关于井下作业常见污染及对策分析

关于井下作业常见污染及对策分析

【摘要】井下作业是油气田勘探开发工作中非常重要的工作，井下作业施工是油田正常运转的关键技术保障，施工过程会对地面、地下造成一定程度的污染，井下作业过程中形成的污染对地面环境及生态环境都会产生直接或间接的负作用，近年来，各油田都通过创新井下作业工艺、加强现场监管、强化应急监管等手段，尽量减少地面污染物的排放，减少井下作业对环境的污染，减少油层的二次污染。本文简要介绍了井下作业施工时的常见污染，并给出了相应的对策。

【关键词】井下作业地层污染环境污染环境保护

环境污染是指由于对生态系统有害的物质进入环境后对生态系统造成的干扰和损害现象，具体来说就是，有害物质或有害因子进入环境并在环境中发生扩散、迁移、转化，并跟生态系统的诸要素发生相互作用，使生态系统的结构与功能发生改变，对人类以及其它生物的生发展产生不利影响。多年来，随着国家对环境保护要求的不断提高，人们的环境保护意识逐渐增强，辽河油田始终遵循科学发展理念，加强环境保护工作，得到了各级政府和公众的认可与肯定，并先后获得“辽宁省环境保护模范企业”、“辽宁环保五十佳企业”等10余项荣誉。尤其是高升采油厂，在施工的各个环节采取了降低污染措施，最大程度减少了污染的发生。

1 井下作业常见污染分析

井下作业产生的污染物类型主要有地面污染和地下油层污染。

地面污染有：井下原油、含油废水混合物、其他污染物。

（1）原油从井底落到地面形成地面油气污染的现象比较常见，其主要原因可以归结为两方面，一是人为操作引起，二是机械自身原因。例如，在提光杆、油管时，原油从高空中向井场洒落，导致油井附近地面受到落地原油的污染；试油时，机械长时间运行后，井口的防喷管堵头盘亘磨损，密封效果变差，不能很好的阻止原油喷发，导致防喷管中的原油喷出污染井场。油井大修时，需要起出光杆和油管，仅仅保留套管，油水混合物从井底自喷出来，对井场周围环境造成了污染。

（2）含油废水混合物污染：洗井、冲沙过程中，由于对井下机械设备需要清洗，这样就会有大量的废水混合物从井底流出，这些废水往往得不到有效控制，流淌至地面，形成废水污染。

（3）其他污染物：施工过程中涉及很多工艺，尤其是在酸化压裂过程中，会在井场形成具有环境破坏能力的残余酸液或压裂液等污染物，这些污染物会对地面水资源、土壤、动植物形成负面影响。

井下作业个人总结

篇一：井下作业年底技术工作总结 井下一公司修井30队 技术工作总结 总结人：胡新河技术工作总结 本人自2002年担任技术员工作以来，认真履行技术员的工作职责，在工作中认真负责，积极吸取好的工作方法，掌握井下新的施工工艺技术，充实自己的修井知识，提高自己解决问题的能力。在这一年来，在公司各级领导的正确领导下，本人能认真学习和履行着本岗位职责，工作认真负责，能够较好地完成组织交办的各项任务。我现将2006年度技术工作情况总结如下： 一、认真做好本队修井工作的日常管理 1.工作中严格要求自己的同时，督促和要求各施工班组，认真录取各项修井资料，严把工序施工质量关，杜绝无功作业，提高修井作业有效率。及时编写完工总结上报施工资料。通过近几年的工作，深刻认识到修井作业中质量工作得重要性。 2.针对员工修井技术知识薄弱的状况，有针对性的开展技术培训。结合本队工作的实际情况，重点培训员工的的实际操作能力，讲解安全防范知识和施工风险识别知识。满足了施工人员安全和技能操作的需要。采用每井一题、每周一课、每月一考的方式对职工进行技能教育；通过技术知识学习和岗位练兵，各职工的特别是外雇工的技术素质和实际操作技能有了很大提高。 3.在做好本职工作的同时，积极配合队长做好本队的安全、环保工作，及时收集施工作业的信息，合理安排调配人员及车辆的运作，确保修井作业连续进行。 二、认真编制施工工艺技术措施 对施工得措施井工程设计进行会审，明确施工井数据、任务、目的及施工中可能存在的危险因素，针对井况及作业任务确定相应的工艺技术及安全方案。如高压井、高油气井、高风险等井，都要制定与井况相配套的防喷、防毒等技术及安全方案。特别是对复杂井（如套破井、砂卡井、管外串井、报废井等），除认真做好措施会审外，并现场指挥和监督，做到精心组织、精细施工，圆满完成了施工作业： 三、努力学习各种技术及管理知识，认真做好本职工作 针对今年石西队在年初的井下招标中开双机进行生产作业，作为我负责全面的技术工作，在工作认真完成上级领导和队长安排的工作，遇到复杂、新工艺井的施工作业，到现场组织施工、协调，都严格按工艺标准实施，严格要求资料的收集工作并对资料员的工作进行培训及教育工作，严把质量关，严格执行四大体系运行工作，努力提高运行质量，针对安全、井控、质量的培训及监督检查工作。配合队长作好施工现场的各项工作的同时，努力提高自身的专业水平。本人充分利用业余时间学习各项复杂井工艺设计，修井工程，抓紧时间学习专业业务知识同时学习计算机知识，使自己的专业技术水平有所提高。在今年努力完成qc论文编写工作和技术论文的撰写工作。在不断的学习和锻炼中，努力使自己的技术理论水平、技术问题处理能力、管理能力都得到较快的提高。 四、疑难复杂井的工艺技术 石西作业区属于新开发的区块，该区块井深井况比较复杂，各项工艺的井都有，上修前对该井的井史认真收集，对各项工艺参照各项技术标准，认真编写施工设计，施工中严格要求自己现场组织进行各项工艺的施工作业。比如： 1、今年所施工的sh3058井（补孔改层）：由于该井同层位的sh3067井改层后出油效果良好。作业区进行试探的开采该层位并对该层位进行二次固井。该井工序：压井,提抽油杆,解卡打捞,提泵,通井,洗井,下桥塞,电侧,射孔,挤化学剂,下结构,试压,验串,挤灰注灰,提结构,钻塞,试压，探井底,地面清蜡,排液,替液诱喷,完井.施工日期从4.22-5.6日完井，该井施工前，

细胞常见问题

1.血清中可能出现的沉淀物是什么？ 基于多年的实验研究，用于细胞培养的胎牛血清以及其它血清中可能会存在以下种类的沉淀物：：（1）纤维蛋白，它是经常出现的较大的沉淀物，可以达到1-2mm，可以用肉眼观察到。因为血清都是在低温下进行收集和快速处理的，一些纤维蛋白原（可溶性的形成絮状纤维蛋白的前体）在处理过程中仍然处于溶解状态，当经过最后的过滤分装后，就会在瓶中凝结出现纤维蛋白沉淀。（2）磷酸钙，它也是常见的一种沉淀物，通常会使血清出现浑浊，并且在37℃培养的时候会增加。这种沉淀物在倒置显微镜下观察像小黑点，这些小黑点由于布朗运动看上去可以活动，因此经常被误认为是微生物污染。（3）胆固醇、脂肪酸酯以及一些蛋白质。他们也是血清中出现沉淀物的常见原因。 2.血清中的沉淀物对细胞培养有什么影响？ （1）细胞生长，我们的试验以及经验表明沉淀物不会影响细胞培养，我们的客户以及其它血清生产商也证明了这一点。（2）过滤，如果血清中出现大量的沉淀物，血清将很难过滤。一般说来，因为在血清生产时最后已经经过100nm或者40nm的过滤处理，并且经过了严格的无菌检测，因此不推荐再过滤用于细胞培养的血清。在实验室中没有必要再过滤处理血清，在大规模的细胞培养中往往将血清直接加到培养基中一起过滤。（3）污染，磷酸钙往往被误认为微生物污染而引起争端。研究者可能会在血清中观察到一些絮状的沉淀，因此就会比较警觉的去做无菌试验，将血清放在培养箱中培养几天，结果可能会观察到更多的絮状沉淀，因此就断定血清被污染了。并且当研究者将血清样品放在倒置显微镜下观察时往往可以看到一些可以运动的小黑点，因此就更加确认是血清被污染了。于是，研究者就会花费更多的时间和精力来和生产商确认，但最终确定血清没有被污染而只是沉淀。为了避免这些问题的发生，我们建议不要直接将血清放在培养箱中培养观察是否有菌，而是将血清加到琼脂板上进行培养以观察是否有细菌生长。另外，也可以进行革兰氏染色，在油镜下观察，以确认是否有污染。 3.如何避免血清中沉淀物的出现？ 首先要注意正确的血清解冻步骤，而且溶解过程中一定要每隔一段时间均匀而缓慢的摇动血清。我们已经发现在下列情况下沉淀物可能增加，使用中应该尽量避免：（1）热灭活血清；（2）在37℃下培养血清；（3）反复冻融；（4）γ射线照射；（5）长期储存在2-8℃；（6）在室温下放置时间过长 4.如何去除血清中的沉淀？ 如想去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装到无菌离心管中，以400g离心，上清液即可直接加入到培养基内一起过滤。注意：不要以过滤的方式去除这些絮状沉淀物，因为这可能阻塞滤膜。 5.冷冻管应如何解冻？ 取出冷冻管后，须立即放入37°C水槽中快速解冻，轻摇冷冻管使其在1分钟内全部融化，并注意水面不可超过冷冻管盖沿，否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时，必须注意安全，预防冷冻管之爆裂。 6.细胞冷冻管解冻培养时，是否应马上去除DMSO？ 除少数特别注明对DMSO敏感之细胞外，绝大部分细胞株（包括悬浮性细胞），在解冻之后，应直接放入含有10-15ml新鲜培养基之培养角瓶中，待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO即可，如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 7.一般客户拿到细胞后，应该注意什么？

井下作业部分岗位风险评估——硫化氢泄漏事故。

安全管理编号：LX-FS-A62111 井下作业部分岗位风险评估—— 硫化氢泄漏事故。 In the daily work environment, plan the important work to be done in the future, and require the personnel to jointly abide by the corresponding procedures and code of conduct, so that the overall behavior or activity reaches the specified standard 编写：_________________________ 审批：_________________________ 时间：________年_____月_____日 A4打印/ 新修订/ 完整/ 内容可编辑

井下作业部分岗位风险评估——硫 化氢泄漏事故。 使用说明：本安全管理资料适用于日常工作环境中对安全相关工作进行具有统筹性，导向性的规划，并要求相关人员共同遵守对应的办事规程与行动准则，使整体行为或活动达到或超越规定的标准。资料内容可按真实状况进行条款调整，套用时请仔细阅读。 1．风险预想：硫化氢泄漏事故。 2．风险危害： （1）人员伤亡； （2）污染环境； （3）设施损坏。 3．原因分析： （1）监测仪器失灵，硫化氢从井口溢出检测不准确硫化氢浓度，导致人员中毒和污染环境； （2）监测到硫化氢浓度超标，施工人员未及时撤离到安全区；

（3）监测人员在下风头，未戴防毒用品，导致监测人员发生硫化氢中毒； （4）计量出液量时，计量人员未戴防毒用品，导致计量人员硫化氢中毒； （5）施工时井场布置不合理，值班房摆在下风头，导致在值班房的人员硫化氢中毒； （6）施工所用井口管材不防硫，造成硫化氢对井口和管材损坏。 4．预防措施： （1）监测仪器完好，监测人员在下风头监测必须戴防毒用品，施工时随时监测硫化氢浓度，发现硫化气浓度超标，即时报警，施工人员迅速撤离到安全区； （2）对含有硫化氢作业井计量出液量时，计量人员必须戴防毒用品；

细胞常见污染情况与分析

细胞培养常见污染的判别及应对措施 2011-01-02 10:19:04| 分类：实验| 标签：污染无菌细胞培养基灭菌|字号大中小订阅 一、避免细胞培养污染的措施： 污染是细胞培养中一个大敌，一旦污染，前功尽弃！决定要进行细胞培养，首先一定要有强烈的无菌意识！操作中要遵守严格的操作规程，不要怕麻烦，越细心越好！注意以下几点，大部份的污染是可以避免的： 1. 每次开始实验前，先用紫外照无菌台和实验室20分，用酒精擦手，台面和不消毒的器械（如移液枪等）；实验中，如允许，尽量多过火，开起或盖盖都靠近火焰或在无菌台深处；使用无菌台后，再用酒精擦台面，紫外照20分！ 2. 滴管不要接触瓶口，吸取废液及加入新鲜培养基时都要注意不要滴在瓶口上等等。 3. 凡是接触瓶口后都要用酒精灯烧烧。 4. 提取组织时，往往头会距离组织很近，所以带口罩很重要！还要换无菌衣（紫外照过的白大褂）。 5. 注意配制完全培养基时不要发生污染，在使用前一定要做无菌培养，因为一般应用污染后的培养基培养细胞后，很快就会发生特别严重的污染。 6. 操作时一定按照实验室的要求，切忌粗心大意。 7. 使用完的东西尽快移出无菌台！另外无菌台上的器械，试剂摆放，也尽量遵循一定的顺序！依污染可能程度依次向外摆。 二、常见的细胞培养污染： 下面是几种细胞培养过程中常见的污染： 1. 支原体污染： 传说中的黑焦虫，长得暴快。24小时就满视野都是了。污染源大多数情况下是培养用血清。

图1 支原体污染的光镜检测（圆圈所示，×10倍） 图2 支原体污染的光镜检测（×20倍）

图3 支原体污染的荧光检测

图4 支原体污染的电镜检测（×30k，煎蛋状和其他形状）

井下作业部分岗位风险评估——洗(压)井时的伤人、火灾和污染事故参考文本

井下作业部分岗位风险评估——洗（压）井时的伤人、火灾和污染事故参考 In The Actual Work Production Management, In Order To Ensure The Smooth Progress Of The Process, And Consider The Relationship Between Each Link, The Specific Requirements Of Each Link To Achieve Risk Control And Planning 某某管理中心 XX年XX月

井下作业部分岗位风险评估——洗（压）井时的伤人、火灾和污染事故参 考文本 使用指引：此安全管理资料应用在实际工作生产管理中为了保障过程顺利推进，同时考虑各个环节之间的关系，每个环节实现的具体要求而进行的风险控制与规划，并将危害降低到最小，文档经过下载可进行自定义修改，请根据实际需求进行调整与使用。 1．风险预想：洗（压）井时的伤人、火灾和污染事 故。 2．风险危害： （1）人身伤害； （2）污染事故； （3）火灾事故。 3．原因分析： （1）由壬对接不紧固，刺漏造成污染； （2）出口未按制，井内压力突然升高，刺坏流程， 造成污染；

（3）进出口用水龙带，水龙带跳动造成污染或砸伤人员； （4）洗（压）井管线堵，造成压力升高，管线崩开造成人身伤害和污染环境； （5）洗（压）井开（关）闸门时，操作人员站在闸门对面，闸门丝杠飞出伤人； （6）在施工的高压区，压力升高，管线崩开伤人； （7）洗井时，出口和值班房在同一方向上，天然气喷出，造成人身伤亡和火灾事故。 4．预防措施： （1）各由壬完好，且要砸紧； （2）洗井时出口控制，出口压力不能超过流程设计最高可承受的压力； （3）进出口管线严禁用水龙带； （4）洗（压）井时，必须检查管线，保证管线畅

关于细胞培养中的污染

细胞培养中常见的污染情况总结如下:常见的污染如下： 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形， 培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理 2、霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现 絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D 或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作 3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清 很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。 4、黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色 的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。 5、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是 它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 6、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽 然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终

井下作业典型事故案例分析(二)

井下作业典型事故案例分析（二） 二OO七年一月

目录 一、××井挤水泥固油管事故 二、××井套铣筒卡钻事故 三、××井试井钢丝及油管落井事故 四、××井深井泵衬套落井事故 五、××井铅模卡钻事故 六、××井管串喷出地面事故 七、××井铣锥除垢卡钻事故 八、维修检泵井返工案例剖析 ××井活塞通不过封隔器检泵返工案例 ××井管式泵倒下返工案例 ××井油管漏失返工案例 ××井抽油杆被磁化返工案例 九、作业现场着火案例剖析 案例一：××井静电引起着火案例 案例二：××井清蜡剂着火案例

一、某井挤水泥固油管事故 某井为光油管挤水泥钻具，作业队按设计要求替完水泥浆后即开始挤，最高压力达25MPa，挤完后上提管串欲反洗井就已卡死，此时，从配水泥浆起时未超过水泥浆的初凝时间（初凝时间为1小时25分，作业用的水和水泥均合格）。 <一>、原因分析 高压下挤水泥会缩短水泥初凝时间，泵压25MPa加液柱压力16MPa，则作用于井底的压力为41MPa之多，再加温度高，水质变化，水泥浆初凝时间缩短一半多。 附：压力变化对水泥初凝时间的影响表。 压力变化对水泥初凝时间的影响表 此外，打水泥固死油管的事故原因有五： 一是整个作业过程因设备或生产组织不当致使作业时间超过水泥浆的初凝时间； 二是井下管串因故脱落造成落井油管固死； 三是套管破损光油管挤水泥时水泥浆上返进入破漏段； 四是带上封挤水泥时因管外串通或下带直嘴孔径过大，故嘴损压力小致使封隔器座封不严导致水泥浆上串到封隔器以上； 五是油管本身有破裂之处造成液体分流加之油管未起出水泥浆外。

本井属第六种原因，既当地面加压25MPa时，井底压力相当于41MPa，故水泥浆初凝时间缩短55%左右，加之井下管串未提出水泥面，故而造成水泥固死油管的事故。 <二>、预防措施 预防此类事故的发生： 1、参考在施工井的温度和施工压力条件下水泥浆的初凝、终凝时间数据； 2、要保证施工用设备完好运转； 3、要做好施工准备、反洗井前的施工时间不得超过水泥浆初凝时间的70%； 4、在反洗井前及时上提井下管串至预计水泥面以上； 5、要在下钻过程中随时观察指重表并要在挤水泥施工前试提井下管串校核、对比悬重； 6、要在光油管挤封井上先套管找漏证实套管完好程度，防止水泥浆上移而固死油管； 7、在单上封的井施工要保证封隔器座封完好； 8、在多层井挤水泥前要有验串资料； 9、下入井的油管要完好无损

细胞培养中常见的污染的处理

细胞培养中常见的污染情况总结如下: 常见的污染如下： 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液 一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养 液是否存在浑浊的现象！ 可在培养液中加相应的抗生素处理 2、霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的 消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期 清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。 其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。 预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就 要注意操作 3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体 感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。 用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用 8ug/ml的浓度。 4、黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。 5、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 6、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。

细胞培养中常见的问题

细胞培养中常见的问题 2006-11-23 15:53 细胞中的颗粒到底是怎么回事？ 我的细胞总有颗粒，开始是细胞中有，后来细胞之间也好像有许多颗粒。好像是细胞碎片一样。是什么东西啊？是支原体污染吗？这可是我刚买回来的细胞啊! 我们实验室也有这种情况，是不是黑的小碎片，有人说是细胞代谢产物，后来拿到高倍镜下看还会动，就怀疑是污染了，也想问问大家到底是什么 是黑色的小碎片。我没注意到它会动，只是觉得不像是活的微生物。我觉得是由于某种污染或外界因素导致的细胞状态变差，裂解出的东西。但是，是什么东西不清楚。 的确很常见 在以前帖子见到说是“黑焦虫”。长时间培养的很容易出现，我根据自己的经验估计是一种污染，因为随着黑点增多，本来生长旺盛的细胞逐渐停滞甚至死亡。而且我后来原代培养的几批细胞并没有发现，我怀疑有好多细胞系本身就是污染的。不过增加换液次数的情况下，好象一般不太娇气的细胞生长不是很受影响。 以前听很有经验的老师说黑焦虫是国产血清的问题，可以有条件换进口血清试试，或者离心一下也可能能解决问题。那么所谓的“黑焦虫”到底是什么东西啊？有谁知道？ 我培养的细胞也出现过此中问题，放到高倍镜下看时有东西在动，但培养液不混浊，估计不是细菌污染，可能是血清问题，是支原体污染。 我培养的细胞也出现过这样的问题，我个人认为是一种支原体污染。国产血清是罪魁祸首，因为只要将细胞饥饿一下，不超过24小时，这种东西就会疯长 我培养的细胞也有出现这中情况。但是并不影响细胞生长。应该不是支原体污染 最近，我复苏细胞细胞的时候也发现过这样的东西，尽管我用的是GIBCO的FBS，后来，每天换液之前洗几遍后，就慢慢变少，现在没了 细胞培养的细菌污染 我们新建的细胞室。每周都会做清洁，用0。2%新洁尔灭消毒，照紫外。实验前也会照至少30分钟。培养基中加青霉素，链霉素。可是培养细胞时还是常有细菌污染，有时甚至分析不出原因。用培养瓶还好一点，用多孔板或平皿就更凄惨。我养的是哺乳动物细胞，不知各位有什么好的方法避免污染！谢谢！ 很可能是超净台无效了，，或者培养基？其实严格操作箱污染都难 我们是新的超净台，不可能失效。而且用同一瓶培养基，一瓶传两瓶，原始的一

细胞培养中常见的污染

细胞培养中常见的污染情况总结如下: 1、细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理 2、霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差， 用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。 其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。 预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作 3、支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。 用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。 4、黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。 5、真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 6、原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所

井下作业部分岗位风险评估——打捞时造成的伤人事故正式版

Through the reasonable organization of the production process, effective use of production resources to carry out production activities, to achieve the desired goal. 井下作业部分岗位风险评估——打捞时造成的伤人 事故正式版

井下作业部分岗位风险评估——打捞时造成的伤人事故正式版 下载提示：此安全管理资料适用于生产计划、生产组织以及生产控制环境中，通过合理组织生产过程，有效利用生产资源，经济合理地进行生产活动，以达到预期的生产目标和实现管理工作结果的把控。文档可以直接使用，也可根据实际需要修订后使用。 1．风险预想：打捞时造成的伤人事 故。 2．风险危害： （1）人身伤害； （2）设备损坏。 3．原因分析： （1）冲洗打捞时，加压过大，使水 泥车憋压，造成水龙带蹩坏； （2）打捞时，不听从指挥，盲目上 提，造成人员受伤及设备损坏； （3）拉力计失灵，解卡时不能准确 掌握上提负荷，造成设备损坏或人员伤

亡； （4）解卡时，地锚、绷绳、死绳、绳卡、大绳未检查，上提解卡时，造成设备损坏或人员伤亡。 4．预防措施： （1）打捞时，加压负荷不超过 30kN，防止憋泵； （2）打捞时，必须有专人指挥； （3）拉计力必须完好，灵活好用； （4）打捞解卡前，对地锚、绷绳、死绳、绳卡、大绳进行检查加固，确保完好； （5）超负荷拔钻时，严格执行公司制定的《拔钻权限规定》。 5．综合评估：

（1）人员高 （2）财产低 （3）环境中 （4）影响高 6．应急措施： （1）人员受伤，立刻送医院抢救； （2）设备损坏及时报生产办进行抢修。 ——此位置可填写公司或团队名字——

井下作业年底技术工作总结

井下一公司修井30 队技术工作总结 总结人：

技术工作总结 本人自20XX年担任技术员工作以来，认真履行技术员的工作职 责，在工作中认真负责，积极吸取好的工作方法，掌握井下新的施工工艺技术，充实自己的修井知识，提高自己解决问题的能力。在这一年来，在公司各级领导的正确领导下，本人能认真学习和履行着本岗位职责，工作认真负责，能够较好地完成组织交办的各项任务。我现将20XX年度技术工作情况总结如下： 认真做好本队修井工作的日常管理 1.工作中严格要求自己的同时，督促和要求各施工班组，认真录取各项修井资料，严把工序施工质量关，杜绝无功作业，提高修井作业有效率。及时编写完工总结上报施工资料。通过近几年的工作，深刻认识到修井作业中质量工作得重要性。 2.针对员工修井技术知识薄弱的状况，有针对性的开展技术培训。结合本队工作的实际情况，重点培训员工的的实际操作能力，讲解安全防范知识和施工风险识别知识。满足了施工人员安全和技能操作的需要。采用每井一题、每周一课、每月一考的方式对职工进行技能教育；通过技术知识学习和岗位练兵，各职工的特别是外雇工的技术素质和实际操作技能有了很大提高。 3. 在做好本职工作的同时，积极配合队长做好本队的安全、工 环保作，及时收集施工作业的信息，合理安排调配人员及车辆的运作，确保 修井作业连续进行。 、认真编制施工工艺技术措施 对施工得措施井工程设计进行会审，明确施工井数据、任务、目的及施工中可能存在的危险因素，针对井况及作业任务确定相应的工艺技术及安全方案。如高压井、高油气井、高风险等井，都要制定与井况相配套的防喷、防毒等技术及安全方案。特别是对复杂井（如套破井、砂卡井、管外串井、报废井等），除认真做好措施会审外，并现场指挥和监督，做到精心组织、精细施工，圆满完成了施工作业：三、努力学习各种技术及管理知识，认真做好本职工作 针对今年石西队在年初的井下招标中开双机进行生产作业，作为我负责全面的技术工作，在工作认真完成上级领导和队长安排的工作，遇到复杂、新工艺井的施工作业，到现场组织施工、协调，都严格按工艺标准实施，严

细胞污染原因和处理

养成良好的无菌操作的习惯拿70％酒精擦手，擦超净台，擦培养瓶，擦培养基瓶，各种瓶子的口多拿火焰烧灼。就不再会发生细菌污染。 决定要进行细胞培养，首先一定要有强烈的无菌意识！操作中要求自己遵守严格的操作规程，不要怕麻烦，越细心越好，越“罗嗦”越好！ 我发现在提取需要组织时，往往头会距离组织很近，所以带口罩很重要！还要换无菌衣（紫外照过的白大褂） 另外，每次开始实验前，先用紫外照无菌台和实验室20分，用酒精擦手，台面，不消毒的器械（如移液枪，冰块等）；实验中，如允许，尽量多过火，开起或盖盖都靠近火焰或在无菌台深处进行；使用无菌台后，再用酒精擦全台面，紫外照20分！ 还有，做到绝对无菌，那不可能！但我们可以做到最大限度的减少含菌量！ 使用完的东西尽快移出无菌台！另外无菌台上的器械，试剂摆放，也尽量遵循一定的顺序！依污染可能程度依次向外摆。 1.滴管不要接触瓶口，吸取废液及加入新鲜培养基时都要注意不要滴在瓶口上 等等。 2.凡是接触瓶口后都要用酒精灯烧烧。 3.初学者一般可以用培养瓶养细胞，个人认为瓶污染的机率要比皿小。 4.注意配制完全培养基时不要发生污染，在使用前一定要做无菌培养，因为 一般应用污染后的培养基培养细胞后，很快就会发生特别严重的污染。 2. 1.注意喷酒精装置的应用：制作很简单，用过的化妆品，理发店理发前往头 发上喷水的瓶子及其他一些有喷水功能的瓶子，经过处理装上百分之75的酒精就可以了（我不知道有没有实验专用喷洒酒精的瓶子，如果有那就更好了）。我用的是师姐留下来的一种护肤品的瓶子。常常往超净台台面，手上喷洒酒精，效果很好。 2。我进入细胞培养室就戴上PE手套（一次性塑料薄膜手套），当在超净台操作时戴上一次性橡胶手套。 3。培养箱内水盘里的水，用灭菌的超净水，每周更换一次（至少也要两周换一次）。换水前要用百分之75酒精消毒。水浴箱也要定期消毒（用百分之75酒精）换双蒸水。 4。从培养箱内取东西前手一定要喷酒精，动作要快，可以先看好了，要取的东西在那里，然后快取。显微镜下观看细胞时间也不要过久，否则会对细胞有不利影响。 5。很多人喜欢常规用抗生素，其实除于特殊筛选系统中外，一般正常培养状态下，培养基中不应添加任何抗生素。当在无血清培养基中添加抗生素时，降低至少在有血清培养基中所使用浓度的50%。血清蛋白会结合和灭活一些抗生素。在无血清培养条件下，抗生素不被灭活，可能对于细胞达到毒性水平。 6。液体培养基贮存于4℃冰箱，实验进行前放在37℃水槽中温热。温热前后注意酒精消毒。

井下作业典型事故案例分析报告(一)

实用文档 井下作业典型事故案例分析（一） 二OO七年一月

目录 一、××井分求管串卡钻事故 二、××井油管落井事故 三、××井钻杆落井事故 四、××井通井规卡钻事故 五、××井测井电缆卡钻事故 六、××井分注管串错下事故 七、××井压裂卡钻事故 八、××井解除抽子卡油管落井事故 九、××井油管爆炸事故

前言 在历年的井下作业中，或多或少出现过不同类型的质量事故，给单位整体效益带来了不同程度的影响。为了预防类似的事故再次发生，有必要剖析作业过程中发生的事故原因，总结出相应的防范措施。 本《案例》搜集整理了近三十年来在井下作业过程中所发生的典型井下作业工程质量事故实例，通过对这些实例的原因分析，提出了相应的防范措施。对今后在井下作业过程中减少或杜绝类似事故的发生、提高我处井下作业的竟争力具有一定的指导意义。 案例体现了三个特点，一是紧密结合井下作业生产实际，总结了井下作业工程质量事故教训及防范措施；二是每个事例都具有独立性、代表性；三是对今后井下作业过程中防范类似事故的发生具有一定的可鉴性。

一、××井分求管串卡钻事故 <一>静态资料 完井日期：2003年9月27日、人工井底:1926.10m、套补距:2.5m、套管外径:Φ139.7mm、内径:Φ124.26mm、套管深度1939.90m、水泥返高22.0m。压裂层位长4+5，油层段：1818—1824.8m 1824.8—1829.9m ，射孔段：1821.0—1825.0m，采用SYD-102-127弹射孔，孔密32孔/米。 ××井分求管串遇卡前后示意图 分求示意图遇卡后示意图

<二>事故过程 分求管串卡钻 2003年11月26日压裂长61层后下入分求钻具，结构为母堵+油管1根+Y211-114轨封1个+变径接头＋ф62mm花管1个+油管191根至井口。母堵深度1840.64m，轨封1830.86m，花管深1829.10m。抽汲过程中发现液面突然降低，直至无液面，2003年11月28日，活动管串，起出油管12根，上提第13根管串遇卡，活动解卡，负荷200-250-300-350-400-450KN未解卡，采用水泥车正、反循环洗井均未畅通，泵压范围18-25MPa。后经倒扣、套铣等方法处理，打捞完发现花管中有抽汲抽子1个和1个抽子上接头。 <三>事故原因分析： 1、当解封后下层液体随着压力的释放会携带地层吐出的砂很快随井筒上升，并上升至封隔器以上，随着起钻具工作的进行，砂子又会逐渐下沉聚集，当聚集到一定量时环空砂粒沉积于封隔器上部导致卡钻。 2、抽汲过程中对抽子未勤检查，长时间使用造成抽子本体脱扣而落井。 3、解卡时正反洗井均不畅通且泵压高，原因是花管内落有抽汲抽子及上接头。 4、压裂后裂缝未完全闭合，反洗井起到诱喷作用使地层吐砂。 <四>预防措施： 1、对于分求钻具，为防止井筒中砂子上返，可在起钻具前，即解封以前，向油管内及环空中灌注活性水至井口，用以平衡地层压力，达到防止砂子上返造成卡钻事故的发生； 2、分层求产时（求上层），轨封位置尽量靠近射孔段下沿，使轨封上面减少沉砂口袋。 3、抽完，进行反洗井工序。 4、上起抽汲钻时应该慢提。 二、××井油管落井事故 <一>油井静态资料 完井日期：2003年11月22日、井深:1989.0m、人工井底:1964.0m、水泥返高:246.9m、套管内径:Φ124.26mm、套管下深:1985.93m、套补距:2.80m，最大井斜:19.0度，层位：延9，

细胞中常见的污染

一、常见的污染如下： 1. 细菌：细菌在普通倒置显微镜下为黑色细沙状，根据感染细菌的不同，可有不同的外形，培养液一般会浑浊变黄，对细胞生长影响明显。 仔细检查一下器皿的灭菌情况，是否在高压灭菌时放气时间足够，压力足够！尤其是和储存培养液接触的移液管等物品，连续两次污染的话有可能造成储存液污染，一定要注意！下次使用前检查一下培养液是否存在浑浊的现象！可在培养液中加相应的抗生素处理。 2. 霉菌：培养液是清亮的，倒置显微镜下无杂质，37度孵箱培养2-3天，仍清亮，但出现絮状杂质，镜下可见呈细丝状的团状漂浮物，可看到明显的菌丝，细胞仍可生长，但时间长之后，细胞的活力状态变差，用硫酸铜溶液擦拭CO2孵箱内，再把水盘里也加上饱和量的硫酸铜。或者在培养箱的托盘加入饱和的消毒磷酸氢二钠高盐液体,可以防止霉菌污染。 CO2孵箱被霉菌污染后，可把所有细胞暂时转移，采用过氧乙酸擦洗孵箱（包括隔板，箱壁）。并把过氧乙酸放置在孵箱内一个小时，使其蒸汽弥漫。待过氧乙酸的气味消散后，再移入细胞。孵箱应定期清洁（2月左右），尤其在多雨的季节。其它培养箱清洗方法是：用84液擦洗－清水擦洗－75%酒精擦洗－紫外灯照。预防霉菌污染，可在培养基里加3u/ml的两性霉素或制霉菌素或放线菌素D或双抗；但细胞一旦污染，很难挽救，制霉菌素或放线菌素D或双抗都于事无补，建议舍弃该污染细胞。，将环境彻底消毒，如果所有细胞都污染，可能是系统污染，检查一下培养基和器材，如果只是个别污染，可能是操作问题，就要注意操作。 3. 支原体：黑色的，好象多为多形，培养液一般会浑浊，原体感染，国内血清很多都没有做支原体阴性检测，而支原体是牛血清中最常见的微生物之一。而且它不能用过滤的办法除去。支原体感染细胞以后，细胞病变不很明显，只是慢慢死去。 用泰乐菌素，兽用支原体病的药，但可用于细胞培养，无任何不良反应。Sigma 公司的使用时用50ug/ml Tylosin培养液培养6天或连续传两代即可清除支原体污染。如果作为常用的抗生素的话, 建议用8ug/ml的浓度。 4. 黑蛟虫：可以穿透滤膜，也可以通过空气传播，低倍下为黑色点状，高倍下可看见黑色的小虫游来游去，培养液也是不浑的，一般不会太影响，细胞还是可以用的。常常是细胞生长状态良好，且观测到的运动物无明显增多，且培养液颜色、透明度无明显变化，可在同一批号的血清养的细胞中发现类似现象。对细胞生长状态不会有明显影响，在细胞增殖旺盛之后会自然消失，除更换血清外无须特殊处理。建议如果细胞有可能是此种污染的话，可以增加细胞的种板密度，以提高细胞的生存率。 5. 真菌：一般培养液清亮，不变色，镜下有丝状物，有些真菌开始很像死细胞碎片，只是它很多很多的小块很清楚，象珊瑚状，不象细胞碎片分不清，慢慢的会长出很细的黑色丝状物。真菌生长的比较慢，不象细菌那么容易被发现，但是一旦发现有它的存在细胞就被污染了，也很难救活了。 6. 原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。 污染的可能原因：可能原因很多。比如配液消毒问题、操作问题、环境问题等等。

井下作业事故案例分析一

井下作业事故案例分析一 一、修井原因 某井在小修作业时，提完抽油杆，上提原井泵管时卡，大力解卡60×9.8KN，未开，倒扣，提出油管，现上大修，打捞解卡，捞出井内遇卡管柱，井内鱼顶为φ114.3mm油管接箍，鱼顶深1147.14m，套管为φ177.8mm，TBS防砂管悬挂器位置为1694.0m。 二、修井简况 （一）在摸清鱼顶情况后，下φ102滑块捞予进行打捞，打捞深度为1147.14m捞获，活动解卡70吨，断、提钻具捞出φ114.3mm平式油管59根，本体断，下φ114—138母锥至1668.16m，造扣打捞未获。 （二）经分析、怀疑套管变形，下φ152mm铅模至1668.16m 处打印，提出铅模进行核实铅模最小外径为137mm，最大外径152mm。 （三）下φ135套管整形器至1668.16m，爆炸整形3次，下φ154×1.50m通井规，通井至1669.81m，下φ152mm铅模打印深1670.55m，提出铅模进行核实，铅模最小外径为140mm，最大外径152mm，下套管整形器至1669.81m处进行爆炸整形2次，下φ154×1.50m通井规，通井至1674.95m。下φ152mm铅模至1674.95m处打印，印痕为不规则管的印痕。经分析，确定为φ114.3mm，平式管本体。

（四）经研究分析，这次卡管原因为套管变形，不是砂卡，下φ102×1.5m双滑块捞予至1674.95m，捞获、捞出φ114.3mm 平式管半根+φ57泵+488.9mm油管1根+488.9mm油管接箍，将井内全部落鱼、捞出，下φ154mm×1.50m通井规、通井至1694.0m。 三、修井效果原因分析及下步措施建议 （一）本次大修按施工要求，捞出井内全部被卡管柱，并对套管进行整形，成功完成大修作业。 （二）通过对本次大修总结发现，要顺利完成大修作业，主要有以下几点： 1．首先摸清鱼顶情况及鱼顶在井内的状态，不能盲目下打捞工具； 2．对井内管柱结构及数据必须清楚，如下母锥进行造扣打捞时，提前遇阻，怀疑为套管变形，进行打印，证实为套管变形，减少施工同期及作业成本。 3．摸清井的地质情况，发现此井不出砂，再根据管柱数据的核实，证实此管柱不能出现砂卡现象，最后下双滑块捞予，进行直接打捞，捞出井内全部落鱼，成功完成大修任务。