实验一邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的、掌握邻二氮菲分光

实验一邻二氮菲分光光度法测定铁

一、实验目的

1、掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法；

2、熟悉吸收曲线绘制及最大吸收波长选择；

3、学会标准曲线绘制及应用。

4、了解721型分光光度计的主要构造，并掌握其使用方法。

二、实验原理

邻二氮菲(phen)和Fe2+在pH3～9的溶液中，生成一种稳定的橙红色络合物Fe(phen) 32+，其lgK=21.3，κ

508

=1.1 × 104L·mol-1·cm-1，铁含量在0.1～6μg·mL-1范围内遵守比尔定律。其吸收曲线如下图所示。显色前需用盐酸羟胺或抗坏血酸将Fe3+全部还原为Fe2+，然后再加入邻二氮菲，并调节溶液酸度至适宜的显色酸度范围。有关反应如下：

2Fe3+ + 2NH

2OH·HC1＝2Fe2+ + N

2

↑+ 2H

2

O + 4H+ + 2C1－

图1-1 邻二氮菲一铁(Ⅱ)的吸收曲线

用分光光度法测定物质的含量，一般采用标准曲线法，即配制一系列浓度的标准溶液，在实验条件下依次测量各标准溶液的吸光度(A)，以溶液的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。在同样实验条件下，测定待测溶

液的吸光度，根据测得吸光度值从标准曲线上查出相应的浓度值，即可计算试样中被测物质的质量浓度。

三、仪器和试剂

1、仪器：721型分光光度计，50mL容量瓶，10mL吸量管，滴定管，洗瓶。

2、试剂：(1) 100ug·mL-1铁标准溶液；

(2) 1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液；

(3) 100g·L-盐酸羟胺水溶液（新配）；

(4) 1.5g·L-1邻二氮菲水溶液；

(5) 1.0mol·L-1乙酸钠溶液；

(6) 0.1mol·L-1氢氧化钠溶液。

四、实验步骤

1、显色标准溶液的配制

取6只 50 mL 容量瓶，并且对其编号(1-6号)。用吸量管依次加入

0,0.20,0.40,0.60,0.80,1.0 mL 100ug·mL-1铁标准溶液，分别加入1 mL 100g· L-盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各加入5 mL 1.0mol·L-1乙酸钠溶液和2mL

1.5g·L-1邻二氮菲水溶液，以水稀释至刻度，摇匀。

2、吸收曲线的绘制

在分光光度计上，用 lcm 吸收池，以试剂空的溶液(1号)为参比，在440-560 nm 之间，每隔 10 nm 测定一次待测溶液(5号)的吸光度A，以波长为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制吸收曲线，从而选择测定铁的最大吸收波长。

3、显色剂用量的确定

取 7 只 50 mL 容量瓶，并且对其编号(1-7号)。各加入2 mL1.0×10-3mol·L-1铁标准溶液和1 mL100g·L-盐酸羟胺水溶液，摇匀后放置2 min，分别加入

0.20,0.40,0.60,0.80,1.0，2.0,4.0 mL1.5g·L-1邻二氮菲水溶液，再各加入5 mL

1.0mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在分光光度计上，用 l cm 吸收池，在选定波长下，以水为参比溶液，测定以上七个溶液的吸光度。以显色剂邻二氮菲的体积 (mL) 为横座标，相应的吸光度为纵座标，绘制吸光度-显色剂用量曲线，确定显色剂的用量。

4、溶液适宜酸度范围的确定

在9只50 mL容量瓶中各加入2.0 mL10-3 mol·L-1铁标准溶液和1.0 mL 100 mol·L-1盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。各加2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液，然后从滴定管中分别加入0，2.00，5.00，8.00，10.00，20.00，25.00，30.00，40.00 mL 0．1 mol·L-1NaOH溶液，摇匀，以水稀释至刻度，摇匀。用精密pH 试纸或酸度计测量各溶液的pH。

以水为参比，在选定波长下，用1 cm吸收池测量各溶液的吸光度。绘制A —pH曲线，确定适宜的pH范围。

5、络合物稳定性的研究

移取2.0 mL10-3mol·L-1铁标准溶液于50 mL 容量瓶中，加入1 mL 100g· L-盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。再加入2 mL 1.5 g·L-1邻二氮菲溶液和5 mL 1.0mol·L-1乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。以水为参比溶液，在选定波长下，用1 cm吸收池，每放置一段时间测量一次溶液的吸光度。

放置时间：5 min，10 min，30 min，1 h，2 h，3 h。

以放置时间为横坐标，吸光度为纵坐标绘制A—t曲线，对络合物的稳定性作出判断。

6、标准曲线的测绘

以步骤1中试剂空的溶液(1号)为参比，用l cm吸收池，在选定波长下测定2─6号各显色标准溶液的吸光度。在坐标纸上，以铁的浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。

7、铁含量的测定

试样溶液按步骤1显色后，在相同条件下测量吸光度，由标准曲线计算试样中微量铁的质量浓度。

五、思考题

⒈用邻二氮菲分光光度法测定铁时为何要加入盐酸羟胺溶液？其作用是什么？试写出有关反应方程式。

2、根据有关实验数据，计算邻二氮菲—Fe(Ⅱ)络合物在选定波长下的摩尔吸收系数。

3、在有关条件实验中，均以水为参比，为什么在测绘标准曲线和测定试液时，要以试剂空白溶液为参比？

实验二分光光度法测定邻二氮菲一铁(Ⅱ)

络合物的组成

一、实验原理

络合物组成的确定是研究络合反应平衡的基本问题之一。金属离子M和络合剂L形成络合物的反应为

M + nL====MLn

式中，n为络合物的配位数，可用摩尔比法(或称饱和法)进行测定，即配制一系列溶液，各溶液的金属离子浓度、酸度、温度等条件恒定，只改变配位体的浓度，在络合物的最大吸收波长处测定各溶液的吸光度，以吸光度对摩尔比c L/c M作图，如图1-2所示。

图1-2 摩尔比法测定络合物组成

将曲线的线性部分延长相交于一点，该点对应的c L/c M值即为配位数n。摩尔比法适用于稳定性较高的络合物组成的测定。

二、仪器与试剂

1．仪器721或722型分光光度计。

2．试剂 (1) 10-3 mol·L-1铁标准溶液；

(2) 100 g·L-1盐酸羟胺溶液；

(3) 10-3 mol·L-1邻二氮菲水溶液；

(4) 1.0mol·L-1乙酸钠溶液。

三、实验步骤

取9只50 mL容量瓶，各加入1.0 mL10-3 mol·L铁标准溶液，1 mL100 g·L-1。盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2 min。依次加入1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0 ml。10-3 mol·L-1邻二氮菲溶液，然后各加5 mL 1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在510 nm处，用1 cm吸收池，以水为参比，测定各溶液的吸光度A。以A对c L/c M作图，将曲线直线部分延长并相交，根据交点位置确定络合物的配位数n。

四、思考题

1．在什么条件下，才可以使用摩尔比法测定络合物的组成?

2．在此实验中为什么可以用水为参比，而不必用试剂空白溶液为参比?

实验三 有机化合物的紫外吸收光谱

及溶剂性质对吸收光谱的影响

一、实验目的

1.了解利用紫外吸收光谱进行定性测定的原理；

2.通过测定不同溶剂的丁酮溶液、异亚丙基丙酮溶液的最大吸收峰的max λ，了解溶剂极性对*n π→跃迁，*ππ→跃迁产生的吸收带的影响；

3.掌握T6新世纪紫外可见分光光度计的使用方法；了解UV-2401（PC ）S 的使用方法。

二、实验原理

具有不饱和结构的有机化合物，如芳香族化合物，在紫外区（200~400nm ） 有特征吸收，为有机化合物的鉴定提供了有用的信息。

紫外吸收光谱定性的方法是比较未知物与已知纯样品在相同条件下绘制的吸收光谱；或将未知物的吸收光谱与标准谱图（如Sadtler 紫外光谱图）相比较，若两光谱图的最大吸收峰的位置max λ和摩尔吸收系数max K 相同，表明它们是同一有机化合物。极性溶剂对有机物的紫外吸收光谱吸收峰的波长、强度、形状有一定的影响。溶剂极性增加，使*n π→跃迁产生的吸收带蓝移，而*ππ→跃迁产生的吸收带红移。

三、仪器与试剂

1.仪器 T6新世纪紫外可见分光光度计；带盖石英吸收池2只（1cm ）

2.试剂 (1) 苯、乙醇、正己烷、氯仿、丁酮；

(2) 用水、氯仿、正己烷配制的0.4g.L -1异亚丙基丙酮溶液。

四、实验步骤

1.苯的吸收光谱的测绘

在石英吸收池中几滴苯，加盖，用手心温热底部片刻，以空白石英吸收池为参比，在220─360 nm 范围进行扫描，绘制吸收光谱，确定吸收峰波长。

2.乙醇中杂质苯的检查

以纯乙醇为参比溶液，在220─360 nm 范围进行扫描，绘制乙醇样品的吸收光谱，并确定是否存在苯的吸收特征峰。

3.溶剂性质对紫外吸收光谱的影响

（1）在3只5mL 的带塞比色管中，各加入0.02mL 丁酮，分别用去离子水、乙醇、氯仿稀释至刻度，摇均。以各自的溶剂为参比，在220─350 nm 范围进行扫描，绘制各溶液的吸收光谱。比较它们最大吸收峰的位置max λ的变化并加以解释。

（2）在3只10mL 的带塞比色管中，分别加入0.20mL 用去离子水、乙醇、氯仿配制的0.4g.L -1异亚丙基丙酮溶液，分别用相应的溶剂稀释至刻度，摇均。以各自的溶剂为参比，在200─350 nm 范围进行扫描，绘制各溶液的吸收光谱；比较它们最大吸收峰的位置max λ的变化并加以解释。

五 注意事项

1.石英吸收池每换一种溶液或溶剂必须清洗干净，并用被测溶液或参比液荡洗3次。

2.本实验所用试剂应为光谱纯或经提纯处理。

六 思考题

1.分子中哪类电子跃迁会产生紫外吸收光谱？

2.为什么极性溶剂有助于*n π→跃迁产生的吸收带蓝移（向短波方向移动），而*ππ→跃迁产生的吸收带红移（向长波方向移动）？

实验四紫外吸收光谱测定蒽醌试样中

蒽醌的含量和摩尔吸收系数

二、实验原理

利用紫外吸收光谱进行定量分析时，必须选择合适的测定波长。在蒽醌试样中含有邻苯二甲酸酐，它们的紫外吸收光谱如图4-4所示。

由于在蒽醌分子结构中的双键共轭体系大于邻苯二甲酸酐，因此蒽醌的吸收峰红移比邻苯二甲酸酐大，且两者的吸收峰形状及其最大吸收波长各不相同，蒽醌在波长251 nm处有一强烈吸收峰(κ=4.6×104L·mol-1·cm-1)，在波长323 nm 处有一中等强度的吸收峰(κ=4.7×103L·mol-1·cm-1)，而在251 nm波长附近有一邻苯二甲酸酐的强烈吸收峰λ

(κ=3.3×104L·mol-1·cm-1)，为了避开其干

max

扰，选用323 nm波长作为测定蒽醌的工作波长。由于甲醇在250～350nm无吸收干扰，因此可用甲醇为参比溶液。

图1-4蒽醌(曲线1)和邻苯二甲酸酐(曲线2)在甲醇中的紫外吸收光谱

摩尔吸收系数k是衡量吸光度定量分析方法灵敏度的重要指标，可利用求标

准曲线斜率的方法求得。

三、仪器与试剂

1．仪器 T6新世纪紫外－可见分光光度计。

2．试剂

(1) 葸醌、甲醇、邻苯二甲酸酐。

(2) 蒽醌试样。

(3) 4.0 g·L-1蒽醌标准贮备液准确称取0.400 0 g蒽醌置于100 mL烧杯中，用甲醇溶解后，转移到100 mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀。

(4) 0.040 0 g·L-1。蒽醌标准溶液吸取1.0 mL上述蒽醌贮备液于100 mL 容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀。

四、实验步骤

1、蒽醌系列标准溶液的配制在5只10 mL容量瓶中，分别加入2.00，4.00，6.00，8.00，10.00 mL葸醌标准溶液(0.040 0 g·L-1)，然后用甲醇稀释到刻度，摇匀备用。

2、称取0.100 0 g葸醌试样于小烧杯中，用甲醇溶解后，转移至50 mL容量瓶中，以甲醇稀释至刻度，摇匀备用。

3、用1 cm石英吸收池、，以甲醇作为参比溶液，在200～350 nm波长范围内测定一份蒽醌标准溶液的紫外吸收光谱。

4、配制浓度为0.1 g·L-1邻苯二甲酸酐的甲醇溶液，按上述方法测绘其紫外吸收光谱。

5、在选定波长下，以甲醇为参比溶液，测定蒽醌标准溶液系列及葸醌试液

的吸光度。以蒽醌标准溶液的吸光度为纵坐标，浓度为横坐标绘制标准曲线，根据葸醌试液的吸光度，在标准曲线上查得其对应的浓度，并根据试样配制情况。计算葸醌试样中葸醌的含量，并计算此波长处的k值。

五、思考题

1、为什么选用323 nm而不选用251 nm波长作为蒽醌定量分析的测定渡

2、本实验为什么用甲醇作参比溶液?

实验五红外光谱测定有机化合物的结构

一、实验目的

1、学习用红外吸收光谱进行化合物的定性分析，

2、掌握用压片法制作固体试样晶片的方法；

3、熟悉红外分光光度仪的工作原理及其使用方法。

二、实验原理

红外光谱是研究分子振动和转动信息的分子光谱，它反映了分子化学键的特征吸收频率，可用于化合物的结构分析和定量测定。

根据实验技术和应用的不同，一般将红外光区划分为三个区域：近红外区（13158～4000cm-1）,中红外区（4000～400cm-1）和远红外区（400～10cm-1）,一般的红外光谱在中红外区进行检测。

红外光谱对化合物定性分析常用方法有两种。

1、已知标准物对照法

已知物对照应由标准试样和待测试样在完全相同的工作条件下，分别测绘出红外光谱进行对照，图谱相同，则为同一化合物。

2、标准谱图查对法

标准图谱查对是一种最直接、可靠的方法。根据待测试样的来源、物理常数、分子式及谱图中的特征谱带，查对标准谱图来确定化合物。常用的标准图谱集为萨特勒红外标准图谱集。

三、仪器及试剂

1、仪器：傅立叶红外光谱仪(WQF-510A)、手压式压片机、压片模具、

磁性样品架、可拆式液体池、KBr盐片、红外灯、玛瑙研钵。

2、试剂：苯甲酸（AR）、无水丙酮、KBr（光谱纯）。

四、实验步骤

1．固体样品苯甲酸的红外光谱的测绘（KBr压片法）。

（1）取干燥的苯甲酸试样约1mg于干净的玛瑙研钵中，在红外灯下研磨成细粉，再加入约150mg干燥的KBr一起研磨至二者完全混合均匀，颗粒粒度约为2μm 以下。

（2）取适量的混合样品于干净的压片模具中，堆积均匀，用手压式压片机用力加压约30s，制成透明试样薄片。

（3）将试样薄片装在磁性样品架上，放入Avatar360 FT－IR红外光谱仪的样品室中，先测空白背景，再将样品置于光路中，测量样品红外光谱图。

（4）扫谱结束后，取出样品架，取下薄片，将压片模具、试样架等擦洗干净，置于干燥器中保存好。

2．液体试样丙酮的红外光谱的测绘（液膜法）。

用滴管取少量液体样品丙酮，滴到液体池的一块盐片上，盖上另一块盐片（稍转动驱走气泡），使样品在两盐片间形成一层透明薄液膜。固定液体池后将其置于红外光谱仪的样品室中，测定样品红外光谱图。

3．数据处理

（1）对所测谱图进行基线校正及适当平滑处理，标出主要吸收峰的波数值，储存数据后，打印谱图。

（2）将扫描得到的两种试样的红外吸收谱图与已知标准谱进行对照比较，并判别各主要吸收峰的归属。

五、注意事项

1．KBr应干燥无水，固体试样研磨和放置均应在红外灯下，防止吸水变潮；KBr 和样品的质量比约在100～200:1之间。

2．可拆式液体池的盐片应保持干燥透明，切不可用手触摸盐片表面；每次测定前后均应在红外灯下反复用无水乙醇及滑石粉抛光，用镜头纸擦拭干净，在红外灯下烘干后，置于干燥器中备用。盐片不能用水冲洗。

六、思考题

1．用压片法制样时，为什么要求将固体试样研磨到颗粒粒度在2 μm左右?为什么要求KBr粉末干燥、避免吸水受潮?

2．对于高聚物固体材料，很难研磨成细小的颗粒，采用什么制样方法比较可行? 3．芳香烃的红外特征吸收在谱图的什么位置?

4．羟基化合物谱图的主要特征是什么?

实验六 分子荧光法测定奎宁的含量

一、实验目的

1．了解用分子荧光光度法测定奎宁的原理和方法。

2．熟练掌握分子荧光光度计的使用方法。

二、实验原理

奎宁在稀酸溶液中是强荧光物质，它有两个激发波长250nm 和350nm ，荧光发射峰在450nm 。

在低浓度时，荧光强度与荧光物质的浓度成正比。

c k I f ?=

三、仪器与试剂

1．仪器 F962KT 型荧光分光光度计，1000mL 容量瓶2个，

50mL 容量瓶6个，10mL 吸量管1支。

2．试剂

(1) 1mol·L -1H 2SO 4溶液；0.05mol·L -1H 2SO 4溶液。

(2) 100 mg·L -1奎宁标准贮备溶液：准确称取0.1207g 硫酸二水奎宁，加

50mL1mol·L -1H 2SO 4溶解，加水定容至1L 。

(3) 10mg·L -1奎宁标准溶液：吸取100 mg·L -1奎宁标准贮备溶液10mL ，加

水定容至100mL 。

(4) 奎宁试样。

四、实验步骤

1．系列标准溶液的配制

取6只50mL容量瓶，分别加入10mg·L-1奎宁标准溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL，加入1mol·L-1H2SO42.5mL，加蒸馏水定容。

2．绘制激发光谱和荧光发射光谱

取4号标准溶液，仪器设置发射波长如460nm后，在200～400nm范围激发扫描得激发光谱（Ex），谱图上可得奎宁荧光强度最大的荧光激发峰波长，然后仪器设置以此最大的荧光激发峰波长为激发波长，在400～600nm范围进行发射扫描, 可得荧光发射光谱(Em)，谱图上可以获得奎宁荧光强度最大发射峰波长。3．绘制标准曲线

将仪器的激发和发射波长设置为奎宁荧光最大激发波长和发射波长后，按软件操作要求放置所配制的标准溶液浓度系列分别可测得各自溶液的荧光强度值，完毕。随即获得标准曲线。

4．未知试样的测定

取4~5片奎宁药片，在研钵中研细，准确称取约0.1g，用0.05mol·L-1H2SO4溶解，全部转移至1000mL容量瓶中，以0.05mol·L-1H2SO4溶液稀释至刻度，摇匀。取溶液5.00mL于50mL容量瓶中，用0.05mol·L-1H2SO4溶液稀释至刻度，摇匀。取与系列标准溶液相同的条件下，测量试样溶液的荧光发射强度。

5、绘制荧光强度I1对奎宁溶液浓度c的标准曲线，并由标准曲线求算未知试样的浓度，计算药片中的奎宁含量。

五、注意事项

奎宁溶液必须当天配制，避光保存。

六、思考题

1．能否用0.05mol·L-1HC1来代替0.05mol·L-1H2SO4稀释溶液？

2．如何绘制激发光谱和荧光发射光谱？

3．哪些因素可能会对奎宁荧光产生影响？

实验七火焰原子吸收光谱法灵敏度和

自来水中钙、镁的测定

一、实验目的

1. 学习原子吸收分光光度法的基本原理；

2. 了解原子吸收分光光度计的基本结构及其使用方法；

3. 掌握用标准曲线法测定自来水中钙、镁含量的方法。

二、实验原理

在使用锐线光源条件下，基态原子蒸气对共振线的吸收，符合朗伯-比尔定律，即

A=lg(I0／I)=KLN0

在试样原子化时，火焰温度低于3 000 K时，对大多数元素来讲，原子蒸气中基态原子的数目实际上十分接近原子总数。在一定实验条件下，待测元素的原子总数目与该元素在试样中的浓度呈正比。则

A = k c

用A-c标准曲线法或标准加入法，可以求算出元素的含量。

由原子吸收法灵敏度的定义，按下式计算其灵敏度S：

三、仪器与试剂

1．仪器AA320N型原子吸收分光光度计；钙、镁空心阴极灯。

2．试剂

(1) 1.0 g·L-1镁标准贮备溶液

(2) 1.0 g·L-1钙标准贮备溶液

(3) 50 mg·L-1标准使用溶液

(4) 100 mg·L-1钙标准使用溶液

(5) MgO(GR)；无水CaCO3(GR)；HCI(AR)

配制用水均为二次蒸馏水。

四、实验步骤

1．钙、镁系列标准溶液的配制

(1) 配制钙系列标准溶液：2.0，4.0，6.0，8.0，10.0 mg·L-1

(2) 配制镁系列标准溶液：0.1，0.2，0.3，0.4，0.5 mg·L-1

2．工作条件的设置

(1) 吸收线波长Ca 422.7 nm。Mg 285.2 nm

(2) 空心阴极灯电流4 mA

(3) 狭缝宽度0.1 mm

(4) 原子化器高度6 mm

(5) 空气流量4 L·min-1，乙炔气流量1．2 L·min-1

3．钙的测定

(1) 用10 mL的移液管吸取自来水样于100 mL，容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

(2) 在最佳工作条件下，以蒸馏水为空白，由稀至浓逐个测量钙系列标准溶液的吸光度，最后测量自来水样的吸光度A。

4．镁的测定

(1) 用2 mL的吸量管吸取自来水样于100 mI容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。

(2) 在最佳工作条件下，以蒸馏水为空白，测定镁系列标准溶液和自来水样的吸光度A。

5．实验结束后，用蒸馏水喷洗原子化系统2 min，按关机程序关机。最后关闭乙炔钢瓶阀门，旋松乙炔稳压阀，关闭空压机和通风机电源。

6．绘制钙、镁的A—c标准曲线，由未知样的吸光度Ax，求算出自来水中钙、镁含量(mg·L-1)。或将数据输入微机，按一元线性回归计算程序，计算钙、镁的含量。

7．根据测量数据，计算该仪器测定钙、镁的灵敏度S。

五、注意事项

1．乙炔为易燃易爆气体，必须严格按照操作步骤工作。在点燃乙炔火焰之前，应先开空气，后开乙炔气；结束或暂停实验时，应先关乙炔气，后关空气。乙炔钢瓶的工作压力，一定要控制在所规定范围内，不得超压工作。必须切记，保障安全。

2．注意保护仪器所配置的系统磁盘。仪器总电源关闭后，若需立即开机使用，应在断电后停机5 min再开机，否则磁盘不能正常显示各种页面。

六、思考题

1．为什么空气、乙炔流量会影响吸光度的大小?

2．为什么要配制钙、镁标准溶液？所配制的钙、镁系列标准溶液可以放置到第二天使用吗？为什么？

实验八玻璃电极响应斜率和溶液pH的测定

一、实验目的

1、掌握用玻璃电极测量溶液pH值的基本原理和测量技术。

2、学会怎样测定玻璃电极的响应斜率，进一步加深对玻璃电极响应特性的了解。

二、实验原理

在进行pH测定时，把玻璃电极与饱和甘汞电极插入试液组成下列电池：

（＋）Ag，AgCl│内参比溶液│玻璃膜│试液║KCl饱和│Hg2Cl2，Hg（－）

E玻E液接E SCE

E电池= E SCE－E玻+E液接

E玻= k-0.059pH

在一定条件下，E

和E SCE为一常数，因此，电动势可写为：

液接

E电池=K+0.059pH（25℃）

若上式中K值已知，则由测得的E

就能计算出被测溶液的pH，但实际上

电池

由于K值不易求得，因此，在实际工作中，用已知的标准缓冲溶液作为基准，比较待测溶液和标准溶液两个电池的电动势来确定待测溶液的pH。所以在测定pH时，先用标准缓冲溶液校正酸度计（亦称定位），以消除K值的影响。

三、仪器和试剂

1.仪器pHS-25型酸度计；复合玻璃电极（雷磁E-201c型塑料壳可充式电极）。

2.试剂(1) pH标准缓冲溶液（详见配制方法）；

(2) 未知pH试液。

四、实验步骤

1．pHS-29A型酸度计的使用，详见仪器使用说明。

2．玻璃电极响应斜率的测定

一支功能良好的玻璃电极，应该有理论上的Nernst响应，即在不同pH的缓冲溶液中测得的电极电位与pH呈直线关系，在25℃其斜率为59mV/pH。测定方法如下。

（1）接通仪器电源，按使用说明调零、校正，安装电极。在50mL烧杯中盛20mL 左右的邻苯二甲酸氢钾缓冲溶液，将电极浸入其中，按下-mV档。不时摇动烧杯，使指针稳定后读数，记下数据E（单位为mV）。

（2）用蒸馏水轻轻冲洗电极，用滤纸吸干。在50mL烧杯中盛20mL左右的硼砂溶液，按下+mV档，不时摇动烧杯，使指针稳定后读数，记下数据E（单位为mV）。

（3）同（2）的操作，更换pH=6.86的缓冲溶液，测其E值。

3．试液的pH测定

（1）将电极用水冲洗干净，用滤纸吸干。

先用广泛pH试纸初测试液的pH，再用与试液pH相近的标准缓冲溶液校正仪器（例如：若测pH为9.0左右的试液，应选用PH=9.18的标准缓冲溶液定位）。（2）校正完毕后，不得再转动定位调节旋钮，否则应重新进行校正工作。用蒸馏水冲洗电极，用滤纸吸干后，将电极插入试液中，摇动烧杯，使指针稳定后由仪器刻度表读出pH。

（3）取下电极，用水冲洗干净，妥善保存，实验完毕。

五、结果处理

1．用以上测得的E值对pH作图，求其直线的斜率。该斜率为玻璃电极的影响斜率，若电极响应斜率偏离理论值（59mV/pH）很多，则此电极不能使用。2．记录所测试试样溶液的pH结果。

六、思考题

1．测定pH时，为什么要选用pH与待测溶液的pH相近的标准缓冲溶液来定位？2．为什么普通的毫伏计不能用于测量pH？

实验九自来水中含氟量的测定—

标准曲线法和标准加入法

一、实验目的

1、掌握直接电位法的测定原理及实验方法；

2、了解氟离子选择性电极的基本性能及测定方法；

3、正确使用氟离子选择性电极和酸度计。

二、实验原理

氟离子选择电极是一种由LaF3单晶制成的电化学传感器。将氟离子选择电极和参比电极（饱和甘汞电极）插入试液中，由于氟电极对氟离子活度有响应，它的电极电位与氟离子活度的大小有关，而参比电极电势则保持衡定，所以通过测定这两个电极间的电位差可确定溶液氟离子活度的大小。用氟电极测定氟离子时，最适宜的pH范围为5.5~6.5。Fe3+，Al3+等离子能与试液中的氟离子生成配合物对测定有干扰，加入大量的柠檬酸，可以消除干扰。用离子选择电极测量的

实验四邻菲罗啉分光光度法测定铁的含量(精)

实验四邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁 一、实验目的： 1、掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法； 2、学会标准曲线的绘制方法及其使用。 二、原理： 亚铁离子（Fe2+）在pH=3~9时与邻菲罗啉生成稳定的橙红色络合物，应用此反应可用比色法测定铁。橙红色络合物的吸光度与浓度的关系符合朗伯-比耳定律。若用还原剂（如盐酸羟胺）把高铁离子还原为亚铁离子，则此法还可测定水中的高价铁和总铁的含量。 三、仪器： 721型分光光度计、1cm比色皿、具赛比色管（50ml）、移液管、吸量管、容量瓶等。 四、试剂： 1、铁贮备液（100μg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵 [（NH4）2Fe（SO4）2·6H2O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的 NH4Fe(SO42·12H2O，其摩尔质量为482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0μg/mL。（实验室准备好） 2、铁标准使用液（20μg/mL）：准确移取铁贮备液20.00ml于100ml 容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液中Fe2+的质量浓度为20.0μg/mL。（学生配制）

3、0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。（临用时配制） 4、10%盐酸羟胺水溶液： 5、醋酸-醋酸钠缓冲溶液（pH=4.6）：称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。 五、测定步骤： 1、标准曲线的绘制： （1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml比色管中，加水至刻度； （2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml醋酸－醋酸铵缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀，（3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以空白作为参比，测定各溶液的吸光度。 （4）以吸光度为纵坐标，铁含量（μg，50ml）为横坐标，绘制出标准曲线。 2、试样中铁含量的测定 吸取待测水样溶液10.00ml于50ml比色管中，按绘制标准曲线的操作，测得水样的吸光度Ａ，由标准曲线查得相应的铁含量，计算出试样的铁的质量浓度。做平行样。 实验四邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁原始记录表

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验原理 邻二氮菲（1，10—二氮杂菲），也称邻菲罗啉是测定微量铁的一个很好的显色剂。在pH2—9范围内（一般控制在5—6间）Fe2+与试剂生成稳定的橙红色配合物Fe（Phen）32+lgK=，在510nm下，其摩尔吸光系数为, ）Fe3+与邻二氮菲作用生成兰色配合物，稳定性较差，因此在实际应用中常加入还原剂盐酸羟胺使Fe2+还原为Fe3+： 2 Fe3++2NH2OHHCl=2 Fe2++N2+4H++2H2O+2Cl- 二、试剂与仪器 仪器： 1．721型分光光度计 2．50mL容量瓶8个,100mL1个,500mL1个 3．移液管：2 mL1支，10 mL1支 4．刻度吸管：10mL、5mL、1mL各1支 试剂： 1．铁标准储备溶液100ug/mL：1000 mL（准确称取铁盐NH4Fe（SO4）212H2O置于烧杯中，加入3moL/LHCI20mL和30ml水，然后加水稀释至刻度，摇匀。) 2．铁标准使用液10ug/mL：用移液管移取上述铁标准储备液 mL，置于100 mL容量瓶中，加入3moL/和少量水，然后加水稀释至刻度，摇匀。 3．HCI3moL/L：100mL 4．盐酸羟胺100g/L（新鲜配制）：100mL 5．邻二氮菲溶液L（新鲜配制）：200mL 6．HAc—NaAc缓冲溶液（pH=5）500 mL：称取136gNaAc，加水使之溶解，再加入120 mL 冰醋酸，加水稀释至500 mL 7．水样配制（mL）：取2mL100ug/mL铁标准储备溶液加水稀释至500mL 三、实验步骤 1.配置mL的铁标准溶液。 1．绘制吸收曲线：用吸量管吸取铁标准溶液（10ug/mL）、、、、、分别放入50 mL容量瓶中，加入1 mL10%盐酸羟胺溶液、 L邻二氮菲溶液和5 mL HAc—NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以试剂溶液为参比液，于721型分光光度计中，在440—560nm波长范围内分别测定其吸光度A值。当临近最大吸收波长附近时应间隔波长5—10nm测A值，其他各处可间隔波长20—40nm测定。然后以波长为横坐标，所测A值为纵坐标，绘制吸收曲线，并找出最大吸收峰的波长。 2．标准曲线的绘制：用吸量管分别移取铁标准溶液（10ug/mL）、、、、、、 mL依次放入7只50mL 容量瓶中，分别加入10%盐酸羟胺溶液1 mL，稍摇动，再加入%邻二氮菲溶液 mL及5 mL HAc —NaAc缓冲溶液，加水稀释至刻度，充分摇匀，放置5分钟，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，选择最大测定波长为测定波长，依次测A值。以铁的质量浓度为横坐标，A值为纵坐标，绘制标准曲线。 3．水样分析：分别加入（或，铁含量以在标准曲线范围内为宜）未知试样溶液，按实验步骤2的方法显色后，在最大测定波长处，用3cm比色皿，以不加铁标准溶液的试液为参比液，平行测A值。求其平均值，在标准曲线上查出铁的质量，计算水样中铁的质量浓度。 四、数据记录与结果计算

北京理工大学-邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

北京理工大学-邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

邻二氮菲分光光度法测定铁 刘红阳 19121201 1120123063 一、实验目的 1、学习测定微量铁的通用方法； 2、掌握分光光度法分析的基本操作及数据处理方法； 3、初步了解分光光度法分析实验条件研究的一般做法。 二、实验原理 一般选择络合物的最大吸收波长为工作波长。控制溶液酸度是显色反应的重要因素。因为多数显色剂是有机弱酸或弱碱，溶液的酸度会直接影响显色剂的理解程度，从而影响显色反应的完全程度及络合物的组成。另一方面，酸度大小也影响着金属离子的存在状态，因此也影响了显色反应的程度。应当确定显色剂加入量的合适范围。不同显色反应的络合物达到稳定所需要的时间不同，且达到稳定后能维持多久也大不相同。大多数显色反应在室温下就能很快完成，但有些反应必须加热才能较快进行。此外，加入试剂的顺序、离子的氧化态、干扰物质的影响等，均需一一加以研究，以便拟定合适的分析方案，使测定既准确，又迅速。本实验通过对铁(Ⅱ)-邻二氮菲显色反应的条件实验，初步了解如何拟定一个分光光度法分析实验的测定条件。 邻二氮菲是测定铁的高灵敏性、高选择性试剂之一，邻二氮菲分光光度法是化工产品中微量铁测定的通用方法。在pH2~9的溶液中，Fe2+和邻二氮菲生成 1:3橘红色络合物，lgβ 3=21.3(20℃)，ε 508 =1.1×104L·mol-1·cm-1，其吸收曲 线如图一所示；Fe3+亦可以与邻二氮菲生成蓝色络合物，因此，在显色前需用盐酸羟胺溶液将全部的Fe3+还原为Fe2+。反应式如下（和图二）： 2Fe3++2NH 2OH===2Fe2++N 2 ↑+2H 2 O+2H+

2019邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁实验指导

精心整理实验二邻菲罗啉分光光度法测定水样中的铁——标准曲线法 一、实验目的： 1．掌握邻菲罗啉分光光度法测定微量铁的原理和方法； 2．学会标准曲线的绘制方法及其使用。 二、原理： 1. 2. 4Fe3+ 橙红色配合物 3. 4. λ 三 可见分光光度计，1cm比色皿、100mL 容量瓶 1个，20mL 移液管 1 支，50mL 容量瓶 10 个， 10mL 吸量管 1 支，1mL 吸量管（或移液管） 1 支，5mL 移液管 1 支，2mL 移液管1 支。 四、试剂： ①铁贮备液（100μg/mL）：准确称取0.7020克分析纯硫酸亚铁铵[（NH4）2Fe（SO4） O]于100毫升烧怀中（或0.8640g分析纯的NH4Fe(SO4)2·12H2O，其摩尔质量为 2·6H2

. 482.18g/mol），加50毫升1+1 H2SO4，完全溶解后，移入1000ml的容量瓶中，并用水稀释到刻度，摇匀，此溶液中Fe的质量浓度为 100.0μg/mL。（实验室准备好）②铁标准溶液（20.00 μg·mL－1）移取100.0μg·mL－1铁标准溶液20.00mL 于100mL容量瓶中，并用蒸馏水稀释至标线，摇匀。(学生自行配制) ③ 10%盐酸羟胺水溶液：（用时配制）。 ④ 0.5%邻菲罗啉水溶液：配制时加数滴盐酸能助溶液或先用少许酒精溶解，再用水稀释至所需体积。（临用时配制）或（避光保存，两周内有效）。 ⑤ HAc-NaAc缓冲溶液（pH≈5.0）:称取40克纯醋酸铵加到50毫升冰醋酸中，加水溶解后稀释至100毫升。 五、测定步骤： 1、标准曲线的绘制： （1）分别吸取铁的标准溶液0.00、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00ml于7支50ml容量瓶中，加水至刻度； （2）依次分别加入10%盐酸羟胺溶液1ml，混匀，加入5ml pH≈5.0缓冲溶液，摇匀，加入0.5%邻菲罗啉溶液2ml，摇匀， （3）放置15分钟后，在510nm波长处，用1cm比色皿，以试剂空白作为参比，测定各溶液的吸光度。 附721型分光光度计操作过程： 1.检查仪器各调节钮的起始位置是否正确，选择波长，并将灵敏度档置第1档 2.接通电源，打开开关 3盖上比色皿暗盒盖，用调“100%”调节器使电表指针处于透过率“100%”位，打开比色皿暗盒盖，用调“0”调节器使电表指针处于透过率“0”位；预热 20min 4.放入参比溶液及试样溶液 5.校准：拉动吸收池拉杆，使参比溶液置于光路中，打开比色皿暗盒盖，用调 “0”调节器使电表指针处于透过率“0”位；盖上比色皿暗盒盖，用调 “100%”调节器使电表指针处于透过率“100%”位。重复校正至稳定 .

邻二氮菲分光光度法测定铁的含量(精)

实验二 邻二氮菲分光光度法测定铁的含量 一、实验目的 1．掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的方法; 2．了解分光光度计的构造、性能及使用方法。 二、实验原理 邻二氮菲（又称邻菲罗啉）是测定微量铁的较好试剂，在pH=2～9的条件下，二价铁离子与试剂生成极稳定的橙红色配合物。配合物的稳K lg ＝21.3，摩 尔吸光系数510 ＝11000 L·mol -1·cm -1。 在显色前，用盐酸羟胺把三价铁离子还原为二价铁离子。 4Fe 3+＋2NH 2OH →4Fe 2+ ＋ N 2O ＋ 4H ＋＋ H 2O 测定时，控制溶液pH ＝3较为适宜，酸度高时，反应进行较慢，酸度太低，则二价铁离子水解，影响显色。 用邻二氮菲测定时，有很多元素干扰测定，须预先进行掩蔽或分离，如钴、镍、铜、铅与试剂形成有色配合物；钨、铂、镉、汞与试剂生成沉淀，还有些金属离子如锡、铅、铋则在邻二氮菲铁配合物形成的pH 范围内发生水解；因此当这些离子共存时，应注意消除它们的干扰作用。 三、仪器与试剂 1．醋酸 钠：l mol·L -1； 2．氢氧化钠：0.4 mol·L -1； 3．盐 酸：2 mol·L -1；、 4．盐酸羟胺：10％（临时配制）； 5．邻二氮菲（0.1%）：0.lg 邻二氮菲溶解在100mL1:1乙醇溶液中。 6．铁标准溶液 (1)10-4mol·L -1铁标准溶液：准确称取0.1961g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -1盐酸15 mL 溶解，移至500 mL 容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀；再准确稀释10倍成为含铁10 - 4mol·L -l 标准溶液。 (2)10 μg·mL -1（即0.01 mg·mL -1）铁标准溶液：准确称取0.3511g （NH 4）2 Fe （SO 4）2·6H 20于烧杯中，用2 mol·L -l 盐酸15 mL 溶解，移入500 mL 容量瓶中，

邻二氮菲分光光度法测定水中微量铁

邻二氮菲分光光度法测定微量铁 一、实验目的 １、学会吸收曲线及标准曲线的绘制,了解分光光度法的基本原理。 ２、掌握用邻二氮菲分光光度法测定微量铁的方法原理。 3、学会721型分光光度计的正确使用，了解其工作原理。 ４、学会数据处理的基本方法。 5、掌握比色皿的正确使用。 二、实验原理 根据朗伯-比耳定律:Ａ=εbc，当入射光波长λ及光程ｂ一定时,在一定浓度范围内，有色物质的吸光度A与该物质的浓度c成正比。只要绘出以吸光度A 为纵坐标,浓度c为横坐标的标准曲线，测出试液的吸光度，就可以由标准曲线查得对应的浓度值,即未知样的含量。同时,还可应用相关的回归分析软件，将数据输入计算机,得到相应的分析结果。 用分光光度法测定试样中的微量铁,可选用显色剂邻二氮菲(又称邻菲罗啉),邻二氮菲分光光度法是化工产品中测定微量铁的通用方法,在pH值为2-9的溶液中,邻二氮菲和二价铁离子结合生成红色配合物： 此配合物的lｇK 稳＝2１．3，摩尔吸光系数ε 510 = 1.１×１０4L·mｏl-1·cm- １，而Fe3+能与邻二氮菲生成3∶１配合物,呈淡蓝色,lｇK 稳 =１4.１。所以在加 入显色剂之前，应用盐酸羟胺（NH ２ OH·HCl)将Fｅ３+还原为Fe2+，其反应式如下：２Fe3＋+ 2NH2OH·HCl → 2Ｆｅ2+＋N2+ H2O ＋4H++ ２ Cl- 测定时酸度高,反应进行较慢；酸度太低,则离子易水解。本实验采用HAc－NａAc缓冲溶液控制溶液pH≈5.0,使显色反应进行完全。

为判断待测溶液中铁元素含量,需首先绘制标准曲线,根据标准曲线中不同浓度铁离子引起的吸光度的变化,对应实测样品引起的吸光度,计算样品中铁离子浓度。 本方法的选择性很高,相当于含铁量4０倍的Sn2＋、Ａl3+、Ｃa2＋、Mｇ２+、Zn2+、 SｉO 32-；2０倍的Cr3+、Ｍｎ2+、VO 3 -、PO 4 3-;5倍的Co2＋、Ni2+、Cu２+-等离子不干扰 测定。但Bi3+、Cd2＋、Hｇ２+、Ｚn2+、Aｇ+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀干扰测定。 三、实验仪器与试剂: 721型分光光度计、酸度计、50ml比色管、吸量管（１mL、2mL、5ｍL、10 mL）、比色皿、洗耳球。 1.１×10-3mol·L-1铁标准溶液、100ug·ml-1铁标准溶液、盐酸、盐酸羟胺、醋酸钠、０.15%邻二氮菲水溶液。 四、实验步骤 (一）准备工作 打开仪器电源开关,预热，调解仪器。 （二）测量工作(以通过空白溶液的透射光强度为Ｉ0,通过待测液的透射光 强度为I,由仪器给出透射比T,再由T值算出吸光度A值） １、吸收曲线的绘制和测量波长的选择 用吸量管吸取２．00 mＬ1.0×1０－3mol．L-1标准溶液，注入50 mL比色管中,加入1．００mL 10％盐酸羟胺溶液，摇匀，加入２.00 mL０.15％邻二氮菲溶液，5.0 mＬ NａＡc溶液，以水稀释至刻度。在光度计上用１ｃm比色皿,采用试剂溶液为参比溶液，在44０－560 nm间，每隔1０ｎm测量一次吸光度，以波长为横坐标,吸光度为纵坐标,绘制吸收曲线,选择测量的适宜波长。一般选用最大吸收波长λ max 为测定波长。 2、显色剂条件的选择(显色剂用量) 在6支比色管中，各加入２.00mL 1．0×１0－3ｍｏｌ·Ｌ－1铁标准溶液和１.00mL 10%盐酸羟胺溶液，摇匀。分别加入0．1０，０．50,１．00,2.00 ，3.0０及４．0０mL 0．15％ 邻二氮菲溶液，5．０ｍL ＮａAc溶液，以水稀释至刻度,摇匀。在光度计上用

水质 铁的测定 邻菲啰啉分光光度法

水质铁的测定邻菲啰啉分光光度法 （量程：0.12~5mg/L） 1 适用范围 本标准适用于地表水、地下水及废水中铁的测定。方法最低检出浓度为0.03mg/L，测定下限为0.12mg/L，测定上限为 5.00mg/L。对铁离子大于 5.00mg/L 的水样，可适当稀释后再按本方法进行测定。 2 原理 亚铁离子在pH3～9 之间的溶液中与邻菲啰啉生成稳定的橙红色络合物，其反应式为： 此络合物在避光时可稳定保存半年。测量波长为510nm，其摩尔吸光系数为 1.1×10 4 L·mol－1·cm－1。若用还原剂（如盐酸羟胺）将高铁离子还原，则本法可测高铁离子及总铁含量。 3 试剂 本标准所用试剂除另有注明外，均为符合国家标准的分析纯化学试剂；实验用水为新制备的去离子水。 3.1 盐酸(HCl)：ρ20＝1.18g/mL，优级纯。 3.2 （1+3）盐酸。 3.3 10%(m/V)盐酸羟胺溶液。 3.4 缓冲溶液：40g 乙酸铵加50mL 冰乙酸用水稀释至100mL。 3.5 0.5%(m/V)邻菲啰啉（1,10-phenanthroline）水溶液，加数滴盐酸帮助溶解。 3.6 铁标准贮备液： 准确称取0.7020g 硫酸亚铁铵((NH 4 ) 2 Fe(SO 4 ) 2 ·6H 2 O)，溶于（1+1）硫酸50mL 中，转移至1000mL容量瓶（A 级）中，加水至标线，摇匀。此溶液每毫升含100μg 铁。 3.7 铁标准使用液： 准确移取铁标准贮备液（3.6）25.00mL 置100mL 容量瓶（A 级）中，加水至标线，摇匀。此溶液每毫升含25.0μg 铁。

4 仪器 分光光度计，10mm 比色皿。2 5 干扰的消除 强氧化剂、氰化物、亚硝酸盐、焦磷酸盐、偏聚磷酸盐及某些重金属离子会干扰测定。经过加酸煮沸可将氰化物及亚硝酸盐除去，并使焦磷酸、偏聚磷酸盐转化为正磷酸盐以减轻干扰。加入盐酸羟胺则可消除强氧化剂的影响。 邻菲啰啉能与某些金属离子形成有色络合物而干扰测定。但在乙酸-乙酸铵的缓冲溶液中，不大于铁浓度10 倍的铜、锌、钴、铬及小于2mg/L 的镍，不干扰测定，当浓度再高时，可加入过量显色剂予以消除。汞、镉、银等能与邻菲啰啉形成沉淀，若浓度低时，可加过量邻菲啰啉来消除；浓度高时，可将沉淀过滤除去。水样有底色，可用不加邻菲啰啉的试液作参比，对水样的底色进行校正。 6 步骤 6.1 校准曲线的绘制 依次移取铁标准使用液（3.7）0、2.00、4.00、6.00、8.00、10.0mL 置150mL 锥形瓶中，加入蒸馏水至50.0mL，再加（1+3）盐酸（3.2）1mL，10%盐酸羟胺1mL，玻璃珠1～2 粒。加热煮沸至溶液剩15mL 左右，冷却至室温，定量转移至50mL 具塞比色管中。加一小片刚果红试纸，滴加饱和乙酸钠溶液至试纸刚刚变红，加入5mL 缓冲溶液（3.4）、0.5%邻菲啰啉溶液（3.5）2mL，加水至标线，摇匀。显色15min 后，用10mm 比色皿（若水样含铁量较高，可适当稀释；浓度低时可换用30mm 或50mm 的比色皿），以水为参比，在510nm 处测量吸光度，由经过空白校正的吸光度对铁的微克数作图。各批试剂的铁含量如不同，每新配一次试液，都需重新绘制校准曲线。 6.2 总铁的测定 采样后立即将样品用盐酸（3.1）酸化至pH＜1（含CN －或S 2 －离子的水样酸化时，必须小心进行，因为会产生有毒气体），分析时取50.0mL 混匀水样于150mL 锥形瓶中，加（1+3）盐酸（3.2）1mL，盐酸羟胺溶液（3.3）1mL，加热煮沸至体积减少到15mL 左右，以保证全部铁的溶解和还原。若仍有沉淀应过滤除去。以下按绘制校准曲线同样操作，测量吸光度并作空白校正。 6.3 亚铁的测定 采样时将2mL 盐酸（3.1）放在一个100mL 具塞的水样瓶内，直接将水样注满样品瓶，塞好瓶塞以防氧化，一直保存到进行显色和测量（最好现场测定或现场显色）。分析时只需取适量水样，直接加入缓冲溶液（3.4）与邻菲啰啉溶液（3.5），显色5～10min，在510nm 处以水为参比测量吸光度，并作空白校正。 6.4 可过滤铁的测定 在采样现场，用0.45μm 滤膜过滤水样，并立即用盐酸酸化过滤水至pH＜1，准确吸取样品50mL置于150mL 锥形瓶中，以下操作与步骤6.1 相同。 7 结果的计算 铁的含量按下式计算：

邻二氮菲分光光度法测定微量铁实验报告

邻二氮菲分光光度法测定微量铁 课程名称：仪器分析 指导教师：李志红 实验员：张丽辉李国跃崔凤琼 刘金旖普杰飞赵宇 时间: 2003年5月12日

一、实验目的： （1）掌握研究显色反应的一般方法。 （2）掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。 （3）熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。 （4）学会制作标准曲线的方法。 （5）通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁在未知式样中的含量，掌握721型，723型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。 二、原理： 可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。 （1）入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。 （2）显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。 （3）溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。 （4）有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。 （5）干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。 邻二氮菲与Fe2+在溶液中形成稳定橙红色配合物。配合无的ε = ×104 L· mol ·cm-1。 配合物配合比为3：1，PH在2-9（一般维持在PH5-6）之间。在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。Fe3+与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe2+与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。此方法选择性高Br3+、Ca2+、Hg 2+、Zn2+及Ag+等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。 三、仪器与试剂： 1、仪器：721型723型分光光度计 500ml容量瓶1个，50 ml 容量瓶7个，10 ml 移液管1支 5ml移液管支，1 ml 移液管1支，滴定管1 支，玻璃棒1 支，烧杯2 个，吸尔球1个，天平一台。 2﹑试剂：（1）铁标准溶液100ug·ml-1,准确称取铁盐NH4Fe(SO4)2·12H2O置于烧杯中，加入盐酸羟胺溶液，定量转依入500ml容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度充分摇匀。 （2）铁标准溶液10ug·ml-1.用移液管移取上述铁标准溶液10ml，置于100ml容量瓶中，并用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀。 （3）盐酸羟胺溶液100g·L-1(用时配制) （4）邻二氮菲溶液·L-1先用少量乙醇溶液，再加蒸馏水稀释至所需浓度。 （5）醋酸钠溶液·L-1μ 四、实验内容与操作步骤： 1.准备工作 (1) 清洗容量瓶，移液官及需用的玻璃器皿。 (2) 配制铁标溶液和其他辅助试剂。 (3) 开机并试至工作状态，操作步骤见附录。

邻菲罗啉分光光度法测定铁

邻菲罗啉分光光度法测定铁 实验目的 1.1 进一步了解朗伯-比尔定律的应用。 1.2 学会邻菲罗啉分光光度法测定铁的方法和正确绘制邻菲罗啉-铁的标准曲线。 1.3 了解分光光度计的构造及使用。 2 实验原理 邻菲罗啉（又称邻二氮杂菲）是测定微量铁的一种较好试剂，其结构如下： 在pH=1.5～9.5的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物，反应式如下： 此络合物的logK稳=21.3，ε=11000。 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+： 4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+ 测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。 Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。

3 仪器和试剂 3.1 可见分光光度计。 3.2 铁盐标准溶液的配制： A液（母液→0.1g·L-1）：准确称取1.4060g分析纯硫酸亚铁铵[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]于200mL烧杯中，加入50.0mL 1mol·L-1HCl，完全溶解后，移入250mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀。 B液（0.01g·L-1）：用25mL移液管，准确移取A液25.00mL，置于250mL的容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，备用。 3.3 乙酸-乙酸钠（HAc-NaAc）缓冲溶液（pH= 4.6）：称取135g分析纯乙酸钠，加入120mL冰乙酸，加水溶解后，稀释至500mL。 3.4 ω=1%的盐酸羟胺水溶液，因不稳定，需临用时配制。 3.5 ω=0.1%的邻菲罗啉水溶液：先用少许乙醇溶解后，用水稀释，新近配制。 3.6 50mL容量瓶7个（先编好1、2、3、4、5、6、7号），10mL移液管（有刻度）1支，5mL移液管（有刻度）4支，5mL量筒1个，500mL烧杯1个，洗瓶1个，洗耳球1个，小滤纸，镜头纸。 4 实验步骤 4.1 吸收曲线的绘制和测量波长的选择 用吸管吸取铁盐标准溶液(B液)5.00mL于50mL容量瓶中，依次加入5.0mL HAc～NaAc缓冲液、2.5mL盐酸羟胺、5.0mL 邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm比色皿以试剂空白为参比，在450～550nm范围内，每隔10nm测量1次吸光值。在峰值附近每间隔5nm测量1次。以波长为横坐标、吸光度为纵坐标绘制吸收曲线，确定最大吸收波长。 4.2 标准曲线绘制 4.2.1 分别移取铁的标准溶液(0.01g·L-1)0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、 5.0mL于6只50mL容量瓶中，依次分别加入5.0mL HAc～NaAc 缓冲液、2.5mL盐酸羟胺、5.0mL邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀，放置10min。 4.2.2 按仪器说明书要求，将分光光度计各部分线路接好，光源接10V电压。

邻二氮菲分光光度法测量微量铁的方法

邻二氮菲分光光度法测量微量铁的方法？具体的计算过程怎么算？ 不能。 加入的试剂的作用分别是：盐酸羟铵是还原剂、邻二氮菲是显色剂、NaAc溶液是缓冲溶液用来控制溶液的PH值（测定时，若酸度较高反应进行较慢，酸度太低则二价铁离子水解，影响显色）。 加还原剂是为了把Fe3+还原为Fe2+，必须先加，这是因为Fe2+与邻二氮菲可生成稳定的桔红色配合物[Fe(phen)3]2+，Fe3+也能与邻二氮菲生成淡蓝色[Fe(phen)3]3+，盐酸羟胺作为还原剂把三价铁还原成二价铁离子，让其与邻二氮菲形成稳定络合物，若在还原剂前先加显色剂邻二氮菲，邻二氮菲会与Fe3+络合，其与三价铁的络合物不如与二价铁的络合物稳定，也就是络合不够完全，不能准确得出铁的含量。 用邻二氮菲法测定铁时,为什么在测定前需要加入还原剂盐酸羟胺 答:因为在通常情况下,铁以三价存在,而只有二价铁才能和邻二氮菲发生反应,所以要将三价铁用盐酸羟胺还原到二价. (2)参比溶液的作用是什么在本实验中可否用蒸馏水作参比 答:参比溶液的作用是扣除背景干扰,不能用蒸馏水作参比,因为只有参比和试液成分尽可能相近,测量的误差才会越小. 用邻二氮菲测定铁时，为什么要加入盐酸氢胺？其作用是什么？试写出有关的化学反应方程式. 答：加入盐酸氢胺是为了将Fe3+全部转化为Fe2+，有关的反应如下： 2 Fe3+ + 2 NH2OH·HCl = 2 Fe2+ + N2 ↑+ 2 H2O + 4 H+ + 2 Cl— 2.在有关条件实验中，均以水为参比，为什么在测绘标准曲线和测定试液时，要以试剂空白溶液为参比？答：扣除实验背景干扰。（详细内容自己想）

邻菲罗啉测定铁

邻菲罗啉测定铁 （1）掌握研究显色反应的一般方法。 （2）掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理和方法。 （3）熟悉绘制吸收曲线的方法，正确选择测定波长。 （4）学会制作标准曲线的方法。 （5）通过邻二氮菲分光光度法测定微量铁在未知式样中的含量，掌握721型，723型分光光度计的正确使用方法，并了解此仪器的主要构造。 二、原理： 可见分光光度法测定无机离子，通常要经过两个过程，一是显色过程，二是测量过程。 为了使测定结果有较高灵敏度和准确度，必须选择合适的显色条件和测量条件，这些条件主要包括入射波长，显色剂用量，有色溶液稳定性，溶液酸度干扰的排除。 （1）入射光波长：一般情况下，应选择被测物质的最大吸收波长的光为入射光。（2）显色剂用量：显色剂的合适用量可通过实验确定。 （3）溶液酸度：选择适合的酸度，可以在不同PH缓冲溶液中加入等量的被测离子和显色剂，测其吸光度，作DA-PH曲线，由曲线上选择合适的PH范围。（4）有色配合物的稳定性：有色配合物的颜色应当稳定足够的时间。 （5）干扰的排除：当被测试液中有其他干扰组分共存时，必须争取一定的措施排除干扰。 邻二氮菲与Fe2+ 在PH2.0-9.0溶液中形成稳定橙红色配合物。配合无的ε =1.1 ×104 L? mol ?cm-1 。 配合物配合比为3：1，PH在2-9（一般维持在PH5-6）之间。在还原剂存在下，颜色可保持几个月不变。Fe3+ 与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性教差，因此在实际应用中加入还原剂使Fe 3+还原为Fe2+ 与显色剂邻二菲作用，在加入显色剂之前，用的还原剂是盐酸羟胺。此方法选择性高Br3+ 、Ca2+ 、Hg 2+、Zn2+ 及Ag+ 等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定，相当于铁量40倍的Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+ 、Zn2+ 、Sio32-，20倍的Cr3+、Mn2+、VPO3-45倍的Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。 三、仪器与试剂： 1、仪器：721型723型分光光度计 500ml容量瓶1个，50 ml 容量瓶7个，10 ml 移液管1支 5ml移液管支，1 ml 移液管1支，滴定管1 支，玻璃棒1 支，烧杯2 个，吸尔球1个，天平一台。 2、试剂：（1）铁标准溶液100ug?ml-1,准确称取0.43107g铁盐 NH4Fe(SO4)2?12H2O置于烧杯中，加入0.5ml盐酸羟胺溶液，定量转依入500ml 容量瓶中，加蒸馏水稀释至刻度充分摇匀。 （2）铁标准溶液10ug?ml-1.用移液管移取上述铁标准溶液10ml，置于100ml容量瓶中，并用蒸馏水稀释至刻度，充分摇匀。 （3）盐酸羟胺溶液100g?L-1(用时配制)

邻菲罗啉分光光度法测定铁修订稿

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邻菲罗啉分光光度法测定铁 实验目的 进一步了解朗伯-比尔定律的应用。 学会邻菲罗啉分光光度法测定铁的方法和正确绘制邻菲罗啉-铁的标准曲线。 了解分光光度计的构造及使用。 2 实验原理 邻菲罗啉（又称邻二氮杂菲）是测定微量铁的一种较好试剂，其结构如下： ???????????????????????????????????????????????????????????? 在pH=～的条件下，Fe2+与邻菲罗啉生成很稳定的橙红色的络合物，反应式如下： ????????????????????????????????????????????? 此络合物的logK稳=，ε=11000。 在显色前，首先用盐酸羟胺把Fe3+还原为Fe2+： 4 Fe3++2NH2OH═4 Fe2++N2O+H2O+4H+ 测定时，控制溶液酸度在pH=2～9较适宜，酸度过高，反应速度慢，酸度太低，则Fe2+水解，影响显色。

Bi3+、Ca2+、Hg2+、Ag+、Zn2+离子与显色剂生成沉淀，Cu2+、Co2+、Ni2+离子则形成有色络合物，因此当这些离子共存时应注意它们的干扰作用。 3 仪器和试剂 可见分光光度计。 铁盐标准溶液的配制： ???? A液（母液?0.1g·L-1）：准确称取1.4060g分析纯硫酸亚铁铵[(NH4)2Fe(SO4)2·6H2O]于200mL烧杯中，加入1mol·L-1HCl，完全溶解后，移入250mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀。 B液（0.01g·L-1）：用25mL移液管，准确移取A液，置于250mL的容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，备用。 乙酸-乙酸钠（HAc-NaAc）缓冲溶液（pH=）：称取135g分析纯乙酸钠，加入120mL冰乙酸，加水溶解后，稀释至500mL。 ?=1%的盐酸羟胺水溶液，因不稳定，需临用时配制。 ?=%的邻菲罗啉水溶液：先用少许乙醇溶解后，用水稀释，新近配制。 50mL容量瓶7个（先编好1、2、3、4、5、6、7号），10mL移液管（有刻度）1支，5mL移液管（有刻度）4支，5mL量筒1个，500mL烧杯1个，洗瓶1个，洗耳球1个，小滤纸，镜头纸。 4 实验步骤 吸收曲线的绘制和测量波长的选择 用吸管吸取铁盐标准溶液(B液)于50mL容量瓶中，依次加入 HAc～NaAc缓冲液、盐酸羟胺、邻菲罗啉溶液，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。用1cm比色皿以试剂空白为参比，在450～550nm范围内，每隔10nm测量1

分光光度法测定邻二氮菲一铁_络合物的组成_

实验2 分光光度法测定邻二氮菲一铁(Ⅱ)络合物的组成 一、实验原理 络合物组成的确定是研究络合反应平衡的基本问题之一。金属离子M和络合剂L形成络合物的反应为 M + nL====MLn 式中，n为络合物的配位数，可用摩尔比法(或称饱和法)进行测定，即配制一系列溶液，各溶液的金属离子浓度、酸度、温度等条件恒定，只改变配位体的浓度，在络合物的最大吸收波长处测定各溶液的吸光度，以吸光度对摩尔比c L/c M作图，如图2-1所示。 图2-1 摩尔比法测定络合物组成 将曲线的线性部分延长相交于一点，该点对应的c L/c M值即为配位数n。摩尔比法适用于稳定性较高的络合物组成的测定。 二、仪器与试剂 1．仪器721或722s型分光光度计。 2．试剂10-3 mol·L-1铁标准溶液；100 g·L-1盐酸羟胺溶液；10-3 mol·L-1邻二氮菲水溶液；1.0 mol·L-1乙酸钠溶液。 三、实验步骤 取9只50 mL容量瓶，各加入1.0 mL10-3 mol·L铁标准溶液，1 mL100 g·L-1。盐酸羟胺溶液，摇匀，放置2 min。依次加入1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，3.5，4.0，4.5，5.0 ml。10-3 mol·L-1邻二氮菲溶液，然后各加5 mL 1.0 mol·L-1叫乙酸钠溶液，以水稀释至刻度，摇匀。在510 nm处，用1 cm吸收池，以水为参比，测定各溶液的吸光度A。以A对c L/c M作图，将曲线直线部分延长并相交，根据交

点位置确定络合物的配位数n。 四、思考题 1．在什么条件下，才可以使用摩尔比法测定络合物的组成? 2．在此实验中为什么可以用水为参比，而不必用试剂空白溶液为参比?

邻二氮菲分光光度法测定微量铁

实验一邻二氮菲分光光度法测定微量铁的条件 一、实验目的 1、掌握分光光度计的原理、构造和使用方法。 2、学习分光光度计分析中如何确定最佳实验条件。 二、实验原理 在可见光区分光光度法测量中，通常是将被测物质与显色剂反应，使之生成有色物质，然后测其吸光度，进而求得被测物质的含量。显色反应的程度受显色剂用量、显色时间，显色液酸度等条件的影响，通过实验，确定合适的显色条件。 三、仪器及试剂 分光光度计；1cm吸收池；10mL移液管； 25mL容量瓶,100ml容量瓶 1．铁标准溶液 100μg·mL-1（即0.01 mg·mL-1）铁标准溶液：准确称取0.3511g（NH4）2 Fe（SO4）2·6H2O 于烧杯中，用2 mol·L-l盐酸15 mL溶解，移入500 mL容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀。 用前，准确稀释10倍成为含铁10 ug·mL-1标准溶液。 2. 1g.L-1邻二氮菲：1.0 g邻二氮菲于小烧杯中，加入5-10ml 95%乙醇溶液溶解，再用水 稀释到1000 mL。 3. 10％盐酸羟胺水溶液：10％水溶液（现用现配，避光保存） 4. 醋酸钠溶液1mol/L 5. 0.8 mol/L氢氧化钠溶液 四、实验步骤 1、吸收曲线的制作和测量波长的选择 用移液管吸取0.0ml、2.0mL 10 ug·mL-1标准溶液，分别注入二个25 mL容量瓶中，加 入1.0mL10%的盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min；再加2 mL邻二氮菲溶液，2.5mL醋酸钠 溶液溶液，用水稀释至刻度，摇匀。放置5min后，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在 440~560nm之间，每隔10nm测一次吸光度，其中在500-520 nm之间，每隔5nm测一次吸 光度。然后以波长为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制吸收曲线，找出最大吸收波长。 2、显色剂用量影响 在7只25mL容量瓶中，各加2.0 mL10 ug·mL-1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min。分别加入0.1、0.25、0.5、1.0、2.0、3.0 、4.0ml 1g.L-1邻二氮菲溶液，再各加2.5mL 1mol/L醋酸钠缓冲溶液，以水稀释至刻度，摇匀。放置5min后，以水为参比，在510 nm测量各溶液的吸光度。 其中，加2.0 mL 1g.L-1邻二氮菲溶液的显色溶液不要倒掉，用于时间影响的测定。 3、显示时间的影响 取上述1中加2.0 mL 1g.L-1邻二氮菲溶液的容量瓶，在显色时间为10min、20min、30min、40min、50min、60min分别测定吸光度值。 4、溶液酸度的影响 在7只25mL容量瓶中，各加入2.0 mL 10 ug·mL-1铁标准溶液和1.0 mL 盐酸羟胺溶液，摇匀后放置2 min，再各分2.0ml邻二氮菲溶液，摇匀。然后，分别用移液管准确吸取加人0.8 mol·L-1氢氧化钠溶液0.0、0.5、1.0，2.0，3.0，4.0、5.0ml于容量瓶中，以水稀释至刻度，摇匀，放

铁的测定(邻菲罗啉分光光度法)

铁的测定（邻菲罗啉分光光度法） 1 量程 亚铁离子含量为5μg/L -200μg/L水样的测定。 2 仪器 上海欣茂723C可见分光光度计，波长510nm，配有100mm比色皿。 3 概要 先将高铁用盐酸羟胺还原成亚铁。在pH为4~5的条件下，亚铁与邻菲罗啉生成浅红色络合物。 4 试剂 4.1 10%盐酸羟胺溶液（重/容）：称取10g盐酸羟胺，加入少量高纯水，待溶解后用高纯水稀释至100ml，摇匀并贮于棕色瓶中，塞紧瓶塞。 4.2 0.1%邻菲罗啉溶液（重/容）：称取1g邻菲罗啉（C12H8N2·H2O）溶于100ml无水乙醇中，用高纯水稀释至1L，摇匀，贮于棕色瓶中，并在暗处保存。 4.3 乙酸-乙酸铵缓冲液：称取100g乙酸铵溶于100ml高纯水中，加200ml冰乙酸，用高纯水稀释至1L，摇匀后贮存。 4.4 铁工作溶液（1ml含1μgFe）：取铁标准溶液（1ml含100μg）10.00ml，注入1L容量瓶中，用高纯水稀释至刻度（使用时配制）。 4.5 浓盐酸（优级纯）。 4.6 浓氨水。 4.7氨水（1+1）。 4.8 刚果红试纸：试纸切成约4mm×4mm的小方块。 5分析步骤 5.1 工作曲线的绘制： 5.1.1 按表1量取一定量亚铁标准溶液（1mL含1μg Fe2+），分别注入一组50mL容量瓶中，加水稀释至30mL左右。 杯中，各加入1ml浓盐酸，加热浓缩至体积略小于25ml。冷却至30℃左右，加入1ml盐酸羟胺溶液，摇匀，静置5min，加入5ml0.1%邻菲罗啉溶液，摇匀后每个锥形瓶中各加入一小块刚果红试纸，慢慢滴加氨水调节PH至3.8～4.1，使刚果红试纸恰由蓝色转变为紫色，然后依次加入5ml乙酸-乙酸铵缓冲液。摇匀后移入原50ml容量瓶中，用高纯水稀释至刻度。在723C型分光光度计上，用波长510nm，100mm长比色皿，以高纯水为参比测定吸光度。 5.1.3 将所测吸光度值减去编号为“0”的空白值（包括高纯水和单倍试剂的空白值）后，和相应的铁含量绘制工作曲线。 4.2 水样的测定： 5.2取50ml水样于100或150ml锥形瓶或烧杯中，加入1ml浓盐酸，然后按绘制工作曲线的同样手续浓缩、发色并在分光光度计上测定吸光度。 注：1. 所用取样及分析器皿，必须先用盐酸溶液（1+1）浸渍或煮洗，然后用高纯水反复清洗后才能使用。为了保证水样不受污染，取样瓶必须用无色透明的带塞玻璃瓶。 2. 对含铁量高的水样，测定时应减少水样的取样量。 3. 如水样中含有强氧化性干扰离子，如高锰酸钾、重铬酸钾和硝酸盐等，会使发色后的亚铁邻菲罗啉络

邻二氮菲分光光度法测铁实验报告

分析化学实验报告 实验名称: 邻二氮菲分光光度法测铁 一、实验目的（略） 二、实验原理（略） 三、仪器和药品（略） 四、实验步骤 1.光谱扫描并选择测量波长 相关思考：可见光波长范围，吸收曲线，最大吸收波长（λmax）；为什么用λmax作为测量波长。 2.考查亚铁邻二氮菲配合物的稳定性 相关思考：为何考查，如何考查，设想吸光度随时间的变化趋势。 3.确定显色剂的用量 相关思考：如何确定显色剂的用量，设想吸光度随显色剂的用量变化趋势及如何根据曲线确定显色剂的用量。 4.绘制标准工作曲线 相关思考：定量测量的理论依据；选择参比液的原则；空白试剂；可信的标准曲线应满足什么要求。 5.测定未知样的含铁量 相关思考：如果未知样的吸光度值不在标准曲线内，如何解决？ 五、数据处理 1.打印吸收曲线，确定λmax。

由吸收曲线，得到亚铁邻二氮菲配合物的最大吸收波长λmax=510.00nm,此时Abs=0.775. 2.打印吸光度-时间曲线，并根据曲线讨论亚铁邻二氮菲配合物的稳定性，确定溶液的显色时间并说明依据。（略） 3.打印吸光度-显色剂用量曲线，并根据曲线确定显色剂用量并说明依据。 在吸光度-显色剂用量曲线中，吸光度随显色剂用量的增加先变大、后保持稳定。由曲线可知，当显色剂用量在3mL附近时，吸光度较大且几乎恒定。因此，显色剂用量应为3mL。 4.打印标准工作曲线，计算未知样铁的含量(mol?L-1)。

六、问题与讨论（略） 七、思考题 1.如果用配制已久的盐酸羟胺溶液，对分析结果有何影响? 配制已久的盐酸羟胺溶液还原性降低，会使二价铁浓度降低，从而使测定的含铁量降低。 2.标准溶液是用分析纯的二价铁盐配制的溶液，为什么显色时还须加盐酸羟胺溶液？ 二价铁溶液在空气中容易被氧化，加入盐酸羟胺溶液作为还原剂，可防止二价铁被氧化。 3.醋酸钠溶液的作用是什么？ 调节溶液的pH，使pH在2~9范围内，满足生成亚铁邻二氮菲配合物的条件。 4.如何选取不同的量具进行所需溶液的量取? （1）铁标准溶液： ①5.00mL：用5mL移液管或5mL吸量管； ②1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL：用5mL吸量管； （2）盐酸羟胺2mL：用可调定量加液器； （3）邻二氮菲溶液0.60mL、1.00mL、2.00mL、3.00mL、4.00mL：用5mL吸量管；（4）NaAc溶液5mL：用可调定量加液器； （5）试样溶液10.00mL：用10mL移液管。