料仍采用1.5mm厚的钢板，辅助材料自选。 请根据描述和设计要求完成以下任务： (1)小明发现问题的途径是________(在A.观察日常生活；B.技术研究与技术试验；C.收集和分析信息中选择合适的选项，将序号填入“________”处)； (2)画出改进后杯托的设计草图，必要时可用文字说明； (3)在设计草图上标注调节件的主要尺寸； (4)杯托安装到书桌侧面，合理的连接件是________(在下列选项中选择合适的选项，将序号填入“________”处)； (5)改进后的杯托需要进行试验，下列试验中不合理的是________(在A.杯托中分别放入Φ35mm 和Φ80mm的水杯或饮料瓶，并调整调节件，观察水杯或饮料瓶是否容易晃动；B.反复调整并固定调节件，沿调节方向推拉调节件，观察是否可靠；C.杯托中分别放入Φ35mm和Φ80mm的水杯或饮料瓶，逐渐加满水或饮料，观察杯托是否变形中选择合适的选项，将序号填入“________”处)。
肉牛养殖技术
肉牛养殖技术 一、肉牛饲养管理 （一）、营养需要 肉牛日粮干物质应占体重2.0％-2.5％，每头每El需蛋白质0.4千克，可消化热能60-122兆焦，钙11-28克，磷11-28克。体重500千克的母牛，全年供给干草1吨、秸秆1吨、青贮1吨、混合精料500千克、盐20千克、骨粉20千克，日平均干草3千克、秸秆3千克、豆壳粉1千克、苜蓿干草1千克、青贮4千克、混合精料1.6千克，食盐和骨粉各0.05千克。 （二）、饲养管理 肉用牛的饲料以青、粗为主，夏季放牧，放牧期一般为5-l0月份，舍饲期从11月份到次年4月份。放牧期每天保证8-10小时的采草时间，放牧人员要跟群放牧，注意观察牛的吃草、发情、精神状况。主要补喂矿物质、食盐，适当补少量精料。放牧期每日补喂精料1千克，舍饲期每日2千克。 （三）、供给多样草料，力争营养全面，并做好饲草的加工调制任何一种牧草都不会有完全的营养成分，舍饲牛应尽量供给多样草料。养牛较好的牧草有黑麦草、橡草、苏丹草等。秸秆可利用玉米秸、稻草、豆秸、花生秧、红薯滕等。精料类有玉米、豆饼(粕)、麸皮、红薯等。为保证饲料的常年均衡供应，春夏可种橡草、冬天可利用耕地种植黑麦草或
其他草种等，分茬收割，鲜草饲喂；种植青贮玉米可在乳熟期，蜡熟期采收制作全株青贮饲料；在秋收后可利用玉米秸、地瓜秧等制作青黄贮饲料。其它的秸秆和稻草、红薯滕、花生秧、豆秸等应全部妥善贮存起来以备冬春利用；要把所产的牧草尽量全部采收、晾晒后贮存。饲草、秸秆等饲喂利用必须经加工调制，先切短(0.5 cm长)或粉碎，然后可采取如下方法：一是盐化后与精料混合饲喂；二是利用秸秆饲料微生物制剂发酵后饲喂；三是加尿素氨化处理后饲喂；四是青黄贮后饲喂，此法比较适合秋季刚收割的玉米秸。红薯、萝卜等块茎饲料是母牛、犊牛冬季补饲的较好饲料，可以室内堆藏或窖藏，喂前应洗净泥土，切碎后单独补饲或与精料拌匀后饲喂，切勿整块饲喂，以免造成食道阻塞。精料类的粮食，豆饼等主要通过粉碎后作补饲用，喂量不要过多，否则易得病。补喂精料根据畜体大小、怀孕、哺乳、育肥等情况确定。母牛怀孕的后2个月应补喂精料，每天l—2kg精料，骨粉50g，食盐30g。哺乳母牛产后头2个月，每天应补给l —2kg精料，骨粉60g，食盐40g。空怀母牛如果膘情差，粗饲料质量不好或饲料单一的也应当适当补喂精料，每天半公斤左右，以利于尽快发情受配怀孕。舍饲养牛应补给矿物质及微量元素添加剂，可以利用营养舔砖，其中含有盐及钙、磷、碘、硒等多种微量元素。利用舔砖可放在饲槽中或固定在柱子上，让牛自由舔食，保证充足饮水。舔砖要防止雨淋
2020年1月浙江选考技术——通用技术试题及答案(含草图设计,精美文字版)
第二部分通用技术（共50 分） 一、选择題（本大题共13小题，每小题2分，共26分，每小题列出的四个备选项中只有一个是符合题目要求的，不选、多选、错选均不得分） 1. 从人机关系角度分析，如图所示的桌椅设计及摆放尺寸中，仅需要考虑人体静态尺寸的是 A. 700 B.600 C.500 D.2000 2. 小明要制作一个木桥模型，用截面为20mm×10mm的木条制作两侧的梁，下列是梁的四种支撑方案，从强度角度考虑，其中合理的是 通用技术实践课上，小明要在工件的圆柱面上钻一个小孔，为了防止钻头跑偏，设计了一个简易钻模（如图所示），将工件装入钻模，钻头沿着钻模上的小孔在圓柱面上钻孔，请根据图及其描述完成第3-4 题。 3. 如果用36mm×36mm×31mm的钢块制作该钻模，下列加工工艺及其工具选择中不需要或不合理的是 A. 冲眼: 样冲和铁锤 B. 划线: 划针和钢角尺 C. 钻孔: 麻花钻和平口钳 D. 锯割: 手锯和台虎钳
4. 加工钻模时，小明进行了下列操作，其中不恰当的是 A. 先在钢块上划出中心线和外轮廓线，然后冲眼、划圆 B. 将麻花钻正直插入钻夹头，并夹紧 C. 将平口钳放到台钻工作台上，并夹紧钢块，戴上防护眼镜，对准冲眼，开始钻孔 D.将钻孔后的钢块连同平口钳一起移到钳工桌上，锉去外轮廓的余量 5. 图中多标的尺寸共有 A. 1 处 B.2 处 C.3 处 D.4 处 6. 如图所示的压紧机构， 在力 F 的作用下 （如图 a 所示） ，推杆通过连杆和摆杆带动压杆逆时针 摆动，将工件压紧。当连杆与摆杆相重合，并与压杆相垂直时 （ 如图 b 所示） ，工件受到的压紧 力最大，此时连杆、摆杆、压杆的主要受力形式是 7. 下列选项中不属于流程的是 A. 连杆受拉、摆杆受弯曲、压杆受压 连杆受弯曲、摆杆受压、压杆受拉 B. 连杆受压、摆杆受拉、压杆弯曲 D. 连杆受压、摆杆受压、压杆受弯曲
长方案控制性超促排卵HCG日应用Gn对体外受精结局的影响
长方案控制性超促排卵HCG日应用Gn对体外受精结局的影 响 摘要：目的探讨在长方案的作用下，在控制性超促排卵HCG日应用Gn对体外 受精结局的影响，旨在为临床上更好的进行体外受精提供依据。方法：利用随机 数字表法将上述研究对象分为试验组和对照组，其中试验组给予GnRH-a长方案 组（试验组），对照组给予改良长方案组（对照组）进行治疗。结果两组患者的 移植胚胎数比较有差异，差异有统计学意义(P<0.05)，而受精率和卵裂率比较无差异，差异无统计学意义(P>0.05)；试验组的临床妊娠率和足月分娩率均高于对照组，两组之间比较有差异，差异有统计学意义（P<0.05）。流产率、胚胎停育率、异 位妊娠和早产率、过期产率及活胎畸形率比较无差异，差异无统计学意义 （P>0.05)。结论 关键词：长方案；控制性超促排卵；HCG；Gn；体外受精； 近年来，受环境、基因等因素的影响，人群中不孕不育的人群数量逐年增多，辅助性生殖技术已经应用于不孕不育的治疗中，控制性超排卵（controlled ovarian hyperstimulation，COH）是体外受精手段中的重要方法之一 [1]，常用的COH 方案主要有长方案、短方案、超短方案、超长方案，其中促性腺激素释放激素激 动剂长方案 ( 简称长方案)是实施体外受精- 胚胎移植(in vitro fertilization- em-bryotransfer，IVF- ET)过程中控制性超排卵的经典方案之一，而人绒毛膜促性腺激 素(human chorionic gonado-tropin, hCG)在生殖领域发挥着重要的辅助作用，本研 究旨在探讨在长方案的作用下，在控制性超促排卵HCG日应用Gn对体外受精结 局的影响，旨在为临床上更好的进行体外受精提供依据。 1.研究对象及方法 1.1 病例来源 笔者回顾性分析了2014年1月至2015年12月间来我院生殖医学中心接受 体外受精- 胚胎移植(in vitro fertilization- em-bryotransfer，IVF- ET)的40例患者作 为研究对象，上述患者年龄在23-42岁之间，平均年龄为31.8±2.9岁。 1.2 纳入标准 （1）取卵次数较少，一般小于等于3次。 （2）基础卵泡刺激素≦15IU/L。 （3）不孕病因主要为单纯的输卵管因素或单纯性男性因素。 （4）主要进行新鲜周期胚胎的移植。 1.3 排除标准 （1）患有临床上常见的妇科疾病，如子宫内膜异位症、子宫腺疾病。 （2）染色体异常。 1.4 治疗方案 （1）促排卵 利用随机数字表法将上述研究对象分为试验组和对照组，其中试验组给予GnRH-a长方案组（试验组），对照组给予改良长方案组（对照组）进行治疗，具体的治疗方案如下： 1.4.1 GnRH-a长方案组（试验组） 试验组于治疗前一周期的排卵后一周注射长效 GnＲH-a 1.8mg，注射后两周 监测患者的血激素水平，同时给予阴道B超检查，当达到垂体降调节标准时开始
肉牛养殖技术经验 (3)
肉牛养殖技术 --山东飞扬牧业牛羊养殖详情咨询:159/647/49186 肉牛养殖技术大全 四条经验养肉牛 （一）买牛先看相如到集市买肉牛时，首先应选购嘴大、鼻孔大、眼有神、体型较长、 腿粗、尾巴有力的牛，这样的牛吃得好，健康无病。另外，还要结合毛皮和臀部，要求皮 肤轻有弹性，臀的毛皮多而软，一抓一大把，这样的牛长肉多，育肥快、经济效益高。 （二）“三定三看”饲养法三定是：一定专人饲养。以便掌握牛吃料情况，观察有无 异常现象发生，有利于及早采取措施；二定饲喂时间。一般是早上5时、上午10时、下 午5时，分3次上槽，夜间最好能补喂1次，每次上槽前先喂少量干草，然后再拌料，2 小时后再饮水，夏季可稍加些盐，以防脱水；三定喂料数量，不能忽多忽少。三看是：看 吃食状况；看粪便，掌握消化是否良好；看反刍。 （三）抓好三项管理措施一是夏季喂完牛后，要把牛拴在通风的树荫下，或背荫、凉 棚下，以防中暑；冬季要拴在背风向阳处，牛舍要采取保暖措施。二是要经常刷试牛体， 能促进血液循环多增膘。三是拴牛绳要短，减少运动量，最好一牛拴一桩，以利增重育肥。 （四）粗粮细喂，科学搭配盛产玉米地区，牛的主要饲草可以是玉米秸，非玉米产区， 因地制宜。铡草时要求是寸草铡四刀，原则是越细越好，草细牛爱吃，易消化、省饲料。 精料喂的数量和品种比例要因时适当掌握。新购进的架子牛，一般都是长时间少喂或不喂 精料，如果精料突然饲喂过多，牛容易消化不良，反而长膘慢。因此，刚买来的牛日食量 一般在1.5～2千克精料为宜。各种料的比例是：玉米面30%、麦麸60%、豆饼面10%、食 盐1～2钱，用水化开拌在料内。10天后再逐渐加精料，出栏前半月，精料量加到每头牛 日粮5～7千克。冬春两季的料比可适当调剂一下。 教你如何巧妙养牛的技术 最好的养牛技术就是：巧养，省料，省事，降低成本，增加收入。 （一）老残牛巧利用。 牛，一般超过10岁以上不论役牛、肉牛、奶牛，利用价值降低了，只能利用它的肉 来增加收入。像这类牛，经过较短的育肥期，就可提高产肉量，具体做法，（1）充分准 备好饲草、饲料，在育肥开始前，草料必须备足，中途断炊，倒影响肥育效果。在肥育期， 采取“困肥”法，即圈在合适的温舍内，室温维持在18—22℃左右，低于零度，不利于肥 育。（2）供料量，每增重1公斤，需料8—10公斤，另可添加些青绿饲料，但不能太多 （供料量也要看牛体型，小型牛减量）。（3）催肥期40—60天，超过150天影响经济效 益。（4）育肥效果，达到日增重1—1.5公斤。 （二）多产母犊新法。 凡是生物繁衍都是按雌雄性别配别出生的，从奶牛的饲养价值来衡量，肉牛价格高。 据国外资料报道，可采取新方法能多产母牛犊。方法是：（1）在人工授精输精前20—30 分钟，先在母牛子宫颈内输入5%的精氨酸溶液，能改变染色体性质，提高母犊受胎率（无 高科技条件慎用）；（2）添加含钙、镁量大的饲料，可提高母胎受胎率，如蔬菜类、萝 卜、大叶菜类等。牛奶、鸡蛋、胡萝卜，含钙镁较多。（3）高科技的日本在显微镜下把 受精卵一分为二，一半作性别鉴定，另一半用作移植，将鉴别雌性的半个授精卵移植到一 头牛子宫内，着床受胎。
体外受精失败的原因及对策
体外受精失败的原因及对策 刘平，郑晓英 作者单位:北京大学第三医院生殖医学中心，北京100191 摘要:在接受体外受精胚胎移植治疗的患者中，有时会出现全部获取的卵母细胞均未受精现象，即受精失败。其原因可能为精子与透明带结合失败和(或)精子穿透异常、卵母细胞激活失败等。目前尚缺乏准确的预测受精失败的方法，临床上一旦出现受精失败应采取积极的补救措施，并根据患者病史、临床特征、配子情况对患者以后的治疗措施提出建议。早补救ICSI的有效性和安全性尚需进一步的临床验证。 关键词:受精;完全受精失败;补救卵母细胞浆内单精子注射;卵母细胞激活 Abstract:Total fertilization failures(TFF)are rareevents of in vitro fertilization(IVF).Most cases oc-cur due to lack or dysfunction of sperm binding to/penetrate the zona pellucida or failure of oocyte acti-vation.Fertilization failure is not predictable becauseof lacking accurately and sensitive method.The clin-ical value of rescue ICSI should be fully considerableaccording to patient history，clinical character andgametes quality.Long term evaluation of babies re-sulting from the application of early rescue ICSI isneeded to confirm empirically the safety of this meth-od. Keywords:fertilization;total fertilization failure;res-cue ICSI;oocyte activation 完全受精失败(total fertilization failures，TFF)指在体外受精—包括常规体外受精(in vitro fertilization，IVF)和卵母细胞浆内单精子注射(intracytoplasmic sperm injecting，ICSI)的显微受精后的一定时段内，精卵没能结合为合子，形态学上没有看到精原核和卵原核形成的现象。多年来的ICSI应用证实:虽然ICSI技术绕开了精子穿越透明带、精卵质膜融合等过程，将精子直接注入卵母细胞内，仍有20%～30%的卵母细胞不能正常受精。 在IVF助孕治疗中，个别患者会出现全部卵母细胞不受精的受精失败，这种现象在常规IVF周期的发生率约为5%～10%[1]，ICSI周期的发生率为1%～3%[2]。 受精失败不仅与精子和卵的质量、受精过程体外环境等因素有关，也可能是某些不明原因性不孕症夫妇长期不能自然受孕的病因所在。当一次取卵获得的多个卵母细胞中有少部分未受精时，被认为是可接受的，但当全部卵母细胞受精失败时，整个治疗过程不得不中断，不仅使医生和胚胎学家感到沮丧，对接受助孕治疗的夫妇更是巨大的精神打击。如何预防和避免受精失败成为改善某些患者IVF结局的重要环节。 1受精失败原因分析
肉牛养殖技术和方法
肉牛养殖技术和方法 对于广大的肉牛养殖户来说，肉牛养殖育肥是非常重要的一项，尤其是是对于一些养殖新手，肉牛养殖技术并不是很了解，这里山东机关干部综合养殖场的养殖专家跟大家分享一下肉牛养殖的技术。 一、肉牛养殖肥育方式：由于自然条件和饲养方法的差别，肥育的方式主要有以下几种：1、6月龄犊牛的肥育方式；2、12-14月龄的幼牛肥育方式；3、4月龄以上架子牛的肥育方式；4、易地肥育方式。 二、肉牛养殖饲养技术1、饲草饲料相对稳定，防止突然变换牛肥育期间，尤其强度肥育或快速催肥，这就需要饲草料相对稳定。若突然变换，必然引起瘤胃内环境改变，直接影响瘤胃微生物区系和发酵活动，导致降低发酵度和饲草料的消化和吸收率，甚至引起消化道的疾病。（标准的牛舍设备）2、注意观察牛只挑食和厌食，须给予足够的粗饲料，改善日粮的适口性，可添加少量糖蜜，多喂些麸皮、大麦、燕麦，或用大麦片代替粉状饲料。临近肥育期厌食，应考虑及时出栏。3、定时饲喂，少给勤添。日喂三次，上、下午各饮水一次，草料拌匀再饲喂，先喂后饮。4、饲草饲料多样化，合理搭配：牛的日粮一般由粗（青）饲料和精料两部分构成，不仅要求有适当容积和采食量（干物质），还需要保证质和量的满足。正如农民所说“杂花草混合料，牛爱吃，易上膘”。5、饮水充足，保持清洁。肥育期间，牛的饮水量与饲料性质和气候条件有很大关系。牛肥育自由采食，应设常备水槽，随渴随喝。放牧肥育或栓系饲养，定时饮水，每日2-3次，以饮足为原则，水需常更换，保持清洁。6、日粮中精粗饲料结构要合理通常情况下，随着肥育期的进展，日粮中精粗比例也有所不同：初期：粗饲料占70%，精料占30%。中期：粗饲料占30%，精料占70%。未期：粗饲料占10%，精料占90%。 三、肉牛养殖肥育期管理措施：经选定供作肥育的后备牛，要逐头检疫，避免疫病传播，造成经济损失。购入前先打扫圈舍，喷洒酚皂液、石炭酸或波尔多液消毒。
食蟹猴人工授精及体外受精实验初步程序
食蟹猴人工授精及體外受精實驗初步程序 KHI Bioservices(Hong Kong)Limited 袁濤 D.V.M 1人工授精及體外受精實驗初步程序 : 1人工授精 (artificial insemination) 1.1母猴準備 利用獨立籠檢視母猴月經, 選擇有正常及規律性月經之猴子進行 利用腹腔鏡(Laparoscopy)或超聲波(Ultrasound)檢查卵巢及卵泡發育情況, 自月經後第5天每隔一天檢查, 接近排卵期時每天進行檢查, 直至確定排卵. [ 另有學者進行荷爾蒙測試 (estrogen, progesterone, LH) 確定排卵 (estrogen ,↓ ↑↑腹腔鏡(Laparoscopy)或超聲波(Ultrasound)較能直接檢視卵泡發育狀progesterone , LH ), 況 ] 1.2公猴取樣 -電激棒取樣 一般分有penile stimulation 及 rectal probe stimulation 電激棒之規格 -精子處理 方法 1取樣後, 凝固精液放於37C 30分鍾 5% CO2 培育箱液化 2液態精液以Tyrode albumin lactate pyruate-HEPES (TALP-HEPES)稀釋1:5 3抽取小許檢視精子活力, 形態及數量 4稀釋至2.0 – 4.0 x 108精子/ml [另有日本研究用2.5 – 5.0 x 107精子/ml 濃度進行 授精] 5培育於30 – 32 , 2-3小時 [另有加入1mM Caffeine使精子活能化(capacitation) ] 1.3授精程序 有文獻提及, 日本獼猴人工授精實驗中, 授精於陰道內之猴不能授精,而只有授精於子官內方可成功. 於食蟹猴陰道及子官均可. 1當母猴証實排卵時, 每天進行0.2ml輸精, 一般由11-14天
通用技术知识点1-8章
第一章走进技术世界 一、技术的价值： 1、技术与人的关系：技术是人类满足自身的需求、愿望，更好的适应大自然，而采取的方法和手段。技术的作用： 保护人：提供抵抗不良环境，防止被侵害的手段和工具。 解放人：解放或延长身体器官，拓展活动空间，提高劳动效率，增强各方面的能力。 发展人：技术促进人的精神和智力的发展，使得人的创新精神和批判能力得以提高，思维方式发生转变，自我价值得以体现。 2、技术与社会的关系： 技术促进社会的发展。技术丰富社会文化内容。技术改变社会生活方式。是推动社会发展和文明进步的主要动力之一。 3、技术与自然的关系 ⑴、利用技术，人类可以改造和利用自然。如：都江堰、荷兰的风车。 ⑵、人类利用技术和改造自然要有合理的尺度，要注意对自然的保护，不能忽视对自然的保护，不能忽视一些技术或产品对环境可能造成的负面影响。 ⑶、技术的发展给自然环境带来了问题，但也给解决这些问题提供了可能。 “绿色”技术：主要包括绿色产品的生产技术以及清洁工艺等。 二、技术的性质 1、技术的目的性 2、技术的创新性：创新是技术发展的核心。技术创新常常表现为技术革新和技术发明。 3、技术的综合性 ⑴、技术活动往往需要综合运用多种知识。 ⑵、科学是回答“为什么”。如：科学活动有牛顿发现万有引力定律、爱因斯坦提出相对论； 技术是解决“怎么办”如：技术活动有瓦特发明蒸汽机、贝尔发明电话。 4、技术的两面性 例如：电池可以带来光明和动力，也可以带来严重的环境污染。 网络技术（方便人们交流沟通，但也有人利用网络犯罪）、 B超技术（可以用于医疗，但也有人进行胎儿鉴别）、 克隆技术（克隆人体器官用于医疗，但也会挑战人类伦理道德）、 核技术（发电，但也会用于战争）、 空间技术（科学实验，卫星通讯。产生太空垃圾）。 转基因技术（可制造符合人类要求的动植物，但其负作用还未知） 5、技术的专利性 狭义的知识产权包括著作权、专利权、商标权三部分。 专利权是指依法批准的发明人或其权利受让人对其发明成果在一定年限内享有的独占权或专用权。专利权是一种专有权，一旦超过法律规定的保护期限，就不再受法律保护。 专利的特性：独占性、时间性、地域性 专利申请过程： 提交申请阶段→受理阶段→初审阶段→发明专利申请公布阶段→发明专利申请公布阶段→发明专利实质审查阶段→授权阶段。 三、技术的未来 对“技术的未来”的思考和憧憬，既不需要技术迷惘中的旷世悲怆，也不需要技术崇拜中肓目乐观。理性地看待技术，以负责、更有远见、有道德的方式使用技术。 第二章技术世界中的设计
肉牛养殖有那些风险因素
肉牛养殖有那些风险因素 肉牛养殖有那些风险因素 肉牛养殖的风险因素主要来自于四个方面。一是肉牛的来源。肉牛的来源影响肉牛机体健康状况和肥育效果，也是决定养殖成功与否的关键因素，引进健康状况较差的肉牛饲养不仅会降低生产性能，也会增加 疫病传播的危险。二是饲养技术。降低饲养成本，提高肥育质量是提高肉牛养殖利润的重要方面，如果在 缺乏饲养技术的条件下盲目投资，会增加肉牛养殖风险。三是疫病防治。疫病发生不但会降低生产性能， 而且会增加养殖成本，因此控制动物疫病发生是保证养殖成功的前提。四是肉牛的销售渠道和销售价格， 选择好的销售渠道，提高销售价格能增加养殖利润。总体而言，肉牛养殖在目前情况下是一个低风险高收 益的行业。五、投资应重点考虑的问题(一)饲草来源饲草是养牛的物质基础。饲养肉牛之前，一定要充 分考察当地的饲草资源，就近解决饲草问题。靠长途运输、高价购草来饲养肉牛将得不偿失。在条件允许 的情况下，若能拿出适当的耕地进行粮草间作或轮作解决青饲料供应问题，对牛的育肥将更加有利。饲草 问题，还应考虑季节因素，保证均衡供应。 (二)资金情况肉牛生产所需资金较大，尤其是短期育肥时购买架子牛需要的流动资金更大，农户应根据个人的资金情况来确定饲养规模的大小。资金雄厚者，规模可大些; 资金薄弱者，宜小规模起步，滚动发 展。(三)技术条件规模饲养肉牛投入资金较大，追求的利润高，不掌握肉牛的生长发育规律和生理特 点，不使用科学的饲养技术，就难以获得最佳效益。因此，要搞肉牛规模育肥，建场前必须对养牛的基础 知识有初步的了解，并在以后的饲养实践中不断地学习，系统地运用新的技术知识科学饲养。(四)场 地的环境与建设面积 肉牛饲养场地要选择在地势高燥，排水良好，便于防疫，远离皮革厂、肉类加工厂、屠宰场及距交通干线 1 000米以上的地方比较理想。按每头牛所需面积与饲养规模来计算牛场建设面积的话，通栏育肥牛舍每 头牛一般可占2.3～4.6平方米，有隔栏的牛舍每头牛可占1.6～2.6平方米。同时建牛场最好请专家设计 指导，牛舍建筑宜简单不宜豪华;，切忌建成牛公馆;。(五)架子牛的来源架子牛的来源及质量是实现 规模养牛的前提条件。规模饲养肉牛应选杂交改良牛，杂交改良牛抗病力强、耐粗饲、增重快、肉质好、 饲料报酬高，可选择饲养西黄一代母牛(西门塔尔牛与南阳黄牛、晋南牛、鲁西牛等地方黄牛的杂交后代) 与夏洛莱牛、利木赞牛、黑白花牛等种公牛杂交的后代，这样的杂交后代牛育肥增重快，能获取较好的经 济效益。(六)自身的经营管理水平像所有饲养企业一样，经营者的管理水平是决定企业盈利水平因素 之一，现实生活中有过许多因管理不当而”场败圈空”的教训。因此，搞规模饲养应考虑在自 身管理水平允许的范围内确定规模大小。可由小规模起步，总结出成熟的管理经验后，再扩大饲养规模。 (七)市场需求饲养肉牛前应选准销售市场。 眼下肉牛育肥的模式有三种：一种是搞成年牛短期育肥，目的是生产普通牛肉，在国内市场销售；另一种 是搞架子牛高效育肥，目的是生产出口活牛，销往国际市场；再一种是搞优质肉牛育肥，目的是生产高档 牛肉和优质牛肉，其高档肉和优质肉占活重的21.86%左右，主要供应国内星级宾馆和大使馆消费，余下的 肉仍作普通牛肉销售。目前国内大多数肉牛育肥场是以生产普通牛肉为主，生产出口活牛和优质肉牛的较 少。在搞规模饲养肉牛前，应视自身的经济实力、技术条件、管理水平等来确定生产模式，力求效益最大 化。 希望广大想从事肉牛养殖行业的养殖户们，根据以上分析来决定是否从事肉牛养殖行业。希望我们能够相互学习，共同推进中国肉牛养殖业的发展。 文章转载：https://www.sodocs.net/doc/0f4429236.html,/News_2_92.html 公司网站：https://www.sodocs.net/doc/0f4429236.html,
辅助生殖技术基本常识
辅助生殖技术概况 AIH：夫精人工授精 AID：供精人工授精 IUI: 宫腔内人工授精 IVF-ET: 体外受精与胚胎移植 ICSI: 单精子胞浆内注射 OI: 诱导排卵 COS: 控制性卵巢刺激 COH: 控制性超排卵 OHSS：卵巢过度刺激综合征 一、不育的定义：正常性生活12个月后未妊娠（WHO） 国内常用的名词：不孕——从未怀孕；不育——曾怀孕但无活婴；目前多采用“不育”一词分类：原发不育、继发不育 二、不孕夫妇检查流程，男方先查 男方：查精液——异常——男方治疗——若无法治疗——无精——AID,若少精且输卵管通畅——AIH——失败——IVF；若严重少弱精——ICSI 女方：正常排卵（基础体温、B超），异常——性激素测定；正常——进行输卵管检查输卵管通畅（通液、HSG、LAP），通畅——指导同房——失败——检查其他不孕因素（LAP+HYS）——失败——IVF 若输卵管不通——LAP+HYS——IVF 三、人工授精（AIH、AID） 1、适应症： AIH：不能正常性交；男女生殖道运行障碍、精液轻中度不正常。 （1）不能正常性交：解剖异常（严重尿道下裂、逆行射精、阴道狭窄） 精神因素（阳痿、早泄、阴道痉挛） （2）男女生殖道运行障碍（宫颈因素、双方免疫因素） AID：无生殖功能或切除睾丸；不良的遗传因素、严重的遗传疾病；夫妻间特殊血型不合、治疗无效；严重少弱精、输精管堵塞、不射精。 2、人工授精的部位： 阴道内；宫颈管内；宫腔内、输卵管内、子宫直肠窝内 3、人工授精精液的处理 目的：提高直线运动的精子数、去除不利的成份、促进精子获能、降低粘稠性 方法：上游法、梯度离心法 4、人工授精的条件 女方输卵管通畅、有成熟的卵泡发育（自然、OI、COH）、内膜8mm以上 精液处理后直线运动的精子 宫腔内授精：1千万以上 宫颈管内授精：2千万以上 5、人工授精的时机 B超监测到有18mm及以上的卵泡，HCG后24-36小时内 四、IVF-ET 1、适应症（卫生部卫科教发[2003]176号文件）：
肉牛养殖可研报告
项目内容及资金使用计划 一、项目立项的必要性 老厂乡白沙村属于典型贫困村，村级集体经济空壳村，集体经济收入为零。结合精准扶贫出列，要求必须有村级集体经济收入，经过乡镇党委、政府调研论证，决定大力发展白沙村肉牛养殖，以此建设白沙村肉牛养殖 1200 率 牛50 经济、社会、生态效益。肉牛生产已成为我乡增强经济实力、调整农村产业结构、富民强乡的一个产业。 （二）项目区选建理由 1、交通便利、区位明显。白沙村距会泽县城50公里，项目建设地位于村组公路旁，交通运输十分方便，为畜牧业的人流、物流、信息流提供了便捷的通道。
2、项目区基础设施条件较好。 具备了项目建设所需要的用地条件，水、电、路三通，饲料来源充足，粪污处理便利。 3、饲草饲料资源丰富。项目区有可利用天然草场0.2万亩；农田种草300亩，产草量达0.15万吨；每年年产农作物秸秆740吨，推广秸秆青贮、 4 5 元 6 高度重视畜牧业的发展，把畜牧业作为贫困户增收的主要产业，特别是把养牛业作为重点产业来扶持，为我乡肉牛产业的发展起到了较大的推动作用。近年来，随着肉牛价格的持续增长，群众对肉牛养殖的积极性很高。 三、项目的主要内容及资金使用计划 （一）项目实施地点
项目实施地点为会泽县老厂乡白沙村二组。 （二）项目建设目标 项目建成投产后，饲养肉牛达到100头以上（其中：能繁母牛50头以上）；通过规模肉牛养殖场的示范作用，白沙村饲养肉牛达到1500头以上（其中：能繁母牛700头以上）；通过集肉牛育肥、合同养殖回收、销 元 1 2 3150 4 5 6 墙100 （7）肉牛养殖科技培训设计：100人次。 （二）建设内容设计 （1）标准化牛圈设计 建设依据和原则 建设地点选择在地势高燥，土质坚硬，地下水位低，排水良好，无工业污染，无生物污染，利于人畜卫生，饲养管理方便，有利于疫病防治，
通用技术设计题汇总
设计题汇总 1．下雨天同学们带雨具到教室，但没有地方放，请你设计一个“雨具架”用于放雨伞。 要求：（1）结构简单、稳固、易于制作 （2）便于摆放在教室中（3）价格低廉 设计内容：⑴用草图及文字说明设计方案 ⑵说明选用的材料、结构、连接方式 ⑶说明作品的特点 答：全不锈钢制作不生锈，下置集水盘，四个脚保持一定的支撑面以提高稳定性，用焊接方式连接，简单且牢固可靠，外形简洁、美观漂亮，结构紧凑，占地小。 2．作为一名高二学生，请结合你在学校所使用的课桌发现的缺陷和不足，根据设计的创新性、实用性、经济性、美观性等原则，为学校设计一张更适合高中生使用的课桌。 （1）简述设计的一般过程 （2）根据你发现和明确的问题，提出具有一定可行性的设计要求（3）综合考虑人、物、环境三个方面，提出设计应主要考虑的因素（4）请运用草图法、模仿法、联想法、奇特性构思法中的一种或几种，构思出一个方案。并用草图及必要的文字说明你的方案 答：①简述设计的一般过程 发现与明确问题、 制定设计方案、 制作模型或原型、 测试、评估及优化、 产品的使用和维护。 ②提出你的设计要求 A．功能要求：具备基本的功能，同时具备桌脚可升降、桌面可倾斜（符合人体工程学）、空间拓展可存放更多书本的功能等等； B．技术要求：课桌基本高度适当、木料材质表面处理工艺等等；C．外观要求：大方、明快等等； D．耐用性：结构稳固，经久耐用等等； E．成本要求：200元人民币以内等等； F．其他方面的要求。 ③综合考虑人、物、环境三个方面，提出设计应主要考虑的因素
④请运用草图法、模仿法、联想法、奇特性构思法中的一种或几种，构思出一个方案。并用草图及必要的文字说明你的方案。 3．为了整治学校周边环境，要在学校门口竖立一块长3米，宽1．5米的告示牌，请你选用下列材料，从设计的创新性、实用性、经济性、稳
肉牛养殖技术基本知识
育肥期肉牛的养殖 肉牛养殖的用户都知道，肥育期是肉牛养殖的重中之重，那么如何在非预期把肉牛养殖好呢？我们一起来了解一下肥育期肉牛养殖技术吧！ 1、饲料搭配与混合，在育肥期的喂养中能够把精料粗料、糟渣料、干草饲料分开喂养，同时也能混合喂养，混合喂养一定将各种饲料按比例混合均匀后投喂。 2、干拌料和湿拌料在饲喂育肥牛时，能够采用干拌料，也能够采用湿拌料。但是搭配一定要比例适中，否则会影响肉牛的生长。 3、饲养次数，饲养次数把握在每日平均2次到3次，也可采用自在采食能满足牛生长发育的营养需求，长得快，出肉多。 4、投料方式，按比例配好饲料，少添勤喂。 5、饮水，育肥期牛体内水来源有代谢水、饲料含水饮水三种来源。在肉牛饮水饲养建议采用自在饮水法，每个牛栏内装有能让牛随意饮到水的安装 肉牛养殖期间需注意几点 随着西餐引进中国，市场对牛肉的需求越来越高，随之肉牛养殖成为火爆行业，很多新养殖户初出茅庐对肉牛养殖还不是很熟悉，肉牛养殖需注意哪些问题？大家了解一下吧肉牛从习性上讲是粗饲，抗病能力较强，但是不等于它不生病。尤其是在集体化养殖条件下，要“防止结合、预防为主”让肉牛有一个良好的生长环境，从而快速成长，给农业户带来更多效益。肉牛容易患传染性贫血、鼻疽和破伤风等病，要养好肉牛，应该注意： 一、肉牛仔离圈时，让其引足清水，千万杜绝引用脏水或污水。 二、搞好牛舍卫生，牛舍不能留任何隔夜粪便，食槽和水缸一定要清洁并消毒。以免感染疫病。 三、肉牛进圈或出圈，尤其在使役完毕后，要让他们痛痛快快地打几个滚，并逐个对其刷拭，这样不仅有利于皮肤清洁，更能促进血液循环，增进体质健康，消除疲劳。 四、饲养时要多多观察，发现肉牛有异常反应，如食欲减退，一定要及时就医，以免延误治疗时机。 五、最好分圈饲养，因为公母混养，性骚扰时常发生，不仅可造成母牛流产而且相互撕咬碰撞，也会有意外伤害。 肉牛养殖的效益如何？ 养殖业虽然不是新兴行业，但是一直兴盛的行业，随着畜牧业不断发展，养殖成为农民发家致富的桥梁，现在尤其以养牛专业为主，让不少肉牛养殖户尝到了甜头，那么肉牛养殖有效益吗？ 改革开放以来，人们生活不断发生变化，吃西餐成为时尚潮流，西餐中必不可少的就是牛排，据不规则调查，市场上牛肉价格呈不断增长趋势，而且需大大多于供，所以肉牛养殖很有市场前景，自然效益也很可观。 肉牛养殖饲料简单，牛食草动物，所以牛的饲料成本相对来说比较低。 肉牛养殖技术并不繁琐，不用什么技术，即便是没上过学的人，只要精心钻研就一定会养好肉牛。
生物体外受精知识点
专题三胚胎工程 3.1——3.2听写 姓名： 1、胚胎工程的操作对象：。 2、精子的发生时间：；卵子的发生是从 开始，减数第一次分裂是在完成的，减数第二次分裂是在 过程中完成的，当时，说明卵子已经完成了受精（卵子已完成受精的标志）。排卵是指：。哺乳动物卵泡的形成和在卵巢内的储备，是在时完成的，这是精子和卵子在发生上的重要区别。 3、精子形成时要经过变形，其中，变为头部，发育为顶体，演变成尾，聚集在尾的基部形成，作用是。细胞内的其他物质浓缩成，最后脱落。 4、在受精之前，须经准备阶段，包括和，其中，卵子要在 内进一步成熟，须达到期，才具备与精子受精的能力。 5、受精时，精子首先发生反应，穿越，然后穿越，并接触到。阻止多精入卵的的屏障有。受精作用完成的标志是。 6、卵裂期的细胞数量，但胚胎的总体积，早期发育的胚胎按时间先后顺序包括：。其中，其中，阶段前的每个细胞属于全能细胞。期开始出现了细胞分化，将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成，该时期还出现了腔，胚胎进一步扩大，出现现象。期出现了胚层分化。内细胞团表层的细胞形成，下方的细胞形成。 7、培养试管动物所用的技术有：， 培育试管动物的意义是。 8、体外受精的步骤主要包括：。 9、实验动物常采用的获取卵母细胞的方法是，所用激素是， 从中冲取卵子，直接与获能的精子在体外受精。从屠宰场已屠宰母畜的卵巢中或从活体中采集的卵母细胞，都需进行体外培成熟养，其目的是。10、采集精子的方法有。从良种公牛采集的精子需才能进行受精作用。体外获能的方法有法和法两种，其中后者是将精子放在一定浓度的溶液中，用化学药物诱导精子获能。 11、获能的精子和培养成熟的卵子，一般可以在溶液中完成受精作用。 12、早期胚胎培养的培养液称为培养液，成分是： 。受精卵在其中培养的目的是。 13、牛、羊等动物的胚胎需培养到阶段进行移植，人的体外受精胚胎可在阶段移植。 14、试管牛和克隆牛中，属于有性生殖的是，二者均用到的技术有：。
通用技术提纲
通用技术《技术与设计I》复习提纲 第一章走进技术世界 一、技术的价值： 1、技术与人的关系 ★技术的作用：（选择题）（考试形式：具体的案例分析技术对人的相应作用） 保护人：提供抵抗不良环境，防止被侵害的手段和工具。 解放人：解放或延长身体器官，拓展活动空间，提高劳动效率，增强各方面的能力。 发展人：技术促进人的精神和智力的发展，使得人的创新精神和批判能力得以提高，思维方式发生转变，自我价值得以体现。 2、技术与社会的关系（了解即可）（关键字是促进） 技术促进社会的发展。技术丰富社会文化内容。技术改变社会生活方式。是推动社会发展和文明进步的主要动力之一。 ★3、技术与自然的关系（选择题）（考试形式：根据某一项技术来判断对自然环境的影响） 1、人类利用技术和改造自然要有合理的尺度，要注意对自然的保护，不能忽视对自然的保护，不能忽视一些技术或产品对环境可能造成的负面影响。 2、技术的发展给自然环境带来了问题，但也给解决这些问题提供了可能。 “绿色”技术：主要包括绿色产品的生产技术以及清洁工艺等。 ★二、技术的性质（选择题）（常考点：综合性与两面性） 1、技术的目的性 技术总是从一定的目的出发，针对、具体的问题，形成解决方案，从而满足人们的某方面的需求 2、技术的创新性（关键字：改变、改进、革新、新型等） 技术创新常常表现为技术革新和技术发明。技术革新一般是在原有技术的基础上的变革和改进，技术发明则是一项新技术的产生。技术创新是一个艰难的历程。 ★3、技术的综合性（多种功能不是体现综合性） 技术活动往往需要综合运用多个学科、多方面的知识。 ★4、技术的两面性（某项新技术新产品价格高不是有害的一面） 技术既可以给人们带来福音，也可能给人们带来危害。 网络技术（方便人们交流沟通，但也有人利用网络犯罪）、 B超技术（可以用于医疗，但也有人进行胎儿鉴别）、 5、技术的专利性 技术作为创造性劳动成果，是技术发明人的智慧和劳动的结晶，它包含丰富的社会价值和经济价值。专利的特性：独占性、时间性、地域性? 专利申请步骤：（了解） 写好专利文件?递交专利文件并交纳申请费?专利局审查文件?批准专利?领取专利证书并缴纳年费及证书费。 三、技术的未来（了解） 对“技术的未来”的思考和憧憬，既不需要技术迷惘中的旷世悲怆，也不需要技术崇拜中肓目乐观。理性地看待技术，以负责、更有远见、有具道德的方式使用技术。 第二章技术世界中的设计 一、技术与设计的关系（解题技巧：题目先出现技术还是设计，先出现的影响后出现的） 1、技术的发展离不开设计（了解） 2、技术的更新对设计产生重要影响（理解） 3、设计的丰富内涵（了解）技术设计与艺术设计
肉牛养殖技术
科学养殖肉牛新技术 —山东飞扬牧业养殖基地 专业户在很多方面都不同于散养户，其中一个主要区别是，专业户的大部分收益来自专业化养殖，且生产规模较大，其养牛所需大部分生产要素需要外购，并且产出需要外销。因此，专业户在进行财务核算时需要把各项投入均按市场价值计价。人工成本是肉牛饲养的必要成本，无论是农户自家劳力还是雇佣劳力均应按市场原则计价。考虑到人工成本所占比例较大，且存在显着的机会成本效应，专业户很有可能是以“是否获得净利润”作为他们经营的“底线”。另外，专业户与市场关系更为密切，风险更大，也更直接受到来自技术创新及管理模式创新的影响。 从目前我市养殖业和人们生活的现实情况分析牛羊肉价格走高的原因：一是市民饮食结构调整。随着生活水平的提高，人们越来越注重对身体的保养，由于一些疾病的出现，使不少人不敢吃猪肉，而牛羊是草食动物，因此为绿色食品，更有利于人们身体健康。二是货源紧缺。从我市乃至全国来看，猪肉消费量逐年下降，牛羊肉的消费量逐年上升。而从农村实际来看，农民养猪的多，养牛羊的少，年轻力壮的农民多数都在外打工，唯有少数年老的人养殖且还是散养。 随着天气逐渐转凉，牛、羊肉都是冬令进补的食物，我市人们又非常喜好羊肉汤，因此牛、羊肉需求会进一步加剧，预计今后价格还会在高位运行，或许还会攀升。 就全国的情况看，牛羊养殖前景非常看好，牛羊是反刍动物，牛羊食草经过反刍、倒沫、促使体格健壮，得病概率低，因而要比养猪省事。此外，牛羊以食粗饲料为主，成本低。从我们国家的实际情况来看，粮食利用率高，而粮食作物的秸秆利用率较低，这也为发展养牛、养羊提供了方便条件。从目前我市养殖的情况看，现有的牛羊生产规模，连市场需求的三分之一也满足不了。从这个角度说，农户们可以放心发展牛羊养殖业。但是，传统的放牧、散养，有啥吃啥，长不长随它去，这样牛羊长肉慢，时间长，因而不仅产量有限，而且利润也低。因此，舍饲是养牛、养羊的发展方向。 这几年来，我国城镇居民对牛肉的消费持续增加，牛肉的社会消费比重不断提高，牛肉产品进口的增长明显快于出口，这说明我国牛业产业发展动力强劲，前景广阔。 由于肉牛养殖场科技人员的缺乏，一些最新技术不能在养殖场顺利推广，使肉牛养殖业中的科技贡献率处于较低水平。肉牛业作为技术性产业，如果不能及时将国内外最新的养殖、疫病防治、饲料加工调制等技术应用于生产实际，就不可能产生显著的经济效益。 集百家牛人之才，纳天下牛人之智。我们要学会高位运行养牛技术，将肉牛养殖与养牛成本规模化。分析我国牛业当前形势，深刻剖析中国牛业发展问题，推广典型地区养殖模式及成功经验。与会嘉宾的真知灼见对启迪牛业发展思路，形成行业发展建议，进一步提高产业的整体效益和市场竞争能力，推动中国牛业快速、健康、持续发展，提供了借鉴和参考。 建议各级部门：加大宣传农民对养牛羊的益处，引导农民推广舍饲喂养，引导农民选优质种牛种羊。