身体求教的标记
身体求教的标记
不管男女,如果身上出现这4个“标记”,赶快去医院,肝癌已经来了!
人体五脏六腑对于人体来说有着非常重要的作用，当然肝脏也不例外。肝脏在人体中承担着排毒的重要工作，因此它可以说是人体监测站，只有对人体有益的物质才能通过，而对人体有害的物质则会被它排除体外。因此如果肝脏受到了损害，那么肝脏的排毒功能将会受到影响，从而导致肝脏内的毒素越来越多，最后导致各种肝脏疾病的入侵，而肝脏疾病中令人谈声色变的就是肝癌。
不管男女，如果身上出现这4个“标记”，赶快去医院，肝癌已经来了！
1、蜘蛛痣
生活中有很多人身上都会长出一些痣，这属于正常现象，但是如果这些痣出现了异常，那么应该引起高度重视。如果身上出现了像蜘蛛一样的痣，很可能肝癌已经找上你了，导致身上长出蜘蛛痣，出现这种情况应该及时到医院接受检查和治疗。
2、手掌红肿
正常人的手掌都是白色带一点红色，而且手掌也不会出现红肿的现象。如果发现自己的手掌出现红肿的现象，很可能肝脏功能严重受损，肝癌已经在向你招手了，应该及时到医院接受检查和治疗。
3、血痣
身上长血痣是肝病患者最常见的一种症状，由于肝癌的降临导致肝脏功能严重受损，肝脏内的毒素无法正常排出体外，从而在皮肤上形成血痣。出现这种情况应该及时到医院诊治。
4、手指甲变黑
正常人的手指甲都是白里透红的，如果发现手指甲颜色变黑了，那么应该提高警惕，很可能肝脏内的毒素堆积过多，导致肝癌的入侵，从而引起手指甲变黑，出现这种情况应该及时到医院检查和治疗。
分子生物学
分子标志物：指可以反映机体生理、病理状态的核酸、蛋白质（多肽）、代谢产物等生物分子。 DNA结构： DNA的二级结构是双螺旋结构：DNA分子由两条相互平行但走向相反的脱氧多核苷酸链组成，两链以-脱氧核糖-磷酸-为骨架，以右手螺旋方式绕同一公共轴盘。螺旋直径为2nm，形成大沟(major groove) 及小沟(minor groove)相间。碱基垂直螺旋轴居双螺旋内側，与对側碱基形成氢键配对（互补配对形式：A=T;G=C）。相邻碱基平面距离0.34nm，螺旋一圈螺距3.4nm，一圈10对碱基。 DNA的三级结构是超螺旋结构：DNA双螺旋链再盘绕即形成超螺旋结构。正超螺旋(positive super coil)盘绕方向与DNA双螺旋方同相同负超螺旋(negative super coil)盘绕方向与DNA双螺旋方向相反。 原核生物DNA的是环状超螺旋结构 核小体(nucleosome) 是染色质的基本组成单位，由DNA和蛋白质构成。组蛋白：H1、H2A、H2B、H3、H4 RNA结构： 一级结构：核苷酸连接方式同DNA。RNA的一级结构即指核苷酸的连接方式、数量和排列 方式。 主要结构特征：①含有稀有碱基（修饰碱基）；②不遵守Char gaff原则；③多数为单链分子，形成链内双链二级结构（发夹结构）；④碱基配对：A-U，G-C。 t RNA二级结构：DHU环反密码环额外环 TΨC环氨基酸臂 t RNA的三级结构是倒L型 t RNA的功能：活化、搬运氨基酸到核糖体，参与蛋白质的翻译。 m RNA的结构与功能: 1）基本特点：含量低（约占总RNA的1%～5%）；种类多（上万种）；分子大小差异大（几百～约2万个核苷酸）；半衰期短。 2）结构特点：编码区——决定蛋白质的一级结构，包括起始密码子、终止密码子、外显子。非编码区——与蛋白质生物合成的调控有关，包括5′非编码区（帽结构、核蛋白体识别结合位点等）、3′非编码区（多聚腺苷酸尾）、间隔序列（内含子）。大多数真核m RNA 的5′末端均在转录后加上一个7-甲基鸟苷，同时第一个核苷酸的C′2甲基化，形成帽子结构m7GpppN-。大多数真核m RNA的3′末端有一个多聚腺苷酸(poly A)结构，称为多聚A尾3）功能：作为蛋白质合成的模板。 帽子结构和多聚A尾的功能：m RNA核内向胞质的转位、m RNA的稳定性维系、翻译起始的调控 增色效应：核酸分子在变性过程中，其溶液的A260会增大，此现象称为增色效应。 融解温度（Tm）：DNA分子热变性程度达到50%时所对应的温度，称为融解温度或解链温度。 Tm的影响因素： ①DNA分子的碱基组成Tm与DNA分子碱基组成的关系 AT富集区先解链，GC富集区后解链。 ②溶液的离子强度一般情况下，在低离子强度溶液中，DNA的Tm较低， 且解链温度范围较宽；在高离子强度溶液中，Tm较高，解链温度范围较窄。 ③ pH 一般情况下，核酸溶液的pH在5~9范围内，DNA的Tm变化不明显；当溶液的pH<4或>11时，DNA的Tm会降低。
荧光标记二抗的选择
荧光标记二抗的选择 荧光标记二抗的选择-FITC/Rhodamine/Texas Red/Cy/PE/AMCA 一般来讲，耦联到二抗上的探针主要有酶(辣根过氧化酶HRP和碱性磷酸酶AP 或其衍生物APAAP，PAP)，荧光基团(FITC, RRX, TR, PE, Rhodamine)和生物素。选用哪种探针的二抗主要取决于具体的实验。对于Western Blot和ELISA，最常用的二抗是酶标二抗；而细胞或组织标记实验(细胞免疫化学，组织免疫化学，流式细胞术)中通常使用荧光标记的二抗。如果想要更大程度的放大检测信号，可以使用Biotin/Avidin检测系统。其中荧光素是具有光致荧光特性的染料，荧光染料种类很多，目前常用于荧光标记二抗有以下几种： 【异硫氰酸荧光素-Fluorescein Isothiocyanate (FITC)荧光标记二抗】 FITC纯品为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水和酒精溶剂。FITC分子量为389.4，最大吸收光波长为490～495nm，最大发射光波长为520～530nm，呈现明亮的黄绿色荧光。FITC在冷暗干燥处可保存多年，是目前应用最广泛的荧光素。由于FITC是小分子化合物，每一个抗体可标记几个FITC分子，IgM通常用小分子的荧光素标记，如FITC、Cy3/5、Texas Red等。FITC荧光二抗主要优点是人眼对黄绿色较为敏感，通常切片标本中的绿色荧光少于红色。然而FITC的最大缺点是淬灭快，因此要和抗淬灭剂一起使用。 【四甲基异硫氰酸罗丹明-Tetramethyl Rhodamin Isothiocyanate(TRITC)，Rhodamine Red-X(RRX), Texas Red(TR)荧光标记二抗】 这些罗丹明的衍生物耦联基团具有不同的吸收波长(550, 570, 596nm)和最大发 射波长(570, 590, 620nm)。尽管TRITC经常和FITC一起在双标记实验中使用，使用RRX和TR可以得到更好的颜色区分。在使用装有氪氩灯的激光共聚焦扫描显微镜作三标记的实验时，RRX尤其有用，可以和Cy2(或者FITC)和Cy5一起使用，因为RRX的发射波长在Cy2和Cy5中间，而且和这两者覆盖都很少。氪氩灯激发光为488nm，598nm和647nm，分别是Cy2(FITC), RRX和Cy5的理想激发波长。因为FITC和PE可以被氩灯的488nm波长激发, 在流式细胞仪中用FITC作双标，另一种用藻红蛋白(PE)耦联基团要比罗丹明好。TRITC为罗丹明的衍生物，呈紫红色粉末，较稳定。最大吸收光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈现橙红色荧光，与FITC的绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。因其荧光淬灭慢，也可用于单独标记染色。 【菁类染料-Cyanine dyes(Cy2, Cy3, Cy5)】 Cy2耦联基团激发波长为492nm，发光为波长510nm的绿色可见光。Cy2和FITC 使用相同的滤波片。由于Cy2比FITC在光下更稳定。要避免使用含有磷酸化的苯二胺的封片剂，因为这种抗淬灭剂和Cy2反应，在染色片储存后会导致荧光微弱和扩散。Cy3和Cy5比其他的荧光团探针要更亮，更稳定，背景更弱。Cy3耦联基团激发光的最大波长为550nm，最强发射光为570nm。因为激发光和发射光波长很接近TRITC, 在荧光显微镜中，可使用和TRITC一样的滤波片。 Cy3在氩光灯(514nm或528nm)下可以被激发出50％的光强，在氦氖灯(543nm)或者汞灯(546nm)下则约75％。Cy3可以和荧光素一起作双标。Cy3还可以和Cy5一起在共聚焦显微镜实验中作多标记。Cy5耦联基团的激发波长最大650nm，发光波长最大670nm。在氪氩灯(647nm)下它们可被激发出98％的荧光，在氦氖灯下(633nm)为63％。Cy5可以和很多其他的荧光基团一起用在多标记的实验中。由于它的最大发射波长在670nm，Cy5很难用裸眼观察，而且不能用汞灯作理想
分子生物学检验
第二章临床分子生物学检验标志物 1. 分子生物标志物：指可以反映机体生理，病理状态的核酸、蛋白质、代谢产物等生物分子，是生物标志物的一种类型。 2. 中心法则：指遗传信息从DNA传递给RNA，再从RNA传递给蛋白质，即完成遗传信息的转录和翻译的过程。也可以从DNA传递给DNA，即完成DNA的复制过程。这是所有有细胞结构的生物所遵循的法则。在某些病毒中的RNA自我复制(如烟草花叶病毒等)和在某些病毒中能以RNA为模板逆转录成DNA的过程(某些致癌病毒)是对中心法则的补充。 3. 基因组：是一个细胞或一种生物体的整套遗传物质，包括基因和非编码DNA。 4. 原核生物基因组特征： 1）原核生物基因组较小：大小一般在106—107碱基对之间； 2）原核生物的类核结构：原核生物基因组DNA位于细胞中央的核区，没有核膜将其与细胞质隔开在蛋白质的协助下，以一定的形式盘曲，折叠包装起来，形成类核； 3）原核生物的操纵子结构：原核生物的结构基因大多数按功能相关性成簇地串联排列于染色体上。结构基因同其上游的调控区以及下游的转录终止信号，共同组成了一个基因表达单位，即操纵子结构； 4）原核生物的结构基因：原核生物的结构基因中无内含子成分，多数是单拷贝基因，基因与基因之间有重复序列存在； 5）具有编码同工酶的基因：这类基因表达产物的功能相同，但基因结构不完全相同；6）含有可移动DNA序列：可移动的DNA序列通过不同的转移方式发生基因重组，改变生物体的遗传性状，使生物体更适应环境的变化； 5. 质粒：指细菌细胞染色体以外，能独立复制并稳定遗传的共价闭合环状分子； 6. 人类基因组包括细胞核内的核基因组（3X109bp）和细胞质内的线粒体基因组（16569bp），人类基因组中存在大量的非编码序列和重复序列； 7. 小卫星DNA：由10—100bp组成的重复单位重复几十到几百甚至几千次，形成的1—5bp 的短DNA，又称可变数目串联重复； 8. 微卫星DNA：核心序列为1—6bp，可以重复上百次，又称短串联重复； 9. 多基因家族：指由某一祖先基因经过重复和变异所产生的一组基因，在多基因家族中，某些成员并不产生有功能的基因产物，这些基因称为假基因； 10. 多态性：当某种变异相对常见，在群体中的频率高于1%时，则称为多态性，频率低于
介绍qtl及标记辅助选择等基本的概念Euphytica (2005)
Euphytica(2005)142:169–196 DOI:10.1007/s10681-005-1681-5C Springer2005 An introduction to markers,quantitative trait loci(QTL)mapping and marker-assisted selection for crop improvement:The basic concepts B.C.Y.Collard1,4,?,M.Z.Z.Jahufer2,J.B.Brouwer3&E.C.K.Pang1 1Department of Biotechnology and Environmental Biology,RMIT University,P.O.Box71,Bundoora,Victoria3083, Australia;2AgResearch Ltd.,Grasslands Research Centre,Tennent Drive,Private Bag11008,Palmerston North, New Zealand;3P.O.Box910,Horsham,Victoria,Australia3402;4Present address:Plant Breeding,Genetics and Biotechnology Division,International Rice Research Institute(IRRI),DAPO Box7777,Metro Manila,Philippines; (?author for correspondence:e-mail:bcycollard@https://www.sodocs.net/doc/1c8514602.html,) Received11July2004;accepted2February2005 Key words:bulked-segregant analysis,DNA markers,linkage map,marker-assisted selection,quantitative trait loci (QTLs),QTL analysis,QTL mapping Summary Recognizing the enormous potential of DNA markers in plant breeding,many agricultural research centers and plant breeding institutes have adopted the capacity for marker development and marker-assisted selection(MAS). However,due to rapid developments in marker technology,statistical methodology for identifying quantitative trait loci(QTLs)and the jargon used by molecular biologists,the utility of DNA markers in plant breeding may not be clearly understood by non-molecular biologists.This review provides an introduction to DNA markers and the concept of polymorphism,linkage analysis and map construction,the principles of QTL analysis and how markers may be applied in breeding programs using MAS.This review has been speci?cally written for readers who have only a basic knowledge of molecular biology and/or plant genetics.Its format is therefore ideal for conventional plant breeders,physiologists,pathologists,other plant scientists and students. Abbreviations:AFLP:ampli?ed fragment length polymorphism;BC:backcross;BSA:bulked-segregant analysis; CIM:composite interval mapping;cM:centiMorgan;DH:doubled haploid;EST:expressed sequence tag;SIM:sim-ple interval mapping;LOD:logarithm of odds;LRS:likelihood ratio statistic;MAS:marker-assisted selection;NIL: near isogenic lines;PCR:polymerase chain reaction;QTL:quantitative trait loci;RAPD:random ampli?ed poly-morphic DNA;RI:recombinant inbred;RFLP:restriction fragment length polymorphism;SSR:simple sequence repeats(microsatellites);SCAR:sequence characterized ampli?ed region;SNP:single nucleotide polymorphism; STS:sequence tagged site Introduction Many agriculturally important traits such as yield,qual-ity and some forms of disease resistance are controlled by many genes and are known as quantitative traits(also ‘polygenic,’‘multifactorial’or‘complex’traits).The regions within genomes that contain genes associated with a particular quantitative trait are known as quan-titative trait loci(QTLs).The identi?cation of QTLs based only on conventional phenotypic evaluation is not possible.A major breakthrough in the characteri-zation of quantitative traits that created opportunities to select for QTLs was initiated by the development of DNA(or molecular)markers in the1980s. One of the main uses of DNA markers in agricul-tural research has been in the construction of linkage maps for diverse crop species.Linkage maps have been utilised for identifying chromosomal regions that contain genes controlling simple traits(controlled by a single gene)and quantitative traits using QTL
分子生物学研究法(上)优缺点
第五章分子生物学研究方法（上） ——DNA、RNA及蛋白质操作技术5.1 重组DNA技术 重组DNA技术（recombinantDNAtechnique）又称遗传工程，在体外重新组合脱氧核糖核酸（DNA）分子，并使它们在适当的细胞中增殖的遗传操作。 重组DNA技术一般包括四步：①获得目的基因；②与克隆载体连接，形成新的重组DNA分子；③用重组DNA分子转化受体细胞，并能在受体细胞中复制和遗传；④对转化子筛选和鉴定。 特点：不受亲缘关系限制，为遗传育种和分子遗传学研究开辟了崭新的途径。 适用于获取目标基因的表达产物。 5.2 DNA基本操作技术 （1）核酸凝胶电泳技术 将某种分子放到特定的电场中，它就会以一定的速度向适当的电极移动。某物质在电场作用下的迁移速度叫作电泳的速率，它与电场强度成正比，与该分子所携带的净电荷数成正比，而与分子的磨擦系数成反比（分子大小、极性、介质的粘度系数等）。在生理条件下，核酸分子中的磷酸基团是离子化的，所以，DNA 和RNA实际上呈多聚阴离子状态(Polyanions)。将DNA、RNA放到电场中，它就会由负极→正极移动。 适用于DNA、RNA片段的分离。 缺点：紫外对DNA分子有损伤，染料毒性大。 （2）细菌转化与目标DNA分子的增殖 细菌转化是指一种细菌菌株由于捕获了来自供体菌株的DNA而导致性状特征发生遗传改变的过程。提供转化DNA的菌株叫做供体菌株，接受转化DNA 的细菌菌株被称做受体菌株。 常用的方法：CaCl2法和电击法 大肠杆菌是最广泛使用的实验菌株。在加入转化DNA之前,必须先用CaCl2处理大肠杆菌细胞，使之呈感受态(Competent Cells)，Mg2+对维持外源DNA的稳定性起重要作用。 转化载体上一般带有LacZ基因，常用带有不同抗生素的选择性培养基结合α-互补蓝白斑筛选法鉴定转化细胞。 （3）聚合酶链反应技术 用于体外快速扩增特定基因或DNA序列最常用的方法。 反应体系：模板DNA、PCR引物、四种核苷酸、Mg2+、TaqDNA聚合酶、缓冲液和超纯水。
分子生物学名解——自己整理
分生考点 Copyright by 孙倩1.顺式作用元件（cis-acting elements）: 存在于基因内外，与基因表达调控相关、能够被基因调控蛋白特异性识别和结合的特定的DNA序列称为顺式作用元件。 2.启动子(promoter)：真核基因的启动子指的是RNA聚合酶识别、结合的基因转录调控区中启动基因转录的一段特异DNA序列，包含一组转录调控功能组件，其中每一个功能组件的DNA序列约7~20 bp。 3.典型的启动子核心序列（core sequences）是在转录起始位点上游25~35 bp处，有一保守的TATA序列，被称为TATA盒（TATA box），真核细胞的TATA盒多为TATAAAA序列。TA TA盒与原核细胞的启动子一样，对RNA聚合酶II的转录起始位点起定位作用。 4. 有一些编码蛋白质基因不含TA TA盒或起始子，多在起始位点上游约100bp内含有20~50个核苷酸的CG序列，被称做CpG岛（CpG island）。此种基因可有多个转录起始点，可产生含不同5’末端的mRNA。这些基因大多为低转录基因，编码中间代谢酶的管家基因。 5.启动子上游元件（promoter-proximal elements, 或upstream promoter elements）是一些位于TATA盒上游的DNA序列，与调节蛋白结合，调节通用转录因子与TATA盒的结合、RNA聚合酶与启动子的结合，以及转录起始复合物的形成，从而决定基因的转录效率与专一性。常见的序列是CAA T盒和GC盒。 6.一些真核细胞基因含有另一种启动子元件，称为起始子(initiator,Inr)，决定启动子的强度。 7.增强子（enhancer）：是能够结合特异基因调节蛋白，促进邻近或远隔特定基因表达的DNA 序列。在酵母中，被称为上游活化序列（upstream activator sequences, UASs）。增强子的作用通常与其所处的位置和方向无关。 8.沉默子(silencer)是指某些真核基因转录调控区中抑制或阻遏基因转录的一段（数百bp）DNA序列。沉默序列促进局部DNA的染色质形成致密结构，从而阻止转录激活因子结合DNA，是基因转录的负性调节因素。 9.能够帮助RNA聚合酶转录RNA的蛋白质统称转录因子（transcription factors，TF）。以反式作用方式调节基因转录的转录因子称为反式作用因子（trans-acting factor），以顺式作用方式调节基因转录的转录因子称为顺式作用蛋白（cis-acting protein）。 10.基本转录因子(general transcription factors)是RNA聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA(mRNA、tRNA及rRNA)转录的类别。 11.特异转录因子(special transcription factors)为个别基因转录所必需，决定该基因的时空特异性表达。 12.常染色质（euchromatin）结构松弛，分散分布在核内的染色质，对DNase I敏感，DNA 可降解为约200 bp 或其倍数的片断；基因表达处于活性状态，故亦称为活性染色质。使用DNase I处理活性染色质时，常会出现一些高敏感位点(hypersensitive sites)，通常位于转录基因的5’和3’侧翼转录调控区的蛋白结合位点附近的裸露DNA上。 13.异染色质（heterochromatin）结构高度致密，处于凝聚状态的染色质，对DNase I不敏感。基因表达处于阻遏状态。 14.染色质重塑（chromatin remodeling）通过改变基因的启动子和调节序列区域的染色质结构来调节基因的表达，称为染色质重塑,也称为核小体重塑(nucleosome remodeling)。主要包括：CpG岛甲基化和组蛋白共价修饰。 15.核小体重塑（nucleosome remodeling）：ATP依赖性核小体重塑复合体参与的核小体的移位、替换和去组装改变等。核小体重塑过程: 基因活化蛋白结合；ATP依赖性酶蛋白复合体结合转录活性区；A TP依赖性酶水解A TP，提供能量；移去或替换核小体。 16.组蛋白修饰包括组蛋白的乙酰化、甲基化、磷酸化、泛素化和多聚ADP-核糖基化。这些
视觉标记_一种优先选择机制
心理科学进展 2006，14（1）：7~11 Advances in Psychological Science 视觉标记：一种优先选择机制* 郝 芳1,2 傅小兰1 （1中国科学院心理研究所，脑与认知科学国家重点实验室，北京 100101） （2中国科学院研究生院，北京 100039） 摘 要 视觉标记是与任务目标相关的自上而下的优先选择解释机制。视觉标记理论对preview效益——对后出现项目的视觉优先选择现象——提供了合理的解释：对先出现的项目自上而下的抑制提高了对后出现项目的优先选择等级。首先介绍视觉标记经典实验范式和preview效益，然后阐述研究者对视觉标记抑制机制的两种主要观点，进而介绍其他优先选择理论对preview效益的解释及其局限性，最后指出视觉标记研究中亟待解决的问题。 关键词视觉标记，优先选择，preview效益，视觉搜索。 分类号 B842 视觉系统会优先选择与当前行为目标相关的项目，忽略无关项目。这种视觉优先选择（prioritizing selection）现象及其机制一直是视觉搜索研究关注的焦点。视觉标记（visual marking）是一种近期提出的对后出现项目的视觉优先选择的解释机制[1]，能合理阐释preview效益（preview benefit）。视觉标记研究成果不仅有助于进一步深化和完善视觉搜索理论，而且具有生态学意义，可以被灵活应用于许多现实情境中，设计和控制视觉优先选择的对象[1]。 本文将首先介绍视觉标记理论及其经典实验范式以及实验中的preview效益，其次阐述视觉标记抑制机制的两种主要观点，然后介绍几种有代表性的其他选择解释机制，并分别说明它们对preview 效益的解释的局限性，最后对视觉标记研究领域进行总结和展望。 收稿日期：2005-03-11 ?本研究得到中国科技部973项目（2002CB312103）、国家自然科学基金重点项目（60433030）和面上项目（30270466）、中国科学院心理研究所创新重点项目（0302037）经费支持。通讯作者：傅小兰，E-mail: fuxl@https://www.sodocs.net/doc/1c8514602.html, 1 视觉标记 视觉标记是自上而下的优先选择解释机制，用于解释先出现项目优先等级下降、后出现项目优先等级提高的现象。 1.1 视觉标记的经典实验范式 Waston和Humphreys最先对视觉标记进行研究[1]。他们采用三种实验条件：单特征搜索条件、颜色-形状特征联合搜索条件和间隔条件。在间隔条件中，先呈现一部分干扰物，1000ms后再呈现另一部分干扰物和靶子（靶子可能出现，也可能不出现），靶子如果出现，将只出现在后呈现的项目中。实验结果表明，在上述三种条件中，间隔条件的靶子搜索成绩显著优于特征联合搜索条件的成绩，与单特征搜索条件的成绩非常接近[1]。Waston和Humphreys认为，出现这种优势是因为观察者抑制了先出现项目的位置，使后出现项目具有较高的视觉优先选择等级。 1.2 视觉标记实验中的preview效益 Watson和Humphreys的视觉标记研究发现了preview效益，即间隔条件下的靶子搜索成绩接近单特征搜索条件下的成绩，显著优于特征联合搜索条件下的成绩[1]。Preview效益要求先后出现的项目之间的时间间隔至少为400ms，而研究者一般选择
分子生物学名词解释
RFLP：个体之间DNA的核苷酸序列存在差异，称为DNA多态性。由于碱基组成的变化而改变了限制性内切酶的酶切位点，从而导致相应的限制性片段的长度和数量发生变化，称为RFLP。 翻译：是指在多种因子辅助下，由tRNA携带并转运相应氨基酸，识别mRNA上的三联体密码子，在核糖体上合成具有特定序列多肽链的过程，称为翻译。突变:DNA的结构发生永久性改变，即突变. 转化：通过自动获取或人为地供给外源DNA，使细胞或培养的受体细胞获得新的遗传表型。 转导：当病毒从被感染的（供体）细胞释放出来、再次感染另一（受体）细胞时，发生在供体细胞与受体细胞之间的DNA转移及基因重组即为转导作用。受体：是细胞膜上或细胞内能识别外源化学信号并与之结合的成分，其化学本质是蛋白质，个别糖脂。 粘粒：又称柯斯质粒，是一类由人工构建的含有λDNA 粘性末端cos序列和质粒复制子的杂种质粒载体。它是为克隆和增殖真核基因组DNA的大区段而设计的，是组建真核生物基因文库及从多种生物中分离基因的有效手段。质粒：是存在于细菌染色体外的、具有自主复制能力的环状双链DNA分子。端粒：以线性染色体形式存在的真核基因组DNA末端都有一种特殊的结构叫端粒。该结构是一段DNA序列和蛋白质形成的一种复合体，仅在真核细胞染色体末端存在。端粒DNA由重复序列组成，人类端粒一端是TTAGGG另一端是AATCCC. 克隆：通过无性繁殖过程所产生的与亲代完全相同的子代群体。 探针：用放射性核素、生物素或荧光染料标记其末端或全链的已知序列的多聚核苷酸链被称为“探针”。 转录：以DNA为模版，由DNA依赖的RNA聚合酶（RNApol）催化4中NTP聚合，生成RNA 的过程。 增强子：其含有多个作用原件，可以特异性地与转录因子结合，增强基因的转录活性的段短DNA序列。 启动子：能被RNA聚合酶特异性识别并与其结合，启动转录的DNA序列。 操纵子:由功能相关的一组基因在染色体上串联，共同构成的一个转录单位。沉默子:某些基因的负性调节元件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。 反转录：在反转录酶的作用下以RNA为模板合成DNA的过程。 点突变：DNA序列上单个碱基的改变称为点突变，可分为转换与颠换两种。 信号肽：是分泌蛋白新生肽链N端的一段能被细胞转运系统识别的保守性的氨基酸序列。 领头链：顺着解链方向生成的子链，复制是连续进行的，这股链称为领头链。G蛋白：鸟苷酸结合蛋白（G protein）简称G蛋白，亦称GTP结合蛋白。是一类含乌苷酸的蛋白质，存在于细胞外膜内表面，为生物信息转导过程中关键的中介体，可以决定信号传输通路何时打开和关闭。 SD序列：mRNA起始密码子AUG上游8～13个碱基处存在的一段特定的核苷酸序列，该序列称为SD序列，是mRNA的起始密码子之所以能与小亚基定位结合的关键。SD序列与小亚基中16SrRNA3’端的互补序列配对结合，使起始密码子定位于翻译起始部位。 RNA编辑：可在改变转录后RNA的序列，而使翻译得到的蛋白质的序列与推导的不同。其机制有两种即位点特异性脱氨基作用和指导RNA（gRNA）介导的尿嘧啶插入和删除。 RNA复制：以RNA作为基因组的病毒称为RNA病毒，这类病毒除反转录病毒外，在宿主细胞都是以病毒的单链RNA为模板合成RNA，这种RNA依赖的RNA 合成又称为RNA复制。 RNA干扰,RNAi：是由双链RNA引发的转录后基因静默机制。在此过程中，与双链RNA有同源序列的mRNA被降解，从而抑制该基因的表达。是真核生物中普遍存在的抵抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制。RNA干涉：是指由短双链RNA诱导的同源mRNA的降解过程，可使基因表达受到抑制。 反义RNA：指与mRNA互补的RNA分子，也包括与其它RNA互补的RNA分子。 根据反义RNA的作用机制可将其分为3类：Ⅰ类反义RNA直接作用于靶mRNA 的S D序列和(或)部分编码区，直接抑制翻译，或与靶mRNA结合形成双链RNA，从而易被RNA酶Ⅲ降解；Ⅱ类反义RNA与mRNA的非编码区结合，引起mRNA构象变化，抑制翻译；Ⅲ类反义RNA则直接抑制靶mRNA的转录。RNA聚合酶:以一条DNA链或RNA为模板催化由核苷-5′-三磷酸合成RNA的酶。 是催化以DNA为模板（template）、三磷酸核糖核苷为底物、通过磷酸二酯键而聚合的合成RNA的酶。 RNA印迹：利用与DNA印记相类似的技术来分析RNA，成为RNA印记。 DNA的变性：在某些理化因素作用下，DNA双链解开成两条单链的过程。DNA复性：在适当条件下，变性DNA的两条互补链可恢复天然的双螺旋构象，这一现象称为复性。热变性的DNA经缓慢冷却后即可复性，这一过程称为退火。 DNA损伤:各种体内外因素所导致的DNA组成与结构的变化称为DNA损伤。DNA印迹：DNA样品经限制性内切酶消化后行琼脂糖凝胶电泳，将含有DNA区带的凝胶在变性溶液中处理后，再将胶中的DNA分子转移到NC膜上。DNA克隆：应用酶学的方法, 在体外将各种来源的遗传物质与载体DNA接合成一具有自我复制能力的DNA分子，继而通过转化或转染宿主细胞，筛选出含有目的基因的转化子细胞，再进行扩增提取获得大量同一DNA分子。也称基因克隆或重组DNA DNA载体：为携带目的基因，实现其无性繁殖或表达有意义的蛋白质所采用的一些DNA分子。 DNA芯片技术：基因芯片，将许多特定的DNA片段有规律地紧密排列于单位面积的支持物上，然后与待测的荧光标记样品进行杂交，杂交后用荧光检测系统等对芯片进行扫描，通过计算机系统对每一位点的荧光信号做出检测、比较和分析，从而迅速得出定性和定量的结果。 cDNA文库：cDNA文库是包含某一组织细胞在一定条件下所表达的全部mRNA 经逆转录而合成的cDNA序列的克隆群体，它以cDNA片段的形式贮存着该组织细胞的基因表达信息。 基因组DNA文库：基因组DNA文库是指生物的基因组DNA的信息（包括所有的编码区和非编码区）以DNA片段形式贮存的克隆群体。 PCR技术：利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内的大量合成，可将微量目的DNA片段大量扩增。可用于已知序列或部分已知序列的检测；或扩增出已知片段，再利用其他方法作进一步分析。灵敏度高、产率高、重复性好、快速简便，已成为基因诊断的主要和首选技术。但易出现假阳性，应注意优化实验条件。 逆转录PCR：将RNA的逆转录反应和PCR反应联合应用的一种技术，先以RNA 为模板，在逆转录酶的作用下的作用下合成cDNA，再以cDNAcDNA为模板通过PCR反应来扩增目的基因。基因：合成有功能的蛋白质，多肽或RNA所必需的全部DNA序列，是基因组的一个功能单位。 基因组：细胞或生物体中，一套完整单倍体的遗传物质的总和。 癌基因：细胞内控制细胞生长和分化的基因，它的结构异常或表达异常，可以引起细胞癌变。 原癌基因：是细胞中的必需基因，进化过程中序列高度保守，对维持细胞正常生理功能、调节细胞生长与增殖起重要作用。但如受到致癌因素作用下可发生变化，表达产物的质或量改变或表达的时空方式改变，而导致细胞恶性转化。 抑癌基因：又名抗癌基因(TSGs ) 、隐性癌基因。是一种抑制细胞生长和肿瘤形成的基因。在生物体内与癌基因功能相抵抗，共同保持生物体内正负信号相互作用的稳定。 管家基因：执行重要生物功能，在生物体几乎全体细胞中持续表达的基因。如rRNA、通用转录因子、代谢酶系、细胞骨架蛋白等。 奢侈基因：仅在特定细胞内选择表达的基因，决定分化细胞的独特性状。 结构基因:基因中编码RNA或蛋白质的DNA序列称为结构基因。 目的基因：我们感兴趣的基因或是DNA序列 病毒癌基因：指致癌病毒存在的某些核苷酸序列，能引起细胞转化。 基因表达：是指生物基因组中结构基因所携带的遗传信息经过转录、翻译等一系列过程，合成特定的蛋白质，进而发挥其特定的生物学功能和生物学效应的全过程。 基因敲除：指通过DNA同源重组定向地将外源基因替换宿主细胞染色体DNA中特定的基因，从而使特定的基因在细胞内或生物体内失活的过程。 基因诊断：利用分子生物学技术方法，直接检测体内DNA或RNA的结构或水平的变化以及是否存在异常的外源核酸，从而对疾病作出诊断的方法。 基因治疗：基因治疗是指通过一定方式将目的基因或有治疗作用的DNA片段导入人体的靶细胞，使其发挥生物学效应，从而达到治疗疾病目的技术疗方法。基因增补：不删除突变的致病基因，而在基因组的某一位点额外插入正常基因，在体内表达出功能正常的蛋白质，达到治疗疾病的目的。 基因置换：用正常基因通过重组原位替换致病基因 基因失活：有些疾病是由于基因的过度表达引起的，向患者体内导入有抑制基因表达作用的核酸，如干扰小RNA等，可降解相应的mRNA或抑制其翻译，阻断致病基因的异常表达，达到治疗疾病的目的。 基因工程：实现基因克隆所采用的方法及相关的工作，称基因工程, 又称重组DNA。 基因组文库：基因组DNA文库是指生物的基因组DNA的信息（包括所有的编码区和非编码区）以DNA片段形式贮存的克隆群体 基因表达的时间特异性:按功能需要，某一特定基因的表达严格按特定的时间顺序发生，称之为基因表达的时间特异性 基因表达的空间特异性:在个体生长全过程，某种基因产物在个体按不同组织空间顺序出现，称之为基因表达的空间特异性。 组成性基因表达:无论表达水平高低，管家基因较少受环境因素影响，而是在个体各个生长阶段的大多数或几乎全部组织中持续表达，或变化很小。区别于其他基因，这类基因表达被视为组成性基因表达。 第二信使：环腺苷酸（cAMP）、环鸟苷酸（cGMP）、甘油二酯（DAG）、三磷酸肌醇（IP3）、磷脂酰肌醇-3,4,5-三磷酸（PIP3）、Ca2+等可以作为外源信息在细胞内的信号转导分子，称为细胞内小分子信使，或称为第二信使。 生长因子：通过质膜上特异的受体，将信息传递至细胞内部，调节细胞生长与增殖的多肽类物质。 解链温度:解链过程中，紫外吸光度的变化达到最大变化值的一半时所对应的温度。 转录模板；即以双链DNA中的确定的一条链（模板链用于转录，编码链不用于转录）为转录模板. 转录因子:真核基因的转录调节蛋白又称转录调节因子或转录因子。 转录空泡：是由DNA双链,RNA聚合酶与新合成的RNA局部形成的结构,它贯穿于延长过程的始终。 遗传密码：DNA编码链或mRNA上的核苷酸，以三个为一组（三连体）决定一个氨基酸的种类，称为三联体密码。转录和翻译是连续的，因此遗传密码决定蛋白质的一级结构。 原位杂交：利用核酸分子单链之间互补的碱基系列，将有放射性或非放射性的外源核酸与组织、细胞或染色体上待测的DNA或RNA互补配对，结合成专一的核酸杂交分子，经一定的检测手段将待测核酸在组织、细胞或染色体上的位置显示出来。 Southern blot杂交：是研究DNA图谱的基本技术，在遗传诊断、DNA图谱分析及PCR产物分析等方面有重要价值。Southern印迹杂交的方法是将标本DNA用限制性内切酶消化后，经琼脂糖电泳分离各酶切片段，接着，使酶切片段DNA发生变性并转印到一固相支持物 (通常是硝酸纤维素薄膜或尼龙膜)上，经固定后和标记探针进行杂交。这种方法不仅可以检测DNA样品中是否存在某一特定的基因，而且还可以获得基因片段的大小及酶切位点分布的信息。 Northern 印迹（Northern blot）：是通过检测RNA的表达水平来检测基因表达，将RNA从凝胶中转印到硝酸纤维素膜上，定性分析mRNA的常用方法. Western blot （蛋白免疫印迹）技术：是将蛋白质从聚丙烯酰胺凝胶中转印到化学合成膜的支撑物上，利用特异性抗体进行反应，定性分析蛋白质。诱导/阻遏表达：在特定环境信号的刺激下，基因的表达开放或增强 / 关闭或下降的现象。 阻遏蛋白：可识别、结合细菌基因的操纵序列，在转录水平抑制基因表达的蛋白质。 蛋白激酶：能够将γ-磷酸基团从磷酸供体分子上转移至底物蛋白的氨基酸受体上的一大类酶。 克隆载体：为使插入的外源DNA序列被扩增而特意设计的载体。 表达载体：为使插入的外源DNA序列可转录翻译成多肽链而特意设计的载体。生物芯片：又称DNA芯片或基因芯片，它们是DNA杂交探针技术与半导体工业技术相结合的结晶。该技术系指将大量探针分子固定于支持物上后与带荧光标记的DNA样品分子进行杂交，通过检测每个探针分子的杂交信号强度进而获取样品分子的数量和序列信息。 核酸探针：指能识别特异碱基顺序的带有标记的一段单链DNA或RNA分子。 印迹技术：利用各种物理方法使电泳胶中的生物大分子转移到NC等各种膜上，使之成为固相化分子。“blotting”，译为印迹技术。 接合作用：当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时，质粒DNA从一个细胞(细菌)转移至另一细胞（细菌）的DNA转移称为接合作用。 回文结构：在DNA链上，两个拷贝反向串联在一起，中间没有间隔序列。 转基因动物：应用转基因技术培育的携带外源基因并能稳定遗传的动物。 冈崎片段、后随链：在DNA复制过程中，以亲代链(5’→3’)为模板时，子代链的合成不能以3’→5’方向进行，而是按5’→3’方向合成出许多小片段，因为是冈崎等人研究发现，因此称冈崎片段。由许多冈崎片段连接而成的子代链称为后随链。
分子生物学(整理)
名词解释： 1、沉默子(silencer)：某些基因的负性调节元件，能够同 反式因子结合从而阻断增强子及反式激活因 子的作用，并最终抑制该基因的转录活性。2、启动子：是RNA聚合酶特异性识别和结合，并启动 转录的特定DNA序列。至少包括一个转录起 始点以及一个以上的功能组件。 3、复制子（replicon）：是从一个DNA复制起点开始的 DNA复制区域，是独立完成复制的功能单位4、终止子(terminator T)：是给予RNA聚合酶转录终止 信号的DNA序列。 5、增强子(enhancer)：指远离转录起始点、决定基因的 时间和空间特异性、增强启动子转录活性的 DNA序列。其发挥作用的方式通常与方向、 距离无关。 6、操纵子：每一个由若干个结构基因及其上游的调控 序列组成的转录区段，共同组成一个转录单 位。一个操纵子只含一个启动序列（promoter） 及数个可转录的编码基因。 7、结构基因：基因中编码RNA或蛋白质的DNA序列。 大多数真核生物结构基因的DNA序列由 编码序列和非编码序列两部分组成。 8、重复基因：指染色体上存在多数拷贝基因。重复基 因往往是生命活动最基本，最重要的功能 相关的基因。 9、断裂基因：大多数真核生物基因的编码区内含有非 编码的插入序列，因此被称为不连续基因 或断裂基因。 10、重叠基因：指两个或两个以上的基因共有一段DNA 序列，或是指一段DNA序列成为两个或两 个以上基因的组成部分。 11、管家基因：在生物体中有些基因的表达在生命的全 过程中都是必需的．是维持细胞最低功 能所必不可少的基因．在一个生物个体 的几乎所有细胞中持续表达，这些基因 称为管家基因。 12、跳跃基因（jumping gene）:转座子每次移动时携带 着转座必需的基因一起在基因组内跃迁， 所以转座子又称跳跃基因（jumping gene）。 是那些能够进行自我复制，并能在生物染 色体间移动的基因物质。 13、假基因(pseudogene)：一种核苷酸序列同其相应的 正常功能基因基本相同，但却不能合成出功 能蛋白质的失活基因。 14、密码子:信使RNA分子中每相邻的三个核苷酸编成 一组，决定多肽链上一个氨基酸或一种信号， 称为密码子或三联体密码。 遗传密码特点：1.方向性；2.连续性；3.简 并性；4.通用性；5摆动性 15、反密码子：是位于tRNA反密码环中部、可与mRNA 中的三联体密码子形成碱基配对的三 个相邻碱基。在蛋白质的合成中，起解 读密码、将特异的氨基酸引入合成位点 的作用。 16、通用密码：指在大部分生物中都编码相同氨基酸的 一类遗传密码子，是生物界普遍采用的遗 传密码。 18、副密码：tRNA 分子上决定其携带氨基酸分子的区 域称为。 19、单顺反子(monocistron)：即一个编码基因转录生成 一个mRNA分子，经翻译生成一条多肽链。 20、基本转录因子(general transcription factors)：是RNA 聚合酶结合启动子所必需的一组蛋白因子，决定三种RNA(mRNA、tRNA及rRNA)转录的类别。 21、特异转录因子(special transcription factors)：为个别基因转录所必需，决定该基因的时间、空间特异性表达。 22、微小RNA (microRNA, miRNA)：是一大家族小分子非编码单链RNA，长度约20~25个碱基，由一段具有发夹环结构，长度为70~90个碱基的单链RNA 前体(pre-miRNA)经Dicer酶剪切后形成。 简答题 1、什么是基因？基因的本质是什么？基因的特点是什 么？ （1）基因：负责编码RNA或一条多肽链的DNA片段，是染色体或基因组的一段DNA序列，包括编码序列（外显子）、编码区前后对于基因表达具有调控功能的序列和单个编码序列间的间隔序列（内含子）。 （2）基因的本质：基因是遗传的物质基础，是DNA或RNA分子上具有遗传信息的特定核苷酸序列。基因通过复制把遗传信息传递给下一代，使后代出现与亲代相似的性状。 (3)基因的两个特点：<1>、能忠实地复制自己，以保持生物的基本特征；<2>、基因能够“变异”，变异基因中一小部分会导致疾病，另外的绝大多数是非致病变异。 什么？ DNA作为遗传物质的优点：（1）DNA可以精确地自我复制，传递遗传信息。使亲代与子代间保持