高中生物选修1精品学案：2.1 微生物的实验室培养(二)

第5课时 微生物的实验室培养(二)

[学习导航] 1.通过阅读教材P 16～17“(一)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基”，掌握配制培养基的步骤和倒平板操作的过程。2.结合教材P 18～19“(二)纯化大肠杆菌”，理解并掌握利用平板划线法和稀释涂布平板法来纯化微生物的方法。

[重难点击] 1.掌握制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法。2.学会用平板划线法和稀释涂布平板法纯化微生物。

一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基

牛肉膏蛋白胨固体培养基是细菌培养中常用的一种培养基，大肠杆菌的纯化就是用的该培养基。

1．牛肉膏蛋白胨培养基的成分及各成分提供的营养

培养基组分 提供的主要营养物质 牛肉膏5.0 g 碳源、氮源、磷酸盐和维生素

蛋白胨10.0 g 碳源、氮源和维生素

NaCl 5.0 g 无机盐 蒸馏水定容至1 000 mL

氢元素、氧元素

2.制备步骤 (1)培养基的配制

计算：根据牛肉膏蛋白胨培养基_____的比例，计算配制100 mL 培养基时各成分的用量 ↓

称量?????

0.5 g 牛肉膏：比较黏稠，用 称取1 g ：易吸潮，要 (牛肉膏也是)0.5 g NaCl

2 g

↓

溶化?????

牛肉膏和称量纸＋水

↓加热溶化后取出称量纸加蛋白胨和NaCl

↓微火加热、不断搅拌

溶解后加 (

需不断用玻棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂) ↓

熔化后，补加蒸馏水至 mL

↓

：1 moL 的NaOH 、pH 试纸，将pH 调为7.4 ～7.6 ↓

______：趁热分装到洁净锥形瓶中 ↓

加棉塞：用棉花不用脱脂棉，脱脂棉吸水 ↓

包扎：外包______纸，且挂标签

(2)灭菌?

????

①培养基： 灭菌

②培养皿： 灭菌

(3)倒平板

①将______的培养皿放在______的桌面上，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞。 ②右手拿锥形瓶，使瓶口__________。

③用左手将培养皿打开一条__________的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖。

④等待平板冷却凝固后，将平板____________。

1．填表比较溶化时两次使用玻棒搅拌的目的

操作

搅拌的目的

往烧杯中加入蛋白胨和氯化钠后用玻棒搅拌 加入琼脂，加热使其熔化的过程中使用玻棒搅拌

2.倒平板时的注意事项

(1)培养基灭菌后，需要冷却至50 ℃左右时，才能倒平板的原因是什么？你用什么办法来估计培养基的温度？

(2)分析下图，回答①、②问题：

①为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？

②从防止杂菌污染的角度思考，平板冷凝后将平板倒置的原因是什么？

(3)怎样判断制备的培养基是否合格、成功，是否受到污染？

1．某学校开展大肠杆菌培养活动，首先对实验室进行清扫和消毒处理，然后准备各种原料和用具。请回答下列问题：

(1)对买回来的菌种进行扩大培养，首先制备试管培养基，写出制备牛肉膏蛋白胨固体培养基所需的原料：_____________________________________________________________。(2)微生物在生长过程中对各种成分需求量不同，配制培养基时各成分要有合适的________。在烧杯中加入琼脂后要不停________，防止______________________。

(3)将配制好的培养基分装到试管中，加棉塞后若干支试管一捆，包上牛皮纸并用皮筋勒紧放入______________中灭菌。灭菌完毕后拔掉电源，待压力表的压力自然降到0时，将试管取出。如果棉塞上沾有培养基，此试管应____________。

2．制备各种牛肉膏蛋白胨固体培养基，关于倒平板的具体描述正确的是()

①待培养基冷却至40 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板②将灭过菌的培养皿放在桌面上，左手拔出棉塞③右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰④用左手的拇指和食指完全打开皿盖⑤右手将锥形瓶中培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖⑥等待平板冷却5～10 s，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上

A．①③④⑤B．④⑤⑥

C．③⑤D．①②④⑥

问题导析 (1)培养基灭菌后，需冷却至______左右时才能倒平板，原因是琼脂在44 ℃以下凝固。

(2)倒平板的过程要在____________附近进行。 一题多变

倒平板的过程需要进行无菌操作，在培养基的制备过程中，还有哪些环节需要进行无菌操作？ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。

二、微生物的分离与纯化技术

1．纯化大肠杆菌 (1)平板划线法

①原理：通过接种环在琼脂固体培养基表面_______的操作，将聚集的菌种逐步_______到培养基的表面。 ②步骤

接种环灭菌：将接种环放在酒精灯火焰上灼烧直至烧红 ↓

取菌种?????

a.在酒精灯 冷却接种环，并打开盛有菌液的

试管的

b.将试管口通过 达到消灭试管口杂菌的目的

c.将已 的接种环伸入菌液中，沾取一环菌液

d.将试管口 ，并塞上棉塞

↓

平板划线???????

a.左手将皿盖打开一条缝隙，右手把沾有菌种的

接种环迅速伸入平板内，划 条平行线，

盖上皿盖。注意 。

b.灼烧接种环，待其冷却后，从第一 区域 开始往第二区域

内划线。重复以上操作，完成三、 四、五区域内划线。注意不要将最 后一区的划线与 相连

↓

培养：将平板 ，放入培养箱中培养 (2)稀释涂布平板法

①原理：将菌液进行一系列的

，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养

基的表面，进行培养。

②步骤

Ⅰ.系列稀释操作

a.编号为101～106试管中分别盛有水。

b.用移液管吸取培养的菌液，注入101倍稀释的试管中，得到稀释菌液。

c.从101倍稀释的试管中吸取1 mL稀释液，注入102倍稀释的试管中。依次类推，完成菌液的稀释。

注意移液管要经过灭菌，并且操作应在酒精灯火焰附近完成。

Ⅱ.涂布平板操作

涂布器消毒：将涂布器浸在盛有的烧杯中

↓

取菌液：取少量菌液滴加到表面

↓

涂布器灭菌：将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后，

8～10 s

↓

涂布平板：用涂布器将均匀涂布在培养基表面，涂布时可转动培养皿，

使菌液分布均匀

2．菌种保藏

比较项目临时保藏甘油管藏

适用范围__________的菌种______的菌种

培养基__________培养基______培养基

保藏温度 4 ℃－20 ℃

具体方法接种到固体斜面培养基上→适宜

温度下培养→____冰箱中保藏

甘油瓶中装入甘油后______→将菌液转

移至甘油瓶中→混匀后冷冻箱中保存

1．平板划线操作注意事项

(1)平板划线法接种菌种时，哪些操作可防止杂菌污染？

(2)在灼烧接种环之后，为什么要等其冷却后再进行划线？

(3)为什么在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环？

(4)在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？

(5)在做第二次划线以及其后的操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？

(6)为何最后一次划线不能与第一次划线相连？

2．稀释涂布平板操作注意事项

(1)涂布平板的所有操作都应在火焰附近进行。结合平板划线与系列稀释的无菌操作要求，想一想将菌液滴加到培养基上时应如何进行无菌操作？

(2)操作结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养？未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长，说明了什么？

归纳总结两种接种方法比较

平板划线法稀释涂布平板法

用途一般用于菌种的纯化一般用于筛选菌株

优点可对混合菌进行分离可以计数

缺点不能计数较麻烦，平板干燥效果不好；若菌液浓度大则长不出单菌落培养

结果

3．稀释涂布平板法是微生物培养中常用的一种接种方法。下列相关叙述错误的是() A．操作中需要将菌液进行一系列的梯度稀释

B．需将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基表面

C．不同浓度的菌液均可在培养基表面形成单个菌落

D．操作过程中对培养基和涂布器等均需进行严格灭菌处理

一题多变

(1)B项中不同稀释度的菌液一般涂布几个平板为宜？

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(2)如何证明该接种过程是成功的？

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(3)题中如果不同稀释度的菌液接种后都不能得到单细胞菌落，原因可能是什么？

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

(4)如果不进行D项操作，培养基上的菌落可能有哪些变化？

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

4．图甲是稀释涂布平板法中的部分操作，图乙是平板划线法操作结果。

下列叙述中，错误的是()

A．甲中涂布前要将涂布器灼烧，冷却后才能取菌液

B．对于浓度较高的菌液，如果甲中的稀释倍数仅为102，则所得的菌落不是由单一的细胞或孢子繁殖而成

C．乙中培养皿中所得的菌落都符合要求

D．乙中的连续划线的起点是上一次划线的末端

问题导析(1)对菌液进行稀释时，菌液中菌体的浓度越高，则稀释的倍数也要______，菌体的浓度低时，则稀释的倍数不必______。

(2)高温会杀死菌体，所以一些经过高温或灼烧灭菌的器材需要______后才能接触菌种。

(3)平板划线法的多次划线中，菌体________，即不同划线处的________不同，所以形成的菌落并非全部是由单个菌体繁殖而成的。

一题多变

稀释倍数和划线次数是两种接种方法的关键，决定稀释倍数和划线次数的因素是什么？

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

拓展提升两种接种方法中，只有稀释涂布平板法才适合对细菌进行计数的原因

只要稀释倍数足够高，则稀释涂布平板法中形成的每个菌落都是由单一菌体繁殖而成的，即一个肉眼看不见的细菌对应着一个可以看见的菌落，可以通过统计菌落的数目推测出细菌的

数目。而平板划线法中除了最后一次划线末端处的菌落是由单一的细菌繁殖而成的，其他每个菌落往往是由多个细菌一起繁殖而成，即一个菌落并非对应着一个细菌，所以不适合用于细菌的计数。

1．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是()

A．计算、称量、倒平板、溶化、灭菌

B．计算、称量、溶化、倒平板、灭菌

C．计算、称量、溶化、灭菌、倒平板

D．计算、称量、灭菌、溶化、倒平板

2．平板冷凝后，要将平板倒置，其原因是()

A．接种时再拿起来方便

B．在皿底上标记日期等方便

C．正着放置容易破碎

D．防止皿盖上的冷凝水落入培养基造成污染

3．如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1→2→3→4→5。下列操作方法正确的是()

A．操作前不用进行任何处理

B．划线操作必须在火焰上进行

C．在5区域中才可以得到所需菌落

D．在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

4．分离纯化大肠杆菌最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。下列有关这两种方法的叙述错误的是()

A．均将大肠杆菌接种在固体培养基的表面

B．获得的每个菌落均是由一个细菌繁殖而来的子细胞群

C．都应在火焰附近进行操作，以防止杂菌污染

D．稀释分散菌种的原理不同，均能达到分离纯化大肠杆菌的目的

5．下表是从土壤中分离纯化土壤细菌的培养基配方。请回答下面的问题。

(1)培养基的类型很多，但培养基中一般都含有水、碳源、__________和无机盐。上述培养基配方中能充当碳源的成分是______________________。培养基配制完成以后，一般还要调节pH并对培养基进行__________处理。

(2)分离纯化微生物最常使用的接种方法是__________和__________________。

(3)假设培养结束后，发现培养基上菌落连成一片，可能的原因是什么？(列举两项)

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。

[答案]精析

一、基础梳理

2．(1)配方称量纸蛋白胨迅速称取琼脂琼脂100调节pH分装牛皮

(2)①高压蒸汽②干热(3)①灭过菌火焰旁②迅速通过火焰③稍大于瓶口④倒过来放置

问题探究

1．促使蛋白胨和氯化钠溶解防止琼脂糊底而导致烧杯破裂

2．(1)琼脂是一种多糖，在98 ℃以上熔化，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃则会烫手，低于50 ℃时若不及时操作，琼脂会凝固。可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。

(2)①通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。

②平板冷凝后，皿盖上会凝结水珠，凝固后的培养基表面的湿度也比较高，将平板倒置，既可以使培养基表面的水分更好地挥发，又可以防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。(3)未接种的培养基在恒温箱中保温一段时间后，如果无菌落生长，说明培养基制备成功、合格，未受到污染。

拓展应用

1．(1)牛肉膏、蛋白胨、蒸馏水、NaCl、琼脂

(2)比例搅拌琼脂糊底引起烧杯破裂

(3)高压蒸汽灭菌锅废弃

2．C[琼脂是一种多糖，在98 ℃以上可溶解于水，在44 ℃以下凝固，倒平板时高于50 ℃则会烫手，低于50 ℃时若不能及时操作，琼脂会凝固。无菌操作应贯穿于操作的全过程，皿盖全打开则空气中的微生物会进入培养基。等待平板冷却凝固(大约需5～10 min)后，将平板倒过来放置，使皿盖在下，皿底在上。]

问题导析(1)50 ℃(2)酒精灯火焰

一题多变要对培养基进行高压蒸汽灭菌，对培养皿进行干热灭菌，酒精灯火焰旁属于灼烧灭菌。

二、基础梳理

1．(1)①连续划线稀释分散②火焰旁棉塞火焰冷却通过火焰三至五不要划破培养基b．划线的末端第一区倒置(2)①梯度稀释②Ⅰ：9 mL 1 mLⅡ：酒精培养基冷却菌液

2．频繁使用长期保存固体斜面液体 4 ℃灭菌

问题探究

1．(1)①接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧。②划完一个区域后，将接种环灼烧，冷却后再划下一区域。③接种环沾取菌液时，要将试管口、棉塞等通过火焰。④划线时将培养皿打开一条缝隙，将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内。

(2)避免接种环温度太高，杀死菌种。

(3)操作的第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物。每次划线前灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后，接种环上残留的菌种，使下一次划线时，接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，从而通过划线次数的增加，使每次划线时菌种的数目逐渐减少，以便得到菌落。

(4)需要。划线结束后灼烧接种环，能及时杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。

(5)划线后末端含有的细菌数目较少，每次从上一次的末端开始划线能够使细菌的数目随划线次数的增加而逐渐减少，最终分散成单个的细菌。

(6)最后一次划线已经将细菌稀释成单个的细胞，如果与第一次划线相连则增加了细菌的数目，得不到纯化的效果。

2．(1)应从操作的各个细节保证“无菌”。例如，酒精灯与培养皿的距离要合适，吸管头不要接触任何其他物体，吸管要在酒精灯火焰附近等。

(2)培养未接种培养基的作用是对照。未接种的培养基在恒温箱中保温1～2 d后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的；若有菌落生长，说明培养基灭菌不彻底，或培养基被污染，需要重新制备。

拓展应用

3．C[稀释涂布平板法要先将菌液进行一系列的梯度稀释，A项正确；只有在稀释度足够高的菌液中，聚集在一起的微生物才被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个菌落，故而要将不同稀释度的菌液分别涂布平板，B项正确、C项错误；在稀释涂布过程中，为防止杂菌污染，要对培养基和涂布器等进行严格灭菌处理，D项正确。]

一题多变(1)为保证结果准确，每个稀释度的菌液一般涂布3个平板，并对结果取平均值。

(2)将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入适宜温度的恒温箱中，培养12 h和24 h 后，观察培养基上的菌落情况，若未接种的培养基上无菌落生长，则证明操作是成功的；否则不成功。

(3)可能是稀释度不够，聚集在一起的微生物没能被分散成单个细胞。

(4)菌落种类和数目增多。

4．C[灼烧后的接种环如果没有冷却就接触菌种，会将菌体杀死，A正确；稀释倍数过低，

会导致多个菌体聚集在一起繁殖成菌落，B正确；平板划线法中一般最后一次划线的末端处形成的菌落才是由单一的细胞或孢子繁殖而成，这种菌落才符合要求，C错误；连续划线中，除了第一次划线外，每一次划线的起点是上一次划线的末端，目的是使得菌体密度越来越小，保证最后划线末端处的菌落是由单一的细胞或孢子繁殖而成。]

问题导析(1)越高太高(2)冷却(3)越来越少菌体数目

一题多变决定稀释倍数及划线次数的因素是菌液的浓度，如果菌液的浓度较高则需要高倍数的稀释，所划线次数也要较多，否则就可以低倍稀释或减少划线次数。

课堂小结称量倒平板平板划线法稀释涂布平板法

当堂检测

1．C[制备牛肉膏蛋白胨固体培养基，应先根据需要计算各成分用量，然后称量、溶化、灭菌、倒平板。]

2．D[平板倒置主要是防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染。]

3．D[划线之前应对接种环灭菌；划线操作在酒精灯火焰旁进行；从1区域至5区域菌落密度越来越小，可能会在3、4、5区域得到所需菌落。]

4．B[用稀释涂布平板法时，如果稀释得当，在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落，这个菌落可能是由一个细菌细胞繁殖形成的。平板划线中最后一次划线的末端处形成的菌落才是由单一的细胞或孢子繁殖而成，这种菌落才符合要求。]

5．(1)氮源牛肉膏和蛋白胨灭菌(2)平板划线法稀释涂布平板法(3)稀释倍数不够，菌液的浓度太高；划线时，划完第一次没有灭菌又接着划第二次；培养过程灭菌不严格，受到微生物的污染

[解析](1)培养微生物的培养基中一般含有水、无机盐、碳源、氮源和生长因子。牛肉膏、蛋白胨既是碳源又是氮源；培养基在接种前必须灭菌处理。

(2)微生物的接种方法包括平板划线法和稀释涂布平板法两种。

(3)多种因素都会导致接种的菌种密度较大，没有形成单一的菌落。

(完整版)人教版高中生物选修一第一章学案和习题1

商丘市一高2010-2011学年下学期 高三生物 选修1 1.1果酒和果醋的制作 编制：秦伟 审定： 备课组长： 使用时间： 总第 期 1 1．有细胞结构而没有核膜的一组生物是 ( ) A ．噬菌体、细菌 B ．变形虫、草履虫 C ．蓝藻、酵母菌 D ．放线菌、圆褐固氮菌 2．酒厂用酵母菌酿酒时，经检测活菌数量适宜但却不产生酒精，应采取的措施是 ( ) A ．降低温度 B ．隔绝空气 C ．加缓冲液 D ．加新鲜培养基 3．将葡萄汁制成果酒和果醋后 （ ） A ．能量减少，有机物种类变化 B ．能量增加，有机物种类不变 C ．能量不变，有机物种类变化 D ．能量减少，有机物种类不变 4．细胞结构是原核细胞、生长繁殖过程不需氧、体内不含有氧呼吸酶的微生物是 ( ) A ．酵母菌 B ．醋酸菌 C ．乳酸菌 D ．变形虫 5．在醋酸菌利用葡萄酒生产葡萄醋的过程中，因为培养环境的改变，醋酸菌也可能出现变异现象，这种变异来源是 ( ) A ．染色体变异 B ．基因突变 C ．基因重组 D ．等位基因分离 6．(多选)若在制作葡萄酒时，在发酵液中同时生成了葡萄醋，可能的原因是 ( ) A ．密封不严，有氧气进入 B ．有空气中的醋酸菌进入 C ．发酵罐消毒不彻底 D ．发酵液灭菌不彻底 7．(多选)制作葡萄酒的过程中，涉及的操作过程有 ( ) A ．发酵装置的消毒 B ．接种菌种 C ．通人氧气量和酸碱度的控制 D ．发酵过程高温加热 8．下列关于果酒和果醋制作的叙述，错误的是 ( ) A ．制作果酒时瓶口需密闭，而制作果醋时中断通氧可能会引起醋酸菌死亡 B ．温度对酵母菌酒精发酵的影响很大，而对醋酸菌的发酵影响不大 C ．在变酸的果酒的表面观察到的菌膜可能是醋酸菌在液面大量繁殖形成的 D ．制作果酒和果醋时都应用70%的酒精对发酵瓶消毒并注意无菌操作 9．利用微生物发酵制作果酒，该过程利用的微生物是___________，其代谢类型是 ____________，与生产实际相关的反应式是_______________ ， 在不灭菌的情况下，如何使酵母菌成为优势菌种?____ ________________________ _____________________________ ___________。 10．酵母菌是自然界中常见的一类真菌． (1)从细胞核的结构看，酵母菌属于_______________________ 生物． (2)酵母菌常进行___________________生殖，在基因工程中，也常用酵母菌作为转入基因的受体细胞，是因为___________________________________________________。 (3)用染料使染色体着色，发现一酵母菌细胞核中有17条染色体，该酵母菌是______倍 体．在自然环境中，酵母菌属于生态系统中的___ ___成分． (4)酵母菌体内遗传物质主要在 上，而醋酸菌的遗传物质主要在________上． 11．下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题： (1)完成图1中的实验流程。 (2)冲洗的主要目的是_________，冲洗应特别注意不能____________，以防止菌种的流失。 (3)图2装置中的充气口在________时关闭，在_______时连接充气泵，并连续不断地向内________________________________________________________________________。 (4)排气口在酒精发酵时排出的气体是由_______产生的______，在醋酸发酵时排出的是________________________________________________________________________。 (5)写出与(4)题有关的反应方程式： ①________________________________________________________________________； ②________________________________________________________________________。 (6)若在果汁中就含有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明原因_______________________________________________________________________________________________________________。 (7)在酒精发酵时瓶内温度一般应控制在________。醋酸发酵时温度一般应控制在________。 1.1答案 1—8 DBACB ABCD ABC B 9、酵母菌 异养兼性厌氧型 C 6H 12O 6 2C 2H 5OH+2CO 2+能量 将混合菌置于缺氧，酸性环境下，利用酵母菌兼性厌氧的特点，而绝大多数其他微生物都无法适应这一环境受到抑制 10、真菌 出芽 酵母菌繁殖快 遗传物质相对少 单 分解者 细胞核 拟核 11、(1)醋酸发酵 (2)洗去浮尘 反复冲洗 (3)酒精发酵 醋酸发酵 泵入空气(氧) (4)酵母菌 CO 2 ( 含氧量少的)空气、CO 2 (5)C 6H 12O 6―→2C 2H 5OH ＋2CO 2 C 6H 12O 6＋2O 2―→2CH 3COOH ＋2CO 2＋2H 2O ， C 2H 5OH ＋O 2―→CH 3COOH ＋H 2O (6)不能。因为酒精发酵时的缺氧环境能抑制醋酸菌生长，且醋酸菌发酵条件是氧气充足 (7)18 ～25 ℃ 30 ～35 ℃ 作 业 班级： 学号 ： 姓名： 高三生物 酶

2019年临床执业医师医学微生物学试题及答案(卷八)

2019年临床执业医师医学微生物学试题及答案（卷八）一.选择题： A型题 1. 霍乱弧菌的主要致病物质不包括 A. 鞭毛 B. 菌毛 C. 毒力因子 D. 肠毒素 E. 内毒素 2. 弧菌主要分布于 A. 空气 B. 土壤 C. 水 D. 人体肠道 E. 动物体肠道 3. 弧菌具有下列哪种结构? A. 鞭毛 B. 芽胞 C. Vi抗原 D. M蛋白 E. A蛋白 4. 关于霍乱弧菌的生物学性状，错误的是

A. 碱性蛋白胨水可作为选择增菌培养基 B. 霍乱弧菌耐碱不耐酸 C. 霍乱病人粪便悬滴标本中，可见“鱼群样穿梭”运动 D. EL-Tor生物型霍乱弧菌抵抗力强，因为能形成芽胞 E. 革兰氏染色阴性 5. 关于霍乱肠毒素，错误的是 A. A亚单位是毒性亚单位 B. B亚单位是结合亚单位 C. 由1个A亚单位和5个B亚单位组成 D. 其受体是糖蛋白 E. 是霍乱弧菌的主要致病物质 6. 霍乱弧菌在下列哪种培养基上生长良好? A. 血清肉汤 B. 肉浸液 C. 碱性蛋白胨水 D. 庖肉培养基 E. 葡萄糖蛋白胨水 7. 取病人米泔水样粪便作悬滴观察，可见到“穿梭”运动的细菌是： A. 肠侵袭性大肠杆菌 B. 伤寒杆菌 C. 变形杆菌

D. 猪霍乱沙门菌 E. 霍乱弧菌 8. 霍乱弧菌有哪些抗原? A. 耐热O抗原与不耐热的H抗原 B. 不耐热O抗原与耐热的H抗原 C. 耐热O抗原与耐热的H抗原 D. 不耐热O抗原与不耐热的H抗原 E. 以上都不是 9. 关于霍乱，错误的是 A. 属于烈性传染病 B. 人类是霍乱弧菌的唯一易感者 C. 病愈后，少数病人可长期带菌 D. 病后的免疫力短暂 E. 接种霍乱死菌苗可增强人群的特异性免疫力 10. 霍乱肠毒素作用于小肠粘膜上皮细胞，使胞内腺苷环化酶活性增加，促进胞内 A. cAMP含量升高 B. ATP含量升高 C. cAMP含量降低 D. cGMP含量升高 E. cGMP含量降低 11. 霍乱弧菌能粘附于宿主细胞是因为具有：

最新 人教版 选修一 微生物的培养与应用 作业

人教版选修一微生物的培养与应用一、选择题(每小题2分,共40分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的) 1含C、H、O、N的大分子有机化合物可以作为( ) A.异养微生物的氮源、能源 B.异养微生物的碳源、能源 C.自养微生物的碳源、氮源、能源 D.异养微生物的碳源、氮源、能源 解析:含C、H、O、N的大分子有机化合物可给异养微生物提供碳源、氮源、能源。 答案:D 2下列有关培养基配制原则的叙述,错误的是( ) A.异养微生物的培养基至少要有一种有机物 B.任何培养基都必须含有水、碳源、氮源、无机盐及特殊营养物质 C.配制培养基时,要注意各种营养物质的浓度和比例 D.微生物的生长除受营养因素影响外,还受到pH、氧、渗透压的影响 解析:不同微生物的营养需求不同,如自生固氮菌能以空气中的N2为氮源,因此培养自生固氮菌的培养基中不需添加氮源。 答案:B 3高温灭菌的原理是( ) A.每种微生物生长的最适温度是一定的 B.微生物对高温环境不适应 C.高温破坏了细胞内蛋白质、核酸的结构,使其丧失活性 D.高温降低了环境中氧的浓度 解析:相对于动植物来说,微生物的耐高温能力是很强的。灭菌即杀死各种微生物及其他生命形态(如芽孢),所以要采用更高温度以破坏微生物体内蛋白质、核酸的结构,使其丧失活性。答案:C 4下列属于菌落特征的是( ) ①菌落的形状②菌落的大小③菌落的多少④菌落的隆起程度⑤菌落的颜色⑥有无荚膜 A.①②③④ B.①②④⑤ C.②③④⑥ D.①②③④⑤⑥ 解析:菌落的特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面。 答案:B 5秸秆处理是解决农村环境问题的关键措施,以下做法没有直接涉及微生物作用的是( ) A.秸秆还田 B.加工为青饲料饲喂牛羊,被其消化利用 C.投入沼气池生产沼气

生物选修1-专题2-微生物的培养与应用导学案(高三复习)

高三生物选修1 专题2 微生物的培养与应用导学案 （一）微生物的实验室培养 1. 培养基 （1）概念：人们按照微生物对＿＿＿＿＿＿的不同需求，配制出供其＿＿＿＿＿＿的营养基质叫培养基。按物理性质可分为＿＿＿＿培养基和＿＿＿＿培养基。 （2）营养构成：各种培养基一般都含有＿＿＿＿、＿＿＿＿＿、＿＿＿和＿＿＿＿＿＿。从细胞的化学元素组成来看，培养基中都含有这些营养成分的原因是：＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ （3）在上述主要营养物质的基础上，还要满足微生物生长对＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿以及＿＿＿＿的要求，例如：培养乳酸杆菌时需在培养基中添加＿＿＿＿＿、培养霉菌时需将培养基PH调至＿＿＿＿、培养细菌时需将PH调至＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿、培养厌氧微生物则需提供＿＿＿＿＿条件。 2. 无菌技术 （1）获得纯净培养物的关键是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿，具体操作如下： ①对实验操作的＿＿＿＿＿、操作者的＿＿＿＿和＿＿＿进行＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 ②将用于微生物培养的＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿＿等器具进行＿＿＿＿。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿相接触。 （2）消毒和灭菌 ①消毒是指＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（不包括芽孢和孢子）。日常生活中常用的方法有＿＿＿＿＿＿＿＿；不耐高温的液体用＿＿＿＿＿＿；人们也常使用（如酒精、氯气、石炭酸、煤酚皂溶液等）消毒、＿＿＿＿消毒。 ②灭菌是指＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿（包括芽孢和孢子）。常用的方法有：＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿、＿＿＿＿＿＿＿＿。 ③无菌技术除了防止培养物被污染外，还能＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 ④利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，避免＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿。 ⑤物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿；随后关闭排气阀继续加热，气压升至＿＿＿＿，温度为＿＿＿＿＿，并维持＿＿＿＿＿min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至＿＿＿时打开锅盖，其目的是防止＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ 3.实验操作 （1）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 ①基本操作步骤：＿＿＿→＿＿＿＿→＿＿＿＿→调pH→＿＿＿＿→＿＿＿＿＿＿＿。 ②相关问题：a.在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是防止＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ b.溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿ c.牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供的营养物质有：＿＿＿、＿＿＿＿＿和＿＿＿＿＿。

(完整word版)2017人教版高中生物选修1专题5课题3《血红蛋白的提取和分离》word导学案

专题5课题3 血红蛋白的提取和分离 一、基础知识 （一）凝胶色谱法 1、凝胶色谱法也称做，是根据分离蛋白质的有效方法。 2、凝胶实际上是一些微小的球体，这些小球体大多数是由构成的，如葡聚糖或琼脂糖。 3、在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程，移动速度；而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 （二）缓冲溶液 1、缓冲溶液的作用是。 2、缓冲溶液通常由溶解于水中配制而成的。 3、生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，为了 ，必须保持体外的pH与体内的。 （三）电泳 1、电泳是指。 2、许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上 。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。电泳利用了待分离样品中各分子的差异以及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。 3、两种常用的电泳方法是和，在凝胶中加入SDS，电泳速率完全取决于 ，因此，在测定蛋白质分子量时通常使用。 二、实验操作 蛋白质的提取和分离一般分为四步：、、和。（一）样品处理 1、红细胞的洗涤：洗涤红细胞的目的是，采集的血样要及时分离红细胞，分离时采用离心（500r/min），然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的 倒入烧杯，再加入（质量分数为），缓慢搅拌 min，离心，如此重复洗涤三次，直至，表明红细胞已洗涤干净。 2、血红蛋白的释放：在和作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。 3、分离血红蛋白溶液：将搅拌好的混合溶液离心（2000r/min）后，试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的，第2层为白色薄层固体，是，第3层是红色透明液体，这是 ，第4层是的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤，除去脂溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的。 （二）粗分离：透析 取1mL的血红蛋白溶液装入中，将透析袋放入盛有300mL的物质的量的浓度为20mmol/L的

临床执业医师历年试题考点纵览医学微生物学

临床执业医师历年试题考点纵览——医学微生物学.ｔxt爱一个人很难,恨一个人更难，又爱又恨的人最难。爱情永远不可能是天平，想在爱情里幸福就要舍得伤心！有些烦恼是我们凭空虚构的,而我们却把它当成真实去承受。临床执业医师历年试题考点纵览——医学微生物学 第一章微生物基本概念 【考纲要求】 １.微生物的定义。 2.三大类微生物及其特点。 【考点纵览】 1.微生物定义。 2.微生物按其结构组成等,可分３大类：非细胞型微生物、原核细胞型微生物、真核细胞型微生物。 【历年考题点津】 １．不属于原核细胞型的微生物是 A.螺旋体 B．放线菌 C.衣原体 Ｄ.真菌 Ｅ．立克次体 答案:D 第二章细菌的形态与结构 【考纲要求】 １.细菌的三种形态及测量单位。 2.细菌基本结构的构成。 3.肽聚糖的结构。

4.革兰阳性菌和阴性菌细胞壁的结构和医学意义。 5．细菌胞质内与医学有关的重要结构与意义。 6．荚膜及其与细菌致病性的关系。 ７.鞭毛及其与医学的关系。 ８.菌毛的分类及其与医学的关系。 ９.芽孢及其与医学的关系。 10.革兰染色的步骤、结果判定和医学意义。 【考点纵览】 １.细菌以微米为测量单位。 2．细菌按基本形态分三种:球菌、杆菌和螺形菌。 3.细菌的基本结构包括细胞壁、细胞膜、细胞浆和核质。 4.不同细菌细胞壁组成及结构不同主要成分为肽聚糖。革兰阳性菌的肽聚糖由聚糖骨架四肤侧链和甘氨酸五肽交联桥三部分组成,革兰阳性菌肽聚糖仅由聚糖骨架和四肽侧链两部分织成。除此之外革兰阳性菌有磷壁酸，革兰阴性菌有脂蛋白,脂质双层和脂多糖。 5．革兰阳性菌和革兰阴性菌细胞壁的区别。 6.不同抗生素作用机制。 7.质粒的概念和特点。 ８.芽孢、荚膜、鞭毛和菌毛的概念功能和与细菌致病性的关系。 ９.最常用的革兰染色的方法和医学意义。 【历年考题点津】 １．细菌细胞壁特有的成分是 Ａ.肽聚糖 B.外膜

人教版高中生物选修一专题二《微生物的培养与应用》知识点归纳

专题二微生物的培养与应用 课题一微生物的实验室培养 ·培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。 ·培养基按照物理性质可分为液体培养基半固体培养基和固体培养基。在液体培养基中加入凝固剂琼脂（是从红藻中提取的一种多糖，在配制培养基中用作凝固剂）后，制成琼脂固体培养基。微生物在固体培养基表面生长，可以形成肉眼可见的菌落。根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。液体培养基应用于工业或生活生产，固体培养基应用于微生物的分离和鉴定，半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。 ·按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成，其中成分的种类比例明确，常用于微生物的分离鉴定。天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成，常用于实际工业生产。 ·按照培养基的用途，可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物生长，促进所需要的微生物的生长。鉴别培养基是根据微生物的特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的，用以鉴别不同类别的微生物。 ·培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。 ·碳源：能为微生物的代谢提供碳元素的物质。如CO2、NaHCO3等无机碳源；糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。异养微生物只能利用有机碳源。单质碳不能作为碳源。 ·氮源：能为微生物的代谢提供氮元素的物质。如N2、NH3、NO3-、NH4+（无机氮源）蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有机氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。 ·培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。例如，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性，培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性，培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件 ·无菌技术·获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵，要注意以下几个方面： ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。 ④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。

最新人教版高中生物选修一导学案(全册 共85页)

最新人教版高中生物选修一导学案（全册）专题1 传统发酵技术的应用课题1 果酒和果醋 的制作 【学习目标】 1.说明果酒和果醋制作的原理 2.设计制作果酒和果醋的装置 【重点难点】 重点：说明果酒和果醋的制作原理，设计制作装置，制作出果酒果醋。 难点：制作过程中发酵条件的控制。 【预习案】 任务一、果酒制作的原理 1．菌种是，属于生物，新陈代谢类型，有氧时，进行，大量繁殖，反应式为；无氧时，能进行，反应式为。 2．酵母菌繁殖的最适温度℃左右，且为有氧条件； 酒精发酵一般控制在℃，缺氧酸性条件。（原因：） 3．自然发酵过程中，起作用的主要是附着于上的野生型酵母菌。也可以在果汁中加入人工培养的酵母菌。 4.葡萄酒呈深红色的原因： 任务二、果醋制作的原理 1．菌种是，属于生物，新陈代谢类型为。只有在氧气充足时，才能进行旺盛的生命活动。变酸的酒表面观察到的菌膜就是在液面大量繁殖形成的。 2．当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的分解成，当缺少糖源时，醋酸菌将变为，再将乙醛变为，反应简式为。 3．醋酸菌的最适合生长温度为℃。 任务三、实验设计 流程图 葡萄发酵发酵 任务四、操作提示 （一）材料的选择与处理

选择______的葡萄，榨汁前先将葡萄进行_______，然后再除去_______。 （二）防止发酵液被污染 1.榨汁机要清洗_______，并_______。 2.发酵瓶要清洗_________，用体积分数________的酒精消毒。 3.装入葡萄汁后，_________充气口。 （三）控制好发酵条件 1.葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约______的空间。 2.制作葡萄酒过程中，将温度严格控制在_________℃，时间控制在_________d左 右，可通过出料口对发酵的情况进行及时的监测。 3.制作葡萄醋的过程中，将温度严格控制在__________℃，时间控制在_______d 左右，并注意适时通过充气口_______。 任务五、课题延伸 果汁发酵后是否有酒精产生，可以用____________来检验。在________条件下， 重铬酸钾与酒精反应呈现____________。 检测时，先在试管中加入发酵液2mL，再滴入物质的量的浓度为3mol/L的 _______3滴，振荡混匀，最后滴加常温下______________________3滴。 【探究案】 探究点一 你认为应该先冲洗葡萄还是先除去枝梗？为什么？ 探究点二 你认为应该从哪些方面防止发酵液被污染？ 探究点三 制葡萄酒时，为什么要将温度控制在18～25 ℃？制葡萄醋时，为什么要将温度控制在30～35 ℃？

2020年临床执业医师《医学微生物学》试题及答案(卷七)

2020年临床执业医师《医学微生物学》试题及答案（卷七）关于霍乱弧菌的生物学性状，错误的描述是 A.革兰染色为阴性 B.有菌毛和单鞭毛 C.悬滴观察呈“穿梭”样运动 D.El-Tor生物型可形成芽胞 E.增菌培养基通常为碱性蛋白胨水 『正确答案』D 1、不属霍乱弧菌生物学特性的是 A、分古典、El-Tor两个生物型，均有O、H抗原 B、无荚膜，芽胞，但有鞭毛 C、营养要求不高，需氧，耐碱不耐酸 D、致病物质主要是霍乱肠毒素 E、革兰阳性菌 2、治疗霍乱的关键是 A、及时补充液体及电解质 B、全菌灭活口服疫苗 C、应用链霉素 D、应用氯霉素 E、应用强力霉素 3、我国沿海地区最常见的食物中毒病原菌是 A、副溶血弧菌

B、肠炎杆菌 C、鼠伤寒沙门菌 D、产气荚膜梭菌 E、霍乱弧菌 4、副溶血弧菌生物学特性不正确的叙述是 A、革兰阴性菌 B、可以发酵葡萄糖，可产气 C、在含有3.5%NaCl培养基中生长良好 D、主要存在于海水、海底沉积物和海产品中 E、可引起细菌性食物中毒 5、霍乱弧菌导致的霍乱在疾病最严重时，每小时失水量可高达 A、0.2L B、0.4L C、0.6L D、0.8L E、1.0L 6、霍乱弧菌的致病因素不包括 A、鞭毛 B、菌毛 C、荚膜 D、肠毒素 E、内毒素

参考答案 1、 【正确答案】E 【答案解析】霍乱弧菌的典型形态为弧形或逗点状，革兰染色阴性，有菌毛，无芽胞。 2、 【正确答案】A 【答案解析】及时补充液体和电解质，预防大量失水导致的低血容量性休克和酸中毒是治疗霍乱的关键。 3、 【正确答案】A 【答案解析】副溶血性弧菌主要存在于海水、海底沉积物和海产品中，在含有3.5%NaCl培养基中生长良好，故又称为嗜盐性细菌。人群常因食用污染此菌的鱼蟹等海产品，而引起细菌性食物中毒，以水样腹泻、呕吐、腹痛及低热为主要症状，为自限性疾病。 4、 【正确答案】B 【答案解析】副溶血性弧菌主要存在于海水、海底沉积物和海产品中，在含有3.5%NaCl培养基中生长良好，故又称为嗜盐性细菌。人群常因食用污染此菌的鱼蟹等海产品，而引起细菌性食物中毒，以水样腹泻、呕吐、腹痛及低热为主要症状，为自限性疾病。 5、

高中生物选修一微生物的实验室培养教案(2)

普通高中课程标准实验教科书——生物选修1[ 人教版] 课题 1 微生物的实验室培养 ★课题目标 （一）知识与技能 了解有关培养基的基础知识；掌握培养基的制备、高压蒸汽灭菌和平板划线法等基本操作技术 （二）过程与方法 分析实验思路的确定和形成的原因，分析实验流程，对比前面的实验设计，归纳共性，分析差异，增加印象 （三）情感、态度与价值观 形成勇于实践、严谨求实的科学态度和科学精神 ★课题重点 无菌技术的操作 ★课题难点 无菌技术的操作 ★教学方法 启发式教学 ★教学工具 多媒体课件 ★教学过程 （一）引入新课 在传统发酵技术的应用中，都利用了微生物的发酵作用，其中的微生物来自于制作过程中的自然感染。而在工业化生产中，为了提高发酵的质量，需要获得优良菌种，并保持发酵菌种的纯度。这就要涉及到微生物的培养、分离、鉴别等基本技术。现在我们开始学习微生物的培养和应用专题。 （二）进行新课 1.基础知识 1.1培养基的种类包括固体培养基和液体培养基等。 〖思考1〗琼脂是从红藻中提取的多糖，在配制培养基中用作为凝固剂

【补充】培养基的类型及其应用： 1.2培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源四类营养成分。 〖思考2〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？ C、H、0、N、P、S是构成细胞原生质的基本元素，约占原生质总量的97%以上。 【补充】碳源：如C02、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。 氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、0、N 的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。 1.3培养基除满足微生物生长的_p^、特殊营养物质和氧气等要求。 【补充】生长因子：某些微生物正常生长代谢过程中必须从培养基中吸收的微量有机小分子，如某些氨基酸、碱基、维生素等。 〖思考3〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供糖、维生素和有机氮等营养物质。 〖思考4〗培养乳酸杆菌时需要添加维生素,培养霉菌时需要将培养基pH调节为酸 性，培养细菌时需要将pH调节为中性或微碱性。 活动2:阅读"无菌技术”，讨论回答下列问题： 1.4获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵—。 1.5无菌技术包括： (1)对实验操作空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒;

高中生物选修1选修1教学案及专题测试和知识点汇总

选修1基础知识点背诵 《果酒和果醋和制作》 一、果酒制作 1．原理：菌种 ，属于 核生物，新陈代谢类型 ，有氧时，呼吸的反应式为： ；无氧时，呼吸的反应式为： 。 2．条件：繁殖最适温度 ，酒精发酵一般控制在 。 （传统发酵技术所使用的酵母菌的来源） 3．菌种来源：???。：。：菌菌种分离获得得纯净的酵母 人工培养型酵母菌附着于葡萄皮上的野生自然发酵 现在工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，更好地抑制其它微生物的生长，采取的措施 是 。 4．实验设计流程图 挑选葡萄→冲洗→______________→_______________→_______________ ↓ ↓ 果酒 果醋 5．根据教材P4操作提示设计实验步骤及装置。 充气口作用 ； 排 气口作用 ； 出料口作用 。 排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，其目的 是 。 使用该装置制酒时，应该关闭 ； 制醋时，应将充气口 。 6．实验结果分析与评价：可通过嗅觉和品尝初步鉴 定，并用______________检验酒精存在。可观察到的 现象为 二、果醋的制作： 1．原理：菌种：___________，属于___________核生物，新陈代谢类为_________ 醋酸生成反应式是___________________ _________ 。 2．条件：最适合温度为__________，需要充足的______________。 3．菌种来源：到______________或______________购买。 4．设计实验流程及操作步骤： 果酒制成以后，在发酵液中加入______________或醋曲，然后将装置转移至 ______________0C 条件下发酵，适时向发酵液中______________。如果没有充气 装置，可以将瓶盖打开，在瓶盖上纱布，以减少空气中尘土污染。 三、操作过程应注意的问题 （1）为防止发酵液被污染，发酵瓶要用 消毒。 （2）葡萄汁装入发酵瓶时，要留出大约 的空间。 （3）制作葡萄酒时将温度严格控制在 ，时间控制在 d 左右，可通过 对发酵的情况进行及时的监测。

2020年临床执业医师《医学微生物学》试题及答案(卷六)

2020年临床执业医师《医学微生物学》试题及答案（卷六） 一、A1 1、目前，病毒分离培养最常用的方法是 A、肉汤培养基培养 B、鸡胚培养 C、细胞培养 D、动物接种 E、人体接种 2、检测病毒并进行微生物学检查时，不是标本采集原则是 A、无菌操作 B、发病早期采集 C、采集病变部位标本 D、查抗体时，采早期血清即可 E、尽快送检，暂将标本低温冷藏 3、对病毒性感染进行血清血诊断时，双份血清抗体效价至少增高几倍时，才有诊断意义 A、2倍 B、4倍 C、8倍 D、16倍 E、32倍 4、病毒的灭活疫苗包括

A、脊髓灰质炎灭活疫苗 B、狂犬病灭活提纯疫苗 C、森林脑炎灭活疫苗 D、乙型脑炎灭活疫苗 E、以上均正确 5、不能用于检测抗病毒抗体的方法是 A、ELISA B、中和试验 C、红细胞凝集试验 D、血凝抑制试验 E、补体结合试验 6、不适用于培养病毒的方法是 A、适龄鸡胚接种 B、传代细胞培养 C、组织器官培养 D、易感动物接种 E、人工合成培基 答案部分 一、A1 1、 【正确答案】C 【答案解析】

细胞培养为分离病毒最常用的方法。 2、 【正确答案】D 【答案解析】 病毒感染实验室检查的成败关键，在于标本的正确采集和递送。发病初期或急性期采集的标本，易于分离出病毒。应根据不同的病毒感染，采集不同类型的标本。病毒在室温中很容易灭活，故标本采集后应立即送往病毒实验室，否则应将标本低温冷藏 3、 【正确答案】B 【答案解析】 血清学诊断的标本，应在患者急性期和恢复期各取一份血液，以便对比双份血清中抗体效价，通常恢复期血清的抗体效价比急性期增高4倍以上才有诊断意义 4、 【正确答案】E 【答案解析】 病毒的灭活疫苗：主要有脊髓灰质炎灭活疫苗(或称Salk疫苗)、乙型脑炎灭活疫苗、人用狂犬病灭活提纯疫苗。肾综合征出血热灭活疫苗、森林脑炎灭活疫苗、甲型肝炎灭活疫苗等 5、 【正确答案】C

新人教版高中生物选修1血红蛋白的提取和分离 学案

血红蛋白的提取和分离学案 [导学诱思] 1．凝胶色谱法 凝胶色谱法也称做，是根据分离蛋白质的有效方法。凝胶实际上是一些由构成的多孔球体，在小球体内部有许多贯穿的通道，相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同，相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道，路程，移动速度；而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在移动，路程，移动速度。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分离。 2．缓冲溶液 缓冲溶液的作用是。缓冲溶液通常由溶解于水中配制而成的。生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的pH下进行的，例如：血浆的pH是，要在实验条件下准确模拟生物体内的过程，必须保持体外的pH与体内的基本一致。 3．电泳 电泳是指。许多重要的生物大分子，如多肽、核酸等都具有可解离的基团，在一定的pH下，这些基团会带上。在电场的作用下，这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。电泳利用了待分离样品中各分子以及分子本身的、的不同，使带电分子产生不同的，从而实现样品中各种分子的分离。 两种常用的电泳方法是和，在测定蛋白质分子量时通常使用。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于以及等因素。 4．蛋白质的提取和分离 蛋白质的提取和分离一般分为四步：、、和。5．样品处理 血液由和组成，其中红细胞最多。红细胞具有 的特点。红细胞中有一种非常重要的蛋白质，其作用是 ，血红蛋白有个肽链组成，包括，其中每条肽

链环绕一个，磁基团可携带。血红蛋白因含有呈现红色。 红细胞的洗涤洗涤红细胞的目的是，采集的血样要及时采用分离红细胞，然后用胶头吸管吸出上层透明的，将下层暗红色的倒入烧杯，再加入，缓慢搅拌，低速短时间离心，如此重复洗涤三次，直至，表明红细胞已洗涤干净。 血红蛋白的释放在和作用下，红细胞破裂释放出血红蛋白。 分离血红蛋白溶液将搅拌好的混合溶液离心后，试管中的溶液分为4层。第一层为无色透明的，第2层为白色薄层固体，是，第3层是红色透明液体，这是，第4层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤，除去之溶性沉淀层，于分液漏斗中静置片刻后，分出下层的红色透明液体。 透析取1mL的血红蛋白溶液装入中，将透析袋放入盛有300mL的物质的量的浓度为20mmol/L的中，透析12h。透析可以去除样品中的杂质，或用于更换样品的。 6．凝胶色谱操作 第一步要制作，第二步要，因为，所以装柱前需要根据色谱柱的内体积计算所需要的凝胶量。在装填凝胶柱时，不得有存在。因为气泡会，降低分离效果。第三步是。 [疑难点拨] 1．凝胶色谱法分离蛋白质的原理 凝胶色谱法也称为分配色谱法，它是根据分子量的大小分离蛋白质的方法之一。所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体，这些小球体大多数是由多糖类化合物构成，小球体内部有许多贯穿的通道，当一个含有各种分子的样品溶液缓慢流经时，各分子在色谱柱内进行两种不同的运动，即垂直向下的运动和无规则的扩散运动，相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部，只能分布在颗粒之间，通过的路程较短，移动速度较快；相对分子质量较小的蛋白质分子比较容易进入凝胶内的通道，通过的路程较长，移动速度较慢。因此，样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出，相对分子质量中等的分子后流出，相对分子质量最小的分子最后流出，这种现象又叫分子筛现象。此外，凝胶本身具有三维网状结构，相对

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课程名称：微生物学检验技术 授课专业：医学检验 学时：4学时 实验十三沙门菌属和变形杆菌属检验 ( Salmonella test and Proteus test) 一、实验目的 1.通过模拟临床标本，模拟临床情景，培养学生应用知识和技能，独立思考，学会发现问题、分析问题和解决问题，培养学生的综合能力。 2.掌握沙门菌属、变形杆菌属的生物学特性、检验程序及鉴定方法。 二、实验设计及安排 ㈠模拟标本：血液(正常血液中分别加入3种沙门菌和大肠杆菌，并编成1、2、3、4号。 ㈡实验分组：2人为一组，每组鉴定一种标本，让学生自己进行实验。 ㈢实验教学过程： 第一天 1.布置任务（检验程序设计、增菌培养、看书、查找相关沙门菌检验、血培养的资料） 2.发标本 3.教师需提供的材料：增菌液 第二天：增菌结果观察，涂片染色镜检、分离培养 1.教师需提供的实验材料： 培养基：SS，EMB 试剂： 0.5%美蓝水溶液，2%伊红水溶液，20%乳糖水溶液等 其他：无菌平板， 1ml无菌吸管，5ml无菌吸管，吸头若干，革兰染液，玻片，显微镜，镜油，擦镜纸，电吹风等 2.教师提示：细菌生长的现象；取菌操作需严格无菌。

第三天：分离培养结果观察、涂片染色镜检、初步生化反应。 1.教师需提供的材料 培养基： KIA,MIU，半固体，蛋白胨水，葡萄糖蛋白胨水，枸盐酸盐琼脂斜面培养基，硝酸盐等 试剂：20%尿素水溶液，0.4%酚红水溶液，1%溴麝香草酚兰酒精溶液，20%葡萄糖水溶液等 其他：无菌中号试管，无菌小号试管，1ml无菌吸管，5ml无菌吸管，吸头若干，斜面板，革兰染液，玻片，显微镜，镜油，擦镜纸，电吹风等 2.学生最容易出现的问题：不能分析选择培养基上出现不同的菌落；染色结果不正确。 3.教师提示：SS、EMB的结果分析结合这两种培养基的原理来解释 第四天：生化反应结果观察，最终鉴定 1.教师需提供的材料 靛基质试剂，甲基红试剂，VP试剂（40%KOH肌酸溶液） 沙门菌属诊断血清 2.学生最容易出现的问题：各项生化反应的结果判断；进行血清学诊断的方法及步骤;根据片面的实验结果做最终结论。 3.教师提示：生化反应结果要结合培养基的成分、原理进行分析、判断；细菌的最终鉴定要综合形态染色、菌落性状、生化反应和血清凝集的各项实验结果。 三、实验报告： 1.写出检验程序； 2.详细描述实验结果并分析； 3. 结果报告；注意列出各种细菌的鉴定依据。 四、实验小结： ㈠实验准备 1.标本1：伤寒沙门菌+大肠杆菌

2020年临床执业医师《医学微生物学》试题及答案(卷一)

2020年临床执业医师《医学微生物学》试题及答案（卷一） 一、A1 1、引起人类原发性非典型肺炎(PAP)的病原体是 A、肺炎链球菌 B、肺炎支原体 C、嗜肺军团菌 D、流感病毒 E、溶脲脲原体 2、支原体主要繁殖方式是 A、二分裂繁殖 B、分节繁殖 C、断裂繁殖 D、出芽繁殖 E、分枝繁殖 3、支原体典型的菌落是 A、“油煎蛋”样 B、蜘蛛网状 C、绒毛状 D、放射状 E、无特异性 4、关于支原体致病机制不包括 A、黏附素

B、荚膜 C、微荚膜 D、超抗原 E、菌毛 5、缺乏细胞壁的原核型微生物是 A、衣原体 B、病毒 C、支原体 D、螺旋体 E、真菌 6、目前发现的能在无活性细胞培养基中繁殖的最小微生物是 A、衣原体 B、支原体 C、立克次体 D、病毒 E、真菌 7、下述关于支原体的特性中哪一项是错误的 A、是能营独立生活的最小的微生物 B、没有细胞壁，对青霉素不敏感 C、可以通过滤菌器 D、是失去了细胞壁的L型细菌 E、肺炎支原体是人类原发性非典型性肺炎的病原

一、A1 1、 【正确答案】B 【答案解析】肺炎支原体感染引起的病理改变以间质性肺炎为主，又称原发性非典型性肺炎。 2、 【正确答案】A 【答案解析】支原体繁殖方式多样，除二分裂繁殖外，还有分节、断裂、出芽或分枝等方式。 3、 【正确答案】A 【答案解析】支原体典型在固体培养基上培养，形成典型的“荷包蛋”状菌落。 4、 【正确答案】E 【答案解析】对人致病的支原体主要通过以下机制引起细胞损伤：黏附素;荚膜或微荚膜;荚膜或微荚膜;超抗原。 5、 【正确答案】C 【答案解析】支原体是一类缺乏细胞壁、呈高度多形性、能通过滤菌器、在无生命培养基中能生长繁殖的最小原核微生物。 6、

选修一微生物的培养高考练习题综合

选修一大题 1、（山东卷，理综，34）科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白，这种蛋白质具有极强的抗菌能力，受到研究者重视。 ⑴分离该抗菌蛋白可用电泳法，其原理是根据蛋白质分子的、大小及形状不同，在电场中的不同而实现分离。 ⑵可用金黄色葡萄球菌来检验该蛋白的抗菌特性。抗菌实验中所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供和。 ⑶分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量菌液。培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的，确定该蛋白质的抗菌效果。 ⑷细菌培养常用的接种方法有和。实验结束后，对使用过的培养基应进行处理。 2、（上海卷，理综，39））氯苯化合物是重要的有机化工原料，原因不易降解，会污染环境。某研究小组依照下列实验方案（图1）筛选出能高效降解氯苯的微生物SP1菌，培养基配方如表1。 （1）配制Ⅱ号固体培养基时，除添加Ⅱ号液体培养基成分外，还应添加1%的____________。（2）培养基配制时，灭菌与调PH的先后顺序是____________。 （3）从用途上来说，Ⅰ号培养基和Ⅱ号培养基分别属于____________培养基和____________培养基。在Ⅱ号培养基中，为SP1菌提供氮源的成分是____________。 （4）在营养缺乏或环境恶劣时，SP1的菌体会变成一个圆形的休眠体，这种休眠体被称为 ____________。 （5）将SP1菌接种在含不同浓度氯苯的Ⅲ号培养液中培养，得到生长曲线（如图2）。从图2可知SP1菌在____________培养条件下最早停止生长，其原因是____________。 3、有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究和作用，使人们能够利用秸秆等废弃物生产酒精，用纤维素酶处理服装面料等。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功的筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。 (1)培养基中加入的化合物A是____________，为微生物的生长提供_____________，这种培养基属于____________培养基。 (2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入_____________________。 (3)在筛选出能产生纤维素酶的微生物之前，可用液体培养基培养，增加微生物的浓度。为获得纯净的菌株，常采用平板划线的方法进行接种，此过程所用的接种工具是_________________，操作时采用________灭菌的方法；还可用________的方法接种。 (4)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是______________ 4、下面是果酒和果醋制作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题： （1）完成图1中的实验流程。 （2）冲洗的主要目的是，冲洗应特别注意不能，以防止菌种的流失。 （3）图2装置中的冲气口在过程中要关闭，某同学在实验时为了密闭装置特意将瓶塞使劲塞紧，并将充气口和排气口用夹子夹紧，以便于发酵，但第二天去观察时发现瓶塞松了，他不明白其中的原因，请帮助解释说明其原因。 （4）排气口在果酒发酵时排出的气体来源是。（5）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？说明理由。。 5、下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答： （1）制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜或其他原料，原因是。 （2）制备泡菜的盐水中清水与盐的质量比约 为，盐水需煮沸并冷却后才可使 用，原因是。试说明盐水在泡菜制作中 的作用：。 （3）泡菜风味形成的关键在于的加入。 （4）泡菜的制作方法不当，很容易造成泡菜变质，甚至 发霉变味，试分析可能的原因：。 （5）发酵过程中应定期测定亚硝酸盐的含量，原因 是。 6、（10分）某同学在做微生物实验时，不小心把圆褐固 氮菌和酵菌混在一起。该同学设计下面的实验，分离得 纯度较高的圆褐固氮菌和酵母菌。 (1)实验原理：圆褐固氮菌是自生固氮菌，能在无氮培养条件下生长繁殖而酵母菌则不能；青霉 出料口 充气口 排气口选挑葡萄冲洗榨汁 酒精发酵 果酒果醋 图1 果酒、果醋制作流程图2

高中生物选修一专题二：课题微生物的实验室培养学案

选修一：专题二：课题1微生物的实验室培养学案 【课程目标】:了解培养基的基础知识，进行微生物培养和无菌技术的操作。 【课题重点】:无菌技术的操作 【课题难点】：无菌技术的操作 基础知识 一、培养基 1．概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。可分为培养基和培养基。 2．营养构成：各种培养基一般都含有、、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。 3．培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、培养霉菌时需将培养基PH调 至、培养细菌时需将PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。 〖思考1〗从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？ 【补充1】碳源：如CO2、糖类、脂肪酸等有机物，构成微生物的结构物质和分泌物，并提供能量。 氮源：如N2、氨盐、硝酸盐、牛肉膏、蛋白胨等，主要用来合成蛋白质、核酸及含氮代谢物等。含有C、H、O、N的化合物既可以作为碳源，又可以作为氮源，如氨基酸等。 二、无菌技术：阅读“无菌技术”，讨论回答下列问题： (一)获得纯净培养物的关键是，具体操作如下： 1．对实验操作的、操作者的和进行。 2．将用于微生物培养的、和等器具进行。 3．为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。 4．实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。 (二)消毒和灭菌 1．消毒是指。常用的方法有、、消毒法。 2．灭菌是指。常用的方法有：、、灭菌。分别适用于那些用具？ 〖思考2〗无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？ 〖思考3〗利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？

〖思考4〗物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持 min；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止。 实验操作----大肠杆菌的纯化培养： 本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。 一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是、、、、。 〖思考5〗在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？ 溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？ 〖思考6〗牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？ 2．倒平板：待培养基冷却至℃左右时在酒精灯火焰附近操作进行。 其过程是： ①在火焰旁右手拿，左手； ②使锥形瓶的瓶口； ③左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖。 ④待平板冷却凝固后，将平板。 〖思考7〗锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？ 〖思考8〗倒平板的目的是什么？ 〖思考9〗若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？ 〖思考10〗配制斜面培养基作用是什么？，试管为什么要加塞棉塞？ 二、纯化大肠杆菌 微生物接种：最常用的是法和法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。 1．平板划线法是的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。 其操作步骤是：①将在酒精灯火焰上灼烧直至。②在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。③将菌种试管口通过火焰达到 的目的。④将冷却的接种环伸入到。⑤将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。⑥将皿盖打开一条缝隙，把接种环，盖上皿盖，不要划破培养基。⑦灼烧接种环，冷却后从划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将相连。