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应用组织芯片技术分析宫颈癌组织中Bit1基因的表达

应用组织芯片技术分析宫颈癌组织中Bit1基因的表达
应用组织芯片技术分析宫颈癌组织中Bit1基因的表达

妇科肿瘤

应用组织芯片技术分析宫颈癌组织中B it1基因的表达

滑 玮1,吕海鹏2,辛晓燕1,张 伟3

Tissue m i croarray a ssay o f Bi t1expressi on i n cervi ca l cancer

HUA W ei1,LV H ai-peng2,X I N X iao-yan1,Z HANG W ei3

1D epart m ent of O bstetrics and Gyneco logy,X ijingH o s p ital;2D epart m ent of E ndodon tics,Schoo l of Stomato l ogy;3D epati m ent of M icroor ganis m;Fourth M ilitary M e d ical U ni ver sity,X i'an710032,China.

Ab stract O bjective:To study the expression o f B it1i n cerv ical cance r and no r ma l cerv i ca l tissue.M ethod s:

T he express i on o f B it1i n84ce rv ica l cancer samp l es w as analyzed by tissue m icro array techno l ogy and i m munoh i sto

che m i stry,compared w ith that of74no r m al cervica l ti ssue sa m ples.R esu lts:T he expressi ons o f B it1w ere observed

i n66.7%and83.8%of cerv ical cancer and nor m a l cerv ica l tissue,respec ti ve l y.T here was si gnificant statistical

d ifferenc

e bet ween the expressi ons o

f B i t1i n t wo ki nds of tissues(P<0.05).T he expressi ons of B it1w ere observed

i n52.9%,78.6%and87.5%o f cerv i ca l cancer tissues of d ifferent histo log ica l grades,respecti ve l y.Statistical a

na l ysis revea l ed that t here w as si gn ifi can t d ifference a m ong the express i ons o f B it1i n t hree k i nds of cerv i ca l tissues(P

=0.028).Conc l usion:B it1expresses diff e rentl y i n cerv i ca l cancer and no r m al ce rv ica l ti ssue,t he expression of

B it1i n cerv i ca l cancer has si gn ificant relati onsh i p w it h h i sto l og ica l grade.

K ey w ords B it1;tissue m icroa rray techno l ogy;ce rv ica l cancer

M odern Onco l ogy2007,15(6):0832~0834

摘要 目的:对比研究B it1基因在正常宫颈组织和不同分化程度的宫颈癌组织中的表达情况。方法:应用

组织芯片技术,通过免疫组织化学方法检测84例宫颈癌标本和74例正常宫颈组织标本中B it1基因的表达情

况。结果:B it1基因在宫颈癌和正常宫颈组织中的表达阳性率分别为66.7%和83.8%,有显著统计学差异(P

<0.05);B it1基因在不同分化程度的宫颈癌组织中的阳性率分别为:低分化鳞状细胞癌,52.9%;中分化鳞状

细胞癌,78.6%;高分化鳞状细胞癌,87.5%。统计学分析发现,B it1基因在不同分化程度的的宫颈癌组织中

的表达存在显著的统计学差异(P=0.028)。结论:B it1基因在正常宫颈组织中的表达明显高于宫颈癌组织,

而且宫颈癌组织中B it1基因的表达与分化程度密切相关。

关键词B it1;组织芯片;宫颈癌

中图分类号R737.33 文献标识码A 文章编号1672-4992-(2007)06-0832-03

脱落凋亡是指细胞与细胞外基质粘附丧失而引起的凋亡。Jan等[1]在研究脱落凋亡调控机制的过程中,发现了一种线粒体蛋白,因其功能而命名为B it1(bcl-2i nhi b itor of transcri ption)。研究显示,胞浆内B it1浓度的升高可以明显促进凋亡的发生[2],由此可见,B it1基因与细胞凋亡有着密切的关系。细胞凋亡的失调控是肿瘤发生的重要机制之一,凋亡相关蛋白的研究对于探索肿瘤发生和发展机制有着重大的意义。

本研究拟采用组织芯片和免疫组织化学技术,检测宫颈鳞状细胞癌组织中B it1蛋白的表达情况,以初步探讨B it1在宫颈癌发生发展过程中的作用。

收稿日期 2006-08-02

作者单位 1第四军医大学西京医院妇产科,陕西 西安 710032 2第四军医大学口腔医院牙体病科,陕西 西安

710032

3第四军医大学基础部微生物学教研室,陕西 西安

710032

作者简介 滑玮(1978-),女,河南长垣人,博士,讲师,主要从事妇科肿瘤的基础研究工作。1 材料与方法

1.1 材料来源

收集第四军医大学西京医院病理科1999年~2004年间的宫颈鳞状细胞癌和正常宫颈的组织蜡块,共158例。患者年龄25岁~71岁,中位数51岁。正常宫颈组织74例,宫颈鳞状细胞癌组织84例,其中低分化鳞状细胞癌34例;中分化鳞状细胞癌42例;高分化鳞状细胞癌8例。B i t1多克隆抗体由第四军医大学生物化学教研室吴元明博士惠赠,免疫组化链霉素抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(SP法)试剂盒及羊多克隆抗体为北京中山公司产品。

1.2 组织芯片的制作

参照K ononen等[3]建立的方法应用美国B eecher阵列仪制作:将H E切片做镜下诊断并标记取样部位,应用打孔采样装置根据标记对供体组织蜡块进行采样,同时也对受体蜡块进行打孔。应用阵列仪的定位装置将供体蜡块的组织芯准确放入受体块的孔内,重复上述操作,制备出孔径、孔距、孔深完全相同的组织微阵列蜡块。通过切片、捞片后,制作成组织芯片。

1.3 组织芯片的染色

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832

!M ODERN ONCOLOGY,Jun 2007,VO I 15,NO 6

采用超敏S-P 法,一抗为B it1多克隆抗体(浓度1?100),孵育条件为4#过夜,阴性对照用PBS 代替一抗。染色具体步骤:60#烤片30m i n ,常规脱蜡水化,3%H 2O 2-甲醇封闭内源性过氧化物酶,室温10m in ,蒸馏水洗3次,以0.01M CB(p H 6.0)微波修复抗原10m in ,冷却至室温,PBS 洗5m in ,滴加正常非免疫动物血清封闭液,室温12m i n ,甩去多余液体,滴加一抗,4#过夜,0.1%Tw een -PBS 洗10m i n ?2次,滴加生物素标记第二抗体工作液,室温孵育10m i n ,0.1%Tw een-PBS 洗5m i n ?3次,滴加链霉菌抗生物素蛋白-HRP 工作液,室温孵育10m in ,0.1%Tween-PBS 洗5m i n ?3次,DAB 显色,蒸馏水洗终止显色,苏木素复染、水洗、分化后充分水洗返蓝,常规脱水透明,中性树胶封片。1.4 结果判定标准

B it 1阳性信号位于细胞浆中,呈棕褐色。参照A ust 等[4]

的标准:阳性细胞数%10%为阴性;11%~50%为弱阳性;51%~80%为阳性;&81%为强阳性。1.5 统计学方法

应用SPSS 13.0软件对实验结果进行 2检验。2 结果

2.1 B it1在正常宫颈组织及宫颈癌组织的表达 见表1

表1 B it1基因在正常宫颈组织及宫颈癌组织的表达 n B i t1基因表达阳性阴性合计阳性率%宫颈癌组织56288466.7正常宫颈组织62127483.8合计

118

40

158

74.7

注: 2=6.097,P =0.014<0.05

84例宫颈癌组织中有56例呈棕褐色弱阳性或阳性反应(图1),28例成阴性反应,阳性率为66.7%;74例正常的宫颈组织中62例呈弱阳性或阳性反应(图2),12例呈阴性反应,阳性率为83.8%。经统计学分析P =0.014<0.05,说明B it 1在正常宫颈组织和宫颈癌组织中的表达存在显著的统计学差异,

在正常宫颈组织中的表达明显高于宫颈癌组织。

图1 B i t1在宫颈癌组织中的阳性表达(?200)

2.2 B it1的表达与宫颈癌分化程度的相关性 见表2

表2 B it1基因的表达与宫颈癌病理分级的相关性分级

B it 1表达(n)阳性阴性合计阳性率%低分化鳞状细胞癌1816 3452.9中分化鳞状细胞癌339 4278.6高分化鳞状细胞癌71 887.5合计

61

23

84

72.6

注: 2检验结果:不同分化程度的宫颈癌比较, 2=7.184,P =0.028<0.05;低分化与中分化比较, 2=5.592,P =0.027<0.05;低分化与高分化比较, 2=3.210,P =0.114>0.05;中分化与高分化比较, 2=0.335,P =1.000>0.05

图2 B i t1在正常宫颈组织中的阳性表达(?200)

在84例鳞状细胞癌组织中,低分化鳞状细胞癌34例,其中B it 1基因阳性表达的有18例,阴性表达的有16例,阳

性率为52.9%;中分化鳞状细胞癌42例,其中B i t1基因阳性表达的有33例,阳性表达的有9例,阳性率为78.6%;高分化鳞状细胞癌8例,其中B it1基因阳性表达的有7例,阳性表达的有1例,阳性率为87.5%。统计学分析发现,B it1基因的表达在不同的宫颈癌病理分级中存在显著的统计学差异(P =0.028<0.05);在低分化鳞状细胞癌中的表达与中分化比存在显著的统计学差异(P =0.027<0.05)。

3 讨论

组织芯片又称组织微阵列,是将数十个、数百个乃至上千个小的组织片整齐地排列在某一载体上(通常是载玻片)而成的微缩组织切片。组织芯片是生物芯片的一种,利用组织芯片可对数百种不同的生物组织同时进行形态结构比较、基因和蛋白表达水平的定位检测,是对基因芯片和蛋白芯片的重要补充和印证。就生物芯片的高通量平行检测来说,可以说cDNA 芯片是基因表达水平上进行,蛋白芯片则是在蛋白表达的水平上进行的,而组织芯片则是在细胞和组织水平上进行的,是近年来在其他芯片技术基础上发展起来的高通量分析待测标本的一项新技术[5]。组织芯片克服了传统病理技术只能逐个组织切片进行研究的落后方法,成百上千倍的提高效率,减少时间和资金的消耗;可以同时平行地研究组织细胞形态、一个特异性基因、蛋白在几百乃至上千种疾病样本中的表达及功能状态,避免了传统技术在不同实验条件下结果的差异性,其对比性和重复性强,使信息来源可靠、确实、可以快速筛选出有预防、诊断和治疗用途的基因和蛋白分子,因而在生命科学的诸多领域均有重要价值和广泛用途[6]。

研究发现:B it1蛋白存在于线粒体中,当B it 1从线粒体中释放至胞浆,或者在细胞胞浆中表达B it 1蛋白,均可以促进相应细胞的凋亡[7]。此外Jan 等[1]在研究整合素参与脱落凋亡的过程中发现,悬浮培养时,细胞中的B it1明显高于贴壁培养时。本研究结果显示:B it 1在宫颈癌组织中的阳性表达率(66.7%)显著低于正常宫颈组织(83.8%),二者之间存在显著的统计学差异(P <0.05)。提示:宫颈癌组织中B it 1基因表达的下调可能缘于宫颈癌细胞与细胞外基质粘

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833!现代肿瘤医学 2007年6月 第15卷第6期

附力的减弱。因此,B it 1基因可能与宫颈癌发生、发展和转移密切相关,对其蛋白的研究可以为宫颈癌的预防和治疗提供一个新的思路。

本研究还发现,B it1在不同病理分级的宫颈癌组织中阳性表达率分别为52.9%、78.6%、87.5%,统计学分析显示B it 1在低分化鳞状细胞癌中的表达与中分化比存在显著的统计学差异(P =0.027<0.05);而B i t1基因在低分化鳞状细胞癌和高分化鳞状细胞癌中、中分化鳞状细胞癌和高分化鳞状细胞癌中的表达则无显著的统计学差异(P =0.114、0.335>0.05),这可能是由高分化鳞状细胞癌组织样本量较小所致。由此可见,B it1在宫颈癌组织中的表达随着分化程度的增加而明显增加,宫颈肿瘤组织分化愈差,胞浆内B it 1水平愈低,与其促凋亡的特性是一致的。

综上所述,B it1在宫颈癌组织中表达水平低于正常宫颈组织,随着肿瘤分化程度的降低,其表达水平逐渐降低。由此可见,B it1基因是与宫颈癌发生、发展密切相关的新基因,研究与其相互作用蛋白质对于探索宫颈癌的发生和转移有着重要意义。

参考文献

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VEGF-C 在宫颈病变中的表达及其与高危型HPV 感染的相关性

李艳丽,郑红兵,李允光,汪爱华

Rel a ti ons bet w een t he expressi on o fVE GF -C and hi gh ri sk HPV i n hu m an cervi ca l canc er and pre-m a li g nant l esi on

LI Y an-l,i ZHENG H ong-bing ,L I Yun-guang ,WANG A i-hua

D e p ar t m ent of O bstetr ics and Gynecology,T ongjiH o sp ital ,T ongjiM e d ical Colle ge ,H uazhong Uni versity of Science and T echno logy,W u han 430030,China .

Ab stract O bjective :To study t he expressi on of VEGF -C,h i gh risk H PV (HR -HPV )in cerv ical cance r and pre-ma li gnant lesi on,and d iscuss the ro le of the m i n occurrence and deve lop m ent of cerv i ca l cancer .M e thods :In 100cases i nc l udi ng 10cases o f no r ma l cerv ical ti ssues ,50cases of C I N and 40cases o f cerv i ca l cancer ti ss ues ,the expression o fV EGF -C w as detec ted by i m munohistoche m istry SABC assay ,and HR -H PV i nfecti on levels we re detected by H C-?be f o re ope ra tion .Resu lts :VEGF -C and HR -HPV w ere bo t h overexpressed in cerv i ca l cance r and CI N ,co m pared w ith nor m a l ce rv ica l ti ssues(P <0.05).In cerv ica l cancer sa m ples and CIN sa mp les ,the ex pression lev el of V E G F -C was positive associated w ith HR -H PV infecti on (P <0.05).Conclusion :VEGF -C m ay play v ita l roles in the tu mo ri g enesis and deve l op m ent of t he HR -HPV -related cerv ical neoplas m s . K ey w ords V EGF -C ;HPV;C I N;cervica l cance r

M odern Onco l ogy 2007,15(6):0834~0837

收稿日期 2006-09-04 修回日期 2006-10-27

作者单位 华中科技大学同济医学院附属同济医院妇产科,湖北 武汉 430030

作者简介 李艳丽(1980-),女,湖北洪湖人,硕士,主要从事妇科肿瘤的临床及基础研究。

通讯作者 郑红兵(1951-),女,湖北武汉人,副教授,硕士导师,主要从事妇科肿瘤的临床及基础研究。

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834!M ODERN ONCOLOGY,Jun 2007,VO I 15,NO 6

组织芯片与临床病理

组织芯片与临床病理 首都医科大学附属北京天坛医院张丽敏 1998 年, Konoen 等在美国 NatureMedicine 上发表了制作组织芯片用于乳腺癌 p53 基因扩增及其表达蛋白水平的研究,并首次提出了组织芯片的概念。随后 Moch 等对肾癌,Scharan 等对不同类型肿瘤, Richter 等对尿道膀胱癌的组织芯片进行了免疫组织化学和原位分子杂交等研究,使得世人对组织芯片有了进一步的认识。 一、组织芯片的概念和特点 (一)组织芯片的概念:组织芯片 (tissuechip) ,又叫组织微阵列(tissuemicroarrays , TMA), 是将许多不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一载玻片上,进行同一指标的原位组织学研究。组织芯片是生物芯片技术的一个重要分支。 组织芯片与基因芯片和蛋白质芯片一起构成了生物芯片系列,使人类第一次能够有效利用成百上千份组织标本,在基因组、转录组和蛋白质组三个水平上进行研究,被誉为医学、生物学领域的一次革命。组织芯片技术作为一项新兴的生物学研究技术,正以它绝对的优越性展示着自己的潜力。( ppt5 )图表显示的是组织芯片与基因芯片、蛋白芯片的区别。 (二)组织芯片的特点:体积小,信息含量大,获得大量结果,减少试验误差。省时、省力、经济,有利于原始蜡块的保存。 二、组织芯片的分类 (一)根据芯片上样本含量的多少:可分为低密度芯片 (<200 点 ) 、中密度芯片(200 ~ 600 点 ) 和高密度芯片 (>600 点 ) 。 目前国际上常用的 TMA 的标本量多为 60-100 个,组织片的直径在 2mm 左右。一般情况下,在直径 2mm 的组织片上有约 100000 个细胞,而直径 0.6mm 的组织片上仅有约30000 个细胞。 (二)按组织来源:可分为人类组织芯片、动物组织芯片和肿瘤组织芯片。

2016年护理资格考点:近距离后装治疗宫颈癌患者的护理措施汇总

1.下列哪项不是近距离后装治疗宫颈癌患者的护理措施 ( B ) A.1:1000苯扎溴铵冲洗阴道 B.有疼痛者不宜立即处理 C.清洁会阴部 D.宫颈癌出血者,用无菌纱布填塞 E.留观1~2小时,观察不良反应 2.全身疾病在口腔的表现哪项正确 ( B ) A.维生素 C缺乏口腔黏膜出现红斑 B.麻疹初期双颊黏膜出现中央带蓝白色的小点 C.糖尿病患者牙龈呈紫色 D.白血病患者牙龈萎缩 E.药物过敏不影响口腔黏膜 3.“六气”不包括 ( E ) A.风、湿 B.寒、火 C.暑 D.燥 E.热 4.禁忌使用鼻饲法的患者是 ( E ) A.口腔手术后 B.破伤风患者 C.昏迷患者 D人工冬眠患者 D.食管静脉曲张出血者 5.恶性肿瘤的药物止痛要点,下列哪项除外: ( C ) A.按时 B.口服 C.轻度癌痛首选弱阿片类药 D.个体化给药 6.尖锐湿疣的好发部位为: ( D ) A.仅发生于外生殖器及肛门附近的皮肤粘膜湿润区 B.好发于外生殖器及肛门附近的皮肤、黏膜湿润区 C.常发生于腋窝、脐窝、乳房及黏膜湿润区 D.乳房 7.麻醉前应用抗胆碱能药物的主要作用是: ( B ) A.减少麻醉药的不良反应,消除不利的神经反射 B.抑制唾液腺、呼吸道腺体的分泌 C.镇静,缓解焦虑 D.提高痛阈,增强麻醉镇痛效果 8.一般来说,肿瘤治疗的首选方法为: ( A ) A.手术治疗 B.放射治疗 C.化学治疗

D.生物治疗 9.大面积烧伤现场急救时,下列哪种情况需要气管切开后方可转院 ( D ) A.呼吸道烧伤 B.严重休克 C.头部烧伤 D.上呼吸道梗阻 E.心搏骤停 10.用于限制患者坐起的约束方法是 ( E ) A.加床栏 B.约束腕部 C.约束踝部 D.固定双膝 E.固定肩部 11.不适合昏迷患者口腔护理的用物是 ( D ) A.石蜡油 B.压舌板 C.弯血管钳 D.吸水管 E.治疗碗 12.颈外静脉穿刺正确的部位是 ( A ) A.下颌角与锁骨上缘中点连线上1/3处 B.下颌角与锁骨上缘中点连线上1/2处 C.下颌角与锁骨上缘中点连线下1/3处 D.下颌角与锁骨下缘中点连线下1/2处 E.下颌角与胸骨柄连线上1/3处 13.药物的血浆半衰期是指 ( B ) A.药物作用强度减弱一半所需的时间 B.血浆药物浓度下降一半所需的时间 C.药物从血浆中消失所需时间的一半 D.50%药物生物转化所需的时间 E.50%药物从体内排出所需的时间 14.患者意识不清,伴有躁动不安、错觉、幻觉或胡言乱语等精神症状,属于 ( B ) A.昏迷 B.谵妄 C.妄想 D.昏睡 E.晕厥 15.癔病性痉挛的主要表现,下列哪项是错误的 ( D ) A.抽搐 B.痉挛 C.无发作先兆 D.病理反射阳性 E.不易跌伤 16.根据内镜发展历史,胶囊式内镜属于: ( C )

组织芯片

组织芯片初步学习 13临七卓医 韦卢鑫 1330705103 组织芯片是将数十至上千个小组织整齐地排放在一张载玻片上而制成的组织切片。它分为多组织片,组织阵列和组织微阵列。组织芯片的特点是:体积小, 信息含量大, 一次性实验即可获大量结果。组织芯片可用于组织中的DNA 、RNA 和蛋白质的定位分析和检测。像普通组织切片一样, 可做HE 染色、特殊染色、免疫组织化学染色、DNA 和RNA 原位杂交、荧光原位杂交。组织芯片蜡块可做100 ~ 200 张连续切片。这样用同一套组织芯片即可迅速的对上百种生物分子标记(如抗原, DNA 和RNA)进行分析、检测。因此组织芯片技术是建立疾病, 特别是肿瘤的生物分子文库的强有力的工具。 图1 组织阵列由41 例淋巴瘤组织组成, 组织的直径是2.0 mm 图2 组织微阵列由200 多不同发展时期的膀胱癌组织组成,组织的直径是0.6 mm 组织芯片的基本制作方法:通过组织芯片制作机细针打孔的方法, 从众多的组织蜡块中采集到数十至上千的圆柱形小组织, 并将其整齐排放到另一个空白蜡块中而制成组织芯片蜡块。然后, 对组织芯片蜡块进行切片, 再将切片转移到载玻片上而制成组织芯片。 组织芯片的应用有: (1)寻找疾病基因::组织芯片与基因芯片配合使用在寻找疾病基因中有很好的互补作用。具有强大的检测基因的功能利用这些新技术,但是, 这些技术不能将原发改变的基因和继发改变的基因区分开来。换句话说, 在这些改变的基因H &E 染色部分从乙醇固定多肿瘤阵列(A ) 四个数组元素:肾癌(B ),鳞状细胞癌 肺(C )中,小叶浸润性乳腺癌(D )和结 肠癌(E )。 B-E ,x400。

组织芯片及其应用

组织芯片及其应用 【综述】组织芯片(tissue chip),也称组织微阵列(tissue microarrays),是生物芯片技术的一个重要分支,是将许多不同个体组织标本以规则阵列方式排布于同一载玻片上,进行同 一指标的原位组织学研究。该技术自1998年问世以来,以其大规模、高通量、标准化等 优点得到大范围的推广应用。 【优势】它克服了传统病理学方法中存在的某些缺陷,使人类第一次有可能利用成百上千份自然或处于疾病状态下的组织标本来研究特定基因及其所表达的蛋白质与疾病之间的相关 关系,同时克服了传统方法操作复杂、自动化程度低、检测效率低等缺点,既可以进行基础 研究,也可以进行临床研究。 【特点】准确、平行、快速、高通 【应用领域】疾病诊断、药物研究筛选、基因表达分析、基因突变的确认、基因分型、新 基因的发现 具体来看,可从以下几点详述: 1 对形态学的贡献:形态比较、特殊形态的提取,将病理切片的不同部位、不同结构同时 平行地呈现于一张芯片中,可进行较为精细的比较。 2 对分子生物学的贡献:e.g. PCR技术复杂昂贵,利用组织芯片可一次完成数百例的检测,方便快捷,也可使PCR结果更为可靠。 3 对遗传信息学的贡献:方便准确地进行DNA和RNA的定位提取:可以相对准确地提取 纯度较高的细胞群,提高DNA和RNA的丰度。 【简述操作步骤】 1 每个组织标本制作一个HE染色切片,显微镜定位标记病变部位,比较切片和石蜡切块。 2 制作空白蜡块接受供体取得的样本。 3 芯片微阵列的设计:计划好研究样本的数量。 4 构建微阵列。 5 使组织芯片表面平整,均匀压平。 【展望】组织芯片技术是一项新兴技术,涉及临床医学、分子生物学、机械制造、计算机 软件的诸多学科。需要各学科人才的通力合作,也对全科人才,全能人才提出了要求。

宫颈癌的护理常规

宫颈癌的护理常规 一、护理评估 1、术前评估: ①心理状况:对疾病的认识程度,有无焦虑、是否知晓病情、自我形象的接受程度。 ②一般评估:意识、生命体征、皮肤完整性、饮食、排泄 睡眠情况等。 ③专科评估:评估阴道流血量、颜色和状态。既往妇科检查发现、宫颈细胞学检查结果。 ④营养状况:有无贫血、消瘦、低蛋白血症等。 ⑤了解有无合并症:有无高血压、心脏病、糖尿病及慢性支气管炎等。 ⑥安全管理:评估跌倒、坠床、压疮、导管等高危因素。 2、术后评估: ①手术情况:手术方式、术中情况、麻醉情况等。 ②一般评估:意识、生命体征、皮肤完整性、静脉穿刺情况及手术带回液体(血)、镇痛泵等。 ③专科评估:如:有无腹痛,及其部位、性质、有无肛门坠胀感;有无阴道流血、流液情况,及其量、性状、有无异味等。 ④重点评估:切口敷料、引流管是否通畅、引流液的量、色、及性状。 ⑤营养状况:进(禁)食情况,有无恶心、呕吐等。 ⑥用药情况:药物名称、药物作用及不良反应等。 ⑦特殊检查结果:如病理及各种特殊检查结果等。 ⑧心理情况:焦虑、紧张、消极或悲观等各种不良的心理状态。 ⑨自理能力状况评估。 ⑩安全管理:评估跌倒、坠床、压疮、导管脱落等高危因素等。 二、术前护理: 1、心理护理: ①应建立良好的护患关系,鼓励病人说出对心理感受,给予心理支持。 ②向患者介绍治疗概况和手术成功的病例,帮助患者增强信心和安全感,保持心情舒畅。 ③告知术前术后注意事项,帮助患者以良好的心态接受手术。

2、术前健康指导:指导患者戒烟酒、练习深呼吸、有效咳嗽、床上 排便等。 3、饮食指导:术前几日进食有营养易消化饮食,术前晚半流质,次日晨禁食水,术前晚及次晨灌肠,保证肠道呈清洁。 4、常规检查:协助医师完善患者必要的化验和检查。如宫颈活检,阴道清洁度检查,还应注意心电图、B型超声及胸部x线摄片检查情况,并告知阳性检查结果。 5、常规准备: ①手术前一日遵医嘱完成抗生素皮试、备皮、备血、沐浴等。 ②手术当日晨排空大小便,更换衣服,去除身上的饰物及假牙等。 ③医护人员根据需要留置尿管,并告知留置尿管的目的。 ④测生命体征、核查手术部位、做好身份识别。生命体征如有异常及 时告知医生并记录。 ⑤遵医嘱给术前针应用,并告知用药名称及目的;待入手术室。 ⑥)阴道准备:经腹全子宫切除术者,术前3天每日用0.2%碘伏液冲洗 阴道,每日1次,共3次;手术当日须再次阴道冲洗,冲洗后拭干。 ⑦胃肠道准备:术前1天晚饭减量,进软食,22:00时后禁食;睡前予 肥皂水或生理盐水灌肠,也可用口服番泻叶水代替;手术当日晨再次灌肠,直至肠管呈清洁、空虚状态。 6、用药情况:告知病人药物名称、药物作用及不良反应等。 7、安全管理:根据风险评估结果采取相应的安全措施。 三、术后护理: 1、体位:根据麻醉和手术部位安置合适体位。 2、病情观察: ①术后30分钟至1小时观察并记录一次生命体征及液体出入量,平稳 后再改为每4小时一次。 ②密切观察切口情况,保持敷料清洁、干燥等。 ③注意保持引流管通畅:保持腹腔引流管及阴道引流通畅,认真观察 引流液量、性状及颜色。按医嘱于术后48∽72小时拔除引流管。 ④注意观察伤口渗血情况,阴道流血情况及保留导尿情况、色、量。 ⑤疼痛的护理:根据病人具体情况,及时给予止痛处理,以保证病人

组织芯片技术简述

组织芯片技术简述 摘要:组织芯片技术是近年来基因芯片(DNA芯片)技术的发展和延伸,属于一种特殊生物芯片技术。组织芯片技术可以将数十个甚至上千个不同个体的临床组织标本按预先设计的顺序排列在一张玻片进行分析研究,是一种高通量、多样本的分析工具。本文就组织芯片技术的原理、发展、特点及应用进行一个简单介绍 关键词:组织芯片原理发展特点应用 正文 一.原理 组织芯片(tissue microarray,TMA)是一种新型生物芯片技术,又叫组织微阵列。由Konanen等人于1998年建立,它建立的初衷是为了在一次实验中对大量组织样品进行平行研究。它将大量组织样本集成在一张固相载体(如石蜡块)上,可以按照预定的数量来“扩增”组织,可以结合其他技术,例如组织芯片技术可以与DNA、RNA、蛋白质、抗体等技术相结合,在基因组、转录组和蛋白质组等三个水平上进行研究。 TMA构建原理可以概括为以下四个步骤: 1.选取待研究的组织。现在人们利用组织芯片技术对人体各组织均有研究,包括肝脏,前列腺,心脏,乳房等等,据相关数据显示,在大脑组织中的应用最多。医学上常选取一些病变器官进行研究。根据制作方法来分,微阵列主要有石蜡包埋的组织微阵列和冰冻微阵列两种。 2. 经检测后标记出待研究的区域。组织微阵列的检测仪主要是高性能显微镜、荧光显微镜或共聚焦荧光显微镜。适用的检测技术有苏木精—HE染色,免疫组织化学(IHC)染色,原位杂交(ISH),荧光原位杂交(FISH),原位PCR,寡核苷酸启动的原位DNA合成(PRINS)等。 3. 使用组织芯片点样仪将标记好的组织按设计排列在空白蜡块上。首先要利用打孔机在已经标记好的靶位点上进行打孔,将组织芯转入蜡块孔中,重复操作可转入上千个样品组织芯。 4. 使用切片机对阵列蜡块进行连续切片即获得组织芯片。根据制作方法来分,微阵列主要有石蜡包埋的组织微阵列和冰冻微阵列两种。后者可以克服上述前者的多种缺陷(含醛基的化合物(可能损伤RNA或使目标抗原结构断裂或破坏抗原——抗体结合位点,另外,石蜡包埋乙醇固定过的组织也无法避免RNA降解)。 二.发展

宫颈癌相关基因DNA甲基化研究进展

宫颈癌相关基因DNA甲基化研究进展 近年研究发现宫颈癌的发生发展可能与表观遗传的改变有很大联系。DNA 甲基化是表观遗传学重要的分子机制之一。近年来,国内外对宫颈癌DNA甲基化的研究越来越多,发现多种基因在宫颈癌的发生发展中发生了甲基化修饰,且这种表观遗传学改变与宫颈病变程度有一定相关性。许多研究提出宫颈癌有关的DNA甲基化检测可能用于临床宫颈癌和癌前病变的诊断或预测。 标签:DNA甲基化;宫颈癌;生物标志物 宫颈癌(cervical cancer)是最常见的妇科恶性肿瘤之一[1-2]。传统上癌症的发生发展被视为一种遗传疾病,表观遗传学机制对于组织特异性基因表达模式的维护和正常发展十分必要,表观遗传学受到破坏将导致基因功能改变及细胞恶性转化。表观遗传学(epigenetics)是与遗传学(genetics)相对应的概念。遗传学改变是指基于基因序列改变所致基因表达水平变化,如基因突变、基因杂合丢失和微卫星不稳定等;而表观遗传学是研究不涉及DNA序列的改变,但基因表达却发生了可遗传的改变的学科。这种改变是细胞内除了遗传信息以外的其他可遗传物质发生改变的结果,且这种改变在发育和细胞增殖过程中能稳定传递。除基因组的改变外,近年研究发现宫颈癌的发生发展可能与表观遗传的改变有很大联系。表观遗传的现象很多,已知的有:DNA甲基化、组蛋白乙酰化、RNA干扰、基因组印记(genomic impriting)和DNA编辑(RNA editing)、基因沉默、核仁显性和休眠转座子激活等。其中DNA甲基化作为表观遗传学重要的分子机制之一,受到人们越来越多的关注[3-4]。基因组正常而甲基化模式改变与肿瘤的演变发展有着密切联系[5]。 1 DNA甲基化 DNA甲基化是表观遗传学和表观基因组学的重要研究内容,在调控基因表达及染色体结构方面发挥着重要作用。在哺乳动物基因组中,所谓DNA甲基化是指在DNA甲基化转移酶(DNA methytrasferase)的作用下将S-腺苷甲硫氨酸提供的甲基基团共价结合到CpG二核苷酸的胞嘧啶5’碳原子上,生成5’-甲基胞嘧啶的过程。人类基因组序列中的CpG二核苷酸分布并不均匀,主要以两种形式存在:一种分散在DNA序列中,约70%总是处于甲基化状态,可称为甲基化CpG位点,如alu等重复序列;另一种则富含CpG DNA短序列,以CpG 岛的形式存在或以大量重复序列区域存在(如着丝粒重复序列、反转录转座子元件、rDNA等)。CpG岛大小为300~3 000 bp左右,且富含非甲基化的CpG二核苷酸。这些CpG岛虽然仅占基因组DNA的1%~2%,但其通常位于基因的转录起始位点附近(启动子或第一外显子区域,人类基因启动子中的60%有CpG 岛),可能参与基因的表达调控,因而受到人们的广泛关注,特别是一些组织特异性CpG岛甲基化异常高,致抑癌基因转录失活,使抑癌基因表达沉默,而甲基化异常低,致原癌基因激活,从而诱发细胞癌变[6-7],这些已经成为肿瘤研究中的热点问题。而DNA甲基化对无CpG岛启动子的调节也很重要,如MASPIN 的组织特异性表达,其启动子无CpG岛,但表达受到DNA甲基化调控。

组织芯片的概念及原理

组织芯片的概念及原理 关键词:细胞株肿瘤细胞菌种保藏中心 ATCC 中国微生物菌种网北京标准物质网 组织芯片(tissue chip),也称组织微阵列(tissuemmroarray),该技术是将数十个甚至上千个不同个体组织标本以规则阵列方式排 布于同一载体上,进行同一指标的原位组织学研究,是一种高通量、大样本以及快速的分子水平分析工具。组织芯片的制作原理与单个切片相同,只是样本数量增加。 组织芯片的种类包括人的常规石蜡包埋样本的组织芯片、各种实验动物的组织芯片、细胞株及一些病原微生物的芯片等。在已有的石蜡包埋组织芯片的基础上,Feizo等创建了冷冻组织微阵列技术。近年来出现了一种新技术,称为下一代组织芯片技术(next-generation tissue。microarray,ngTMA),该技术将组织学专业知识与数字化病理技术及自动化组织芯片技术相结合,能精准定位所需要的组织区域或细胞类型,避免无效组织的出现,有助于肿瘤微环境中的病理学研究。 组织芯片主要用于各种原位组织技术实验中,包括常规形态学观察、各种特殊染色、免疫组织化学染色、核酸原位杂交、原位PCR、荧光原位杂交、原位RT-PCR和寡核苷酸启动的DNA合成(PRINS)等;

其次用于临床和基础的研究,如分子诊断、预后指标筛选、治疗靶点定位、抗体和药物筛选、基因和表达分析等。 组织芯片的设计应考虑组织的种类及芯片上每一样本组织片的大小。此外,组织片的大小对某一器官或组织所存在病变的代表程度如何也是考量因素。一般而言,芯片上组织样本数量越大,组织的面积越小,细胞数量也越少。在直径约为2mm的组织芯片上有约100000个细胞,而在直径为0.6mm的组织片上只有约30 000个细胞,故在组织芯片的设计中并不是组织片的数量越多越好,最常用的组织芯片的样本含量仍以60~100个为主,组织片的直径可为2mm,这样既可提供较大面积的组织进行形态学观察,又可定位和半定量观察免疫组化或原位杂交等的检测信号(图9-7-1)。

宫颈癌患者的护理查房

小讲课:子宫颈癌 一、疾病的相关知识 1.定义:宫颈癌又称子宫颈癌,系指发生在宫颈外口的原始鳞-柱交接处与生理性鳞-柱交接部所形成的移行带区的恶性肿瘤。 2.病因: 目前已明确高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是引起子宫颈癌的主要病因。 1、性行为异常:性生活年龄过早,多个性伴侣,发生子宫颈癌的危险性越高,这一点已得到许多资料证实。 2、初潮过早与多孕多产:女性经期生殖系统的抵御能力明显下降,是感染性疾病的好发期。妊娠期、产褥期妇女抵御疾病能力相对较差,多产造成的产道损伤等,都将成为宫颈疾病的易患因素。 3、卫生习惯不良:外阴清洁卫生习惯不良(如不洗外阴,不用干净的卫生巾),不洁性生活等与子宫颈癌的发生相关。 4、营养、维生素与微量元素的缺乏:某些维生素及微量元素的缺乏(如:锌、硒和维生素C)可能与子宫颈癌的发病有关。 5、生殖道感染:如单纯疱疹病毒感染,HIV病毒感染、支原体、衣原体感染等。 6、其它:吸烟、吸毒、营养不良及长期慢性宫颈炎、宫颈癌前病变未进行治疗及随访。 3.病理 1、巨检:外生型(菜花型)、内生型(浸润性)、溃疡性、颈管型; 2、显微镜检:鳞癌、腺癌、鳞腺癌。 转移途径:主要为直接蔓延和淋巴转移,血性转移较少见。 4.辅助检查 A.宫颈刮片细胞学检查:宫颈癌筛查的主要方法;

B.宫颈碘试验(不着色区为高危区); C.阴道镜检查; D.宫颈和宫颈管活组织检查:未确诊宫颈癌及宫颈癌前病变的最可靠依据。 5.处理原则 1.手术(根治性子宫切除术及盆腔淋巴结切除术)治疗:适用于Ⅰa~Ⅱa期患者; 2.放射治疗; 3.化疗。 二.护理评估,护理诊断,护理措施 Ⅰ护理评估 1身体评估 1)健康史 2)身体状况 症状:接触性出血及白带增多常为宫颈癌的最早症状。 A.阴道流血早期多为接触性出血;中晚期为不规则阴道流血。 B.阴道排液多数患者有阴道排液,液体为白色或血性,可稀薄如水样或米泔状,或有腥臭。晚期患者因癌组织坏死伴感染,可有大量米汤样或脓性恶臭白带。 C.晚期症状根据癌灶累及范围出现不同的继发性症状。由于癌症累及神经骨骼及泌尿系统,可以出现骨盆疼痛、背痛、小便出血或疼痛,进一步发展癌症累及淋巴系统及全身,可以出现下肢水肿,疲倦和消瘦。 2.心理社会评估 Ⅱ.护理诊断

宫颈组织病理学

宫颈组织病理学 ——宫颈癌前病变与宫颈癌病理 重庆市肿瘤医院病理科叶学正 「、子宫颈组织学介绍 (一)鳞状上皮 宫颈突入阴道部分为固有鳞状上皮。 基底层______ k副基底层________ 中层________ 表层 基底细胞增生:细胞层数增加,核增大无明显深染及多形性,其意义尚不明确 鳞状细胞增生:因机械刺激、激素缺乏引起,表现为细胞层数增加及角化过度,无异型。 (二)宫颈腺上皮 为内宫颈,偶可为外宫颈的高柱状分泌粘液上皮及少数纤毛上皮,并形成隐窝伸入宫颈间质中,一般深度3 mm,偶达1cm ,称为腺体”,实为盲管。 柱状细胞 储备细胞储备细胞增生 (三)移行区 指柱状上皮与鳞状上皮交界区,是CIN和鳞癌好发区;阴道镜下柱状上皮薄,毛细血管清楚呈深红色,而鳞状上皮区厚,呈浅红色。 移行区随生理及病理情况而变化,青春期前位于宫颈外口附近,而绝 经期后,移行区向上退缩达颈管内。 (四)鳞状化生 储备细胞增生------- ?不完全不成熟鳞状化生-------- ?成熟鳞状化生 鳞化发生于原表面柱状上皮区,也发生于隐窝(腺体)区。 不成熟鳞化与CIN鉴别:细胞形态一致,异型轻,核分裂少见。不成熟鳞化可出现非典型性,伴发CIN,而且是CIN发生区。 鳞化是一个不可逆过程,既是一生理过程,又与炎症及内环境改变有关。 (五)子宫颈间质

浅层有粘膜相关淋巴组织,巨噬细胞及Lan gerha ns细胞;上皮下间质富于毛细血管网,有淋巴管,间质主要由平滑肌,纤维组织构成。 、HPV感染病理组织学及与CIN及宫颈癌 HPV感染通过性传播,易累及化生鳞状上皮,并复制,繁殖,释放病毒, 高危HPV与CIN及宫颈癌,尤其是鳞状细胞癌的相关性已在全球得到公认。 (一)三种实验方法对HPV检出率的比较[sato等] 目前认为杂交捕获试验能够检出近种基因型,是检测 的最好方法,原位杂交可用于组织切片,优点是可定位。 (二)HPV感染的组织学 1. 挖空细胞形成(koilocytosis)及挖空细胞非典型性(koilocytoticatypia) 表层或中层鳞状细胞有轮廓清楚的核周空泡形成,核大、核膜起皱、呈葡萄干样、核深染、染色质缠结成窜,可见双核、多核细胞及巨核细胞,与高危HPV感染有关。不要将糖原积聚的透亮胞浆鳞状上皮及绝经后出现的核周空晕鳞状上皮误认为挖空细胞。 2?有少部分HPV感染细胞唯一异常表现为核的增大。 3?糖原缺乏区鳞状上皮胞浆噬酸性,棘层肥厚,角化不全或角化过度。 4.乳头状瘤样病变,见于尖锐湿疣。 (三)HPV感染与CIN及宫颈癌病理诊断 1. 挖空细胞在CIN-1中常见,在CIN-2及CIN-3中少见。 不要将挖空细胞的非典型性过诊断。 2. H PV感染并有CIN的特征为:基底细胞非典型性,成熟结构紊乱,分裂象多见及可见病理性核分裂象。 3. 高危HPV与CIN及鳞癌的相关性已确认;在原位腺癌、浸润性腺癌及腺

宫颈癌患者的护理查房

宫颈癌患者的护理查房 一、疾病的相关知识 1.定义:宫颈癌又称子宫颈癌,系指发生在宫颈阴道部或移行带的鳞状上皮细胞及宫颈管内膜的柱状上皮细胞交界处的恶性肿瘤。 2.宫颈癌的病因: 目前已明确高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是引起子宫颈癌的主要病因。 1、性行为异常:性生活年龄过早,多个性伴侣,发生子宫颈癌的危险性越高,这一点已得到许多资料证实。 2、初潮过早与多孕多产:女性经期生殖系统的抵御能力明显下降,是感染性疾病的好发期。妊娠期、产褥期妇女抵御疾病能力相对较差,多产造成的产道损伤等,都将成为宫颈疾病的易患因素。 3、卫生习惯不良:外阴清洁卫生习惯不良(如不洗外阴,不用干净的卫生巾),不洁性生活等与子宫颈癌的发生相关。 4、营养、维生素与微量元素的缺乏:某些维生素及微量元素的缺乏(如:锌、硒和维生素C)可能与子宫颈癌的发病有关。 5、生殖道感染:如单纯疱疹病毒感染,HIV病毒感染、支原体、衣原体感染等。 6、其它:吸烟、吸毒、营养不良及长期慢性宫颈炎、宫颈癌前病变未进行治疗及随访。 3.宫颈癌的临床表现: 宫颈癌最初的症状可以出现不规则阴道出血,主要表现为: A非经期的阴道流血; B接触性出血:性生活过程中出血或疼痛; C绝经后阴道出血。 晚期症状主要有:阴道排出难闻的分泌物。由于癌症累及神经骨骼及泌尿系统,可以出现骨盆疼痛、背痛、小便出血或疼痛,进一步发展癌症累及淋巴系统及全身,可以出现下肢水肿,疲倦和消瘦。 二.护理诊断,护理措施,护理评价: I.护理诊断 恐惧:与宫颈癌诊断及可能的预后不良有关。 疼痛:与晚期病变浸润或广泛性子宫切除术后创伤有关。 排尿异常:与宫颈癌根治术后影响膀胱正常张力有关。 营养失调:与阴道流血,癌症消耗有关。

乳腺癌组织芯片的应用与HER-2neu的表达

收稿日期:2004-03-04 作者简介:官 静(1975-),女,湖北武汉人,硕士研究生,主要从事肿瘤病理的研究。 乳腺癌组织芯片的应用与HER 22/neu 的表达 官 静,刘丽江 (江汉大学医学与生命科学学院病理学与病理生理学教研室,湖北武汉430056) 摘 要 目的:构建乳腺癌及乳腺癌-良性病变组织微阵列,研究HER 22/neu 在原发性乳腺癌和乳腺良性病变中的表达并探讨HER 22/neu 的判断标准。方法:制作乳腺癌-乳腺良性病变组织微阵列(tissue microarray )。用免疫组织化学方法检测HER 22/neu 在180例乳腺癌,32例乳腺良性病变组织中的表达。结果:构建乳腺癌及乳腺癌-乳腺良性病变组织微阵列4个,180例乳腺癌中HER 22/neu 阳性率为37.78%(68/180),32例乳腺良性病变不表达。乳腺癌组织中HER 22/neu 的过表达率显著高于乳腺良性病变组织(P <0.05)。结论:乳腺癌-乳腺良性病变组织微阵列的建立使乳腺癌相关基因及其蛋白产物的筛选工作简便、快捷。HER 22/neu 的过表达与乳腺癌的发生密切相关。 关键词:乳腺癌;组织微阵列;HER 22/neu 中图分类号:R730.2 文献标识码:A 文章编号:100921777(2004)022******* 组织微阵列/组织芯片技术(tissue microarray or tissuechip )是最近伴随基因芯片技术发展起来的一 种新方法,可在一张玻片上一次性完成几百例以上的临床组织标本的基因及其表达的分析,是快速、经济地大规模筛查组织中基因结构改变、表达异常的强有力工具[1]。目前国内用这种技术进行基因表达研究的报道尚不多见。 乳腺癌HER 22/neu 基因的过表达是临床治疗的重要客观依据。石蜡切片HER 22/neu 基因表达的免疫组织化学检测是否能作为治疗的依据,尚有不同的意见。为进一步明确HER 22/neu 基因表达与乳腺癌治疗的相关性,构建了乳腺癌-乳腺良性病变组织微阵列,并结合免疫组织化学法检测了180例乳腺癌及32例乳腺良性病变组织标本中HER 22/neu 基因的表达,在高通量、高标准化分析 的前提下,探讨HER 22/neu 基因表达与乳腺癌的关系及评价的方法。 1 对象与方法 1.1 对象 收集经病理学确诊的乳腺手术标本共265例。其中105例乳腺癌,48例乳腺良性病变标本来自江 汉大学附属医院及其它医院1998~2003年乳腺手术标本,112例乳腺癌标本由北京友谊医院病理科提供。乳腺癌患者年龄31~72岁,平均年龄47.6岁。乳腺良性病变患者年龄16~65岁,平均年龄36.5岁。全部组织标本获取前均未经放疗和/或化 疗。所有组织均经10%缓冲福尔马林固定,石蜡包埋。 1.2 乳腺癌-乳腺良性病变组织微阵列的制作 将蜡块制成5μm 厚HE 染色切片,在低倍镜下用油性笔标出目标区域。并在相应蜡块上做出标记,这些蜡块称为供体蜡块(donor bloke )。制作硬度适中的受体蜡块(35mm ×27mm )。用组织微阵列仪(Microarrayer ,美国B EECHER INSTRU 2M EN TS 公司产品)从265例乳腺手术标本的供体 蜡块中分别提取直径为0.6mm 或2.0mm 的组织芯,插入到受体蜡块中制作成组织微阵列4个。其一为乳腺癌-乳腺良性病变组织微阵列(直径0.6mm ,包括乳腺癌组织样本41例,乳腺良性病变样本48例),其余为乳腺癌组织微阵列,分别包括乳腺癌 组织样本64例(直径0.6mm ,),65例(直径2.0mm )及47例(直径2.0mm )。然后将制成的阵列放 入37℃温箱中20min 使组织与受体蜡块结合紧密。 第32卷 第2期江汉大学学报(自然科学版) Vol.32 No.2 2004年6月Journal of Jianghan University (Natural Sciences )J un.,2004

宫颈癌病人的护理

宫颈癌病人的护理 宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤。宫颈癌以鳞状细胞癌最为多见,其次为腺癌和鳞腺癌。子宫颈癌病变多发生在宫颈外口的原始鳞柱交接部与生理性鳞柱交接部间所形成的移行带区。 子宫颈癌的癌前病变称为宫颈上皮内瘤样变,其中包括宫颈不典型增生及宫颈原位癌。子宫颈癌有较长的癌前病变阶段,宫颈细胞学检查可使子宫颈癌得到早期诊断,早期治疗。 宫颈癌的组织发生和发展 一、病因 宫颈癌病因目前尚未完全明确,国内外大量临床和流行病学资料表明: 早年性生活、早育、多产、宫颈慢性炎症以及有性乱史者发病率明显增高; 宫颈癌的发病还与经济状况、种族和地理因素有关; 近年来大量的研究表明,人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌发生的主要危险因素。 只有高危型HPV感染,同时在吸烟、长时间口服避孕药、激素、性传播性疾病等其他辅助因素的影响和协同下才有可能发生宫颈癌。 二、临床表现 (一)症状 1.接触性出血早期表现为同房后出血或双合诊检查后出血,以后可出现月经间期出血或绝经后出血, 晚期出血量可增多,甚至癌肿破坏大血管造成大出血。 2.排液多发生在阴道出血后,早期量少,呈白色或淡黄色,随肿瘤组织的破溃可产生浆液性的分泌 物;晚期可出现脓性分泌物或米汤样恶臭排液。 3.疼痛为晚期的症状,由于侵犯宫旁组织和神经,可出现严重持续性腰骶部或坐骨神经痛。病灶压 迫输尿管或直肠,可出现尿频、尿急、肛门坠胀等。 4.晚期由于病变广泛,可因静脉、淋巴回流受阻致输尿管积水、尿毒症。长期疾病消耗可出现恶病质。 (二)体征 早期无明显症状,随着宫颈癌的生长发展,宫颈局部可出现以下4种体征: (1)外生型:宫颈表面有息肉样或乳头样赘生物向外生长,形成菜花状; (2)内生型:宫颈肥大、质硬,表面光滑或有轻度溃疡,宫颈段膨大如桶状; (3)溃疡型:癌组织脱落出现凹陷性溃疡或如火山口样空洞; (4)颈管型:病灶隐蔽在宫颈管,是由特殊的浸润性生长扩散到宫颈管,病灶浸润阴道壁时可形成冰冻骨盆。 三、辅助检查 1.宫颈刮片细胞学检查是宫颈癌筛查的主要方法。 2.宫颈和宫颈管活体组织检查是确定宫颈癌前病变和宫颈癌的最可靠方法。 3.宫颈碘试验在碘不染色区取材活检可提高诊断率。 4.阴道镜检查、造影、膀胱镜、直肠镜检查有助于确定癌肿临床分期。 确诊宫颈癌最可靠的辅助检查方法是

组织芯片的应用

组织芯片应用 细胞表型分析 用组织芯片技术可以对细胞进行高通量免疫表型分析。用标准的免疫组化法对组织芯片上的数百甚至上千例各种不同的肿瘤组织标本进行各种指标的检测,不但可用于发现这些指标与肿瘤的诊断、鉴别诊断和预后密切相关,而且与完整的大组织切片相比,不同部位点样构建的组织芯片便可以提供一个可靠的高通量免疫组化表型分析系 统。 与基因芯片联合应用 用组织芯片技术也可以同时进行数种或数十种基因扩增、表达的检测,可用于发现各种组织样本中各种基因的调控,再根据这些不同的调控情况得出有价值的实验结果。 用于新基因靶点筛选 组织芯片技术亦可用于寻找治疗肿瘤的新靶点。用组织芯片对每个候选基因进行分析可以发现最有潜力成为新药或抑制剂的靶基因,或发现原癌基因或编码信号转导分子的新基因。如果某种特殊基因过度表达或在许多肿瘤中表达增强,则此基因即可作为一种重要的靶基因,那么干扰这种基因的表达或其表达产物功能的物质可能就是极有潜力的新药。所以,肿瘤组织芯片特别适合于研制抗肿瘤药物时先对靶基因进行选择。 缩微组织学和病理学图谱 根据需要可制备各种缩微组织学和病理学图谱。如制备各种正常组织芯片、各种病理类型的肿瘤组织芯片、同一系统中的各种肿瘤组织芯片、少见肿瘤组织芯片、疑难病例组织芯片、各种炎症组织芯片、各种寄生虫组织芯片以及胚胎发育组织芯片。可用于进修、学习、存储和进行对比研究等。 基因扩增分析 用组织芯片技术也可以同时进行数种或数十种基因扩增、表达的检测,可用于发现各种组织样本中各种基因的调控,再根据这些不同的调控情况得出有价值的实验结果。 抗体筛选 在各种疾病研究中,疾病相关抗体和探针是必不可少的研究工具,其特异性敏感性对研究结果影响巨大。对抗体和探针测试的基本方法就是用大量不同来源的阳性和阴性组织进行检查。对此,传统病理学方法需做大量单一切片。如果采用组织芯片技术,一次实验即可完成。现在组织芯片技术已经成为生物制品公司、病理医生和研究者筛选抗体和探针的必备工具。 用于个体化肿瘤治疗 组织芯片可用于筛选大量的肿瘤组织标本来确定哪些肿瘤应采取何种治疗方式。如对乳腺癌进行HER-2基因的筛选,高表达或者扩增的患者Herceptin 治疗将有良好的效果。 图表 1食道癌免疫组化胞核染色图 图表 2免疫组化胞浆染色图 图表 3免疫组化胞核染色图 图表 4肿瘤HE 染色图 图表 5乳腺癌FISH 图 图表 6前列腺免疫组化胞膜染色图 图表 7肺癌免疫组化胞 膜染色图

宫颈癌病人康复指导

宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤,近年来其发病有年轻化的趋势。目前治疗方案以手术和放射治疗为主,亦可采用中西医综合治疗。正确的护理可以帮助患者尽快康复,相反,则有可能会给患者的病情带来影响,所以掌握此病的护理技巧才是关键。那么,宫颈癌病人康复指导有哪些呢? 1、宫颈癌手术后,最伤脑筋的便是排尿障碍。可出现尿意丧失或排尿困难等症状,即或能排尿也多半会有相当数量的残余尿存在。此时,则应每日多次测量残余尿,观察经过。经过数日的训练,即或没有尿意也可逐渐恢复自己排尿的功能,残余尿可日渐减少。有的患者在手术后数周内还不能自己排尿,也不要惊慌,应在主治医生指导下进行训练,必定能逐步恢复自我排尿功能。 3、夫妻生活需要丈夫的合作。宫颈癌手术后约两个月,手术创口多已完全愈合,可以过性生活。然而由于担心是否会伤及手术创口,多存在着恐惧心理,因而做丈夫的应该很好地理解体谅这种心情,不论在肉体上或精神上都应给予多方面体贴关注,等待同意后再开始性生活,不能勉强行事。 4、宫颈癌化疗时,饮食调养以健脾补肾为主,可用枸杞、莲藕、山药粉、苡米粥、阿胶、甲鱼、动物肝、胎盘、木耳、香蕉等食物加以调养。若出现恶心、呕吐、食欲不振等消化道反应时,应以健脾和胃的膳食调治为主,如姜汁、蔗汁、乌梅、香蕉、金橘等食物都可起到疗效。 5.中医药康复护理,坚持定期复查及服用益气补肺、清热抗癌的中药数年。宫颈癌中医中药治疗方法没有明显副作用,患者易于接受,对于晚期失去西医治疗机会的患者可采用中医方法进行治疗。宫颈癌中医治疗讲究标本兼治,对于患者来说,更好的改善了患者的症状,减少了并发症的发生,减轻了患者的痛苦。而且从控制肿瘤上来说,能起到提高见效速度,控制肿瘤生长,全面控制肿瘤发展,从根本上抑制癌肿。 郑州希福中医肿瘤医院“三联平衡疗法”的抗癌效果非常明显,特别是对于一些中晚期或者是病情较为严重的患者,坚持“三联平衡疗法”治疗可明显改善患者的体质,提高患者的生活质量,延长患者的生存期限,赢得了患者的认可。 中医三联平衡疗法是由著名的中医肿瘤专家袁希福教授根据30年的抗癌经验,在先辈们阴阳平衡疗法的基础上,将传统中医药理论与当代免疫理论、细胞分化增殖周期理论及基因理论等最新医学理论有机嫁接,融会贯通而创立的中医治疗肿瘤的方法。该疗法具备中医药”清热解毒、活血化瘀、扶正固本、软坚散结、以毒攻毒”等优势,并通过反复的临床实践应运而生。 袁希福三联平衡疗法治疗宫颈癌具有以下优势 一、对人体失调的生理功能具有双向调节、抑杀癌细胞的优势,使肿瘤逐渐缩小消失,防止其扩散和转移;

宫颈癌相关易感基因研究进展

宫颈癌相关易感基因研究进展 发表时间:2018-08-24T13:33:54.723Z 来源:《航空军医》2018年12期作者:吕青松 [导读] 文中就近年来有关内源性易感基因与宫颈癌相关性的研究进展进行综述,以期为宫颈癌的早期临床诊断和治疗提供新的思路。(永州市中心医院北院检验科湖南永州 425006) 摘要:研究证实持续的高危型人乳头瘤病毒(HPV)感染是宫颈癌发生的主要原因,而大量HPV感染者最终仅有极少数人会发展为宫颈癌,HPV的高感染率与宫颈癌实际发病率存在明显的差异,说明持续的高危型HPV感染仅仅只是宫颈癌发生的必要因素,遗传易感因素在宫颈癌的发生亦起到了不可忽视的作用。文中就近年来有关内源性易感基因与宫颈癌相关性的研究进展进行综述,以期为宫颈癌的早期临床诊断和治疗提供新的思路。 关键词:宫颈癌;易感基因 Abstract::Research suggests that persistent high-risk type HPV infection is a major cause of cervical cancer occur,but in a large number of HPV infection only a small number of people will eventually develop into cervical cancer,there are significant differences between the high rate of infected HPV and the actual incidence of cervical cancer,suggests that persistent high-risk type HPV infection factors only necessary for cervical cancer occurrence,the predisposing genes in cervical cancer also played a considerable role.This paper reviews the recent advances in the correlation between predisposing genes and cervical cancer in order to provide new ideas for early clinical diagnosis and treatment of cervical cancer. Key words::cervical cancer、predisposing genes 前言 宫颈癌是一种常见的女性恶性肿瘤,据统计大概80%的病例发生在发展中国家[1]。目前我国宫颈癌的整体发病情况不容忽视,年新增病例约9.6万例,占世界宫颈癌新发病例的18%左右,其中死亡病例约2.6万例。同时,近年来的调查显示宫颈癌的发病率有年轻化发展的趋势,因此防治工作刻不容缓。 目前有关宫颈癌的病因学研究取得较大成果,高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌发生的必要条件已经在学术界达成共识,但是癌症的发生发展是一个相当漫长且复杂的生物学过程,期间涉及的因素众多;最近的流行病调查资料显示,高危型HPV(HR-HPV)感染率高达15-40%,而宫颈癌的发病率仅为15/10万左右,提示大部分的HR-HPV感染最终并没有发展成宫颈癌[1]。因此,可以推断宫颈癌的发生应是内部遗传因素与外部生活环境的致癌因素共同作用的结果,外围环境的致癌因素主要有HPV病毒感染、性活动、经济卫生条件、膳食失衡以及婚育状况等,宿主内在因素主要以遗传基因为主[2]。即使处于完全相同的环境致癌因素中的不同个体,最终发展成宫颈癌的概率依然会因为个体遗传因素的差异而不同,遗传易感性先于环境致癌因素而存在,因此,寻找可遗传的宫颈癌易感基因亦可作为宫颈癌防治、筛查的有效方式,本文详细综述了当前已有报道与宫颈癌相关的易感基因。 1、叶酸代谢酶(MTHFR)基因 叶酸是一种水溶性维生素,作为一碳单位的供体,在蛋白质、DNA、RNA的合成以及DNA 甲基化等生命活动过程中起着非常关键的作用,是所有上述生化反应过程的限制因素。报道显示,缺乏叶酸或其代谢功能出现异常会增加宫颈上皮内瘤变(CIN)甚至罹患宫颈癌的风险,而持续服用叶酸制剂可改善宫颈上皮异常[3 ]。由于MTHFR是叶酸活化过程中的关键酶,因此该基因突变会降低叶酸代谢酶的生物活性,进而影响细胞内正常DNA的合成和甲基化,结合外部环境因素诸如HPV感染、吸烟、叶酸水平、饮酒及原癌基因的交互作用从而整体上改变个体对宫颈癌的易感性。 MTHFR基因位于1号染色体的短臂上(1p36.3),该基因总长约20kb,包含11个外显子和10个内含子。截至目前为止,共20多个突变位点被发现,其中1298A→C和677C→T被认为与人类疾病关系较为密切[4]。同时据已完成的分子流行病学调查显示MTHFR基因多态性亦与宫颈癌的发生有相关性。Mohammad Shekari[5]等研究发现MTHR基因多态性与北印度妇女子宫颈癌的发生风险有关,暗示该基因可能是妇女宫颈癌发生的易感基因。孙海魁等研究发现MTHFR 基因突变与 HPV16 E6基因协同作用可整体提高宫颈癌的发病率,但该结论被认为还需要进一步进行验证;Zhu等[6]以白种人和亚洲人为群体对MTHFR 677TT基因型和CC基因型进行Meta分析研究,该研究统计了13种MTHFR基因多态性(共计1936例患者)与宫颈癌关系的相关性,结果发现,某种类型MTHFR基因多态性是亚洲人宫颈癌的易感基因型,但却是白种人的宫颈癌保护基因。另外,Botezatu 和Agodi等[7]的研究间接验证了Zhu的研究结果,他们分别在研究罗马尼亚妇女和西西里妇女的宫颈癌易感基因时得到相同的结论,他们发现MTHFR基因是罗马尼亚妇女宫颈癌的易感基因,而在西西里妇女的研究中得到相反的结果。因此关于MTHFR基因与宫颈癌易感性关系还需更加深入的探讨与研究。 2、DNA甲基转移酶1基因 DNA甲基化是指甲基团在DNA甲基转移酶(DNMT)的作用下添加到胞嘧啶并形成5-胞嘧啶的过程,属于共价化学修饰过程,可对基因的表达进行调控并保护DNA位点不受限制酶切降解;现有研究表明,基因的转录必须在核苷酸没有被甲基化的状态下进行,异常的核苷酸甲基化会影响基因的正常转录。正常情况下原癌基因由于发生了甲基化而一直处于受抑制状态,如果DNMTS发生功能紊乱,可造成原癌基因未能甲基化而被激活,并最终会引发癌变的可能。DNA甲基化转移酶1(DNMT1)作为DNA甲基化转移酶家族的主要成员是维持和调节基因组DNA甲基化的关键,诸多报道显示DNMT1基因多态性与宫颈癌易感性有关。 Luczak等[8]研究发现在宫颈癌及其癌前病变组织细胞中DNMT蛋白表达上升;Au Yeung等[9]的研究发现HPV-16 E6基因可通过 P53/DNMT1信号通路影响宫颈癌的发生;王金桃等[10-11]在研究叶酸缺乏与DNMT1基因在宫颈癌中关系时发现,DNMT1基因的高表达或低水平的血清叶酸均可增加宫颈癌和癌前病变的发病风险,该研究还发现HPV16感染与DNMT1基因功能异常对宫颈癌的发生可能有协同效应。王玲等[12]通过采用病例对照研究法比较不同DNMT1基因型与宫颈癌的发生关系发现确诊为宫颈癌患者的DNMT1基因突变频率高于对照组,且携带突变等位基因C(TC+CC)的个体发生宫颈癌的风险增加了1.985倍,表明DNMT1基因多态性增加了宫颈癌易感性。 3、基质金属蛋白酶MMPs 基质金属蛋白(MMPs)家族成员多达26种,是一类能够降解胞外基质成分的水解酶,可参与调节细胞粘着、胚胎发育、组织创伤修

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