大学生创新创业计划项目申请书
附件一：
贵州大学“大学生创新创业训练计划”
项目申请书
（2012 年）
项目名称：提高古尼虫草多糖物质的研究
项目类别：√创新训练、□创业训练、□创业实践
项目负责人：
专业名称：生物科学类
指导教师：
申报单位：生命科学学院
申报日期： 2012年3月30日
贵州大学教务处
填写要求
1．填写申请书前，请认真查阅《关于做好2010年校级、国家级大学生创新性实验计划项目组织申报工作的通知》的要求。
2．申请书按照要求，逐项认真填写，填写内容必须实事求是，表达明确严谨。空缺项要填“无”。
3．格式要求：申报书中各项内容以Word文档格式填写；表格空间不足的，可以扩展或另附纸张；均用A4纸双面打印，于左侧装订成册。
4．凡选择性栏目，请在相应的□等之上画“ ”。
5．联系单位：教务处实践教学管理中心
6．联系电话：8292071
一、基本情况
项目名称提高古尼虫草多糖物质的研究
项目类型√创新训练项目□创业训练项目□创业实践项目
项目来源□自立项目√教师科研课题的子项目□其它
项目类型√实验研究□软件制作□以实验为手段的其他类型
经费来源√学校资助□学院资助√导师课题资助□企业资助
经费额度2500元
项目实施时
间
起始时间：2012 年04 月完成时间：2013 年04 月
团队角色姓名年级学院专业联系电话E-mail 主持
人
成员
指导教师姓名
承担
课程
微生物遗传学、昆虫病原微生物资源
及其利用、昆虫病理学及病原微生物
利用方向专题讨论等
主要研究方
向
蛹虫草菌种选育
及虫草素中试生
产工艺研究
（3）红曲协同发酵提高蛹虫草子实体和虫草菌素的产量
二、立论依据
2-1项目研究内容简介
多糖广泛存在于动物、植物和微生物细胞壁中，它毒性小、安全性高、功能广泛，具有免疫调节、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗病毒、抗炎症、抗氧化、抗突变、抗菌、抗衰老等生物活性。
古尼虫草[Cordyceps gunnii（Berk.）Berk.] 是虫草菌属中一种大型虫草，主产于澳大利亚、新西兰和我国的贵州、湖南和安徽等省份。具有镇静、镇痛、调节机体免疫力、抗癌、增强记忆等多种药理作用（何劲等，2009）。古尼虫草多糖是古尼虫草的主要活性物质，具有抗癌、调节机体免疫力、抗氧化、抗衰老、增强记忆等生理活性。
本项目，拟通过培养条件的优化，对古尼虫草中多糖的含量进行研究，找出提高古尼虫草中多糖的含量的最优组合条件，为古尼虫草的研究开发利用提供科学依据。
的体液免疫功能得以恢复正常。古尼拟青霉菌丝体提取液有诱生及促诱生干扰素的作用，发挥此作用的主要有效成分是多糖；其胞外多糖和解聚后的胞内多糖具有免疫抑制的生物活性。Zhu, ZY（2009）研究表明古尼虫草水溶性多糖有较好的抗癌作用。
调节免疫力。肖建辉等（2005）也证实古尼虫草多糖解聚后能明显提高免疫活性古尼拟青霉能显著增强机体的非特异性和特异性免疫功能，对某些过敏反应又有免疫抑制作用，双向调节免疫功能，调节的药化成分可能与多糖组分有关（何劲等，2009）。
抗氧化。Zhenyuan ZHU（2011）分离出一种水溶性多糖CPS50-I，用D-半乳糖造模的老鼠模型实验，结果表明其具有显著的抗氧化活性。
抗衰老。刘安军（2008）研究表明古尼虫草多糖可提高小鼠脑组织和血清中SOD ( P< ) 和GSH-Px ( P < ) 活力，明显抑制小鼠脑组织和血清中MDA (P< ) 的形成。古尼虫草多糖有很好的抗衰老作用.
增强记忆。李淑芳（1991）、张永明（2007）等先后采用动物模型( 记忆巩固障碍与记忆再现障碍模型，进行跳台、避暗和迷宫试验)，小鼠皮下给药或灌胃方式，证明古尼拟青霉水溶性提取液、多糖和黄酮均有改善和提高小鼠记忆的功能。其原因可能是古尼多糖和黄酮能够减缓小鼠海马神经细胞凋亡，改善脑供血量，提高大脑蛋白质与超氧化歧化酶含量，降低脑中丙二醛含量等作用有关。
目前，对古尼虫草的培养研究很少，仅几篇关于古尼虫草菌丝体的培养研究，还未见对古尼虫草主要活性成分古尼虫草多糖的培养研究。本项目，拟通过培养条件的优化，对古尼虫草中多糖的含量进行研究，找出提高古尼虫草中多糖的含量的最优组合条件，为古尼虫草的研究开发利用提供科学依据。
参考文献：
[1]施松善, 王顺春. 多糖生物活性研究进展[J]. 生命科学,2011,23(7):662-670.
[2]肖建辉, 虫草发酵及其代谢产物的分离与生物活性研究[D].上海:华东理工大学,2010.
[3]梁宗琦.中国真菌志第三十二卷虫草属[M].北京:科学出版社,2007.
[4] Zhenyuan ZHU, Chuanling SI, Yueru ZHONG, Changmei ZHU, Jiaping Zhou. The purification and antioxidative activities in D-galactose-induced aging mice of a water-soluble polysaccharide from Cordyceps gunnii (berk.) Berk. Mycelium. Journal of Food Biochemistry. 2011, 35 :303-322.
[5] Zhu, ZY; Si, CL; Zhang, YM., Purification and antitumor activities of a water-soluble polysaccharide isolated from Cordyceps gunnii (berk.) Berk. mycelium, PLANTA MEDICA，2009，75 (9)，942-943,.
[6]梅德强,文庭池,梁宗琦.古尼拟青霉菌丝体多糖( MPPG )对肿瘤细胞产生免疫抑制因子的
影响[J]. 贵州大学学报,2006 , 23 ( 2) : 191-195 .
[7]何劲,雷帮星,文庭池,等.古尼拟青霉的毒理及药用价值研究概况[J]. 贵州农业科学,2009,
37(1):87~ 89.
[8]肖建辉,梁宗琦,胡锡阶,等.古尼虫草多糖及其解聚物的免疫活性[J].免疫学杂志, 2005, 2
1(1) :51-53,58.
[9]李义勇,章卫民,张亚雄.虫草的抗菌抗肿瘤活性研究进展[J]. 微生物学杂志,2009,
29(6):65-69.
[10]刘安军,祝长美,朱振元,等. 古尼虫草多糖对衰老模型小鼠的影响[J]. 现代食品科技.2008,24(3):201-203.
[11]李淑芳,鲍淑娟,韩君勇,等．古尼拟青霉药理作用研究Ⅲ．古尼拟青霉对记亿的促进作用[J].贵阳医学院学报.1991,16 (1)：45-46．
[12]张永明．古尼虫草的益智作用及其活性物质的相关性研究[D].贵阳:贵州大学, 2007.
[13]张倩,张永明,陆卫群,等.古尼虫草多糖改善小鼠学习记忆作用的研究[J].营养学报，2007, 29(4):393-395,400 .
三、项目研究基础与保障
3-1项目研究与实施基础
贵州大学生化工程中心是省级重点生化中试基地，2006年6月列入国家教育部“西南特色药用生物资源开发利用教育部工程研究中心”建设项目。拥有国内较先进的研究开发实验室：生物活性成分分离及检测技术研究室，配有较完善先进的研究开发及检测仪器设备：HPLC分析型和制备型、紫外可见分光光度计、真空旋转蒸发器、专用分离柱、超滤装置、微波提取器等20余台件。正在筹建细胞培养室、动物实验室等，有二氧化碳培养箱、小鼠自主活动测试仪等，能完成细胞、动物、组织器官等不同水平的药理实验。实验室长期从事虫草的分类、人工培养、活性物质检测、药理等方面的研究，具备实施本项目所需要的实验条件。
3-2学院、指导教师可提供的条件保障
指导老师所在的实验室，具有HPLC分析型和制备型、紫外可见分光光度计、真空旋转蒸发器、专用分离柱、超滤装置、微波提取器等20余台件。有二氧化碳培养箱、小鼠自主活动测试仪等，能完成细胞、动物、组织器官等不同水平的药理实验。实验室长期从事虫草的分类、人工培养、活性物质检测、药理等方面的研究，具备实施本项目所需要的实验条件。指导教师所在的研究团队主要是从事虫草的研究工作，完全掌握了本研究所需要的各种实验技术，因此也具备了开展本研究所需要的工作环境，所以可以指导好学生完成本项目，取得项目预期成果。
四、项目研究实施方案
4-1项目研究的目标、内容和拟解决的关键问题
一、目标
提高古尼虫草中多糖的含量，找出培养其最优培养条件。
二、内容
1.文献资料的查阅，准备。
2.古尼虫草菌株的搜集。菌株是整个实验的前体基础，有好的菌株会给后续实验打下良好的基础。
3.古尼虫草的培养。采用固体或液体发酵培养。
用单因素法依次研究不同氮源、碳源，无机盐、生长因子等营养因子对古尼虫草中多糖的含量的影响，找出最适氮源、不同碳源，无机盐、生长因子。再通过正交实验优化生产古尼虫草中多糖各营养因子的最佳配比。
4.多糖的检测。
（1）葡萄糖标准曲线的建立。
（2）多糖这制备。古尼虫草菌丝体低温烘干，60目粉碎，3热水提取，减压浓缩，乙醇沉淀，冲洗，得到古尼虫草多糖。
（3）含量测定：用苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法检测
三、拟解决的关键问题
1.有合适的菌株，这是整个实验的基础。
2.接种必须注意无菌操作。
3.多糖的检测。
4-2项目研究计划、技术线路、进展安排等实施方案（文献查阅、社会调查、实验方案设计、组织设备和材料、实施实验、分析处理数据、研制开发、撰写论文或研究报告、结题和答辩、项目鉴定、成果推广或论文发表、其他等，按所需执行环节填写）
本项目计划1年完成。具体计划及预期结果如下：
2012年1月至2012年2月：
1.项目所需文献资料、仪器设备、药品试剂等相关研究工作的前期准备。
2.菌种搜集。
2012年3月至2012年9月：
古尼虫草多糖的含量提高优化培养，找出其的最佳培养条件。
2012年10月至12月：
撰写科学论文，在国内核心期刊发表论文1篇。
五、预期成果
成果研究形式：论文、设计、产品研制、软件开发、专利、研究报告等，至少选其中一项填写
在国内核心期刊发表论文1篇,毕业论文2—3篇。
六、经费预算
支出科目
金额
（元）
预算根据及理由
资料费200 资料复印、打印
试剂费1300 培养虫草所需的试剂、检测剂等论文版面费1000 用于发表论文总计2000
七、审查意见
指导
教师
意见
指导教师签名：年月日
学院
意见
负责人签名、公章：年月日
学校
意见
负责人签名、公章：年月日
八、申请者承诺
我保证上述填报内容的真实性。如果获得资助，我与本项目组成员将严格遵守学校的有关规定，在不影响课程学习的同时，保证项目研究工作的时间，并按计划认真开展研究工作，在项目研究过程中或结束时，接受学校对本项目的中期检查和结题验收，并按时提交工作总结和结题报告。
申请者（签名）：
年月日
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推荐人签名：年月日