草莓组培

1、取材。每年的6-8月，选择植株生长健壮，匍匐茎充实，尖端生长良好，无病虫害的优良植株取其茎尖或花药，作为组织培养的外植体。

2、消毒。材料取来修整后用纱布包好放在自来水龙头下冲洗2-4小时（以茎尖为例），然后进行表面消毒。先用70%酒精漂洗半分钟，然后用0.1%的新洁尔灭浸泡15-20分钟，再用0.1%的升汞（氯化汞）消毒5-8分钟，最后用1-2%的过氧乙酸消毒1分钟。每次都要用无菌水冲洗3-4次后再进行下一次消毒。整个消毒过程都应在超净工作台内完成。

3、接种。接种在超净工作台内进行，接种前要先用酒精灯对接种用具（镊子、接种针、接种架等）消毒自然放凉。先用镊子一层层的剥去茎尖外的幼叶和鳞片，然后在解剖镜下找到生长点（可带1-2个叶原基）用接种针挑出生长点（小于0.5毫米），放入事先准备好的盛有培养基的培养瓶内，封好瓶口，置于培养室内培养成小植株。

4、室内培养。培养室要求干净清洁，室内装有紫外线杀菌灯，每天要对室内进行消毒，以防污染。培养温度20-28℃，最适温度25℃，相对湿度70%，光照强度1000-2000勒克斯，每日光照10小时左右。

5、继代培养。每培养25-30天，培养瓶内的小植株就会分出3-5个小植株，把这些小植株分出放于继代培养基内培养；过20-30天后又会长出小植株，如此反复进行继代培养，增加繁殖系数。

6、诱导生根。根据生产需要可在1-2月份集中一批苗子生根。草莓试管苗生根很容易，有的在继代培养基上便可生根。或者在培养基中加入0.5毫克/升的LBA，经30天左右便可长出6-10条长约2-3厘米的小根。

7、温室驯化。把生好根的小苗经光照锻炼7-10天，从试管内取出，洗净根部培养基，移栽入事先准备好的营养土内，使其逐渐长大发出5-6片新叶的过程称为驯化。驯化用的营养土要求土质以疏松的沙土掺入少量有机质。移栽后要浇透水，支小拱棚覆盖塑料薄膜保湿。驯化温度以15-20℃，前两周空气相对湿度80-100%，第三周开始短时间放风，放风强度逐渐加大，至移栽后第四周可去掉覆盖物。根据情况每天或隔天喷水一次，保持土壤湿润而不积水为宜。驯化一般需2-3个月即可移出。经病毒鉴定，确认无毒后放入网纱大棚内繁殖。

8、病毒鉴定和检验。草莓无病毒苗的鉴定检验手段是采用小叶嫁接法、蚜虫接种鉴定法和电子显微镜检测法。利用电子显微镜检测草莓病毒比前两种更直观，而且速度快。其方法是利用负染色法及超薄切片法处理待测叶片，然后在电子显微镜下观察，如果被测叶片中含有较多病毒颗粒子，可被直接观察到。经检验确认无毒的草莓苗移入网纱大棚进行繁殖。

9、网纱大棚内繁殖。草莓病毒的传播主要靠蚜虫、飞虱等虫媒传播。把无

病毒苗放入网纱内繁殖可防止蚜虫等传播病毒。网纱大棚内土壤要经过严格消毒，并注意定期喷施杀蚜虫药。网纱大棚内育苗与苗圃育苗大体一致。

快速繁殖草莓秧苗比其他方法有许多优点：采用无毒材料培养的秧苗无病毒，生长健壮，叶片浓绿，可改善果实品质，提高产量；繁殖快，对新品种的推广有利，解决了新品种材料少、在生产中推广速度慢的问题。快速繁殖不受季节影响，一年四季均可进行。在人工控制的条件下，可工厂化育苗，根据生产需要为生产提供种苗。现把组培草莓种苗的方法和技术简要介绍给广大草莓种植者。

1.培养基的配制：培养基由植物生长所必需的有机营养成分、微量元素和生长调节剂组成。首先配制基本培养基，包括微量元素、有机物质、蔗糖(3%)、琼脂(0.6%)等。为调节被培养物的生长和分化，还需加入细胞分裂素和其他生长素，如6-苄氨基嘌呤(BA)0.25毫克／升、吲哚丁酸(IBA)0.5～1.0毫克／升、GA3(赤霉素)0.1毫克／升等，组成MS培养基。配好后装入三角瓶或试管，经高压消毒后备用。

2.采取茎苗：在6月份选取刚扎根的匍匐茎苗，对茎苗进行消毒。消毒方法是，剥去茎苗外面的叶片，用肥皂水洗干净，再用自来水冲洗一小时。在无菌条件下，用70%的酒精漂洗10分钟后，用5%的次氯酸钠溶液消毒7～8分钟，再用无菌水冲洗5遍，使接种材料无细菌和真菌。然后在超净工作台上，无菌条件下剥取茎尖生长点0.5毫米，接种到上述已配好的培养基上，每个培养瓶可接种5～7个茎尖。接种后，在26℃的恒温、光强2000勒[克斯]、每天光照6小时的条件下进行培养。

3.初代培养：对刚接种到培养基上的匍匐茎尖进行培养，使茎尖分生组织分化出芽和无根小植株。在培养基上加入有利分化的激素，成为分化培养基。茎尖经30天以上的培养，一个茎尖能分化出数个无根小植株。

4.继代培养：把已分化好的新芽转入到新培养基上，进行继代培养繁殖，使新芽不断增殖，加速生长。3～4个星期后，可获得30～40个腋芽形成的芽丛，芽丛中有的抽生新茎，并有正常叶片。经过多次继代培养，使增殖的数量达到一定要求，再把无根苗转入生根培养基上培养，促进生根。

5.生根培养：生根培养时要撤去BA，即去掉了细胞分裂素类的激素，增加生根培养激素，如吲哚丁酸(IBA)等。生长在这种培养基上的无根植株不再增殖，在每株无根苗基部生出许多不定根，可得到成批完全小植株。

6.移植：在把试管苗种植到土壤里以前，可先将其培养在无菌土壤中，或在盛有由蛀石、草炭、锯末等基质组成的培养土的小塑料盆中进行培养。培养时，应将试管苗放在温室中，温度保持在20～25℃为宜。为了保持湿度，以利于试管苗成活，移植后的14天内要用薄膜遮阴，待外界气温适合时，再移植到田间培植。要注意防治蚜虫等虫害，加强田间水、肥管理，可喷两次50毫克／千克赤霉素，促进抽生匍匐茎。新抽生的匍匐茎苗为原种苗，经多

次、多量繁殖，即可获得成批生产用苗。

以国外引入和国内自己培养的新优草莓品种丰香、盛港及美国6号等为试材进行组织培养繁苗试验，总结出草莓的组培苗生产、驯化和移栽等系列的技术体系，不仅能快速培养出大量脱毒种苗，而且取得较好的社会效益和经济效益。

组织培养技术

1、培养程序和培养基

5--6月于晴天的下午在健壮、无病的草莓刚抽出的匍匐茎上取茎尖，大小为0．3--0．4mm，作为组织培养的外植体。

用于草莓茎尖培养诱导芽分化的基本培养基为MS，附加6-BA0．5mg/L，NAA 0．2mg/L，蔗糖30g/L，琼脂粉6．5g／L，pH值调至5．8--6．0。

在草莓茎尖的扩大繁殖阶段，采用MS培养基附加6-BA 0．5mg/L、NAA 0．01mg／L。扩大繁殖主要是将丛生苗分块即每5--7株切成一块，转入继代培养基。在转苗过程中，去掉原生叶片有利于新苗分化，在扩大繁殖中随时清除愈伤组织，有利于新苗增殖和生长。

诱导生根培养基用1／2MS附加不同浓度IBA。试验表明：以IBA 0．1mg／L的浓度处理的生根率最高，为100％，平均根条数为2．4条。不加TBA及IBA浓度超过0．2mg／L，多数苗都是先于苗基切口处产生愈伤组织，随后在愈伤组织上分化生根，致使成活率大大降低。

2、操作技术要点及培养条件

(1)灭菌与接种

预处理为了灭菌彻底，常把接种材料先进行湿润处理，使灭菌剂能顺利地渗入材料。可用多种湿润剂，我们采用的是75％的酒精，湿润的时间为半分钟至1分钟。

灭菌处理在草莓组织培养中常用灭菌剂的种类很多。我们曾用过次氯酸钠10％水溶液(含有效氯0．4--0．5％)，浸泡接种材料10--15分钟；次氯酸钙(漂白粉)，用其饱和上清液，浸泡接种材料15--30分钟；过氧化氢10--12％水溶液浸泡10--20分钟；新洁尔灭5--10％水溶液，浸泡10--15分钟；升汞0．1％水溶液，浸泡8--10分钟。其中前4种灭菌剂对接种材料比较安全，但因灭菌时间较长，常常使接种材料的外层氧化变褐，以致影响培养效果。升汞有很强的杀菌能力，但浸泡时间稍长会造成接种材料中毒。因此，在草莓组织培养中，如把握好

时间，升汞是应用较多的灭菌剂。灭菌后的接种材料，要用无菌水充分清洗，通常要换水3--5次。

接种以培养无病毒苗为主要目的的草莓组织培养，所接种的茎尖材料很小，在接种时首先要求准确熟练地剥取茎尖生长点，并使用固体培养基比较适宜，接种时应注意不能将整个茎尖埋入培养基中。培养基须用1--1．1大气压热压灭菌20分钟。

从材料接种到生根苗长成，这期间的培养温度一般应稳定在25±2℃。每日光照12小时，光强以2000Lx为宜。培养室温度在18--26℃范围内，瓶苗可以正常生长及发根，但在28℃以上时，绿苗普遍变黄，生根率降低，根尖发黄老化，幼苗易产生玻璃化现象。

组培苗的移栽技术

1、移栽技术

试管苗的苗龄为15天，主根长1．5cm左右，白色无须根，移栽成活率可达90％--100％。

移栽前要将培养瓶从培养室中取出置于自然条件下，打开瓶盖进行透气锻炼。24小时后，从瓶中取出幼苗，清除干净根部及根颈处的培养基，栽入苗圃或穴盘中进行驯化。

基质可采用经过灭菌处理的腐熟的锯木屑或腐叶土，也可采用经过灭菌处理的由蛭石与珍珠岩按体积计以1：1比例配成的混合物，或园土与煤渣按体积计以2：1比例配制成的混合物。

2、提高移栽成活率的关键

选择不定根直接生自茎基，根多且粗壮，叶片在3片以上，叶大、厚、深绿的生根苗，成活率普遍较高。

栽培基质要用清水冲洗干净，或用多菌灵或甲基托布津掺拌灭菌，用煤渣作基质时，还要用0．2％冰乙酸中和使碱性降低。

移栽时采取“深栽浅埋”。深栽就是在移栽时根要栽得深，浅埋的标准是使小苗的根颈与土表平齐，或略高于土表。

注意控制光照与温度、湿度。小苗移栽后，放在温室内或塑料拱棚内培养，温度控制在15--20℃，湿度维持在80％左右为宜。同时由于刚移栽的小苗茎杆脆嫩，应尽量采用喷雾状浇水，水量也不宜过大，落干后再喷。遮光50％，一周后，可逐渐增强日光照射。

草莓组织培养

草莓的组织培养 一、茎尖 1．概述通过对草莓茎尖离体培养的试验研究表明：取草莓茎尖为外植体，以0．35 mm大小为宜；用MS+0.5 mg/L 6-BA+O.2 mg/L NAA培养基． 不定芽再生率高；以1/2 MS+O.1 mg/L IBA 生根效果最好。 2.结论（1）再生途径：草莓刚抽出的匍匐茎的茎尖 （2）灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理，最后用无菌水冲洗5～8次，接种于诱导培养基中。诱导培养基为MS+0．5 mg／L6一BA+0．2mg／L NAA+3 蔗糖(w／v)+0．5﹪卡拉胶，pH值为5.6～5.8。每个灭菌处理接种2O枚外植体，l5d后观察记录外植体的污染、死亡、无菌成活生长等情况。 （3）培养基： ①芽诱导试验，于MS培养基附加0．2 mg／L NAA、IAA、IBA不同种类生长素的培养基中，20d后调查记录幼芽分化情况。 ②继代培养与扩大繁殖，MS培养基附加0.5 mg/L6-BA、0.01 mg/L NAA。 ③根诱导试验, 用1/2 MS附加不同浓度(mg/I )IBA 有0．05、0．1、0．2、0．5及不加IBA的5个处理. （3）条件：培养基均在1～ 1.1大气压下热压灭菌20min。培养温度(25± 2)℃。每日光照12h，光强2 000Lux。 （1）再生途径：用其花药、花蕾、叶、叶柄、子叶、下胚轴等作外植体进行离体培养。 （2）灭菌方法：洗去泥土、灰尘，再用自来水冲淋2～3h，置超净工作台上进行75 ﹪乙醇和0．1 升汞不同时间的灭菌处理. （3）培养基：①MS+BA 1.0 mg/L+NAA 0.5 mg/L(浓度单位,下同)；②MS+6一BA0.5+KT 0.5；③MS+BA2.0+IAA 1.0；④MS+BA2.0+NAA0.5+2,4-D0.1；⑤MS+BA2.0+IBA0.1。以上培养基各加CH 100 mg/L，蔗糖20g/ L(①为30g/ L)。 ①用于花药诱导培养基； ②用于花药幺伤组织分化培养； ③、④用于其余5种外植体(叶盘、叶柄、下胚轴、子叶、花蕾)诱导培养；⑤仅用于花蕾培养。 （4）条件：培养条件均为12 h光照12 h黑暗。光强度1200-1500lx、温度(25 ±2)℃。 三、叶片以红颊、章姬、丰香草莓叶片为试材，对影响草莓叶片不定芽再生的主要因素进行了试验研究，建立了草莓离体叶片的再生体系。试验结果表明，基因型、不同激素种类和配比直接影响了草莓叶片再生芽的发生。基因型是影响草莓叶片再生能力的决定因素，不同激素配比是不定芽产生的关键因素。 叶片愈伤组织的诱导培养基以MS+TDZ 2~3mg／1较理想， 芽伸长的理想培养基为MS+6一BA 0．3～O．5mg／l， 生根培养基以1／2MS+IBA0．3mg／1较适宜，移栽成活率可达90％以上。 2.结论（1）再生途径：先采取当年生匍匐茎茎尖培养繁殖，建立起三个品种的无性繁殖系；再从继代3周的无菌苗上剪取叶片作为外植体，进行不同的处理，每瓶接10片叶盘，每处理重复5瓶。 （2）灭菌方法：于121℃下高温高压蒸汽灭菌20min。

草莓组培

1、取材。每年的6-8月，选择植株生长健壮，匍匐茎充实，尖端生长良好，无病虫害的优良植株取其茎尖或花药，作为组织培养的外植体。 2、消毒。材料取来修整后用纱布包好放在自来水龙头下冲洗2-4小时（以茎尖为例），然后进行表面消毒。先用70%酒精漂洗半分钟，然后用0.1%的新洁尔灭浸泡15-20分钟，再用0.1%的升汞（氯化汞）消毒5-8分钟，最后用1-2%的过氧乙酸消毒1分钟。每次都要用无菌水冲洗3-4次后再进行下一次消毒。整个消毒过程都应在超净工作台内完成。 3、接种。接种在超净工作台内进行，接种前要先用酒精灯对接种用具（镊子、接种针、接种架等）消毒自然放凉。先用镊子一层层的剥去茎尖外的幼叶和鳞片，然后在解剖镜下找到生长点（可带1-2个叶原基）用接种针挑出生长点（小于0.5毫米），放入事先准备好的盛有培养基的培养瓶内，封好瓶口，置于培养室内培养成小植株。 4、室内培养。培养室要求干净清洁，室内装有紫外线杀菌灯，每天要对室内进行消毒，以防污染。培养温度20-28℃，最适温度25℃，相对湿度70%，光照强度1000-2000勒克斯，每日光照10小时左右。 5、继代培养。每培养25-30天，培养瓶内的小植株就会分出3-5个小植株，把这些小植株分出放于继代培养基内培养；过20-30天后又会长出小植株，如此反复进行继代培养，增加繁殖系数。 6、诱导生根。根据生产需要可在1-2月份集中一批苗子生根。草莓试管苗生根很容易，有的在继代培养基上便可生根。或者在培养基中加入0.5毫克/升的LBA，经30天左右便可长出6-10条长约2-3厘米的小根。 7、温室驯化。把生好根的小苗经光照锻炼7-10天，从试管内取出，洗净根部培养基，移栽入事先准备好的营养土内，使其逐渐长大发出5-6片新叶的过程称为驯化。驯化用的营养土要求土质以疏松的沙土掺入少量有机质。移栽后要浇透水，支小拱棚覆盖塑料薄膜保湿。驯化温度以15-20℃，前两周空气相对湿度80-100%，第三周开始短时间放风，放风强度逐渐加大，至移栽后第四周可去掉覆盖物。根据情况每天或隔天喷水一次，保持土壤湿润而不积水为宜。驯化一般需2-3个月即可移出。经病毒鉴定，确认无毒后放入网纱大棚内繁殖。 8、病毒鉴定和检验。草莓无病毒苗的鉴定检验手段是采用小叶嫁接法、蚜虫接种鉴定法和电子显微镜检测法。利用电子显微镜检测草莓病毒比前两种更直观，而且速度快。其方法是利用负染色法及超薄切片法处理待测叶片，然后在电子显微镜下观察，如果被测叶片中含有较多病毒颗粒子，可被直接观察到。经检验确认无毒的草莓苗移入网纱大棚进行繁殖。 9、网纱大棚内繁殖。草莓病毒的传播主要靠蚜虫、飞虱等虫媒传播。把无

苹果树组培快繁技术实例 · 含配方

苹果的组织培养是采用无菌培养技术，将来自优良植物的茎尖、腋芽、叶片、鳞片、块根和球茎等器官以及它们的组织切片进行离体培养，使之在短期内获得大量遗传性一致的个体的方法。由于离体技术处理严格，所以很容易脱除一些细菌病原及病毒，是复壮品种的有效措施。已成功脱除的病毒和病害有苹果褪绿叶斑病毒、花叶病病毒、轮纹病等。苹果矮化砧、抗寒砧的组织培养也已成功。苹果脱毒组培技术流程具体如下。

一 外植体材料选择与处理 早春，将上年芽接或切接的盆栽长富2号苹果苗移人温室，待新梢长出3～5片新叶时，放入热处理箱中，37℃恒温热处理30d或32℃与37℃每8h变换一次，变温热处理60d。脱毒率可达80％以上。热处理结束后，从盆栽苗嫩梢上采集生长旺盛、长约2～3cm顶梢，流水冲洗10min，去掉小叶。70％乙醇浸泡30s，蒸馏水冲洗后放入0.1％HgCI。中消毒10min，无菌水冲洗3～5次，解剖镜下迅速剥取1.0mm的茎尖进行分离培养，接种于起始培养基上。

二 培养基制备 1.1 芽诱导 适宜苹果芽诱导培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L。诱导的芽生长正常可发育成新梢。 1.2 继代培养 选择诱导的芽丛切割成单芽茎段，转接于设计的继代培养基上。适宜的苹果继代培养基为：MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.05mg/L+蔗糖4％+琼脂0.36mg/L。培养条件：光照强度2000～ 2500lx，光照时间14～16h/d，适宜温度为25℃±2.0℃。40d后增殖6.1倍。 1.3 生根培养 选择生长正常的继代培养苗，剪成单芽茎段，插入生根培养基中，苹果适宜的生根培养基为：1／2MS+IAA1.5mg/L+蔗糖25％+琼脂0.36％。培养30d后，平均4～6条根／苗，长达0.5～1.0cm。根白且粗，多直接生于茎基部。

满天星组培快繁技术实例 · 含配方

满天星 Gypsophila elegans 满天星，又名为霞草、重瓣丝石竹，原产地中海沿岸，属石竹科多年生宿根草本花卉。为常绿矮生小灌木，其株高约为65～70cm，茎细皮滑，分枝甚多，叶片窄长，无柄，对生，叶色粉绿。由于它花型小、浅色、花姿蓬松具立体感，气质高雅清秀，给人以朦胧感，花序群体效果极佳，是重要的陪衬花，为当今最流行的切花之一，十分畅销。

满天星种苗多采用边生产切花，边利用植株下部发生的腋芽进行插扦获得。用这种方法，满 天星繁殖系数较低，种苗品质参差不齐，较难获得大批量的优质种苗。一些单瓣种可用种子 繁殖。商品化切花生产的，种苗繁殖以组培为主，采用茎尖培养，繁殖系数高，根系生长状 况好，花枝挺拔，色泽纯正，切花质量高。满天星组织培养繁殖速度快，生根率高，无畸形 变异，过渡苗驯化成活率高，与其他花卉组培相比，易获得成功，但普遍存在玻璃化现象。 1、初代培养 诱导培养基为1/2MS+0.3mg/L 6-BA+0.1mg/L KT+0.3mg/L NAA，或MS+1.0mg/L 6- BA+2.0mg/L KT+0.3mg/L NAA+0.2mg/L IAA，各培养基加3％～4％蔗糖0.6％～0.7％琼脂。培养温度25～27℃，光照强度2000～2200lx，光照时间每天12～16h。 剪取满天星母株上生长较粗壮的嫩梢，剪去展开叶片，留下生长较嫩的叶片，将外植体放在 烧杯中，用自来水冲洗10～20min，然后加入少量家用洗衣粉或洗洁精少许，加入少量的水，用小毛刷搅拌2～5min。用此方法重复数次，再用自来水冲洗干净满天星茎尖上的洗涤液。 把冲洗净的满天星茎尖外植体放入75％的酒精中约3～5min，再用0.1％的升汞浸泡外植体 5～7min，或在10％的漂白粉清洗液中浸泡10～15min，再用无菌蒸馏水冲洗5～7次，即得 无菌外植体，置于无菌操作台中的培养皿中待用。然后将嫩茎切成lcm左右的带芽茎段，腋 芽切取0.5～1.0cm长的茎尖，接种到诱导培养基上。

草莓组织培养研究进展

[摘要] 从草莓组织培养类型（草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养）开始，介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。 [关键词]草莓;组织培养; 草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上七大水果之一，素有“水果皇后”的美称。草莓果实色泽艳丽，芳香多汁，酸甜适度，鲜美可口，营养丰富，每百克果实内含有蛋白质1g，脂肪，糖4～12g，酸～2g，无机盐，粗纤维，Vc45～120mg，比苹果和葡萄高10多倍，并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质，其中锌的含量是香蕉的4倍以上，比柑橘高6倍以上，比苹果高40倍以上。另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效，对促进智力发育有重要作用。深受国内外消费者的喜爱。草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物，近15年来在我国发展迅猛，中国园艺学会草莓分会统计2003年底，我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。在浆果中，草莓的总产量和总面积仅次于葡萄，成为我国发展农村经济，促进农民增收的重要经济作物。 随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长，草莓的病毒病严重影响草莓的生产。作为高级浆果的草莓，在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗：主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖，但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。王国平（1988）等调查，我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上，戴子林（1995）等调查，我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上；感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢，一般减产30%-80%，并逐年加重；严重影响草莓的长势、品质和产量，对病毒病目前还没有药剂可以防治。 通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗，可以解决上述问题。近年来在草莓种苗生产中，有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视，本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。 一、常见草莓组织培养类型 目前，国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道：常用的外植体主要有：茎尖（Adam，1972；庆子孝，1972；谭兰英等，1981）、腋芽（Boxus，1974、1977；杨乃博，1981）、叶片、叶柄、茎段，花药（Quak,1977；大泽，1972）。常见的草莓组织培养主要的类型：草莓茎尖组织培养、草莓叶片和叶柄组织培养、

草莓组织培养研究进展

草莓组织培养 [摘要] 从草莓组织培养类型（草莓茎尖组织培养、草莓花药培养、草莓叶片、叶柄组织培养）开始，介绍了近几十年国内外草莓组培的研究现状和进展。 [关键词]草莓;组织培养; 草莓是蔷薇科草莓属多年生草本植物，是世界上七大水果之一，素有“水果皇后”的美称。草莓果实色泽艳丽，芳香多汁，酸甜适度，鲜美可口，营养丰富，每百克果实内含有蛋白质1g，脂肪0.6g，糖4～12g，酸0.8～2g，无机盐0.6g，粗纤维1.5g，Vc45～120mg，比苹果和葡萄高10多倍，并含有丰富的磷、钙、铁、锌等矿物质，其中锌的含量是香蕉的4倍以上，比柑橘高6倍以上，比苹果高40倍以上。另外食用草莓对肠胃病和贫血病有一定的疗效，对促进智力发育有重要作用。深受国内外消费者的喜爱。草莓作为一种栽培周期短、结果早、见效快的经济作物，近15年来在我国发展迅猛，中国园艺学会草莓分会统计2003年底，我国草莓总面积和总产量均跃居世界第一位。在浆果中，草莓的总产量和总面积仅次于葡萄，成为我国发展农村经济，促进农民增收的重要经济作物。 随着草莓在国内栽培面积的扩大和种植年限的延长，草莓的病毒病严重影响草莓的生产。作为高级浆果的草莓，在我国目前的生产栽培上多沿用无性繁殖种苗：主要方法是匍匐茎繁殖和分株繁殖，但这两种方法效率低、种苗易退化、易造成病毒蔓延。王国平（1988）等调查，我国栽培草莓带病毒植株率过80%以上，戴子林（1995）等调查，我国长江流域感染大面积植株感染率在50%以上；感染了病毒病的草莓果子一年比一年小、畸形、品质差、生长缓慢，一般减产30%-80%，并逐年加重；严重影响草莓的长势、品质和产量，对病毒病目前还没有药剂可以防治。 通过草莓组织培养扩繁草莓脱毒苗，可以解决上述问题。近年来在草莓种苗生产中，有关草莓组培快繁技术的研究备受人们的重视，本文就草莓组织培养研究与应用作一综述。 一、常见草莓组织培养类型 目前，国内外在草莓品种快速繁殖上已有不少报道：常用的外植体主要有：茎尖（Adam，1972；庆子孝，1972；谭兰英等，1981）、腋芽（Boxus，1974、1977；杨乃博，1981）、叶片、叶柄、茎段，花药（Quak,1977；大泽，1972）。常见的草莓组织培养主要的类型：草莓茎尖组织培养、草莓叶片和叶柄组织培养、

草莓组培苗工厂化生产的可行性报告

草莓组培苗工厂化生产的可行性报告 学科专业植物细胞工程__ 指导老师范淑芳___ 班级生物技术及应用（1）班 学号 2070307030142 姓名关前军_ _

草莓组培苗工厂化生产的可行性报告 草莓(Fragaria ananassaDuch)属蔷薇科、草莓属,多年生草本植物,在 世界小浆果生产中荣居榜首。含丰富蛋白质、无机盐、维生素C等营养物质, 食之柔软多汁、酸甜适度、芳香浓郁,深受消费者喜爱。草莓传统繁殖方法通 常用匍匐茎分株繁殖,此法繁殖速度慢,而且极易感染病毒,母本苗栽植1年 后即可被蚜传病毒感染,减产可达20%以上,高者可达60%,染毒植株果小、含 糖量低,降低商品价值和食用价值。利用组培育苗,不仅繁殖速度快,而且可获 得无毒植株。 1 项目背景 1、1 组培苗工厂化生产受限原因 ①组培生产设备、设施投资大，生产耗费高，导致产品成本较高； ②专业人才少，从业者缺乏生产和管理经验，难以对生产工艺流程进行完 善和优化； ③消费者对组培苗的认识不足，产品营销受市场制约严重，价格偏低，限 制了组培苗工厂化生产的发展； ④由于组培技术水平的限制，试管苗生产性能不稳定或难以预知，造成消 费者不敢大批量应用于生产。 1、2 社会需求 脱毒草莓苗具有出生长快，长势旺，茎叶粗壮，繁殖系数高的优良特征，同时具有果子外观好，色泽鲜红，均匀整齐，增产效益高和植株抗病能力强，等许多优点。草莓脱毒苗在生产上极明显的增产效益可连续保持三年以上，是目前农业调整产业结构，发展高效益农业的理想经济作物，故各地果农对脱毒草莓的需求巨大。 1、3 发展前景 草莓是国外最受欢迎的保健水果，具有不断增长的出口需求和发展前景草莓被欧美国家誉为“水果皇后”，不仅含有比其他水果高10倍的维生素，而且果实中所含的鞣花酸具有抗癌效果，因此在欧美市场十分畅销，售价是苹果的5倍、葡萄的2倍，而且供不应求。脱毒草莓具有科技含量高、栽培容易、增产效

菊苣的组培快繁技术

菊苣(Cichorium intybus L.)菊科菊苣属多年生草本植物。根肉质、短粗；茎直立，有棱，中空，多分枝；叶互生，长倒披针形；头状花序，花冠舌状，花色青蓝。 菊苣为药食两用植物，叶可调制生菜，根含菊糖及芳香族物质，可提制代用咖啡，促进人体 消化器官活动；其地上部分及根可供药用，中药名分别为菊苣、菊苣根，具有清热解毒，利 尿消肿，健胃等功效。 该植物耐寒，耐旱，喜生于阳光充足的田边、山坡等地，具有较强的固土护坡与水土保持作用。为此，艾比蒂繁育大量菊苣组培苗，为大面积的沙漠和退化、沙化土地提供帮助。 菊苣の快繁技术 材料准备 菊苣的种子为外殖体 培养条件 初代培养基 MS+BA0.5-1.0mg/L+IBA0.05-0.1 mg/L 愈伤组织诱导分化培养基

MS+BA1.0-1.5mg/L+IBA0.05-0.1 mg/L 生根培养基 1/2MS+NAA0.05-1.0 mg/L 以上培养基中加入2-3%的蔗糖和0.7%琼脂，pH 5.8-6.8，培养温度为25±2℃，光照时间12 h，光照强度为1000-2000LX。 生长与分化情况 (1) 初代培养：挑选野生菊苣结实饱满的成熟种子，用纱布包好，在超净工作台内，用75% 乙醇消毒30s，再用0.1%的氯化汞浸泡3-5分钟，无菌水冲洗3-5次，种子用滤纸吸干，置 于初代培养基上培养。15-20天，菊苣种子萌发生长2cm左右，切取0.5cm左右的叶片接种 于诱导分化的培养基上。 (2) 愈伤组织诱导分化培养：15-20天叶片分化为疏松的愈伤组织，有绿点凸起的愈伤组织逐 渐长出了小芽。芽生长较快，20天左右长成2-3cm的植株。 (3)生根培养：挑选3-4cm生长健壮的植株转接入生根培养基上，培养10天左右就有根的发生，根生长较快，须根较多。

草莓组培实习报告

草莓组培实习 华南农业大学李志真 一、实习意义 植物脱毒苗在农业生产中广泛使用对于降低农业生产成本、提高农产品的品质、改善农业的产业结构、提高农民经济收入都有重要的作用。草莓属多年生草本植物，靠生长出的匍匐茎进行营养繁殖，经多年种植后极易感染多种病毒，致使品质及产量降低，经济效益明显下降。利用组培快繁技术可对草莓脱毒苗进行快速繁殖及推广，出苗整齐，可进行周年生产，不受季节限制，实现新品种的工厂化育苗，并迅速推广。因此在草莓组织培养中，掌握草莓脱毒苗的培养与移栽有重要意义。 二、实习内容 实习主要掌握草莓脱毒苗的培养及大田移栽方法。 移栽的适宜温度为15度到25度。环境温度太高，炼苗不易成活，而环境温度太低，则幼苗生长缓慢。因此，炼苗宜在春秋两季温度适宜时进行。冬季也可以在温室内进行炼苗。炼苗时最好使用由透气性能好、保水能力强的蛭石作为基质配制成的培养体系。蛭石无菌无毒，但亦无营养，因此应定期浇以稀释1倍的MS培养液作为营养液代替水进行浇灌，保证脱毒苗营养及水分的供给。 移栽时，先将草莓生根培养瓶上的扎口绳或皮筋松开使组培苗初步接触空气，让植株开始长出角质层。时间约为2～3d。然后移去瓶口包扎物，让组培苗充分接触空气，2～3d后，组培苗对外界环境已逐渐适应，且培养基已开始长出菌类，此时进行组培苗的出瓶炼苗。首先，小心地用镊子夹持组培苗将苗从瓶中移出，用流水慢慢冲净植株根部的培养基，注意切勿伤及根部的根毛，小心地将洗净的脱毒苗移栽到事先已经灭菌处理过的苗床上。栽苗的深度要做到，浅不露根，深不埋心，浇足水，并用塑料膜进行覆盖使棚内的相对湿度保持在80%左右，以后定期放风，逐渐降低棚内的相对湿度，直至将塑料膜去掉。 于4月上旬选择透气性良好、疏松肥沃的土壤种植脱毒草莓苗，行距、株距各为1m，浇足水，并用防虫网进行覆盖，防止病虫害感染传毒。于9月上旬取健壮的匍匐茎苗进行大田移栽。 三、实习收获

草莓组培苗工厂化生产的可行性报告

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草莓(Fragaria ananassaDuch)属蔷薇科、草莓属,多年生草本植物,在 世界小浆果生产中荣居榜首。含丰富蛋白质、无机盐、维生素C等营养物质, 食之柔软多汁、酸甜适度、芳香浓郁,深受消费者喜爱。草莓传统繁殖方法通 常用匍匐茎分株繁殖,此法繁殖速度慢,而且极易感染病毒,母本苗栽植1年 后即可被蚜传病毒感染,减产可达20%以上,高者可达60%,染毒植株果小、含 糖量低,降低商品价值和食用价值。利用组培育苗,不仅繁殖速度快,而且可获 得无毒植株。 1 项目背景 1、1 组培苗工厂化生产受限原因 ①组培生产设备、设施投资大，生产耗费高，导致产品成本较高； ②专业人才少，从业者缺乏生产和管理经验，难以对生产工艺流程进行完 善和优化； ③消费者对组培苗的认识不足，产品营销受市场制约严重，价格偏低，限 制了组培苗工厂化生产的发展； ④由于组培技术水平的限制，试管苗生产性能不稳定或难以预知，造成消 费者不敢大批量应用于生产。 1、2 社会需求 脱毒草莓苗具有出生长快，长势旺，茎叶粗壮，繁殖系数高的优良特征，同时具有果子外观好，色泽鲜红，均匀整齐，增产效益高和植株抗病能力强，等许多优点。草莓脱毒苗在生产上极明显的增产效益可连续保持三年以上，是目前农业调整产业结构，发展高效益农业的理想经济作物，故各地果农对脱毒草莓的需求巨大。 1、3 发展前景 草莓是国外最受欢迎的保健水果，具有不断增长的出口需求和发展前景草莓被欧美国家誉为“水果皇后”，不仅含有比其他水果高10倍的维生素，而且果实中所含的鞣花酸具有抗癌效果，因此在欧美市场十分畅销，售价是苹果的5倍、葡萄的2倍，而且供不应求。脱毒草莓具有科技含量高、栽培容易、增产效果显著、周期短、没有风险和经济效益高等特点，为满足日益增长的社会需求，脱毒草莓苗是发展我国高效农业和绿色有机农业的首选经济作物。 2 生产规模的确定

草莓的组织培养

草莓的组织培养 草莓( Fr agaria ananassa Duch)是蔷薇科草莓属宿根性多年生草本植物,为世界性水果,其栽培面积和产量在世界浆果类水果生产中仅次于葡萄.草莓具有适应性广、栽培容易、结果早、产量高、收益好等优点,是一种经济价值较高的天然高档食品,除供鲜食外,还可加工成罐头、酱、酒、饮料等制品,并有较高的医疗保健作用.因此,全国各地都在积极引种. 一、茎尖组织培养 1.文章概述: 何欢乐, 阳静, 蔡润, 潘俊松等人以草莓匍匐茎为材料,截取3~4cm长的顶端.在双筒解剖镜下由外向内逐层剥去幼叶,直至闪亮半圆球的顶端分生组织充分暴露出来.切取 1.0mm的茎尖接种到MS培养基（3%蔗糖,8%琼脂,pH值为5.6）上,培养容器为100ml的玻璃瓶.培养基放30~40ml/瓶.茎尖培养通常先形成愈伤组织,再长出不定芽,经不定芽增殖形成植株. 2.结论 (1) 发生途径:选生长不久的草莓茎尖——材料处理及消毒——接种——培养——继代培养——生根. (2) 灭菌方法:自田间选取健壮草莓母株上生长充实而小叶尚为展开的匍匐茎顶端约3~4cm长的顶芽,用自来水冲洗2~3h后,在超净台上进行灭菌处理,先用小镊子将匍匐茎的外部大叶摘除,再用70%酒精快速处理30s,用饱和漂白精液浸泡15min,然后用无菌水冲洗3~5遍. (3) 培养基: 诱导草莓茎尖成活与生长的最适培养基为+BA 0.5mg/L. 丛生芽的增殖,最优的增殖培养基以MS+BA 0.5mg/L为好. 草莓是比较容易在培养基上生根的植物,其生根不需要任何激素 刺激,只需1/2 MS 就可达到最好的生根效果. (4) 条件:光照31.25umol/m2/s,14 h/d,温度25±2℃. 二、草莓叶片培养 草莓品种改良多采用常规杂交育种技术,由于草莓的高杂合性和多倍性,使得杂交育种工作周期长、工作量大,而且目标性状常与不良性状连锁,造成育种效率低.生物技术作为现今植物改良的有效手段极大地推动了草莓育种工作的进程.自